HEMATOLOGIA

La Hematologa (de gr. hema: sangre, logo: estudio) hematologa: Es la especialidad mdica que se dedica al tratamiento de los pacientes con enfermedades hematolgicas, para ello se encarga del estudio e investigacin de la sangre y los rganos hematopoyticos (mdula sea, ganglios linfticos, bazo, etc) tanto sanos como enfermos

Objeto de la Hematologa La hematologa es la rama de la ciencia mdica que se encarga del estudio de los elementos deformes de la sangre y sus precursores, as como de los trastornos estructurales y bioqumicos de estos elementos, que puedan conducir a una enfermedad. La hematologa es una ciencia que comprende el estudio de la etiologa, diagnstico, tratamiento, pronstico y prevencin de las enfermedades de la sangre y rganos hemolinfoproductores. Los especialistas en este dominio son llamados hematlogos. La hematologa comprende el estudio del paquete celular, el perfil o el estado sanguneo, los cuales son: Recuento de eritrocitos Recuento de leucocitos Determinacin de hemoglobina Velocidad de sedimentacin globular (VSG) Frmula leucocitaria (recuento diferencial de leucocitos)

COMPOSICION DE LA SANGRE La sangre es un tejido lquido que circula dentro del sistema cerrado de los vasos sanguneos, y que se compone de clulas (eritrocitos, leucocitos, y plaquetas), tambin llamados elementos figurados de la sangre, y del plasma, que es la parte lquida de la sangre que mantiene en suspensin las clulas. Las clulas constituyen el 45% del volumen total de la sangre humana y el plasma el 55% restante. Resumiendo, los constituyentes de la sangre total son: I. Clulas: Glbulos rojos o eritrocitos Glbulos blancos o leucocitos

Plaquetas o trombocitos II. Plasma: Agua (91-92%) Elementos slidos (8-9%) III. Protenas (7%), seroalbminas, seroglobulinas, y fibringeno. IV. Sustancias inorgnicas (0.9%): Sodio (Na), Potasio (K), Calcio (Ca), Fsforo (P), etc. V. Sustancias orgnicas que no son protenas. Urea, cido rico, xantina, hipoxantina, creatina y creatinina, amoniaco y amonicidos, adems, grasas neutras, fosfolpidos, colesterol y glucosa. VI. Secreciones internas de las glndulas y varias enzimas como amilasa, proteasa, y lipasa. El plasma, al cual se le ha extrado el fibringeno despus de haberse formado el cogulo, se conoce con el nombre de suero. GLOBULOS ROJOS O ERITROCITOS Son producidos principalmente en la mdula sea roja de los huesos, en el bazo y en el hgado. Tienen forma discoidal, son anucleados, miden 7.2 micras de dimetro y 2.2 micras de espesor. Tienen alrededor una membrana compuesta de protenas, lpidos simples y colesterol. El cuerpo del eritrocito tiene una malla de tejido de igual constitucin en la que se encuentra el pigmento rojo llamado hemoglobina. La hemoglobina es una protena conjugada formada por el grupo prosttico HEM y la protena GLOBINA que se encuentran dentro del eritrocito dando el color rojo caracterstico al eritrocito. La caracterstica ms importante de la hemoglobina es su capacidad de combinarse con el oxgeno de las clulas; en los tejidos, la hemoglobina se combina con CO2 , formando la carboaminohemoglobina, que a nivel de los pulmones libera CO2, que sale al exterior. Numero de eritrocitos.- En la especie humana la cantidad normal de eritrocitos es de 5 a 6 millones por milmetro cbico en el hombre y de 4.5 a 5.5 millones en la mujer. Su disminucin es causa de anemia. GLBULOS BLANCOS O LEUCOCITOS Tienen mayor tamao que los eritrocitos y s contienen ncleo. La cantidad normal de leucocitos es de 5000 a 10000 por milmetro cbico. Hay varios tipos de leucocitos: Basfilos, Eosinfilos, Monocitos, Linfocitos, Neutrofilos, y todos ellos tienen la funcin de combatir las infecciones bacterianas. PLAQUETAS O TROMBOCITOS Son de menor tamao que los eritrocitos y no tienen ncleo. La cantidad normal de las plaquetas es de 150000 a 450000 por milmetro cbico de sangre. Tienen una funcin muy importante en la coagulacin sangunea. En resumen: Las clulas de la sangre tienen las siguientes funciones: a) Respiracin, b) Defensa del organismo y c) Coagulacin. EL PLASMA Y SUS CONSTITUYENTES

1.- Agua Es el medio principal en el cual se llevan a cabo todas las reacciones qumicas de la clula. Las funciones de este lquido son: hidratante, regulacin de la temperatura corporal y balance hdrico. 2.- Elementos slidos Protenas: Las seroalbminas, las seroglobulinas y el fibringeno mantienen la presin onctica. Estas mismas protenas (en especial las primeras) confieren la viscosidad a la sangre y, por lo tanto, intervienen en el mantenimiento de la presin arterial. Adems, intervienen en el equilibrio cido-bsico. Las seroglobulinas tienen actividad como anticuerpos (mecanismo de defensa). El fibrinogeno participa en la coagulacin de la sangre. Sustancias inorgnicas: Las sales (sodio, potasio, calcio, etc.) son llevadas a las clulas por el plasma para mantener el equilibrio del medio interno Sustancias orgnicas que no son protenas: Son producto del metabolismo celular, susbstancias con poder alimenticio. El plasma recoge los desechos metablicos y los lleva a los riones, la piel, y al intestino para su eliminacin. Secreciones internas de las glndulas: El plasma se encarga de trasportar las hormonas secretadas por las glndulas.

RECOLECCION DE ESPECMENES SANGUNEOS La sangre es el fludo corporal ms utilizado con fines analticos. Los tres procedimientos habituales para obtener la sangre son: Puncin cutnea Puncin venosa Puncin arterial

La tcnica utilizada para la obtencin de muestras de sangre es fundamental para realizar correctamente el estudio clnico que se desea realizar. En cualquier caso; la sangre arterial y la sangre venosa se diferencian en algunos aspectos que deben ser tenidos en cuenta. La sangre que ha sido oxigenada por el pulmn, es bombeada por el corazn hacia los rganos y tejidos para cubrir las necesidades metablicas. Esta sangre arterial tiene una composicin prcticamente uniforme en todo el organismo. Por el contrario; la composicin de la sangre venosa vara segn la actividad metablica del rgano o tejido perfundido por lo que la composicin de la sangre venosa es diferente segn el punto en que se extrae. La sangre venosa tiene mucho menos oxgeno que la arterial, adems vara en sta el factor pH, su concentracin de CO2 y su hematocrito (concentracin de eritrocitos en relacin con el plasma). Vara tambin en ocasiones la concentracin de glucosa, cido lctico, cloro y amonio. La sangre obtenida por puncin de la piel, que a veces se denomina incorrectamente sangre capilar, es una mezcla de sangre procedente de arteriolas, vnulas y capilares y ,por tanto, es en parte arterial y en parte venosa. El aumento de presin en las arteriolas hace que la muestra sea ms rica en sangre arterial. La sangre de puncin cutnea tambin contiene lquido intersticial y lquido intracelular.

PUNCION CUTANEA Es el mtodo ms utilizado en los pacientes peditricos, especialmente en los lactantes. La excesiva cantidad de sangre extrada mediante venopuncin puede provocar anemia especialmente en nios prematuros. Por otra parte la puncin de venas profundas en pacientes peditricos tambin puede condicionar, ocasionalmente: paro cardaco, hemorragia, trombosis, gangrena por constriccin venosa, lesin de tejidos e infeccin. La puncin cutnea resulta til en adultos aquejados de obesidad extrema, quemaduras graves, y tendencia trombtica, tambin este tipo de puncin suele utilizarse en pacientes geritricos. PUNCION VENOSA Es el principal mtodo de extraccin sangunea para realizar anlisis clnicos. A partir de sangre sin anticoagulante se obtiene SUERO, si la sangre contiene anticoagulante se obtiene PLASMA, del plasma forma parte el fibringeno, sustancia de la que carece el suero. Por otra parte la separacin inmediata del plasma o suero de las clulas es importante para obtener resultados ptimos en el anlisis clnico. PUNCION ARTERIAL La sangre arterial se utiliza para medir la tensin del oxgeno y dixido de carbono, as como para establecer el pH. Las determinaciones de gases en la sangre (gasometra) son fundamentales en el estudio de los problemas de oxigenacin que se producen en las enfermedades como la neumona, la neumonitis, la insuficiencia respiratoria y la embolia pulmonar. Las punciones arteriales son tcnicamente ms difciles y de mayor riesgo clnico que las punciones venosas.

HEMOGLOBINA La hemoglobina (Hb), componente principal de los glbulos rojos, es una protena conjugada que sirve de vehculo para el transporte de oxgeno y de CO2. Cuando la hemoglobina est totalmente saturada, cada gramo contiene alrededor de 1.34 ml de oxgeno. La masa de los eritrocitos de un adulto contiene 600 g de hemoglobina capaz de transportar 800 ml de oxgeno. Una molcula de hemoglobina consta de dos pares de cadenas polipeptdicas (globina) y cuatro grupos prostticos hem que contienen cada uno un tomo de hierro ferroso. Cada grupo hem se localiza precisamente en una determinada zona de una de las cadenas de polipptidos. Localizado cerca de la superficie de la molcula, el hem se combina de forma reversible con una molcula de oxgeno o dixido de carbono. La principal funcin de la hemoglobina es el transporte del oxgeno de los pulmones, donde la tensin del oxgeno es elevada, hacia los tejidos, en donde es baja. A una tensin de oxgeno de 100 mm de Hg, en los capilares pulmonares, el 95 al 98% de la hemoglobina se combina con el oxgeno. En los tejidos, donde la tensin del oxgeno puede descender hasta 20 mm de Hg, el oxgeno se disocia fcilmente de la hemoglobina; en este caso menos de un 30% puede permanecer combinado con la hemoglobina. La hemoglobinometra es un mtodo para medir la concentracin de

hemoglobina en la sangre. La anemia, una disminucin de la concentracin de hemoglobina por debajo de lo normal del recuento de eritrocitos o del hematocrito, constituye una alteracin muy corriente y una frecuente complicacin de otras enfermedades. El diagnstico clnico de anemia basado en la estimacin del color de la piel y las mucosas visibles es de poca garanta. Para hacer la cosa ms complicada, la anemia suele estar enmascarada, en muchos procesos, por otras manifestaciones. En una extensin limitada pueden aplicarse consideraciones similares a procesos con valores de hemoglobina anormalmente elevados. Por todas estas razones, la estimacin correcta de la hemoglobina es importante y la hemoglobinometra es una de las pruebas habituales que debe llevarse a cabo prcticamente en todos los pacientes.
Determinacin de la concentracin de hemoglobina. El mtodo ms empleado es el de la cianometahemoglobina, otros mtodos son: el de la oxihemoglobina y el que mide el contenido de hierro Mtodo de la cianometahemoglobina. Principio: El ferricianuro potsico oxida la hemoglobina a metahemoglobina y el cianuro potsico proporciona los iones cianuro (CN-) para formar cianometahemoglobina que tiene una absorcin mxima a 540 nm. La capacidad de absorcin de la solucin se mide en un espectrofotmetro a 540 nm y se compara con la de una solucin estndar.

ESPECTROFOTMETRO
Qu es un Espectrofotmetro? Un espectrofotmetro es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz de Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz, separndolo en facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su energa. Su eficiencia, resolucin, sensibilidad y rango espectral, dependern de las variables de diseo y de la seleccin de los componentes pticos que lo conforman. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida. El color de las sustancias se debe a que estas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas, y slo vemos aquellas longitudes de onda que no fueron absorbidas. Componentes de un espectrofotmetro 1. Fuente de luz

La misma ilumina la muestra. Debe cumplir con las condiciones de estabilidad, direccionabilidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son lmpara de tungsteno y lmpara de arco de xenn. 2. Monocromador Para obtener luz monocromtica, constitudo por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin. El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto. 3. Fotodetectores En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mviles del equipo.

UTILIDAD Los espectrofotmetros son tiles debido a la relacin de la intensidad del color en una muestra y su relacin a la cantidad de soluto dentro de la muestra. Por ejemplo, si usted utiliza una solucin del colorante rojo del alimento en agua, y mida la cantidad de luz azul absorbida cuando pasa a travs de la solucin, una fluctuacin mensurable del voltaje puede ser inducido en una fotoclula en el lado opuesto. Si ahora la solucin del tinte rojo es diluida por la adicin del agua el color ser menos intenso. As, hay una relacin entre el voltaje y la cantidad de tinte en la muestra. El espectrofotmetro tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de una longitud de onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al experimentador obtener informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. Esto podemos lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma. Como cada sustancia tiene unas propiedades espectrales nicas, distintas sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de tomos tridimensional particular que hace que cada sustancia tenga caractersticas nicas. Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. La concentracin es proporcional a la absorbancia, segn la Ley Beer-Lambert: a mayor cantidad de molculas presentes en la muestra, mayor ser la cantidad de energa absorbida por sus electrones. Abs = K C L Abs: absorbancia

K: coeficiente de extincin molar C: concentracin L: distancia que viaja la luz a traves de la muestra. (normalmente es de 1 cm) La cuveta promedio, que guarda la muestra, tiene dimensiones internas de un centmetro (L). La ecuacin describe una lnea recta, donde el origen es cero. Si L es constante (1.0 cm) y se conoce el valor de K, podemos calcular C en base a Abs: Abs / K L = C

TIPOS DE ESPECTROFOTMETROS Absorcin Atmica De emisin Ultravioleta Infrarrojo

Ejemplos de distintos tipos de Espectrofotmetros

ESPECTROFOTMETRO SMART SPECTRO Porttil e ideal para anlisis de aguas. Seleccin automtica de longitud de onda. 40 test pre-programados y memoria para 25 test adicionales ESPECIFICACIONES: Rango de longitud de ondas: 350-1000nm Exactitud de longitus de onda: 2nm Resolucin: 1nm Monocromador: red de difraccin de 1200 lneas/mm Fuente de luz: lmpara halgena Detector: fotodiodo de silicio Rango fotomtrico: -0,1 a 2,5 Abs. Exactitud fotomtrica: 0,005 Abs. Modos de medicin: %T, Abs. y concentracin Admite celdas de 25mm de dimetro y cubetas de 10mm Dimensiones: 35 x 28 x 17cm Peso: 4,65kg

ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCIN ATMICA Rango de longitud de onda: 190 a 860 nm - Paso de banda espectral: 0,2 n a 200 nm Dispersin lineal recproca: . a 200 nm - 0,1 nm/mm . a 800 nm - 0,4 nm/mm - Efecto Zeeman, longitudinal inverso - Atomizacin: calentamiento transversal del horno de grafito, calentamiento elctrico - Rango de medidas de: . Absorbancia -0,5 a 2000 . Concentracin 0,0001 a 9999 unidades de concentracin . Factor de expansin 0,01 a 100 . Tiempo de lectura 1 a 60 segundos . Tiempo de demora 0 a 60 segundos

ESPECTROFOTMETRO UV-VISIBLE UVMINI-1240 Aplicaciones Estndar con Espectrofotmetro UV Mini Modo fotomtrico para longitud de onda fija

Con el modo fotomtrico, Ud. puede medir la absorbancia o la transmitancia en la longitud de onda fija. Anlisis cuantitativo fijo usando el mtodo Factor-K. Los Resultados son automticamente impresos o son mandados al puerto RS-232C. Modo espectro para barrido de longitud de onda

Con ese modo estndar, Ud. puede lograr espectro UV-Visible completo de muestras de 190nm a 1100nm. El Barrido repetido le permite a Ud medir automticamente cualquier cambio espectral en todo el rango. Modo cuantificacin para anlisis de longitud simple

Este modo le permite a Ud. preparar una curva de calibracin para determinaciones fciles de concentraciones de muestras desconocidas. Estn disponibles en modos de uno, dos o tres longitudes de onda. Los Mtodos cuantitativos posibles de seleccionar incluyendo factor-K, curva de calibracin de un punto o multi-puntos.

ESPECTROFOTOMETRIA UV-VIS TU 1800 UV-VIS SPECTROPHOTOMETER El TU1800/1800S es el ms popular espectofotmetro. Su ptica adopta el sistema de medicin SPLIT-BEAN con un detector formado por dos fotodiodos de estado slido de alta sensibilidad. Las operaciones del instrumento estan controladas a travs de un microchip interno en conjunto con una pantalla de cristal lquido (LCD) y un teclado Soft-Touch con salida para impresora. Su compartimiento es para 8 celdas y adems posee una fuente de luz accesible. El TU1800/1800S efecta mediciones fotomtricas, mediciones espectrales y cuantitativas, es fcilmente operable con caractersticas sobresalientes, Escaneo de longitudes de onda automtico entre 1100-200 nm., chequea automticamente la lnea de base.