Alcoholes

RAFAEL URIBE ACEVEDO RESIDENTE 1er AO TOXICOLOGA CLNICA.

Derechos de autor, 2013. Solo para uso educativo, no para uso comercial. Prohibida su distribucin sin autorizacin de la Universidad de Antioquia.

Alcoholes
Son hidrocarburos que contienen un grupo OH.

El Etanol (CH3-CH2-OH) contiene el grupo OH en un carbono terminal.

Liquido, transparente, voltil, sabor quemante y olor cacterstico.

Alcoholes
El Etanol es sintetizado a partir de los carbohidratos por la enzimas zimasas de las levaduras.

Tambin puede ser formado por hidratacin del etileno o del acetileno Acetaldehdo el cual es hidrogenado para ETANOL.

Bebidas alcohlicas

Alcoholes
Alcohol metlico o Metanol (CH3OH)

Liquido incoloro e inflamable

Productos de la reduccin cataltica de CO y CO2 en presencia de Hidrogeno.

Limpiavidrios, barnices, tinner, anticongelantes, combustibles, bebidas alcohlicas ilegales.

Etanol
Alcohol deshidrogenasa

Metanol

Acetaldehdo

Formaldehdo
Aldehdo deshidrogenasa

Acetato
10 formil - THF

Formato
THF
CO2 y H20

Ley 1548 del 5 Julio de 2012

1er de embriaguez = 40 99 mg de etanol/ 100 ml de sangre total. 2do de embriaguez = 100 - 149 mg de etanol/ 100 ml de sangre total. 3er de embriaguez = 150 mg de etanol / 100 ml de sangre total. 20 39 mg de etanol / 100 ml de sangre total, sancin. Si no accede a la prueba = Sancin.

Determinacin De Etanol En Material Biolgico

Generalmente se analiza: Sangre
Orina Contenido gstrico Saliva Aire espirado

El mtodo ideal por sensibilidad , especificidad y tiempo es la cromatografa de gases < Costo

Determinacin De Etanol En Material Biolgico

Prueba rpida cualitativa para la determinacin de etanol en orina, mediante oxidacin por mezcla sulfocrmica. Deteccin cualitativa de etanol previa destilacin de la muestra. Determinacin cuantitativa de etanol en sangre por microdifusin. Determinacin cuantitativa de etanol en sangre por colorimetra.

Prueba Rpida Cualitativa Para La Determinacin De Etanol En Orina, Mediante Oxidacin Por Mezcla sulfocrmica.
Reactivos:
Disolver 4.262 gr de bicromato de K en 100 ml de AD Refrigerar y agregar 500 ml de [ acido sulfrico ] y diluir hasta 1 L de AD ( 1 ml = 1 mg etanol )

Patrn de alcohol etlico al 2%: 50 ml de AD en un frasco de 100 ml y agregar 2.53 de alcohol etlico absoluto (punta de la pipeta sobre la superficie el agua para evitar evaporacin del alcohol) y completar 100 ml con AD

Prueba Rpida Cualitativa Para La Determinacin De Etanol En Orina, Mediante Oxidacin Por Mezcla sulfocrmica.
Procedimiento:
2 tubos de ensayo en c/u 1ml del reactivo.

En 1 tubo 0,5 ml de sol. Patrn y en otro 0,5 ml de orina y dejar reposar 5. El color pasa de amarillo a verde o azul intenso de acuerdo ala concentracin del alcohol etlico de la muestra.

Prueba Rpida Cualitativa Para La Determinacin De Etanol En Orina, Mediante Oxidacin Por Mezcla sulfocrmica.
3C2H5OH + 2K2Cr2O7 + 8H2SO4

3CH3COOH + 2Cr2(S04)3 + 2K2SO4 + 11 H20

Detecta hasta 20 mg/% de alcohol en orina

Deteccin Cualitativa De Etanol Previa Destilacin De La Muestra

Muestra de sangre (2-10 ml) o orina (50-100ml) + 20 ml de sol. Saturada de Ac. Pcrico se diluye en 20 40 ml de AD y se destila para recoger unos 10 ml del destilado. Sobre alcuota de destilado se pueden efectuar os siguientes ensayos: Test de Yodoformo

Test de Vitali
Test de oxidacin con mezcla sulfocrmica

Deteccin Cualitativa De Etanol Previa Destilacin De La Muestra

Test de Yodoformo: 2 ml del destilado + 10 gotas de sol. NaOH al 10% y varias gotas de sol. De Yodo hasta tener un color amarillo persistente. R/ Aparicin de cristales de amarillos de yodoformo indica presencia de etanol, tambin la pueden producir otros alcoholes pero no el metanol

Deteccin Cualitativa De Etanol Previa Destilacin De La Muestra

Test de Vitali : Mezclar una pequea porcin del destilado con 1 lenteja de KOH en un vidrio de reloj + 2 gotas de sulfuro de carbono. Dejar enfriar. Despus de evaporarse el sulfuro de carbono se aade 1 gota de sol. Molibdato de amonio 10% y un exceso de cido sulfrico diluido. R/ Rojo = alcohol , la cetona y el acetaldehdo producen color similar.

Determinacin Cuantitativa De Etanol En Sangre Por Microdifusin.

Mtodo de winnic: Se basa en la difusin del alcohol de la muestra hacia la mezcla sulfocrmica, utilizando celdas de Conway. Equipos: Celdas de Conway - Mezcla sulfocrmica de dicromato de K 0,4N en cido sulfrico0,1N - Sol. Carbonato de K 20% - Sol de yoduro de K 0,3N en AD - Sol. De almidn al 2% - Sol. Tiosulfato de Na 0,1N

Determinacin Cuantitativa De Etanol En Sangre Por Microdifusin.

Procedimiento:
1.Colocar 0,5 ml de dicromato de K 0,4N en Ac. Sulfrico 0,1N en el compartimiento central de la celda

2. 1ml de de Sol. Carbonato de K 20% y 1ml de sangre en el compartimiento exterior

3.Sellar la celda con petrolato solido y ponerla a 50 C por 2 h.

Determinacin Cuantitativa De Etanol En Sangre Por Microdifusin.

Titulacin:
Enfriar la celda y poner 0,5ml de Sol. Yoduro de K 0,3N y 1

gota de Sol. De almidn en el compartimiento central y se titula con tiosulfato 0,1N, agitando con una varilla.
Hacer una blanco de reactivos con agua destilada (como la muestra) En el punto final se aprecia cambio de color verde oscuro a azul claro.

Determinacin Cuantitativa De Etanol En Sangre Por Microdifusin.

Calculo: La diferencia de las dos titulaciones multiplicada por 1,15 (factor de correccin) = cantidad de etanol en mgs en el volumen de muestra utilizada.

Determinacin Cuantitativa De Etanol En Sangre Por Colorimetra.

Se basa en en la oxidacin en medio cido con bicromato de K del etanol, que pasara completamente a cido actico. El exceso de bicromato se valora por colorimetra. Detecta de 1 10 mg de alcohol x Lt de sangre. Cantidad de muestra: 2ml de sangre oxalatada. Aparatos: Equipo de destilacin y colormetro. Reactivos: Sol. Saturada de Ac. Pcrico Sol. Acuosa de bicromato de K 0,5% y Ac. Sulfrico 1:1.

Determinacin Cuantitativa De Etanol En Sangre Por Colorimetra.

Procedimiento: 1.2ml de sangre oxalatada en 20ml de Sol. Saturada de cido pcrico. 2.Destilar y recoger de 9 10 ml, tomar 5 ml del destilado y agregar 5 ml de Sol. cido sulfrico. 3.Mezclar y calentar a 80c x 1 h. 4.Enfriar y leer en el colormetro a 600 mu

El color verde = Formacin de sulfato crmico x reaccin entre exceso de bicromato y Ac. Sulfrico.
La curva se prepara con estndares que tienen cantidades conocidas de etanol.

Etanol Por Microdifusin

Mtodo desarrollado para determinar la presencia de sus. Voltiles reductoras en muestras biolgicas y no biolgicas. Principio: Reaccin de Oxido-reduccin en la cual el alcohol presente en la muestra se difunde y reacciona con el agente oxidante (mezcla sulfocrmica) cambiando de color naranja a verde manzana.

El exceso de dicromato de la muestra es ledo espectrofotomtricamente y corregido con el blanco de prueba. Sensibilidad 30 mg / 100 ml y es lineal hasta 220 mg/ 100ml.

Etanol Microdifusin
Tipos de muestra: Sangre (puncin venosa, No alcohol antisptico) Orina Otros fluidos Biolgicos Alimentos lquidos Conservacin muestra de Sangre:
Recipiente con cierre hermticos Fluoruro de Na o EDTA

42C

Oxalato y citrato

Etanol Microdifusin
Reactivos: Mezcla sulfocrmica preparada con dicromato de K y Ac. sulfrico

Sol. Saturada de carbonato de K

Etanol absoluto Puntos de control: 3 horas de difusin. Sol. de trabajo 159,5 mg/100ml de etanol preparada a partir de etanol al 99.8% del cual a su ves se saca la sol. Madre de 319mg/100ml.

Etanol Microdifusin
Mtodo: Se procesan: 1 Estndar de 159,5 mg/100ml 1 Blanco 1 Control de calidad interno 1 La muestra que debe prepararse 1ro
A C B

Agua para sellar la celda 2ml de mezcla sulfocrmica 2 ml de Sol. Saturada de K2CO3 y 1 ml de muestra.

Celda de Conway

Etanol Microdifusin
1. Mezclar en forma suave la celda hasta que el compartimento C quede homogneo. 2. Incubar a T ambiente x 3 horas.
3. Tomar el contenido del B de c/da celda en un baln volumtrico de 10 ml con pipeta Pasteur y realizar sucesivos lavados hasta completar el vol. Del baln (10ml)

4. Leer en el espectrofotmetro a 450 nm y anotar.

Etanol Microdifusin
Calculo :
Conc. De alcohol Abs. Blanco Abs. Desconocido x Conc. Estndar = en la muestra Abs. Blanco Abs. Estndar

Resultado cuantitativo = [ ] de alcohol etlico en sangre .mg/100ml. En la prueba cualitativa el color verde manzana indica prueba +

Determinacin de metanol en material Biolgico

Muestras: Sangre 10 ml sin anticoagulante. Orina 100 ml. Contenido gstrico, vmito y residuos de botella de licor.

En ningn caso se deben contaminar con formol incluso muestra de vsceras.

Determinacin de metanol en material Biolgico

Determinacin cualitativa de metanol en sangre.

Tcnica cuantitativa por microdifusin de Feldstein y Klendshoj.

Microdifusin.

Determinacin Cualitativa De Metanol En Sangre

Reactivos: Ac. Sulfrico 25%
Permanganato de K N/5

Cloruro frrico al 10%

Leche Resorcinol (1-200) Bisulfito de Na anhidro Ac. Sulfrico concentrado

Sol. Saturada de Ac. pcrico

Determinacin Cualitativa De Metanol En Sangre

Procedimiento: 1.Poner la muestra en un baln de destilacin + 20 ml de sol. De Ac. Pcrico. 2.Recoger 10ml del destilado. 3.5 ml del destilado + 1 ml de Ac. Sulfrico 25% + 4 ml de permanganato de K. 4.Agitar y dejar en reposo 10 5.Filtrar y decolorar el exceso de permanganato con bisulfito de Na en polvo 6.Separar el filtrado en 3 tubos para las siguientes pruebas.

Determinacin Cualitativa De Metanol En Sangre

Reaccin de Ac. Cromotrpico:
3 ml del filtrado en el tubo + Ac. Cromotrpico (la punta de la esptula) y mezclar. Tubo inclinado, se le agrega 4 ml de Ac. Sulfrico por las paredes. Color purpura en la interfase = Presencia de formaldehdo Limite de la deteccin = 1 ppm

Determinacin Cualitativa De Metanol En Sangre

Reaccin de Hehner: A otro tubo con el filtrado se le agrega 1 gota de Cloruro frrico 10% Mezcla + 5ml de leche. Por las paredes 5 ml de [ Ac. Sulfrico ] R/ Anillo violeta en la interfase = Formaldehdo. Confirmacin: Otro tubo con filtrado se le agregan 8 gotas de sol. Resorcinol y 5 ml de [ Ac. Sulfrico ] Reposar 3 R/ Anillo Rosa en la interfase = Formaldehdo.

Limite de deteccin 3ppm

Tcnica Cuantitativa por microdifusin de Feldstein y Klendshoj.

Reactivos: Ac. Sulfrico al 10% (sol. Absorbente) Sol. Acuosa saturada de carbonato de K
Permanganato de K 5% Sol. Saturada de bisulfito de Na Ac. Cromotrpico al 0,5%

Tcnica Cuantitativa por microdifusin de Feldstein y Klendshoj.

Procedimiento: 1.Poner 2,2 ml de Ac. Sulfrico al 10% en el compartimento central.
2.1 ml de sangre + 1 ml de la sol. Carbonato de K en la cmara externa. 3.Cerrar y extender los reactivos por rotacin mesurada.

4.2 horas a temperatura ambiente.

Tcnica Cuantitativa por microdifusin de Feldstein y Klendshoj.

5. Colocar 1 ml de la sol. Absorbente en 2 tubos de ensayo. 6. A uno de los tubos agregar 1 gota de permanganato de K al 5% y dejar 10. 7. Agregar a c/da tubo 1 gota de sol. Bisulfito de Na y 0,2 ml de sol. de Ac. Cromotrpico al 0,5%. 8. Colocar los tubos en bao de hielo y agregar 4 ml de Ac. Sulfrico puro

Tcnica Cuantitativa por microdifusin de Feldstein y Klendshoj.

9. Mezclar refrigerando trasladara bao de mara x 15.

10. Enfriar y llevarlo a 10 ml en matrz aforado.

11. Determinar la densidad ptica a 580mu. que deber sustraerse del valor correspondiente al tubo no tratado con oxidante.

12. Preparar una curva con patrones diluidos en acido sulfrico al 10% en volumen.

Tcnica Cuantitativa Por Microdifusin De Feldstein Y Klendshoj.

Los resultados se multiplican por 1,21

Se puede determinar hasta 0,5 mg % de alcohol metlico

Previa destilacin de la muestra , se puede cuantificar el metanol con cromatografo de gases.

Metanol Microdifusin
Muestra: No utilizar alcohol como antisptico Sangre Total Tubo seco o con fluoruro de Na Almacenar a 4c Suero Licores Alimentos lquidos Principio: Reaccin de oxidacin del metanol a formaldehdo con permanganato, con la posterior formacin de un complejo (anillo) de color violeta tras la adicin de acido cromotrpico.

Limite de deteccin: 0,5 mg/ 100 ml

Metanol Microdifusin
Reactivos: Ac. sulfrico 10% Carbonato de k 20% Permanganato de K Bisulfito de Na en polvo. Ac. Cromotrpico en polvo.
A C B

Agua para sellar la celda 2ml de Ac. Sulfrico 10% 2ml de Sol. Saturada de K2CO3 y 1 ml de muestra.

Celda de Conway

Metanol Microdifusin
Para c/da muestra de debe hacer un control positivo y otro negativo. Prepara 1ro la celda de la muestra y luego el control positivo.

Mtodo: 1.Sellar el compartimento A con agua. 2.Agregar 2 ml de Ac. Sulfrico 10% al compartimento interno.
3.Agregar 2 ml de sol. Saturada de Carbonato de K y 1 ml de la muestra o AD (control neg) o control positivo en el C.

Metanol Microdifusin
4. Agregar 2 ml de sol. Saturada de Carbonato de K y 1 ml de la muestra o AD (control neg) o control positivo en el C. 5. Sellar la celda para evitar evaporacin. 6. Mezclar por rotacin suave y dejar difundir por 3 h a T ambiente. 7. Tomar el contenido del compartimento central con una pipeta Pasteur y distribuir en partes iguales en 2 tubos

Metanol Microdifusin
6. Marcar los tubos como 1 y 2 (oxidado) e identificarlos como: Muestra , control + , control -. 7. Colocar los tubos en una gradilla y procesar as:
Reactivos
Ac. Sulfrico 10% del B
KMnO4

Control negativo Control positivo Muestra Tubo 1 Tubo 2 (o) Tubo 1 Tubo 2 (o) Tubo 1 Tubo 2 (o)
1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

2 gotas

2 gotas

2 gotas

Esperar 1 minuto

Metanol Microdifusin
Control negativo
Tubo 1 Tubo 2 (o)
Cantidad tomada con la punta de la esptula

Control positivo
Tubo 1 Tubo 2 (o)
Cantidad tomada con la punta de la esptula

Muestra
Tubo 1 Tubo 2 (o)
Cantidad tomada con la punta de la esptula

Bisulfito de Na

Agitar los tubos hasta que haya decoloracin completa

Ac. Cromotrpico
La punta de la esptula La punta de la esptula La punta de la esptula La punta de la esptula La punta de la esptula La punta de la esptula

Mezclar bien
[Ac. Sulfrico] 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml

Esperar 5 min

Metanol Microdifusin
Resultados: Anillo violeta en tubo 1 = Formaldehdo

Anillo violeta en Tubo 2 (oxidado)= Metanol