Manual de Parasitologia General2

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE BIOANLISIS
Manual de Prct ca! de La"#rat#r # de Para! t#l#$%a &eneral'
Manual de Parasitologa General
INTRODUCCI(N La implantacin del Nuevo Modelo Educativo en la Facultad de Bioanlisis genero la reestructuracin del plan de estudios en un sistema de crditos, con Experiencias Educativas ubicadas en 4 reas de formacin, un gran porcenta e de estas Experiencias Educativas inclu!en "oras paralelas donde los alumnos llevan a cabo prcticas #ue fortalecen sus conocimientos, "abilidades ! actitudes, para lo cual es necesario contar con manuales #ue gu$en las actividades de los alumnos dentro de los laboratorios% &ctualmente la Facultad de Bioanlisis con base al nuevo modelo educativo integral ! flexible 'ME(F) cuenta con el registro de un manual de prcticas de laboratorio de *arasitolog$a +l$nica, por ello la necesidad de reali-ar un Manual de *arasitolog$a .eneral #ue le va a permitir al alumno contar con material bibliogrfico actuali-ado, en el cul obtendr nocin sobre la microunidad de competencia ! generalidades de la prctica a reali-ar, as$ como la importancia de cada una de ellas, a!udar a identificar la morfolog$a de los parsitos , siendo tico, responsable ! cuidadoso en la seleccin de mtodos para coad!uvar en el diagnostico cl$nico oportuno de estas enfermedades% /u contenido presenta contribuciones fundamentales a su formacin 0 QUMICO CLNICO, se conforma de 12 prcticas de laboratorio con listado de referencia bibliogrficas% +ada unidad abarcara temas generales como miscelnea de reactivos de cada mtodo% La experiencia educativa *arasitolog$a general se encuentra en el rea disciplinar de la carrera de 0)UIMICA CLINICA3 cuenta con 4 "oras tericas ! 5 de prctica, con un total de 6 crditos basado en el programa de dic"a experiencia educativa del Nuevo Modelo Educativo (ntegral ! Flexible% Es importante se7alar #ue un manual de prcticas es un documento #ue contiene la descripcin de los procedimientos #ue deben seguirse en la reali-acin de las actividades del alumno dentro del laboratorio%
Manual de Parasitologa General 2
/e conforma de generalidades, tcnica o procedimiento, material ! mtodo, as$ como el e#uipo a utili-ar ! cual#uier otro dato #ue pueda auxiliar al correcto desarrollo de cada prctica% En l se encuentra la informacin bsica referente a cada procedimiento, el cual aumenta la eficiencia de los alumnos% +ada prctica de laboratorio esta estructurada de la siguiente manera8 N9mero ! nombre de la prctica Microunidad de +ompetencia .eneralidades Material :cnica ;bservaciones '<atos del *arsito) +uestionario Bibliograf$as
Este manual introduce al alumno en el campo de la parasitolog$a general, abordando desde los puntos pedaggicos, cient$ficos ! de distintos ngulos, los conceptos actuales para obtener un me or entendimiento en lo relacionado a las enfermedades parasitarias #ue son tan frecuentes en nuestra regin% <ebido a la situacin geogrfica prevalencia parasitaria elevada% en reas como en las #ue nos encontramos
'tropical ! subtropical) ! el desarrollo socioeconmico deficiente favorece a tener una
RE&LAMENTO DEL DEPARTAMENTO DE LABORATORIOS U*C*S* +ALAPA* DISPOSICIONES &ENERALES 1%= El responsable de cada prctica es el maestro% 5%= No se permite a los alumnos traba ar en los laboratorios sin la presencia del maestro% 4%= El e#uipo de proteccin personal dentro de los laboratorios ! en los anexos de los laboratorios ser8 Alu,n#! Bata de algodn 122 >, de manga larga Lentes de seguridad durante todo el tiempo #ue dure la prctica% En caso de lentes graduados, #ue sean de cristal duro inastillable ! uso de protectores laterales% El pelo recogido en las prcticas #ue se utilice mec"ero .uantes en caso de #ue la prctica lo exi a, a criterio del maestro% :oalla o lien-o de algodn% Bata de algodn 122 >, de manga larga Lentes de seguridad durante todo el tiempo #ue dure la prctica% En caso de lentes graduados, #ue sean de cristal duro inastillable ! uso de protectores laterales% El pelo recogido en las prcticas #ue se utilice mec"ero%
Pr#.e!#r
LOS SERVICIOS 4%= El departamento de laboratorios de la unidad de ciencias de la salud prestara los servicios a usuarios de conformidad a las siguientes normas8 L#! C*C* catedrt c#! de"ern ?espetar sus "orarios de entrada ! salida% *ermanecer dentro del laboratorio mientras "a!a alumnos traba ando%
/olicitar con anticipacin su material de traba o, por escrito en las "o as especiales #ue para ello existen, con un m$nimo tiempo de 46 "rs% "biles% Las "o as de pedido se les proporcionaran en los laboratorios% Ense7ar oportunamente a los alumnos el mane o ! cuidado del material, reactivos ! e#uipo #ue utilicen en la practica% (nformar a los alumnos sobre el mane o de residuos peligrosos biolgico infecciosos%
L#! alu,n#! <ebern solicitar el material ! e#uipo mediante un vale debidamente re#uisitado, con especificaciones de cada pie-a% El alumno #ue reciba el material, entregar su credencial vigente, revisando con cuidado el material en presencia del laboratorista% En caso de ruptura o prdida del material, se conservara en el laboratorio su credencial "asta #ue el material sea repuesto% /e debe de entregar el material limpio al trmino de la prctica% <e ar limpias las mesas de traba o de los laboratorios% <epositar los desec"os #u$micos generados en el recipiente #ue corresponda, seg9n instrucciones del maestro% <eben de conservar las tar as de los laboratorios libres de toda basura 'algodn, papeles o desec"os de cual#uier clase)% /epararan adecuadamente los residuos biolgicos infecciosos para ser depositados !a sea en bolsas o en contenedores r$gidos, seg9n sea el caso% NORMAS DE COMPORTAMIENTO @%= Los usuarios debern abstenerse de de ar, en el lugar de traba o, cosas de valor a la vista ! cerrar las puertas de los cub$culos ! laboratorios% A%= *ara traba ar en el laboratorio es necesario acadmico utilicen bata ! lentes de seguridad% B%= <urante el desarrollo de las prcticas #ueda estrictamente pro"ibido la entrada de personas a enas al grupo% 6%= En los laboratorios #ueda pro"ibido%
#ue los estudiantes ! personal
Fumar +onsumir alimentos Cugar *rovocar desordenes El uso de -apatos abiertos '"uarac"es)
D%= Las tomas de agua ! de gas deben mantenerse siempre cerradas cuando no se estn utili-ando% 12%= Eueda pro"ibido pipetear con la boca% 11%= No probar, oler ni tocar con las manos ning9n producto #u$mico% 15%= El traba o con sustancias toxicas ! voltiles deber efectuarse dentro de la campana de extraccin de gases% 14%= &ntes de desec"arse cultivos de microorganismos o muestras biolgicas se debern inactivar% 14%= +ual#uier derrame de muestras biolgicas deber ser comunicado al profesor, #uien supervisara el proceso de descontaminacin del rea% 1@%= La recoleccin de muestras de sangre se reali-ara con seguridad, por lo cual #uienes la toman debern8 ?evisar sus manos en busca de cortes, raspaduras u otras lesiones cutneas +olocarse los guantes *rocurar no contaminar las manos mientras se extrae la sangre Lavar las manos con agua ! abn inmediatamente despus de cual#uier accidente de contaminacin con sangre% +olocar las eringas ! agu as en los recipientes adecuados En caso de pinc"a-o o cortada lavar la "erida con agua ! abn%
1A%= +uando se mane e material contaminado, infecciosos o toxico por contacto, se debern usar guantes ! seguir las siguientes normas8 /e deben evitar usar o!as en el laboratorio% +uando se termine el traba o se debern lavar las manos con agua ! abn% <esec"ar los guantes
No tocar con las manos enguantadas los o os, la nari-, otras mucosas ni la piel descubierta% No abandonar el lugar de traba o ni pasear por el laboratorio o pasillo con los guantes puestos% Mantener el laboratorio limpio ! ordenado, evitando la presencia de material ! e#uipo #ue no tenga relacin con el traba o% Nunca pipetear l$#uidos con la boca
SANCIONES1B%=En caso de ruptura o perdida de material, se conservar en los laboratorios la credencial del alumno "asta #ue sea repuesto% 16%= Las personas a #uienes se les sorprenda "aciendo mal uso de e#uipos, materiales, instalaciones, sern sancionados conforme a la Legislacin Fniversitaria, seg9n la gravedad de la falta cometida% 1D%= En el caso de los alumnos, las sanciones aplicables sern las #ue decida el G +onse o :cnico, conforme a las disposiciones de la Legislacin Fniversitaria%
Mater a .ecal
/ece! El examen de las "eces comprende dos grandes cap$tulos de la investigacin anal$tica cl$nica8 la coprolog$a Eu$mico Funcional ! la +oproparasitolog$a La investigacin comprende los siguientes puntos8 ?ecoleccin +aracteres organolpticos Macroscpicos como8
Cantidad Har$a seg9n la alimentacin8 con rgimen crnico, de @2 a 122 gI54 ", con rgimen vegetariano, de 5@2 a 422 g, finalmente, en rgimen mixto, de 122 a 522 g% :odo ello por d$a ! en una sola deposicin% /e puede definir la diarrea, de ando a un lado otras muc"as definiciones, como la eliminacin fecal #ue excede los 522 g por d$a, cuando el contenido de la dieta en fibras es ba o% El agua es el principal componente, siendo su contenido de aproximadamente un A@ >% Consistencia Normalmente es pastosa=dura% *uede modificarse en distintas circunstancias% En las diarreas la consistencia es l$#uida, en cantidad abundante cuando se deben a patolog$a intestino delgado ! mucosas si proceden del intestino grueso% Las deposiciones semiblandas indican un trnsito rpido por el intestino delgado o son propias de las afecciones pancreticas o biliares% En el estre7imiento son duras, en forma de grandes bolos% Las deposiciones caprinas son propias de los estados espsticos acentuados% Color *ardo% <urante la lactancia, amarillo% /e tornan verdes por la accin del aire en la lactancia natural% /on oscuras si contienen gran cantidad de pigmentos biliares 'descargas biliares e ictericia "emol$tica), pero son a9n ms oscuras ! de aspecto al#uitranado cuando contienen sangre de procedencia alta 'si la sangre es de procedencia ba a, es de color ro o ! no bien me-clada) ! en pacientes en tratamiento con sales de "ierro% <e color amarillo pardo, pero con gran contenido en grasa, en
las esteatorreas de origen pancretico 'conteniendo pigmentos biliares)% El color verde es propio de las diarreas de fermentacin del ni7o% Moco /u presencia en las "eces es propia de los estados inflamatorios 'enteritis ! +olitis), pero tambin se presenta en el s$ndrome de intestino irritable, en el #ue no "a! inflamacin% Pus /e presenta en pe#ue7as cantidades en la enteritis ! colitis de cual#uier etiolog$a% *ero la presencia brusca de pus abundante es indicio de la evacuacin a la luintestinal de un absceso prximo 'perirrectales, prostticos, pioslpinx, etc%)% Sangre Mu! frecuente en la enteritis ! la colitis, parece en cantidades pe#ue7as ! me-clada con moco=pus% /i procede de las porciones altas del intestino se presenta bien me-clada con las "eces ! suele ser negru-ca, aun cuando puede persistir ro a si el trnsito intestinal "a sido mu! rpido% /i la sangre va mal me-clada con las "eces sugiere una procedencia ba a% En ausencia de enteritis o colitis o, en general, de cual#uier infeccin intestinal, la presencia de sangre "ar sospec"ar una lesin de la mucosa '9lcera, tumor, angiodisplasia, etc%) o tambin en una enfermedad "emorrgica% <ebe practicarse siempre un anlisis de sangre 'tiempos de "emorragia, coagulacin, protrombina ! tromboplastina ! pla#uetas)% En los casos en #ue existe la sospec"a de prdida de sangre a nivel gastrointestinal distal 'p%e% anemia ferropnica en el anciano), pero no se obtienen datos macroscpicos de la misma es conveniente su deteccin mediante el estudio de sangre oculta en "eces 'prueba del gua!aco) o el empleo de "emat$es marcados, con resultados positivos cuando su volumen es de 2,1 mlImin o superior% Examen Microscpico +onsistencia8
&cuosa Blanda *astosa

<ura E emplos &gua de arro*ur de lente as *apilla *ega osa *ega osa oscura *astosa espumosa ?estos gruesos de alimentos +lera :ifoidea (nsuficiencia gstrica Esteatorrea origen biliar, pancretico Melenas <ispepsia (nsuficiencia pancretica
C#l#r La coloracin parda "abitual se debe a urobilina ! estercobilina, el color es seg9n el alimento% Lactantes +arn$voros Hegetariano *an o *apas J &marillo canario J +asta7o oscuro '+af) J Herdoso J &marillentas = (ctericia ;bstructiva = Gepatitis = (ngestin de Bario 'peptobismol) &marillentas con matices8 = Esteatorrea = <iarreas de fermentacin = (nsuficiencia pancretica
Blanco grisceo 'ceni-a)8
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Par! t#!- Macr#! 0 , cr#!c12 c#! +lulas8 epiteliales J (rritacin Leucocitos8 se observan colocando una gota de cido actico al 12> ms una gota de materia fecal% /u presencia indica infeccin bacteriana% /i "a! ms de 12 por campo, "acer un diferencial% Ma!or cantidad de Neutrfilos '*olimorfo nucleares) la infeccin es causada por bacterias% /i "a! ma!or cantidad de no segmentados la infeccin es viral Cr !tale! &ra!a :rnsito acelerado% <eficiencia en-imatica% <eficiencia en absorcin% Metodolog$a por el Laboratorio +l$nico% .rasas neutras J te7idas con /udn ((( 'gotas anaran adas), ms de A2 gotas indican esteatorrea S%ndr#,e de ,ala a"!#rc 1n De. n c 1n Es la dificultad en la digestin o absorcin de los nutrientes de las substancias alimenticias% :$picamente, la mal absorcin puede ser la insuficiencia para absorber a-9cares, grasas ! prote$nas espec$ficas u otros nutrientes 'tales como las vitaminas) o una mal absorcin inespec$fica general de los alimentos% La mala absorcin puede ir acompa7ada de8 <iarrea ;xalato de +alcio J Normal ! aumentada, su presencia en insuficiencia gstrica <e colesterol J +lculos vesiculares "ematoidina J agu as amarillas, se presentan en grupos, aparecen despus de "emorragias% +"arcot=Le!den J &mibiasis, (% belli
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Ginc"a-n o clicos ?etraso del crecimiento <eposiciones dif$ciles ! frecuentes <ebilitamiento muscular <istensin abdominal
Cau!a! Fibrosis #u$stica (ntolerancia a la lactosa Enfermedad cel$aca 'enteropat$a inducida por gluten) Enfermedad de K"ipple 'distrofia por medicamentos) (ntolerancia a la lacto alb9mina bovina 'prote$na de la lec"e de vaca) (ntolerancia a la prote$na de la lec"e de so!a &crodermatitis enteroptica #ue causa la mala absorcin del Linc Mal absorcin de vitamina B=15 *arsitos
Caracter%!t ca! ,acr#!c12 ca! ;lor 8 cido +olor8 +laro +onsistencia8 de pastosa a li#uida +antidad8 abundantes Flotabilidad de las "eces *resencia de grasa 'gotas oleosas)%
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Rec#lecc 1n3 ,ane4# 0 c#n!er5ac 1n de 2r#duct#! " #l1$ c#! 6C#ntr#l de cal dad7 &eneral dade!* En el mane o de los productos biolgicos es donde va a radicar el xito o el fracaso de un diagnstico en enfermedades parasitarias% Es necesario seguir ciertos lineamientos preestablecidos para cada producto% Fn portaob etos desengrasado insuficientemente, dar por resultado un frote sangu$neo defectuoso, con el #ue dif$cilmente se "ar$a un diagnstico adecuado% Fna materia fecal recolectada con orina, destru!e los embriones de Necator, lo #ue "ace fracasar un examen posterior como el desarrollo de larvas F, en el cultivo de Garada=Mori '1D@@) para la obtencin de larvas% En suma, las muestras mal recolectadas, inadecuadamente conservadas ! con muc"o tiempo despus de "aber sido obtenidas, no servirn para observaciones ! estudios posteriores, e inclusive pueden conducir a resultados errneos o falsos% Rec#lecc 1n* La obtencin de la materia fecal se puede "acer de diferentes
maneras, la ms frecuente es por la expulsin natural% La segunda se puede obtener con purgantes ! la otra es de #u se toma por medio de la cuc"arilla rectal% La #ue se utili-a con ma!or frecuencia es la primera, la segunda se utili-a en casos mu! especiales como en amebosis intestinal crnica ! en estrongiloidosis, Finalmente, la toma con cuc"arilla rectal se utili-a en los lactantes% Las muestras sern seriadas en tres d$as consecutivos, salvo otras indicaciones Mane4#% /e deben utili-ar frascos limpios de boca anc"a, se evitar la contaminacin con tierra, agua u orina% Los frascos se guardarn en lugares frescos, pues el calor acelera los fenmenos de fermentacin ! con fr$o se pueden destruir los #uistes ! trofo-o$tos de proto-oos '.oldman ! Co"nson, 1D@2, +"ang, 1D@@), debern
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eti#uetarse con el nombre de la persona, edad, sexo, fec"a, de preferencia, "ora de expulsin de las "eces% C#n!er5ac 1n* Los conservadores pueden ser f$sicos o #u$micos% Los medios f$sicos, son las temperaturas ba as, de 12M + #ue es la temperatura del refrigerador, se utili-an sobre todo para "eces formadas, las cuales incluso pueden llegar a examinarse 54 ! "asta 46 "oras despus de evacuadas, lo #ue no sucede con las "eces diarreicas, #ue deben examinarse en un pla-o no ma!or de una "ora ! no debern refrigerarse% Los medios #u$micos permiten la conservacin de las muestras durante un tiempo ma!or, sin correr el riesgo de #ue las formas parasitarias se deformen o destru!an% En seguida se anotan algunos de los ms usados8
C#n!er5ad#re! 0 2re!er5ad#re! /olucin de formalinaN al 12 >% /olucin de formalina al @>% /olucin de mert"iolate=!odo=formalde"$do 'M(F)%
Fi ador de fenol alco"ol ! formol '*&F)
Prct ca N#* 8 M cr#!c#2%a M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno comprender los procedimientos experimentales de muestras biolgicas de forma responsable, para su observacin a nivel microscpico siendo cuidadoso% &eneral dade!/irve para ampliar las imgenes de ob etos mu! pe#ue7os, tiene un sistema de iluminacin para poder visuali-ar el ob eto ! de un sistema de lentes para aumentar la imagen% El microscopio es un aparato frecuentemente utili-ado en el laboratorio de diagnostico cl$nico para observar de clulas microorganismos, etc% Fno de los instrumentos ms valiosos para el parasitlogo es el microscopio ! continuacin se indicaran algunas reglas simples para mantener los aparatos en buen estado !, por consiguiente #ue brinden el auxilio necesario con resultados ptimos% La calibracin del microscopio, le permitir "acer mediciones de las estructuras #ue observe, lo #ue le facilitar el diferenciar e identificar clulas, parsitos ! otras estructuras% La calibracin consiste en la determinar los coeficientes micromtricos para cada uno de los ob etivos de manera #ue cuando se necesitan saber el tama7o de una clula, se estable-ca el n9mero de subdivisiones con la escala micromtrica #ue al multiplicarse por el factor del ob etivo se determine el tama7o de la misma en micras%
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Mater al micrmetro ocular cmara de Neubauer
T9cn caIn!truct 5# 2ara la cal "rac 1n del , cr#!c#2 # c#n el , cr1,etr# #culara7 de!cr 2c 1n de la e!cala de la c,ara de Neu"auerEn la cmara de Neubauer "a! cuatro secciones marcadas con una L, donde se cuentan los leucocitos ! una -ona central donde recuentan los eritrocitos% En la figura 1 se se7ala el tama7o de los diferentes cuadros% El cuadro central de la cmara es la -ona de cuenta de eritrocitos, en esta cuadricula mide 1mm '1222 micras como lo indica la figura 1)
Figura 1%
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La cuadricula para cuenta de eritrocitos esta dividida en @ x @ cuadros ! cada una mide 2%5 mm 522 micras% & su ve- cada cuadro est dividido en 4 x 4 cuadros ! cada uno mide 2%2@ mm @2 micras, a partir de ellos se obtienen los coeficientes micromtricos '+%M)% "7 DESCRIPCI:N DE LA ESCALA DEL MICROMETRO OCULAR La escala del micrmetro ocular tiene 12 divisiones grandes del mismo tama7o, de las cuales de la segunda a la sexta presentan @ subdivisiones iguales% *ara medir una estructura, esta se "ar coincidir dentro de la escala, contabili-ando las divisiones grandes como cinco ! las pe#ue7as como uno%
Mide 122 micrmetros
DETERMINACI:N DE LOS COEFICIENTES MICROMETR;COS /e deben establecer los coeficientes micromtricos de cada ob etivo '12O, 42O, ! 122O)% +olocar el micrmetro ocular en el orificio i-#uierdo del microscopio, la cmara de Neubauer en la platina, enfocar con el ob etivo de 12O ! centrar en el campo la cuadr$cula de eritrocitos% Gacer coincidir la escala del micrmetro ocular en la l$nea media de la cuadricula para "acer cuenta de eritrocitos% Buscar donde una de las divisiones de la escala del micrmetro coincida con el borde de un cuadro de la cmara de Neubauer ! establecer los coeficientes micromtricos '+%M)
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MEDICI:N DE ESTRUCTURAS MICROSC:PICAS *ara determinar el tama7o de una estructura microscpica se deber "acer coincidir la estructura, en la escala del micrmetro ocular, moviendo la platina% Fna ve- #ue coincida el borde i-#uierdo de la estructura con una l$nea, establecer el n9mero de subdivisiones #ue abarca, contabili-ando como @ las #ue no tienen subdivisiones ! como uno cada uno de las mismas% +alcular la medida de la estructura, en micrmetros, multiplicando el n9mero de subdivisiones por el coeficiente micromtrico del ob etivo correspondiente%
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Cue!t #nar # 1% P+ul es la finalidad de la utili-acin de la micrometr$a en parasitolog$aQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 5% Menciona venta as ! desventa as del uso de la micrometr$a RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 4% P+mo calculamos la micrometr$a del ob etivo de inmersinQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR B "l #$ra.%a1% "ttp8IIe#uipo1%files%Kordpress%comI522BI12Idsc222B6% pg
2.
"ttp8IIKKK%scielo%clIscielo%p"pQ pidS/2B165544522@222522225TscriptSscRarttext%
4% "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdeptosImicrobiologiaIparasitologiaItrematodosIge neralidades%p"p
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Prct ca N#* < E=a,en D rect# M cr#un dad de c#,2etenc a El alumno aprender a reconocer la morfolog$a de los proto-oos mediante examen directo de una manera responsable% &eneral dade!Buscar, principalmente en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas mviles de parsitos de tama7o microscpico 'trofo-o$tos, #uistes de proto-oos8 Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Balantidium coli , etc%, as$ como larvas o "uevos de "elmintos8 Strongyloides stercoralis, Ancylostoma duodenale, Necator americanus, Trichostrongylus sp., Paragonimus, asciola, etc%)% Mater al*ortaob etos +ubreob etos *ipetas *asteur Microscopio compuesto &plicadores de madera o palillos* La muestra utili-ada es tan pe#ue7a, #ue es poco representativa% React 5#!+loruro de sodio, agua destilada, !odo cristaloide, !oduro de potasio S#luc #ne!- !"er miscel#nea de reacti"os$$ /olucin salina isotnica Lugol parasitolgico8 solucin madre8 /olucin de traba o%
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T9cn ca1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa% B "l #$ra.%a1% "ttp8IIbvs%minsa%gob%peIarc"ivosI(N/I1A@RN:4B%pdf 5% "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdiri eIindex%p"pQdirRverS11 4% Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana% 4% Francisco :ru illo +ontreras, Ungeles Hillanueva Verenas, Miguel ?a!go-a &na!a '5221)% Enfermedades *arasitarias% .uadala ara, +ullar% al%8 Ediciones
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Prct ca N#* > B?!@ueda De Par! t#! Inte!t nale! M cr#un dad de c#,2etenc aEue el alumno aprenda a identificar los diferentes tipos de morfolog$a de parsitos intestinales% *or medio de examen directo ! en fresco siendo tico ! responsable% &eneral dade!.rupo de animales #ue viven a expensas de seres vivos, en cu!o aparato digestivo se alo an ! con el #ue compite por el consumo de las sustancias alimenticias #ue ingiere el "usped% /u tama7o va desde ser diminuto '! slo es posible verlos a travs del microscopio), o medir desde cent$metros "asta metros% /u presencia en el organismo "umano est directamente relacionada con la falta de "igiene, tanto personal como al preparar alimentos ! las condiciones del lugar donde se consumen% Existen muc"os parsitos causantes de afecciones en el ser "umano Mater al Materia Biolgico ' Geces, /ecreciones) Formalde"$do al 12 > 'ver miscelnea de reactivos) &batelenguas Lugol 'ver miscelnea de reactivos) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) &plicador de madera +ubreob etos *ortaob etos Microscopio Laminillas permanentes de las diversas especies%
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T9cn caC#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# en .re!c#1% +olocar una gota de solucin Na+l al 2%6@>, en un portaob etos% 5% +on un aplicador obtener aproximadamente 5 mg de la materia fecal ! me-clarla en la gota de solucin salina% 4% Gacer una suspensin uniforme ! retirar los detritos macroscpicos% 4% +olocar un cubreob etos ! "acer la observacin microscpica inmediatamente con los ob etivos 12O ! 42O% C#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# d rect#1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa% Re!ultad#! de la #"!er5ac 1n M cr#!c12 ca* a) Nombre del parsitoRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
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Cue!t #nar # 1% P+ul es el examen de laboratorio de eleccin para la b9s#ueda de "uevos, #uistes o larvas en "ecesQ8 RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
5% P+ul es el examen de laboratorio de eleccin para la b9s#ueda de trofo-o$tos en "ecesQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
4% PEu entiende por examen coproparasitoscpico cualitativoQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a 1% "ttp8IIB4%15@%4B%145Isearc"Q #Scac"e8u:C2H#epW?&C8KKK%"igiene%edu%u!IcefaIparasitoI522BI*?;:(N:ce fa"tm%docXmorfologiaXdeXproto-oosXintestinalesXdeXimportanciaXME<(+&Tc dS15T"lSesTctSclnYTglSmx

2. "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdiri eIindex%p"pQdirRverS11
4% Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana%
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Prct ca N#*A M#r.#l#$%a de l#! 2r#t#B##! nte!t nale! M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno identificar los proto-oos intestinales de importancia medica mediante la observacin de mtodos directos, de una manera tica ! responsable% &eneral dade!Los proto-oarios son microorganismos unicelulares pertenecientes al ?eino Protista, subreino Proto%oa% /e caracteri-an por ser eucariota, pueden reproducirse asexuada o sexuadamente, tienen movilidad variable dependiendo de sus rganos de locomocin% *ueden vivir libremente o actuar como parsitos% *ueden parasitar a distintos animales ! a la especie "umana% Los parsitos "umanos se pueden clasificar taxonmicamente en 4 *"!lum basndose en sus caracter$sticas nucleares, de reproduccin ! de locomocin% /eg9n la clasificacin de la sociedad de proto-ologos parsitos pertenecen fundamentalmente a tres de 1D62, los proto-oos Sarcomastigophora, p"!la8
apicomple&a, y 'ilophora. (os Sarcomastig)*oros se subdividen, a su ve-, en dos grandes subp"!la8 Mastigophora y Sarcodina, respectivamente los flagelados tisulares intestinales ! la amibas% M#r.#l#$%aEntamoeba histol tica 'amebosis) :rofo-o$tos8 es la forma patgena, mide de 52 a @2 Zm% las cepas patgenas contienen "emat$es en su interior% *re#uiste8 tiene un solo n9cleo, barras de cromatina con sus extremos romos ! una vacuola de glucgeno% Euiste8 es la forma infectante, posee de uno a cuatro n9cleos
cu!os cariosomas centrales se observan a veces en las preparaciones en fresco, ! siempre en las preparaciones coloreadas% Entamoeba Coli8 morfolgicamente es seme ante a la Entamoeba histolytica, se diferencia por las caracter$sticas de la cromatina perinuclear ! la posicin excntrica del cariosoma, se presenta como trofo-o$tos, pre#uiste ! #uiste% Entamoeba hartmanni8 esta especie es seme ante en cuanto a las fases #ue posee a E% "istol!tica, con excepcin de sus tama7o, Entamoeba hartmanni desarrolla trofo-o$tos de 4=12Zm de dimetro, tiene un citoplasma vacuolado parecido al #ue muestra Entamoeba coli, el n9cleo 9nico en esta fase muestra un endosoma central ! la cromatina perifrica se distribu!e de manera "omognea% La media de los #uistes oscila entre @=12 Zm de dimetro, pueden ser vacuolados ! mostrar con una tincin permanente cuerpos cromatoides de aspecto baciloide o similares a un grano de arro-% Endolima! nana8 es ms pe#ue7a #ue la Entamoeba histolytica, morfolgicamente se destaca por#ue tanto los :rofo-o$tos como los #uistes poseen un n9cleo con un cariosoma central mu! marcado, ! no se observa membrana nuclear en los preparados microscpicos observados en fresco% Mater al Materia Biolgico ' Geces, /ecreciones, Hiales positivo proporcionados por el catedrtico ) Formalde"$do al 12 > 'ver miscelnea de reactivos) &batelenguas Lugol 'ver miscelnea de reactivos) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) &plicador de madera +ubreob etos *ortaob etos Microscopio
Laminillas permanentes de las diversas especies
T9cn caC#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# d rect#1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa%
Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsitan RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
Cue!t #nar # 8* PEu caracter$sticas son importantes para diferenciar Entamoeba histolytica de Entamoeba hartmanniQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
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<* PEu recursos de laboratorio son esenciales para identificar las amebas comensalesQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR >* &un cuando Entamoeba coli, Endolima& nana no son amebas patgenas, Pen #u radica la relevancia de su "alla-goQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a1% "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdiri eIindex%p"pQdirRverS11

2.
Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana%
4% :a! Lavala C%, .utirre- Euiro- M%, .racia V7e- V% '5224) 0*arasitolog$a +l$nica <e +raig3 Editorial Masson <o!ma Mxico /% &% :ercera edicin% 4% <e Garo &rteaga (%, /ala-ar /c"ettino *%, +abrera Bravo M% '1DD@) 0<iagnostico Morfolgico de las *arasitosis3 Editorial Mnde- Editores% /egunda edicin%
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Prct ca N#* C M#r.#l#$%a de l#! 2r#t#B#ar #! .la$elad#! nte!t nale! M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno identifi#ue las caracter$sticas morfolgicas del los proto-oarios flagelados mediante tcnicas permanentes, ef$meras obteniendo as$ una conciencia social% &eneral dade!Morfologa de Giardia:
*resentar un tama7o inferior a 52 [m% +arecen de ciertos orgnulos como son las mitocondrias ! el aparato de .olgi% \nicamente tiene un "ospedador 'monoxeno), es cosmopolita ! tiene dos formas de vida en su ciclo vital8 "ro#o$o%to8 presenta un tama7o en torno a 52 [m de longitud ! 1@ [m de anc"o con una morfolog$a piriforme ! una simetr$a bilateral% *ro!ectada en un plano se aseme a a una pera% *osee 6 flagelos, 5 anteriores, 5 posteriores, 5 ventrales ! 5 caudales, cu!a funcin es la motilidad celular% En la cara ventral presenta una estructura con forma de disco bilobulado, cu!a funcin es permitir la fi acin del parsito a la superficie del epitelio intestinal% En la cara dorsal ! coincidiendo en posicin con el disco bilobulado se sit9an dos n9cleos ovalados con grandes endosomas% & lo largo de la superficie ventral se disponen unos elementos denominados cuerpos mediales, cu!a funcin a9n permanece desconocida% El trofo-o$to es la forma vegetativa #ue se alimenta ! se reproduce% )u !te8 presenta un tama7o en torno a 1@ [m de longitud ! 12 [m de anc"o con una morfolog$a ovalada% *osee 4 n9cleos #ue siempre aparecen dispuestos en alguno de los polos% No presenta flagelos aun#ue se pueden apreciar los axonemas flagelares 'restos de los flagelos) ! los cuerpos mediales duplicados con respecto al trofo-oito% La pared es transparente ! mu! resistente tanto a factores f$sicos como #u$micos% El #uiste es la forma vegetativa infectante ! de resistencia%
&limentacin por fagocitosis ! pinocitosis del contenido intestinal a travs de la superficie dorsal% ?eproduccin por divisin binaria longitudinal% /e produce tan rpido #ue en poco tiempo pueden formarse millones de parsitos% No presentan reproduccin sexual% Mater al Materia Biolgico ' Geces) Formalde"$do al 12 > 'ver miscelnea de reactivos) &batelenguas Lugol 'ver miscelnea de reactivos) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) &plicador de madera +ubreob etos *ortaob etos Microscopio
T9cn caC#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# d rect#1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa%
Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
Cue!t #nar # 8* Mencione dos productos biolgicos 9tiles para reali-ar el diagnstico de la giardiosis RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a1%= "ttp8IIciencianet%com%arIBBIvacuna=contra=el=c"agas=pero=para=animales=dom=sticos 5%= "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdiri eIindex%p"pQdirRverS11 4%= Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana%
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Prct ca N#* D M#r.#l#$%a de Pr#t#B#ar #! C l ad#! Inte!t nale! M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno aprender a identificar las diferentes estructuras morfolgicas de los ciliados por medio de tcnicas de fi acin de manera cuidadosa ! ordenada% &eneral dade!/on formas unicelulares, relativamente grandes, con una estructura interna comple a% Ga! tres caracter$sticas #ue los definen8
/u superficie aparece cubierta de cilios alineados regularmente, con los #ue se mueven de forma activa ! velo-% :ienen dos n9cleos, ,acr#n?cle# ! , cr#n?cle#, este 9ltimo reservado para la reproduccin sexual, #ue reali-an espordicamente% La ma!or$a reali-a la fagocitosis mediante la #ue se alimentan a travs de una -ona especiali-ada, "undida, llamada c t#!t#,a, es decir, boca celular%
M#r.#l#$%a&alantidium Coli Es el proto-oario paras$tico ms grande en el ser "umano% Tr#.#B#%t#!* :ienen un tama7o usual de 42=@2 Zm, tiene forma ovoide con la parte anterior afiliada, movilidad rotatoria% N9cleos8 1 largo, macron9cleo en forma de ri7n, 1 pe#ue7o, micron9cleo esfrico ad!acente al macron9cleo, el cuerpo esta recubierto de cilios% /e observan vacuolas contrctiles% )u !te8 :ama7o usual de @2=@@Zm, es esfrico u oval, posee un macron9cleo grande visible en preparaciones no te7idas% El macron9cleo ! vacuolas contrctiles visibles en #uistes venes% En los maduros apariencia granular
las estructuras internas tienen
Mater al Materia Biolgico ' Geces) Formalde"$do al 12 > 'ver miscelnea de reactivos) &batelenguas Lugol 'ver miscelnea de reactivos) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) &plicador de madera +ubreob etos *ortaob etos Microscopio *reparaciones fi as de la especies%
T9cn caC#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# d rect#1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa% Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
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e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR Cue!t #nar #1%= PEue regin del cuerpo "umano invade el Balantidium coliQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 5%= P+ul es la v$a de entrada para el ser "umano ! cul es la fase infectante del ciliadoQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 4%= P+ules son las manifestaciones cl$nicas ms frecuentes de la BalantidiosisQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a1%= "ttp8IIKKK%uprm%eduIbiolog!IprofsIbunYle!Ilab4%"tm 5%= "ttp8IIKebpages%ull%esIusersI pineroI:ablas>52e>52imagenesIB%pdf 4%= +apedia.mobi,es,'iliophora -.. "ttp8IImundo=pecuario%comItema145Itrematodos%"tml
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Prct ca N#* E M#r.#l#$%a de l#! 2r#t#B#ar #! !an$u%ne#! .la$elad#! M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno identifi#ue las caracter$sticas morfolgicas del los proto-oarios flagelados mediante tcnicas permanentes, ef$meras obteniendo as$ una conciencia social% &eneral dade!Mor#olog%a de Leishmania (eishmania presenta 5 estados morfolgicos, el 2r#,a!t $#te, presente de forma extracelular ! ubicado en el intestino de los flebtomos, se caracteri-a por tener un cuerpo alargado ! un flagelo #ue les permite el movimiento, sta forma al ser inoculada dentro de los "ospederos se transforma en el segundo estado morfolgico conocido como a,a!t $#te% Los amastigotes se caracteri-an por ser redondeados, sin la presencia del *lagelo , de 5 a 4 micras de dimetro con un n9cleo ! un Yinetoplasto 'estructura mitocondrial especiali-ada #ue contiene &<N), sta forma parasitaria es la visuali-ada en los frotis ! biopsias para el diagnstico de la enfermedad% Los amastigotes son exclusivamente intracelulares pero pueden encontrarse en el intersticio en los casos en los #ue el parsito se replica "asta producir la ruptura de la clula "ospedera% M#r.#l#$%a de Tr02an#!#,a8 *resenta tres formas distintas8 amastigota, epimastigota ! tripomastigota%
A,a!t $#ta8 esfrico u ovalado, es la forma reproductiva en el interior
de las clulas mam$feras%

E2 ,a!t $#ta8 &largada ! con el cinetoplasto locali-ado anteriormente al
n9cleo, es la forma reproductiva en el tracto digestivo de los invertebrados ! en medios de cultivo%
Tr 2#,a!t $#ta8 tambin alargado, pero con el cinetoplasto locali-ado
posteriormente al n9cleo% /e encuentra en la sangre de los mam$feros ! es la forma infectante de ellos% Esta forma no se divide%
Mater al Materia Biolgico ' sangre) *ortaob etos Microscopio colorante de Wrig"t colorante de .iemsa
T9cn ca1% En un portaob etos de ar caer 5 gotas de sangre ! "acer una extensin, de ar secar al aire% 5%= :e7ir con solucin colorante de Wrig"t durante 1 a 4 minutos% 4%= *asado este tiempo lavar con agua destilada% <e ar escurrir ! secar al aire% 4%= ;bservar con ob etivos de 12O, 42O ! 122O utili-ando con ste 9ltimo aceite de inmersin%
Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
Cue!t #nar # <* P<e #u color se observa el n9cleo de los trofo-o$tos de Plasmodium te7idos con el colorante de .iemsaQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR >* P+mo se transmite la (eishmaniosisQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a1%= "ttp8IIciencianet%com%arIBBIvacuna=contra=el=c"agas=pero=para=animales=dom=sticos 5%= "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdiri eIindex%p"pQdirRverS11 4%= Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana%
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Prct ca N#* F M#r.#l#$%a de l#! 2r#t#B#ar #! .la$elad#! en ca5 dade! M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno identifi#ue las caracter$sticas morfolgicas del los proto-oarios flagelados mediante tcnicas permanentes, ef$meras obteniendo as$ una conciencia social% &eneral dade!M#r.#l#$%a de tr cG#,#na!Trichomonas "aginalis es un proto-oo flagelado patgeno, cu!o "bitat es el tracto genitourinario% ;tros tricomonnidos, tales como Trichomonas tena& ! Pentatrichomonas hominis se "an asociado a patolog$a bucal ! respiratoria, e intestinal, respectivamente% Tr#.#B#%t#8 presenta un tama7o 12=52 [m de longitud ! una morfolog$a piriforme% *osee @ flagelos8 cuatro son anteriores ! libres, ! el #uinto se dirige "acia la parte posterior del cuerpo celular asociado a la superficie celular formando una membrana ondulante #ue no tiene porcin libre del flagelo% *aralelo a dic"a membrana se dispone, en el interior de la clula, un "a- de microt9bulos denominado costa% El trofo-o$to es la forma vegetativa #ue se alimenta, se reproduce e infecta Tr#.#B#%t#! n# teH d#! En productos biolgicos provenientes de exudados vaginales ! uretrales, T. "aginalis presenta varias formas% En algunos organismos se encuentra su clsica forma ovoide con movimientos mu! rpidos debido a sus flagelos, en individuos pe#ue7o el axostilo sobre sale el cuerpo "acia la -ona ms posterior, aun#ue en la ma!or$a de los #ueda dentro del citoplasma% La membrana ondulante es ms corta #ue el cuerpo% En los exmenes en fresco, debido al movimiento de estos parsitos es dif$cil observar con detalle algunos de los aspectos morfolgicos descritos%
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Tr#.#B# t#! c#n t nc 1n 2er,anente +on "ematoxilina tiene un color gris o a-ul grisceo, miden 1@ de largo por 12 Zm en promedio, tienen formas variables, son ms grandes #ue las otras especies% +uatro flagelos anteriores se extienden recorren dos tercios a partir de sus blefaroplastos, los cuales estn del ordenados dentro de la membrana% La membrana ondulante ! la costa son cortas, del cuerpo del parsito% El n9cleo se encuentra cerca extremo anterior, contiene un n9mero de grnulos, generalmente ordenados en
forma de flor% El citoplasma no se observa con facilidad% El citoplasma se encuentra lleno de vacuolas con restos alimenticios% El axostilo puede o no sobresalir el cuerpo del organismo% Mater al Materia Biolgico '/ecreciones) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) *ipeta *asteur con bulbo +ubreob etos *ortaob etos Microscopio
T9cn ca1%= /e coloca a la paciente en posicin ginecolgica% 5%=(ntroducir con cuidado el espe o vaginal% 4%= +on un "isopo tomar la muestra del fondo de saco posterior% 4%= <epositar la primera toma en un portaob etos limpio ! "acer un extendido% @%= La segunda toma depositarla en un tubo de ensa!e con solucin salina conservando a 4B]+% A%= Fna ve- seco el extendido se procede a te7ir con el colorante de Wrig"t de 1 a 4 min% B%= /e observa al microscopio con ob etivos de 12O, 42O ! 122O agregando a ste 9ltimo aceite de inmersin%
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6%= +on una pipeta *asteur se toma una gota del fondo del tubo de ensa!e ! se deposita en un portaob etos ! se cubre% D%= Examinar con ob etivos de 12O ! 42O% 12%&notar resultados de observacin ! "acer dibu os%
Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
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Prct ca N#* I M#r.#l#$%a de l#! /el, nt#! de ,2#rtanc a ,9d ca M cr#un dad de c#,2etenc aEl alumno identifi#ue las caracter$sticas morfolgicas de los "elmintos importancia medica de una manera tica ! responsable% &eneral dade!El trmino gusano o verme, es amplio, se utili-a en el lengua e popular para "acer referencia a invertebrados de forma alargada, sin apndices ! #ue se despla-an arrastrndose8 lombri- de tierra, larva de mosca, tenias, etc% Gelminto8 es un nombre general, no taxonmico, utili-ado para designar a los gusanos parsitos ! a los de vida libre%
Morfologa de los principales grupos de helmintos:
de
C9!t#d#!- /u morfolog$a se caracteri-a por la presencia de un rgano anterior de fi acin, el esclex, provisto de ganc"os ! ventosas, #ue le permite fi arse a la mucosa intestinal, ! una parte posterior en forma de cinta de aspecto segmentado, denominada estrbilo, formado de una sucesin continua de progltides% <esde la base del esclex, las progltides del estrbilo #uedan encadenadas de modo #ue las ms antiguas o maduras van #uedando en la parte posterior del estrbilo% Las progltides cercanas al esclex se denominan inmaduros, !a #ue crecern paulatinamente en tama7o, formando un aparato reproductor masculino ! femenino completo, o dos, a medida #ue van siendo despla-adas por la formacin de nuevos anillos inmaduros% <e esta forma, se pueden observar los distintos estados de maduracin dentro del estrbilo, como si "ubiramos recogido una serie de fotogramas de su evolucin ! puede llegar a medir ms de @ metros%
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Tre,t#d#!- Los tremtodos se caracteri-an por tener un cuerpo no segmentado, con frecuencia en forma de "o a, ! revestido por un tegumento no ciliado formado por una cut$cula no #uitinosa, generalmente gruesa, por deba o de ella existe un epitelio sincitial !, ba o ste, fibras musculares longitudinales ! circulares% En las especies anaerobias, endoparsitos del tubo digestivo el glucgeno se usa en un tipo especial de fermentacin #ue libera +;5 ! cidos grasos% Ne,t#d#!- Los nemtodos son gusanos redondos, tienen el cuerpo alargado, cil$ndrico ! no segmentado con simetr$a bilateral% +on frecuencia, el mac"o tiene un extremo posterior curvado o "elicoidal con esp$culas copulatorias !, en algunas especies, una bolsa caudal denominada bursa% El extremo anterior del adulto puede tener ganc"illos orales, dientes, o placas en la cpsula bucal, #ue sirven para la unin a te idos, ! pe#ue7as pro!ecciones de la superficie corporal conocidas como cerdas o papilas, #ue se cree #ue son de naturale-a sensitiva% /e denominan fastidios o deiridios seg9n la porcin del cuerpo donde se localicen
Material:
Materia Biolgico ' Geces, /ecreciones, Hiales positivo proporcionados por el catedrtico ) Formalde"$do al 12 > 'ver miscelnea de reactivos) &batelenguas Lugol 'ver miscelnea de reactivos) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) &plicador de madera +ubreob etos *ortaob etos Microscopio Laminillas permanentes de las diversas especies%
T9cn caManual de Parasitologa General 42
C#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# d rect#1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa% Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR Cue!t #nar # 1%= Pcul es la forma infectante de asciola hep#ticaQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 5%= P+mo se reali-a el diagnostico de TeniasisQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 4%= P+ul es la fase infectiva de /scaris lumbricoides para el "umanoQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR B "l #$ra.%a8* "ttp8IIKKK%facmed%unam%mxIdiri eIindex%p"pQdirRverS11
<* "ttp8IImundo=pecuario%comItema145Itrematodos%"tml
>*
<e Garo &rteaga (%,/ala-ar /c"ettino *%, +abrera Bravo M% '1DD@) 0<iagnostico Morfolgico de las *arasitosis3 Editorial Mnde- Editores% /egunda
edicin%
Prct ca N#*8J M#r.#l#$%a de l#! A2 c#,2le=a M cr#un dadEl alumno aprender a identificar las diferentes estructuras morfolgicas de los &picomplexas mediante tcnicas permanentes de manera ordenada ! cuidadosa% &eneral dade!'(icom(le!as es un extenso grupo protistas caracteri-ado por la presencia de un orgnulo 9nico denominado comple0o apical% /on unicelulares, forman esporas ! exclusivamente parsitos de animales% Las estructuras mviles tales como flagelos o seudpodos estn ausentes excepto en ciertas etapas de los gametos% &lgunas enfermedades causadas por estos organismos son8

Malaria 'Plasmodium) Babesiosis 'Babesia) +occidiosis, inclu!endo8

o o o o
+riptosporidiosis ''ryptosporidium par"um) +iclosporosis ''yclospora cayetanensis) :oxoplasmosis 'To&oplasma gondii) (sosporiasis '1sospora belli)
Morfologa
Isos(ora belli- &picomplexa8 roptrias% ;portunista% ;o#uiste8 52=54 Zm% 54 x14 Zm% Gabita en el intestino delgado% Loonosis% +ontaminacin oro=fecal directa% La fase
infectante en el ser "umano es el oo#uiste, producto de la reproduccin sexual del parsito% 1sospora belli infecta por v$a bucal al ser "umano cuando ste ingiere alimentos contaminados%
Material:
Material Biolgico Formalde"$do al 12 > 'ver miscelnea de reactivos) &batelenguas Lugol 'ver miscelnea de reactivos) Na+l 2%6@ > 'ver miscelnea de reactivos) &plicador de madera +ubreob etos *ortaob etos Microscopio Laminillas permanentes de las diversas especies%
T9cn caC#2r#2ara! t#!c12 c# , cr#!c12 c# d rect#1% En un portaob eto se colocan, separadamente, una gota de solucin salina ! otra de lugol% 5% +on el aplicador de madera, se toma una muestra de 1 a 4 mg de "eces ! se me-cla con la solucin salina% 4% +on el mismo aplicador se retiran las fibras ! otros fragmentos gruesos% 4% /e coloca el cubreob etos% @% /e efect9a la misma operacin en la gota del lugol ! se observa% Dat#! del 2ar! t#% a) Nombre del parsito RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR b) & #ue grupo taxonmico pertenece RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
c) Estad$o desarrollado RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR d) & #ue rgano 's) sitio 's) invade o parsita RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR e) Menciona #ue tipo de tcnica se llevo a cabo, especificando si fue en fresco en tincin RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR f) <escribe las caracter$sticas ! Io criterios morfolgicos% RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR Cue!t #nar # 1% P+ul es la fase 1sospora belli en el ser "umanoQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 5% P+ul es la v$a de infeccin de 1sospora belliQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 4% PEu tcnica se emplea para el diagnstico de la 1sosporiosisQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a1% = "ttp8IIKKK%parasitologia%blogcindario%comI522BI2@I22221=parasitologia%"tml = A4Y 5%= Kapedia%mobiIesI+iliop"ora 4%= Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana% 4% <e Garo &rteaga (%, /ala-ar /c"ettino *%, +abrera Bravo M% '1DD@) 0<iagnostico
Morfolgico de las *arasitosis3 Editorial Mnde- Editores% /egunda edicin%
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Prct ca N#*88 T nc #ne! 2er,anente! de 2ar! t#! M cr#un dad de c#,2etenc aEue el alumno se familiarice con las diferentes tcnicas de tincin de parsitos para poder distinguirlos al microscopio ! utili-arlas en el diagnstico de manera tica ! responsable% &eneral dade!En la ma!or$a de los casos los proto-oarios intestinales se pueden observar bien con tinciones temporales, como en el caso de los exmenes directos con lugol, solucin salina ! sudn% En algunas ocasiones es necesario te7ir los parsitos en forma definitiva para obtener preparaciones permanentes, otras veces estas tinciones son necesarias por #ue se necesita distinguir algunas de sus estructuras celulares, utili-ando tinciones especiales permanentes para poder observarse% El inmunodiagnstico puede reali-arse recurriendo a las tinciones con anticuerpos marcados con colorantes fluorescentes, permitiendo identificacin ms fcil% Las preparaciones fecales permanentes son "ec"as por diferentes ra-ones !a #ue proporcionan informacin sobre el material estudiado% Fna buena tcnica de tincin debe reunir los siguientes re#uisitos8
La coloracin de las estructuras nucleares ! citoplasmticas debe ser selectiva% Las soluciones #ue se utili-an deben ser fciles de preparar
<eben tener la capacidad de te7ir las diferentes fases del parsito en la misma muestra <urante su reali-acin se deben emplear el menor numero de soluciones El paso en el cual se lleva a cabo diferenciacin debe ser rpido% Eue presente una de las tonalidades para facilitar la identificacin de estructuras parasitarias%
(ndependientemente del mtodo #ue se eli a se deben tener las siguientes precauciones para la obtencin de me ores resultados%

No permitir #ue la preparacin a te7ir se se#ue durante el mtodo de tincin% :odas las soluciones empleadas deben estar perfectamente tapadas para evitar evaporacin Escurrir siempre el portaob eto antes de introducirlo en la siguiente solucin tocando el extremo por dos segundos con papel absorbente% La solucin de !odo se debe de cambiar de una a tres semanas, pero si al utili-arla se torna plida se rempla-a o se le adiciona ms solucin madre lugol%
+uando se ti7e un gran n9mero de portaob eto el colorante se va dilu!endo, afectando la calidad de la tincin% +uando se utilice el alco"ol et$lico absoluto o xilol en la tincin, se deben de mantener en frasco perfectamente cerrado para evitar #ue se "idraten% /i su resina sinttica se encuentran mu! densos, adicione xilol ! colo#ue l frasco a 4B> para "omogenei-ar ! utili-ar "asta 54 "oras
T9cn ca!Pre2arac #ne! e.%,era!* /on fciles rpidas ! 9tiles para poder observar, discriminar ! diagnosticar estructuras parasitarias despus de reali-ar los mtodos coproparasitoscpicos '+*/)8 directo en fresco, de concentracinIflotacin 'faust, Ferreira) o concentracin sedimentacin '?itc"ie)% La solucin de lugol es de uso generali-ado% Lu$#l T9cn caManual de Parasitologa General 48
a) El procedimiento consiste en colocar la muestra de materia fecal sobre un portaob etos limpio ! desengrasado b) Emulsionarla con una gota de lugol, cubrirla con cubreob etos evitando la formacin de burbu as d aire c) ;bservar al microscopio con los ob etivos de 12x confirmando la observacin con el ob etivo 42x% d) &notar resultados de la observacin% Pre2arac #ne! 2er,anente! *ara fi ar trofo-oitos flagelados 'Trichomonas "aginalis, Giardia lamblia)% T9cn ca1% En una ca a petri colocar un triangulo de la varilla de vidrio, ! adicione unos cristales de !odo metlico 5% +on la a!uda de una pipeta deposite el material biolgico 'secrecin vaginal, sedimento urinario) sobre un portaob etos sin extenderlo introducir este porta en la ca a petri con la gota resuspendida "acia aba o con la finalidad #ue los vapores de !odo fi en a los proto-oarios de ar actuar de @ a 12 segundos, "asta obtener una me-cla de color mbar "omognea% 4% /acar inmediatamente la preparacin de la ca a petri 'cuidando de los vapores del !odo !a #ue fi an la retina del o o)% 4% (nmediatamente despus, adicionar una gota de sangre con E<:& ! reali-ar posteriormente un extendido sangu$neo delgado% @% <e ar secar a temperatura ambiente ! posteriormente fi arlo con metanol por un tiempo de 1 minuto% A% :e7ir la preparacin con .iemsa o Wrigt" seg9n tcnicas "ematolgicas= B% ;bservar al microscopio con aceite de inmersin% 6% Las tric"omonas te7idas se observan de coloracin rosa tenue con flagelos oscuros%
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D% /e tiene #ue reali-ar una dilucin del colorante .iemsa o Wrig"t por cada mililitro de colorante se adicionan 5 ml de agua destilada, se ti7e por @ minutos% 12% /e monta con resina sinttica o en su defecto con Entellan de MercY% MertG #lateK0#d#K.#r,aldeG%d# 6MIF7 El M(F es fcil de "acer% Fi a ! ti7e en forma simultnea% Es un buen fi ador de #uistes, trofo-o$tos, "uevo ! larvas%
T9cn ca 1%= Gomogeni-ar una muestra tami-ada de un vial del producto biolgico de proto-oo en una relacin de 1 ml de M(F ms 5 ml de la suspensin del vial suspendido en formol al 12>% 5%= se "omogeni-a el vial, posteriormente se toma con una pipeta de transferencia 122 micro litros aproximadamente en un portaob etos para despus colocare el cubreob etos% 4%= se lleva la preparacin al microscopio en seco dbil '12x) para buscar "uevos, #uistes o larvas 4%= la identificacin se "ace por las tonalidades de las propiedades de la eosina #ue contrasta la morfolog$a n$tida de los #uistes, "uevos o larvas% & ard a la,"l a 1% *oner una gota de material fecal o contenido duodenal% 5% ?esuspenda sobre un portaob etos ! extienda la gota% 4% <e e secar a temperatura ambiente 4% Fi e con metanol ! de ar secar% @% :i7a con .iemsa durante 4@ minutos% '5ml de agua de la llave con 1 gota de solucin madre de .iemsa)% A% Montar con Entellan de MercY%
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Alc#G#l3 .#r,aldeG%d#3 c d# ac9t c# 6AFA7 El &F& se utili-a para conservar meta-oarios 'tremtodos ! cestodos) Pr#ced , ent# 2ara . 4ar tre,t#d#! *ara no da7ar la morfolog$a de los meta-oarios, stos se manipularn extremando cuidados, ! antes de fi arlos "a! #ue someterlos a una fase de rela acin8 a) *ara rela arlos los trematodos se colocan en agua destilada durante @ a 12 minutos 'no de ar ms de 52 minutos debido a #ue las estructuras internas se destru!en por la lisis osmtica)% La incubacin de los tremtodos adultos en agua tambin favorecen la salida de "uevo, lo cual es benfico debido a #ue se observarn me or las estructuras internas% b) El espcimen se coloca entre dos portaob etos en posicin dorsoventral ! se presionan con cuidado sin macerarlo% c) *or un extremo de los portaob etos se seca el exceso de agua con una gasa, por el otro extremo se a7ade el fi ador '&F&) ! se de a reposar 12 minutos% d) Los trematodos se separan de los portaob etos ! se colocan en el fi ador '&F&) durante 46 "oras e) /e transfieren a un recipiente con etanol al B2>, en estas condiciones, los trematodos se pueden almacenar en forma permanente o #uedan listos para la tincin% Pr#ced , ent# 2ara . 4ar ce!t#d#! Los cestodos, igual #ue los tremtodos, primero se rela an% a) /e colocan en agua destilada o solucin isotnica a 4B]+ durante @ a 42 minutos 'ms tiempo ocasionar lisis osmtica de varios rganos internos)% ;tra opcin es utili-ar etanol al @%2> a temperatura ambiente% b) /i el parsito es de un tama7o medio, se coloca entre dos portaob etos en posicin dorsoventral ! se presionan con cuidado sin macerarlo% c) *or un extremo de los portaob etos se seca el exceso de agua con una gasa, por el otro extremo se a7ade el fi ador '&F&) ! se de a reposar 42 minutos%
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d) El e emplar se retira ! se coloca en un recipiente con el fi ador '&F&) durante 54 "oras% e) Los cestodos se transfieren a un recipiente con etanol al B2>% Pr#ced , ent#! 2ara . 4ar ne,t#d#!* *ara "acer una buena observacin de las estructuras internas de los nematodos, stos necesitan tinciones% Basta con un procedimiento adecuado para aclararlos ! fi arlos% a) <ebido a #ue el fi ador puede contraer la estructura de los nematodos vivos, stos se colocan durante 42 segundos en cido actico glacial fr$o ! despus en etanol al B2>% b) Los nematos pueden almacenarse de manera permanente en etanol alo B2> con @> de glicerol '#ue suavi-a ! aclara)% /i se desean preparaciones fi as, entonces se usa el glicerogel% T nc 1n tr cr1, ca de &#,#r KLGeatle0 &l principio la tincin de .omori se utili- en te idos ! W"eatle! la uso en parsitos% Este mtodo es ms rpido #ue el de "ematoxilina frrica% Es 9til para diferenciar proto-oarios intestinales en donde se pueden ver algunos detalles del citoplasma ! el n9cleo% La tincin se puede "acer en frotis de muestra previamente preservadas en *H& o en frotis con muestras frescas ! fi as con /c"audinn% '*ara preparacin de reactivos ver anexos) Funda,ent# Esta tcnica combina un colorante plasmtico '+romotropo 5?) ! un colorante de fibras conectivas 'verde lu-Ia-ul de anilina) en una solucin de cido fosfot9ngstico ! cido actico glacial% El tratamiento previo de las secciones con solucin de Bouin caliente intensifica la tincin% El cido fosfot9ngstico favorece la coloracin ro a de m9sculo ! citoplasmas% Las fibras de colgeno toman los iones de tungstato formando un comple o al #ue se une el verde lu-% El ba7o de cido actico "ace los colores ms trasparentes pero no altera el balance de color
Pr#ced , ent# a) La preparacin de las laminillas ! la fi acin se reali-an de manera similar al descrito en la tincin de "ematoxilina% b) *ara eliminar el exceso de cloruro de mercurio del fi ador de /c"audinn, las laminillas se colocan el alco"ol B2>=!odo durante un minuto c) /e lavan dos veces con etanol al B2>, durante minutos% d) Las laminillas se colocan en solucin concentrada durante @ a 12 minutos e) /e transfieren a etanol al D2> con un 1> de cido actico '12=1@ segundos) f) /e sumergen dos veces en etanol absoluto% g) /e ponen en etanol absoluto durante 42 segundos ") /e meten en xileno durante un minuto% i) Las preparaciones se cubren con resina o blsamo de +anad, se les coloca un cubre ob eto de numero 1 ! se de an secar%
Re!ultad#! 1% Fibras musculares, fibrina ! citoplasma8 ro o% 5% +olgeno, cart$lago, mucinas ! membranas basales8 verde% 4% N9cleos8 a-ul negru-co Nota) los portaob etos se pueden te7ir rpidamente pasando por una serie de frascos +oplin #ue contengan cada uno de los reactivos% ;tra estrategia s usar un solo frasco +oplin, al #ue se le van cambiando los reactivos% +on cual#uiera de esas dos maniobras se pueden colorear por lo menos 12 lamillas en un solo tren de tincin% Los proto-oarios ad#uieren diferentes tonalidades% El fondo se ve sobre todo ro o o verde, en tanto #ue los proto-oarios toman un color ms neutro, casi siempre gris o verde plido% Los cuerpos cromatoides ! eritrocitos toman tanto el color ro o
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como el colorante verde con lo #ue se genera un fuerte contraste con el citoplasma% *or lo regular los elementos nucleares se ti7en de un color ms oscuro% Z eGlKNeel!en La tincin para organismos resistentes al cido ! al alco"ol se empe- a usar en parasitolog$a cuando "icieron su aparicin organismos oportunista de los gneros +r!tosporidium, +!clospora ! otros ms del grupo de los microsporidios% El procedimiento para reali-ar la tincin es mu! sencillo% Pr#ced , ent#a) /obre un portaob eto se "ace un frotis de "eces, de preferencia delgado% b) La muestra se fi a con metanol absoluto 'la laminilla se cubre con metanol absoluto ! se de a #ue el alco"ol se evapore)% c) /e cubre la preparacin con un papel filtro '5O4 cm)% d) /e aplican de @ a B gotas de carbolfucsina para #ue el papel filtro #ue completamente "9medo, luego se calienta la laminilla "asta #ue produ-ca vapores 'si #ue la laminilla se se#ue)% V se sigue aplicando la carbolfucsina durante 4 a @ minutos% e) +on una pin-a de diseccin se retira el papel filtro, se lava con agua ! se de a #ue la laminilla se se#ue% f) /e decolora con alco"ol=cido "asta #ue no #uede color en el lavado% g) /e lava la laminilla con agua de la llave% ") Luego se aplica el a-ul de metileno durante un minuto% i) <espus se lava ! se seca con el aire durante uno a 5 minutos% ) ;bservar con el ob etivo de inmersin '122O) /e,at#= l na .9rr ca ,#d . cada La "ematoxilina frrica es una de las tcnicas de tincin ms aceptada aun#ue el procedimiento es largo% *ara obtener buenas tinciones se recomienda usar el fi ador de /c"audinn% Pr#ced , ent#-
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a) Gacer un frotis en un portaob etos ! emulsionarlos con solucin salina isotnica8 es necesario #ue la capa #uede delgada% &ntes de #ue las "eces se se#uen% /e fi a con sc"audinn durante A2 minutos 'se puede de ar toda la noc"e en fi ador)% b) *ar eliminar los cristales del cloruro de mercurio, las preparaciones se colocan en una solucin de etanol al B2>=!odo durante @ minutos% 'la solucin de alco"ol=!odo se preparar a7adiendo unas gotas de !odo al 4> al etanol al B2>)% *osteriormente en etanol al D@> ! en etanol al B2> 'en ambos pasos durante @ minutos)% /e lavan con agua durante 12 minutos% c) Los portaob etos se colocan en solucin de traba o durante @ minutos% d) /e lavan con agua durante 12 minutos% e) /e des"idratan en etanol al B2>, D@> ! en etanol absoluto 'cada paso ser en @ minutos)% f) Las laminillas se transfieren a xileno durante 12 minutos% g) Las laminillas se cubren con blsamo de +anad, se coloca un cubreob etos del numero 1 ! de a secar% En todos los pasos "a! #ue evitar #ue las laminillas se se#uen% El blsamo de +anad debe aplicarse cuando el portaob eto todav$a esta "9medo de xileno% En el paso de etanol absoluto a xileno se puede formar precipitados cali-os, para evitarlos, se recomienda utili-ar etanol absoluto ! xileno nuevos% /i "a! precipitado se deben repetir esos pasos% T nc 1n de M n0#un 2ara c#cc d #! Funda,ent#La observacin de presencia o ausencia de B%&%&%? sin usar calor% T9cn ca1% ?eali-ar un extendido de "eces frescas o conservadas en formalde"ido al 12> sobre un portaob eto ! de ar secar al aire durante 52 minutos%
5% Fi ar los extendidos colocando metanol durante 1 minuto ! de ar secar al aire% 4% +olocar sobre el extendido un cuarto de papel filtro de manera #ue lo cubra en su totalidad ! agregar el colorante carbol=fucsina, te7ir durante @ minutos, 'no es necesario calentar)% 4% Lavar con agua de la llave% @% <ecolorar con alco"ol cido por goteo "asta #ue no escurra ms colorante ! lave ron agua de llave% A% +ubrir los extendidos con a-ul de metileno durante un minuto, lavar con agua de la llave ! de ar secar al aire% B% ;bservar al microscopio con el ob etivo de 122x% si se #uiere guardar la lmina "acer monta e con resina sinttica% S#luc 1n de aBul de ,et len# de L#e..lerFunda,ent#/e utili-an para observar morfolog$a, agrupacin, elementos celulares, leucocitos, clulas epiteliales, etc% T9cn ca <isolver 2%4 gramos de a-ul de metileno en 42 ml de alco"ol et$lico al D@> ! adicionar 122 ml de "idrxido de *otasio al 2%21>% 1% Extienda la muestra problema ! de ar secar 5% Fi e con metanol durante 1 minuto 4% +ubra el extendido con un cuadro de papel filtro, de manera #ue lo cubra en su totalidad% 4% &dicionar en fr$o la solucin de Fucsina sobre el papel filtro, ti7a por @ minutos% @% En uague con agua de la llave% A% <ecolore con alco"ol et$lico cido por goteo "asta #ue no escurra colorante%
B% En uague con agua inmediatamente% 6% &dicione a-ul de metileno de Loeffler durante un minuto% D% Lave con agua de la llave ! de e secar% 12% ;bserve la precipitacin en ob etivo de 122x con aceite de inmersin=
Cue!t #nar #
1% P*or #u es necesario usar colorantes para te7ir a los proto-oarios parsitosQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 5% P+ul es la diferencia entre tinciones ef$meras ! tinciones permanentesQ PEn #u circunstancias se recomienda se cada una de ellasQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR P*or #u es necesario fi ar las estructuras parasitariasQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR 4% P+ul es la solucin fi adora #ue se utili-a con ma!or frecuencia para las preparaciones permanentes del frotis de "ecesQ RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR RRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRRR
B "l #$ra.%a1.
"ttp8IIbvs%minsa%gob%peIarc"ivosI(N/I1A@RN:4B%pdf a la enfermedad% Mxico, <F8 Mc.raK="ill (nteramericana%
5% Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas
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4% Francisco :ru illo +ontreras, Ungeles Hillanueva Verenas, Miguel ?a!go-a &na!a '5221)% Enfermedades *arasitarias% .uadala ara, Cal%8 Ediciones +ullar%
ANE+O NO* 8 MISCELNEA DE REACTIVOSa7 MertG #lateK0#d#K.#r,aldeG%d# 6MIF7 S#luc 1n c#ncentrada:intura de mert"iolate 522%2ml
Formalde"$do F/* .licerina &gua destilada S#luc 1n de 0#d# 6lu$#l7Voduro de potasio Vodo cristaloide &gua destilada S#luc 1n de tra"a4#/olucin concentrada /olucin de !odo
5@%2 ml @%2 ml 5@2%2 ml 12%2g @%2g 122%2ml 5%4@ ml 2%1@ ml
S#luc 1n c#ncentrada% El mert"iolate 'No%DD Lill! 181222) se "omogenei-a con el formalde"$do, glicerina ! agua% La solucin se almacena en un frasco mbar ! puede durar "asta un a7o% La solucin de !odo tiene un tiempo de vida corto 'menos de una semana) por tal ra-n se debe preparar slo la necesaria ! almacenarla en frascos de color mbar% La solucin de traba o se prepara en el momento en #ue se va a preservar la muestra% En un recipiente se me-cla la muestra de matera fecal con la solucin de traba o, pero conservando una relacin de 184=@ 'muestra8 M(F)% "7 /e,at#= l na .9rr ca ,#d . cada Soluci*n concentrada ' Gematoxilina Etanol absoluto 1222%2ml Soluci*n concentrada & /ulfato ferroso de amonio /ulfato frrico de amonio Ucido clor"$drico &gua destilada Soluci*n de traba+o /olucin concentrada & /olucin concentrada B 1@ml 1@ml 12%2g 12%2g 12%2 ml 1222%2 ml 12%2 g
Las soluciones se almacenan a temperatura ambiente ! su vida media es de A meses%
La solucin de traba o tiene vida media de B d$as
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c7 S#luc 1n de .#r,al na # .#r,aldeG%d# al 8J N React 5#!Formalina &gua de la llave Pr#ced , ent#8 /e me-clan 12 ml de formalina ! D2 ml de agua de la llave, se envasa en frascos con tapn de plstico% La solucin de formalina al 12 >, esta indicada para preservar muestras en la cuales se desconoce su contenido parasitario, se recomienda esta solucin, aun#ue los "uevos de scaris ! tricocfalos siguen en desarrollo, esto no importa para su identificacin posterior% *ara usar adecuadamente esta solucin, se me-cla una parte de "eces con 4 de la misma% <ebido #ue el formol es el conservador ideal para #uistes, "uevos ! larvas, se debe de escoger la parte ms consistente de la muestra% d7 Lu$#l 2ara! t#l1$ c# React 5#!Vodo cristaloide Voduro de potasio Pr#ced , ent#/e disuelven 12 grs% de !oduro de potasio en 122ml de agua destilada ! enseguida se agregan @ grs% de !odo cristaloide, se agita constantemente para #ue se disuelva la ma!or cantidad posible, se guarda el frasco mbar% No importa #ue #uede exceso de !odo en el fondo, esto se "ace para #ue la solucin permane-ca con la concentracin deseada durante muc"o tiempo e inclusive se puede reintegrar el volumen con adicin de agua destilada% e7 S#luc 1n !al na !#t1n ca React 5#!&gua destilada +loruro de sodio Pr#ced , ent#/e pesan 6%@ de Na+l, se disuelve en agua destilada ! se completa el volumen a 1222 ml en matra- volumtrico% .7 S#luc 1n !aturada de NaCl 6!al,uera7
React 5#!+loruro de sodio comercial, resulta ms prctico ! econmico utili-ar sal de cocina% &gua Pr#ced , ent#En un recipiente de 1 litro, se vierte agua "asta la mitad ! se agrega suficiente cloruro de sodio para #ue se "aga una solucin sobre saturada, o sea #ue #uede exceso de la sal sin disolver en el fondo, el sobrenadante es el #ue se deber utili-ar% *ara acelerar la disolucin, se puede calentar la me-cla ! se de a enfriar, el exceso de la sal cristali-ar% $7 !#luc 1n de alc#G#l et%l c# al EJ N React 5#!&lco"ol et$lico absoluto &gua Pr#ced , ent#/e disuelven 42 ml de alco"ol et$lico absoluto en B2 ml de agua de la llave ! se guarda en un frasco con tapn% G7 Ge,at#= l na c#ncentrada React 5#!/ulfato doble de aluminio ! amonio &lco"ol met$lico absoluto .licerina Pr#ced , ent#*rimero se va a reali-ar la solucin acuosa saturada de alumbre de amonio% /e solubili-a el sulfato doble de aluminio ! amonio en un recipiente, se pone a calentar ! se agrega sal, "asta su disolucin, cuando se enfr$a la solucin el exceso cristali-ara, se utili-a el sobrenadante% Enseguida se pesan 4 grs% de "ematoxilina, se disuelven en 5@ ml de alco"ol ! se a7aden 422 ml de la solucin de de alumbre de amonio, se de a madurar la solucin con el tapn flo o ! a la lu- del sol durante 1@ d$as, pasados los cuales se agregan 122 ml de alco"ol met$lico absoluto ! 122 ml de glicerina, ambos #u$micamente puros% /e vuelven a guardar, a"ora durante un mes expuesta a la lu- solar% &ntes de usarla deber filtrarse% 7 !#luc 1n "u..er de .#!.at#!
React 5#!Fosfato monopotsico Fosfato disdico Pr#ced , ent#/e pesan 2%4D grs% de fosfato monopotsico ! 1%14 de fosfato di sdico, se me-clan ! se disuelven "asta completar un volumen de 1222 ml en un matra- volumtrico% 47 !#luc 1n de tra"a4# & e,!a React 5#!+olorante de .iemsa en polvo .licerina E*% &lco"ol met$lico /olucin buffer de fosfato Pr#ced , ent#*rimero se va a reali-ar la solucin madre de giemsa% /e pesan 4%6 grs% de giemsa en polvo, se coloca en un mortero de @22 ml, se agregan 5@2 ml de glicerina, mientras #ue con el pistilo se me-cla con muc"o cuidado "asta #ue "omogeneice ! no "a!a grumos% /e agregan 5@2 ml de alco"ol met$lico absoluto libre de acetona% /e de an 122 ml de alco"ol sin incorporar% La me-cla se vac$a en un frasco oscuro, con el resto del alco"ol se en uaga el mortero ! el pistilo de tal manera #ue no #ueden restos del colorante% <espus de "aber reali-ado la solucin madre de giemsa, se me-cla volumen a volumen con la solucin buffer de fosfato% M7 C#l#rante de Or $Gt React 5#!+olorante de Krig"t en polvo &lco"ol met$lico absoluto, libre de acetona%
Pr#ced , ent#/e pesan 2%A2 grs% de colorante de Krig"t ! se disuelven en 4A2 ml de alco"ol met$lico absoluto ! libre de acetona% l7 Alc#G#l3 .#r,aldeG%d#3 c d# ac9t c# 6AFA7
React 5#! Etanol 'D@>) Formalde"$do &gua destilada Ucido actico glacial 42%2ml 12%2 ml @2 ml 12%2ml
La me-cla de etanol, formalde"$do ! agua destilada dura varios meses% +uando se agrega el cido actico dura un mes% m, -iehl.Neelsen Carbol#ucsina Soluci*n ' Fucsina bsica Etanol 'D@>) Soluci*n & Fenol 'cristales fundidos) @%2g &gua destilada D@%2ml /e me-clan las dos soluciones ! antes de su uso se de an reposar una semana n7 ABul de ,et len# alcal n# de L#P..ler Soluci*n ' &-ul de metileno Etanol 'D@>) Soluci*n & Gidrxido de potasio '2%12> peso) /e me-clan las dos soluciones% #7 Alc#G#l c d# Ucido clor"$drico 'G+l) Etanol 'D@>D 4%2 ml DB%2 ml 122ml 2%4g 42%2 ml 2%4g 12%2 ml
*rimero se vierte el etanol ! se le agrega despus el G+l, la reaccin provoca calor%
27 S#luc 1n de .#r,al na al CN* /e me-clan @ ml de formalina ! D@ ml de agua de la llave, se envasa en frascos con tapn de plstico%
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La solucin de formalina al 12>, est indicada para preservar muestras en las cuales se desconoce su contenido parasitario, se recomienda esta solucin, aun#ue losa "uevos de scaris ! tricocfalos siguen en desarrollo, esto no importa para su identificacin posterior% *ara usar adecuadamente esta solucin, se me-cla una parte de "eces con tres de la misma% <ebido a #ue el formol es el conservador ideal para #uistes, "uevos ! larvas, se debe de escoger la parte ms consistente de la muestra%
@7 F 4ad#r de .en#l alc#G#l 0 .#r,#l 6PAF7 Esta solucin se puede utili-ar en lugar del formol, conserva adecuadamente trofo-o$tos ! #uistes de proto-oos, as$ como "uevos ! larvas de "elmintos% El material previamente con o sin tincin preservado con *&F, se puede utili-ar para "acer lecturas inmediatas
temporal, pues si no se utili-a sta, los n9cleos se ponen perfectamente de manifiesto para observarse sin otro tipo de manipulacin% En el caso de #ue se desee "acer tinciones de tipo temporal se recomienda el uso de colorantes como el a-ul de metileno o el de tionina% +omo el primero se encuentra prcticamente en cual#uier laboratorio, en este caso se indica la forma de preparacin de la solucin de contraste con este fi ador% /i se desea utili-ar tionina, se prepara de manera seme ante%
ANE+O <* IM&ENES
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5% Becerri Flores, ?omero +abello '5224)% *arasitolog$a mdica de las molculas

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