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UNIVERSIDADE PAULISTA - UNIP PROF KARIN MARIA LUDWIG EXAME PARASITOLGICO DE FEZES OBJETIVO: O exame parasitolgico de fezes (EPF)

tem como objetivo diagnosticar os parasitos intestinais do homem, atravs da pesquisa das diferentes formas parasitrias que so eliminadas. PRINCIPAIS MTODOS DE EXAME DE FEZES: Os mtodos qualitativos so os mais utilizados, demonstrando a presena das formas parasitrias, sem quantific-las. Com o nmero reduzido de formas parasitrias eliminadas com as fezes, necessrio recorrer a processos de enriquecimento para concentr-las. Os principais processos de enriquecimento so: 1. Sedimentao espontnea: Mtodo de Hoffmann, Pons e Janer (Lutz), que permite o encontro de ovos e larvas de helmintos e cistos de protozorios. 2. Sedimentao por centrifugao: Mtodo de Blagg (MIFC), Mtodo de Richie, que permite o encontro de ovos e larvas de helmintos e cistos de protozorios. 3. Flutuao espontnea: Mtodo de Willis, que permite a pesquisa de ovos leves (principalmente ancilostomdeos). 4. Centrifugoflutuao: Mtodo de Faust, usado para a pesquisa de cistos de protozorios e ovos leves. 5. Concentrao de larvas de helmintos por migrao ativa, devido ao hidrotropismo e termotropismo positivo: Mtodo de Baermann-Moraes e mtodo de Rugai. Indicados para a pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis. ESCOLHA DO MTODO: No existe um mtodo capaz de diagnosticar, ao mesmo tempo, todas as formas parasitrias. Algumas formas so mais gerais, permitindo o diagnstico de vrios parasitos intestinais, alm de serem de fcil execuo e pouco dispendioso, por isso muito usado na rotina. Neste caso os mais empregados so: Mtodo de Hoffmann, Pons e Janer (Lutz) e Mtodo de Blagg (MIFC). Quando no especificada a suspeita clnica o exame feito por um dos mtodos citados. recomendvel a repetio do exame com outra amostra, no caso de resultado negativo. Quando solicitada a pesquisa de um parasito em especial, devem ser executados, ao mesmo tempo, o mtodo geral e o especfico, pois outros parasitos no seriam diagnosticados se fosse executado apenas o mtodo especfico. Alguns autores preconizam a execuo de vrios mtodos com cada amostra (mtodos geral, especfico para larvas de helmintos e para cistos de protozorios). Mas na maioria das vezes, tal procedimento invivel, seja por quantidade insuficiente de fezes, ou pelo elevado nmero de exames a serem realizados por dia. A maior interao entre o mdico e o laboratrio contribuiria para que o exame parasitolgico fosse o mais exato possvel. Recomendaes gerais: algumas espcies de parasitos s so evidenciadas por tcnicas especficas; um exame isolado, em que o resultado negativo, no deve ser conclusivo; a produo de cistos ou larvas no uniforme ao longo do dia ou do ciclo do parasito; o material deve ser examinado o mais rpido possvel.

MTODOS QUALITATIVOS MICROSCPICOS TCNICAS DE SEDIMENTAO: Princpio: Os organismos so sedimentados pela gravidade ou centrifugao. Apresenta uma ao inversa flutuao: os cistos, ovos e larvas so retidos no fundo do tubo, enquanto os detritos so suspensos para a superfcie, no interferindo no diagnstico. Objetivos: Aumento do nmero de ovos operculados, larvas ou cistos, e a separao das gorduras da maioria dos detritos. Desvantagens: Grande quantidade de detritos fecais no sedimento Identificao dos parasitos mais difcil do que pelas tcnicas de flutuao. Tcnicas de sedimentao mais usadas: Lutz ou Hoffman, Pons & Janer (gua corrente); Ritchie (formalina ter); Blagg (mertiolato-iodo formaldedo) (MIF). 1. MTODO DE LUTZ OU DE HOFFMANN, PONS & JANER (HPJ): Foi descrito em 1919 por Adolf Lutz e, em 1934, foi tambm denominado de mtodo de Hoffmann, Pons & Janer.

FUNDAMENTO: A concentrao dos ovos no material se faz pela sedimentao espontnea. Ovos e cistos tendem a sedimentar na gua, que auxilia na diminuio de contaminao bacteriana, muco e gordura. No serve para trofozotos de protozorios. FINALIDADE: adequado para ovos pesados que, por sua densidade elevada, sedimentam facilmente quando em soluo; Pesquisa de ovos e cistos em fezes, especialmente para pesquisa de Schistosoma mansoni. TCNICA: Preparao das fezes: 1) Dissolver aproximadamente 2g de fezes em frasco de borrel com cerca de 5mL de gua e triturar bem com basto de vidro, deixar em repouso por alguns minutos; 2) Acrescentar mais 20mL de gua; 3) Filtrar a suspenso para um clice cnico, passando pela peneira (tela metlica ou tecido de nilon) e pela gaze cirrgica (dobrada em quatro), lavando os detritos retidos atravs da introduo de mais gua; 4) Completar o volume do clice com gua; 5) Deixar a soluo (gua + fezes) em repouso para sedimentar de 2 a 24 horas;

Realizao do exame: Aps o tempo de sedimentao, observar o aspecto do lquido sobrenadante para tomar uma das duas alternativas: a) se o lquido estiver turvo, descart-lo cuidadosamente sem levantar ou perder o sedimento, colocar mais gua at o volume anterior e deixar de repouso por mais 60 minutos; b) se o lquido estiver lmpido e o sedimento bom, proceder a coleta de uma amostra para exame. Exame: 1) Coleta do sedimento; Existem duas tcnicas para se coletar o sedimento para exame: a) Com uma pipeta bem fina (Pasteur), coletar no clice, bem no fundo o sedimento com um pouco do lquido sobrenadante para exame; b) desprezar o lquido sobrenadante cuidadosamente, homogeneizar o sedimento e coletar uma gota do mesmo (esse procedimento melhor, pois a gota coletada mais representativa do sedimento). 2) Colocar a amostra coletada em uma lmina (espalhar um pouco sobre a mesma); 3) Levar a lmina ao microscpio e examinar primeiramente com a objetiva de 10x, observando toda a lmina para apenas localizar os parasitos presentes; 4) Logo aps passar para a objetiva de 40x para determinar o tipo de parasito encontrado; 5) Adicionar soluo de Lugol para se evidenciar os ncleos e assim determinar com preciso qual o parasito encontrado. Observaes: Cobrir a lmina com lamnula facultativo; Deve-se, no mnimo, examinar duas lminas de cada amostra; Pode-se preparar 2 esfregaos: 1 com lugol e outro sem.

VANTAGENS DA TCNICA: Fcil execuo; Pode ser usada para ovos e larvas de helmintos e cistos de protozorios; Baixo custo. DESVANTAGEM DA TCNICA: demorada.

2. MTODO DE MIFC OU DE BLAGG (Sedimentao por Centrifugao): FUNDAMENTO: Utiliza material preservado, constitudo por fezes colocadas no MIF e assim, conservadas no decurso de at alguns meses, sem que ocorram alteraes de trofozotos e cistos de protozorios, como ainda de ovos de helmintos. Essa boa preservao permite, sem dificuldades, convenientes reconhecimentos especficos. FINALIDADE: adequado para ovos leves de helmintos e cistos de protozorios conservados. TCNICA: 1) Coletar as fezes recm-emitidas em lquido conservador de MIF; 2) Homogeneizar bem; 3) Filtrar a suspenso em gaze cirrgica dobrada em quatro, num copo plstico descartvel; 4) Transferir 1 a 2mL do filtrado para um tubo cnico de centrifugao, com capacidade para 15mL; 5) Acrescentar 4 a 5mL de ter sulfrico e agitar vigorosamente (importante para desengordurar o material); 6) Centrifugar por um minuto a 1.500rpm; 7) Com o auxlio de um basto, descolar a camada de detritos da parede do tubo; 8) Inverter o tubo para desprezar o lquido, mantendo-o com a boca voltada para baixo, at limpar as paredes do mesmo, utilizando um basto de vidro contendo algodo na extremidade; 9) Acrescentar ao sedimento gotas de salina e/ou lugol; 10) Inverter o tubo em uma lmina, deixando escoar todo o sedimento. Se a quantidade de sedimento for excessiva, utilizar uma pipeta para colet-lo e preparar as lminas; 11) Cobrir com lamnula e examinar com as objetivas de l0x e/ou 40x. VANTAGENS DA TCNICA: Fcil execuo; Pode ser usada para ovos de helmintos e cistos de protozorios. DESVANTAGEM DA TCNICA: A amostra deve ter sido coletada em lquido conservador de MIF; Uso de diversos reagentes perigosos que exigem um tratamento adequado durante o descarte e lavagem do material.

3. MTODO DE RITCHIE OU FORMOL-TER (Centrfugo-sedimentao): Foi descrito por Ritchie em 1948. FUNDAMENTO e FINALIDADE: Um mtodo de concentrao para visualizar cistos de protozorios e ovos leves de helmintos. Geralmente so empregados mtodos de colorao para visualizao dos oocistos, como por exemplo, lugol e ZiehlNeelsen modificado. Utilizado principalmente para deteco de oocistos de coccdeos: Isospora belli, Cryptosporidium sp e Ciclospora sp. TCNICA: Utilizar material fecal a fresco; 1) Colocar 1 ou 2g de fezes coletadas de vrias partes do bolo fecal em frasco contendo 10ml de gua corrente ou soluo salina a 0,85%; 2) Filtrar a suspenso atravs de gaze dobrada quatro vezes, e receber o filtrado em um tubo cnico de centrfuga de 15 mL; 3) Centrifugar (1500rpm por um minuto); 4) Decantar o sobrenadante e adicionar 1 a 2mL de gua corrente ou soluo salina a 0,85% ao sedimento antes de ressuspend-lo. Completar com gua corrente (ou soluo salina a 0,85%) 2/3 do volume do tubo. Agitar e centrifugar (1500rpm por 1 min). 5) Repita a etapa 4, at que o sobrenadante se apresente relativamente claro. 6) Depois que o ltimo sobrenadante decantado, ressuspender o sedimento com 1 a 2mL de formalina a 10% (dar preferncia soluo tamponada de formalina a 10% , pH neutro). Completar o volume da suspenso em 10 mL com formalina a 10%. Deixar em repouso em repouso durante 5 minutos.

7) Adicionar 3ml de ter ou acetado de etila, fechar o tubo e agitar vigorosamente, na posio invertida, por 30 minutos. Remover a tampa com cuidado. 8) Centrifugar (1500rpm por 1 min). Quatro camadas se formaro: (1) sedimento no fundo do tubo contendo os parasitos, (2) camada de formalina, (3) tampo de detritos fecais, e (4) camada de ter na superfcie; 9) Afrouxar e separar o tampo de detritos das paredes do tubo com um estilete fino e com cuidado decantar as trs camadas superiores. Limpar com swab de algodo as paredes do tubo, removendo os detritos remanescentes; 10) Uma pequena quantidade de lquido que permanece nas paredes do tubo escorre para o fundo junto ao sedimento. 11) Misturar o lquido e o sedimento, preparando as lminas para a pesquisa de ovos, lavas e cistos. 12) Cobrir com lamnula e examinar com as objetivas de l0x e/ou 40x. VANTAGENS DA TCNICA: Pode ser usada para ovos de helmintos e cistos de protozorios; Pode ser utilizada para observao de oocistos de coccdeos. DESVANTAGEM DA TCNICA: Uso de diversos reagentes perigosos que exigem um tratamento adequado durante o descarte e lavagem do material. No pode ser usada para os ovos pesados de helmintos, principalmente ovos de Schistosoma mansoni e ovos infrteis de Ascaris lumbricoides. OBSERVAO: Foi lanado no mercado o Coprotest, que um processo simplificado e seguro de sedimentao por centrifugao. Consiste no seguinte: a) o paciente compra em farmcia o recipiente Coprotest, o qual j vem com o conservador (formol a 10%); coloca as fezes na cavidade do coletor, fecha o frasco e agita por dois minutos para homogeneizar, enviando, em seguida, ao laboratrio; b) o laboratorista recolhe a amostra em um tubo de centrfuga; acrescenta 3mL de acetato de etila ou ter, agita e centrifuga por trs minutos; despreza os detritos e o lquido sobrenadante e acrescenta uma gota de lugol ao sedimento: c) recolhe uma amostra numa lmina, cobre com lamnula e examina ao microscpio.

TCNICAS DE FLUTUAO Princpio: Baseia-se na diferena de densidade especfica entre os ovos de helmintos, cistos de protozorios e o material fecal, a fim de que esses organismos flutuem na superfcie dos reagentes (reagentes de alta densidade). Vantagens: Formao na superfcie do tubo de uma membrana clara com poucos detritos fecais e a remoo seletiva de ovos e cistos, mesmo quando em pequeno nmero no bolo fecal. Desvantagens: Alta densidade dos reagentes alterao na parede dos ovos e dos cistos dificultando a identificao exame dentro de 10 a 20 minutos. Tcnicas de flutuao mais usadas: 1. Mtodo de Willis (soluo saturada de NaCl); 2. Mtodo de Faust (sulfato de zinco).

1. MTODO DE WILLIS (Flutuao em Soluo Saturada de Cloreto de Sdio) Foi descrito por Willis em 1921. FUNDAMENTO: Flutuao de ovos de helmintos em uma soluo saturada de NaCl em gua. FINALIDADE: indicado na pesquisa de ovos leves de helmintos e no serve para cistos de protozorios e larvas de helmintos. um mtodo padro para pesquisa de ovos de ancilostomdeos nas fezes. Exemplos de ovos leves: Ancylostoma duodenale, Necator americanus, ovos frteis de Ascaris lumbricoides, Hymenolepis nana e Trichuris trichiura. TCNICA: 1) Colocar 10g de fezes num frasco Borrel (pode ser usado o prprio no qual as fezes foram enviadas). 2) Diluir as mesmas em soluo saturada de acar ou sal (NaCI). 3) Completar o volume at a borda do frasco. 4) Colocar na boca do frasco uma lmina, que dever estar em contato com o lquido.

5) Deixar em repouso por cinco minutos. 6) Findo esse tempo, retirar rapidamente a lmina, voltando para cima a parte molhada. 7) Cobrir com lamnula, levar ao microscpio e examinar com objetiva de 10x e/ou 40x (pode-se ou no corar pelo lugol). Variao da tcnica: 1) Colocar uma quantidade de fezes de aproximadamente 1 a 2 g coletada de vrias partes do bolo fecal, em pequena cuba de vidro de 3 cm de dimetro com capacidade aproximada de 20 mL. Completar da capacidade do recipiente com soluo saturada de cloreto de sdio. 2) Suspender as fezes na soluo saturada salina at haver uma total homogeneizao. Completar o volume do frasco com soluo de NaCl. 3) A lamnula deve ficar em contato com o menisco durante 30 a 45 minutos; no dever haver formao de bolhas de ar entra a lamnula e a superfcie do lquido. A gota contendo os ovos se adere face inferior da lamnula. 4) Remover a lamnula e inverter rapidamente a sua posio sobre uma lmina. 5) Examinar ao microscpio com objetiva de pequeno aumento. Observaes: Os ovos no flutuam na superfcie do reagente quando a homogeneizao do material fecal incompleta, havendo uma imperfeita separao dos ovos e dos detritos fecais. Para a flutuao no se deve usar um tempo muito curto (menos de 30 minutos) ou muito longo (mais de 60 minutos). Nesse caso os ovos que flutuam na superfcie podem descer para o fundo da pequena cuba (Suzuki, 1980).

2. MTODO DE FAUST (Centrifugo-Flutuao em Sulfato de Zinco) A tcnica de Willis (1921) foi modificada por Faust et al. (1938), na qual a soluo saturada de cloreto de sdio foi substituda pela soluo de sulfato de zinco. FUNDAMENTO: Fundamenta-se na propriedade que apresentam certos ovos de helmintos de flutuarem na superfcie de uma soluo de densidade elevada e de aderirem ao vidro. FINALIDADE: Este procedimento simples e eficiente est indicado para pesquisa de ovos com densidade especifica baixa como os de ancilostomdeos. um mtodo utilizado para a pesquisa de ovos de helmintos, excluindo-se os chamados ovos pesados. Exemplos: alm dos ovos leves, cistos de Giardia lamblia e cistos de Entamoeba histolytica. TCNICA: 1) Diluir 10g de fezes em 20mL de gua filtrada. 2) Homogeneizar bem. 3) Filtrar atravs de gaze dobrada em quatro, num copo plstico, e transferir para um tubo de Wasserman. 4) Centrifugar por um minuto a 2.500rpm. 5) Desprezar o lquido sobrenadante e ressuspender o sedimento em gua. 6) Repetir as operaes 4 e 5 mais duas ou trs vezes, at que o lquido sobrenadante fique claro. 7) Desprezar a gua sobrenadante e ressuspender o sedimento com uma soluo de sulfato de zinco a 33%, densidade de l,l8g/mL. 8) Centrifugar novamente por um minuto a 2.500rpm. 9) Os cistos (e ovos leves) presentes estaro na pelcula superficial; a mesma recolhida com ala de platina, colocada numa lmina junto com uma gota de lugol e coberta com lamnula. Observao O material deve ser examinado imediatamente, pois o contato com a soluo de sulfato de zinco pode deformar os cistos de protozorios ou ovos de helmintos de casca fina. Variao da tcnica: 1. Colocar 1 ou 2 g de fezes coletadas de vrias partes do bolo fecal em frasco contendo 10 mL de gua corrente . Filtrar a suspenso atravs de gazes dobrado em quatro vezes, e receber o filtrado em um tubo cnico de centrfuga de 15 mL. 2. Adicionar gua corrente at completar 2/3 da capacidade do tubo. Centrifugar 2500rpm por 1 minuto. 3. Decantar o sobrenadante e adicionar 1 a 2 mL de gua corrente ao sedimento, antes de ressuspend-lo. Completar com gua corrente 2/3 do volume do tubo, agitar e centrifugar. 4. Repetir a etapa 3, at que o sobrenadante apresente-se relativamente claro. 5. Depois que o ltimo sobrenadante decantado, adicionar 1 a 2 mL do reagente (sulfato de zinco a 33%), e ressuspender o sedimento. Completar com sulfato de zinco at 0,5cm da borda do tubo e centrifugar (2500 rpm por 1 minuto). 6. Cuidadosamente, remover o tubo da centrifuga e, sem agitao. Coloc-lo em uma estante em posio vertical. 7. Com uma ala de arame ou ala de platina (dimetro de 5 a 7 mm) tocar no centro da membrana formada na superfcie, transferido vrias aladas para uma lmina de microscopia. Examinar ovos, larvas e cistos.

Diferenas importantes: Alguns pesquisadores preferem a sobreposio de uma lamnula na borda do tubo remoo da pelcula com ala de arame (BURROWS, 1965: MELVIN & BROOKE, l982). Depois de concluda a etapa 4, com auxlio de pipeta, encher o tubo at a borda com soluo de sulfato de zinco. Colocar uma lamnula (22 x 22 mm) na superfcie do tubo. Deixando-a em contato com o lquido durante 8 a 10 minutos. Remover a lamnula, invertendo a sua posio, e colocar a face com a gota sobre uma lmina. Examinar para ovos, larvas e cistos.

TCNICAS DE CONCENTRAO DE LARVAS Princpio: Este mtodo baseado no hidro-termo-tropismo positivo das larvas pela ao da gravidade. Indicao: um mtodo seletivo para pesquisa de larvas e no especfico, pois podemos encontrar cistos e ovos de outros parasitos. Tcnicas mais usadas: 1. Mtodo de Rugai. 2. Mtodo de Baermann-Moraes;

1. MTODO DE RUGAI (Mtodos para o isolamento de larvas) Este mtodo foi desenvolvido por RUGAI, MATTOS & BRISOLA em 1954. Segue o mesmo princpio do mtodo de Baermann-Moraes, porm mais simplificado. FUNDAMENTO: Permite a deteco de larvas vivas, estimuladas pelo calor brando. FINALIDADE: Este procedimento simples e eficiente para pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis nas fezes e tambm de Ancilostomdeos. TCNICA: 1) Retirar a tampa do recipiente que acondiciona as fezes e envolv-lo cm uma gaze dobrada em quatro, fazendo uma pequena trouxa. 2) Colocar o material assim preparado, com a abertura voltada para baixo, num clice de sedimentao, contendo gua aquecida (45 C), em quantidade suficiente para entr ar em contato com as fezes. 3) Deixar uma hora em repouso. 4) Coletar o sedimento no fundo do clice, com a ajuda de uma pipeta. 5) Examinar no microscpio, com a objetiva de 10x. 6) Corar as larvas como lugol e observ-las com o maior aumento, para identificao.

Fezes dentro da gaze em contato com a gua morna contida no clice de sedimentao. Observaes Para a execuo desse mtodo, o ideal que as fezes sejam colhidas no dia do exame, pois a refrigerao diminui a viabilidade das larvas. Fezes diarricas ou coletadas em conservador no se prestam para esse mtodo. Variao da tcnica: 1. Estender, sobre a abertura de um recipiente contendo fezes, gaze dobrada quatro vezes, e repuxar as extremidades para trs;

2. Encher, com aproximadamente 70 a 100 mL de gua corrente aquecida a 40-45 C, um copo cnico de sedi mentao (capacidade de 125ml); 3. Transferir o recipiente com as fezes para o interior do copo cnico de sedimentao, de modo que o lquido alcance toda a extenso da abertura do recipiente, cuidando para no formar bolhas de ar; 4. Deixar em repouso durante 60 minutos. 5. Colher o sedimento, no fundo do copo cnico, com pipeta capilar longa (Pipeta Pasteur). Alguns autores recomendam retirar o recipiente do copo cnico antes da colheita do sedimento. Entretanto, outros preferem manter o recipiente, para evitar o revolvimento do lquido; 6. Examinar o sedimento entre lmina e lamnula. Corar a preparao com soluo de lugol. Indicaes importantes de outros autores: No se deve colocar lugol, pois o mesmo mata as larvas. A temperatura deve permanecer constante. Fezes lquidas no so adequadas para este mtodo. Quando as mesmas se apresentarem liquefeitas pode-se acrescentar uma poro de fub ou farinha de milho para torn-las um pouco pastosas.

MTODO QUANTITATIVO 1. Mtodo de KATO-KATZ (KATO, 1960; KATZ, CHAVES E PELLEGRINO, 1972) Utilizado principalmente na pesquisa de ovos de S. mansoni e outros helmintos. Tcnica 1. Colocar a amostra fecal sobre o papel absorvente; 2. Comprimir a tela metlica ou de nilon sobre as fezes, fazendo com que parte passe atravs das malhas tela (40 - 60 mg); 3. Colocar sobre uma lmina de vidro a placa de plstico. Remover as fezes que passam atravs das malhas e transferilas para o orifcio da placa, at complet-lo; 4. Depois de encher o orifcio central, remover com cuidado o carto, deixando as fezes. 5. Cobrir as fezes com a lamnula de celofane (embebida em verde malaquita); 6. Inverter a preparao sobre o papel absorvente, realizando presso com o polegar sobre a lmina at obter uma uniformidade do material; 7. Deixar a preparao em repouso (clarificao) durante 30 minutos a 34-40 C ou temperatura ambient e por 1-2 horas; 8. Examinar a preparao ao microscpio. Contar todos os ovos encontrados e multiplicar o total por 24, resultando em ovos/grama de fezes.

EXAME MACROSCPICO 1. TAMISAO DAS FEZES FUNDAMENTO: Consiste em desmanchar o bolo fecal em gua e verificar a presena de estruturas parasitrias macroscpicas. FINALIDADE: Este procedimento serve para deteco de vermes adultos como o Ascaris lumbricoides e Enterobius vermicularis que so encontrados frequentemente misturados ou na superfcie das fezes, como tambm as progltides de Taenia sp. Outros helmintos como o Trichiuris trichiura, Ancilostomdeos e Hymenolepis nana so depositados no bolo fecal aps o incio do tratamento. Frequentemente podero ser encontrados helmintos adultos nas amostras fecais e ausncia dos ovos. Esses processos macroscpicos so vantajosos para a demonstrao e coleta de pequenos helmintos, de proglotes e de esclex. Mtodo especialmente utilizado para observao de esclex e proglotes, que servem respectivamente para o controle de cura e diagnstico da tenase. TCNICA: 1. Emulsionar as fezes em gua, em recipiente adequado, utilizando basto de vidro ou outro objeto apropriado. 2. Coar o material em tamis (peneira) metlico de 80 a 100 malhas por cm2, coletando as proglotes porventura retiradas ou outras estruturas, alm de outros parasitos. Observaes: Convm realizar a operao em uma pia, empregando jato suave de gua corrente, obtido, por exemplo, atravs de tubo de borracha ligado torneira. Todo o material eliminado durante uma evacuao dever ser submetido a exame, mas a utilizao de maior quantidade somente poder tornar mais provvel o encontro das proglotes. Se necessrio, os detritos retidos no tamis podero ser periodicamente passados para cuba com gua, na qual tambm ser conveniente realizar a pesquisa. ainda aconselhvel coar novamente, deixando ficar retidos os fragmentos maiores de material desprezvel.

Importncia: Este mesmo processo til para a pesquisa do esclex, quando for efetuado tratamento da tenase. Serve tambm para a coleta de outros vermes nas fezes de indivduos medicados por meio de antihelmnticos.

Tamisao das fezes para pesquisa de proglotes de Taenia sp: material sendo coado em peneira adequada.

EXAME DIRETO A FRESCO O exame direto a fresco um procedimento simples e eficiente para o estudo das fezes, permitindo observar as formas trofozoticas vivas dos protozorios. Este procedimento coprolgico jamais deve ser omitido. As preparaes a fresco so obtidas diretamente dos espcimes fecais e requerem o mnimo de material (2 mg) para cada mtodo de exame . Todos os estgios de diagnstico dos organismos, pelo uso de diferentes solues, podem ser determinados e identificados. Os esfregaos com fezes frescas e no fixadas so rotineiramente preparados com as solues salina a 0,85% e de iodo. Entretanto, se o nmero de organismos for pequeno, o exame de pequena quantidade de fezes usadas para a preparao de esfregaos a fresco pode ser insuficiente para revelar a presena de parasitas. Os esfregaos devero ser sistemtica e completamente examinados atravs da objetiva do microscpio de pequeno aumento (10x) e com pequena intensidade de luz. A confirmao dos parasitas deve ser realizada com a objetiva de grande aumento (40x). Materiais e reagentes: - palitos de madeira ou basto de vidro; - lminas de vidro e lamnulas; - soluo salina 0,85%; - soluo de lugol 1%. Mtodo: 1. Coloque 1 gota de soluo salina 0,85% e 1 gota de soluo de lugol 1% sobre a lmina; 2. Efetuar dois esfregaos de fezes: com o palito pegue uma poro pequena de fezes (em torno de 2 mg de fezes) e misture com as solues para formar suspenses, obtendo um preparado transparente; 3. Cobrir cada suspenso com uma lamnula; 4. Examinar ao microscpio, primeiramente com pequeno aumento (objetiva de 10x) e, a seguir, com maior aumento (objetiva de 40x). Observaes: a) a preparao bem feita uniforme e corresponde a 2 mg de fezes, nem to grossa que os detritos fecais atrapalhem a visualizao dos parasitos, e nem to fina que tenha muito espao vazio; b) recomendado que o material usado para coletar seja mergulhado em diferentes pontos da amostra; c) examine o esfregao de maneira sistemtica correndo todo o esfregao coberto pela lamnula nas 2 gotas, de cima para baixo ou lateralmente.