Universidade Federal de Pelotas CDTec - Graduao em Biotecnologia Disciplina de Biologia Celular

Ncleo, Ciclo Celular e Meiose

Priscila M. M. de Leon
Mdica Veterinria Doutoranda em Biotecnologia

Maio, 2011

Ncleo Celular

Ncleo Celular
Conceito: Corpsculo celular relacionado ao controle de todas as atividades celulares.

Funes: Armazenamento do material gentico Controle o metabolismo celular atravs da transcrio do DNA em RNA

Ncleo Celular
Caractersticas gerais: nico Esfrico ou ovide Localizado no centro da clula ou levemente desviado O contedo do ncleo se apresenta com uma massa amorfa viscosa de material rodeada por um complexo envoltrio nuclear. a maior organela da clula animal. Cls. com metabolismo intenso apresentam ncleos volumosos

*Excees: (eucariotos possuem forma varivel)

Cls hepticas: 2 ncleos Fibra muscular esqueltica: dezenas de ncleos Cls glandulares mucosas: forma achatada: Glbulos brancos: forma lobulada Cls. Vegetais: ncleo perifrico

1. corte longitudinal 2. ncleos perifricos 3. corte transversal 4. ncleo perifrico

Neurrnio binulceado

Ncleo Celular
Estruturas do ncleo interfsico:
1. Carioteca 2. Nucleoplasma 3. Nuclolo 4. Cromatina

Ncleo Celular
Estruturas do ncleo interfsico: 1. Carioteca :
Envoltrio Nuclear, formado por 2 membranas com poros (3.000 poros), onde h intercmbio de substncias entre o ncleo e o citoplasma. Membranas so lipoproteicas (30% lipdeos e 70% protenas) membrana externa: salpicada de ribossomos e contnua ao retculo endoplasmtico rugoso cisterna perinuclear: cavidade intermembranas superfcie interna: lmina nuclear (rede fibrosa de suporte mecnico) Complexo Poro Nuclear: nucleoporinas *diferencia eucariotos de procariotos * Cls com alta atividade proteica apresentam mais poros Centro de atividades para a movimentao de RNAs e protenas transporte seletivo

Ncleo Celular
Estruturas nucleares:
1. Carioteca :

Complexo Poro Nuclear

COMPLEXO DO PORO

Nucleoporinas

Ncleo Celular
Estruturas nucleares:
2. Nucleoplasma:
ou Cariolinfa uma massa incolor que preenche o ncleo celular. * constitudo principalmente por gua e protenas. Alm de nucleosdeos, nucleotdeos e ons * Protenas: enzimas de transcrio e duplicao do DNA * Contm filamentos de cromatina e o nuclolo
Matriz nuclear: estrutura fibrilar que forma o endoesqueleto nuclear

Ncleo Celular
Estruturas nucleares:
3. Nuclolo: Trata-se de um corpsculo esponjoso e desprovido de membranas, que se encontra em contato direto com o nucleoplasma, rico em RNA ribossmico, alm de protenas e pouco DNA (DNA ribossmico). Geralmente esfrico e visvel em cls vivas. * Funo: organizao dos ribossomos, sntese de RNA ribossmico e montagem das subunidades ribossmicas. * Quanto maior o seu nmero e tamanho, maior a sntese proteica da clula. Poro fibrilar: localizao central, rRNA e protenas ribossomais (poro central e densa) Poro granular: localizao perifrica, subunidades ribossmicas em formao. Regio Organizadora do Nuclolo (NORs): cromatina

Nuclolo

Ncleo Celular
Estruturas nucleares:
4. Cromatina: representa o material gentico, complexo de DNA e protenas que se encontra dentro do ncleo celular nas clulas eucariticas. Sua organizao dinmica devido alteraes no ciclo celular * Tm aspecto emaranhado de filamentos longos e finos, denominados Cromonemas. Durante a diviso celular, os cromonemas espiralizam-se, tornando-se mais curtos e mais grossos e passam a ser chamados de Cromossomos. - Heterocromatinas: regies condensadas, DNA inativo (funo estrutural). - Eucromatinas: regies distendidas, DNA ativo (expresso de protenas e enzimas). *Cl. eucaritica quase todo o DNA est compactado na cromatina. *Grande parte da cromatina localizada na periferia do ncleo.

Cromatina:
Protenas da cromatina: Histonas e no-histnicas No-histnicas: protenas que participam da replicao e reparo do DNA, ativao e represso gnica Histonas:
principais protenas da cromatina participam da arquitetura molecular da cromatina ntima associao com o DNA So bastante estveis Tem peso molecular baixo e carter bsico (arginina e lisina) Ligam-se ao DNA atravs de seus radicais amino com os fosfatos do DNA Tipos: H1 (220 aa) , H2A, H2B, H3 e H4 (102 a 135 aa)

Cromonema = Cromossomo
* Durante a diviso celular, os cromonemas espiralizam-se, tornando-se mais curtos e mais grossos. Podem, ento, ser vistos individualmente e passam a ser chamados de cromossomos.

CLASSIFICAO DOS CROMOSSOMOS

Cromatina = Cromossomos
O material gentico descondensado Cromatina - ativo, pois pode ser transcrito mais facilmente nesse estado. Ao se tornar condensado Cromossomo a transcrio dificultada, mas por outro lado a diviso celular ocorre com maior preciso.

Cromatina:
Nucleossomo: unidade estrutural bsica da cromatina (DNA em dupla hlice e Histonas).
Forma: cilndrica achatada, 10 nm x 6 nm * Constitudo por 200 pares de bases (pb) de DNA associado com octmero de histonas (H2A, H2B, H3 e H4) e uma molcula de H1 * Centro do nucleossomo (octmero de histonas + 146 pb de DNA) * DNA de ligao (15 at 100pb)

Nucleofilamento ou fibra de 10 nm: 1 nvel de compactao da cromatina.

Associao de nucleossomos adjacentes atravs da interao de H1 (extremidade amino-terminal a extremidade carboxi-terminal) 10% durante a intrfase, permitindo acesso as enzimas de transcrio

Solenide ou fibra de 30 nm: 2 nvel de compactao da cromatina.

Formada pelo enovelamento da fibra de 10 nm em estrutura helicoidal. Cada volta contm 6 nucleossomos radias Maioria durante a interfase

Nucleossomo:

Caritipo
o estudo da constituio cromossmica dos seres vivos. Espcie humana, composto de 46 cromossomos em 23 pares (22 pares de autossomos e 1 par sexual) Permite a anlise das anomalias numricas ou estruturais dos cromossomos. O estudo do caritipo (forma, tamanho e nmero de cromossomos) pode ajudar no diagnstico pr-natal ou psnatal de aberraes genticas.

Componentes Clulas Procariontes Carioteca Ausente

Clula Animal Presente Presente Presente Presente

Clula Vegetal Presente Presente Presente Presente

Funes

Movimentao de RNA e protenas Estrutura nuclear Material gentico (DNA + protenas) Rico em RNA ribossmico

Nucleoplasma Ausente Cromatina Nuclolo Presente Ausente

Ncleo celular - pontos importantes:

Em uma clula em crescimento ou em diferenciao, o ncleo metabolicamente ativo, replicando DNA e sintetizando rRNA, tRNA e mRNA. Nuclolo o local de sntese de RNA ribossmico Dentro do ncleo o mRNA liga-se a protenas especficas formando partculas de ribonucleoproteinas Ento passa para o citosol atravs dos poros nucleares para a sntese de protenas

Ciclo Celular

CICLO CELULAR
Conceito: * Envolve processos desde a formao celular at a diviso em duas cls filhas. *Eventos que preparam e realizam a diviso celular Funo: proliferao celular, reposio e regenerao, diferenciao celular e latncia.

Clulas somticas clula duplica seu material gentico e o distribui igualmente para duas clulasfilhas, multiplicam-se por mitose Clulas germinativas gametas carregam metade do n cromossmico, multiplicam-se por meiose (diviso reducional)

CICLO CELULAR
Etapas coordenadas do ciclo celular: 1. Intrfase: Compreendida entre duas divises sucessivas Perodo de Crescimento: clula cresce e preparase para nova diviso. Ocorre a duplicao dos componentes da clula me. 2. Perodo de Diviso: diviso propriamente dita, se origina duas cls filhas. Cariocinese ou Mitose diviso nuclear Citocinese diviso citoplasmca

CICLO CELULAR
Fases do ciclo celular: I. Intrfase:
G1 intervalo entre o m da mitose e a sntese de DNA (fase mais varivel) - S duplicao e sntese de DNA - G2 intervalo entre o trmino da sntese de DNA e a prxima mitose. G = gap (intervalo) S = sntese * 95% do tempo de clico celular gasto na Intrfase, porm tempo varia com tipo celular. * Intrfase uma fase de intensa atividade metablica

CICLO CELULAR
Sinais qumicos que controlam o ciclo provm de fora e de dentro da clula Sinais externos: Hormnios Fatores de crescimento (ligam-se a receptores de membrana das clulas alvo): PDGF, EGF, VEGF, FGF * Complexo receptor-ligante ativa produo de sinalizadores intracelulares Sinais internos: Sinalizadores ativam cascata de fosforilao intracelular, induzindo a expresso de genes. so protenas de 2 tipos: Ciclinas Quinases (CDKs - Cinases Dependentes de Ciclina) * Complexo CDK-ciclina fosforila protenas especficas

Controladores negativos
CKIs (Inibidores de Cdk): protenas que interagem com Cdks, bloqueando sua atividade de quinase Complexo ubiquitina de degradao de protena: degrada ciclinas e outras protenas para promover a progresso do ciclo celular

CICLO CELULAR - Intrfase

G1
Intensa sntese de RNA e protenas; aumento do citoplasma da clula-filha recm formada; Se refaz o citoplasma, dividido durante a mitose; Cromatina no compactada e no distinguvel como cromossomos individualizados; Pode durar horas ou at meses Inicia com estmulo de crescimento e posterior sntese de ciclinas que vo se ligar as CDKs (quinases)

CICLO CELULAR - Intrfase

S
Duplicao do DNA Replicao Cromatina com duplicao do DNA e Histonas aumenta a quantidade de DNA polimerase e RNA; Complexo ciclinaA/Cdk2 importante funo antes da sntese de DNA, fosforilando protenas envolvidas na origem de replicao do DNA Fator Promotor da Mitose (MPF ou ciclinaB/cdc2), protege a clula de segunda diviso no DNA at que entre na mitose

CICLO CELULAR - Intrfase

G2
Tempo para o crescimento celular e para assegurar completa replicao e reparao do DNA antes da mitose Pequena sntese de RNA e protenas essenciais para o incio da mitose Acmulo do Fator Promotor de Maturao (regulador geral da transio de G2 para M) Eventos: condensao da cromatina, ruptura do envoltrio nuclear, montagem do fuso e degradao da ciclina

CICLO CELULAR
G0 estado de quiescncia Ponto de controle do ciclo celular: I. Ponto de restrio (R):
Ocorre ao fim da fase G1 impede a progresso do ciclo celular em condies desfavorveis ou insatisfatrias No momento que a clula passa por R atinge at a faz de Mitose * Em mamferos a p53 sinal de parada em G1 (clulas cancgenas)

II.

Checkpoint G2-M
Formao do fator Promotor da Maturao (ciclinas mitticas ligam-se a protenas CdK formando MPF)

CICLO CELULAR
Fases do Ciclo: G1: 12 horas S: 7 a 8 horas G2: 3 a 4 horas M: 1 a 2 horas Total: 24 horas

Em geral ciclo celular dura: 12 a 24 h em mamferos; 1 hora em unicelulares.

Proliferao celular:
Classificao celular de acordo proliferao:
1. As clulas que se dividem continuamente
Clulas embrionrias, as do epitlio do intestino delgado (renovao de trs em trs dias), as dos folculos capilares, as do sistema linftico e as da medula ssea (cl sanguneas).

2. Dividem-se em reposta a estmulo

Podem permanecer em G0 So cl desprovidas de fatores de crescimento, necessitam estmulo Fibroblastos, hepatcitos, cl renais, ovrio, musculo liso, cl. Osseas. 3. Clulas terminalmente diferenciadas Perdem permanentemente a capacidade reprodutiva Permanecem em G0 Neurnios, msculo esqueltico, cl cardaca.

Meiose

MEIOSE
Conceito: * Ciclo de diviso de clulas germinativas diplides (2n) em clulas haplides (n) * Gametognese * Resulta na formao de 4 clulas diferentes geneticamente.
Acontecem duas divises celulares sucessivas aps uma nica duplicao do DNA (intrfase): Meiose I Diviso Reducional Meiose II Diviso Equacional

MEIOSE
Fases de cada diviso meitica (Meiose I e Meiose II): 1. Prfase 2. Metfase 3. Anfase 4. Telfase

 Diviso Reducional = so formadas duas clulas haplides a partir de uma diplide

MEIOSE I
Prfase I: perodo exageradamente demorado (muito anos na oogenese e 13 a 14 dias na espermatognese) Eventos: Pareamento dos cromossomos homlogos
Garante a disjuno dos cromossomos homlogos (ncleos filhos recebem um de cada par) Permite a recombinao gnica (crossing-over) Contribui para a diversidade gentica do processo evolutivo

MEIOSE I
Prfase I - Subdiviso: Leptteno
Cromatina comea a condensao gradual em Cromossomos (ainda s visvel filamentos finos) Crommeros: pontos de condensao nos filamentos Ncleos Axiais

Zigteno
Sinapse (aproximao e pareamento dos cromossomos de forma ordenada) Complexo Sinaptonmico (ncleo axial em contato com a cromatina)

MEIOSE I
Prfase I - Subdiviso: Paquteno
Cromossomos permanecem pareados Recombinao gnica (crossing-over)*

Diplteno
Separao dos cromossomos homlogos Quiasmas (evidncia citolgica do crossing-over) Na oognese ocorre o aumento do volume celular *Intensa atividade metablica

MEIOSE I
Prfase I - Subdiviso: Diacinese
Aumento da repulso entre cromossomos homlogos Terminalizao dos quiasmas Aumento da condensao cromossmica e desaparecimento dos nuclolos (ruptura da envoltrio)

Recombinao gnica ou Crossing-over

Evento molecular que envolve troca de genes entre os cromossomos de origem materna e paterna Etapas:
1. Quebra do DNA 2. Formao de molcula de DNA hbrida 3. Substituio das bases impropriamente pareadas * Ndulos de recombinao

Resultado final da Prfase I: caractersticas principais pareamento dos cromossomos homlogos crossing over

MEIOSE I
Metfase I:
Os cromossomos homlogos, ainda emparelhados, ocupam a regio equatorial da clula, presos s fibras do fuso acromtico que emergem de centrolos opostos. Cromossomos atingem a sua condensao mxima (maior que na mitose) Membrana nuclear desaparece; forma-se o fuso Centrmeros em polos opostos
Migrao Cromtides-irms para polos opostos

Meiose I - Metfase I

MEIOSE I
Anfase I:
Os cromossomos homlogos separam-se, so movimentados pelas fibras do fuso acromtico que encurtam-se. Os cromossomos so direcionados para os plos opostos da clula (disjuno). Como ainda no ocorre a duplicao dos centrmeros, as cromtides irms seguem juntas para o mesmo plo. os conjuntos paterno e materno originais so separados em combinaes aleatrias *Etapa propensa a erros chamados de no-disjuno Formao da Placa Equatorial

Meiose I - Anfase I

MEIOSE I
Telfase I:
Os cromossomos chegam aos plos ainda duplicados, formandos por duas cromtides presas pelo centrmero Carioteca se reorganiza surgindo dois novos ncleos ocorrendo a citocinese Cromossomos se desespiralizam, reaparecem os nuclolos Desorganiza-se o fuso acromtico, os centrolos duplicam-se

Citocinese: Citoplasma se divide e so originadas duas clulas

haplides.

Formao de duas clulas Haplides

Meiose I - Telfase I

MEIOSE - Intercinese
No intervalo entre a meiose I e II, ocorre a intercinese, cada uma das duas clulas iniciar a diviso II. Fase breve Essa fase difere da intrfase por no ocorrer a replicao da informao gentica, tal como ocorre na intrfase. No ocorre a fase S ( ento no h duplicao do DNA) *Clulas Haplides (n) e de quantidade 2C de DNA, pois cromossomos esto duplicados

MEIOSE II
* Semelhante a Mitose Prfase II: bem simplificada, visto que os cromossomos no perdem a sua condensao durante a telfase I. Eventos: Os cromossomos condensam-se, desaparecem os nuclolos, os centrolos duplicados ocupam plos opostos na clula, surge o fuso acromtico, a carioteca desorganiza-se e os cromossomos espalham-se pelo citoplasma, prendendo-se s fibras do fuso acromtico pelo centrmero.

Meiose II - Profase II

MEIOSE II
Metfase II: Os cromossomos ligados ao fuso so transportados ao centro da clula formando a placa equatorial. No h mais homlogos nas clulas eles se dispem um sobre o outro, como na mitose.

MEIOSE II
Anfase II: Devido a trao do fuso em sentidos diferentes ocorre a quebra do centrmero e as cromtides irms so separadas.

MEIOSE II
Telfase II: Reaparecimento da carioteca e do nuclolo, descondensao cromossmica, ocorre a citocinese e formao de quatro clulas haplides e geneticamente diferentes. * Cada clula dessa meiose ir conter um grupo de cromossomos no homlogos. Reduo cromossonal e da quantidade de DNA (n, 1C).

MEIOSE II Telfase II

Resultados da meiose
Incio Meiose: 1 cromossomo = 2 molculas de DNA idncas de dupla hlice (2 cromtides-irms), unidas pelo centrmero: 46 cromossomos = 4C = 2n Final Meiose I: 1 cromossomo = 2 cromtides-irms: 23 cromossomos = 2C = n Final Meiose II: 1 cromossomo = 1 cromtide (1 molcula de DNA): 23 cromossomos = C = n

Vdeo - Biologia da Meiose

Gametognese
Oognese:
* Processo de formao do gameta feminino, (vulo). a) Perodo germinativo: as Oognias (2n) sofrem mitoses formando vrias clulas durante o perodo embrionrio. b) Perodo de crescimento: as oognias aumentam de tamanho dando origem a clulas que agora so chamadas ocitos I c) Perodo de maturao: Os ovcitos I entram em meiose I, dando origem a duas clulas, uma maior (n) ovcito II e outra menor (n) 1 corpsculo polar. Inicia-se ento a meiose II; o ocito II dar origem a duas clulas (n), ocito e 2 corpsculo polar.

Gametognese
Oognese:
Os ovcitos primrios entram em meiose I e ficam parados em prfase I (diplteno) da meiose I at a puberdade Entra em meiose II, at metfase II, e finalmente completada na poca da fertilizao Gestaes em idade avanada esto mais sujeitas a malformaes, devido ao maior de tempo exposto a risco de mutaes do que um ovcito de uma mulher mais jovem Quase todo o citoplasma vai para uma clula filha, que depois ir formar o ovcito, outra clula o Corpsculo Polar (uma pequena clula que se degenera)

Gametognese
Espermatognese:
a) Perodo germinativo: as espermatgonias dividem-se por mitose, dando origem a vrias outras gnias. Perodo de multiplicao ocorre durante a vida toda. b) Perodo de crescimento: as mitoses param e a espermatognia cresce dando origem a uma clula maior, o Espermatcito I. c) Perodo maturao: Espermatcito I (2n) entra em meiose I, dando origem a duas clulas (n), Espermatcitos II, que entram em meiose II formando quatro clulas (n), Espermtides. d) Espermiognese: espermtides sofrem transformaes, originando Espermatozides.

Gametognese

primleon@gmail.com