DETERMINACION DE ,ACIDO SORBICO Y BENZOICO MEDIANTE

LA SEGUNDA DERIVADA DEL ESPECTRO ULTRAVIOLETA

Determination of sorbic and benzoic acids by Second Derivativa U.V. Spectroscopy
Por J. LPEZ * y J. SIMAL
Departamento de Bromatologa, Toxicologa y Anlisis Qumico Aplicado de la
Facultad de Farmacia y Seccin de Qumica Analtica Bromatolgica del C.S.I.C.
(Departamento de Investigaciones Qumico-Farmacuticas) . Santiago de Compostela
SUMMARY
Have been applied 2th derivate espectroscopy for the identification and quantification of
sorbic and benzoic acids conjunctly in food with satisfactory simplicity and precision.
Key words: Sorbic acid. Benzoid acid. Second derivative spectroscopy. Juices. Marmalades.
RESUMEN
Se ha aplicado la segunda derivada del espectro U.V. para la identificacin y cuantificacin de
cido 5rbico y benzoico conjuntamente en alimentos con una satisfactoria sencillez y precisin.
Palabras clave: Acido srbico. Acido benzoico. Espectroscopia de segunda derivada. Zumos.
Mermeladas.
INTRODUCCION
Como hemos tenido ocasin de comprobar (7), la aplicacin de la espectroscopia
de derivadas puede ser utilizada de una manera rpida y sencilla para la determi-
nacin de algunos conservadores de uso comn (cido benzoico).
Anlogamente, entre los conservadores de naturaleza inorgnica la espectroscopia
de derivadas tambin puede ser empleada para la identificacin y determinacin de
nitritos y nitratos en aguas ( 6) y sales salmueras ( 1), obtenindose resultados satis-
factorios.
Asimismo, la espectroscopia de derivada tiene una amplia aplicacin para la de-
terminacin de gran cantidad de sustancias en otros campos: cido saliclico (2),
cafena (8), vitamina e (5), etc.
Por lo que, debido a la creciente utilizacin conjunta de los cidos srbico y
benzoico en alimentos, se hace necesario disponer de un mtodo rpido para la bs-
queda y determinacin de ambos conservadores, que puede ser aplicado al anlisis
de rutina de diferentes muestras de alimentos existentes en el mercado.
* Este trabajo es parte de la tesis doctoral de J. Lpez Hernndez.
Anal. Bromatol. XXXIV-1 (1982), 113-121
La ae aenvaaas, en 1a reg1on uuravlOleia, aumenra 1a reso-
lucin de las bandas solapadas, incrementando la especificidad de las medidas espec-
trofotomtricas (4), pudiendo aplicarse tanto para la determinacin de los cidos
srbico y benzoico como para detectar la presencia de sustancias interferentes que
pueden ser causa de error en las medidas espectrofotomtricas.
PARTE EXPERIMENTAL
Para la dterminacin de ambos conservadores se realiza un estudio de los espec-
tros ultravioleta correspondientes al espectro directo, derivada cero y segunda deri-
vada, fijando en los dos casos una serie de puntos de inters para la identificacin
de las mezclas. El material y los aparatos utilizados son similares a los descritos en
un anterior trabajo (7).
Reactivos
Solucin patrn de cido benzoico: 5 mg disueltos en 100 ml de una solu-
cin a partes iguales de ter de petrleo y ter etlico. Esta solucin se
prepara diariamente.
Solucin patrn de cido srbico: 5 mg en 100 ml de una solucin a partes
iguales de ter de petrleo y ter etlico. Se prepara como la anterior a
diario.
Soluciones de trabajo de cido benzoico: 0,20, 0,40, 0,60, 0,80 y 1,0 mg/
100 ml, obtenidas por dilucin de la solucin patrn.
Soluciones de trabajo de cido srbico: 0,10, 0,20, 0,30 y 0,40 mg/100 ml,
obtenidas por dilucin de la solucin patrn.
Condiciones de trabajo
Velocidad del papel: 160 mm/minuto.
Sean: 480 nm/minuto.
Modo: 3.
Sensibilidad: 50 (x 100) mV para la derivada cero, y 10 20 (e 100) mV
para la segunda derivada (teniendo en cuenta que la expresin de resultados
la hemos realizado a 20 mV, si el registro lo hemos hecho a 10 mV, divi-
dimos la altura entre 2.
Parmetros de inters en el espectro directo (derivada cero) y en el espectro
de segunda derivada
Absorbancia mxima del cido benzoico (fig. 1).
Punto que se elige a fin de estudiar la relacin entre la absorbancia
del mximo del cido benzoico y la de dicho punto, que debe mante-
nerse constante cuando no se presentan interferencias.
Absorbancia mxima del cido srbico (fig. 2).
Punto de absorbancia establecido para estudiar la relacin entre el
mximo y dicho punto, que en caso de no haber interferencia, debe
de permanecer constante.
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DETERMINACIN DE CIDO SRBICO Y BENZOICO 115
- A
290
Absorbancia a 290 nm, leda para determinar la absorcin de fondo.
A dicha longitud de onda el cido benzoico y el cido srbico no pre-
sentan absorcin significativa. Como el valor de A
290
puede ser en
algunos casos significativo, lo consideraremos a la hora de realizar los
clculos.
En el espectro de la segunda derivada hemos realizado un estudio del registro
grfico a fin de determinar aquellos parmetros que pueden ser susceptibles de ser
utilizados para la determinacin de mezclas de cido srbico y cido benzoico, defi-
niendo a cada uno de ellos por la distancia a que aparece del origen, teniendo en
cuenta las condiciones de trabajo elegidas (figs. 1, 2 y 3).
Las distancias que estudiamos son las siguientes:
d
7 mm
9 mm
d 9,5 mm
11,5 mm
d 21,5 mm
22 mm
_ d 22 mm
23,5 mm
12 mm
-d
17 mm
Procedimiento
Dos primeras distancias caractersticas del cido benzoico que
aparece entre 280-260 nm (fig. 1).
Distancias correspondientes al mximo de 226 nm del cido ben-
zoico (fig. 1).
Distancias correspondientes al cido benzoico (fig. 1).
Para el cido srbico se estudian estas distancias caractersticas
y como punto de inflexin los que estn a 14, 17, 19 y 21 nm
(fig. 2).
Para realizar este estudio se ha registrado la lectura de una escala patrn de
cido benzoico y cido srbico. En el Cuadro 1 se observa para ambos cidos por
separado la relacin a/b y a' /b' (figs. 1 y 2).
En un trabajo preliminar (3) se han estudiado los de correlacin de
7 mm
las distintas rectas, habiendo resultado aptos para los picos en las distancias d
9 mm
d
9,5 mm d 21,5 mm 1 d 1 , 'd b . 1 , 'd , b' 1
1
en e caso e ac1 o enzotco y para e ac1 o sor 1co, os
1,5 mm 22 mm
f
. . b 1 d' . d 12 mm
coe 1c1entes son uenos en as 1stanc1as .
17 mm
El Cv % observado cuando se lee una mezcla de cido srbico y benzoico en
1 d
. . d 7 mm d 9 mm
1
'f'
as 1stanc1as , es muy ato, por tanto, para cuant11car mez-
9 mm 11,5 mm
das mediante espectrofotometra de segunda derivada se utilizar para el cido
benzol.co la dt'stancta d
21
'
5
mm. P 1 ' 'd ' b' 1 d' ili' d '
ara e ac1 o sor 1co a 1stanc1a ut za a sera
22,5 mm
d 12 mm
17 mm
Asimismo, se estudiar en la segunda derivada del espectro la presencia de inter-
ferencias, mediante la determinacin de las relaciones a/b y a' /b' (figs. 1 y 2),
siendo estos parmetros los siguientes para cada conservador:
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t' mm
"' 1
Fig. l.-Registro grfico del espectro directo (derivada cero) y segunda derivada del espectro
U.V. de 0,60 mg de cido benzoico, en 100 ml de ter de pertleo-ter etlico (1: 1).
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1 1
226 250
2. Derivada
1
__ l..!f!'.!."2._
Derivada O
Fig. 2.-Registro grfico del espectro directo (derivada cero) y segunda derivada del espectro
ultravioleta de 0,20 mg de cido srbico, disueltos en 100 mi de ter de petrleo-ter
etlico (1 : 1).
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118
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300
2. Derivada
Derivada O
3oo
Fig. 3.-Registro grfico del espectro directo (derivada cero) y segunda derivada del espectro
ultravioleta de una mezcla de 0,20 mg de cido srbico y 0,40 mg de cido benzoico,
disueltos en lOO mi de ter de petrleo-ter etlico (1 : 1).
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Acido benzoico
La relacin para determinar interferencias se establece entre el pico localizado
entre la lnea base, y el mximo a 21,5 mm (a) y el pico que aparece entre el
mnimo a 22 mm y la lnea base (b), en las condiciones de trabajo elegidas (fig. 1).
Acido srhico
Se calcula en el espectro de la segunda derivada, la relacin existente entre el
pico que aparece entre la lna base y el mximo localizado a 12 mm en las condi-
ciones de trabajo (a'), y el pico localizado entre dicha lnea base y el mnimo a
17 mm (b') (fig. 2).
Esta relacin tanto para el cido srbico como para el cido benzoico es cons-
tante (Cuadro 1).
Cuadro 1
ACIDO BENZOICO ACIDO SORBICO
CONCENTRACION a/b CONCENTRACION a' /b'
mg/100 ml mg/100 ml
0,20 2,28 0,10 0,796
0,40 2,34 0,20 0,785
0,60 2,21 0,30 0,754
0,80 2,27 0,40 0,791
Valor medio 2,275 0,781
Desviacin standard 0,0532 0,0189
Coef. de variacin % 2,3 2,4
Resultados
Se ha aplicado este mtodo al anlisis de nuevas muestras de zumos, una de
refresco y 10 de mermeladas, que presentaban cido srbico y benzoico conjunta-
mente como conservadoras, pudiendo realizar la determinacin de ambos cuando
las relaciones a' /b' (cido srbico) y a /b (cido benzoico) eran similares a las esta-
blecidas con los patrones:
cido srbico
cido benzoico
a' /b' = 0,781 0,019
a' /b' = 2,275 0,053
Para facilitar la nomenclatura se ha denominado a las muestras de la siguiente
manera:
Z = muestra de zumo
R = muestra de refresco
M = muestra de mermelada
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En todos los casos la letra indicativa de la muestra va acompaada de un sub-
ndice indicativo del nmero de la muestra.
Los resultados se encuentran recogidos en el Cuadro 2.
Cuadro 2
Determinacin de cido srbico y benzoico mediante la segunda derivada
del espectro U.V.
Acido srbico Acido benzoico
Muestra a'/b' a/b mg/100 de mg/100 de
muestra muestra
------
zl 0,632 3,61
z. 0,770 2,26 6,5 41,3
z"
0,769 2,28 17,4 39.0
z4 0,679 3,13
z"
0,601 2,80
Zs 0,562 2,45
z7 0,691 2,52
z. 0,463 2,33 23,5
z. 0,650 2,39
Z1o 0,769 2,30 18,9 24,1
R1 0,763 1,76 17,7
M1 0,672 2,49
M. 0,552 1,97
M"
0,701 2,51
M. 0,683 2,44
Ms 0,769 2,31 23,6 29,2
Ms 0,765 2,22 31,1 24,6
M1 0,772 2,23 34,5 26,9
Ms 0,754 3,12
M. 0.782 3,62 11,8
M1o 0,796 1,93
Nota: La expresin de resultados se realiza en 100 g o ml, segn se trata de muestras slidas
o lquidas.
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CONCLUSIONES
1.
0
La segunda derivada del espectro ultravioleta es aplicable al anlisis cualitativo
y cuantitativo de los cidos srbico y benzoico, cuando ambos conservadores
se emplean individual o conjuntamente, siempre que no existan en las muestras
sustancias interferentes.
2.
0
Se ha comprobado la presencia de cido srbico y benzoico en 21 muestras
de distinta naturaleza, habiendo sido posible cuantificar estos conservadores en
diferentes casos. (Vase Cuadro 2.)
3.
0
Los niveles detectados de estos conservadores, no sobrepasan en ningn caso
las cantidades mximas autorizadas por la legislacin alimentaria ( 60 mg/
100 g para refrescos y zumos y 100 mg/100 g para mermeladas para ambos
conservadores) .
BIBLIOGRAFIA
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