III.

MATERIALES Y METDOS
3.1. MATERIALES DE VIDRIO, METAL Y OTROS 3.1.1. Tubos de ensayo de 11x 130 mm. 3.1.2. Gradillas. 3.1.3. Pipetas graduadas de 1, 5, 10 ml. 3.1.4. Micro pipetas (capilares). 3.1.5. Fiolas de 100 ml. 3.1.6. Probetas de 50 ml. 3.1.7. Beakers de 50 ml y 100 ml. 3.1.8. Buretas. 3.1.9. Luna reloj. 3.1.10. Papel watman N 3 3.2. EQUIPOS 3.2.1. Ph metro. 3.2.2. Estufa 3.3. REACTIVOS 3.3.1. Aminocidos preparados por separado. 3.3.2. Standares de aminocidos. 3.3.3. Solventes: - Ac. Actico 0.1 N. - Fenol: agua (80:20) - Butanol: actico (glacial): agua: Piridina. - NaOH 0.1 y 0.01 N. - Reactivos Nihidrina para relevado.

3.4. MTODOS
FLUJOGRAMA CUANTIFICACIN Y SEPARACIN

Preparacin del papel Cromatogrfico

Colocando los AA en Papel Cromatogrfico

Remojando en el cido HCl, Luego lo puesimos en la estufa Para secarlo

Con la ayuda de los capilares se agrego 0.2 ul de Triptfano, Arginina, Acido Asprtico

Colocando el papel

En la cmara

Realizando el secado

Analizando los Resultados de la Coloracin

IV. RESULTADOS

Resultados obtenidos en la corrida con el papel Cromatografico

17.2 cm

8.5 cm distancia recorrida de la Triptfano

2.2 cm distancia recorrida de la Acido asprtico

1.9 cm distancia recorrida de Arginina

Relacin entre la distancia recorrida por la muestra en relacin al recorrido del solvente

Rf1 = d1 fs
TABLA N 1 Rf del AA Triptfano:

; Rf2 = d2 fs

; Rf3 = d3 fs

Rf del AA Arginina:

Rf del AA Acido Asprtico:

Rf1 = _8.5 17.2 Rf1 = 0.49

Rf2 = _1.9 17.2 Rf2 = 0.11

Rf3 =_2.2_ 17.2 Rf3 = 0.12

TABLA N 2

Distancia Final Distancia recorrida del triptfano Distancia recorrida de la arginina Distancia recorrida del cido asprtico

17.2 cm 8.5 cm 1.9 cm 2.2 cm

Clculos obtenidos para sacar las concentraciones: Datos: CC1 = 1mg/ml Para T2: C1 x V1 = C2 x V2 (1mg/ml)x(0.1ml) = C2(1.5ml) C2 = 0.1mg 1.5ml C2 = 0.067mg/ml Para T3: C1 x V1 = C2 x V2 (1mg/ml)x(0.2ml) = C2(1.5ml) C2 = 0.2mg 1.5ml C2 = 0.133mg/ml Para T4: C1 x V1 = C2 x V2 (1mg/ml)x(0.3ml) = C2(1.5ml) C2 = 0.3mg 1.5ml C2 = 0.200mg/ml

Para T5: C1 x V1 = C2 x V2 (1mg/ml)x(0.5ml) = C2(1.5ml) C2 = 0.5mg 1.5ml C2 = 0.333mg/ml Abs2 = 1.129 Abs3 = 0.992 Abs4 = 0.790 Abs5 = 0.645

Para T6:

Fc = CC2 + CC3 + CC4 + CC5 Abs2 Abs3 Abs4 Abs5

Fc = 0.067 + 0.133 + 0.200 + 0.124 1.129 0.992 0.790 0.645

Fc = 0.636

0.3 ----> V,x 1.5 ----> V,f

0.3 = 0.2 Fd 1.5

TUBO PROBLEMA

CCTX = Fc (AbsX) Fd CCT2 = 0.636 x (1.129) x 0.2 CCT2 =0.14

CCT3 = 0.636 x (0.992) x 0.2 CCT3 = 0.13

CCT4 = 0.636 x (0.790) x 0.2 CCT4 = 0.10

CCT5 = 0.636 x (0.645) x 0.2 CCT5 = 0.08

TABLA DE RESULTADOS ABSORVANCIA / CONCENTRACIN

ABSORVANCIA Abs2 = 1.129 Abs3 = 0.992 Abs4 = 0.790 Abs5 = 0.645 GRAFICO (Curva patron)
1.2 1.1 A B S O R B A N C I A 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0

CONCETRACIN CCT2 = 0.14 CCT3 = 0.13 CCT4 = 0.10 CCT5 = 0.08

0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.09 0.1 0.11 0.12 0.13 0.14 0.15 CONCENTRACIONES

V. DISCUSIONES
5.1. Segn Grandn J. (2007), nos indica que el Triptfano es un aminocido que capta un tipo de protena, uso el proceso de cromatografa muy utilizados en los laboratorios y realizo el anlisis cualitativo, el rango que indica se encuentra entre 0.40 hasta 0.55. Asimismo en la prctica de cromatografa hecha en el laboratorio nos dio un resultado positivo ya que el valor que optamos fue 0.49 y est dentro del rango del autor. 5.2. Segn Nelson D. (2002), nos indica que la Arginina es un aminocido que capta un tipo de protena, uso el proceso de cromatografa muy utilizados en los laboratorios y realizo el anlisis cualitativo, el rango que indica se encuentra entre 0.09 hasta 0.15. Asimismo en la prctica de cromatografa hecha en el laboratorio nos dio un resultado positivo ya que el valor que optamos fue 0.11 y est dentro del rango del autor. 5.3. Segn Del Pozo R. (2005), nos indica que el cido Asprtico es un aminocido que capta un tipo de protena, uso el proceso de cromatografa muy utilizados en los laboratorios y realizo el anlisis cualitativo, el rango que indica se encuentra entre 0.09 hasta 0.15. Asimismo en la prctica de cromatografa hecha en el laboratorio nos dio un resultado positivo ya que el valor que optamos fue 0.12 y est dentro del rango del autor. 5.4. Segn Skoog W. (2000), nos indica que al realizar al realizar practica de aminocidos, y saber sus valores de absorbancia deben saber calcular, disolver, ya que el espectrofotmetro solo lee colores claros y les da un aproximado en nmero. Asimismo en la prctica de cromatografa al realizar con nuestras 5 muestras lo llevamos a leer en el espectrofotmetro y nos arroj unas cifras aceptables.

6. BIBLIOGRAFIA
6.1. Grandn J. (2007), gua de trabajos practicos, carrera de Medicina, Universidad La Catlica De Concepcin, BIOQUIMICA. Pg 45 48. 6.2. Nelson D. (2002), Lenhinger Principio de Bioqumica, tercera edicin, edicin omega. Pg 34 38. 6.3. Del Pozo R. (2005), texto gua de bioqumica Medicina, vulemen 1, Universidad Nacional De San Marcos. Pg 50 53. 6.4. Skoog W. (2000), Qumica Analtica, sptima edicin, editorial Mc Graw-Hill. Pg 94 96.