Aula Permanente de Ciencias de la Salud Mojcar 2009

Universidad de Granada
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TOXICOLOGIA : DETERMINACION DE
DROGAS DE ABUSO


1. INTRODUCCIN

El uso de sustancias capaces de modificar el estado de nimo, la percepcin de la realidad e
incluso el propio flujo del pensamiento es tan viejo como la humanidad.

En el Nuevo Mundo, los indios andinos siempre han masticado hojas de coca para
aumentar su resistencia fsica a la fatiga. Algunas tribus de nativos americanos han usado el
peyote, un hongo alucingeno, en rituales mgico-religiosos. La antigua China difundi
ampliamente los placeres exticos del opio.

En la civilizacin occidental actual, slo se considera legal el uso de la cafena, la
nicotina y el alcohol. Pero no siempre ha sido as. Por ejemplo, durante la ltima mitad del siglo
XIX, el inters por la cocana se generaliz y se promovi su uso para el tratamiento de
numerosas enfermedades, contando con numerosos defensores dentro del rea mdica. El
propio Sigmund Freud lleg a publicar entre 1884 y 1887 una serie de trabajos sobre la coca y
cocana de gran repercusin en la clase mdica de la poca. A finales del siglo XIX la cocana
apareca en una gran variedad de medicinas patentadas, desde gotas para los dolores de
muelas hasta remedios para las hemorroides. La misma Coca-cola, bebida smbolo de
Occidente, fue introducida en 1886 por John Pemberton como tnico y tratamiento contra la
jaqueca. Su composicin fue originariamente un jarabe a base de coca con la adicin de
cafena. Conforme fue generalizndose su consumo, se hizo cada vez ms evidente su alto
poder adictivo y la toxicidad asociada a su consumo. A finales de los 1880, Freud y otros
especialistas modificaron sus opiniones, publicando trabajos sobre la capacidad adictiva de la
cocana.

2. CONCEPTO

Desde el momento en que nuestra sociedad acepta como legales algunas drogas y como
ilcitas otras, es muy difcil formular una definicin correcta y aceptada del amplio trmino
droga y, ms an, del concepto de droga de abuso. Siguiendo el diccionario, se entiende por
droga: una serie de sustancias naturales o de sntesis con propiedades estupefacientes,
alucingenas o excitantes que provocan en diversa medida el fenmeno de la
drogodependencia. La Organizacin Mundial de la salud (OMS) define la droga como toda
sustancia que introducida en un organismo vivo puede modificar una o varias de sus funciones
y es susceptible de crear dependencia, y que puede a la vez provocar tolerancia.. No obstante,
debe sealarse que en esta definicin cabran sustancias como el caf, alcohol y tabaco.

En 1950, la OMS defini drogodependencia o toxicomana como un estado de
intoxicacin crnica o espordica, negativa para el individuo y para la sociedad, producto de la
ingesta repetida de sustancias farmacolgicamente activas, entre cuyas principales
caractersticas estaran:

- Un deseo irrefrenable de continuar ingiriendo la sustancia y de obtenerla por
cualquier medio.
- Una tendencia a incrementar la dosis.
- Una dependencia psicolgica y a veces fsica a los efectos de la sustancia.

3. CONSUMO DE DROGAS. EFECTOS

La ingestin de drogas lleva a dos tipos de efectos:

- Efectos agudos: se producen en los minutos o en las horas sucesivas al consumo.
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- Efectos crnicos: como resultado de un consumo prolongado en el tiempo,
variando ampliamente segn la droga consumida, la dosis, la pureza de la droga, el
estado nutricional y emocional del consumidor...

Los efectos relacionados con la ingestin de las drogas siempre son duales:

- Un efecto reforzador, placentero, debido a los beneficios primarios (placer) y
secundarios (euforia, tranquilidad...) que la droga produce.
- Un segundo efecto aversivo, en cuanto se constituye en castigo para el
consumidor: mareos, vmitos, sentimiento de culpa, crisis de abstinencia...

A pesar de los efectos negativos, el consumidor vuelve habitualmente a consumir la droga. La
ingestin le produce cierto tipo de placer y esto aumenta la necesidad de consumo

El consumo crnico produce una acumulacin de efectos placenteros y aversivos al mismo
tiempo, acompandose de distintos factores especficos:

- Tolerancia: Para experimentar el placer obtenido en consumos anteriores, la dosis
debe aumentarse o cambiarse a otra ms fuerte, aumentando de esta manera las
sensaciones de placer y aversin.
- Dao orgnico: Casi todos los rganos vitales llegan a daarse, prioritariamente el
cerebro.
- Compulsin: La obtencin de placer-castigo hacen al consumidor obsesivo-
compulsivo. Por muchas veces que lo intente, es difcil dejar de consumirla.
- Dependencia: La droga, que al principio era un medio, se ha convertido e un fin; la
persona se ha convertido en dependiente.
- Crisis de abstinencia: Cuando el consumidor, mucho ms si es dependiente, deja
de consumir por cualquier razn, estas drogas le producen una serie de
fenmenos, a nivel fsico y psquico, acompaados de dolor e incluso enajenacin.

Pero no slo deben tenerse en cuenta los trastornos sanitarios que provocan las
distintas drogas de abuso, sino todos los problemas mdico-sociales que su uso condiciona.
Las relaciones interpersonales suelen empobrecerse. Las conductas compulsivas agresivas o
verdaderamente violentas, junto con la alteracin evidente de la percepcin de la realidad,
obvia y claramente determinan una incapacidad laboral en mayor o menor grado.

CLASIFICACIN
ESTIMULANTES: Cocana, anfetaminas, nicotina...
DEPRESORAS: opiceos, barbitricos, alcohol, Benzodiazepinas..
PERTURBADORAS DEL SNC: LSD, mescalina...
OTRAS: Cannabis (D y A), PCP (D y A), xtasis (A y E)

4. FARMACOLOGA

La deteccin de una droga depende de diversos factores, entre los que se incluye la potencia
de la misma, la va de administracin, la absorcin interna, su distribucin por el organismo, su
metabolismo y las vas de eliminacion.

A. Va de administracin

Las drogas se pueden ingerir, fumar, inyectar, inspirar (esnifar) o inhalar, y tambin
absorberse a travs de las mucosas del ano, la vagina o la boca, por absorcin
sublingual. La va de administracin utilizada afectar a la intensidad y rapidez de los
efectos, ya que tiene gran influencia sobre la absorcin de la droga y, en consecuencia,
sobre la permanencia de sus metabolitos en los fluidos biolgicos.




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Absorcin

Cualquiera que sea la va de administracin utilizada, es necesario que la droga
alcance el torrente sanguneo para que haga su efecto. La va endovenosa tiene una
absorcin del 100%. El sniffing, el humo y la administracin sublingual provocan una
rpida absorcin. No es este el caso de la va oral, ya que en sta, la absorcin puede
verse influenciada por el pH gstrico, por la ingesta simultnea de alimentos y por las
caractersticas fsico-qumicas de la droga. Todava es ms lenta la absorcin tras la
administracin subcutnea o rectal.

B. Distribucin

La circulacin sangunea realiza la distribucin de la droga absorbida a los tejidos y
rganos. Cada sustancia se une en distinta medida a las protenas plasmticas y estn
dotadas de una mayor o menor afinidad por las grasas o el agua. Estas caractersticas
determinan a su vez una mayor o menor tendencia de cada droga a distribuirse por los
tejidos o a permanecer en la circulacin y a ser metabolizada o excretada.

C. Metabolismo

Las drogas tienden a metabolizarse, sobre todo a nivel heptico, a compuestos ms
hidrosolubles y, en consecuencia, ms fcilmente eliminables a travs de los riones.
Por tanto, la permanencia en la circulacin sangunea de los metabolitos de estas
drogas est influenciada por la edad, el sexo, hepatopata, hbito tabquico, alcohol y
el consumo concomitante de otras drogas o frmacos que interaccionen.

D. Eliminacin

La va de excrecin ms importante para las drogas y sus metabolitos relacionados es
la renal. Por lo tanto, la orina constituye la muestra de eleccin en el screening de las
drogas de abuso. Sin embargo, tambin el hgado elimina parte a travs de la bilis y las
heces; adems, se eliminan trazas de metabolitos a travs de la saliva, leche materna,
cabellos y pulmones.





5. DETECCIN DE DROGAS DE ABUSO

A. Tipo de muestra

El tipo de muestra empleado depende en parte del objetivo primario del anlisis. La
muestra preferida es la orina, por razones tcnicas y prcticas. Las drogas y sus
metabolitos, normalmente, presentan una concentracin mayor y se pueden detectar
durante ms tiempo en orina que en sangre.

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El suero es til para determinar el consumo reciente de drogas y se utiliza con
frecuencia como muestra en los anlisis toxicolgicos forenses y post-morten.

Los niveles de drogas en saliva parecen estar ms correlacionados con los de
suero y requieren tcnicas analticas ms sensibles, ya que su concentracin es menor.

Los extractos tisulares son tiles en los anlisis post-morten, donde no hay
disponibilidad de otro tipo de muestras.

El meconio, residuo slido que almacena el feto durante la gestacin, puede
llegar a ser ms sensible que la orina, y se emplea para reflejar el uso materno de las
drogas durante el tercer trimestre de l embarazo.

El anlisis del cabello, como mtodo sustitutivo de la orina, es controvertido. El
cabello permite detectar el consumo de drogas, especialmente la cocana, aunque se
haya consumido en meses anteriores, a diferencia de la orina, que slo permite
detectar el consumo realizado entre las 24 y las 72 horas antes de la toma de
muestras.

B. Deteccin y cuantificacin de drogas de abuso en orina: Problemtica y finalidad

La orina representa un producto normal del organismo que puede recogerse de forma
sencilla y no invasiva. Adems, las drogas y sus metabolitos se detectan fcilmente en
vehculos acuosos y se encuentran en la orina en mayor cantidad que en la sangre.
Por otra parte, la orina contiene muchas sustancias que potencialmente pueden
interferir y que, en la fase de recogida, puede ser fcilmente adulterada por el
drogodependiente. En resumen, la concentracin urinaria de un determinado metabolito
no est directamente relacionada con la concentracin del mismo en el suero.
Realmente, la concentracin urinaria de una determinada sustancia est enormemente
influenciada por el volumen urinario, que a su vez depende de la cantidad de agua
ingerida, de la actividad fsica desarrollada y de las condiciones climticas. De esta
forma, al variar la cantidad de agua excretada cambiar tambin la concentracin de la
droga. Esto explica que sea difcil para el laboratorio evaluar el tiempo transcurrido
desde la ltima administracin y la dosis consumida por el sujeto. En realidad, un
resultado positivo obtenido con un mtodo cualitativo indica slo que el sujeto ha
consumido una cierta cantidad de droga en un rango de tiempo variable y que va desde
algunas horas hasta un mes o ms, en relacin al tipo de droga consumida, la va de
administracin, la edad, el sexo, el peso corporal, la funcionalidad de los rganos
excretores y, eventualmente, la administracin concomitante de frmacos o de otros
estupefacientes.
Algunas pruebas inmunoqumicas comercializadas se limitan a ofrecer
respuestas del tipo positivo/negativo, expresando los resultados en trminos
cualitativos. Sin embargo, la ventaja de obtener resultados numricos est totalmente
evaluada por otros mtodos, entre los que cabe destacar el FPIA.

En la deteccin de drogas de abuso se distinguen dos niveles de anlisis: el de
screening y el de confirmacin. El fin de las pruebas de screening es eliminar las
muestras verdaderamente negativas, y evitar as, en el mayor nmero de posibles
casos, tener que recurrir a tcnicas de anlisis ms sofisticadas (pruebas de
confirmacin) y costosas en trminos de tiempo y dinero (HPLC, GC/MS). Adems, los
mtodos de screening permiten la ejecucin rpida de anlisis para un panel completo
de drogas de abuso:
Cannabis (TCH) Antidepresivos triciclicos
Phencyclidina (PCP) Cocaina
Anfetaminas Morfina (Opiaceos)
Benzodiacepinas Propoxyfeno
Metadona Metanfetamina
Extasis (MDMA) Barbituricos


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La valoracin de cada mtodo deber tener en cuenta algunas caractersticas:

- Especificidad: Capacidad de un sistema analtico de no dar positividad en muestras
que no contengan el analito a determinar. Sin embargo, a veces un cierto grado de
reactividad cruzada puede ser de utilidad: es el caso de las benzodiazepinas, por
ejemplo, que reconocen anticuerpos directos para toda la familia farmacolgica y
no para una sola molcula.
- Sensibilidad: Capacidad de un sistema de identificar la sustancia buscada en todas
las muestras que realmente la contengan. Es el lmite de capacidad de deteccin y
cuantificacin de una sustancia especfica presente en una muestra. El punto en el
cual el mtodo es incapaz de reproducir con exactitud el anlisis, debido a
interferencias o a limitaciones del instrumento, es la sensibilidad mnima del test.
Cuanto ms sensible sea un sistema analtico, ms capaz ser de detectar la droga
o sus metabolitos durante un periodo de tiempo ms largo o bien en presencia de
orina ms diluida. Esto es importante porque, mientras que un falso positivo puede
ser descubierto en las pruebas de confirmacin, el falso negativo se pierde.
- Valor umbral (cut-off): Establece qu concentracin de la droga debe estar
presente antes de que la muestra sea sealada como positiva por el sistema.

C. Mtodos de screening para la deteccin de drogas
La tecnologa bsica de todas las pruebas de screening es sustancialmente la
inmunoqumica, donde un antgeno marcado compite con otro no marcado por el
sitio de unin de un anticuerpo especfico. La principal diferencia entre los diversos
sistemas disponibles radica en el trazador: radiactivo en el radioinmunoensayo (RIA),
enzimtico en la tcnica de inmunoensayo mltiple enzimtico (EMIT) y fluorescente en
el inmunoensayo de polarizacin fluorescente (FPIA). La Inmunocromatografia es uno
de los metodos mas usados.

TCNICA DE INMUNOCROMATOGRAFA
C C T T S S
FUNDAMENTO DE INMUNOCROMATOGRAFA PARA DETECCIN DE ANTGENOS
TIRA NITROCELULOSA
Anticuerpo Anticuerpo anti anti- -anticuerpo anticuerpo
G G
Anticuerpo Anticuerpo anti anti- -drug drug
conjugado conjugado
G G
Anticuerpo Anticuerpo anti anti- -drug drug
G G


D. Importancia y caractersticas de los mtodos de confirmacin

Uno de los aspectos mdico-legales ms importantes en la determinacin de drogas en
lquidos biolgicos es la seleccin del mtodo y un oportuno cut-off segn el tipo de
valoracin que se solicita y de la finalidad del examen. En lo referente al mtodo, hay
unanimidad cientfica en considerar a los mtodos inmunoqumicos como idneos con
la posibilidad de variar el cut-off, ser capaz de expresar los resultados de forma
cuantitativa y no slo como positivo o negativo. La confirmacin de la positividad se
efecta con mtodos cromatogrficos.

1. Cromatografa de gases-Espectrometra de masas (GC-MS)

2. Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)

APLICACIONES DE LA DETERMINACIN DE DROGAS DE ABUSO
Finalidad: Diagnstico-teraputica
* Salud laboral
* Servicios de urgencias de hospitales
* Medicina forense
* Instituciones penitenciarias
* Programas teraputicos de desintoxicacin
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6. FASES DEL ANLISIS y CONTROL DE CALIDAD
A. PREANALTICA
Consentimiento del paciente, intimidad
Toma de muestra biolgica
Conservacin, contraanlisis
Cadena de custodia (muestras judiciales, medicina forense)
B. ANALTICA
Determinacin de la presencia de drogas o sus metabolitos en muestras
biolgicas recogidas en condiciones adecuadas
A. POSTANALTICA
Interpretacin de los resultados positivos
Se debern mantener los procedimientos analticos especializados e instrumentacin y el
personal deber estar debidamente entrenado para su trabajo. Los programas de control de
calidad diseados para controlar todas las actividades debern contemplar todo el proceso,
desde la toma de la muestra hasta la emisin del informe de los resultados. La interpretacin
de los resultados requiere que se est familiarizado con la farmacologa de las drogas y las
posibles interferencias por las condiciones de la muestra,el metodo analitico y la medicacion.