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Materia: Interaccin microorganismo-planta Cdigo 2167 Carrera Microbiologa Cuarto bimestre Tiempo estimado: 65 hs Docentes Responsables: Dra Susana

Beatriz Rosas (Dpto Biologa Molecular) Colaboradores: Dr Javier Andrs, Mic Lorena Guiaz, Martha Dardanelli Objetivo de la Asignatura Se procura a travs de la misma que el futuro profesional se interiorice de temas en pleno desarrollo en pases de avanzada como lo es la interaccin entre los vegetales y microorganismos y el enorme potencial de aplicacin, primordialmente en la agricultura con implicancias en la industria alimenticia, La rizsfera es un sitio de actividad microbiolgica compleja e intensa. La raz constituye un sustrato dinmico que cambia constantemente el patrn de exudados y con ello, la disponibilidad de nutrientes en su entorno. Estas interacciones incluyen, entre otras, competencia por los sitios de colonizacin, competencia por nutrientes, inhibicin estimulacin de crecimiento entre las poblaciones PGPR hace referencia a aquellas rizobacterias que son capaces de incrementar la produccin vegetal a travs de una serie de mecanismos directos, por aporte de nutrientes como lo es el ms complejo y perfecto modelo de interaccin: la fijacin simbitica del N2 por el gnero Rhizobium, el aporte no simbitico del N2 (Azospirillun, Azotobacter) , la solubilizacin de fosfatos por determinados grupos gneros bacterianos la disponibilidad de Hierro a travs de la produccin de siderforos. El control biolgico, propuesta que ha resurgido en los ltimos aos busca, a travs del uso de microorganismos productores de siderforos , que deprivan Fe al patgeno la produccin de sustancias tipo antibiticos, aumentar indirectamente la produccin vegetal asegurando la sanidad del mismo Ms recientemente, la induccin de resistencia sistmica (ISR) por parte de ciertos gneros bacterianos, que aumentan la capacidad defensiva de la planta por mecanismos no patognicos, abre otra va interesante de biocontrol El manejo rizosfrico adecuado puede contribuir, en gran magnitud, a mejorar la fertilidad de los suelos propiciando condiciones ptimas para el desarrollo vegetal adems de poder controlar los patgenos sin necesidad de recurrir masivamente al uso de agroqumicos disminuyendo el impacto ecolgico negativo que ellos generan. Contenido Analtico Mdulo I. Consideraciones generales Establecimiento de la interaccin microorganismo -planta. Rol de las molculas Seales. Colonizacin Mdulo II. La rizsfera y el crecimiento de la planta. Concepto de rizsfera. Cuantificacin de la microflora rizosfrica. Naturaleza Cualitativa de la microflora. Liberacin de compuestos orgnicos de las races. Efecto de los microorganismos rizosfricos sobre la toma de nutrientes, desarrollo y salud vegetal. Quimiotaxis en la rizsfera. Tcnicas de estudios rizosfricos. Rizoplano. Concepto Mdulo III. Asociaciones benficas Fijacin Biolgica del nitrgeno: Interaccin rizobia-Leguminosa como modelo molecular. Interaccin gene por gene en la simbiosis. Modelo para la

interaccin husped microbio. Molculas seales del vegetal y del microorganismo. Compartamentalizacin y funciones metablicas en el ndulo. Metabolismo Nitrogenado en la bacteria y metabolismo nitrogenado en las plantas Expresin gnica especfica en los tejidos simbiticos, en el simbionte y las regulaciones metablicas correspondientes. Microorganismos libres en asociacin con la planta. Microorganismos endfitos: Interrelacin entre el metabolismo microbiano y vegetal. Colonizacin interna Del vegetal Micorrizas. Su utilizacin para la obtencin de plantines vigorosos, capaces de Soportar situaciones de estrs. Tipos de micorrizas, distintas asociaciones con el vegetal. Mdulo IV. Asociaciones patognicas Agrobacterium tumefasciens como modelo molecular de patogenia. Agentes pat genos para la planta. Formas de penetracin. Mecanismos que producen enfermedad en el vegetal. Respuestas fisiolgicas del vegetal ante el parasitismo. Relacin entre simbiosis ( enfermedad controlada) y patogenia. Rol de las fito Hormonas, de origen microbiano vegetal, en la patognesis. Molculas seales Involucradas en patognesis. Genes avr. Modelos Mdulo V. Mecanismos PGPR Rhizobacterias que promueven el crecimiento vegetal (PGPR). Mecanismos Directos: Fijacin Biolgica del Nitrgeno. Produccin de siderforos. Solubilizacin de fosfatos. Produccin de fitohormonas: Acido Indol Actico y sus derivados. Citocininas. Etileno. Giberelinas. Mecanismos indirectos: Produccin de siderforos como control de patogenia. Produccin de antibiticos. Produccin de txicos como cianidas. Competencia por nutrientes. Induccin de Resistencia Sistmica (ISR) Enumeracin e identificacin de bacterias rizosfricas por tcnicas inmunolgicas avanzadas, PCR, BIOLOG, metilsteres de cidos grasos Mdulo VI. Mecanismos de defensa vegetal Primer lnea de defensa: resistencia gentica. Segunda lnea de defensa: Mecanismos de defensas promovidos por las plantas ante el ataque de un patgeno: Compartamentalizacin de compuestos txicos segregados por patgenos en vacuolas y pared celular. Sntesis de taninos, fenoles, alcaloides, fitoalexinas. Sntesis de lignina. Sntesis de protenas relacionadas a patognesis (PR-P) correlacionadas con el SAR. Tercer lnea de defensa: Reaccin Hipersensible en el vegetal. Establecimiento del SAR (Resistencia Sistmica Adquirida) en tejidos no infectados. Molculas seales involucradas. Rol del Acido Saliclico. Intervencin del Acido jasmnico. Modelo molecular de desarrollo del SAR. Mecanismo de defensa provocado por organismos no patgenos: Induccin de Resistencia Sistmica (ISR). Rhizobacterias beneficiosas productoras de Acido saliclico que producen ISR en los vegetales. Mecanismo molecular de desarrollo del ISR. Perspectivas futuras de utilizacin. Induccin de ISR utilizando semillas tratadas con cepas PGPR. Influencia de la colonizacin de raz en las respuestas de defensa. Mdulo VII. Biocontrol Control de patogenia utilizando organismos rizosfricos. Relacin entre promocin del crecimiento vegetal y control biolgico.

Bases moleculares de la antibiosis mediada por rhizobacterias. Gentica y regulacin de sntesis de algunos antibiticos. Gentica de la produccin de fenazinas Produccin de siderforos: tcnicas de gentica molecular para estudiar el transporte de alta afinidad de Fe (III) por organismos rizosfricos. Relacin de utilizacin de Fe entre plantas, microorganismos inocuos y microorganismos patgenos. Toma de Fe(III) y receptores de siderforos frricos. Regulacin del transporte de Fe. Produccin de enzimas que hidrolizan micelio fngico. Competicin por nutrientes. Otros mecanismos de Biocontrol. La importancia del biocontrol en el damping-off. Su aplicacin en horticultura, ornamentales y cultivos extensivos. La bsqueda de aplicacin de biocontrol sobre nemtodos parasticos de los vegetales

Mdulo VIII. Aplicacin Industrial de cepas PGPR. Normativas de uso Formulacin de inoculantes. Mtodos. Soportes y Ttulo del inculo. Legislacin actual sobre la utilizacin de cepas PGPR a campo. Produccin de inoculantes no convencionales para su aplicacin intensiva. Patentamiento de cepas PGPR y/o sus productos. Estado actual en el mundo y en la Argentina sobre la utilizacin de PGPRs.

BIBLIOGRAFIA Plant Growth-Promoting Rhizobacteria. Progress and Prospects. 1990. Ed by C Keel, B Koller and G Dfago. The Second International Workshop on Plant Growth Promoting Rhizobacteria. Interlaken, Switzerland. Plant Physiology. 1991. Lincoln Taiz, Eduardo Zeiger Cummings Publishing Company, Inc. Ed The Benjamn/

Improving Plant Productivity with Rhizosphere Bacteria. 1994. Ed by M Ryder, P Stephens and G Bowen. CSIRO. Australia Phytohormones in Soils. Microbial production and function. 1995 Ed by Frankenberger, W Jr and Muhammad Arshad. Marcel Dekker, Inc NY Plant-Microbe Symbiosis: Molecular Approaches. 1996. Ed by A Fitter and D Stribley. New Phytologist Trust Cambridge University Press. Plant Microbe Interactions. 1997. Ed by Stacey G, Keen N. Chapman and Hall. Proceedings Fifth International Worshop in PGPR. 2000. Ed by J. Kloepper and Gasoni L. http://www.ag.auburn.edu/argentina Publicaciones peridicas actualizadas

Actividad prctica

1-Estudio de la Fijacin Simbitica del Nitrgeno y de la coinoculacin a nivel laboratorio. Observacin microscpica por tincin de encurvamiento de pelos radicales, hilo de infeccin y primordios nodulares 2-Promocin directa del crecimiento vegetal por microorganismos rizosfricos. Movilizacin de nutrientes, Actividades enzimticas involucradas. Actividades hormonales 3-Promocin indirecta del crecimiento vegetal. Aislamiento de sustancias activas en antibiosis. Actividades enzimticas degradativas de pared fngica. 4-ISR en sistema de raz bifurcado en tomate

Metodologa de la Enseanza Organizacin de la s actividades de los alumnos -Guas de aprendizaje -Tcnicas Grupales -Exposicin- demostracin a travs de seminarios con Discusin Grupal Recursos materiales -Uso del pizarrn -Uso de monocaon Tipo de comunicacin -Interaccin: Dilogo e interrogatorio -Comunicacin Directa: Dilogo e Interrogatorio -Grupal: Grupos pequeos a medianos segn actividad Regmenes de Evaluacin Rgimen de Regularidad Se debern cumplir los siguientes requisitos -Asistencia al 80% de tericos y prcticas -Exposicin de un seminario basada en bibliografa actualizada sobre temas del Programa -Se realizar una evaluacin escrita final integradora de todos los contenidos a la culminacin del cursado. -Presentacin de una monografa con tema sugerido a eleccin, con opcin de gua docente. La presentacin se realizar una semana previa al turno seleccionado a fin de tener evaluacin del /los docentes Responsables.. La monografa va acompaada a un cuestionario de aplicacin prctica -Cumplimentar los informes requeridos.

Dra Susana Beatriz Rosas Profesor Responsable