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GUA TCNICA GTC

COLOMBIANA 125


2005-10-26




GUA DE REFERENCIAS DE MTODOS
HORIZONTALES DE ANLISIS MICROBIOLGICOS
PARA BEBIDAS, ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA
ANIMALES









E: REFERENCES GUIDE FOR HORIZONTAL
MICROBIOLOGYCAL METHODS FOR BEVERAGE, FOOD
AND ANIMAL FEEDING STUFFS


CORRESPONDENCIA:


DESCRIPTORES: microbiologa de alimentos mtodos
horizontales; microbiologa de
alimentos alimentos para animales;
microbiologa de alimentos bebidas.












I.C.S.: 07.100.30

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC)
Apartado 14237 Bogot, D.C. - Tel. 6078888 - Fax 2221435


Prohibida su reproduccin Editada 2005-11-08









PRLOGO



El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo
nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993.

ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.

La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica
est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo
caracterizado por la participacin del pblico en general.

La GTC 125 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2005-10-26

Esta gua est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta gua a travs
de su participacin en el Comit Tcnico 25 Microbiologa.

3M COLOMBIA -DIVISIN DE MICROBIOLOGA-
ACEITES Y GRASAS VEGETALES S.A.
ALGARRA S.A.
ALPINA S.A.
AQUALAB LTDA.
ASESORAS MICROBIOLGICAS
ASINAL LTDA
ASOCIACIN COLOMBIANA DE MICROBIOLOGA
AVESCO Y KLIK S.A.
BIANLISIS
BIOCONTROL LTDA.
BIOIMGEN
BIOMERIUX S.A.
BIOQUILAB LTDA.
BIOTRENDS LABORATORIOS
CALIDAD MICROBIOLGICA
CARULLA VIVERO S.A.
CERCAL LTDA.
COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA
COMPAA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A.
CONGELAGRO
CREPES & WAFLES S.A.
EMPRESA DE ACUEDUCTO Y
ALCANTARILLADO DE BOGOT E.S.P.
ENZIPAN DE COLOMBIA LTDA.
FBRICA DE ESPECIAS Y CONDIMENTOS
EL REY S.A.
FARMACOOP
FRIGORFICO GUADALUPE S.A.
FRIGORFICOS COLOMBIANOS S.A.
GASEOSAS COLOMBIANAS S.A.

HOSPITAL DE SAN CRISTBAL
HOSPITAL SAN JOS
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.
-LABFARVE- LABORATORIO DE
FARMACOLOGA VEGETAL
LABORATORIO A.B.B.A.
LABORATORIO DE CONTROL DE
CALIDAD DEL EJRCITO

LABORATORIO LABCONTROL
LABORATORIOS GRAM
LARKIN
LESNIAK E.U.
LEVAPN S.A.
MERCADEO DE ALIMENTOS DE
COLOMBIA S.A.
MERCK S.A.
MICROBILOGOS ASOCIADOS
NULAB LTDA.
PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA








QUMICOS Y REACTIVOS LTDA. -QUIMIREL-
REPRESENTACIONES BIOTECNOLGICAS
LTDA.
ROCHE DIAGNOSTICS







SECRETARA DISTRITAL DE SALUD
SUIZO S.A.
SURTIQUMICOS LTDA.
UNIVERSIDAD DE LOS ANDES

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las
siguientes empresas:

ASESORAS MICROBIOLGICAS
BAVARIA S.A.
CASA LUKER
CENICAA
CONGELAGRO
CONSULTORAS MICROBIOLGICAS
COOPERATIVA DE GANADEROS DE
CARTAGENA LTDA.
EJRCITO
FRIGORFICO SUIZO S.A.
INGENIO PICHICHI S.A.
INGENIO RIOPAILA
INSTITUTO COLOMBIANO
AGROPECUARIO -ICA-
-INVIMA- INSTITUTO NACIONAL DE
VIGILANCIA MEDICAMENTOS Y
ALIMENTOS
LABORATORIO MICROBIOLGICO SIS
LLOREDA GRASAS S.A.
MERCK S.A.
MINISTERIO DE PROTECCIN SOCIAL.
NESTL DE COLOMBIA S.A.
PASIFLORA COLOMBIANA S.A.
PRODUCTORA DE CONCENTRADOS Y
JUGOS DE FRUTA
PURIFICACIN Y ANLISIS DE FLUIDOS
LTDA.
QUALA S.A.
QUIOS LTDA.
-RICA RONDO- INDUSTRIA NACIONAL
DE ALIMENTOS S.A.
TECNIMICRO LABORATORIO DE
ANLISIS
UNIDAD ADMINISTRATIVA DE SALUD
PBLICA
UNIVERSIDAD CATLICA INGECAL
VIKINGOS


ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.

DIRECCIN DE NORMALIZACIN

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GUA DE REFERENCIAS DE MTODOS HORIZONTALES DE ANLISIS
MICROBIOLGICOS PARA BEBIDAS, ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA ANIMALES









1. OBJETO

1.1 Esta gua brinda informacin sobre los mtodos horizontales propuestos por diferentes
entidades oficiales para el anlisis de los alimentos. Son criterios mnimos que todos los
laboratorios deberan considerar al establecer sus tcnicas de anlisis.

1.2 Esta gua fue diseada para que la utilicen quienes son responsables de realizar los
anlisis microbiolgicos de alimentos.

1.3 Esta gua presenta las caractersticas de los medios de cultivo, tiempos, temperatura y
forma de expresin de los resultados para cada mtodo horizontal propuesto.

1.4 Esta gua no pretende limitar solo el uso de los mtodos horizontales, sino por el
contrario presentar tambin las alternativas de las metodologas propuestas por entidades
oficialmente reconocidas.


2. RESUMEN DE LA GUA

Esta gua describe las directrices ms importantes a tener en cuenta en la aplicacin de un
mtodo horizontal, como son los medios de cultivo, los rangos de temperatura y los tiempos
lmites de incubacin segn el microorganismo a detectar.

Aunque esta gua est prevista para aplicarla a todos los alimentos de consumo humano
incluidos los productos lcteos, y alimentos de consumo animal, pueden existir ciertos
alimentos a los cuales los mtodos de ensayos descritos no aplican debido a la naturaleza de
la muestra.


3. IMPORTANCIA Y USO

La escogencia de un mtodo horizontal para la evaluacin de un alimento determinando su
inocuidad o rechazo para consumo humano o animal y los resultados de los anlisis, se usan
para control de los procesos o evaluacin de la conformidad con la reglamentacin que
establece los lmites de aceptabilidad para un producto.

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Los laboratorios que llevan a cabo muestreo de alimentos y generan datos estadsticos, y las
personas que tienen la responsabilidad de seleccionar un laboratorio para realizar estudios de
la calidad de los alimentos, necesitan utilizar criterios, directrices y recomendaciones de
mtodos oficiales para la evaluacin de sus productos.

La demostracin y documentacin por parte de un laboratorio de que hubo una seleccin
apropiada del mtodo para el anlisis del alimento, incrementa la credibilidad de los datos
producidos y promueve su aceptacin.

Por lo tanto, la gua proporciona recomendaciones para la seleccin de los diferentes mtodos
horizontales utilizados tanto a nivel internacional, como a nivel nacional para cada uno de los
microorganismos que se pueden presentar en una muestra para analizar.



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Tabla 1. Mtodos horizontales para hongos y levaduras

Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de resultados
Filtracin por
membrana
hidrofbica
995.21 Todos los alimentos Agar YM - 11 25
o
C 1
o
C 50 h 2 h
Nmero ms probable
(NMP)
AOAC 2000
Captulo 17
Recuento en
placa
997.02 Todos los alimentos
Membrana hidrofbicas
Yeast and Mold Count
Plate
20
o
C a 25
o
C 5 d Contar cajas hasta 150 Colonias
Recuento en
placa
1 OGY
Recuento en
placa
2 DRBC
Recuento en
placa
3 SMA + Clortetraciclina
STANDARD
METHODS
Dairy
Products
1992 16th
Captulo 8.10
Recuento en
placa
4
Todos los alimentos
PDA
25
o
C 1
o
C 5 d Se cuenta entre 15 y 150 colonias
ICMSF 1984
Recuento en
placa
1 Todos los alimentos
Oxitetraciclina
Gentamicina Extracto de
levadura Glucosa (YGC)
20
o
C a 24
o
C 3 d a 5 d
Se cuenta entre 30 y 300 colonias.
Calcular mohos y levaduras por
aparte
INVIMA 1998
Recuento en
placa
1 Todos los alimentos OGY 22
o
C 2
o
C 5 d a 7 d Se cuenta entre 20 y 100 colonias
Contina . . .



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Tabla 1. (Continuacin)

Incubacin Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de resultados
DRBC (M183)
DG18 ( M184)
PCA (M124)+
Cloranfenicol
Agar maltosa (M185)
Agar extracto Malta
(M182)
Recuento en
placa/dilucin
Captulo 18 Todos los alimentos
Agar Papa Dextrosa
(M127)
25 C 1 C 5 d
DRBC (M183)
Recuento en
placa directo
Captulo 18
Habas, nueces,
condimentos, caf,
coco, etc. Alimentos
que deben ser
abiertos con pinzas
DG18 ( M184)
25C 1 C 5 d
Contar cajas entre 10 - 150 colonias
FDA - BAM
2001
Microscopia
Fluorescencia
Cuantificacin
levaduras
viables y no
viables
Captulo 18
Bebidas y muestras
liquidas
Azul de Anilina NaOH




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Tabla 1. (Continuacin)


Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de resultados
20.52 Todos los alimentos
Agar Plate
count+Cloramfenicol
22 C a 25
o
C 5 d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Reportar como UFC por g o ml
20.53
Cereales, arroz,
nueces y condimentos
Agar DG18 22 C a 25
o
C 5 d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Reportar como UFC por g o ml
20.541 Mohos acidoflicos Agar ADYS 25
o
C 5 d a 7 d
20.542
Mohos
Aflatosxignicos
Agar AFPA 32
o
C 42 h a 48 h
20.543 Especies de Fusarium Agar CZID 25
o
C 7 d
20.545 Especies De Mucor Agar MYCK 25
o
C 5 d
20.546
Especies De
Penicilium
Agar DRYES 20
o
C 7 d a 8 d
20.547
Levaduras resistentes
a preservantes
Agar Agar MAA o TGY 25 C a 30
o
C 3 d a 5 d
20.548 Hongos Xeroflicos Agar DG18 o MY50G 25
o
C 1 C 7 d
APHA
Captulo 20
Recuento
20.549
Levaduras dominantes
en alimentos
Agar MEA o TGY 25
o
C 1 C 3 d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Reportar como UFC por g o ml

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Tabla 1. (Final)



Incubacin Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de resultados
NTC 4132
ICONTEC
Recuento en
placa
ISO 7954
Todos los alimentos
Agar extracto
levadura, dextrosa,
cloranfenicol
25
o
C 1 C 3 d a 5 d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Reportar como UFC por g o ml
PDA
PLATE COUNT AACC
Recuento en
placa
AACC 4250 Todos los alimentos
AGAR MALTA
22 C a 25
o
C 3 d a 5 d
Contar entre 15 - 150 colonias.
Reportar como UFC por g o ml


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Tabla 2. Mtodos horizontales para listeria monocytogenes

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Expresin de
resultados
OXA, Iluminacin de Henry
PALCAM,
35
o
C/24 h a 48 h
Coloracin Gram,
Catalasa, Oxidasa
Prueba
CAMP Agar
sangre
35
o
C/48 h
LPM+esculin/
Fe
3+,

TSBYE*(A
partir de este
se inoculan
las
bioqumicas
35
o
C/24 h
LPM y pasar
a:
30
o
C/24 h a 48 h
Reduccin de
Nitrato (Caldo
Nitrato M108)
35
o
C/5 d
TSAYE 30
o
C/24 h a 48 h SIM o MTM Amb/7 d
FDA-BAM
2001
Deteccin Captulo 10
Todos los
alimentos
Caldo EB 30
o
C 4 h
EB+acrifla-
vina, cido
nalidixico y
ciclohexam
ida
30
o
C 44 h


Caldo
carbohidratos
+: Dextrosa,
Esculina,
Maltosa,
Ramnosa,
Manitol,
Xilosa
35
o
C/7 d
Presencia
ausencia
Contina...
* Hacer pruebas bioqumicas de acuerdo a cada entidad oficial

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Tabla 2. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatuta C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Kits para Elisa
FDA-
BAM
2001
Deteccin
Captulo
10
Todos los
alimentos
Caldo EB 30 C 4h
EB+acrifla-
vina, cido
nalidixico y
ciclohexami
da
30
o
C 44 h
Serologa
Agar Oxford y
Agar Palcam.
Pasar a:
35
o
C 2
o
C/
24 h 48 h
Mtodo Iluminacin Henry
Agar Triptosa
cido
nalidixico.
Pasar a:
Coloracin Gram, Catalasa,
Oxidasa
Productos
Lcteos
Caldo EB
30
o
C 2
o
C/24 h -
48 h
Agar
movilidad-
nitrato
modificado
Hatano
Schuch
Temperatura
ambiente / 2 d -
5 d
Hemlisis 35
o
C 2

C/24 h
CAMP
Xilosa,
Ramnosa,
Manitol
35
o
C 2
o
C/24 h
- 48 h
INVIMA Deteccin No. 20
Productos
crnicos
Caldo LEB
+ acriflavina
1 %
30
o
C 2
o
C/18 h
-24 h
Caldo
LEB2+
acriflavina
0,2 %
30
o
C 2
o
C/18 h -
24 h
Agar tripticasa
soya extracto
Levadura
TSA-YE

35
o
C 2
o
C/
18 h a 24 h

Serologa



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Tabla 2. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Agar sangre 48 h 37 C
Caldo TSYE:
Utilizacin de
carbohidratos
7 d 37 C
Agar para
motilidad
2 d -7 d 25 C
Enriqueci-
miento y
Aislamiento
993.12
Lcteos,
derivados
lcteos,
crnicos,
derivados
crnicos.
Medio de
enriqueci-
miento
selectivo
completo
48 h 30 C
Medio Oxford
medio TSYE
48 h 37 C
Medio de test
CAMP
18 h -24 h 37 C
AOAC
Inmunopre
cipitacin
997.03
Productos
lcteos,
carnes
rojas,
cerdo,
aves y
derivados,
productos
marinos,
frutas,
vegetales,
pastas,
chocolate,
huevos y
harina de
hueso


caldo MFB
+Lic. O
Caldo
Frazer
28 h 2 h 30 C BLEB 242h 30C INMUNOPRECIPITACIN
Presencia
ausencia

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Tabla 2. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin de
resultados
Coloracin Gram, Catalasa
Motilidad
25 C 2 C 2 d -
5 d
Agar sangre
de cordero
35 C 2 C 24 h
2 h
Fermenta-
cin de
carbohidra-
tos: ramnosa,
xilosa,
manitol
35 C 2 C
24 h - 48 h hasta
5 d
NTC 4666
ISO
11290-1
Deteccin
y aisla-
miento
todos los
alimentos
Caldo
Fraser
media
concentra-
cin. Caldo
Leb 1
Caldo
Palcam
24 h 30 C 2 C
Caldo
Fraser +
agentes
selectivos.
Caldo Leb
2 Caldo
Palcam
24 h -48 h a 30 C
2 C
Agar Oxford
Agar Palcam y
pasar a
TSYEA
24 h - 48 h a
35 C 2 C
para
TSYEA:18 h -
24 h a 35 C
2 C
Serologa, CAMP
Presencia
ausencia
Agar Oxford y
Palcam
24 h a 48 h 35
C
Coloracin Gram, Catalasa,
Oxidasa
Agar LPM, y
pasar a :
24 h a 48 h 30
C
36.511
leche y
productos
lcteos
Caldo M52 48 h 30 C
TSA-YE
24 h - 48 h 30
C
Fermentacin del manitol,
ramnosa y xilosa
Caldo UVM
y pasar a :
22 h 2 h 30 C
2 C
26 h a 48 h 35
C
APHA
Captulo
36
36512
Aisla-
miento e
Identifica-
cin
Productos
crnicos

Caldo FB 26 h -48 h 35 C
Agar MOX
26 h a 48 h
35 C 2 C
Hemlisis en agar sangre de
caballo
Presencia
ausencia



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Tabla 2. (Final)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatu-ra C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin de
resultados
agar LMP
24 h a 48 h 30
C
Coloracin Gram, Catalasa,
Oxidasa
Agar oxford
pasar a :
24 h a 48 h 35
C
Agar sangre
de cordero
48 h 35 C
TSA-YE 24 h 30 C
Urea
Red de
nitratos
TSI
5 d 35 C
SIM
7 d temperatura
ambiente
MR-VP 48 h 35 C
Fermenta-
cin
carbohidratos
TSBYE +
Dextrosa,
esculina,
maltosa,
ramnosa,
manitol,
xilosa
7 d 35 C
Standard
Methods
for Dairy
products
Deteccin 5,4A
todos los
alimentos
Caldo LEB 2 das 30 C

CAMP






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Tabla 3. (Mtodos horizontales para Salmonella spp.

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Huevos, leche,
ponqus, bizcochos,
pan, formulas
infantiles, casena,
Harina de soya,
fideos, macarrones,
spaghetti, queso,
ensaladas
preparadas(con
jamn, huevo, pollo,
atn, pavo), frutas y
vegetales
deshidratados,
carnes, crustceos,
pescados, coco,
ancas de rana,
carcasas de conejo
Caldo
Lactosa
35
o
C/ 24 h
2 h
PARA ALIMENTOS CON
ALTA CARGA
MICROBIANA
CONSULTAR NORMAS
NTC 4491-1
NTC 4491-2
NTC 4491-3
NTC 4491-4
TSI, LIA
Urea
conven-
cional
35
o
C/24 h 2 h
Cscara De Huevo,
Huevo Liquido, Huevo
cocido, colores,
sabores
Caldo
TS+Sulfato
Ferroso
35
o
C/ 24 h
2 h
Rappaport
Vassiliadis
(RV) y
42
o
C 0,2
o
C/
24 h 2 h
UREA
Rpida
37
o
C 0,5
o
C/2 h
Bao de Mara
Leche en polvo
Solucin
Verde
Brillante
35
o
C/ 24 h
2 h
Caldo
Tetrationato
(TT)
43
o
C 0,2
o
C/
24 h 2 h
Antisuero
flagelar
polivalente
48
o
C a 50
o
C/1 h
Bao de Mara
FDA -
BAM
Deteccin Captulo 5
Levadura seca,
especias
Caldo TS
35
o
C/ 24 h
2 h


Agar BS,
XLD y HE
35
o
C/ 24 h
2 h
Antisuero
somtico
polivalente
1 min
Presencia
ausencia
Contina...

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Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Dulces
Reconsti-
tuted
nonfat dry
milk
35
o
C/ 24 h
2 h
PARA ALIMENTOS CON
ALTA CARGA
MICROBIANA
CONSULTAR NORMAS
NTC 4491-1
NTC 4491-2
NTC 4491-3
NTC 4491-4

Caldo Rojo
fenol
dulcitol o
Caldo Base
Prpura
con 0,5 %
dulcitol
35
o
C/48 h 2 h
Rappaport
Vassiliadis
(RV) y
42
o
C 0,2
o
C/
24 h 2 h
Para cultivos mixtos
Caldo
Triptona o
Triptofano
35
o
C/24 h 2 h
XLD Caldo KCN 35
o
C/ 48 h 2 h
Agar Mac
Conkey
Caldo
Malonato
35
o
C/48 h 2 h
Caldo
Tetrationato
(TT)

35
o
C 2,0
o
C/
24 h 2 h
Agar HE
35 C/ 24 h
2 h
Test Indol
Caldo
Lactosa
Rojo Fenol,
o Lactosa
Prpura
35
o
C/48 h 2 h
Caldo
Sacarosa
Rojo Fenol,
o Sacarosa
Prpura
35
o
C/48 h 2 h
FDA -
BAM
Deteccin Captulo 5
Jugo Naranja
(Pasteurizado y No
Pasteurizado
Caldo
Pre-
enriqueci
miento
Universal
35
o
C/ 24 h
2 h

Caldo MR-
VP
35
o
C/48 h 2 h
Presencia
ausencia


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14
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de
la tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados

Agar Citrato
Simmons
35
o
C/96 h 2 h
FDA -
BAM
Deteccin Captulo 18

Todos los
alimentos

Agua De
Peptona
Tamponada

35
o
C 2
o
C/
18 h -24 h Caldo Selenito
Cistina y
35
o
C 0,2
o
C/
18 h - 24 h
Coloracin
Gram
LIA
Agar UREA
Lactosa
Glucosa
Sacarosa
Lisina
Movilidad
Caldo Red
Nitrato TSI
Citrato
Simmons
Agar
fenilalanina
Caldo
Triptofano
Caldo MR-
VP
INVIMA Deteccin
Leche en
Polvo
Agua
destilada +
5 ml de
solucin
Verde
Brillante
0,1%
35
o
C/18 h -
24 h
Caldo
Tetrationato
(TT)+0,2 ml
Solucin de
Yodo + 0,1 ml
Solucin
acuosa de
verde brillante
0,1 %
43
o
C 0,2
o
C/
18 h - 24 h
Agar BS,
Agar XLD y
Agar Verde
brillante
lactosa
sacarosa con
novobiocina
35
o
C 2
o
C/
24 h 2 h
Oxidasa
35
o
C 2
o
C/24 h
- 48h



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15
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expre-
sin de
resulta-
dos
Leche Cruda,
leche
pasteurizada.
Quesos, yogurt
Caldo
Lactosa
35
o
C/24 h 2 h
Caldo
Selenito
Cistina y
TSI, LIA
35
o
C/25 h 2 h
y 48 h 2 h
Leche en polvo,
casena, postres
congelados,
mantequilla
Solucin
Verde
Brillante
35
o
C/24 h 2 h
Caldo
Tetrationato
(TT)
35
o
C/24 h
2 h
Agar BS,
Agar XLD
y Agar HE
35
o
C/24 h 2 h
UREA
Convencional
35
o
C/24 h 2 h
UREA Rpida
37
o
C 0,5
o
C/2
h Bao de Mara
Antisuero
flagelar
polivalente
48
o
C - 50
o
C/ 1
h Bao de
Mara
Antisuero
somtico
polivalente
1 min
Agar Lisina
Decarboxilasa
35
o
C/48 h 2 h
Caldo Rojo
fenol dulcitol
o Caldo Base
Prpura con
0,5% dulcitol
35
o
C/48 h 2 h
Caldo
Triptona o
Triptofano
35
o
C/24 h 2 h
Caldo KCN 35
o
C/48 h 2 h
Standard
Methods
Deteccin
Captulo 5
No. 5,4 B
Todos los
alimentos
Caldo
Lactosa
35
o
C/24 h 2 h
Caldo
Tetrationato
(TT)
35
o
C/24 h
2 h
Agar BS,
Agar XLD
y Agar HE
35
o
C/24 h 2 h
Caldo
Malonato
35
o
C/48 h 2 h
Presenci
a
ausencia

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16
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Test Indol
Caldo Lactosa
Rojo Fenol, o
Lactosa
Prpura

35
o
C/48 h 2 h
Caldo
Sacarosa Rojo
Fenol, o
Sacarosa
Prpura
35
o
C/48 h 2 h
Caldo MR-VP 35
o
C/48 h 2 h
Agar Citrato
Simmons
35
o
C/96 h 2 h
Standard
Methods
Deteccin
Captulo 5
No. 5,4 B
Todos los
alimentos
Caldo
Lactosa
35
o
C/24 h 2 h
Caldo
Tetrationato
(TT)
35
o
C/24 h
2 h
Agar BS,
Agar XLD y
Agar HE
35
o
C/24 h 2
h
Sistemas multitest Rpidos



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17
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Expresin
de
resultados

Agar Lisina
Hierro
35
o
C a 37
C durante
24 h
Presencia
ausencia
de
Salmonella
en g de
producto.
Levadura
desecada
Agua destilada
leche en polvo
descremada y
entera
Agua destilada
+ 2 ml de
solucin verde
brillante al
1 %
caramelos y
dulces
Leche en polvo
reconstituida
con verde
brillante
ICMSF Deteccin. 1
Subproductos
grasos de
animales, coco
Caldo lactosa
+ 1 % de
Tergitol o agua
de peptona
tamponada
con 0,22 % de
Tergitol

Caldo
tetrationato
verde
brillante
43 C 0,05 C
24 h.
Agar sulfito
bismuto
35 C a 37 C
durante 48 h
Agar triple
azcar hierro


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18
Tabla 3. (Continuacin)


Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
PARA ALIMENTOS CON
ALTA CARGA
MICROBIANA
CONSULTAR NORMAS
NTC 4491-1
NTC 4491-2
NTC 4491-3
NTC 4491-4
Agar BS
Agar XLD
Agar HE
35
o
C/24 h
2 h
TSI
Urea
convencional
35
o
C/24 h 2 h
Rappaport
Vassiliadis
(RV)
42 C 0,2
o
C/
24 h 2 h
LIA 35
o
C/48 h 2 h
Caldo
TBG
43 C 0,2
o
C/
24 h 2 h
UREA Rpida
37 C 0,5
o
C/
2 h Bao de
Mara
Antisuero
flagelar
polivalente
48 C a 50
o
C/
1 h Bao de
Mara
Antisuero
somtico
polivalente
1 min
APHA
Mtodo de
Referencia
37.5
Huevos, leche,
ponqus,
bizcochos, pan,
formulas
infantiles, casena,
Harina de soya,
fideos,
macarrones,
spaghetti, queso,
ensaladas
preparadas(con
jamn, huevo,
pollo, atn, pavo),
frutas y vegetales
deshidratados,
carnes,
crustceos,
pescados, coco,
ancas de rana,
carcasas de
conejo
Caldo
Lactosa
35
o
C/24 h 2 h


Caldo Rojo
fenol dulcitol
o Caldo Base
Prpura
bromocresol
con 0,5 %
dulcitol
35
o
C/48 h 2 h
Presencia/
ausencia

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19
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Caldo Triptona
o Triptofano
35
o
C/24 h 2 h
Caldo KCN 35
o
C/48 h 2 h
Caldo
Malonato
35
o
C/48 h 2 h

PARA ALIMENTOS
CON ALTA CARGA
MICROBIANA
CONSULTAR NORMAS
NTC 4491-1
NTC 4491-2
NTC 4491-3
NTC 4491-4
Test Indol 35 C 24 h
Cscara De
Huevo, Huevo
Liquido, Huevo
cocido, colores,
sabores,
Levadura seca,
Caldo TS 35
o
C 24 h 2 h Caldo SC
35 C/24 h
2 h
Caldo Lactosa
prpura
bromocresol o
rojo fenol
35
o
C/24 h a
48 h
Leche en polvo
Solucin
Verde
Brillante
35
o
C/24 h 2 h
Caldo
TBG
35 C/24 h
2 h
Caldo
Sacarosa Rojo
Fenol, o
Sacarosa
Prpura
35
o
C/48 h 2 h
especias de
cebolla y ajo
Caldo
lactosa
35
o
C/24 h 2 h Caldo MR-VP 35
o
C/8 h 2 h
Mtodo de
Referencia
37.5
Dulces
Caldo
lactosa
35
o
C/24 h 2 h


Agar Citrato
Simmons
35
o
C/96 h 2 h
Agar Lisina
y Agar HE

43
o
C/24 h
APHA
Filtracin
Por
membrana
Hidrofbica
37.72
leche en polvo,
huevo
pulverizado,
queso
pulverizado,
pimienta,
chocolate y pollo
crudo
Caldo
lactosa,
Caldo TS,
Solucin
Verde
Brillante
35
o
C/18 h a 24h
Caldo
TBG
35
o
C/6 h a
8 h
Agar EF-18 35
o
C/24 h





GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

20
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Expresin
de
resultados
Todos los
alimentos
Caldo lactosa,
Caldo TS,
Solucin
Verde Brillante
35
o
C/24 h 2 h Caldo TBG
35
o
C/6 h a
8 h
Inmunodifusion 37.73
Carnes crudas
Caldo lactosa,
Caldo TS,
Solucin
Verde Brillante
35
o
C/24 h 2 h Caldo TGB
42
o
C 0,5
o
C/
6 h a 8 h
1-2 TEST
system
35
o
C/14 h
Inmunoensayo
Enzimtico
37.74
Todos los
alimentos
Medio no
selectivo
35
o
C/24 h 2 h
Caldo SC o
TGB
35
o
C/18 h a
24 h

Caldo -M

35
o
C/6 h
APHA
Test Rpidos
para la
deteccin de
Salmonella
37.8
Todos los
alimentos y
muestras
ambientales

Mtodos multitest aprobados
por la AOAC


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21
Tabla 3. (Continuacin)
Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de
la tcnica
Mtodo Alimentos Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Huevos deshidradatos,
Caldo
lactosa
24 h 2 h a
35 C
Agar TSI
y LIA
24 h 2 h a 35 C
Leche entera en polvo
Agua +
1%
solucin
de
coloracin
verde
brillante
24 h 2 h a
35 C
Caldo
selenito
cistina + 1-
10 ml caldo
tetrationato
Test de
ureasa
Bao de mara 2 h
a 35
o
C 0,5 C
Levadura activa
desecada
Caldo
tripticasa
de soya
24 h 2 h a
35 C
Caldo
selenito
cistina
Caldo
lactosa
rojo de
fenol
48 h 2 h a 35 C
Ajo y cebolla en polvo
Caldo
tripticasa
de soya
24 h 2 h a
35 C
Caldo
sucrosa
rojo de
fenol
48 h 2 h a 35 C
Chocolates de leche y
casena
Caldo
lactosa+
%
solucin
de
coloracin
verde
brillante
24 h 2 h a
35 C
Medio
MR/VP
48 h 2 h a 35 C
Deteccin. 967.25
Leche en polvo
instantnea libre de
grasa
Solucin
verde
brillante
24 h 2 h a
35 C
Caldo
selenito
cistina + 1-
10 ml caldo
tetrationato
24 h 2 h
a 35 C
XLD,
Agar
Sulfito
Bismuto,
Agar para
entricos
Hektoen
24 h 2 h a
35 C
Agar
citrato de
Simmons
96 h 2 h a 35 C
AOAC
Kit de
identificacin
bioqumica
978,24 (a) Todos los alimentos
Mtodos multitest aprobados
por la AOAC

Presencia
ausencia

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22
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de
la tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados

Test
Serolgicos
Aglutinacin Todos los alimentos

Mtodo de
bsqueda por
anticuerpos
fluorescentes
975.54 Todos los alimentos
ISO-GRID 991.12 Todos los alimentos
AOAC
Mtodo de
bsqueda
monoclonal
calorimtrico
EIA
986.35 Todos los alimentos
Positivo
negativo





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23
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Mtodo de
bsqueda
monoclonal
calorimtrico
EIA
987.11
Todo tipo de alimentos
excepto materias
primas de alimentos o
alimentos con alta
carga microbiana

Inmunoensayo
enzimtico
policlonal para
salmonellas
mtiles y no
mtiles
992.11 Todos los alimentos
Ensayo de
inmunofluores-
cencia unido a
una enzima
996.08 Todos los alimentos
AOAC
Inmunodifusin
para
salmonellas
mtiles
989.13 Todos los alimentos
Positivo
negativo












GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

24
Tabla 3. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Expresin
de
resultados
MSRV 993.07 Cocoa y chocolate
MSRV 995.07
Productos lcteos
deshidratados

Mtodo de
conductancia
991.38 Todos los alimentos
Pollo, ostras, setas,
camarones, alimento
para aves y alimentos
altamente
contaminados
Caldo
lactosa
24 h 2 h a
35 C
Deteccin. 995.2
Ancas de rana
Caldo
lactosa
24 h 2 h a
35 C
medio
Rappaport-
Vassiliadis
+1-10 ml
caldo
tetrationato
Bao de
mara
24 h 2 h
a 42
o
C
0,2 C
Agar
Sulfito
Bismuto,
agar para
entricos
Hektoen y
XLD
24 h 2 h a
35 C
TSI y LIA
24 h 2 h a
35 C
Inmunoensayo
enzimtico
policlonal con
caldo RV y caldo
tetrationato
998.09 Todos los alimentos
AOAC
INMUNOPRECIPI
TACIN para
salmonelas
mtiles y no
mtiles
999.09 Todos los alimentos
Positivo
negativo


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25
Tabla 3. (Final)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Expresin
de
resultados
medio
Rappaport-
Vassiliadis/
medio verde
malaquita o
Tetrationate
16 h a 18 h a 42,5 C
0,5 C
TSI, LIA y
Urea
NTC Deteccin 4574
Alimentos de
consumo
humano y para
animales
Agua
peptonada
tamponada,
Caldo
lactosado
18 h - 24 h a
35 C 2 C
Medio
Selenito/cistina
16-18 H a 35 C 2
C
Agar
Rambach,
agar
Hektoen,
agar
McConkey,
agar sulfito
bismuto,
agar
salmonella-
shiguella
(SS), agar
verde
brillante
A. XLD
24 h a 48 h
a 35 C 2
C
Serologa:
sueros poli-
monovalentes
24 h - 48 h a
35 C 2 C
Presencia
ausencia
de
Salmonella
en 25 g de
producto.
AACC 4225A
Todos los
alimentos
Caldo
nutritivo
24 h 2 h a
35 C
Selenito cistina
tetrationato
24 h 2 h a 42 C
Agar
Hektoen,
XLD, SB,
McConkey
24 h 35C
Agar TSI, LIA
y serolgico
en BHI
24 h 35 C


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26
Tabla 4. Mtodos horizontales para aerobios

Incubacin
Entidad
oficial
Principio de
la tcnica
Mtodo Alimentos
Medio
cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
Recuento en
placa
966.23
Desmenuzados,
congelados,
precocidos,
preparados,
nueces y
carnes
Agar Plate
count
35
o
C 2 C 48 h 2 h
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g
Filtracin por
membrana
Hidrofbica
986.32
Leche
Pasterizada,
Huevos en
polvo y cremas
TSFA 32
o
C 48 h 2 h
Total de bacterias/g o
ml
Recuento en
Placa
988.18
Productos
Lcteos
Gel de
pectina
32
o
C 1 C 48 h 3 h
Conteo: 25 - 250 UFC
Reportar como:
UFC/g
AOAC 2000
Captulo 17
Recuento en
Placa
990.12
Todos los
alimentos
Membrana
hidrofbicas
Aerobic
Count
35
o
C 1 C 48 h 3 h
Conteo 30-300 UFC
Reportar como UFC/g
o ml
Recuento en
Placa
6,2 Class O
Productos
Lcteos
Standard
Methods
Agar
32
o
C 1 C 48 h 3 h
Conteo: 25 - 250 UFC
Reportar como:
UFC/g o ml
STANDARD
METHODS
Diary
products
1992 16th
Captulo 6
Recuento en
placa
6.3
Productos
Lcteos
Membrana
hidrofbicas
Aerobic
Count
32
o
C 2 C 48 h 3 h
Conteo: 25 - 250 UFC
Reportar como:
UFC/g
Recuento
estndar en
placa
Mtodo 1
Todos los
alimentos
Agar Plate
Count
29
o
C a 31
o
C
48 h
3d
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g
Recuento en
placa de
siembra por
extensin en
superficie
Mtodo 2
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
29
o
C a 31
o
C

72 h
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g
Recuento en
placa por
siembra de
gotas en
superficie
con asa
calibrada
Mtodo 3
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
29
o
C a 31
o
C 48 h
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g
ICMS 1984
Recuento en
placa por
siembra con
asa calibrada
Mtodo 4
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
29
o
C a 31
o
C 48 h
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g
INVIMA 1998
Recuento en
placa
No. 2
Todos los
alimentos
Agar Plate
Count
35
o
C 2
o
C 48 h 2 h
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g
Todos los
alimentos
35
o
C 2
o
C 48 h 2 h
Conteo: 30 - 300 UFC
Reportar como:
UFC/g o ml FDA - BAM
2001
Recuento en
Placa
Captulo 3
Lcteos
Agar Plate
count
32
o
C 1
o
C 48 h 2 h
Conteo: 25 - 250 UFC
Reportar como:
UFC/g
Contina . . .


GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

27
Tabla 4. (Final)

Incubacin
Entidad
oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio
cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
Recuento
en placa
7.62
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
Recuento
directo en
placa
7.63
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
Filtracin
por
membrana
7.71
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
Recuento
en placa
7.72
Todos los
alimentos
Membrana
hidrofbicas
Aerobic
Count
Conteo: 30 - 300
UFC Reportar como:
UFC/g o ml
Mtodo
Pectin gel
7.73 Redi-gel
Mtodo
Membrana
hidrofobica
7.74
Aerobic
count hgmf
Mtodo
placa en
espiral
7.75
Productos
lcteos
Agar Plate
count
Conteo: 25 - 250
UFC Reportar como:
UFC/g o ml
Mtodo de
asa
calibrada
7.76
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
Recuento
en placa
por siembra
de gotas en
superficie
con asa
calibrada
7.77
Todos los
alimentos
Agar Plate
count
APHA
Captulo 7
2001
7.78
Todos los
alimentos
Simplate
25 C a 35 C 48 h 2 h
Conteo: 30 - 300
UFC Reportar
como: UFC/g o ml
ICONTEC
Recuento
Placa
NTC
4519/ISO
4833
Todos los
alimentos
Standard
Plate Count
35
o
C 2
o
C 48 h 2 h
Conteo: 30 - 300
UFC
Reportar como:
UFC/g
Agar Plate
Count
AACC
Recuento
Placa
AACC 4211
Todos los
alimentos
Buffer
fosfato
(diluciones)
35
o
C 2
o
C 48 h 2 h
Conteo: 30 - 300
UFC
Reportar como:
UFC/g


GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

28
Tabla 5. Mtodos horizontales para Staphylococcus. Aureus

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad oficial
Principio de
la tcnica Mtodo Alimentos
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
1. Caldo
BHI
35
o
C - 37C/
18 h -24 h
Nmero Ms
Probable
987.09
Todos los
alimentos
Caldo
tripticasa
soya + 10 %
NaCl + 1 %
Piruvato Na
35
o
C/48 h
Agar
Baird
Parker
35 C - 37
o
C/
48 h
2.
Coagulasa*
35
o
C - 37 C/
4 h -18 h mx 48
h
Reportar el
NMP segn
Tabla
1. Caldo
BHI
35
o
C - 37C/ 18
h - 24 h
AOAC 2000
Captulo 17.5.02
Aislamiento y
enumeracin
en superficie
975.55
Todos los
alimentos
Agar
Baird
Parker
35 C-37
o
C/48 h
2.
Coagulasa*
35
o
C - 37 C/
4h -18 h mx 48 h
Contar las
cajas que
tengan entre
20 y 200
colonias
STANDARD
METHOS
Diary products
Cap 5

Aislamiento y
enumeracin
en superficie
5.4 (f)
Todos los
alimentos





Agar
Baird
Parker
35 C/45 h - 48 h
1. Caldo
BHI
35
o
C/18 h - 24 h
Contar cajas
entre 20 -
200 colonias

Contina . . .

* Hacer pruebas bioqumicas de acuerdo a cada entidad oficial

GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

29
Tabla 5. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad oficial
Principio de
la tcnica Mtodo Alimentos
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Expresin
de
resultados
2. Coagulasa* 35 C/6 h
3. Catalasa
4. Glucosa 37 C/5 d
5. Manitol 37 C/5 d
6. Sensibilidad
Lisostafina
35 C < 2 h
7. Nucleasa
Termoestable
35 C/4 h
Numero mas
probable
5.4 (f.4)
Todos los
alimentos
Caldo
tripticasa
soya +
cloruro de
sodio
35
o
C/48 h
Agar
Baird
Parker
35 C/48 h
8. Produccion
de enterotoxin
35 C - 37 C/
18 h -24 h
Nmero ms
probable
(NMP)
Aislamiento y
enumeracin
en superficie
Productos
lcteos
Agar
Manitol
agar
S110
37
o
C/24 h Similar al anterior
Contar cajas
entre 20 -
200 colonias
STANDARD
METHOS
Diary products
Cap 5
Nmero Ms
Probable
5.4 (f.5)
Leches






Caldo
Giolitti
cantoni
Caldo
Lactosa
salado
37
o
C/24 h Similar al anterior
Nmero ms
probable
(NMP)

* Hacer pruebas bioqumicas de acuerdo a cada entidad oficial

GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

30
Tabla 5. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad oficial
Principio de
la tcnica Mtodo Alimentos
Medio (s)
de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Caldo BHI 35
o
C/18 h -24 h
1 Caldo BHI
35
o
C/18 h -
24 h
Agar Baid
Parker
35
o
C-37
o
C/30 h
-48 h Coagulasa* 35 C/4 h -24 h
2
Agar yema
de huevo
polimixina
telurito 35
o
C-37
o
C/24 h
Caldo BHI 35
o
C/18 h -24 h
3
Agar
Kranep
35
o
C-37
o
C/30 h
-48 h
Coagulasa* 35 C/4 h -24 h
Aislamiento y
enumeracin
en superficie
4






Agar
difosfato de
fenolftaleina
con
polimixina
35
o
C-37
o
C/24 h
-48 h
Caldo BHI 35
o
C/18 h -24 h
Contar cajas
entre 20 -
200
colonias/
UFC por g o
ml
ICMSF 1984
Numero mas
probable
5
Todos los
alimentos
Caldo telurito
manitol
glicina
35
o
C - 37
o
C/
24 h -48 h
Agar leche
sal
37
o
C/24 h Coagulasa* 35 C/4 h -24 h
Nmero
ms
probable
1. Caldo
BHI
35
o
C 2
o
C/18 h
-24 h
INVIMA 1998
Captulo 2
Numeral 8
Todos los
alimentos






Agar Baid
Parker
35
o
C 2
o
C/48 h
2.
Coagulasa*
35
o
C 2
o
C/
6 h y descartar a
las 24 h
Contar cajas
entre 20 -
200
colonias.
REPORTAR
como UFC
por g o ml

* Hacer pruebas bioqumicas de acuerdo a cada entidad oficial

GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

31
Tabla 5. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio (s)
de cultivo
Tiempo
y
Tempe-
ratura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
1. Caldo BHI
35
o
C 2
o
C/
18 h -24 h
2. Coagulasa*
35
o
C 2
o
C/6 h
y descartar a las
24 h
3. Catalasa
4. Glucosa 37
o
C/7 d
5. Manitol 37
o
C/7 d
6.
Sensibilidad
Lisostafina
35 C/2 h
Recuento


Agar Baid
Parker
35 C/45 h - 48 h
7. Nucleasa
Termoestable
35 C/4 h
Contar cajas
entre 20 -
200 colonias
1. Caldo BHI
35
o
C 2
o
C/
18 h -24 h
FDA -BAM 2001
NMP
Captulo
12
Productos en
los que se
espere un
pequeo
numero de
S.aureus y
alimentos
que
contengan
una gran
poblacin de
especies
competitivas




Caldo
Tripticasa
Soya+NaCl+
Piruvato de
sodio
35
o
C/48 h
2 h
Agar Baird
Parker
35 C/48 h
2. Coagulasa*
35
o
C 2
o
C/6 h
y descartar a las
24 h
Reportar el
NMP segn
Tabla de
NMP

* Hacer pruebas bioqumicas de acuerdo a cada entidad oficial

GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

32
Tabla 5. (Continuacin)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica Mtodo Alimentos Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Expresin
de
resultados
1. Caldo
BHI
35 C - 37 C/
18 h - 24 h Procedimiento
de
Enriquecimiento
selectivo
39.51
Alimentos
que
contienen
una pequea
poblacin de
clulas
injuriadas


Caldo
Tripticasa
Soya +
NaCl
35 C - 37 C/
24 h 2 h
Agar Baird
Parker
35 C - 37 C/
46 h 2 h
3.
Coagulasa:
plasma +
EDTA
35
o
C-37
o
C/
6 h
Contar cajas
entre 20 -
200 colonias
1. Caldo
BHI
35
o
C - 37
o
C/
18 h -24 h
Procedimiento
de
Enriquecimiento
selectivo
39.52
Ingredientes
alimenticios
crudos y
alimentos no
procesado
de los cuales
se espera
que
contenga
grandes
poblaciones
de especies
competitivas
Caldo
Tripticasa
Soya+NaCl
+Piruvato
de sodio
35 C -37 C/
48 h 2 h
Caldo
Giolitti
Cantoni
35 C - 37 C/
24 h - 48 h
Agar Bard
Parker
35
o
C-37
o
C/48 h
2 h
3.
Coagulasa:
plasma +
EDTA
35
o
C - 37
o
C/
6 h
Reportar
NMP de
Estafilococos
Coag /g
1. Caldo
BHI
35
o
C - 37
o
C/
18 h - 24 h
Conteo en
Superficie
39.53
Alimentos
crudos y no
procesados
Agar Baird
Parker
sembrar
0,3 ml en 3
cajas 35 C-37 C/45 h
- 48 h
3.
Coagulasa:
plasma +
EDTA
35
o
C - 37
o
C/
6 h
Contar cajas
entre 20 -
200 colonias
APHA 2000
Captulo 39
Enumeracin
directa de
S.aureus
Coagulasa
Positiva
39.57
Quesos,
leche y
postres a
base de
leche








Agar
Fibrinoge-
no Plasma
de conejo
35 C-37 C/48 h


REPORTAR
como # de
S.aureus por
g o ml de
producto


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33
Tabla 5. (Final)

Preenriquecimiento Enriquecimiento Aislamiento Bioqumicas
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica Mtodo Alimentos Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Tempera-
tura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura
C
Medio (s)
de cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Medio (s) de
cultivo
Tiempo y
Temperatura C
Expresin
de
resultados
Agar Baid
Parker sin
yema de
huevo
35
o
C - 37
o
C/
48 h

APHA
2000
Captulo
39
Enumeracin
directa de
S.aureus
Coagulasa y
Termonucleasa
positiva
39.58
Alimentos
crudos y
procesados

Agar Baird
Parker +
Plasma
Telurito
fibrinogeno
+piruvato
de sodio
35
o
C - 37
o
C/8 h
Agar DNA
Azul de
toluidina
35
o
C - 37
o
C/4 h
Contar entre
10-100
colonias
tpicas
Agar Baid
Parker
35
o
C 2
o
C/24 h
ICONTEC NTC 4779
Todos los
alimentos

Medio
plasma de
conejo
fibrinogeno
35
o
C 2
o
C/18 h
- 72 h
Coagulasa:
plasma +
EDTA
35
o
C/4 h -24 h

Contar entre
20-200
colonias
1. Caldo BHI
35
o
C -37
o
C/
18 h - 24 h
AACC
Todos los
alimentos

Agar Baid
Parker

35
o
C - 37
o
C/48 h

2.
Coagulasa:
plasma +
EDTA
35
o
C-37
o
C/18 h
- 24 h
Positivo o
negativo



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34
Tabla 6. Mtodos horizontales para Bacillus cereus

Incubacin
Entidad oficial
Principio
de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio cultivo
Tempera-
tura
Tiempo
Expresin de
resultados
Recuento
en placa
980.31 D
Todos los
alimentos
Agar MYP 30 C 24 h a 48 h
Conteo: 15-
150 colonias
tpicas con
halo de
lecitinasa
30 C 48 h 2 h
NMP de B
cereus
confirmados
AOAC 2000
Captulo 17
NMP para
alimentos
que
contienen
10
3
UFC/g
980.31 E
Todos los
alimentos
Caldo
tripticasa soya
polimixina/
confirmar en
MYP
30 C 24 h a 48 h
ICMSF 1984
Recuento
en placa
siembra
por estria
en
superficie

Todos los
alimentos
Agar yema de
huevo
polimixina o
yema de
huevo sal
polimixina
cloruro de
trifeniltrtrazolio
35 C -37 C 24 h
Reportar como
presuntos de
B cereus las
colonias
tpicas. Hacer
confirmacin
INVIMA 1998
Recuento
en placa
siembra
0,1 ml en
superficie
con varilla
de hockey
9
Todos los
alimentos
Agar selectivo
para Cereus
segn Mossel
35
o
C 2
o
C 18 h a 24 h
Reportar como
presuntos de
B cereus las
colonias
tpicas. Hacer
confirmacin
Recuento
en placa
siembra de
0,1 ml en
superficie
D
Todos los
alimentos
Agar manitol
yema de
huevo
polimixina
MYP
30 C 24 h
Reportar
UFC/g7ml de
B cereus las
colonias
tpicas.
Caldo
tripticasa soya
polimixina
30 C 48 h 2 h
FDA - BAM
2001 Captulo
14
NMP E
Todos los
alimentos
Agar MYP 30 C 24 h
Hacer
confirmacin
Hacer lectura
tabla NMP
APHA
Captulotulo 32
2001
Recuento
en placa
32.21
Todos los
alimentos
Agar MYP y
Agar KG (Kin-
Goepfert)
30
o
C -32 C 20 h a 24 h
Conteo: 30-
300
NMP 32.22
Todos los
alimentos
Caldo
tripticasa soya
polimixina
30 C 48 h
Hacer lectura
NMP
ICONTEC
Recuento
Placa
siembra de
0,1 ml en
superficie
NTC 4679
Todos los
alimentos
Agar MYP 30 C 2
o
C 18 h a 24 h
Conteo entre
15-150
colonias
AACC
Recuento
Placa

Todos los
alimentos




79
o
C - 80 C 12 min
Standard
methods Diary
Products
Captulo 8
Esporas de
Bacillus
8.9
Leche
cruda
SMA + 0,1 %
almidn
soluble
30 C 1
o
C 48 C
Esporas
aerobias
mesfilas/ ml
* Hacer confirmacin mediante pruebas bioqumicas


GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

35
Tabla 7. Mtodos horizontales para Clostridium

Incubacin Incubacin Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio
cultivo
Temperatura Tiempo
Pruebas
confirmativas
T
O
Tiempo
Expresin de
resultados
Medio de
tioglicolato
fluido
35 C 18 h a 24 h TSC sin
yema de
huevo
35 C 20 h
caldo de
esporulacin
35 C 24 h
Medio gelatina
lactosa y
nitrato motility
35 C 24 h
Recuento en
placa
976.3
Todos los
alimentos
TSC con
yema de
huevo
35 C 24 h
Caldo PY para
colonias
atpicas
35 C 24 h
20- 200 UFC/ g o ml
AOAC 2000
Captulo 17
Nmero ms
probable
993.10 Mariscos IMM
45 C en bao
de mara
16 h a 18 h
Medio
modificado de
C. perfringens
45 C 24 h NMP Bacterias/g o ml
Agar leche
lactosa yema
de huevo +
antitoxina
polivalente
35
o
C - 37 C
en
anaerobiosis
18 h a 24 h
Tipificacin
serolgica

Fermentacin
de
carbohidratos/
medio de carne
cocida
35
o
C - 37 C
en
anaerobiosis
18 h a 24 h
ICMSF
Recuento en
placa e
identificacin
1 britnico
Todos los
alimentos
Agar
sangre de
caballo
35
o
C a 37 C
en
anaerobiosis y
aerobiosis
48 h
caldo peptona
+ lactosa,
glucosa,
sacarosa,
maltosa
35
o
C - 37 C
en
anaerobiosis
48 h
30 - 300 UFC/g o ml
Contina . . .

GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

36
Tabla 7. (Continuacin)

Incubacin Incubacin Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio
cultivo
Temperatura Tiempo
Pruebas
confirmativas
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
Deteccin por
enriquecimiento*
Todos los
alimentos
de baja
carga
microbiana
Medio de
carne
cocida
35
o
C a 37 C 18 h a 24 h
Agar sangre de
caballo
35
o
C - 37 C
en
anaerobiosis
y aerobiosis
24 h Presencia ausencia
Nmero ms
probable *

Todos los
alimentos
Medio de
carne
cocida
35
o
C a 37 C
en
anaerobiosis
24 h
Agar sangre de
caballo
35
o
C - 37 C
en
anaerobiosis
48 h
NMP Bacterias/ g o
ml
Recuento en
placa
Todos los
alimentos
Agar sulfito
cicloserina/
Agar
triptosa
sulfito
cicloserina
Agar
perfringens
de Shahidi-
Ferguson
35
o
C a 37 C
en
anaerobiosis
20 h a 24 h
Agar movilidad
nitrato
suplementado
Caldo gelatina
lactosa Yema
de huevo
Hemlisis
35
o
C - 37 C 24 h 20 - 200 UFC/ g o ml
ICMSF
Deteccin por
enriquecimiento
2
norteamericano
Todos los
alimentos
de baja
carga
microbiana
medio
fluido
tioglicolato
46 C 0,5
o
C
37 C 0,5
o
C
4 h a 6 h
18 h a 24 h
Agar yema de
huevo de
McClung y
Toabe Agar
sangre de
oveja
35
o
C - 37 C
en
anaerobiosis
24 h Presencia ausencia
Recuento de
esporas
No. 10
Todos los
alimentos
Agar SPS
Agar sulfito
cicloserina
35 C 2
o
C 72 h 5 - 50 colonias
Caldo
tioglicolato
Caldo de carne
35 C 24 a 48 h
20 - 200 UFC/ g o ml
INVIMA
1998
Recuento en
placa
No. 11
Todos los
alimentos
Agar SPS
Agar
triptosa
sulfito
cicloserina
35 C 2
o
C 48 h
Bioqumicas: Catalasa, movilidad nitrato, lactosa y gelatina


GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

37
Tabla 7. (Final)

Incubacin Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Pruebas
confirmativas/
bioqumicas
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
medio de carne
cocida
24 h a 48 h
Caldo de
tioglicolato fluido
35 C
18 h a 24 h
FDA- BAM
2001
Recuento en
placa
Captulo 16
Todos los
alimentos
Agar TSC sin
yema de
huevo
35 C en
anaerobiosis
20 h a 24 h
medio leche-
hierro modificado
46 C en bao
de mara
2 h
20-200 UFC/g o ml
Recuento en
placa
34.71
Todos los
alimentos
Caldo hgado
Caldo
peptona-
glucosa
extracto de
levadura
35 C a 37 C 20 h a 24 h
Agar TSC + yema
de huevo
35 C 18 h a 24 h UFC/g ml
APHA
Captulo 34
2001
Recuento en
placa
34.72
Todos los
alimentos
Agar TSC 35 C a 37 C 18 h a 24 h
Agar TSC sin
yema de huevo
35 C - 37 C 18 h a 24 h 20-200 UFC/g ml
Medio fluido de
tioglicolato
35 C 2 C
en
anaerobiosis
18 h a 24 h
Mtodo A. Medio
SL
46 C en bao
de agua
18 h a 24 h
ICONTEC
Recuento en
placa
NTC 4834
Todos los
alimentos
Agar triptosa
sulfito
cicloserina
libre de yema
de huevo Agar
SPS
Agar TSN
35 C 2 C
en
anaerobiosis
24 h a 72 h
Mtodo B. Caldo
fluido de
tioglicolato Caldo
de carne cocida
46 C 0,5 C
35 C
3 h a 4 h
24 h a 48 h
15-150 UFC/g ml
* Hacer las pruebas bioqumicas indicadas en el recuento en placa e identificacin


GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

38
Tabla 8. Mtodos horizontales para Coliformes

Prueba presuntiva Prueba confirmativa
Incubacin Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo
Alimentos
Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Medio
cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
recuento en gel
de pectina
989.11 Productos lcteos VRB redigel 32 C 1 C 24 h 2 h 25-250 UFC/g o ml
Pelcula
rehidratable
Membrana
hidrofbicas
986,33
989,10
leche y productos
lcteos
Placa membrana
hidrofbicas para
recuento de
coliformes
32 C 1 C 24 h 2 h 15-150 UFC/ml
Pelcula
rehidratable
Membrana
hidrofbicas
996.02 Productos lcteos HSCC 32 C 1 C 24 h 2 h > 150 UFC/g o ml
Pelcula
rehidratable
Membrana
hidrofbicas
991.14
Todos los
alimentos
Membrana
hidrofbicas E. coli
count plate
35 C 1 C 24 h 2 h 15-150 UFC/ml
Discos 992.30
Todos los
alimentos
Caldo LST 35 C 1 C 24 h 2 h
Discos SSD
+ MUG
35 C 24 h a 48 h
Presencia / ausencia
E. coli
m-FC 35 C TSAM 44,5 C 0,5 C 24 h 2 h Coliformes/ ml o g
AOAC
2000
Captulo 17
Filtracin por
membrana
hidrofbica
983.25
Todos los
alimentos
TBA para E. coli 44,5 C 0,5 C
24 h 2 h

Coliformes fecales/ ml
o g
Recuento en
placa
7.8 VRBA 32 C 1 C 24 h 2 h Caldo BGB 32 C 1 C 48 h 3 h >150 UFC/g o ml
Nmero ms
probable
7.9 caldo LST 35 C 1 C 24 h 2 h Caldo BGB 35 C 1 C 48 h 3 h NMP/ g ml
L- EMB
Tubo SMA
35 C 1 C 24 h 2 h Test Completo
en medio lquido
7.10
Productos lcteos
caldo LST 35 C 1 C 24 h 2 h
Tubo LST 35 C 1 C 48 h 2 h
Presencia ausencia
Medio
rehidratable
7.13 Productos lcteos
Membrana
hidrofbicas VRBA
32 C 1 C 24 h 2 h >150 UFC/g o ml
Gel de pectina 7.14 Productos lcteos VRB redigel 32 C 1 C 24 h 2 h Caldo BGB 32 C 1 C 48 h 3 h 25-250 UFC/g o ml
Medio caldo para
coliformes
35 C 3 h
Standard
Methods
Captulo 7
Impedancia para
deteccin de
coliformes
7.15
Leche, materia
prima, crema y
mezcla de helado
Impedancia 35 C 14 h
Caldo BGB 32 C 48 h
Recuento por
impedancia de
coliformes/ ml

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39
Tabla 8. (Continuacin)

Prueba presuntiva Prueba confirmativa
Incubacin Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo
Alimentos
Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
Nmero ms
probable
1 Nortea-
mericano
Todos los
alimentos
Caldo lauril sulfato
triptosa
35 C a 37 C 24 h y 48 h
Caldo lactosa
bilis verde
brillante 2 %
Agar eosina
azul de metileno
Agar Endo
35 C a 37 C 24 h a 48 h
NMP Coliformes/
ml o g
Nmero ms
probable
2
britnico
Todos los
alimentos
Caldo MacConkey 35 C a 37 C 24 h y 48 h
NMP Coliformes/
ml o g
Nmero ms
probable
3
Todos los
alimentos
Caldo lactosa bilis
verde brillante
35 C a 37 C 24 h y 48 h
Agar bilis
lactosa rojo
neutro Agar
Endo
35 C a 37 C 24 h y 48 h
NMP Coliformes/
ml o g
Recuento en placa 4
Todos los
alimentos
Agar bilis lactosa
rojo neutro verde
brillante
35 C a 37 C 24 h
< 150 colonias
UFC/ml o g
Nmero ms
probable
coliformes fecales
1
norteame
ricano
Todos los
alimentos
Caldo lauril sulfato
triptosa
35 C a 37 C 24 h y 48 h Caldo EC 44,5 C 0,2 C 24 h y 48 h
NMP Coliformes/
ml o g
ICMSF
Nmero ms
probable
coliformes fecales
2
Europeo
Todos los
alimentos
Caldo MacConkey 35 C a 37 C 24 h y 48 h
Caldo lactosa
bilis verde
brillante 2% e
Indol
44 C 0,1 C 24 h y 48 h
NMP Coliformes/
ml o g
Nmero ms
probable
No. 13
Todos los
alimentos
Caldo lactosado
bilis verde brillante
2 %
35 C 2 C 24 h a 48 h
Agar EMB Agar
VRBA
Agar Endo
35 C 2 C 24 h y 48 h
NMP de
coliformes/ g ml
INVIMA
1998
Nmero ms
probable de
coliformes fecales
No. 14
Todos los
alimentos
Caldo lactosado
bilis verde brillante
2 %
35 C 2 C 24 h a 48 h
Caldo lactosado
bilis verde
brillante 2 % y
Caldo triptfano
44,5 C 0,5 C
en bao de agua
48 h
NMP de coliformes
fecales/g ml

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40
Tabla 8. (Continuacin)

Prueba presuntiva Prueba confirmativa
Incubacin Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio cultivo
T
o
Tiempo
Medio
cultivo
T
o
Tiempo
Expresin de
resultados
Nmero ms
probable
Caldo lauril triptosa 35 C 1 C 48 h 2 h
Caldo
BGLB
35 C 48 h 2 h
NMP de coliformes /g
ml
Recuento en
placa
Todos los
alimentos
VRBA
35 C 32C para
prod. lcteos
18 h a 24 h
Caldo
BGLB
35 C
24 h - 48
2 h
25- 250 UFC/ g ml
Caldo EC 45,5 C 0,2 C 48 h 2 h
FDA - BAM
2001
Nmero ms
probable para
coliformes
fecales
Captulo 4
Mariscos Caldo lauril triptosa 35 C 48 h 2 h
Caldo L-
EMB
35 C
18 h - 24
2 h
NMP de coliformes
fecales /g ml
Nmero ms
probable
8,71- 8,72
Caldo lauril sulfato
triptosa
35 C 0,5 C
24 h - 48 h
2 h
Caldo bilis
verde
brillante
35 C 0,5 C 48 h 2 h
NMP de coliformes /g
ml
Recuento en
placa para
microorganis-
mos no
estresados
8.73 VRBA 35 C 18 h - 24 h
Sugiere
Caldo bilis
verde
brillante
35 C 0,5 C 48 h 2 h 15-150 UFC/g ml
TSA
Temperatura
ambiente
2 h 0,5 h
Recuento en
placa para
microorg
estresados
8.74
VRBA
35 C 32 C para
productos lcteos
18 h - 24 h
15-150 UFC/g ml
Recuento en
Membrana
hidrofbicas
8.75 VRBA
35 C 32 C para
productos lcteos
24 h 2 h UFC/g ml
APHA
Captulo 8
2001
Gel de pectina
Redigel
8.76
Todos los
alimentos
Medio VRB Redigel
35 C 32 C
para productos
lcteos
24 h 2 h

UFC/g ml

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Tabla 8. (Final)

Prueba presuntiva Prueba confirmativa
Incubacin Incubacin
Entidad
oficial
Principio de la
tcnica
Mtodo Alimentos
Medio cultivo
Temperatura Tiempo
Medio
cultivo
Temperatura Tiempo
Expresin de
resultados
Membrana
hidrofbica
8.77 Agar m-FC 35 C 24 h 2 h


NMP coliformes/g
ml
Nmero ms
probable para
coliformes fecales
8.81

Caldo lauril sulfato
triptosa
35 C 0,5 C
24 h -48 h
2 h
Caldo EC 45,5 C 0,2 C 48 h 2 h
NMP de coliformes
fecales /g ml
Nmero ms
probable para
coliformes y E. coli
8.931
Todos los
alimentos
Caldo LST+ MUG 35 C 24 h h 2 h L-EMB 35 C
18 h a 24
2 h
NMP de coliformes/g
ml
Recuento en placa
para coliformes y E.
coli
8.933
Todos los
alimentos
Agar VRBA+MUG 35 C 18 h a 24 h 15-150 UFC/g ml
Recuento en placa
HGMF+ MUG para
coliformes y E. coli
8.934
Todos los
alimentos
LMG+MUG 35 C 24 h 2 h
NMP de coliformes/g
ml
Recuento en
Membrana
hidrofbicas
8.935
Todos los
alimentos
Membrana
hidrofbicas E.coli
count plate
35 C 24 h 2 h 15-150 UFC/g ml
APHA
Captulo 8
2001
Recuento en
Colichrome
8.936
Todos los
alimentos
Redigel colichrome
35 C 32 C
para productos
lcteos
24 h - 48 h












15-150 UFC/g ml
AACC
Nmero ms
probable para
coliformes y E. coli
4215
Todos los
alimentos
Caldo LST 35 C 48 h 2 h Caldo BGLB 35 C 48 h 2 h
NMP de coliformes/g
ml
* Hacer pruebas bioqumicas de acuerdo a cada entidad oficial






GUA TCNICA COLOMBIANA GTC 125

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BIBLIOGRAFA


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th
Edition. Dr. William Horwitz, Volume I y
II. 2000. USA.

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Detection in Food and Cosmetic Products. FDA - BAM 2001

NTC 4132:1997, Microbiologa. Gua general para el recuento de mohos y levaduras. tcnica
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ISO 7954:1987, Microbiology. General Guidance for Enumeration of Yeasts and Moulds.
Colony count technique at 25C.

American Association of Cereal Chemists. AACC 4250. 2004

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NTC 4666 - ISO 11290-1: 1999, Microbiologa de alimentos y alimentos para animales. Mtodo
horizontal para la deteccin de Listeria monocytogenes. Parte 1. Mtodo de deteccin.

ICMSF, 1986. Ecologa microbiana de los alimentos. Volumen 1. Significado y mtodos de
Recuento. Ed. Acribia, Zaragoza.

NTC 4574:1999, Microbiologa de alimentos y de alimentos para animales. Gua general sobre
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NTC 4491-1:2005, Microbiologa de alimentos y alimentos para animales. Preparacin de
muestras para ensayo, suspensin inicial y diluciones decimales para anlisis microbiolgico.
Parte 1. Reglas generales para la preparacin de la suspensin inicial y de diluciones
decimales.

NTC 4491-2:2004, Microbiologa de alimentos y alimentos para animales. Preparacin de
muestras para ensayo. Suspensin inicial y diluciones decimales para anlisis microbiolgico.
Parte 2. reglas especificas para la preparacin de carne y productos carnicos.

NTC 4491-3:2004, Microbiologa de alimentos y alimentos para animales. Preparacin de
muestras para ensayo, suspensin inicial y diluciones decimales para anlisis microbiolgico.
Parte 3. Reglas especificas para preparacin de muestras de pescado y productos de la pesca.

NTC 4491-4:2005, Microbiologa de alimentos y alimentos para animales. Preparacin de
muestras para ensayo, suspensin inicial y diluciones decimales para anlisis microbiolgico.
Parte 4: Reglas especificas para la preparacin de productos diferentes de leche, productos
lcteos, carne, productos crnicos, pescados y productos de la pesca.

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