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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA - UESB

DEPARTAMENTO DE ESTUDOS BSICOS E INSTRUMENTAIS DEBI

Ubiquidade

Relatrio apresentado a prof. Dra. Ligia Miranda como parte das exigncias parciais para a aprovao da disciplina de Microbiologia Geral.

Realizado pelas Alunas: Daniela dos Santos Moreira Emilly karoline Oliveira Lima Jaqueline de Jesus Silva

Itapetinga BA Agosto de 2011

Introduo
A maioria dos microorganismos cresce bem nas temperaturas ideais para os seres humanos. No entanto, certas bactrias so capazes de crescer em temperaturas extremas, onde a maioria dos organismos eucariticos no sobreviveria. (Tortora 2005). Cada espcie bacteriana cresce a uma temperatura especifica mnima, tima e mxima. A temperatura mnima de crescimento considerada a menor temperatura em que a espcie capaz de crescer. A temperatura tima de crescimento aquela em que a espcie apresenta o melhor crescimento. A temperatura mxima de crescimento a temperatura mais alta em que ainda possvel haver crescimento. (Tortora 2005). Visto que os microorganismos so ubquos, os meios de cultura devem ser esterilizados antes do uso. Para a maioria dos meios de cultura, a esterilizao realizada pelo emprego de calor, tipicamente mido, em uma grande panela de presso denominada autoclave. (Microbiologia de Brock, 2004) O material nutriente preparado no laboratrio para o crescimento de

microorganismos denominado meio de cultura. Algumas bactrias podem crescer normalmente em qualquer meio de cultura, outras necessitam de meios especiais e existem aquelas que no so capazes de crescer em nenhum meio de cultura j desenvolvido. Quando microorganismos so colocados em um meio de cultura para iniciar o crescimento, so chamados de inoculo. Os microorganismos que crescem e se multiplicam nos meios de cultura so denominados cultura. (Tortora 2005). Uma vez que o meio de cultura estril tenha sido preparado, este pode receber um inculo de uma cultura pura previamente crescida, de maneira a reiniciar o processo de crescimento. Para tanto necessrio o emprego de uma tcnica assptica. (Microbiologia de Brock, 2004). Segundo ALMEIDA et al (1988) com o objetivo de isolar e identificar a microbiota fngica em ambientes considerados asspticos, atravs de exposies com meios de cultivo adequados, em trs pocas distintas do ano, antes e imediatamente aps as manobras tcnicas realizadas em trs reas de trabalho: ambiente aberto, ambiente fechado sem filtrao de ar e ambiente fechado com filtrao de ar,

utilizadas em produo de imunobiolgicos. Os meios gar-Sabouraud e gar-soja, enriquecidos com 0,2% de extrato de levedura e sem cloranfenicol, foram estudados quanto sua eficcia no isolamento de bolores e leveduras, considerando- se o nmero de colnias desenvolvidas e a freqncia dos diversos fungos isolados. Isolaram- se 67 espcimens, sendo 64 fungos filamentosos (bolores) e trs leveduras. Dos bolores, 54 pertenciam a 22 gneros da diviso Deuteromycota, famlias Moniliaceae e Dematiaceae, cinco amostras filamentosas foram includas na ordem Agonomycetales (Mycelia Sterilia), e uma amostra foi classificada na diviso Deuteromycota, ordem Sphaeropsidales, classe Coelomycetes. Da diviso

Zygomycota, ordem Mucorales, famlia Mucoraceae, um nico mucorceo foi identificado at gnero. As trs leveduras pertenciam tambm diviso Deuteromycota (Fungi Imperfecti), famlia Cryptococcaceae, e foram identificadas como sendo duas Rhodotorula rubra e uma Torulopsis candida. Comprovou-se que o nmero de colnias isoladas aumentou aps a realizao das monobras tcnicas e que a filtrao de ar atravs de filtros tipo HEPA, reduzindo o nmero de colnias isoladas nos ambientes fechados, aumenta a segurana do trabalho; comumente recomendada para reas de atividade tcnica cujos resultados satisfatrios esto diretamente relacionados com uma baixa incidncia de contaminantes. Para o crescimento de microorganismos no laboratrio, h uma grande variedade de meios de cultura. A maioria desses meios, disponveis em forma comercial, j contm todos os componentes desejados, sendo necessria somente a adio de gua para posterior esterilizao. Os meios de cultura esto constantemente sendo desenvolvidos ou mesmo atualizados para o isolamento e a identificao de bactrias principalmente nas reas de pesquisa de alimentos, gua e microbiologia clnica. (Tortora 2005). Quando se deseja o crescimento de bactrias em um meio slido, um agente solidificante como o agar adicionado ao meio. O agar um polissacardeo complexo obtido a partir de algas marinhas que j vem sendo bastante utilizado para deixar alimentos como gelias e sorvetes mais espessos. (Tortora 2005). Para Falco et al (1976) possvel desenvolver um meio modificado de cultura para isolamento e caracterizao de enterobactrias, visando especialmente salmonelas fermentadoras da lactose. No chamado "Meio modificado" as colnias das duas

estirpes de Salmonella (lactose positivas e lactose negativas) apresentam a morfologia idntica, o que no ocorre quando so empregados os meios rotineiros base de lactose, para isolamento de enterobactrias. Esse meio uma modificao do meio de Hektoen Enteric Agar, do qual retirou-se lactose e adicionou-se xilose e L-lisina. Foi verificado que h possibilidade de diferenciar-se os diversos grupos de enterobactrias, empregando um meio de cultura sem lactose e usando como sistema diferenciador xilose e L-lisina. O meio modificado foi tambm avaliado quantitativamente comparando o seu poder enriquecedor ou inibitrio, ao dos meios de Hektoen Enteric Agar, Brilliant Green Agar e SS Agar para diferentes grupos de enterobactrias.

Resumo
O presente experimento foi realizado para a confirmao de que os microrganismos esto presentes em diversos ambientes e superfcies que nos circundam, ilustrando assim a sua ubiqidade. Realizado por meio da tcnica de coleta de amostras do ambiente da universidade e objetos pessoais, isolou-se a colnia em uma placa contendo gar e cido tartrico, dividida em IV quadrantes, onde quatro amostras foram coletadas, uma para cada quadrante e aps o crescimento dos microorganismos em estufa pde-se observar o desenvolvimento dos mesmos, podendo assim caracterizar as colnias quanto morfologia (forma, elevao e margem) das espcies presentes.

Objetivos
O objetivo desta prtica foi observar o crescimento de microorganismos isolados em meio de cultura a partir das amostras coletadas em diferentes locais do ambiente, podendo descrever as suas caractersticas quanto forma, margem e elevao.

Materiais
Placa de petri com PCA (agar padro para contagem) e cido tartrico; Estufa de Incubao e geladeira; lcool a 70%

Mtodos
A realizao desta prtica constituiu-se em coletar amostras do meio ambiente para observao do crescimento de microrganismos. Para essa prtica foram necessrias 4 placas de Petri, sendo que duas delas ficaram expostas durante a aula, para a observao de fungos e bactrias do ambiente. Utilizou-se para o desenvolvimento da prtica uma terceira placa de Petri dividida em quatro quadrantes com gar. Aps a higienizao e esterilizao das mos do manipulador com sabo, gua corrente e lcool a 70%, foram coletadas amostras de celular, bebedouro, mouse e um recipiente para Catchup, atravs do contato dos dedos com esses objetos. As amostras foram transferidas para a placa, sendo uma fixada em cada quadrante, pela prpria mo do manipulador. Numa quarta placa de Petri, dividida em quatro quadrantes contendo Acido tartrico e gar, foram adicionado sobre cada quadrante da placa amostras de : Terra, Filtro do arcondicionado, parede e banheiro (mictrio). Logo aps a coleta das amostras a placa foi incubada na estufa a 37C devidamente fechada. A segunda etapa da pratica constituiu-se na observao dos microorganismos presentes em diferentes locais, e a quantidade de colnias formadas classificandoas quanto a sua forma, margem e elevao.

Resultados
No primeiro quadrante na amostra da torneira do banheiro Mdulo I observou-se o crescimento de duas colnias de bactrias com bordas esbranquiadas de forma circular, elevao convexa, e margem totalmente inteira; No segundo quadrante na amostra da moeda de 50 centavos foi observado o crescimento de bolor e uma colnia de bactrias com borda esbranquiada de forma circular, elevao convexa, e margem totalmente inteira. No terceiro quadrante no houve o crescimento de microorganismos. No quarto quadrante foi possvel observar o crescimento de duas colnias de bactrias de cor salmon de forma circular margem totalmente inteira e elevao protuberante. Na placa que ficou exposta ao ambiente houve crescimento de bolor com bordas esbranquiadas e no centro pontos pretos, sendo acmulos de esporos. Desenvolveu-se no primeiro quadrante e se espalhou pelo segundo e terceiro quadrantes.

Discusso
O material nutriente preparado no laboratrio para o crescimento de

microorganismos denominado meio de cultura. Algumas bactrias podem crescer normalmente em qualquer meio de cultura, outras necessitam de meios especiais e existem aquelas que no so capazes de crescer em nenhum meio de cultura j desenvolvido. (Tortora 2005). Em comparao ao artigo da Faculdade de sade Pblica da Universidade de So Paulo, Falco et al (1975), foi verificado que h possibilidade de diferenciar diversos grupos de enterobactrias, empregando um meio de cultura sem lactose e apesar de ter-se trabalhado apenas com bactrias de coleo, acredita-se que os resultados foram bastante satisfatrios de modo a sugerir a introduo do Meio Modificado na rotina de isolamento de enterobactrias com referncia especial Salmonella.

Pelo teste de ubiqidade observou-se no primeiro segundo e quarto quadrantes da placa de Petri com agar e cido tartrico, um crescimento de colnias de bactrias esbranquiadas, com forma circular, margem inteira e elevao convexa, sendo algumas diferenciadas como no quarto quadrante que cresceu uma colnia com a cor salmon, com forma circular, margem inteira e elevao protuberante. No terceiro quadrante no houve o desenvolvimento de microorganismos, pois os locais onde as amostras foram coletadas no foram propcios. Pode-se ter como referncia o artigo de ALMEIDA et al (1988) que comprovou-se que o nmero de colnias isoladas aumentou aps a realizao das manobras tcnicas e que a filtrao de ar atravs de filtros tipo HEPA, reduzindo o nmero de colnias isoladas nos ambientes fechados, aumenta a segurana do trabalho; comumente recomendada para reas de atividade tcnica cujos resultados satisfatrios esto diretamente relacionados com uma baixa incidncia de contaminantes. O resultado do experimento foi bastante parecido com o artigo, pois, permitiu observar que o meio ambiente est repleto de microorganismos, podendo encontrlos no ar, na gua, nos vrios objetos e superfcies que nos circundam.

Concluso
Aps o experimento com o teste de ubiqidade, foi possvel afirmar que os seres microbianos esto por toda parte, em moedas, torneiras, nos objetos de uso pessoal e coletivo, os quais se desenvolvem em ambientes propcios, provando a eficcia do teste de ubiqidade. Fica claro que o local em que esses objetos se encontram, interfere no desenvolvimento ou no desses seres. Foi possvel concluir tambm que, alm de estarem espalhados por diversos locais nos ambientes, eles so variados, tanto em tipos e formas, quanto em cor. Encontraram-se bactrias de cor esbranquiada e salmon, de forma circular, margem inteira, e elevaes convexas e protuberantes, alm dos bolores desenvolvidos a partir do ambiente.

Referencias Bibliogrficas
TORTORA, G.J.;B.R.; CASE, C.L.; Microbiologia, 8 Ed.; Editora Artmed, p. 156,163,164. 2005 ALMEIDA, M.E.S. de et al. Identificao da microbiota fngica de ambientes considerados asspticos. Rev. Sade pbl., S. Paulo, 22: 201 - 6,1988. MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J.M,; PARKER,J.;Microbiologia de Brock. 10 Ed.; Editora Pearson,p 54-55, 101-102. 2004. FALCO, D.P. de et al. Meio modificado de cultura para caracterizao de Salmonella lactose positiva. Rev. Sade Pblica v.10 n.1 So Paulo mar. 1976