LABORATORIO DE BIORREACTORES

RAMREZ SENZ D., SALGADO ROMN J.M.

PRCTICA 3. AGITACIN Y MEZCLADO

INTRODUCCIN.
En la industria biotecnolgica existen numerosos procesos llevados a cabo en biorreactores, para los cuales
uno de los factores ms importantes a considerar es la homogenizacin de las materias primas a travs de la
eficaz agitacin y mezclado de estas. La agitacin se refiere al movimiento inducido de un material en una
forma especfica, mientras que el mezclado se define como la distribucin al azar de dos o ms fases
inicialmente separadas.
Dependiendo de los objetivos de la etapa del proceso, la agitacin puede cumplir una o ms finalidades, entre
las que se encuentran:
Mezclado de lquidos miscibles.
Dispersin dos lquidos inmiscibles para formar una emulsin o suspensin de gotas diminutas.
Dispersin de gases en lquidos, con subsecuente transferencia de masa; por ejemplo la distribucin de
oxgeno a los microorganismos para que se realicen apropiadamente sus actividades metablicas.
Suspensin y distribucin de slidos en lquidos.
Facilitacin de la transferencia de calor entre el lquido y un intercambiador de calor, como un
serpentn o una camisa.
Disminucin del tamao de gota de lquidos coalescentes.
Reduccin del tamao de partculas aglomeradas.
Un mezclado insuficiente puede causar regiones en las que haya altas concentraciones de inhibidores de
crecimiento, deficiencia de oxgeno o de algn otro nutriente, gradientes importantes de temperatura y pH,
que se pueden reflejar en la obtencin de bajas productividades y bajos rendimientos. Por ello, es importante
estudiar el efecto de las variables de operacin sobre el grado de mezclado que se pueda alcanzar en el
biorreactor, as como el tiempo de este.
El tiempo de mezclado es el lapso transcurrido desde el instante de la adicin de un trazador al tanque
mezclado, hasta que el contenido alcanza cierto grado de uniformidad, es decir, la concentracin del trazador
se hace constante y uniforme en el medio (figura 3.1).

Figura 3.1. Medicin del tiempo de mezclado.

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En la tabla 3.1 se realiza una breve descripcin acerca del patrn de flujo que se crea en los biorreactores tipo
tanque agitado, columna de burbujeo y airlift.
Tabla 3.1. Patrn de flujo formado en diferentes configuraciones de biorreactores.
SISTEMA
DESCRIPCIN
Tanque agitado
El impulsor crea un patrn de flujo en el sistema, dando
lugar a que el lquido circule a travs del tanque y
eventualmente retorne a este. Dependiendo del
tamao, geometra y proporciones del tanque, el tipo
de agitador y las caractersticas del fluido; el flujo global
puede ser axial, radial o tangencial.
Los tres principales tipos de agitadores son hlices,
palas y turbinas, los cuales resuelven posiblemente en
un 95% todos problemas de agitacin de lquidos (2).
Columna
La agitacin se lleva a cabo mediante el movimiento
ascendente de las burbujas de aire. El nmero y tamao
de las burbujas de aire dependen de la velocidad de
aireacin, de las propiedades fsicas del caldo de cultivo,
del tipo de dispersor, de la altura de la columna y de la
presencia de dispersores colocados a lo largo de la
columna.

Airlift

Recirculacin externa Recirculacin

interna

Los biorreactores airlift tienen en su interior al menos

una zona de flujo ascendente y otra de flujo
descendente. El movimiento del lquido se debe a que
en dichas zonas la densidad de la dispersin gas-lquido
es diferente porque hay mayor cantidad de aire en la
zona de flujo ascendente que en la de flujo
descendente. La diferencia de las fracciones de gas
retenido, es una medida de la diferencia de densidades
entre las dispersiones gas-lquido en dichas zonas, la
cual es la fuerza motriz para la circulacin del lquido en
el biorreactor.
El mezclado del lquido es predominantemente
producido por la circulacin del lquido y en menor
grado por la dispersin axial debida al ascenso de las
burbujas
de
aire,
por
lo
tanto
ocurre
sobresalientemente en las zonas de deflexin superior e
inferior, debido a las diferencias de velocidad ah
existentes.

OBJETIVO.

El alumno explicar los efectos de la agitacin y el mezclado en una biorreaccin y los relacionar con el tiempo
de mezclado y patrn de flujo.
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MATERIALES Y MTODOS.
EQUIPOS:
Tanque agitado.
Medidor de pH y temperatura con adquisicin
de datos en lnea.
Computadora y software para la adquisicin de
datos en lnea.
MATERIAL:
Cronmetros.
1 impulsor tipo propela marina de 7 cm de
dimetro.
1 impulsor tipo propela marina de 10 cm de
dimetro.
1 impulsores de hoja de 7 cm de dimetro.
1 impulsor de hoja de 10 cm de dimetro.
1 impulsor de 4 palas (45) de 7 cm de
dimetro.
1 impulsor de 2 palas (90) de 7 cm de
dimetro.

1 impulsor de 2 palas (90) de 10 cm de

dimetro.
10 g de bolas de unicel de 3mm dimetro
(puede sustituirse por algn otro material que
sea liviano).
1 cmara de video.
1 lmpara de escritorio.
1 probeta de 1 L.
Micropipeta de 1000mL y puntas azules.
2 pipetas de 10 mL.
Cinta metrica o flexmetro.
Cronometro.
REACTIVOS:
Solucin de NaOH 6 N.
Solucin de HCl 6 N.
Solucin de azul de bromocresol.
Soluciones reguladoras de pH, de 4, 7 y 10.
Agua corriente.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.
ACTIVIDADES PREVIAS:
1. Calibrar los electrodos (seguir las instrucciones del profesor y consultar el manual).
2. Tomar y registrar las medidas del tanque y de las mamparas (deflectores).
3. Verificar que la vlvula de salida del tanque se encuentre cerrada.
4. Llenar litro por litro el tanque y marcar la altura equivalente a cada uno.
5. Vaciar el tanque hasta alcanzar un volumen de operacin estndar (Relacin 1:1 D/H), esto es el
equivalente a 13.5 L.
6. Conectar el equip a la toma de corriente.
7. Centrar y colocar el motor con la flecha incluida.
8. Pesar las bolas de unicel que posteriormente le sarn agregadas al sistema como trazadores.
9. Identificar los diferentes tipos de impulsores que sern utilizados a lo largo de la prctica.
10. Preparar y poner en posicin el equipo de filmacin.
11. Ajustar la iluminacin.
MEDICIN DEL TIEMPO DE MEZCLADO:
1. Una vez conectado el sistema de medicin de pH a la computadora, calibrar el electrodo y colocarlo en
el tanque.
2. Encender el equipo y asegurar que este se encuentre funcionando en perfecto estado.
3. Colocar un impulsor y sumergirlo dentro del tanque de mezclado a la altura de un dimetro del mismo.
4. Comenzar a filmar el tanque.
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6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.

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Llevar la velocidad inicial a 100 rpm.

Agregar al tanque 0.5 mL de la solucin de indicador.
Ajustar el pH a un valor entre 8.5 y 9.0.
Adicionar 1 mL de la solucin de HCl 6 N, el indicador virara a azul.
Al momento de adicionar un pulso, con ayuda de un cronometro, registrar (en la tabla 3.2) el tiempo
que transcurre hasta la obtencin de la homogenizacin del color del liquido en el tanque.
Simultneamente a la adicin del pulso, ejecutar el programa de adquisicin de datos de pH de manera
que registre el valor de pH cada 0.16 s. Registrar el tiempo en que se estabiliza el pH en la tabla 3.2.
Adicionar 1 mL de la solucin de NaOH 6 N, el indicador virar a amarillo.
Repetir los pasos 9 y 10.
Cambiar las condiciones de operacin (300 y 500 rpm) y una vez alcanzado el estado estacionario, de
nuevo repetir pasos del 8 al 12.
Repetir el procedimiento para cada impulsor.

DETERMINACIN DE PATRONES DE FLUJO:

1. Encender el equipo y asegurarse que este se encuentre funcionando en perfecto estado.
2. Colocar un impulsor y sumergirlo dentro del tanque de mezclado a la altura de un dimetro del mismo.
3. Comenzar a filmar el tanque.
4. Llevar la velocidad inicial a 100 rpm.
5. Colocar lentamente 10 g de las bolas de unicel.
6. Aumentar la velocidad de agitacin en intervalos de 100 rpm para los impulsores de palas y de 300 rpm
para impulsores de hoja y propelas marinas, hasta que el sistema soporte.
7. Anotar sus observaciones en la tabla 3.3.
8. Disminuir lentamente la velocidad hasta llegar a 100 rpm y apagar el motor.
9. Repetir el procedimiento para cada impulsor.

RESULTADOS Y DISCUSIN.
Discuta los siguientes puntos:
1.
2.
3.
4.

Elaborar graficas de pH en funcin del tiempo.

Calcular el tiempo de mezclado para cada condicin de operacin y realizar una comparacin de estos.
Calcular la potencia del motor bajo las diferentes condiciones realizar una comparacin entre estas.
Obtener las correlaciones matemticas de las relaciones del tiempo de mezclado con las variables de
operacin empleadas.

CUESTIONARIO.
PRE-LABORATORIO
1. Qu relacin de dimetros entre el tubo de arrastre y el del biorreactor ofrece la mnima resistencia al
flujo? Argumente su respuesta.
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Tabla 3.3. Resultados de la determinacin de patrones de flujo.
IMPULSOR
CAMBIOS OBSERVADOS

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FLUJO PREDOMINANTE

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2. Qu nmeros adimensionales se utilizan para los clculos de potencia de agitacin y aireacin? Explique el
significado de cada uno de ellos.
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3. Qu influencia tienen el tipo de impulsor y difusor en el tiempo de mezclado, fracciones de gas retenido,
potencia de agitacin y potencia de aireacin?
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POST-LABORATORIO
1. Explique el efecto de los tubos de arrastre y las mamparas en el patrn de flujo. (Puede apoyarse con
dibujos).
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2. Describa dos maneras experimentales de determinar el tiempo de mezclado.

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3. Escriba las ecuaciones para determinar el tiempo de mezclado en biorreactores tipo tanque agitado y
columna de burbujeo.
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4. Complete el siguiente cuadro:
IMPULSOR

Palas

FLUJO

Radial y tangencial.
Con palas inclinadas
hay movimiento
vertical.

Turbinas

VISCOSIDAD

VELOCIDAD

DIMENSIONES

Entre 1150 y 1750

rpm. Las grandes
400 y 800 rpm.
La longitud vara
entre el 50 y el 80%
del dimetro interior
del tanque. La
anchura de la pala es
de 1/6 a 1/10 de su
longitud.

Vara entre el 30 y
el 50% del
dimetro del
tanque.

DISEO

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REFERENCIAS

REFERENCIAS.
1. Aiba, S. y Humprey A.E. Biochemical Engineering. Academic Press. EUA. 1973, 434 pgs.
2. Harnby, N., Edwards, M. F. and Nienow, A. W. Mixing in the Process Industries. Second Edition. s.l. :
Butterworth-Heinemann, 1997. I
3. McCabe, Warren L., Smith, Julian C. y Harrio, Peter. Operaciones Unitarias en Ingeniera Qumica. Cuarta
edicin. Madrid : McGraw-Hill, 1991.
4. Paul, Edward L., Atiemo-Obeng, Victor A. and Kresta, Suzanne M. Handbook of Industrial Mixing, Science
and Practice. New Jersey : Wiley-Interscience, 2004.
5. Wang, D.I.C., Cooney, C.L., Demain, A.L. Dunill, P., Humphrey, A.E. Lilly, M.D. 1978. Fermentation and
Enzyme Technology. John Wiley & Sons. Nueva York, EUA. 384 pgs.

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