Escuela Superior Politcnica de Chimborazo

Facultad de ciencias

Escuela de bioqumica y farmacia Sexto semestre

Bioqumica II

Vitaminas y coenzimas

1. Qu son las vitaminas y las coenzimas? El trmino Vitamina se le debe al Bioqumico polaco Casimir Funk quien lo plante en 1912. Consideraba que eran necesarias para la vida (vita) y la terminacin Amina es porque crea que todas estas sustancias posean la funcin Amina las vitaminas son esenciales en el

metabolismo y necesarias para el crecimiento y para el buen funcionamiento del cuerpo. Solo la Vitamina D es producida por el organismo, el resto se obtiene a travs de los alimentos. Las vitaminas son sustancias orgnicas, de naturaleza y composicin variada. Imprescindibles en los procesos metablicos que tienen lugar en la nutricin de los seres vivos. No aportan energa, ya que no se utilizan como combustible, pero sin ellas el organismo no es capaz de aprovechar los elementos constructivos y energticos suministrados por la alimentacin. Normalmente se utilizan en el interior de las clulas como antecesoras de las coenzimas, a partir de las cuales se elaboran los miles de enzimas que regulan las reacciones qumicas de las que viven las clulas. Una coenzima es una pequea molcula orgnica que se une a una enzima y que es esencial para su actividad, pero que no sufre una alteracin permanente en la reaccin. La mayor parte de las coenzimas derivan de las vitaminas y cada tipo de coenzima tiene una funcin bioqumica concreta. Algunas son agentes de oxidorreduccin, otras facilitan la transferencia de grupos, entre otras actividades bioqumicas. Por lo tanto, las coenzimas son la forma activa de las vitaminas, como por ejemplo, la forma activa o coenzimtica de la tiamina es el pirofosfato de tiamina (PPT). Son cofactores orgnicos no proteicos, termoestables, que unidos a una apoenzima constituyen la holoenzima o forma catalticamente activa de la enzima. Tienen en general baja masa molecular (al menos comparada con la apoenzima) y son claves en el mecanismo de catlisis, por ejemplo, aceptando o donando electrones o grupos funcionales, que transportan de un enzima a otro. A diferencia de las enzimas, los coenzimas se modifican y consumen durante la reaccin qumica; por ejemplo, el NAD+ se reduce a NADH cuando acepta dos electrones (y un protn) y por tanto se agota; cuando el NADH libera sus electrones se recupera el NAD+, que de nuevo puede actuar como coenzima. 2. Cmo se clasifican las vitaminas?

Tradicionalmente se establecen 2 grupos de vitaminas segn su capacidad de disolucin: vitaminas hidrosolubles y liposolubles. 1. VITAMINAS LIPOSOLUBLES Las vitaminas liposolubles, A, D, E y K, se consumen junto con alimentos que contienen grasa. Son las que se disuelven en grasas y aceites. Se almacenan en el hgado y en los tejidos grasos, debido a que se pueden almacenar en la grasa del cuerpo no es necesario tomarlas todos los das por lo que es posible, tras un consumo suficiente, subsistir una poca sin su aporte. Si se consumen en exceso (ms de 10 veces las cantidades recomendadas) pueden resultar txicas. Esto les puede ocurrir sobre todo a deportistas, que aunque mantienen una dieta equilibrada recurren a suplementos vitamnicos en dosis elevadas, con la idea de que as pueden aumentar su rendimiento fsico. Esto es totalmente falso, as como la creencia de que los nios van a crecer si toman ms vitaminas de las necesarias. Las Vitaminas Liposolubles son: Vitamina A (Retinol) Vitamina D (Calciferol) Vitamina E (Tocoferol) Vitamina K (Antihemorrgica)

Vitamina A La vitamina A tambin se conoce como Retinol o Antixeroftlmica, slo est presente como tal en los alimentos de origen animal, aunque en los vegetales se encuentra como provitamina A,

en forma de carotenos. Los diferentes carotenos se transforman en vitamina A en el cuerpo humano. Se almacena en el hgado en grandes cantidades y tambin en el tejido graso de la piel (palmas de las manos y pies principalmente). Es una sustancia antioxidante, ya que elimina radicales libres y protege al ADN de su accin mutgena, contribuyendo, por tanto, a frenar el envejecimiento celular. El consumo de alimentos ricos en vitamina A es recomendable en personas propensas a sufrir infecciones respiratorias (gripas, amigdalitis o inflamaciones), problemas oculares (fotofobia, sequedad o ceguera nocturna) o con la piel reseca y spera (acn incluido). PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA A Aceite de Hgado de Pescado Yema de Huevo Aceite de Soya Mantequilla Zanahoria Espinacas Hgado Perejil Leche Queso Tomate Lechuga

Estructura de la Vitamina A:

Vitamina D Calciferol o Antirraqutica. Esta vitamina da la energa suficiente al intestino para la absorcin de nutrientes como el calcio y las protenas. Esta vitamina se obtiene a travs de provitaminas de origen animal que se activan en la piel por la accin de los rayos ultravioleta cuando tomamos "baos de sol". La carencia de vitamina D produce en los nios malformaciones seas, caries dental y hasta Raquitismo, exceder su consumo produce trastornos digestivos, vmito, diarrea, daos al rin, hgado, corazn y prdida de apetito. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA D Leche Enriquecida Yema de Huevo Sardina Atn Queso Hgado cereales

Estructura de la Vitamina D:

Vitamina E Tocoferol o restauradora de la fertilidad. Esta vitamina participa en la formacin de glbulos rojos, msculos y otros tejidos. La participacin de la vitamina E como antioxidante es de suma importancia en la prevencin de enfermedades donde existe una destruccin de clulas importantes. Al parecer, su exceso no produce efectos txicos masivos.

PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA E Aceites Vegetales Germen de Trigo Chocolates Legumbre Verduras Leche Girasol Frutas Maz Soya Hgado

Estructura de la Vitamina E:

VITAMINA K Antihemorrgica o filoquinona. Es un diterpeno (C20 H32) con cuatro formas moleculares: K1, K2, K3, K4 (sta ltima se obtuvo sintticamente). La vitamina K participa en diferentes reacciones en el metabolismo, como coenzima, y tambin forma parte de una protena muy importante llamada protombina que es la protena que participa en la coagulacin de la sangre. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA K

Legumbres Hgado de Pescado Aceite de Soya Yema de Huevo Verduras

Estructura de Vitamina K:

2. VITAMINAS HIDROSOLUBLES Las vitaminas hidrosolubles son aquellas que se disuelven en agua. Se trata de coenzimas o precursores de coenzimas, necesarias para muchas reacciones qumicas del metabolismo. Se caracterizan porque se disuelven en agua, por lo que pueden pasarse al agua del lavado o de la coccin de los alimentos. Muchos alimentos ricos en este tipo de vitaminas no nos aportan al final de prepararlos la misma cantidad que contenan inicialmente. Para recuperar parte de estas vitaminas, se puede aprovechar el agua de coccin de las verduras para caldos o sopas. A diferencia de las vitaminas liposolubles no se almacenan en el organismo. Esto hace que deban aportarse regularmente y slo puede prescindirse de ellas durante algunos das. El exceso de vitaminas hidrosolubles se excreta por la orina, por lo que no tienen efecto txico por elevada que sea su ingesta, aunque se podra sufrir anormalidades en el rin por no poder evacuar la totalidad de lquido. Vitaminas Hidrosolubles: VITAMINA C. cido Ascrbico. Antiescorbtica. VITAMINA B1. Tiamina. Antiberibrica. VITAMINA B2. Riboflavina. VITAMINA B3. Niacina. cido Nicotnico. Vitamina PP. Antipelagrosa. VITAMINA B5. cido Pantotnico. Vitamina W. VITAMINA B6. Piridoxina. VITAMINA B8. Biotina. Vitamina H. VITAMINA B9. cido Flico. VITAMINA B12. Cobalamina. VITAMINA C cido Ascrbico o vitamina Antiescorbtica. Esta vitamina es necesaria para producir colgeno que es una protena necesaria para la cicatrizacin de heridas. El consumo adecuado de alimentos ricos en vitamina C es muy importante porque es parte de las sustancias que une a las clulas para formar los tejidos. Las necesidades de vitamina C no son iguales para todos, durante el crecimiento, el embarazo y las heridas hay requerimientos aumentados de este nutrimento.

Lo ms recomendable es comer las frutas y verduras frescas puesto la accin del calor destruye a la vitamina C. Tambin hay que mencionar que la vitamina C en contacto con el aire se oxida y pierde su actividad, y esto hay que recordarlo cuando uno se prepara un jugo de fruta como el de naranja, de no tomrselo rpidamente habr perdido un gran cantidad de vitamina C. La otra forma de destruccin de la vitamina C, es al tener contacto con alcohol etlico, por ejemplo con la cerveza o el tequila. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA C Leche de Vaca Hortalizas Verduras Cereales Carne Frutas Ctricos

Estructura de la vitamina C:

Vitamina con su coenzima

COMPLEJO B: Son sustancias frgiles, solubles en agua, varias de las cuales son sobre todo importantes para metabolizar los hidratos de carbono. El factor hidrosoluble B, en un principio considerado como una sola sustancia, demostr contener diferentes componentes con actividad vitamnica. Los distintos compuestos se designaron con la letra B y un subndice numrico. La tendencia actual es utilizar los nombres de cada sustancia. El denominado complejo vitamnico B incluye los siguientes compuestos: tiamina (B1), riboflavina (B2), cido Pantotnico (B3), cido nicotnico (B5), Piridoxina (B6), biotina (B7), y cobalamina (B12) Vitamina B1

Tiamina, Aneurina O Antiberibrica. Desempean un papel fundamental en el metabolismo de los glcidos y lpidos, es decir, en la produccin de energa. Es la gran aliada del estado de nimo por su efecto benfico sobre el sistema nervioso y la actitud mental. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA B1 Vsceras (hgado, corazn y riones) Levadura de Cerveza Vegetales de Hoja Verde Germen de Trigo Legumbres Cereales Carne Frutas

Estructura de la vitamina B1:

Vitamina B2

Riboflavina. Al igual que la tiamina, acta como coenzima, es decir, debe combinarse con una porcin de otra enzima para ser efectiva en el metabolismo de los hidratos de carbono, grasas y especialmente en el metabolismo de las protenas que participan en el transporte de oxgeno. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA B2 Levadura de Cerveza Germen de Trigo Verduras Cereales Lentejas Hgado Leche Carne Coco Pan Queso

Estructura de la vitamina B2:


FMN

Vitamina B3 Vitamina PP o nicotinamida. Interviene en el metabolismo de los hidratos de carbono, las grasas y las protenas. Es poco frecuente encontrarnos con estados carenciales, ya que nuestro organismo es capaz de producir una cierta cantidad de niacina a partir del triptfano, aminocido que forma parte de muchas protenas que tomamos en una alimentacin mixta. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA B3 Harina Integral de Trigo Pan de Trigo Integral Levadura de Cerveza Salvado de Trigo Hgado de Ternera Germen de Trigo Arroz Integral Almendras

Estructura de la vitamina B3:

Vitamina B5 cido Pantotnico o vitamina W. Desempea un papel aun no definido en el metabolismo de las protenas. Interviene en el metabolismo celular como coenzima en la liberacin de energa a partir de las grasas, protenas y carbohidratos. Se encuentra en una gran cantidad y variedad de alimentos (pantothen en griego significa "en todas partes"). Forma parte de la Coenzima A. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA B5 Levadura de Cerveza Vegetales Verdes Yema de Huevo Cereales Vsceras Man Carnes Frutas

Estructura de la vitamina B5:

Vitamina con su coenzima

Vitamina B6 Piridoxina. Acta en la utilizacin de grasas del cuerpo y en la formacin de glbulos rojos. Mejora la capacidad de regeneracin del tejido nervioso, para contrarrestar los efectos negativos de la radioterapia y contra el mareo en los viajes. Esta vitamina se halla en casi todos los alimentos tanto de origen animal como vegetal, por lo que es muy raro encontrarse con estados deficitarios. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA B6 Carne de Pollo Espinacas Garbanzos Cereales Aguacate Sardinas Pltano Lentejas Hgado Granos Atn Pan

Estructura de la Vitamina B6:

Vitamina con su coenzima

VITAMINA B8 Vitamina H o Biotina. Es una coenzima que participa en la transferencia de grupos carboxilo, interviene en las reacciones que producen energa y en el metabolismo de los cidos grasos. Interviene en la formacin de la glucosa a partir de los carbohidratos y de las grasas. PRINCIPALES FUENTES DE BIOTINA Levadura de Cerveza Yema de Huevo leguminosas Riones Coliflor Hgado Leche Frutas

Estructura de la Vitamina B8:

Vitamina con su coenzima

Vitamina B12 Cianocobalamina. Esta vitamina Interviene en la sntesis de ADN, ARN. PRINCIPALES FUENTES DE VITAMINA B12 Pescado Riones Huevos Quesos Leche

Carne

Estructura de la Vitamina B12:

Vitamina con su coenzima

Falsas vitaminas. Son sustancias con una accin similar a la de las vitaminas, pero con la diferencia de que el organismo las sintetiza por s mismo. Entre ellas estn: Inositol, Colina cido flico

Inositol: Forma parte del complejo B y est ntimamente unido a la colina y la biotina. Forma parte de los tejidos de todos los seres vivos: en los animales formando parte de los fosfolpidos. El inositol interviene en la formacin de lecitina, que se usa para trasladar las grasas desde el hgado hasta las clulas, por lo que es imprescindible en el metabolismo de las grasas y ayuda a reducir el colesterol sanguneo. Colina: Tambin se le puede considerar un componente del grupo B. Acta al mismo tiempo con el inositol en la formacin de lecitina, que tiene importantes funciones en el sistema lipdico. La colina se sintetiza en el intestino delgado por medio de la interaccin de la vitamina B 12 y el cido flico con el aminocido metionina, por lo que un aporte insuficiente de cualquiera de estas sustancias puede provocar su escasez. Tambin se puede producir una deficiencia de colina si no tenemos un aporte suficiente de fosfolpidos o si consumimos alcohol en grandes cantidades. cido Flico: Se le llama cido flico por encontrarse principalmente en las hojas de los vegetales junto con la vitamina B12 participa en la sntesis del ADN, la protena que compone los cromosomas y que recoge el cdigo gentico que gobierna el metabolismo de las clulas, por lo tanto es vital durante el crecimiento, las necesidades aumentan durante el embarazo (desarrollo del feto). En el embarazo las clulas se multiplican rpidamente y se forma una gran cantidad de tejido. Esto requiere bastante cido flico, razn por la que es frecuente una deficiencia de este elemento entre mujeres embarazadas. Es un factor antianmico, porque es necesaria para la formacin de las clulas sanguneas, concretamente, de los glbulos rojos. PRINCIPALES FUENTES DE CIDO FLICO Vegetales Verdes Yema de Huevo Championes Legumbres Naranjas Cereales Hgado Nueces

Estructura del cido Flico:

Vitamina con su coenzima

3. Para qu sirven las coenzimas? Las coenzimas actan como portadores transitorios de grupos qumicos, actuando alternativamente como donadores y aceptores de estos grupos, entre un sustrato y otro. Las coenzimas son molculas indispensables para que se lleven a cabo muchas reacciones enzimticas en el cuerpo. Podramos decir que hacen que nuestro cuerpo trabaje de una manera ms eficaz. Como en el caso de la reaccin entre el Glutamato + piruvato que da como resultado alfa-cetoglutarato + alanina, esta reaccin esta catalizada por la gutamato: piruvato transmitasa (GPT) (E.C 2.6.1.2) que, como otras transmitasas, utiliza el piridoxal fosfato como coenzima. Hay coenzimas que no pueden ser sintetizados integramente en el cuerpo humano, sino que alguno de sus componentes o precursores debe ser incorporado a partir de la dieta. Estos precursores exgenos pertenecen al grupo de biomoleculas denominado vitaminas. La importancia de las coenzimas: Tiamina o Vit B1: Las funciones bioqumicas exigen su conversin en pirofosfato de tiamina, (TTP), molcula que sirve de coenzima en varias reacciones qumicas. Riboflavina o Vit B2: Es componente de 2 coenzimas relacionadas con el transporte de electrones en la cadena respiratoria. Acido pantotnico o Vit B5: Es parte de la llamada coenzima A. Participa en el metabolismo de cidos grasos, especialmente en el de los fragmentos de 2 tomos de Carbono que constituyen la acetil coenzima A. Piridoxina o Vit B6: Su importancia data en la conversin a piridoxal-5-fosfato (PALP) molcula que funciona como coenzima en numerosas reacciones bioqumicas casi todas relacionadas de alguna manera con los aminocidos. Interviene en el metabolismo de AAs y en la trasformacin de triptfano en cido nicotnico. Las coenzimas suelen alterarse durante la reaccin enzimtica, pero una vez acabada sta se regenera y vuelven a ser funcionales. Debe ser considerada de forma ms amplia: NAD (5-dicotinamida- adenina dinucletido) Presente en todos los organismos, se conoce tambin como coenzima II. Es al antioxidante ms eficaz conocido. Una de sus principales funciones es la produccin de energa en la clula. En cuanto ms NADH libre haya, mayor cantidad de energa puede producir la clula. Las principales funciones son: Aumenta la produccin de energa celular. Interviene en la regulacin celular y reparacin del DNA. Potenciar el sistema inmunitario.

Potentsimo antioxidante. Estimula biosntesis de dopamina, noradrenalina, adrenalina.

Las aplicaciones qumicas de NADH: Parkinson Alzheimer Sndrome de fatiga crnica Fatiga

CIDO LIPOICO Actan como coenzima, en varios procesos bioqumicos, uno de ellos el de gliclisis, que es el responsable de la conversin de azcar sanguneo en energa. Mejora la actividad del a mitocondria, organulo respiratorio y energtico de la clula. COENZIMA Q10 La coenzima Q10, en particular, ayuda a "fabricar energa", ya que si bien el cuerpo puede en teora conseguir todas las materias primas precisas para la obtencin de la citada energa ello no es suficiente si el mecanismo de transformacin no funciona correctamente. Sin la coenzima Q10 no se puede producir "la chispa" y por tanto la energa. Nuestro cuerpo obtiene la coenzima Q10 a travs de la dieta y por transformacin de otras coenzimas. La coenzima Q10 contenido en los alimentos es destruido fcilmente por los mtodos de procesamiento alimentario modernos. Adems nuestra capacidad de obtener coenzima Q10 disminuye durante el proceso del envejecimiento y sobre todo en situaciones de estrs continuo. En resumen las coenzimas sirve para: Actuar junto con las vitaminas, ya que stas son precursoras de las coenzimas. Sirve de sistemas orgnicos conjugados con una movilidad electrnica muy grande: sta es la razn esencial de que posean poder cataltico. La mayor parte de las coenzimas poseen uno o ms ncleos cclicos o heterocclicos, estos ncleos no son sintetizados por el organismo humano o animal, debiendo ser aportados en la dieta. Muchas coenzimas derivan de las vitaminas. La especificidad de reaccin propiamente dicha corresponde a las apoenzimas, que son las nicas capaces de dirigir la reaccin bioqumica en un sentido determinado. Mientras que las coenzimas son capaces de participar en reacciones diferentes segn la apoenzima a que se hallen unidos. Las coenzimas intervienen estequiomtricamente en la reaccin que catalizan.

4. Seale al menos 3 reacciones enzimticas que requieren coenzimas: Met a bo lismo d e l et an o l La metabolizacin consiste en 2 oxidaciones consecutivas; la enzima que interviene del etanol al acetaldehdo es el alcohol deshidrogenasa, y de acetaldehdo a in acetato es el acetaldehdo deshidrogenasa, los cuales requieren de cofactores: NAD + que es la forma oxidada y de NADH + H+ que es la forma reducida. Alcohol-deshidrogenasa CH3CH2OH NAD CH3-C=O NADH+H+ NAD H acetaldehdo deshidrogenasa CH3COONADH+H+

REACCIONES ENZIMTICAS QUE EMPLEAN LA TIAMINA PIROFOSFATO

Una difosfotransferasa de tiamina dependiente de ATP presente en cerebro e hgado, es la responsable de la conversin de la tiamina a su forma activa, el difosfato de tiamina (pirofosfato).

El difosfato de tiamina es una coenzima que interviene en las reacciones enzimticas en las que hay transferencia de una unidad de aldehdo activado. Existen dos clases de estas reacciones: 1.- Descarboxilacin oxidativa de -cetocidos (p.ej; -cetoglutarato, piruvato y los anlogos ceto de leucina, isoleucina y valina). 2.- Reacciones de la transcetolasa (p.ej; en la va del fosfato de pentosa). En su estructura presenta un anillo de pirimidina sustituido, unido por un grupo de metilo a un
anillo de tiazol tambin sustituido, unido a su vez a un grupo etilo al pirofosfato. La vitamina carece de pirofosfato.

En la re a ccin se t ra n sf ie re n lo s g rup o s a ld e h do de d os ca rb on o s a l p iro fo sf at o d e t ia min a (TP P ). (TP P e s e l st e r p irof o sf rico d e la vita min a B 1 )

El fosfato de piridoxal en la glucogenlisis: La coenzima es una parte integral de los mecanismos de accin de la fosforilasa, la enzima que cataliza la degradacin del glucgeno. En esta accin tambin forma una base de Sciff inicial con el grupo -amino de un residuo de lisina de la enzima. La cual permanece intacta durante el proceso de fosforolisis del enlace 1-4 glucosdico para formar glucosa 1-fosfato. La fosforilasa muscular puede representar de 70 a 80% de la vitamina B6 corporal total.

Transferencia de un grupo amino (NH 2) por transaminasas dependientes del fosfato de piridoxal (PirP). El smbolo P es una protena apoenzimtica a la cual est fija de modo covalente la coenzima PirP.

El fosfato de piridoxal es la coenzima de varias enzimas que participan en el metabolismo de los aminocidos.

A travs de la formacin de una base de Schiff entre su grupo aldehdo y el grupo amino de aminocido.

Enlaces covalentes de una -aminocido que pueden volverse reactivos al unirse a varias enzimas especficas para el fosfato de piridoxal. El fosfato piridoxal facilita algunos cambios en los tres enlaces restantes del carbn -amino, para permitir la transaminacin, la descarboxilacin, o la actividad de la treonina aldosa respectivamente. La funcin del fosfato de piridoxal en la transaminacin es:

Funcin de la coenzima fosfato de piridoxal en la transaminacin de un -aminocido. La primera fase implica la produccin de -cetocido correspondiente y la enzima fosfato de piridoxamina, seguida del proceso a la inversa, que utiliza un nuevo -cetocido como sustrato.el fosfato de piridoxal se une inicialmente a su apoenzima mediante una base de Schiff entre su grupo aldehdo y el grupo amino de la enzima y mediante un enlace inico entre su fosfato y la enzima. El grupo -amino de un aminocido sustrato desplaza el grupo -amino formando una nueva base de S.

5. Haga un esquema de las funciones de las vitaminas y que provocan sus deficiencias:

VITAMINAS

LIPOSOLUBLES

FUNCIONES

ENFERMEDADES CARENCIALES

A (Retinol)

Antioxidante, elimina radicales libres y protege al ADN de su accin mutgeno. La funcin principal es intervenir en la formacin y mantenimiento de la piel, membranas mucosas, dientes y huesos. Participa en la elaboracin de enzimas en el hgado y de hormonas sexuales y suprarrenales.

Antioxidante, elimina radicales libres y protege al ADN de su accin mutgeno. La funcin principal es intervenir en la formacin y mantenimiento de la piel, membranas mucosas, dientes y huesos. Participa en la elaboracin de enzimas en el hgado y de hormonas sexuales y suprarrenales.

D(Calciferol)

Es necesaria para la formacin normal y proteccin de los huesos y dientes contra los efectos del bajo consumo de calcio.

Malformaciones seas, caries dental, Raquitismo. En los adultos: osteoporosis, reblandecimiento seo u osteomalacia. Contribuye a la aparicin del cncer de mama, colon y prstata.

E(Tocoferol)

Antioxidante. Protege al pulmn contra la contaminacin. Retarda el envejecimiento celular. Tambin acelera la cicatrizacin. Previene los abortos espontneos y calambres en las piernas.

Distrofia muscular, prdida de la fertilidad y Anemia.

K (Antihemorrgica)

Participa en diferentes reacciones en el metabolismo, como coenzima, y tambin forma parte de una protena llamada protombina.

Lesin cerebral en los nios y anemia en algunos adultos. Alteraciones en la coagulacin de la sangre y Hemorragias difciles de detener.

VITAMINAS

HIDROSOLUBLES

FUNCIONES

ENFERMEDADES CARENCIALES

C (cido Ascrbico)

Crecimiento y reparacin de las encas, vasos, huesos y dientes, alergias, prevencin del resfriado comn.

Escorbuto: hinchamientos, hemorragias en las encas y cada de los dientes.

B1 (Tiamina)

Depresin, irritabilidad, prdida de memoria, prdida de concentracin.

Beriberi: se caracteriza por debilidad muscular, inflamacin del corazn

B2 (riboflavina)

Acta en el mantenimiento de las membranas mucosas.

Acta en el mantenimiento de las membranas mucosas.

B3 (Niacina)

Vasodilatador. Indispensable para la salud del cerebro y del sistema nervioso.

Pelagra: caracterizada por dermatitis, diarrea y demencia

B5 (cido Pantotnico)

Constituyente de la CoA. Para la biotransformacin y detoxificacin de las

sustancias txicas.

Falta de atencin, apata, alergias y bajo rendimiento energtico en general.

B6 (Piridoxina)

Mejora la capacidad de regeneracin del tejido nervioso. Ayuda a prevenir enfermedades nerviosas y de la piel. Transferencia de grupos carboxilo, para el crecimiento y funcionamiento de la piel y glndulas sexuales.

Depresin, alteraciones de la piel, grietas en la comisura de los labios, piedras en el rin.

B8 (Biotina)

Depresin, dolores musculares, anemia, dermatitis, alopecia y alteraciones en el crecimiento.

B9 (cido Flico)

Junto con la vitamina B12 participa en la sntesis del ADN. Previene lceras bucales y favorece el buen estado del cutis.

Debilidad, fatiga, irritabilidad, en los nios detenimiento del crecimiento, en adultos anemia, irritabilidad. Anemia perniciosa, psicosis, degeneracin nerviosa, desarreglos menstruales, lceras en la lengua y excesiva pigmentacin en las manos.

B12 (Cobalamina)

Necesaria para la formacin de nucleoprotenas, protenas, glbulos rojos. Funcionamiento del sistema nervioso.

6. Mtodos de valoracin de las vitaminas: La industria vitamnica avanza con gran rapidez debido a los descubrimientos mdicos sobre la importancia de las vitaminas, incluso algunos se atreven a decir que sern los suplementos vitamnicos el arma principal de la medicina para mantener una salud ptima y prevenir enfermedades crnicas. Debido a esto ha venido dndose una "fiebre vitamnica", a pesar de que muchas investigaciones pueden demorar dcadas para demostrar las afirmaciones que se vienen haciendo. Los elementos principales de la fiebre vitamnica vienen siendo principalmente los antioxidantes: vitamina C, E y los Beta Carotenos. El xito de los antioxidantes se debe a su efecto sobre los Radicales Libres capaz de provocar una reaccin en cadena y destruir clulas al desgastar sus membranas y afectar su material gentico. Los qumicos que estudian este proceso sostienen la hiptesis de que las vitaminas E y C y los Beta Carotenos pueden neutralizar los radicales libres amarrando sus electrones libres. De probarse cientficamente que los antioxidantes tienen capacidad para neutralizar los radicales libres surgira una posibilidad real para reducir la mortalidad por cncer. ANLISIS FISICO QUMICOS: Anlisis de composicin (Principios inmediatos, Vitaminas liposolubles e hidrosolubles, Caracterizacin de Azcares, Aminocidos, cidos Grasos (Saturados, Monoinsaturados, Poliinsaturados, Omega 3, Omega 6, EPA, DHA), Esteroles, entre otros.) Aditivos (Acidulantes, Antioxidantes, Conservantes, Colorantes sintticos y naturales, Edulcorantes) Contaminantes Txicos (Metales Pesados, Plaguicidas, Micotoxinas, Residuos de Antibiticos, Residuos Medicamentosos (Hormonas, Antibiticos, Beta-Agonistas) Alrgenos (Gluten, Histamina, Sulfitos) Factores antinutritivos (cido Cianhdrico, Teobromina, Gosipol, Glucosinolatos) Anlisis reolgicos en harinas. Metales y elementos esenciales. Caracterizaciones fsicas (Viscosidad, pH, color, Grados Brix.)

Desarrollo de nuevos mtodos.

P ARA DE TE RMI NAR LA VI TAMI NA B 1 Para la determinacin de la vitamina B 1 elaboramos una curva de calibracin se toman: 0,0, 1,5. 3,0 y 4,5 mL de solucin estndar patrn de vitamina B 1 (tiamina) en 4 matraces volumtricos de 50 mL respectivamente, a estos se aade solucin de KCl al 25% hasta completar 15 mL, luego se aaden 2 mL de solucin de HgCl 2 0,8%. La mezcla se agita, luego se aaden 8 mL de solucin de KOH 0.04 N y nuevamente la mezcla se agita muy bien. Los matraces se colocan en bao mara a 40 C durante 15 minutos luego se los deja enfriar y el contenido se diluye a 50 mL con acetona. Se verifican las longitudes de onda y se toman las lecturas de la fluorescencia para los estndares con los que se traza la curva de calibracin. P ARA DE TE RMI NAR RI BO FLAV I NA Se elabora una curva de calibracin con soluciones estndares de riboflavina que pueden ser de: 0,20; 0,50; 0,80, y 1,2 mg/L. las soluciones estndares se pueden preparar a partir de soluciones patrn de 10 mg/L y en un volumen mximo de 25 mL. Con los datos de la fluorescencia se traza la curva y en base a esta se determina la concentracin de una muestra incgnita. En este caso es necesario establecer las respectivas longitudes de onda de excitacin y emisin. DETERMINACIN DEL CIDO ASCRBICO USANDO 2,6 DICLOROFENOLINDOFENOL Para soluciones incoloras. En un tubo resistente al calor se pipetea 5 mL de jugo de fruta diluido que contenga aproximadamente 0.1 mg de vitamina C, agregue 1 mL de cido actico glacial y titule con la solucin del colorante hasta tener un color rosa. Repita la titulacin usando para el blanco 5 mL de agua (Bl) y 5 mL de solucin patrn de cido ascrbico (Pt) y calcule el contenido de vitamina C en la muestra:

Para soluciones coloreadas. Es difcil ver el punto final cuando la muestra es muy coloreada, por lo tanto, debe agregarse cloroformo a la muestra de reaccin y el punto final se logra cuando se obtiene un color rosa estable en la orgnica. La .muestra y el blanco se tratan en forma idntica y el contenido de vitamina C se calcula como se indic anteriormente. DETERMINACIN DE VITAMINA C EMPLEANDO EL MTODO DE TILLMANS TITULACIN DE LA SOLUCIN DE DI Se pipetea 0,2 mL de la solucin patrn de AA a un erlenmeyer de 250 mL conteniendo 10-20 mL de cido oxlico al 2% y valorar con la disolucin de DI hasta que aparezca claramente una coloracin rosa, que debe permanecer de 10 a 15 segundos. Para establecer el titulo del DI debe repetirse la titulacin al menos tres veces y debe compararse con un blanco. PREPARACIN DE LA MUESTRA La cantidad de muestra utilizada en la titulacin deber escogerse de tal manera que la cantidad de AA contenida en ella sea como mximo 0.5 mg. Los zumos (de frutas y verduras) se diluyen hasta el volumen deseado con la disolucin de cido oxlico y se filtran si es necesario. El resto de alimentos slidos conteniendo vitamina C se disuelven en cido oxlico, se mezclan con cido actico o con los reactivos CARREZ I y II para precipitar las protenas y se filtran. Los mtodos de valoracin de VIT. A Saponificacin: Eliminar la interferencia de la materia grasa.

Se realiza con hidrxido de sodio en solucin al 50%. La extraccin se efecta por medio de ter etlico, se adiciona un antioxidante. Si se est trabajando con muestras de alimento es

necesario purificar los extractos utilizando cromatografa semipreparativa para concentrar el extracto. La purificacin se lleva a cabo por cromatografa en fase reversa, utilizando metanol-agua como fase mvil, o en fase normal. La deteccin se realiza a 264 nm. Extraccin Separacin cromatogrfica en columna de albmina Determinacin cuantitativa de Vitamina A por espectrometra y por colorimetra

MTODOS CROMATOGRFICOS En un principio, se trabaj con cromatografa de papel, capa fina y de gases y no resultaron adecuados porque se presentan problemas: por ejemplo, la vitamina A se degrada al exponerla a la atmsfera o bien a altas temperaturas. La cromatografa en capa fina se utiliz hasta que se demostr que se produce la formacin de ismeros de esta vitamina. Las muestras se someten al proceso de saponificacin con una solucin acuosa de hidrxido de potasio y un volumen definido de etanol. La extraccin se realiza por medio de ter de petrleo. Se hace un cambio de solvente y se redisuelve en n-hexano; la concentracin del estndar de trabajo es de 10 a 50 UI/ml. La cuantificacin se lleva a cabo por cromatografa de lquidos de alta resolucin, fase normal o fase inversa, con deteccin por fluorescencia o ultravioleta, a 325 nm como longitud de excitacin y 489 nm como longitud de emisin. Los tiempos de retencin son del orden de 6 minutos. La variacin permitida en el mtodo es del 50% cuando se trata de alimentos terminados, 20% para premezclas y 10% para concentrados vitamnicos. Esto da idea de la dificultad de la cuantificacin. Si la determinacin de la vitamina A es relativamente difcil, la cuantificacin de la vitamina D 3 encierra mayores problemas. El peso de la muestra depende del nivel esperado. Si el contenido declarado es de 1,000 a 10,000 UI/kg se pesarn 20 g, entre 10,000 a 50,000 UI/kg se ocupan 10 g y cuando el valor terico es mayor a 50,000 UI/kg la cantidad de muestra es de 5 g. El anlisis de la vitamina E presenta la tendencia a ser cuantificado por medio de la tcnica de HPLC, con saponificacin previa. La extraccin se realiza con ter de petrleo, la deteccin se efecta a 286 nm. La vitamina E se determina como DL--tocoferol y se calcula como acetato de DL--tocoferol. Uno de los procedimiento reportados por Hofmann-La Roche se fundamenta en la extraccin de la vitamina por medio de HCl 0.01 mol/l a 65C, en etanol, utilizando una cubeta de ultrasonido. En una alcuota de este extracto se realiza el proceso de particin con hexano y se eliminan impurezas solubles en agua, se somete a centrifugacin y de la fase orgnica se obtiene una alcuota que se inyecta al sistema de cromatografa, cuando se trabaja en fase normal o realiza un cambio de solvente en el caso de que se utilice fase reversa. La longitud de onda de deteccin es de 285 nm. La corrida cromatogrfica se realiza en cerca de 16 minutos. En este procedimiento se considera que la variacin de resultados del orden de 6%. Para la vitamina K en premezclas y alimentos terminados, en todos los casos se cuantifica el contenido de menadiona; el anlisis se realiza por cromatografa en fase normal, la deteccin se realiza a 251 nm. TECNICAS DE ANLISIS: Para la realizacin se dispone de las siguientes tcnicas: Cromatografa de Gases Cromatografa Lquida Espectrofotometra de Absorcin Atmica Espectrofotometra de Infrarrojos

 Espectrofotometra Ultravioleta- Visible Resonancia Magntica Nuclear Cromatografa capa fina Inmunoensayo (ELISA)

ANLISIS MICROBIOLGICO El laboratorio de ensayos realiza determinaciones microbiolgicas basadas en los mtodos oficiales y/o recomendados. Recuentos o investigaciones de la prctica totalidad de microorganismos y grupos microbianos de inters. Asesoramiento en manipulaciones y procesos, para evitar las causas de aparicin de grmenes. Estudios de caducidad y esterilidad.

BIBLIOGRAFA: VARGAS, Julio Csar,, GUTIERREZ, Lilia,, Qumica. Edicin. 11., pp: 285-294 El Manual Merck novena edicin. Grupo Editorial OCEANO/CENTRUM Pginas 1074 a 1091. MACARULLA., Jos., GOI, Flix. Bioqumica Humana. 1985. Editorial REVERTE S.A. Barcelona. Pp: 179, 192,193. CEDIEL, Ricardo. CASASBUENAS, Jaime. CEDIEL, Juanita. GORZALES, Edgar. Medicina interna del sintoma a la efermedad. 1998. Quinta edicin. Editorial CELSUS. Colombia. Pp: 472, 478, 484. BOHINSKI, RC. 1991. Bioqumica. Quinta edicin. Addison Wesley Iberoamericana. EUA. 739p MURRAY, R. y otros. 2001. Bioqumica de Harper. 15a edicin. Manual Moderno. Mxico. 1041p www.rincondelvago.com www.um.es/~molecula/vita.htm http://www.ob-center.com/coenzima.htm http://www.arrakis.es/~lluengo/enzimas.html http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=1224 http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=1224

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