UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS MICROBIOLOGA GENERAL

MTODOS ESPECTROMTRICOS PAULINA LUCINA

INTRODUCCIN
Aquellos mtodos de anlisis ptico ms usados en el rea de investigacin. Es la medida de la cantidad de radiacin absorbida por las molculas de una muestra en funcin de las longitudes de onda especficas.

Radiacin Electromagntica
Se puede describir como un flujo de partculas llamadas fotones

o bien como una onda propagndose en el espacio.

Se toma el concepto de longitud de onda, definindolo como la distancia entre dos mximos consecutivos de la onda.

Esta es inversamente proporcional a la energa de la misma, de tal manera que el espectro de radiaciones electromagnticas abarca un amplio rango de energas, las de menor energa son las ondas de radio y las de mayor energa son las llamadas radiacin gamma.

Tipos de Mtodos Espectroscpicos

Efecto del haz de luz sobre un objeto

Un haz choca con una sustancia puede suceder: Puede pasar a travs de la materia haciendo una sola pequea absorcin.

La direccin de propagacin de la luz puede ser alterada por : Refraccin Reflexin Difraccin Dispersin Energa puede ser absorbida total o parcialmente

Transmitancia:

Es la fraccin de radiacin incidente transmitida por la materia

Si:

Absorbancia:

Es una medida de la cantidad de Energa incidente absorbida por una sustancia en solucin.

Si:

La Ley de Lambert y Beer

Expresa que la absorbancia de una solucin es directamente proporcional al camino recorrido por la radiacin electromagntica y a la concentracin de la solucin

Requerimientos:

= Es la cte. de proporcionalidad llamada coeficiente de absortividad molar (L mol-1cm-1). b = Es el paso ptico, anchura de la celda (cm). c = concentracin de la muestra (M).

Luz monocromtica. Disolucin diluida (< 0,01M). Especie absorbente no participe en un equilibrio que dependa de su concentracin.

Espectrofotmetro
Los aparatos de medida de la absorcin de la radiacin electromagntica se denominan espectrofotmetros y pueden representarse de forma sencilla mediante el siguiente esquema:

Componentes esenciales de un Espectrofotmetro

Fuentes continuas Lmpara: Fuente de luz de alta intensidad para efectuar la medicin.

Fuentes Lneas
Laser

LMPARAS Fuentes Continuas Tungsteno Hidrgeno /Deuterio Arco de Xenn Sodio Mercurio Hidrgeno Vis IR UV UV Vis Vis UV Vis

Fuentes de Lneas

Absorcin
Filtros Selectores de longitud de onda Interferencia

Prisma Monocromadores
Red de difraccin Reflexin

Transmisin

Filtro de Interferencia

Monocromadores

Dispositivos pticos que descomponen la radiacin electromagntica en sus componentes y permite aislar cualquier porcin deseada del espectro

De prisma: Aslan la radiacin mediante el fenmeno de la dispersin ptica

De Red: Aslan radiacin mediante el fenmeno de interferencia ptica

Portamuestras

Material de la celda

Forma de la celda

Cuarzo o Slice fundida

Vidrio

Cilndricas

Rectangulares

Regin UV

Regin Vis

Detectores

Dispositivos que convierte la radiacin electromagntica en una seal utilizable

Fototubos Fotomultiplicadores Fotodiodos

Bibliografa: Skoog, Principios de Anlisis Instrumental, 5ta Edicin, Editorial McGraw Hill, Cap. 67 http://www.slideshare.net/SantosSerkovic/espectrofotometria-pdf http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wpcontent/uploads/2010/08/2011-TP-1-ESPECTROFOTOMETRIA.pdf http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/cineticapractica6_19764.pdf