FIBROSIS QUSTICA

SEMINARIO DE BIOQUMICA N 08
Docentes: Dr. Csar Guzmn Vigo Integrantes: Capuay Effio Leonardo

NDICE
Objetivos Resumen... Abstract.... Introduccin. A que se deben las infecciones respiratorias repetidas ?.............................................. A qu se debe la elevacin del Cloro en el sudor ? A qu se debe las heces voluminosas y ftidas del paciente?.......................................... En qu consiste la tcnica PLFR (polimorfismo longitudinal de fragmentos restrictivos)? Cules son las caractersticas de la protena CFTR.?..................................................... Qu papel tendra esta protena ?..................................................................................... Caso clnico Conclusiones... Bibliografa.....

OBJETIVOS
Conocer cmo afecta la fibrosis qustica Explicar a qu se deben ciertos eventos relacionados con la fibrosis qustica Dar a conocer la tcnica PLFR Comprender la funcin de la protena CFTR Explicar la funcin de dicha protena

RESUMEN

La fibrosis qustica es un trastorno hereditario caracterizado por la congestin pulmonar, as como la infeccin y mala absorcin de nutrientes por parte del pncreas Es una enfermedad de transmisin autonmica recesiva, se sabe que el gen defectuoso est localizado en el cromosoma 7 humano, conocido como gen regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis qustica (CFTR). Afecta fundamentalmente a los aparatos digestivo y respiratorio y suele caracterizarse por Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crnica (EPOC), insuficiencia pancretica y niveles muy elevados de los electrlitos del sudor. En la fibrosis Qustica, un defecto gentico altera una protena que regula la circulacin normal de sal entrando y saliendo de la clula. Como resultado se producen secreciones ms viscosas y pegajosas en las vas respiratorias y digestivas, sobre todo. Tambin hay un aumento de la cantidad de sal en el sudor. Como consecuencia de la produccin de secreciones espesas en los bronquios hay obstruccin de estos con riesgo alto de infecciones por bacterias, aparicin de neumonas recurrentes severas que van daando progresivamente el rbol bronquial con desarrollo posterior de bronquiectasias, destruccin progresiva del tejido pulmonar con mala oxigenacin del organismo y finalmente hipertensin pulmonar. La sospecha diagnstica se basa fundamentalmente en la presencia de las manifestaciones clnicas caractersticas y se debe confirmar mediante el estudio de electrolitos en el sudor.

PALABRAS CLAVE: Dominios transmembranales, Nucletidos, fibrosis, delecin, homocigotos, fibrosis qustica , electrolitos , espacio paracelular, Esteatorrea, ftido

ABSTRACT
Cystic fibrosis is an inherited disorder characterized by pulmonary congestion and infection and malabsorption of nutrients by the pncreas. It is an autosomal recessive disease transmission; it is known that the defective geneis located on human chromosome 7, known as conductance affects the regulator gene for digestive and cystic

fibrosis transmembrane regulator

(CFTR). It

mainly

respiratory

systems and is often characterized by chronic obstructive pulmonary disease (COPD), pancreatic insufficiency and very high levels of electrolytes in sweat. In cystic fibrosis, a genetic defect alters a protein that regulates the normal movement of salt in and out of the cell. As a result there are more viscous and sticky secretions in the respiratory and digestive tracts, especially. There is also an increase in the amount of salt in sweat. As a result of the production of thick secretions in the bronchi there is blockage of these high risk of bacterial infections, the appearance of severe recurrent pneumonia

are progressively damaging the bronchial tree with subsequent development of bronchiectas is, progressive destruction of lung tissue with poor oxygenation body and finally pulmonary hypertension. The suspected diagnosis is mainly based on the presence of clinical features and should be confirmed by the study of electrolytes in sweat. KEY WORDS: Transmembrane domains, Nucleotides, fibrosis, deletion, homozygous cystic fibrosis, electrolytes, paracellular space, steatorrhea, foul

INTRODUCCIN

La fibrosis qustica es una enfermedad autosmica recesiva, es decir para que un nio padezca la enfermedad es imprescindible que ambos padres le hayan transmitido el gen de la enfermedad. Afecta principalmente a los lbulos superiores. La fibrosis qustica tambin conocida como MUCOVISCIDOSIS que hace alusin, precisamente, a ese aspecto esencial de la enfermedad que ya he mencionado: el carcter viscoso del moco o de las secreciones que segregan estos enfermos.Aparece en 1 persona por cada 2000 o 3500 de raza blanca Se considera una enfermedad hereditaria, crnica y progresiva, que cuando se desarrolla plenamente, afecta, cuando menos, a tres sistemas del organismo humano: El pulmn ,el aparato digestivo y en especial, aunque no de forma exclusiva, al pncreas. A las glndulas sudorparas, es decir, las encargadas de producir sudor. El riesgo de tener otro hijo enfermo es del 25%, es decir 1 entre 4. El riesgo de tener un portador sano del gen de la FQ, del 50% (2 entre 4). Estos hijos aunque no padecen la enfermedad s que pueden transmitirla. La posibilidad de tener un hijo que ni padece la enfermedad ni es portador del gen (es decir que es sano y no va a transmitirlo) es del 25% (1 entre 4). El gen defectuoso que lleva al cuerpo a producir un lquido anormalmente espeso y pegajoso llamado moco. Este moco se acumula en las vas respiratorias de los pulmones y en el pncreas, el rgano que ayuda a descomponer y absorber los alimentos

RESOLUCIN DEL CUESTIONARIO

1. A qu se deben las infecciones respiratorias repetidas?

Por lo general, la fibrosis qustica es una enfermedad hereditaria autonmica recesiva que se caracteriza por infecciones pulmonares repetivas . Las manifestaciones respiratorias son la principal causa de morbilidad y mortalidad en la fibrosis qustica. En el aparato respiratorio se producen secreciones mucosas deshidratadas, extremadamente viscosas, que obstruyen las vas areas y secundariamente se infectan. La infeccin crnica persistente inicialmente es por Staphylococcus aureus y Haemophilus influenzae y finalmente coloniza la Pseudomonas aeruginosa

2. A qu se debe la elevacin del Cloro en el sudor?

La mayor parte de las mutaciones como la G542X o la F508 producen una FQ clsica , es decir una con insuficiencia pancretica exocrina, enfermedad pulmonar crnica, elevacin de los electrolitos en el sudor y por lo tanto asociados a formas graves de la enfermedad. Las alteraciones electrolticas producen un aumento del cloro y sodio en el sudor. El defecto se debe a una alteracin en el transporte de cloro a travs del epitelio de las glndulas sudorparas, vas areas, pncreas y glndulas intestinales. A nivel de las clulas epiteliales respiratorias se produce un transporte activo de cloro desde el intersticio hacia la luz y de reabsorcin de sodio en direccin opuesta, arrastrando agua por el espacio paracelular. El transporte de cloro y sodio se acompaa de modificaciones en la diferencia de potencial entre la clula epitelial y la sangre. La prdida de la funcin del CFTR (regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis qustica) significa que el cloro existente en el conducto de glndulas sudorparas no puede ser reabsorbido, lo que da una disminucin del gradiente electroqumico que permite normalmente que el sodio atraviese la membrana apical. Este defecto entonces induce a un incremento de concentraciones de sodio y cloro en el sudor.

3. A qu se debe las heces voluminosas y ftidas del paciente?

Las heces voluminosas y ftidas del paciente son producto de una insuficiencia pancretica, lo cual se presenta generalmente en un 80-95% en pacientes con fibrosis qustica. Esta enfermedad se trata de una disfuncin de las glndulas productoras de moco, trayendo consigo un problema de mal absorcin, como consecuencia, llega a bloquearse el conducto pancretico, se forman quistes en su interior, y termina incluso fibrosando todo el pncreas, por lo que no habr ni tripsina, ni lipasa, ni amilasa, entonces no podrn absorberse ni las grasas ni las protenas. Incluso la mantencin de un pH cido en segmentos altos del intestino facilitara la inactivacin de la lipasa y favorecera la precipitacin de sales biliares, contribuyendo an ms a la mal digestin de grasas. Todo esto clnicamente evidenciado como esteatorrea (deposiciones voluminosas, aceitosas y de muy mal olor).
Fig. Que ocurre en una insuficiencia pancretica

4. En qu consiste la tcnica del PLFR (polimorfismo longitudinal de fragmentos restrictivos).

Los detectores de DNA tambin pueden usarse paraencontrar secuencias de DNA ntimamente enlazadas al gen que interesa, pero en realidad no dentro de l.Los anlisis pueden extenderse a la identificacin devariaciones especficas de cromosomas (diferencias en la secuencia entre cromosomas homlogos). La digestin del DNA con una endonucleasa de restriccin genera diferentes mapas (patrones de fragmentosde DNA) de genes homlogos que contienen secuencias diferentes de bases. Este fenmeno se denomina"polimorfismo de la Longitud del fragmento de restriccin" (PLFR). En una enfermedad genticaligada a un polimorfismo de la longitud de restriccin,el portador de la enfermedad poseer un cromosoma con un gen normal y uno con un gen defectuoso. Cuando los fragmentos de restriccin se analizan y sondean, se detectan dos bandas de hibridacin (que es distinto a una sola banda cuando ambos genes sonidnticos). Los

descendientes

que

heredan el

cromosoma portador del defecto exhiben una sola banda

dehibridacin que difiere de la producida por cromosomas normales. El polimorfismo de longitud de fragmentos de restriccin (PLFR) se basa en el hecho de que las secuencias nucleotidicas de DNA de diferentes individuos no son idnticas. En realidad, uno de cada 103nucletidos es diferente, generalmente en una regin no codificante de DNA. Se genera un PLFR cuando una diferencia individual de este tipo crea o elimina un sitio de reconocimiento para una encima de restriccin. Si se crea un sitio extra, aparecen dos fragmentos de menor tamao que los habituales en una hibridacin Southernblot. Si se elimina un sitio, aparece un fragmento mayor en lugar de dos puntos pequeos. Este enfoque puede utilizarse para la deteccin indirecta de mutaciones causantes de enfermedades. Es importante comprender que el PLFR en s mismo no est relacionado con la mutacin. Estos pueden utilizarse como marcadores dentro de una familia para distinguir quin es propenso a ser portador de una mutacin causante de enfermedad y quien no lo es.

5. Cules son las caractersticas de la protena CFTR.

La protena tiene un peso molecular de 170,000 daltons y est conformada por dos dominios transmembranales (MSD1 y MSD2), con seis subdominios transmembranales (TM), dos dominios enlazadores de nucletidos (NBD1 y NBD2), un dominio regulador R. Se encuentra mayormente embebida en la membrana, que provee al canal o poro de intercambio de iones Cl - a travs de ella. Cada MSD est conformado por 6 hlices transmembranales y, aparte de los giros que intervienen entre las hlices TM 1 y 2 en el MSD1 y entre 7 y 8 en la posicin correspondiente en el MSD2.

Diagrama que muestra los cinco dominios de la CFTR.

La protena CFTR intacta forma un canal permeable de cloruro en la membrana externa de muchas clulas.

La estructura completa de la protena CFTR todava no se ha determinado experimentalmente. Esto es porque las protenas de las membranas, como CFTR, con regiones substancialmente hidrofbicas son extremadamente difciles de cristalizar, y la cristalografa de rayos x se puede realizar solo en protenas cristalizadas. Se han propuesto algunos modelos de la estructura de la protena CFTR por comparacin con otras protenas conocidas como transportadores ABC. Mientras que la mayora de transportadores ABC consisten de cuatro dominios (dos que atraviesan la membrana y dos dominios de enlace con nucletidos), la CFTR es la nica que se conoce que posee un dominio regulador. Las modificaciones en el dominio regulador, ya sea por adicin o remocin de grupos fosfato, se ha demostrado que controla el movimiento de iones cloruro a travs de la membrana. Con la CFTR normal, una vez la protena es sintetizada, es transportada al retculo endoplsmico (RE) y aparato de Golgi para procesamiento adicional antes de ser integrada en la membrana celular. Cuando la protena CFTR con la mutacin delta F508 llega al retculo endoplsmico, el mecanismo de control de calidad de este componente celular reconoce que esta protena no tiene la conformacin correcta y marca la protena como defectuosa para su degradacin. De esta manera, la delta F508 nunca llega a la membrana celular. Las personas que son homocigotos para la mutacin F508 tienden a tener los sntomas ms severos para la fibrosis qustica debido a la prdida crtica del transportador de iones cloruro. Esto altera el balance inico de sodio y cloruro y crea una capa de moco denso y pegajoso que no puede ser removida por los cilios atrapando bacterias, resultando en infecciones crnicas. Mientras que el mecanismo que lleva a dao pulmonar no esta completamente comprendido, las enfermedades pulmonares es la causa ms importante de morbilidad y mortalidad entre los pacientes de fibrosis qustica. Los dominios transmembrana forman un "canal de cloro". Cuando se produce una fosforilacin del dominio R y el ATP se uno a los 2 dominios NBF, el canal de cloro se abre y los iones Cl - salen de la clula.

6. Qu papel tendra esta protena (CFTR)?

Los avances en torno al conocimiento de la protena de regulacin de transmembrana de la fibrosis qustica (CFTR) han permitido entender mejor la fisiopatologa de sta enfermedad y la compleja relacin genotipo-fenotipo. Hoy se han reportado ms de 1710 mutaciones distintas de sta protena; sin embargo, slo algunas de ellas se asocian a enfermedad respiratoria. Se reconoce que CFTR es responsable de la adecuada secrecin y absorcin de electrolitos a travs del epitelio (no slo respiratorio); y por ello, la enfermedad se caracteriza por una secrecin defectuosa de Clepitelial y una absorcin de Na+ aumentada. Estudios recientes muestran que el CFTR interacta con otras protenas a travs de los dominios PDZ. Finalmente el rol de la protena CFTR en muchas condiciones especficas es motivo de investigacin actualmente. Por otro lado se sabe que la Fibrosis Qustica (FQ) es la enfermedad autosmica recesiva letal ms frecuente en la raza caucsica. Su evolucin crnica, progresiva y compromiso multisistmico presenta grandes variaciones fenotpicas entre individuos afectados. Un avance importante en el entendimiento de la FQ fue sin lugar a dudas la clonacin del gen en 1989. Este gen se encuentra localizado en el brazo largo del cromosoma 7 y codifica una protena de 1480 aminocidos denominada CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator) situada en la porcin apical de la membrana de las clulas epiteliales, que se expresa en las clulas secretorias, senos paranasales, pulmones, pncreas, hgado y tracto reproductivo. La protena CFTR fue descrita inicialmente como un canal de cloro (Cl-) regulado por AMPc y la proteinquinasa A (PKA). Se reconoce que CFTR es un regulador de otros canales Inicos. En clulas epiteliales normales sin FQ y en clulas recombinantes que sobreexpresan CFTR, las grandes corrientes de Cl-, a travs de la membrana, son activadas con el incremento en el AMPc intracelular. En registros de canales individuales con la tcnica patch-clamp (pinzamiento), se observan corrientes de Cl- dependientes de CFTR de baja conductancia que no pueden ser detectadas en clulas epiteliales provenientes de pacientes con FQ. La protena CFTR se expresa en la porcin luminal de las membranas de epitelios secretores y de absorcin, y cumple un rol predominante en la secrecin de electrolitos activada En clulas epiteliales normales sin FQ y en clulas recombinantes que sobreexpresan CFTR, las grandes corrientes de Cl-, a travs de la membrana, son activadas con el incremento en el AMPc intracelular. En registros de canales

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individuales con la tcnica patch-clamp (pinzamiento), se observan corrientes de Cl- dependientes de CFTR de baja conductancia que no pueden ser detectadas en clulas epiteliales provenientes de pacientes con FQ. La protena CFTR se expresa en la porcin luminal de las membranas de epitelios secretores y de absorcin, y cumple un rol predominante en la secrecin de electrolitos activada por AMPc y calcio (Ca2+) intracelular. CFTR constituye la va de salida luminal para Cl-, el que ha sido captado por el cotransportador Na+-K+-2Cl-. Adems de su funcin secretora, el CFTR tambin regula la funcin de electrolitos al controlar la actividad del canal de Na+ epitelial (ENaC) en clulas epiteliales de absorcin del colon, vas areas y conductos sudorparos.

Al contrario del colon y las vas areas, en los cuales el CFTR tiene un efecto inhibidor sobre la activacin de ENaC con la activacin por PKA, el CFTR es necesario para la activacin de ENaC en los conductos sudorparos. Secrecin defectuosa de Cl- y absorcin de Na+ aumentada en FQ

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La forma de interaccin de CFTR con ENaC y otros canales inicos an es desconocida y contina bajo investigacin. Dado que los defectos en CFTR llevan a una regulacin defectuosa del canal ENaC, la FQ se caracteriza por alteraciones en la secrecin y absorcin de electrolitos. En relacin con la enfermedad pulmonar de riesgo vital en pacientes con FQ, se han descrito dos mecanismos fisiopatolgicos importantes: 1) la secrecin alterada de Cl-, la cual se localiza de preferencia en las glndulas submucosas y 2) la absorcin aumentada de Na y la consecuente hiperabsorcin de electrolitos, la cual ocurre en el epitelio superficial.

En las vas areas normales, el transporte inico cambia desde una absorcin neta bajo condiciones de reposo a una secrecin neta cuando se expone a secretagogos. Sin embargo, las vas areas en pacientes con FQ son incapaces de aumentar su transporte secretor con estimulacin. Por el contrario, la conductancia de Na+ epitelial aumentada en membranas apicales, en forma paralela a una permeabilidad paracelular para Cl- y la elevada permeabilidad al agua no permite gradientes osmticos transepiteliales mayores, lo que lleva a hiperabsorcin en los epitelios FQ. Por lo tanto, la capa de lquido superficial de la va area (ASL) disminuye, las glndulas mucosas ya no son despejadas del mucus y el clearance mucociliar se ve fuertemente alterado en las vas areas con FQ. La expresin clnica de la FQ es causada por una gran cantidad de mutaciones distintas que afectan la funcin del CFTR en diferentes vas.

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CASO CLNICO
FIBROSIS QUSTICA

Paciente DE 18 aos, que por tercera vez al ao presenta un cuadro de fiebre, tos con expectoracin muco purulenta. Ha notado adems que sus heces se hacen ms voluminosas, ftidas y flotan en el inodoro. Le llama la atencin que por ms que come no aumenta de peso. Los exmenes de laboratorio mostraron:

Grasas en heces : 15 % Composicin Iontoforesis : Trigicridos. : 70 mmol / L de Cl en sudor (VN<50 mmol/L).

RESOLUCIN DEL CASO CLNICO

Uno de los principales sntomas que nos puede llevar a un diagnostico puede ser la tos con moco y las heces grasas malolientes. Los pacientes con fibrosis qustica presentan un aumento del contenido de sodio y cloro en el sudor.La fibrosis qustica es una enfermedad hereditaria que se caracteriza por una secreccion anormal de las glndulas exocrina de los bronquios, el intestino delgado, los conductos pancreticos, los conductos pancreticos, los conductos biliares y la piel. Casi todos los pacientes con fibrosis qustica tienen un contenido de sodio y de cloro en el sudor 2 a 5 veces superior a los valores normales. La forma clsica se caracteriza por establecerse ya dentro del primer ao de vida con sntomas catarrales ms o menos intensos pero recurrentes o constantes (pueden confundirse con tosferina y asma), deposiciones abundantes, ftidas y frecuentes, escasa ganancia de peso y talla, y sudoracin aparentemente excesiva y de sabor salado.

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El pacientes con fibrosis qustica una mala absorcin de las grasas e inhibicin de tripsina, lipasa, y amilasa, trae como consecuencia el no poder absorber ni las grasas ni las protenas, lo que se manifiesta en las heces caracterizadas por ser voluminosas, y de olor ftido.

CARACTERISTICAS COMPATIBLES CON FIBROSIS QUSTICA

1. Enfermedad crnica de los pulmones o los senos paranasales manifestadas por: Infecciones persistentes por grmenes propios de la FQ (existen microbios especialmente relacionados con las infecciones pulmonares en los pacientes con esta enfermedad). Tos crnica y expectoracin (expulsin de moco con la tos). Anormalidades persistentes en la radiografa del torax. Obstruccin de la va area manifestada por jadeo y atrapamiento de aire en el pulmn. Plipos nasales y anormalidades de los senos paranasales apreciables por radiografa o por tomografa axial computarizada. Acropaquias (engrosamiento de los dedos que simulan "palillos de tambor").

2, Anormalidades gastrointestinales y nutricionales: Intestinal: Ileo meconial, sndrome de obstruccin intestinal distal, prolapso rectal. Pancretico: Insuficiencia pancretica, pancreatitis recurrente. Hepticas: Enfermedad heptica crnica manifestada por evidencia clnica o histolgica (es decir a travs de la biopsia del hgado) de cirrosis biliar focal o cirrosis multilobular. Nutricional: Inadecuado crecimiento (malnutricin protico-calrica), hipoproteinemia (descenso de las protenas) y edema (hinchazn por retencin de lquidos), complicaciones secundarias de dficit de vitaminas liposolubles (vitaminas A,D, E y K).

CONCLUSIONES DEL CASO CLINICO El pacientes con fibrosis qustica una mala absorcin de las grasas e inhibicin de tripsina, lipasa, y amilasa, trae como consecuencia el no poder absorber ni las grasas ni las protenas, lo que se manifiesta en las heces caracterizadas por ser voluminosas, y de olor ftido.

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La fibrosis qustica es una enfermedad hereditaria que se caracteriza por una secreccion anormal de las glndulas exocrina de los bronquios, el intestino delgado, los conductos pancreticos, los conductos pancreticos, los conductos biliares y la piel.

El Pulmn: En la FQ ste moco es ms espeso de lo habitual por lo que se taponan bronquios y, como si de tuberas se tratase, se acumulan grmenes que sern origen de infecciones recurrentes. La lesin del pulmn se va instaurando de forma progresiva y, por mecanismos muy complejos, acaban daando secundariamente al corazn en etapas muy tardas.

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CONCLUSIONES

Una mutacin de un aminocido (falta una fenilalanina en la posicin 508) conduce a un fallo del transporte celular y localizacin en la membrana celular de la protena CFTR. El gen ("regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis qustica") est localizado en el brazo largo del cromosoma 7, en la posicin 7q31.2, ocupando 180.000 pares de bases. La mayor parte de las mutaciones como G542X o F508 producen esta fibrosis qustica clsica, en la cual las manifestaciones respiratorias son la principal causa de morbilidad y mortalidad. Tambin se produce una insuficiencia pancretica exocrina y elevacin de los electrolitos en el sudor En pacientes con fibrosis qustica una mala absorcin de las grasas e inhibicin de tripsina, lipasa, y amilasa, trae como consecuencia el no poder absorber ni las grasas ni las protenas, lo que se manifiesta en las heces caracterizadas por ser voluminosas, y de olor ftido. Se reconoce que CFTR es responsable de la adecuada secrecin y absorcin de electrolitos a travs del epitelio (no slo respiratorio); y por ello, la enfermedad se caracteriza por una secrecin defectuosa de Cl- epitelial y una absorcin de Na+ aumentada.

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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