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DIPLOMADO: ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD MICROBIOLOGICA DE LOS ALIMENTOS REPORTE DE LABORATORIO Prctica N I: DIAGNOSTICO DE AEROBIOS MESOFILOS Tut r: Lic! Eric" San# $a%! R&a%i'a# ( r: Ing! ) *&+#a Cri,tina Van&ga, Ca,ti%% ! #& 2//3 #& 2//3
C-inan#&ga6 1uni
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OB1ETIVO GENERAL
R&a%i'ar &% Diagn.,tic #& Bact&ria, A&r *i , M&,.7i% , uti%i'an# %a 8&t # % g9a tra#ici na% #& i#&nti7icaci.n + r&cu&nt t ta% #& *act&ria, a&r *ia, M&,.7i% , a :/C! OB1ETIVOS ESPECIFICOS A(%icar % , c n ci8i&nt , t&.ric , a#;uiri# , (ara &% Diagn.,tic #& A&r *i , M&,.7i% ,! C t&5ar % , r&,u%ta# , *t&ni# , c n % , $a% r&, (&r8iti# , &n NTON ;u& ,& &,t uti%i'an# &n &% Pa9, (ara &$a%uar ,i &,tn #&ntr #& % , rang , ac&(ta# , (ara c n,u8 -u8an ! INTRODUCCION L , an%i,i, 8icr *i %.gic , , n r&a%i'a# , a% a%i8&nt 7r&,c (r c&,a# (ara $a% rar %a ca%i#a# c n ;u& &,t& (r #uct -a ,i# 8ani(u%a# ant&, #& %%&gar a% c n,u8i# r6 + a,9 a,&gurar,& ;u& &, un (r #uct a(t (ara &% c n,u8 -u8an !
!n r&cu&nt *a5 #& a&r *i , 8&,.7i% , no implica o no asegura la ausencia de patgenos o sus to"inas, de la misma manera un recuento elevado no significa presencia de flora patgena. !n r&cu&nt &%&$a# #& a&r *i , 8&,.7i% , puede significar E"cesiva contaminacin de la materia prima #eficiente manipulacin durante el proceso de elaboracin $a posibilidad de %ue e"istan patgenos, pues estos son mesfilos $a inmediata alteracin del producto El recuento de mesfilos nos indica las condiciones de salubridad de algunos alimentos
M<t # , uti%i'a# , (ara R&cu&nt #& A&r *i , M&,.7i% , M<t # #& P%aca F%ui#a: S& toma 1 ml de la muestra diluida, se coloca en
un plato petri, y se le adiciona el medio de cultivo preparado con anticipacin &no m's de 2 horas antes de utili(arlo) a una temperatura no mayor de *+ ,C, se homogeni(a moviendo el plato suavemente en c-rculos, se deja enfriar, hasta %ue la placa solidifi%ue. .ncubando a 30 ,C por 24 horas /e utili(a medios de cultivo como el 0gar 1utritivo, el 02C o un e%uivalente, sea el nombre seg3n la casa comercial %ue lo distribuya. M<t # #& (%aca #i7u,a: /e preparan los platos con anterioridad dej'ndolos a una temperatura d 38, C para %ue se deshidraten un poco y as- puedan absorber con mayor facilidad la muestra inoculada %ue en este caso es de 0.1 ml de muestra diluida. .ncubando a 30 ,C por 24 horas. E;ui( ,6 Mat&ria%&, + R&acti$ ,: 4. Estufa. 5. 0utoclave. 3. 6alan(as. *. Contador de colonias 7uebec. +. 6otellas de dilucin. 8. .ncubadora. 9. :orte". ;. 2latos petri. <. 2ipetas, 2ipetas aids. 40.Refrigerador 44.=ermmetros 45.>rea de trabajo. 43.?edios @ A02CB o un e%uivalente 4*.0sa espaciadora
2ara preCsecar y utili(ar las placas el mismo d-a vierta 5+ml del medio en el plato petri y se%ue en un flujo laminar sin cubierta a temperatura ambiente &5* @ 58C) asi consigue una perdida de 5C3g de agua. Di%uci.n #& %a 8u&,tra: 1. 2esar 50g de alimento &Camarn) 2. 0Dadir 450ml de solucin bufferada en una licuadora, y licuar durante 5 min. 3. /iendo esta nuestra dilucin 10-1 a partir de esta dilucin proceder a reali(ar dos diluciones m's 10-2, 10-3, en nuestra caso, per se pueden reali(ar m's si el alimento lo amerita. 4. !tili(ar pipetas est riles, y pipetas %ue no dejen el 10% de volumen en la pipeta, por ejemplo por ejemplo no utilice una pipeta de 40ml para pipetear 1ml, 5. =odas las diluciones ag-telas de manera vigorosa unos 10 segundos en un vorte". 6. 1o puede transcurrir m's de 15 min. para reali(ar las diluciones y la siembra 9. Evite tomar espuma como muestra. 8. 2ipetear de 0.1-0.5ml de cada dilucin sobre los agares preparados. <. Con la varilla de vidrio o pl'stico est ril distribuya el inoculo sobre la superficie del medio, girando el disco con la mano o con una placa giratoria. 40.#eje %ue el inoculo sea absorbido por el medio antes de incubar. 11. .ncubar a 35 C por 48horas.
En la muestra anali(ada se obtuvieron los siguientes resultadosF En los plato s de la dilucin 10-1 Plato N 1 - 10-1 4 40 4.0 x10
Plato N 2 - 10-1 En los plato s de la dilucin 10-2 Plato N 1 - 10-2 Plato N 2 - 10-2 En los plato s de la dilucin 10-3 Plato N 1 - 10-3 Plato N 2 - 10-3
90 9.0 x 10
1 1
<1 1
/iguiendo el procedimiento establecido por la norma se toman los platos de las diluciones %ue cumplen con el criterio de aceptacin = 30 > 300 colonias. La, #i%uci n&, ;u& ,& t 8aran (ara a(%icar %a 7 r8u%a , n %a, # , (ri8&ra, 10-1 y 10-2 1 G C H I&4 " n4) K &0.4 " n5)L H &d) 1 G 40+90+100+100 (1 x 2) + (0.1 x 2) / 10-1 N ? 15 Ufc / g
ANALISIS DE RESULTADOS /eg3n los resultados obtenidos el recuento de aerobios mesfilos en los 50 g de camarn anali(ados es de 15 U7c @ g, encontr'ndose este valor dentro de los criterios establecidos por nuestros compradores e"tranjeros AB1.0 x 10-5), pero en nuestro 2a-s actualmente las normas %ue establecen estos criterios microbiolgicos no tienen un valor especifico para este tipo de alimentos,
solamente cuando se refiere a pescados, moluscos, e%uinodermos y crust'ceos enlatados siendo el l-mite m'"imo permitido de < 10 U7c @ g. CONCLUSION /e reali( un an'lisis de aerobios mesfilos a una muestra de camarn y seg3n los resultados obtenidos en el conteo de colonias este alimento es apto para el consumo humano, seg3n los criterios establecidos de normas internacionales.
BIBLIOGRAFIA R&g%a8&nt T<cnic C&ntr a8&rican C RTCA 67. 04. 50: 08 Alim n!os. "#i! #ios $ic#o%iol&gicos 'a#a la Inoc(i)a) ) los Alim n!os