Laboratorio de Biorreactores

Prctica No. 2

Pra ctica No. 2.

Instrumentacin y control en Biorreactores

Por:

Juan Manuel Salgado Romn

INTRODUCCIN
El crecimiento de un microorganismo en un biorreactor tiene que estar controlado, y el operador tiene que tener
suficiente informacin acerca del estado del microorganismo y las condiciones del biorreactor. Monitorear un
proceso de fermentacin podra necesitar conocimiento del bioproceso, as como de las condiciones en que se
lleva a cabo. Los Biorreactores operan en condiciones estriles y se obtiene informacin tomando muestras o por
mediciones in situ, es decir, que el sensor se encuentra en el interior del biorreactor en contacto con el medio de
cultivo evitando problemas de retardo o representatividad de la muestra, la medicin y control de las condiciones
de fermentacin son muy importantes para el control del bioproceso ya que proporcionan conocimiento y por
consiguiente un mejor entendimiento de la operacin. De los diferentes tipos de Biorreactores que existen el ms
comn es el tipo tanque agitado y las variables ms comunes que se miden son la temperatura, presin, pH y
oxigeno disuelto. Los sensores en el biorreactor proveen informacin del estado de los procesos y adems
proporcionan adecuadamente datos de operacin de las variables de proceso. Algunos fenmenos qumicos o
fsicos del biorreactor son convertidos a seales elctricas, las cuales son amplificadas y luego graficadas en un
monitor (o almacenadas) y usadas en la seal de entrada para una unidad de control.
Durante la fermentacin se pueden medir parmetros del tipo fsico, qumico y biolgico, y en Biorreactores
equipados la instrumentacin bsica puede proveer suficiente informacin para determinar la masa total, la
velocidad de agitacin, potencia y torque, potencial redox, concentracin de dixido de carbono disuelto y
velocidades de flujo de gas y lquido dentro del reactor. Mientras que el control bsico es sobre las variables de
temperatura, pH, concentracin de oxgeno disuelto, nivel de espuma y nivel del lquido.
El control se realiza segn el lazo de control tpico formado por el proceso (tanque, tuberas, y bombas en el caso
del nivel; e intercambiadores de calor y serpentn en el caso de control de temperatura) el transmisor, el
controlador y la vlvula de control.
Un circuito o lazo abierto de control es el camino que sigue la seal sin re-alimentacin, es decir, carece de un
detector de seal de error y de controlador. Mientras que el lazo cerrado de control es el camino que sigue la seal
desde el controlador hacia la vlvula de proceso y re-alimentndose a travs del transmisor hacia un punto de
suma con el punto de consigna.

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Una caracterstica importante de los instrumentos de medicin son la exactitud y la precisin. La exactitud es la
cualidad de medida por la que tiene a dar lecturas prximas al valor verdadero de la magnitud de medida, es decir,
es el grado de conformidad de un valor indicado a un valor estndar aceptado o valor ideal. Mientras que la
precisin es la cualidad de un instrumento por la que tiende a dar lecturas muy prximas unas a otra, es decir, es el
grado de dispersin de las mismas (el error). El error es la diferencia algebraica entre el valor ledo o transmitido
por el instrumento y el valor real de la variable medida.
Los instrumentos de medicin y control son relativamente complejos y su funcin puede comprenderse bien si
estn incluidos dentro de una clasificacin adecuada, se consideran dos clasificaciones bsicas: la primera
relacionada con la funcin del instrumento y la segunda con la variable del proceso. En funcin del instrumento
estn los instrumentos ciegos, instrumentos indicadores (puede leerse el valor de la variable), instrumentos
registradores (registran con trazo continuo o a puntos la variable), los sensores captan el valor de la variable de
proceso y envan una seal de salida predeterminada. El sensor puede formar parte de otro instrumento (por
ejemplo un transmisor) o bien puede estar separado. Tambin se denomina detector o elemento primario por estar
en contacto con la variable, por lo que utiliza o absorbe energa del medio controlado para dar, al sistema de
medicin, una indicacin en respuesta a la variacin de la variable. El sensor (o detector o elemento primario
convierte la energa de la variable en una forma adecuada para la medida) Los transmisores captan la variable de
proceso a travs de un elemento primario y la transmiten a distancia en forma de seal neumtica (de 3-15 psi) o
electrnica (4-20 mA de c.c.).

OBJETIVOS
Usar y manejar los instrumentos para la medicin y control de las variables de una biorreaccin, permitiendo la
colaboracin en conjunto.

OBJETIVOS PARTICULARES

Aprender a usar y manejar los electrodos de temperatura, pH y Oxgeno Disuelto empleados para medir la
concentracin de dichas variables en el biorreactor.

Identificar qu tipo de respuesta ejercen la consola sobre el biorreactor, para las diferentes variables de
proceso.

MATERIALES Y EQUIPO

Consola Applikon Ez-control

Biorreactor Tanque Agitado con tapa, mangueras y mantilla de calentamiento.

Electrodos de pH, Oxgeno Disuelto, Temperatura y de nivel.

Tres Botellas con solucin de NaOH, HCl y Antiespumante (Tween 80) una de cada una.

Dos parrillas de calentamiento.

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Dos vasos de precipitado de 1 L y una Probeta de 250 mL

Potencimetro con 3 soluciones buffer de pH 4, 7 y 10.

Termmetro de Mercurio (o metlico) de -4 a 110C.

Compresor de Aire y Tanque con gas N2.

Cuestionario Pre-laboratorio
1. Qu es lazo (o bucle) cerrado de control?
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2. Qu es elemento final de control?
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3 Menciona un ejemplo y cmo opera un elemento final de control?
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4. Menciona dos tipos de sensores que midan la concentracin de Oxgeno disuelto y su funcionamiento?
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5. En que consiste la Ley de Henry y para qu es utilizada, muestra valores a diferentes temperaturas?
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DESARROLLO EXPERIMENTAL.
Actividades previas.
1.- Calibrar un potencimetro y el termmetro de mercurio a usar.
2.- Preparar las soluciones de NaOH y HCl concentradas
Descripcin del sistema

Esquema
A. Control del pH de un medio de cultivo en el biorreactor.
1.- Siguiendo las instrucciones del profesor llenar el reactor con agua manteniendo una relacin H:D de 1:1
y conectar los sensores a la consola.
2.- Mida en una probeta el volumen de medio que se depositara en el biorreactor.
3.- Conecte el sensor de pHApplikon, los depsitos de cido y lcali y las mangueras a las bombas peristlticas
correspondientes dejando la lnea llena con la solucin.
4.- En la consola Ez-control establezca un valor de control (set point) de acuerdo al pH del medio, as como
un control automtico para el pH con un tiempo de accin/respuesta a intervalos de 3 minutos, adicionando
0.5 mL del fluido de control y una velocidad de agitacin de 100 r.p.m.
5.- Simule una reaccin de basificacin adicionando con una pipeta 1.5 mL de NaOH 6 N.
6.- Observe en la pantalla de la consola el comportamiento de la grfica y registrar el tiempo necesario en
que el pH regresa al valor establecido en el set point, registrar los datos en la tabla 1.
7.- Ahora simule una reaccin de acidificacin adicionando con una pipeta 2.5 mL de HCl 6 N.
8.- Repita el paso nmero seis.

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Tabla 1. Datos obtenidos en la simulacin de una basificacin y acidificacin.
Experimento:
basificacin
1
2
3
4
5
6

pH

T (C)

t(seg)

Experimento:
acidificacin
1
2
3
4
5
6

pH

T (C)

t(seg)

B. Control del aumento de temperatura provocado por una fermentacin exotrmica

1.- Mantener el medio de cultivo a un pH entre 7 y 9, conectar la mantilla de calentamiento y el serpentn a
las mangueras con agua de refrigeracin (asegrese que el agua fluya por las tuberas).
2.- En la consola fijar el set point de temperatura a 28C; y una velocidad de agitacin de 100 r.p.m.
3.- En un vaso de precipitado calentar a 50C un volumen de agua igual al 10% del volumen contenido en
el biorreactor.
3.- Adicionar cuidadosamente el agua dentro del tanque y ver cmo se comporta los elementos finales de
control, registrar los valores de la temperatura en la tabla 2.
4.- Una vez que el medio del tanque llegue a la temperatura del set point adicione un volumen de agua
igual al 10% del volumen contenido en el biorreator a una temperatura de 4C.
Tabla 2. Datos obtenidos en la simulacin de una fermentacin exotrmica.
Experimento

m1 (g)

m2 (g)

T1 (C)

t(seg)

T (C)

1
2
3
4
5
6
7
8
9
C. Calibracin del sensor de O.D.
1.- Conectar el sensor de O.D. a la consola, a la tubera de aire comprimido y el rotmetro; y abrir la
vlvula para que el gas fluya durante 20 minutos para saturar con ste gas el medio de cultivo; a una
velocidad de agitacin de 100 r.p.m.
2.- En la pantalla de la consola navegar por el men hasta la seccin de calibracin del sensor de oxgeno,
una vez que la medicin con el sensor sea estable fijar el valor superior de oxgeno, es decir, el 100%.

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3.- Cambiar la lnea de aire comprimido por la del tanque de N2 as como tambin para el rotmetro, abrir la
vlvula y dejar que fluya el gas hacia el interior durante 10 minutos para saturar con ste gas el medio de
cultivo.
4.- En la pantalla de la consola navegar por el men hasta la seccin de calibracin del sensor de oxgeno,
una vez que la medicin con el sensor sea estable fijar el valor inferior de oxgeno, es decir, el 0.0%.
5.- Cierre el flujo d nitrgeno y observe que sucede con el valor del oxgeno disuelto.
D. Control del nivel debido por formacin de espuma.
1.- Al medio de cultivo del reactor agregue una cantidad de detergente equivalente al 0.2% (relacin p/v) a
temperatura ambiente, establezca una velocidad de agitacin de 200 r.p.m. y una flujo de aire de 1.5 L/min.
2.- Conecte el sistema de control de espuma (varilla de nivel) y las mangueras con antiespumante (Tween20) a la bomba peristltica.
3.- Observe si con estas condiciones se forma espuma, de lo contrario aumente la velocidad de agitacin a
intervalos de 25 r.p.m. hasta una mximo de 400.
4.- Fije las revoluciones de agitacin que forma una mayor cantidad de espuma; realice sus observaciones y
anotaciones en la tabla 3.
Tabla 3. Sistema de monitoreo y control en Biorreactores.

Oxgeno Disuelto

p.H.

Temperatura

Biorreactor.
Sensor
Control
Notas

Sensor
Control
Notas

Sensor
Control
Notas

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Nivel de espuma

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Sensor
Control
Notas

Cuestionario Pos-Laboratorio
1. Adems de las variables de temperatura, pH, O.D. y nivel que otras variables se pueden medir mediante
sensores?
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2. Cmo se relaciona el % de oxgeno disuelto con la concentracin en mg/L?
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3. Cul es el fenmeno fisicoqumico por el que el antiespumante elimina la espuma?
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4. Menciona el fundamento de los termopares, el efecto combinado el Peltier (1834) y el efecto Thomson.
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REFERENCIAS
1) Creus S. Antonio (2010). Instrumentacin industrial, octava edicin. Editorial Alfaomega/ marcombo.
2) Najafpour Ghasem D. (2007), Biochemical engineering and Biotechnology, Primera edicin, Elsevier
B.V. ISBN-13: 978-0-444-52845-2
3) Stanbury P. F., Whitaker A. and Hall S. J. Principles of Fermentation Technology. Editorial ButterworthHeinemann, segunda edicin, Gran Bretaa (2000).
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