ANLISIS ESPECTROSCPICO ULTRAVIOLETA-VISIBLE

INTRODUCCIN El presente trabajo, recopila los conceptos tericos fundamentales de la

espectroscopa, desde el comportamiento de la radiacin electromagntica hasta los procesos de absorcin por parte de las sustancias, as como tambin los instrumentos y tcnicas aplicadas. Con relacin a las aplicaciones, se vincula la Espectroscopa UV V con la Cintica !umica para las reacciones de orden cero, orden uno y orden dos, as como tambin se aplican las reglas de "ood#ard$%offman las cuales sirven de referencia para identificar, y predecir la longitud de onda de m&'ima absorcin en muchos compuestos (ue permiten su posterior identificacin. )odo lo anterior est& respaldado por ilustraciones y tablas (ue permiten una visin m&s completa y agradable sobre los diferentes tpicos tratados. FUNDAMENTOS TERICOS Una de las herramientas m&s poderosas en el an&lisis (umico lo constituye la Espectroscopa. *a misma se fundamenta en la radiacin electromagntica emitida o absorbida por las sustancias, por lo (ue el estudio del comportamiento de las radiaciones sirve como base para ste tipo de an&lisis. *a radiacin electromagntica es una forma de energa (ue se puede describir en funcin de sus propiedades ondulatorias. *as ondas electromagnticas se despla+an a velocidades muy grandes y no e'igen la presencia de ning,n medio de soporte para su propagacin, es decir, la onda resulta ser un medio de transmisin de energa a distancia. Esta transferencia de energa se llama radiacin electromagntica por(ue las ondas se pueden producir por electricidad y por magnetismo. *as propiedades de una onda son - longitud de onda .l/, frecuencia .n/, amplitud .0/ , n,mero de ondas .n/. 1i se conoce la frecuencia y la longitud de onda, el producto de ambas magnitudes debe dar la distancia (ue recorre la onda en la unidad de tiempo y representa la velocidad de la radiacin (ue se representa como - C 2 l 3 n 2 4 35656 cm s.

El espectro de la radiacin electromagntica cubre un inmenso campo de longitudes de onda. En algunas de sus interacciones con la materia puede demostrarse (ue la radiacin se comporta como si estuviera constituida por pa(uetes discretos de energa, denominados fotones. *a energa de un fotn es variable y depende de la frecuencia o de la longitud de onda de la radiacin. *a relacin (ue e'iste entre la energa de un fotn .E/ y su frecuencia viene dada por - E 2 h 3n, donde h es la constante de 7lanc8 con un valor de 9,94.56$4: ;.s. *a radiacin electromagntica presenta una dualidad de propiedades, los fenmenos de refraccin y de difraccin, por ejemplo, se e'plican mejor asignando a a(uellos propiedades de las ondas. 7or el contrario, en su interaccin con la materia, el comportamiento de la radiacin se describe mejor asign&ndole propiedades corpusculares, siendo la energa de los corp,sculos .cuantos/ igual a hn. PROCESO DE ABSORCIN Cuando a travs de un l(uido se hace pasar un ha+ de lu+ blanca, parte de la radiacin es absorbida por la muestra, la lu+ transmitida puede colorearse si alg,n componente presente en la muestra puede absorber a distintos niveles longitudes de ondas diferentes de la lu+. 0s, la absorcin selectiva de la radiacin electromagntica al atravesar una solucin, da lugar a (ue el rayo emergente difiera del incidente. En el caso de la radiacin visible, por ejemplo, cuando un rayo de lu+ blanca visto a travs de una disolucin acuosa de Cu1< : .sulfato c,prico/ aparece a+ul, es por(ue los iones Cu=> interact,an, absorbiendo los componentes rojos del rayo, mientras (ue transmite completamente la parte a+ul de la radiacin. Cuando un &tomo, in o molcula absorbe un fotn, la energa (ue recibe da como resultado una alteracin de su estado? se dice entonces (ue la especie en cuestin est& e'citada. *a e'citacin puede consistir en algunos de los siguientes procesos5. =. )ransicin de un electrn a un nivel energtico superior. Cambio en el modo de vibracin de la molcula.

4. 0lteracin en su modo de rotacin.

Cada una de stas transiciones re(uiere una cantidad definida de energa? la probabilidad de (ue ocurra una transicin particular dada es m&'ima cuando el fotn absorbido proporciona e'actamente la cantidad de energa necesaria para la misma. *a cantidad de energa implicada en cada uno de los tipos de transiciones indicadas vara entre ellas. En general, las transiciones (ue promueven electrones a niveles superiores consumen cantidad de energa mayores (ue la (ue se precisa para provocar cambios vibracionales y stas a su ve+ mayores (ue las (ue producen alteraciones en los modos rotacionales *a absorcin de la radiacin por los sistemas suele describirse por medio de la representacin gr&fica de dicha absorcin en funcin de la longitud de onda, dicha representacin recibe el nombre de espectro de absorcin. *a cantidad de energa necesaria para los diversos procesos responsables de la absorcin son bien definidos y caractersticos de cada especie (umica, por lo tanto, su espectro de absorcin es definido y caracterstico, esto constituye la base para la identificacin cualitativa de las diferentes especies (umicas. )ambin el empleo de absorcin de la radiacin, sirve para la determinacin cuantitativa de los sistemas (umicos, la ley de @eer$*ambert permite sistemati+ar estas determinaciones cuantitativas. LEY DE BEER-LAMBERT A*a fraccin de la lu+ incidente (ue es absorbida por una muestra, es proporcional al n,mero de molculas encontradas en su caminoA Cuando un ha+ de radiacin monocrom&tica atraviesa una solucin (ue contiene una especie absorbente, la energa radiante del ha+ se reduce progresivamente como consecuencia de la absorcin de la energa por parte de las partculas de dicha especie (umica. *a disminucin de la energa depende de la concentracin de la sustancia responsable de la absorcin .cromforo/, as como de la longitud del recorrido del ha+ a travs de la solucin. *a ley de @eer$*ambert e'presa cuantitativamente estas relaciones como-

log 7o 7 2 0 y 0 2 e3b3c 7o 2 intensidad de la radiacin (ue incide sobre una superficie por unidad de tiempo 7 2 intensidad del ha+ despus de atravesar una capa de dicha solucin de b cm de espesor 7o es mayor (ue 7. e 2 absortividad molar o coeficiente de absorcin molar 0 2 absorbancia b 2 concentracin en mol * El cumplimiento de la ley de @eer$ *ambert re(uiere (ue la muestra en estudio no posea actividad ptica .tiene elemento de simetra (ue anula la absorcin de la radiacin/. *a ecuacin de @eer$*ambert no es directamente aplicable al an&lisis (umico, debido a (ue 7o y 7 tal como han sido definidos no se pueden medir f&cilmente en el laboratorio. *a ra+n primordial, es (ue la solucin a estudiar debe estar contenida en un recipiente y el ha+ de radiacin interact,a con las paredes del recipiente, dando lugar a una prdida de intensidad en cada interfase como consecuencia de la refle'in y posiblemente de la absorcin. 7ara aplicar e'perimentalmente la ley de @eer$*ambert hay (ue proceder a la correccin de stos efectos. Esto se consigue comparando la intensidad del ha+ transmitido por la solucin en estudio con la intensidad (ue atraviesa una cubeta idntica (ue contenga solo al disolvente de la muestra. 1e calcula as la absorcin e'perimental (ue se apro'ima mucho a la absorcin verdadera de la solucin0 2 log 7o .disolvente/ 7 .solucin/ 2 log 7o 7 BASES PARA APLICAR LAS REGLAS DE WOODWARD-HOFFMAN *a absorcin de radiaciones UV o Visible proviene de la e'citacin de los electrones enla+antes y como consecuencia, las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos de enlaces (ue e'isten en las especies en estudio. *a Espectroscopa de absorcin molecular es por tanto valiosa para la identificacin de los grupos funcionales de una molcula. 1in embargo, son m&s importantes las aplicaciones de la Espectroscopa de 0bsorcin UV y Visible en la determinacin cuantitativa de compuestos (ue contienen grupos absorbentes. *as especies absorbentes de acuerdo a *as transiciones electrnicas, se clasifican en- a/ electrones p, s y n b/ electrones d y f c/ electrones de transferencia de carga. *as

especies absorbentes tienen m&'imos de absorcin .lma'/ (ue permite su identificacin. Estos m&'imos de absorcin sirven tan solo como una gua apro'imada para la identificacin de los grupos funcionales, debido a (ue las posiciones de los m&'imos se ven tambin afectados por el disolvente y por los detalles estructurales de la molcula (ue contiene los cromforos. 0 pesar de (ue no permite una identificacin ine(uvoca de un compuesto, el espectro de absorcin UV V, es sin embargo, ,til para detectar la presencia de ciertos grupos funcionales (ue act,an como cromforos. 7or ejemplo, una banda dbil de absorcin en la regin =B6 a =C6 nm, (ue se despla+a hacia longitudes de onda m&s cortas cuando la polaridad del disolvente aumenta, indica firmemente la presencia de un grupo carbonilo.

APLICACIONES DE LA ESPECTROSCOPA UV/V. 1. 1irve para identificar tanto especies org&nicas como inorg&nicas. 2. 1e pueden identificar especies no absorbentes hacindolas reaccionar selectivamente con sustancias (umicas dando productos (ue absorben fuertemente en las regiones UV V. 3. Combinando ciertos aspectos de la Cintica !umica .ecuaciones de orden cero, orden uno y orden dos por ejemplo/ con la ley de @eer$*ambert permite mediante el trabajo analtico, predecir el tiempo de vida media y el tiempo al C6D de los sustancias (umicas. 4. Con las reglas de "ood#ard$%offman permite predecir la longitud de onda m&'ima de absorcin .pico/ en muchos compuestos

INSTRUMENTOS PARA EL ANLISIS UV/V *os instrumentos usados para el an&lisis espectroscpico en general, tienen como partes fundamentalesa/ Euentes de la radiacin .foco estable de energa radiante/ b/ Fonocromador .prisma o redes de difraccin/ c/ Gecipientes transparentes para contener la muestra y el disolvente. d/ Hetector de la radiacin (ue mide la seIal de salida del instrumento

Los componentes espectrofotomtricos m&s importantes se pueden observar en el siguiente dibujo, y a continuacin los describiremos agrup&ndolos en tres partes fundamentales-

Euente de lu+ Fonocromador Eotodetectores

Fuen e !e "u# La fuente de lu+ ilumina la muestra. *as condiciones necesarias de la fuente son e$ %&'"'!%!, !'(e))'*n%&'"'!%!, !'$ ('&u)'+n !e ene(,-% e$.e) (%" )*n 'nu% y "%(,%

/'!%. *as fuentes empleadas en los espectrofotmetros son l&mparas de tungsteno de bajo voltaje, l&mpara tungsteno$halgena o l&mpara de pulso arco de 'enn. *a "01.%(% !e un,$ en* tiene una potencia de salida uniforme y la salida de lu+ puede controlarse mediante la energa suministrada al foco. Una bombilla pe(ueIa de filamento enrollado es apropiada para concentrar el flujo de lu+ en un ha+ intenso. Cuando la l&mpara de tungsteno$halgena funciona con corriente constante, la fuente tiene un alto grado de estabilidad y larga vida. *a l&mpara de arco de 'enn tiene una distribucin de energa espectral pr'ima a la iluminacin del da. Es probable (ue las muestras te'tiles e'perimenten un cambio de color debido a la frecuente e'posicin a un potente ha+. *a nueva tecnologa ha proporcionado un tubo de destellos de 'enn (ue proporciona un flash de lu+ de unos nanosegundos de duracin. Esto elimina el calentamiento y la prdida de color de las muestras. M*n*)(*1%!*( Constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin. El monocromador asla las radiaciones de las longitudes de onda deseadas a partir de las radiaciones heterocrom&ticas (ue inciden o se reflejan desde el objeto. Ren!'2% !e en (%!%- 1irve como una fuente para el monocromador. Es un rect&ngulo largo y estrecho (ue proporciona una mayor resolucin de la longitud de onda de la energa dispersada, y su longitud permite tener suficiente energa en el sistema como para producir una seIal manejable posteriormente. Ren!'2% !e $%"'!%- Hetermina la banda de paso en trminos de la longitud de onda de la energa (ue alcan+a el detector de la muestra. C*"'1%!*(- 7ermite dirigir los rayos (ue emanan de la rendija de entrada de forma (ue los rayos provenientes de todas las posiciones de la rendija llegan

al elemento de dispersin con el mismo &ngulo. El segundo colimador forma una imagen de la rendija de entrada, despus de (ue ha sido dispersada como funcin de la longitud de onda, en la rendija de salida. E"e1en * !e !'$.e($'+n- Es la parte m&s importante del monocromador. En los monocromadores convencionales se utili+a el (e -)u"* .rejilla/ o el .('$1% como elemento de dispersin de la lu+ y se selecciona la longitud de onda deseada a travs de una rendija estrecha. *a distribucin ptica simple (ue utili+a un prisma como elemento de dispersin aparece en la siguiente figura-

*a longitud de onda re(uerida en las radiaciones puede obtenerse, bien girando los elementos de dispersin, o bien moviendo la rendija situada en el plano focal del espectro. *a anchura de banda de las radiaciones monocrom&ticas se decide a partir de la anchura de la rendija. *a dispersin del prisma vara con las longitudes de onda. 7or esa ra+n, la anchura de banda de las radiaciones monocrom&ticas, obtenidas con una anchura de rendija de salida constante, varan con la longitud de onda. En la pr&ctica, los monocromadores de prisma se consideran obsoletos.

*os monocromadores (ue emplean un retculo como elemento de dispersin son superiores a los monocromadores (ue emplean un prisma. *a capacidad de dispersin del retculo es independiente de la longitud de onda. *as mejoras en el mtodo de decisin y el desarrollo de los mtodos para reali+ar rplicas a partir de un retculo maestro han dado como resultado un uso m&s e'tendido del monocromador de retculo. *os monocromadores de prisma y retculo dan unas radiaciones monocrom&ticas (ue presentan longitudes de onda de variacin continua. El instrumental para medir el color precisa de longitudes de onda seleccionadas. Esto conduce al empleo del monocromador de filtro. Hicho monocromador est& e(uipado con 59 o 45 filtros de interferencia para seleccionar las radiaciones de las longitudes de onda deseadas a partir del ha+ de lu+ heterocrom&tico. *os sensores pticos (ue utili+an dichos monocromadores se denominan e$.e) (*3* +1e (*$ )*1.%) *$. *os instrumentos de la presente generacin utili+an tambin un elemento de dispersin poco convencional como es el 3'" (* !e /%('%)'+n )*n 'nu% 4CVF5, para reducir el coste y el tamaIo del instrumento. *a ,nica desventaja es su anchura de banda, mayor (ue la de un monocromador convencional. 1u anchura de banda vara desde 56 nm en la regin del a+ul hasta 5B nm en la regin roja del espectro visible. *os monocromadores CVF son pr&cticos y ofrecen un resultado mejor (ue los filtros de interferencia separados utili+ados en los e$.e) (*3* +1e (*$ )*1.%) *$ de los instrumentos de la generacin anterior. El manejo de los instrumentos de la actual generacin en modo compacto, digamos a intervalos de 56 nm o =6 nm, est& determinado por el soft#are del ordenador pero no limitado por los hard#ares del instrumento. F* *!e e) *(e$ Los fotodetectores se utili+an para )*n/e( '( "% $e6%" "u1'n*$% en $e6%" e"7) (')% , y as transmitir informaciones al procesador de seIal. El fotodetector puede ser de fotoclula, fotomultiplicador o de detectores de estado slido.

*os instrumentos de la generacin actual emplean generalmente !e e) *(e$ !e e$ %!* $+"'!*, tipo fotodiodo de silicio, (ue dan un resultado mejor (ue el detector convencional. En los instrumentos modernos est& dispuesta una serie de 59 de dichos detectores para percibir la seIal de manera simult&nea en las 59 longitudes de onda (ue cubren por completo la regin visible. Esto reduce el tiempo de registro, as como minimi+a las partes mviles de los instrumentos.

CONCLUSIONES
1. *a Espectroscopa en general, representa una de las herramientas analticas m&s importantes en el trabajo de rutina en los laboratorios. 2. *a regin UV es importante para la determinacin cuantitativa de muchos compuestos org&nicos. 3. *a absorciometra en la regin Visible, proporciona medios para la determinacin cuantitativa de cantidades muy pe(ueIas o tra+as de la mayor parte de los compuestos inorg&nicos. 4. *a preparacin de muestras muy diluidas, se deben hacer por diluciones sucesivas a partir de soluciones concentradas para disminuir el porcentaje de error en dicha preparacin. 5. El disolvente no debe presentar absorcin en la misma +ona de absorcin del soluto, y debe ser de alta pure+a y disolver por completo al soluto. 6. 1e debe comparar la valide+ de la ley de @eer$*ambert para el disolvente empleado y en el intervalo completo de concentraciones en el (ue se va a trabajar. 7. *a absorcin UV V proviene de la e'citacin de los electrones enla+antes, y como consecuencia las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos de enlaces (ue e'isten en las especies en estudio. @as&ndose en lo anterior es (ue funcionan *as reglas de "ood#ard$%offman.

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