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Extrao de DNA : isolando DNA na cozinha.

Objetivo: extrair DNA de cebola utilizando produtos de uso domstico (detergente para lavar loua, sal de cozinha e lcool) e separ-lo dos demais componentes celulares. Material -Cebolas - Ralador -Sal de cozinha -Detergente para lavar loua (lquido ou gel) -gua quente (65C a 80C) -Papel filtro (ou filtro de caf, ou coador descartvel, ou algodo) -Funil ou suporte para filtro de caf -Gelo -lcool 96 GL gelado -Dois frascos de vidro / tubos de ensaio/ pipetas/estante para tudos -Basto ou pipeta de vidro -Recipiente (plstico ou isopor) para o banho de gelo -Termmetro/ lminas/ lamnulas Procedimento 1- Ralar a cebola e colocar o material ralado em um frasco (bquer) 2- Preparao de 100ml de soluo 80 ml de gua, 20 ml de detergente e uma colher de sal. Misturar um pouco e aquecer essa soluo para que fique entre 65C e 80C . Misture bem a soluo com a cebola ralada. Aguarde aproximadamente 10 min. 3- Coloque o frasco com a cebola e a soluo em um banho de gelo e deixe aproximadamente 10 min. medida que a suspenso onde esto a soluo e a cebola esfriar, dever ser possvel observar que o lquido parece estar talhando (formando grumos). 4- Quando a suspenso estiver fria, filtre-a e colete o lquido filtrado em um tubo de ensaio ou em um frasco limpo. 5- Incline o frasco de vidro com o lquido filtrado (ngulo de 30 a 40) e derrame vagarosamente, pela parede lateral, o lcool gelado. Voc ver que o lcool no se mistura prontamente com a soluo filtrada, havendo a formao de duas fases (na superior fica o lcool). Entre as duas fases possvel observar a formao de um precipitado com aspecto de fiapos esbranquiados, que so os cidos nuclicos. 6- Com a ajuda de um basto ou pipeta, possvel enrolar os cidos nuclicos que esto precipitando, ou seja, voc pode pescar o DNA dos morangos. 7- Uma vez enrolados nos basto ou na pipeta, os cidos nuclicos devem ser transferidos para uma lmina com uma lamnula e observados no microscpio para a visualizao da fita de DNA. Funes: -Cebola: possui clulas grandes, que se rompem quando ela ralada, cortada ou macerada; -Sal: faz as molculas de DNA precipitar na soluo aquosa e favorece a aglomerao das molculas de DNA; - Detergente: dissolve a camada lipdica da clula; - lcool gelado: faz as molculas se aglutinarem e forma uma massa filamentosa e esbranquiada, alm de retirar as molculas de DNA da soluo; - Temperatura: auxilia a dissoluo da membrana celular (o calor degrada a parede celular e lisa a clula); - Gelo: diminui a freqncia de quebra das molculas de DNA.