OBJETIVOS DE LA ESTERILIZACIN: No se puede hablar de esterilizacin sin considerar el concepto de microorganismo.

Un microorganismo es un agente microscpico vivo e imperceptible a los sentidos que generalmente est agrupado en colonias, aunque bien puede estar como una unidad formadora de colonias (U.F.C.), la que se desarrolla en un medio apropiado para formar colonias perceptibles. Los microorganismos pueden ser patgenos (productores de ciertas enfermedades) o banales (los habitualmente hallados en los alimentos, el aire, el polvillo ambiental, que no perjudican al hombre. El hecho de que existan distintos tipos de grmenes en el medio ambiente, crea grandes dificultades en los estudios bacteriolgicos, cuando es necesario obtener las especies microbianas en estado de pureza, ya que tanto el instrumental como los medios de cultivo son invadidos con suma facilidad por los microbios del medio ambiente. Con el fin de subsanar stos inconvenientes se practica la esterilizacin, procedimiento que consiste en destruir todos los grmenes vivos que existan sobre los objetos o sustancias que se desean libre de ellos (aspticos). Los Microorganismos pueden clasificarse en criorresistentes, que son los resistentes al fro y termorresistentes o resistentes a las altas temperaturas, aunque la clasificacin ms comn es por la temperatura a la que se reproducen. As se los puede clasificar en Crifilos (-5 a 14 C); Mesfilos (25 a 47 C) y Termfilos (50 hasta 113 C). Por ejemplo, muchos hongos se destruyen con la temperatura, pero sus esporas an son viables y cuando encuentran un medio apropiado, rico en nutrientes y humedad, se reproducen. Por tal motivo la tecnologa para su destruccin debe considerar stas variables. LA ESTERILIZACIN Esta operacin comprende todos los procedimientos fsicos, mecnicos y qumicos, que se emplean para destruir, inactivar o retener grmenes en general y patgenos en particular. A travs de esta, los materiales de laboratorio para determinados diagnsticos y los elementos quirrgicos y la piel del enfermo alcanzan un estado de desinfeccin que evita la contaminacin operatoria. CAPTULO 2 2. MTODOS FSICOS: Calor La utilizacin de este mtodo y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposicin y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor. El calor provoca desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos. 2.1 Fuego Directo: Este procedimiento consiste en exponer a la llama de un mechero de Bunsen el objeto que se desea esterilizar. Cuando ste es de metal se deja permanecer en el rea de reduccin de la llama hasta que se ponga al rojo (asas de cultivo; algunas agujas, etc) . Si es de vidrio se deja un tiempo prudencial, procurando que la llama llegue a todos lados. Antes de utilizar el objeto esterilizado es necesario dejarlo enfriar en un sitio asptico. Este procedimiento tiene limitaciones debido a que deteriora los objetos y si son de gran volumen, la esterilizacin nunca es perfecta. 2.2 Calor Seco: El calor seco produce desecacin de la clula, esto es txico por niveles elevados de electrolitos y fusin de membranas, residuos que quedan adheridos al objeto estril. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que estn en contacto con stos. An as se sigue utilizando el calor seco en todos los laboratorios para la esterilizacin de placas de petri y pipeteros (recipientes metlicos para alojar pipetas para la siembra de sustancias lquidas).

La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos componentes o nutrientes de los microorganismos, requiere mayor temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del medio es baja. 2.3 Estufas: Para esterilizar por intermedio del aire caliente es necesario colocar los objetos en aparatos especiales llamados ESTUFAS. Y llevar el aire interior a una temperatura entre 150 y 190 C. Uno de los primeros aparatos utilizados para este fin fu el horno de Pasteur, que luego se sustituy por estufas de aire caliente. Estas constan de una doble cmara, el aire caliente generado por una resistencia elctrica circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cmaras, a temperaturas vatriables, siendo la ms aconsejadas 170 C para el instrumental metlico y a 140 C para el contenido de los tambores. Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de metal denominados de par bimetlico, consistente en dos metales de distinto coeficiente de dilatacin. Cuando uno se dilata, el otro no lo hace y se arquea. Uno de los extremos de ste dispositivo se halla en contacto con un interruptor que corta la alimentacin de la resistencia calefactora. UN AVANCE EN EL CONTROL DE TEMPERATURA: En la actualidad la mayora de las estufas de esterilizacin o de cultivo se termorregulan por medio de un termostato hidrulico que consiste en una ampolla metlica con gas en su interior, hermtica, unida por medio de un capilar de metal a un tambor que vara su volumen cuando aumenta la temperatura. Este tambor est en contacto con una llave interruptora, de manera que si el gas interior del tambor se dilata por el calor, la llave a la que est unido interrumpe el fluido elctrico a la resistencia, manteniendo as la temperatura de la cmara. MODERNIZACIN EN EL DISPOSITIVO DE CONTROL DE TEMPERATURA: Se ha logrado controlar la temperatura mediante un circuito electrnico que utiliza el microprocesador 555, utilizando como sensor una termorresistencia. Esta baja la resistencia a la corriente al aumentar la temperatura y la seal es enviada al procesador, el que corta un rel que alimenta la corriente de la resistencia de calefaccin. Tanto ste como otros dispositivos electrnicos ofrecen extrema sensibilidad de control, ya apto mas para estufas de cultivo que para esterilizacin. Ventajas del calor seco: No es corrosivo para metales e instrumentos. Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no voltiles. Desventajas: *Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la baja penetracin del calor. CAPTULO 3 Calor Hmedo: El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones: *El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas son producidas por reacciones que eliminan agua. *El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado que el aire. Antecedentes: El primer antecedente fue la marmita de Papin en 1681, semejante a una olla a presin que permita mantener el agua por encima de los 100 C.

En 1830 William Henry, mdico de Manchester; trataba ropa y otros utensilios provenientes de personas infectadas exponindolos en una vasija a vapor recalentado y aire caliente obteniendo el material libre de infeccin. Pasteur en 1876, Koch y Wolffhugel en 1881 dan los fundamentos de la esterilizacin por calor seco y calor hmedo: 30 minutos a 110 - 120 C de exposicin al vapor eran equivalentes a una hora de calor seco a 130 - 150 C. En 1884 aparece en Pars con el nombre de Chamberland un equipo para usar en laboratorio, el que luego se masificara en todos los laboratorios biolgicos. AUTOCLAVE Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a presin. El modelo ms usado es el de Chamberland. Esteriliza a 120 a una atmsfera de presin (estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante 20 a 30 minutos. Equipo: Consta de una caldera de cobre, sostenida por una camisa externa metlica, que en la parte inferior recibe calor por combustin de gas o por una resistencia elctrica. La caldera se cierra en la parte superior por una tapa de bronce sujetada por bulones, mariposas o charnelas. Esta tapa posee tres orificios, uno para el manmetro, otro para el escape de vapor en forma de robinete (tambin llamado espita) y el tercero, para una vlvula de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte. Funcionamiento y mtodo para esterilizar adecuadamente en Autoclave: Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los objetos que se disponen sobre una rejilla o canasta de metal. Se cierra asegurando la tapa, ajustando los bulones y se da calor, dejando abierta la vlvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salida de vapor en forma de chorro continuo y abundante. Se cierra la espita de vapor y se espera hasta que llegue a la temperatura adecuada. A partir de all se cuenta el tiempo de esterilizacin, luego del cual se debe esperar al descenso de la temperatura para abrir la espita de purga y la tapa del autoclave nuevamente. Atmsferas Grados Centgrados 0 1/2 1 1 1/2 2 100 112 120 128 135

Este proceso de esterilizacin es el que mejor resultados d en microbiologa. El vapor de agua a fuerte presin acta a mayores temperaturas: Tiempos de esterilizacin en autoclave: Del tiempo, temperatura y presin usados en la esterilizacin depende el xito alcanzado. Generalmente los datos presin y temperatura son fijados, y el nico factor que se vara

es el tiempo. Los materiales necesitan diferentes tiempos de esterilizacin dependiendo de su textura, porosidad, y otras caractersticas propias de cada material. Algunos materiales como el hule, necesitan poco tiempo, mientras otros como el metal quirrgico necesitan ms. Los siguientes datos han sido tomados para una temperatura de esterilizacin de 250F (121C) a 15-20 PSI. Guantes de Caucho (Hule) 15 minutos Sondas (base tejida) 15 minutos Sondas (ltex) 15 minutos Frascos de Vidrio, Cristalera en General 20 minutos Agua en frascos 20 minutos Jeringas de Vidrio 20 minutos Bandeja 30 minutos Equipo de transfusin 30 minutos Paquetes de maternidad 30 minutos Ropa 30 minutos Torundas 30 minutos Paquete quirrgico 45 minutos Instrumental de acero inoxidable 45 minutos *Cuando se esteriliza se deben hacer paquetes bien cerrados y bien ordenados, para que haya buena penetracin de vapor en el material. No incluir dentro del mismo paquete material con diferentes tiempos de esterilizacin. Ej. : Lencera y Vidrio. El mtodo utilizado para envolver los paquetes deber garantizar el mantenimiento de las condiciones de esterilidad de los materiales durante su almacenamiento. Como Cargar el Autoclave a) Se deben acomodar los bultos o paquetes de tal forma que haya una libre circulacin de vapor entre ellos (no tratar de llenar el autoclave hasta sobrecargarlo). b) Colocar de lado las botellas, frascos y cualquier clase de recipiente no poroso de material seco. Esto permite un pronto desplazamiento del aire y un rpido contacto del vapor con las superficies de las vasijas y su contenido. Tambin facilita el secado. c) Esterilizar los lquidos separndolos de otros materiales. d) Cuando se esterilizan lquidos, debe hacerse con los recipientes destapados. e) La cristalera deber esterilizarse colocando los recipientes boca abajo u horizontales (nunca con la boca hacia arriba). CAPTULO 4 Tyndalizacin: Esterilizacin por accin discontinua del vapor de agua, se basa en el principio de Tyndall Las bacterias que resisten una sesin de calefaccin, hecha en determinadas condiciones, pueden ser destruidas cuando la misma operacin se repite con intervalos separados y en varias sesiones. Se efecta por medio del autoclave de Chamberland, dejando abierta la vlvula de escape, o sea funcionando a la presin normal. Puede tambin realizarse a temperaturas ms bajas, 56 u 80 para evitar la descomposicin de las sustancias a esterilizar, por las temperaturas elevadas. Ventajas del calor hmedo: Rpido calentamiento y penetracin Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo No deja residuos txicos Hay un bajo deterioro del material expuesto

 Econmico Desventajas: No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos. Ebullicin: Durante mucho tiempo se "hirvieron" los utensilios y materiales quirrgicos o jeringas hipodrmicas para esterilizarlas. El agua a 100 C no garantiza una adecuada esterilizacin, no obstante posee la propiedad de desprender las colonias o los microorganismos y destruir aquellos que son susceptibles a sta temperatura. Un claro ejemplo de ello fue el sistema utilizado hasta hace pocos aos para esterilizar jeringas de vidrio y agujas hipodrmicas de nquel con embocadura de bronce en el mejor de los casos, platino, hirvindolos en agua. FILTRACIN: Este procedimiento es aplicable a la esterilizacin de lquidos y gases, especialmente los primeros. Cuando el lquido a filtrar no puede resistir, sin descomponerse , la accin del calor, se aplica la tcnica de filtracin, la que puede efectuarse mediante presin o aspiracin. Se basa en el pasaje de lquidos a travs de sustancias porosas que detienen a los microbios. Los antiguos filtros se fabricaban en forma de bujas que son cilindros huecos abiertos por una extremidad y cerrados por otra, de paredes de espesor variable. La filtracin se reconoci como tcnica de esterilizacin a partir de las observaciones de Koch en 1893, con la epidemia de clera y la presencia del vibrin en el agua. Esta observacin fue ilustrada en la epidemia Hamburgo-Altona en 1892. El agua del ro Elba, que contena Vibrio comma pasaba a las caeras de agua de Hamburgo. Solo aparecieron unos pocos casos de clera en el suburbio de Altona, donde el agua del Elba era filtrada por arenas (ntese el plural, refirindose tal vez a varios grados de arena), antes de su distribucin. Los filtros de porcelana se llaman "de Chamberland" y los de tierras infusorias calcinadas se denominan "Berkefield" En la actualidad se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El tamao del poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Los filtros que se utilizan no retienen virus ni micoplasmas, estos ltimos estn en el lmite de separacin segn el dimetro de poro que se utilice. La filtracin se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolbiles. Su usa para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones intravenosas, drogas diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y soluciones de antibiticos y vitaminas. Existen tres tipos bsicos de filtros: a- Filtros profundos o Filtros de profundidad: Consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o pegado dentro de los canales de flujo. En este tipo de filtros la retencin de las partculas se produce por una combinacin de absorcin y de retencin mecnica en la matriz. b- Membranas filtrantes: Tienen una estructura continua, y la retencin se debe principalmente al tamao de la partcula. Partculas ms pequeas al tamao del poro quedan retenidas en la matriza del filtro debido a efectos electrostticos. La firma Millipore ha desarrollado membranas de 0,45 y 14 cm de dimetro, con un soporte de papel siliconado para su proteccin debido a la fragilidad de la misma, la ue debe ser monada en un soporte estril y que permita el ingreso del lquido a esterilizar a presin. c- Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo): Son pelculas muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiacin y sustancias qumicas. Son filtros con orificios muy regulares que

atraviesan la membrana verticalmente. Funcionan como tamices, evitando el paso de toda partcula con un tamao mayor al del poro. CAPTULO 5 MTODOS QUMICOS: Estos mtodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos. En comparacin con los procedimientos fsicos, stos mtodos tienen una importancia secundaria. Los antispticos son considerados venenos protoplasmticos que, al actuar sobre los grmenes, los destruyen. Algunos de ellos ejercen su accin nociva sobre todas las clulas, por lo cual se les considera venenos generales, por el contrario otros actan sobre algunas especies bacterianas, mostrndose como venenos especficos. Este mtodo es ptimo para la antisepsia de las manos del operador, de locales, de mesas de trabajo, de jaulas de animales, y para destruir grmenes que puedan caer en lugares de trabajo. AGENTES QUMICOS La Iodopovidona (pervinox), el Cloruro de Benzalconio (sal de amonio cuaternario o Cloruro de Zefirano) son ejemplos de antispticos tiles para desinfectar manos y superficies. Cuando la superficie es resistente, el mejor agente biocida es el Hipoclorito de Sodio (agua lavandina). ESTUFAS DE ESTERILIZACION POR OXIDO DE ETILENO Destruye todos los organismos y microorganismos conocidos, incluso esporas y virus. Esteriliza sin deterioro artculos de goma, plstico, metal, madera, lana, piel, papel, productos farmacuticos. Esterilizacin con embalajes: a este gas son permeables sustancias como polietileno, nylon, celofn, etc. En 1928, autores americanos: Bac, Cotton y Ellington; Schrader y Bossert y Autores alemanes: Gassner y Hase, descubrieron las propiedades del xido de etileno. En 1933 fueron certificadas las propiedades del xido de etileno en un laboratorio de La Sorbona y en 1939 se estudi en un laboratorio de investigacin del Ejercito de U.S.A. El xido de etileno era bactericida, esporicida, con gran poder de penetracin, efectivo a bajas temperaturas y penetra sustancias porosas; para evitar su poder explosivo y su alto potencial inflamable se mezcl con CO2 en una proporcin de 7,15 veces el volumen de xido de etileno. Trabajo de Phillips y Kaye. El tiempo de esterilizacin que requiere el material depende de mltiples variables, el vaco que se produce, la humedad, la concentracin del gas expresado en gs./l y la temperatura, es decir que reduciendo la temperatura aumenta el tiempo de exposicin requerido. El gas se adquiere en botellas metlicas o cartuchos que se vaporizan, cambian de lquido a gas a 10 C. Todos los artculos debern airearse por 6 hs. despus de una esterilizacin. El Oxido de etileno es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrgenos lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos, hidroxilos, etc. Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria farmacutica. Destruye todos los microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma, plastico, papel, etc.), equipos electrnicos, bombas cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo, y adems cancerigeno. Con aldehdos Son agentes alquilantes que actan sobre las protenas, provocando una modificacin irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimtica. Estos compuestos destruyen las esporas.

Glutaraldehdo: Consiste en preparar una solucin alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos. Este mtodo tiene la ventaja de ser rpido y ser el nico esterilizante efectivo fro. Puede esterilizar plstico, goma, vidrio, metal, etc. Alcoholes Antispticos Iodo Agentes catinicos, aninicos y anfteros Organo Mercuriales Colorantes Cloro y Compuestos clorados Desinfectantes y/o Esterilizantes Aldehdos Oxido de Etileno Compuestos Fenlicos Acidos y Alcalis Formaldehdo: Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodn, que despus pueden ser expuesta al calor para un rpida esterilizacin (accin del gas formaldehdo). Tambin pueden ser usadas en Estufas de Formol, llamadas tambin de formalina, que son cajas de doble fondo, en cuya base se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60 C y pueden esterilizar materiales de ltex, goma, plsticos, etc. Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs. CAPTULO 6 RADIACIN: Su accin depende de: El tipo de radiacin El tiempo de exposicin La dosis Radiaciones Ionizantes: Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los cidos nucleicos, estructuras proteicas y lipdicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos. Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolbiles (termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a escala industrial por sus costos. Rayos Ultravioleta: Afectan a las molculas de DNA de los microorganismos. Son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies, se utilizan para la esterilizacin en quirfanos. Rayos Gamma: Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energia atomica. Este tipo de esterilizacin se aplica a productos o materiales termolbiles y de gran importancia en el campo industrial. Puede esterilizar antibiticos, vacunas, alimentos, etc.

Control de calidad: La correcta esterilizacin se puede controlar mediante dos mtodos, siendo el segundo el ms seguro. Indicadores: Cintas comerciales que se colocan en el paquete o caja a esterilizar, que viran de color, cuando se alcanzan las temperaturas adecuadas para la esterilizacin. Se describe la composicin de los llamados "testigos de esterilizacin" preparadas por sustancias qumicas. 1- Mezcla de Demande: Safranina............... 0,01 g. Benzonaftol........... 100,00 g. sta mezcla se colorea de rojo cuando sufre una temperatura de 110 C. 2- Mezcla de Grard: Fucsina................ 1 g. Benzonaftol...........250 g. Esta mezcla toma un color rojo rub a 110 C. 3. Mezcla de Grard 4. Verde Brillante......... 1 g. Acetanilida............100 g. Esta mezcla es azul a la temperatura ordinaria, a 115 C toma un color verde oscuro) 5. Mezcla de Grard Metil Violeta...........1 g. Hidrato de Terpina....100 g. Mezcla violeta plido que a 117 C se vuelve violeta oscuro. Las mezclas se colocan en ampollas y se cierran a la lmpara, colocndose junto con el material a esterilizar. Pruebas de cultivo: Tambin pueden colocarse grmenes vivos, especialmente esporulados y los que presentan mayor resistencia como el bacilus subtilis o el b. Mesentericus de la papa (tambin responsable de la filamentacin en el pan), esterilizndose conjuntamente con el material para luego sembrar una suspensin de los grmenes para observarse en agar nutritivo a las 24 Hs. Si existe o n desarrollo de colonias. ESTERILIZACIN - DESINFECCIN - ANTISPTICOS Y DESINFECTANTES Definiciones: ESTERILIZACIN: Es la destruccin o eliminacin completa de toda forma de vida microbiana. Puede llevarse a cabo por procesos fsicos o qumicos (vapor a presin, calor seco, xido de etileno, lquidos qumicos). DESINFECCIN: Es un proceso que elimina la mayora o todos los microorganismos sobre los objetos inanimados con la excepcin de esporos bacterianos. Se efecta por medio de agentes qumicos, clasificados en tres categora: Alta, intermedia y baja, segn la intensidad de su accin. GERMICIDA: Agente que destruye microorganismos en especial patgenos, en tejidos vivos y objetos inanimados. Segn germen sobre el que acta, se lo denominar fungicida, virucida, bactericida, etc.. ANTISPTICO: Sustancia aplicada en la piel u otro tejido vivo que previene o detiene el crecimiento o la accin de microorganismos por inhibicin de su actividad o por su destruccin. DESINFECTANTE:

Sustancia que destruye los grmenes o microorganismos presentes, a excepcin de las esporas bacterianas. Se utiliza este trmino en sustancias aplicadas sobre objetos inanimados. PASTEURIZACIN: Proceso de exponer un objeto a agua caliente, 77C, durante 30 minutos. Su propsito: destruir todos los microorganismos patgenos, excepto esporas bacterianas. LIMPIEZA: Es la remocin fsica de materia orgnica o suciedad de los objetos. Generalmente se realiza utilizando agua, con o sin detergentes. DECONTAMINACIN: Se puede definir como inactividad de los grmenes patgenos de los objetos, de modo que sea seguro manipularlos. Mtodos de Esterilizacin: Los ms usados: 1. calor seco 2. calor hmedo 3. gases: Ej. ms comn: Oxido de Etileno Otros: 4. Glutaraldehido al 2% 5. Irradiacin MTODOS DE ESTERILIZACIN - Conceptos tiles Calor: Es una forma de energa almacenada en un cuerpo. Tanto el hmedo como el seco esterilizan, pero el calor seco destruye con una velocidad ms lenta y requiere temperaturas ms altas y tiempos de exposicin ms prolongados. Esterilizacin por calor seco: estufa Este mtodo utiliza aire caliente seco y la operacin se realiza en aparatos que reciben el nombre de esterilizacin por aire caliente o estufas. Ventajas de este mtodo: facilidad de instalacin, facilidad de manejo y facilidad de poder esterilizar material dentro de recipientes cerrados. Desventajas: Son necesarias altas temperaturas, con lo cual los instrumentos a esterilizar pueden ser deteriorados por el excesivo calor. - No distribucin homognea de la temperatura. - Excesivo gasto de funcionamiento por consumo de energa elctrica. Esterilizacin por calor hmedo: Ebullicin: El agua hierve a 100C. No constituye mtodo esterilizante, ya que permite la sobrevida de muchas esporas. Autoclave: Acta de manera combinada el calor y la presin. El calor hmedo es producido en forma de vapor de agua a presin y el mecanismo de la destruccin se realiza a travs del mecanismo de la coagulacin de la protena bacteriana, destruyendo los microorganismos ms resistentes como las esporas. Resumiendo: "Todos los organismos vivos pueden ser rpidamente destruidos en presencia del vapor de agua a presin". Cintas testigo: Son cintas que viran de color cuando alcanzan determinada temperatura dentro de los aparatos esterilizados, pero no son indicadores de que los procesos de esterilizacin, con todos sus ciclos, se hayan cumplido correctamente. El uso de las mismas en forma rutinaria en todos los materiales que se esterilicen, no debe reemplazar los monitoreos biolgicas peridicos. Esporas de Bacillus Stearolthermophilas: Se utilizan para monitorear la efectividad de la esterilizacin, pues son las ms resistentes al calor hmedo.

Acondicionamiento del material: Debe realizarse en forma tal de asegurar una penetracin efectiva del elemento esterilizante (calor - gas) y la proteccin contra la oxidacin, la corrosin y la prdida de filo de los instrumentos cortantes. xido de etileno: El xido de etileno es un agente alquilante ampliamente utilizado en la esterilizacin gaseosa. Es activo contra todo tipo de bacterias, incluyendo esporas, virus y bacilos tuberculosos. Es utilizado para todo aquel material termolbil o que no resista las condiciones de esterilizacin por calor hmedo o seco. Ej.: plsticos, goma, equipo electrnico. Es mutagnico, txico, la inhalacin causa nuseas, vmitos y trastornos neurolgicos, a igual que cualquier otro tipo de gas, es inflamable y de riesgo cuando su utilizacin no se realiza adecuadamente, bajo condiciones controladas y por personal competente. Clasificacin de los elementos y niveles de desinfeccin Clasificacin de los elementos: De acuerdo al riesgo potencial de producir una infeccin durante su uso, los materiales se dividen en: a) Crticos: Constituido por instrumental u objetos que se introducen directamente dentro del torrente sanguneo o dentro de reas normalmente estriles del cuerpo (Ej.: instrumental quirrgico, catteres cardacos, implantes, etc.) Tienen GRAN RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES b) Semicrticos: Constituido por elementos que estn en contacto con las membranas mucosas intactas del paciente o piel lesionada . Generalmente no penetran en cavidades estriles del cuerpo (Ej.: endoscopios rgidos y flexibles no invasivos, tubos endotraqueales, citoscopios, etc.) Tienen GRAN RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES c) No crticos: Son aquellos elementos que habitualmente no tocan al paciente o tocan la piel intacta (Ej.: muletas, mesa del paciente, tensimetro, estetoscopio, etc.) Tienen POCO RIESGO DE PRODUCIR INFECCIONES Niveles de desinfeccin: a) Alto nivel: Destruye todos los microorganismos con excepcin de un gran nmero de esporas bacterianas (bacterias, casi todas las esporas de hongos, bacilo de TBC, pequeos virus) b) Nivel intermedio: Inactiva bacterias vegetativas, hongos, casi a todos los virus, pero no a endosporos bacterianos. c) Bajo nivel: Destruyen a la mayora de las bacterias, algunos virus, algunos hongos, pero no afectan organismos ms resistentes como bacilo de TBC o endosporos bacterianos. CLASIFICACIN DE ELEMENTOS NIVELES DE DESINFECCIN ELEMENTOS EJEMPLOS -------------------------------------------------------PROC. INDICADOS --------------------------------------------------------

CRTICOS --------------------------

Agujas, sondas vesicales, cat. cardacos, implantes, mat. quirrgico, componentes de bomba extracorp., rin artificial, etc. --------------------------------------------

ESTERILIZACIN (nicamente) ------------------------------------- ESTERILIZACIN

 SEMICRTICOS

Fibroscopios, tubos endotraq., broncoscopios, endoscopios, citoscopios, circuitos del respirador y anest. , equipos de terapia respiratoria y de aspiracin de secreciones, etc.

--------------------------------------------------------------------Mscaras de oxgeno, humidif., frascos de aspiracin

NO CRTICOS Tensimetros, termmetros, estetoscopio, chatas y orinales, electrodos, etc.

DESINFECCIN DE ALTO NIVEL: Decontaminacin Limpieza Desinfeccin: - Glutaraldeh. 2% - Formaldeh. 4% - Hipoclorito de sodio 1000 p.p.m. de cloro libre. ------------------------------------- ALTO NIVEL: Limpieza Hipoclorito de sodio 1000 p.p.m. de cloro libre. NIVEL INTERMEDIO Limpieza Desinfeccin: - lodopovidona - Alcohol 70% - Hipoclorito de sodio 500 p.p.m. de cloro libre. BAJO NIVEL: Limpieza: agua y detergente.

Mesadas, piletas, camas, paredes, techos, pisos. ANTISPTICOS Y DESINFECTANTES DE USO COMN EN HOSPITALES Y/O CENTROS ASISTENCIALES Recordar: 1. Al utilizar cualquiera de stos productos se debe tener en cuenta que la piel del paciente puede ser sensible a ellos. 2. Es conveniente que el antisptico de eleccin sea el mismo en todas las reas geogrficas del hospital. Su uso debe estar previamente determinado, excepto reas especiales donde el espectro del antisptico que se elige debe ser amplio para eliminar el mayor nmero posible de grmenes. tambin se tendr en cuenta que no dae las manos del personal. 3. Los antispticos deben, una vez que llegan a los distintos servicios, fraccionarse en frascos pequeos, opacos y con tapa. El antisptico que se coloca en estos frascos debe recambiarse diariamente, previo lavado y escurrido del frasco antes de proceder a su rellenado. 4. El alcohol al 70% puede colocarse en frascos comunes de vidrio blanco, pero stos debern tener tapa hermtica. 5. Es importante mantener tapados los antispticos ya que, por ejemplo, en el alcohol yodado, puede alterarse la concentracin de cualquiera de sus componentes por evaporacin. 6. La Iodopovodona jabonosa puede reemplazarse por gluconato de clorhexidina (Hibiscrub M.R.) segn la evaluacin que, en determinadas situaciones, realice la institucin. IODO-POVIDONA: (Pervinox M.R.) (Fada M.R.)

Es un iodforo que resulta de la combinacin de iodo con un agente solubilizador (PVP o povidona) que mantiene la eficacia germicida del iodo y resulta en un antisptico relativamente libre de toxicidad e irritacin. Est disponible en forma de solucin jabonosa y como solucin tpica. Esta forma de iodo no irrita ni mancha y ha sido ampliamente aceptada en los ltimos aos para una gran variedad de aplicaciones preventivas, de limpieza (solucin jabonosa para lavado de manos y bao previo prequirrgico) y teraputicas, incluyendo su uso en curacin de heridas. La ms comnmente empleada es la solucin al 10%. Hay otros compuestos que estn sometidos a investigacin. Se cree que es microbicida, no meramente bactericida, lo que significa que adems de las bacterias Gram (+) y Gram (-), eliminan virus, hongos, protozoos y levaduras. Se recomienda usarla sin diluir. Las soluciones jabonosas son desinfectantes de nivel intermedio y bajo, pudindoselas usar en materiales semicrticos y no crticos. GLUCONATO DE CLORHEXIDINA AL 4% (Hibiscrub M.R., Butyl M.R.) Es un agente bactericida tpico eficaz contra grmenes Gram (+) y Gram (-), pero de mayor eficacia sobre los primeros. Es tambin efectivo contra hongos y virus, pero su accin es muy baja sobre el Mycobacterium tuberculosis. El envase debe tener las mismas caractersticas que se recomiendan para la Iodopovidona. Presentacin: - Clorhexidina jabonosa - Clorhexidina alcohlica (no est en el mercado comn). Se lo recomienda para: - Bao del paciente (preferentemente no en cama ya que mancha las sbanas). - Lavado de manos. La ventaja de ste antisptico es una importante accin residual sobre la piel (entre 3 y 6 horas). No se lo debe usar para desinfeccin de elementos o superficies, puesto que se inactiva en presencia de materia orgnica y materiales como corcho, algodn o goma. HEXACLOROFENO (FISOHEX M.R.) Es un agente bacteriosttico ms eficaz contra los grmenes Gram (+) que contra los Gram (-), especialmente los estafilococos. Las materias orgnicas interfieren en su accin. Aunque una sola aplicacin apenas modifica la flora cutnea, tiene efectos, acumulativos. Por lo tanto, puede usarse en duchas preoperatorias durante dos a cuatro das. Cuando se ingiere o absorbe a travs de una grieta en la piel o membranas mucosas (o incluso a travs de piel intacta de algunos nios), el hexaclorofeno provoca una neurotoxicidad potencialmente cuando existen erupciones cutneas, quemaduras o heridas abiertas, ni en recin nacidos o pacientes de Neonatologa. Se lo considera como a otros fenlicos, como desinfectante de nivel intermedio o bajo. Puede usarse en materiales no crticos y limpieza del ambiente hospitalario. PERXIDO DE HIDROGENO (Agua oxigenada) Ha sido reconocido como germicida desde hace ms de 100 aos atrs. Ha sido empleado durante aos para promover la limpieza y debridamiento de las heridas. Tiene un dbil efecto germicida y fcilmente se degrada a oxgeno molecular y agua. Es muy importante su estabilidad, (6-10%), lo que es muy difcil de garantizar en nuestros mercados en relacin al tiempo de almacenamiento. Su accin es mecnica, las burbujas de oxgeno desprenden tejido muerto y las bolsas de bacterias ayudan a eliminarlas de la herida. Tiene inconvenientes, puede crear ampollas llenas de aire en los nuevos epitelios,

separndolos del tejido subyacente. Por consiguiente, el perxido de hidrgeno no debe utilizarse cuando la herida est adecuadamente debridada y se est formando epitelio nuevo. Tras su aplicacin, debe eliminarse de la herida con solucin fisiolgica. Tampoco debe emplearse en ciertas heridas profundas ni en la cavidad peritoneal, pues podra provocar un mbolo gaseoso en los capilares y vasos linfticos. Se ha demostrado que es bactericida, virucida y fungicida. La inmersin de material limpio en una solucin estabilizada al 6% proporcionara una desinfeccin de alto nivel en treinta minutos. Su estabilidad no est garantizada en nuestro medio, por lo que no se la recomienda. Corroe metales como el cobre, aluminio y zinc. Debe mantenerse al abrigo de la luz. ALCOHOL El alcohol etlico al 70% (etanol) es el que ms comnmente se encuentra en el ambiente hospitalario. Se lo recomienda para: - Antisepsia de la piel en pacientes alrgicos al Iodo (debe dejarse actuar entre uno y dos minutos). - Desinfeccin de termmetros axilares y rectales. - Desinfeccin de endoscopios fibropticos. Es eficaz contra la mayora de las bacterias patgenas, pero de accin imprevisible contra los hongos y virus. Algo ms potente es el alcohol isoproplico al 70-100% (Isopropanol). Ambos resecan la piel, lesionan el epitelio nuevo y provocan ardor cuando se aplican sobre heridas abiertas. El isopropanol tambin provoca vasodilatacin bajo la superficie cutnea, de modo que las punciones con aguja sangran ms que cuando se utiliza etanol. El uso de alcohol al 70% en las manos es un excelente mtodo que reemplazara en situaciones de emergencia el lavado con soluciones jabonosas, dada su alta eficacia. No tiene accin residual, pero varios estudios demostraron que es capaz de reducir en un 99,7% la concentracin microbiana de la piel de las manos. ALCOHOL IODADO Es una combinacin de iodo con alcohol al 70%. Se debe utilizar en concentraciones al 2%. Acta sobre bacterias Gram (+), Gram (-), Mycobacterium tuberculosis y hongos. Se lo utiliza como antisptico de eleccin para la preparacin de la zona operatoria de la piel. Debe mantenerse en recipientes opacos y tapados para evitar que por evaporacin se alteren las concentraciones iniciales con que el producto llega proveniente de la farmacia del hospital. AMONIOS CUATERNARIOS (Cl. de Benzalconio: Tersotyl M.R.) (DG6 M.R.) Estos compuestos tuvieron amplio uso desde su inicio como germicida en el ao 1935. Son buenos agentes de limpieza, pero actualmente no se recomiendan como antispticos de piel y tejidos, ya que diversos estudios han documentado que en ellos sobreviven y desarrollan bacterias Gram (-), que han podido relacionarse con brotes de infecciones hospitalarias. Materiales como el algodn y las gasas disminuyen su actividad, porque absorben los ingredientes activos. No se los debe utilizar para la desinfeccin de elementos crticos o semicrticos. Solamente para el tratamiento de materiales no crticos. No eliminan esporas ni determinados virus, como por ejemplo el de la Hepatitis B. Debe usarse con cuidado, ya que se ha visto que algunas soluciones permiten el crecimiento de Pseudonomas. COMPUESTOS MERCURIALES (Merthiolate M.R.) Son antispticos que inactivan rpidamente en presencia de protenas. Se requieren altas concentraciones de mercuriales para alcanzar un efecto bactericida: son desinfectantes

de bajo nivel y prcticamente no cumplen ningn rol en las estrategias modernas de desinfeccin. Usado sobre materiales o superficies debe recordarse que corroe los metales. FORMALDEHDO Inactiva microorganismos a travs de la alcalinizacin de las protenas. Se presenta en concentraciones del 40%. La solucin acuosa es bactericida, tuberculicida, fungicida, esporicida y virucida. Segn su dilucin actuar como esterilizante, luego de un tiempo prolongado o como desinfectante de alto nivel. Se lo utiliza para la inactivacin de bacterias en los sistemas de distribucin de agua tratada de los servicios de Hemodilisis. Si se lo emplea en la reutilizacin de membranas su concentracin ser del 4%, con un tiempo de contacto de 24 Hs. como mnimo. Debe tenerse presente que los filtros deben ser enjuagados cuidadosamente antes de usarse. Resultan convenientes monitoreos peridicos de formaldehdo residual. Los vapores de formaldehdo tienen efectos txicos e irritantes, por lo que es necesaria la utilizacin de elementos protectores durante su manipulacin. (Mscaras respiratorias, protectores oculares, guantes resistentes y delantales impermeables). El ambiente de trabajo debe contar con un adecuado sistema de recambio de aire. Concentraciones ambientales de 2 p.p.m. han ocasionado efectos txicos. Las pastillas de formalina no deben utilizarse en cajas de instrumental, guantes, etc. Su accin germicida solo se produce en la vaporizacin por calor. Actualmente se desaconseja su uso en quirfanos o habitaciones de pacientes, por ser no solo un procedimiento riesgoso (efecto carcinognico) sino tambin ineficaz. Por las razones expuestas, su uso queda limitado a los servicios de Hemodilisis. GLUTARALDEHDO AL 2% Es una solucin estable, bactericida de amplio espectro, eficaz contra virus, de efectiva accin esporicida. Resulta activo ante presencia de materia orgnica. Algunas publicaciones indican que no es corrosivo para los metales, gomas y lentes, mientras que otras indican presencia de corrosin a largo plazo. No tiene efectos deletreos sobre cementos y lentes de endoscopios. Se debe evitar la corrosin por contacto, debida a la presencia de dos metales diferentes en presencia de un electrolito conductor: agua. (Ej.: No mezclar acero inoxidable con instrumental de nquel). Acta afectando las lipoprotenas de la membrana celular y el citoplasma de las formas bacterianas vegetativas, altera el sistema enzimtico y el dao en la membrana permite la salida de sustancias y componentes intracelulares y facilita la entrada directa del desinfectante al citoplasma. Entre los factores que influencian su actividad, se debe tener en cuenta: (Ver factores que influyen en los procedimientos de desinfeccin) - Ph: Solucin alcalina. 7.9 - Concentracin: al 2% - Temperatura: ambiente - Materia orgnica: Tratar de disminuir su presencia en los materiales a desinfectar. Uno de los factores ms importantes es la limpieza previa del material, requisito sin el cual el proceso de desinfeccin fracasara. El glutaraldehdo es incrustante de la sangre. Recientes estudios han podido demostrar que concentraciones de glutaraldehido disminuyen del 2,1% (Ph 8.5) al 1,3% (Ph 7.4) a lo largo de un perodo de 28 das a temperatura ambiente. El glutaraldehido tiene una vida media entre 14 y 28 das. Los preparados comerciales tienen una solucin "activadora", un inhibidor de corrosin y glutaraldehido al 2%. La solucin "activadora" se coloca en el momento de preparar el producto para usar por

primera vez. Debe tenerse la precaucin de mezclar muy bien la preparacin, para evitar obtener una solucin parcialmente activada. MATERIALES QUE SE PUEDEN DECONTAMINAR, DESINFECTAR Y ESTERILIZAR CON GLUTARALDEHIDO AL 2%. Aluminio, zinc, acero de carbono, carburo de tungsteno, acero inoxidable, acero cromado, cloruro de polivinlico, policarbonato, polietileno, poli propileno, sondas de neopreno, silicn, tubos de ltex, tubos de Krotn, y nylon rgido. Resulta de utilidad para materiales especiales, como LARINGOSCOPIOS, ELECTROBISTURIES, ENDOSCOPIOS, LUCES PTICAS, etc., que por su calidad no pueden ser sometidos a procedimientos de decontaminacin habituales o por calor, como por ej. el autoclavado y a los que el Hipoclorito de sodio ya sea al 1 o al 10% les produce con el tiempo un importante deterioro. Se debe controlar diariamente, hasta que se establezca un promedio para el uso y duracin del glutaraldehido "activado", con tiras medidoras de Ph. y con tiras medidoras del porcentaje de concentracin, que debe mantenerse siempre al 2%. La capacidad germicida de la solucin vara segn el uso del producto activado. A mayor uso diario, se produce una disminucin de la vida media del mismo. Se recomienda su medicin y no el uso estandarizado durante 14 ( endoscopios, por ej., por posibilidad de bacilo de Koch ) o 28 das. Algunas marcas comerciales de este producto ofrecen tiras reactivas destinadas a medir la concentracin del mismo, Es por ello que conviene tener en cuenta las especificaciones del fabricante. Hay varias marcas comerciales disponibles en el mercado. La contaminacin de la solucin con materia orgnica influenciar en la prdida de la actividad. Materias orgnicas como sangre o pus, podran actuar protegiendo especies microbianas o compitiendo con la molcula desinfectante, reduciendo su actividad. Se ha comprobado disminucin en la actividad del glutaraldehido cuando se diluye con agua. Cuando se lo utiliza como DESINFECTANTE DE ALTO NIVEL en instrumentos sometidos a limpieza previa, la mayora de los estudios sugieren un tiempo de contacto no menor a 10 minutos. Cuando la finalidad es la DECONTAMINACIN el tiempo se extender a 30 minutos y cuando el objetivo es la ESTERILIZACIN : 10 HORAS o ms. Los objetos sometidos a desinfeccin con glutaraldehido se sometern a previa limpieza manual. ( Realizada con guantes y proteccin ocular ). La limpieza manual se realiza cepillando la superficie de los instrumentos con cepillos duros ( no de metal ). Ej. cepillo de dientes o de uas, bajo chorro de agua fra. No se debe usar agua a ms de 45 grados centgrados, pues coagula la albmina y hace ms difcil la limpieza. Las superficies no deben frotarse con polvos limpiadores domsticos, abrasivos, lana de acero, esponjas de metal, cepillo de alambre, porque estos rayan los metales, aumentando las posibilidades de corrosin. Los cepillos de limpieza, una vez usados, deben ser lavados, desinfectados (Hipoclorito al 1%) y secados para evitar que se contaminen. Los detergentes empleados en la limpieza, no deben ser abrasivos ni custicos ni precipitar en aguas duras. Instrumentos acanalados, huecos o con cualquier tipo de luz, deben ser lavados en su interior mediante presin por medio de una jeringa o similar. Este procedimiento tambin es vlido cuando se sumerge el elemento en el glutaraldehido, a efectos de que el desinfectante contacte con todas las partes del instrumental a desinfectar.

Despus de la limpieza manual , el enjuague es muy importante, ya que se debe retirar todo resto de detergente antes de sumergir el instrumental en la solucin desinfectante. (no menos de dos minutos). Resulta por lo expuesto relativamente fcil el uso de glutaraldehido, pero si bien es de baja irritabilidad y toxicidad, puede tener algunos efectos txicos para el personal que lo manipula, ya sea en procesos de desinfeccin, decontaminacin o esterilizacin. Del mismo modo, puede resultar txico para el paciente expuesto al instrumental tratado, que en algunos casos puede involucrar el contacto con la sangre. Algunas investigaciones mostraron que los plsticos y las gomas absorben el 10% del glutaraldehido y lo liberan despus de 24 Hs. La absorcin de glutaraldehido depende del tiempo de contacto entre el enjuague del material. Esta investigacin sugiere la inmersin del material en agua estril en tres baos diferentes, agitando frecuentemente el material (2 minutos en total ). Tener en cuenta el enjuague a presin con jeringa en instrumental con luz interior. El glutaraldehido es levemente irritante de la piel, severamente irritante de los ojos y membranas mucosas. Se han documentado dermatitis de contacto en asistentes dentales y enfermeras del quirfano por no adoptar medidas de bioseguridad. La inhalacin de aldehdos tambin resulta txica. Debe utilizarse en un ambiente exclusivo, con buena aireacin. El Personal que lo utilizar debe estar entrenado en su correcto manejo y debe conocer las medidas de bioseguridad que debe emplear para su manipuleo. La vestimenta de los operadores consistir en: Barbijo, Proteccin ocular (Antiparras o gafas, para evitar riesgo de salpicaduras en los ojos) y guantes resistentes. Dado que no se puede medir la cantidad de partculas por milln que se encuentran presentes en la atmsfera del lugar donde se utiliza el producto, se recomienda que los operadores no trabajen en dicho lugar durante mas de quince o veinte minutos continuos. Si el ambiente cuenta con extractor de aire, a la altura de las mesadas de trabajo, el riesgo de toxicidad para los operadores disminuye. Se recomienda mantener los contenedores de glutaraldehido activado correctamente tapados, salvo en el momento en que se realizan los procedimientos