MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente BIOTECNOLOGIA

Objetivos:

Laboratorio de enzimas

Definir qu es una enzima y cmo estas actan en reacciones dentro de la clula. Identificar diferentes factores que pueden afectar la actividad enzimtica. Diferenciar entre inhibicin competitiva y no-competitiva. !"I#$ n su mayor%a prote%nas o &!$ 'riboenzimas( )atalizadores qu%micos que a*ilizan una reaccin qu%mica formacin o rompimiento de enlaces qu%micos $l finalizar la reaccin la enzima se libera y queda disponible para otra reaccin !o se consumen en las reacciones y no se alteran +ueden ser reusadas y no se necesitan en *randes cantidades $ctan sobre un sustrato formando un comple,o enzima-sustrato al unirse en un lu*ar espec%fico del sustrato el sitio activo de la enzima Las enzimas son selectivas- pocas molculas pueden interactuar con el sitio activo y formar el comple,o

& $))I.! ).! !"I#$

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

REACCION CON O SIN ENZIMA

Cuando se forma esta interaccin baja la energa de activacin necesaria ara oder llevar a cabo la reaccin!

Energa de activacin

Sin enzima Con enzima

Curso de la reaccin

ENZIMAS EN UNA REACCIN.

"uncionan mejor bajo condiciones es ecficas #optimas) $ue inclu%en Tem eratura & Los cambios ueden alterar el desem e'o de la en(ima) desactivarla o destruirla Algunas en(imas necesitan activadores ara oder formar el com lejo en(ima*sustrato COFACTOR E INHIBIDORES Activadores #cofactores+* cambia la forma de la en(ima ara formar el com lejo en(ima*sustrato ueden ser iones met,licos de origen org,nico se llaman coen(imas In-ibidores* im iden la actividad de la en(ima) uede ser de dos formas blo$uea el sitio activo* com etitiva

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

altera la forma del sitio activo eg,ndose a la en(ima en otro lugar % cambia la forma de la en(ima* no com etitiva

INHIBICIN COMPETITIVA

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

INHIBICION NO COMPETITIVA

CATALASA se encuentra en casi todas las clulas aerbicas acta rompiendo el perxido de hidrgeno en a*ua y o/%*eno que se produce en las clulas 010.0
PROCEDIMIENTO .!

010. 2.0

M"te#i"$es:

Los estudiantes del curso deber traer. P"%"s H&'"(o Es%i ")". Set"s.

/re aracin de -omogenados

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

0! /ara re arar el -omogenado) a artir de eda(os de a a) -gado) % es inaca or se arado en una licuadora o mortero % moler con un oco de agua -asta diluir arte de la muestra! 1! /oner cada -omogenado en un tubo de ensa%o!

2! Con gotero) onga 3 gotas de cada -omogenado en las fosas de la laca de orcelana4 a'ada 2 gotas de er5ido de -idrgeno a cada muestra! 6! Observe % anote los resultados en la siguiente tabla 3abla 4.5 &esultados homo*enado con per/ido de hidr*eno &eaccin al a6adir *otas del per/ido

1omo*enado Agua Papas Hgado Espinaca

a! b! c! d!

78u9 ocurri al a'adir el er5ido: 7Ocurri lo mismo ara todas las muestras: 7/or $u9 se forman las burbujas: 78u9 otros organismos se odran robar:

+&.) DI#I !3. n.0 5. Identifi$ue 3 tubos de ensa%o!

1! /onga 2 mL de cada -omogenado en los tubos como sigue. A * &gado

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

B* C* <* E* 2! 6! 3! =

/a a ;etas Es inaca Agua &aga una marca -asta donde llega cada -omogenado! /onga 2 mL de er5ido de -idrgeno en cada tubo de ensa%o! Observe la reaccin or tubo % mar$ue el cambio en l$uido! Tabule los resultados en la Tabla siguiente tabla >esultados -omogenado con er5ido de -idrgeno Cantidad de burbujas 7Cu,nto -omogenado se consumi:

Tabla 1 Tubo

a! b! c!

78u9 organismos rodujo m,s gas: 78u9 gas se est, roduciendo: 78u9 sugiere la evidencia o los resultados de los e5 erimentos reali(ados: 7Contienen catalasa:

EFECTO DE LA TEMPERATURA Influ%e en la actividad! El unto timo re resenta el m,5imo de actividad! A tem eraturas bajas) las en(imas se -allan ?mu% rgidas? % cuando se su era un valor considerable la actividad cae bruscamente or$ue) como rotena) la en(ima se desnaturali(a />OCE<I@IENTO n!2 0! 1! 2! >otular 3 tubos de ensa%o) % calentar ba'o de &1A -asta BACC) % otro -asta 2DCC! A'adir 3 mL de -gado -omogenado a cada uno! Colocar los tubos en las siguientes condiciones.

Tubo 0 E BACC # oner tubo or 3 minutos+ Tubo 1 E 2DCC # oner tubo or 3 minutos+

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

Tubo 2 E Tem eratura ambiental Tubo 6 E En -ielo #dejar or 2A minutos+ Tubo 3 E En congelador F 6CC #dejar or 2A minutos+ 6! 3! =! D! A'ada 1 mL de er5ido al tubo 0! Observe los resultados % el tiem o $ue tarda en roducirse las burbujas! Tome el tiem o inicial al a'adir el er5ido % el tiem o cuando em iece a roducirse las burbujas! >e etir con los dem,s tubos! Grafi$ue sus resultados #tiem o de reaccin vs! tem eratura+ en la siguiente Tabla

EFECTO DE PH Todas las en(imas resentan un & timo de actividad! El & uede afectar de varias maneras. El centro activo uede contener amino,cidos con gru os ioni(ados $ue ueden variar con el &! El sustrato uede verse afectado or las variaciones del &! Algunas en(imas resentan variaciones eculiares! La e sina del estmago) resenta un timo a &E1) % la fosfatasa alcalina del intestino un &E 01 />OCE<I@IENTO n!6 0! >otular 2 tubos de ensa%o A G C! 1! A'ada 0 cm de -omogenado de -gado a cada tubo! 2! A'ada 2 cm de &CL 2@ al tubo A 6! A'ada 2 cm de NaO& 2@ al tubo B 3! A'ada 2 cm de agua al tubo C agite suavemente -asta me(clar =! A'ada 2 cm de er5ido de -idrgeno a cada tubo! D! Observe % anote las reacciones

EFECTO DE T * PH

MINISTERIO DE EDUCACIN NACIONAL

UNIVERSIDAD DE LA AMAZONIA
NIT. 891.190.346-1 Flore !"#-C#$%e&'-Colo()"# *RO+RAMA DE IN+ENIERIA DE ALIMENTOS

198,-,00-

Bact. Paola A. Garca Rincn Docente

/>EGHNTA; 7Cu,l es la relacin entre el & % la actividad en(im,tica: Las en(imas del estmago funcionan mejor con un & de 1! 7Cmo afectara un & de 6 en el estmago a la digestin: 7<e $u9 otras maneras se le ocurrira se odra robar el funcionamiento o no funcionamiento de las en(imas estudiadas en el laboratorio: 7/uede mencionar ejem los de otras en(imas $ue actIen en nuestro cuer o: 78u9 efecto odra tener una fiebre alta rolongada sobre el funcionamiento de las en(imas: 7/uede mencionar alguna condicin m9dica $ue se deba al malfuncionamiento o no funcionamiento de una en(ima: 78u9 sucede cuando se one er5ido de -idrgeno en una -erida: 78u9 sugiere la evidencia: E5 li$ue or$ue tantas es ecies roducen la en(ima catalasa! 7En $u9 otras maneras las en(imas son im ortantes ara nosotros: @encione ejem los de cosas en nuestro diario vivir $ue envuelven algIn uso de en(imas