Destinos de la glucosa 1. Sntesis de polisacridos complejos para matriz extra celular y pared celular (cell vegetal). 2.

Almacenada en forma de polisacridos (glicgeno o almidn en clula vegetal) o sacarosa. 3. Oxidacin a piruvato va glicolisis para proporcionar ATP e intermediarios metablicos (NADH, piruvato). 4. Oxidacin a travs de la ruta de las pentosas fosfato (fosfogluconato) para obtener ribosa 5-fosfato utilizada en las sntesis de ac. Nucleicos y NADPH para los procesos biosinteticos reductores.

Gluclisis
Va metablica anaerbica de oxidacin de la glucosa (6C) a dos molculas de piruvato (3C), conservando energa en forma de 2ATP, 2NADH y en el mismo piruvato. (El piruvato tiene la mayor parte de la energa de la glucosa, que se ocupara en ciclo ac. Ctrico y Fosforilacin oxidativa) 10 Enzimas glucoliticas: protenas citosolicas solubles. 10 intermediarios: compuestos todos fosforilados de 6 o 3 carbonos. Dos fases principales cada una compuesta de 5 etapas: Resumen fase preparatoria: Se invierte la energa de dos ATP para elevar, mediante fosforilacion, el contenido de energa libre de los intermediarios, convirtiendo la glucosa en fructosa 1,6bifosfato, la que se dividir en dos molculas triosas fosfato: el gliceraldehido 3-fosfato y la dihidrixiacetona fosfato. Resumen fase de beneficios: La glucosa y las cadenas de todas las hexosas metabolizadas, se convierten en un producto comn, el gliceraldehido 3-fosfato (2), este se oxida (y fosforila) a piruvato (2), y la energa de esta oxidacin se conserva en forma de un NADH y dos ATP por cada gliceraldehido. (Rendimiento neto de dos ATP por cada glucosa).

Etapas: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Fosforilacion del C-6 de la glucosa: enzima hexoquinasa-sustrato MgATP2--G <0 irreversible. Isomerizacin de la glucosa-6P en fructosa-6P: fosfohexosa isomersa- reversible. Fosforilacion de la fructosa-6P a fructosa 1,6-bifosfato: PFK-1- MgATP2--G <0 irreversible. Rotura de la fructosa 1,6P en dos triosas-P: gliceraldehido-3P y dihidroxiacetona-P: Aldosareversible. Interconversion de la dihidroxiacetona-P en gliceraldehido-3P: Tirosa fosfato isomersareversible. Oxidacin (y fosforilacin) del gliceraldehdo 3P a 1,3-bifosfoglicerato:gliceraldehido (intermediario alta energia), 3-fosfato deshidrogenasa: un fosfato inorgnico Pi y un NAD+ por cada gliceraldehido-3P oxidado. reversible Transferencia de fosforilo desde 1,3-bifosfoglicerato al ADP, formacin dos ATP neto acoplado a la alta energa libre de hidrolisis del 1,3-bifosfoglicerato: fosfoglicerato quinasa. reversible. Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato: la enzima fosfoglicerato mutasa. reversible. Deshidratacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato (PEP), molcula de elevada energa libre de hidrolisis o transferencia de fosforilo: enolasa- reversible. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP, formacin de dos ATP netos: fosforilacion impulsada por la hidrolisis del PEP de alta energa y catalizado por la piruvato quinasa. G <0 irreversible. Ecuacin global glucolisis:

7. 8. 9. 10.

*grupo fosforilo: P = -PO32(*La glucosa y todos los derivados de azucares en la glucolisis son ismeros D, por lo que esto se omite normalmente.*) Proceso importantes: (1) Degradacin del esqueleto carbonado de la glucosa a piruvato. (2) Fosforilacion del ADP a ATP por parte de compuestos fosfato de alta energa. (3) Formacin de NADH Ecuacin global glicolisis: puede dividirse en dos procesos. 1. Conversin de la glucosa en piruvato, reaccin exergonica. 2. Formacin ATP a partir de ADP y Pi, reaccin endergonica. La suma de las ecuaciones es la variable global de energa libre estndar de la glucolisis: tanto en condiciones estndar como intracelulares (no estndar) la glicolisis es un proceso esencialmente irreversible. Funciones del grupo fosforilo (-PO32) 1. Mantencin de los azucares dentro de la clula sin ejercer ningn esfuerzo: la membrana plasmtica no posee transportadores de membrana para azcares fosforilados, como los intermediarios de la glucolisis, por lo que estos no pueden salir fuera de la clula una vez que son fosforilados. La clula ya no gasta energa para retener estas molculas fosforiladas, a pesar de la gran diferencia de concentracin inta y extra celular 2. Los grupos fosforilo son componentes esenciales en la conservacin enzimtica de la energa metablica. La energa liberada en al ruta de enlaces fosfoanhidridos (como por ej ATP) se conserva parcialmente en la formacin de esteres fosfato tales como la glucosa 6fosfato. Los compuestos fosfato de alta energa que se forman en la glucolisis( 1,3bifofoglicerato y fosfoenolpiruvato) donan grupos fosforilo al ADP para formar ATP. 3. La fijacin de los grupos fosfato a los sitios activos de las enzimas disminuyen la energa de activacin y aumentan la especificidad de las reacciones enzimticas. Los grupos fosfato del ADP, ATP, y lso intermediarios glucoliticos forman complejos con el Mg+2, siendo los sitios de unin a sustrato de muchas enzimas glucoliticas especficas para esos complejos Mg+2. Prcticamente todas las enzimas glucoliticas requieren Mg+2 para ejercer su actividad.

Fase preparatoria: 1. Fosforilacion de la glucosa: enzima hexoquinasa activa la glucosa mediante la fosforilacion en el C-6, produciendo una glucosa 6-fosfato. Un ATP es el donador del grupo fosforilo. Energa libre de Gibbs para la reaccin es negativa, indica que la reaccin ocurre en la direccin indicada, y para ocurrir en el sentido contrario necesita ayuda (energa externa), por lo que se dice que es una reaccin irreversible.

Hexoquinasa: -Cataliza la fosforilacion de otras hexosas comunes como la manosa y la fructosa. -Necesita Mg+2 para su actividad (al igual que muchas quinasas), ya que este apantalla las cargas negativas de los grupos fosforilos del ATP, haciendo que tomo de fosforo terminal sea una diana mas fcil par el ataque nucleofilo del OH de la glucosa. Por lo tanto el sustrato de la enzima es el MgATP2- y no el ATP4-. -Posee cuatro isoenzimas (l-lV): enzimas que catalizan la misma reaccin pero que estn codificadas por genes distintos. (La hexoquinasa IV o glucoquinsas se diferencia de las otras por sus propiedades cinticas y de regulacin, enzima que se vera mas adelante) Las isoenzimas generalmente son protenas de estructura cuaternarias, y las subunidades del tetrmero no necesariamente son iguales. Profe (estudiar enzimas antes): La glucoquinasa posee un Km aproximado de 10 mili molar. Si la comparamos con una enzima de menor km, por ejemplo 0,1 milimolar. Si tengo una alta concentracin de sustrato, la enzima de bajo km va a estar saturada, no podr trabajar ms rpido, ya estoy sobre al velocidad mxima., y la de alto km va poder trabajar y no estar saturada, por lo tanto podre regular la actividad de esta enzima, segn la concentracin del sustrato. Por lo tanto la mantencin del equilibrio de la glucosa lo hace la hexoquinsa que tiene bajo km. Y Cuando la concentracin de glucosa esta muy alta, la glucoquinasa empieza a funcionar porque la glucoquinasa de menor km ya esta saturada.

Todas nuestras clulas posee el mismo genoma, sin embargo no todas poseen las mismas enzimas, por ejemplo los miocitos, solamente poseen la hexoquinsa de tipos dos. Esta enzima es inhibida en presencia de altas concentraciones de glucosas 6-fosfato, lo que indica que el miocito no entra ms glucosa, ya que la clula no puede almacenar ms glicgeno.

2. Conversin de la glucosa 6-fosfato en fructosa 6-fosfato: la enzima fosfohexosa isomersa (fosfoglucosa isomersa) cataliza la isomerizacin reversible de la glucosa-6P que es una aldosa, en fructosa 6P, que es una cetosa. -La energa libre para esta reaccin es levemente positiva, muy pequea considerada como cercana a cero, por lo que la reaccin transcurre fcilmente en cualquiera de los dos sentidos -Esta isomerizacin es de carcter crtico para que ocurran las etapas siguientes 3 y 4. (Donde el reordenamiento de los grupos carbonilo e hidroxilo en C-1 y C-2 son necesarios. Para la fosforilacion de la etapa 3 se requiere que el grupo C-1 se convierta de carbonilo en alcohol, y en la etapa 4, la rotura del enlace entre C-3 y C-4 requiere la presencia de un grupo carbonilo en C-2) (ver imagen) (cambio carbonilo, de la posicin uno a las posicin dos)

(Mecanismo de isomerizacin)

3. Fosforilacion de la fructosa 6-fosfato a fructosa 1,6-bifosfato: La enzima fosfofructoquinasa-1 (PFK-1) cataliza la transferencia de un grupo fosforilo desde el ATP a la fructosa 6P para dar fructosa 1,6 P.

-Segunda de las dos reacciones de activacin de la glicolisis. -Energa libre negativa. Reaccin prcticamente irreversible en condiciones celulares. -Primera etapa comprometida en la ruta de la glucolisis, ya que las molculas anteriores glucosa -6P y fructosa-6 tienen otros destinos posibles. La fructosa 1,6 P esta destinada a la glucolisis. PKF-1 Sometida a una regulacin alosterica: -Su actividad aumenta siempre que se agota el suministro de ATP en las clulas o cuando existe un exceso de los productos de rotura del ATP (AMP y especialmente AMP) -Su actividad es inhibida siempre que la clula tenga mucho ATP y disponga de un buen suministro de otros combustibles, como ac. grasos. -Requiere de magnesio, para estabilizar el ATP. -(Ribulosa 5-fosfato, intermediario del ciclo de las pentosas tambin activa de manera indirecta la fosfofructoquinsa). -(PKF-1 se distingue de otra enzima PFK-2, la cual cataliza la formacin de fructosa 2,6-bifosfato a partir de la fructosa-6P en una ruta separada que se ver mas adelante) -En algunos organismos la fructosa 2,6-bifosfato es un potente activador alosterico de la PFK-1. -((( Algunas bacterias, protistas y plantas tienen PFK que usa pirofosfato y no ATP))) *Bifosfato: compuesto que contiene dos grupos fosforilo o fosfato en posiciones diferentes de la molcula. *Difosfato: compuesto que poseen dos grupos fosforilo unidos entre sien forma de grupo pirofosforilo PPi. (ej: ATP)

4. Rotura de a fructosa 1,6.bifosfato: la enzima aldolasa (o fructosa 1,6-bifosfato aldolasa) cataliza una condensacin aldolica (tipo de reaccin donde se forma un enlace C-C) pero en sentido inverso, dividiendo la hexosa (6C) fructosa 1,6-P en dos triosas (3C) fosfato diferentes, el gliceraldehido 3-fosfato, una aldosa, y dihidroxiacetona fosfato, una cetosa. *reaccin de condensacin aldolica, sale mecanismo en el libro, pero no en diapos profe, ni menciono, no creo que entre * -Aunque la energa libre de la reaccin es fuertemente positiva en la direccin de la rotura de la fructosa 1,6-bifosfato, a bajas concentraciones de reactivos presentes en las clulas, la variacin de energa libre real es pequea por lo que la aldolasa es fcilmente reversible. La reaccin tres tira a la 4 La aldolasa acta en la direccin inversa durante el proceso de la gluconeognesis. -Recordar que mecanismo de rotura entre el carbono 3 y 4 necesita de un grupo carbonilo en el C2, lo que se hiso en etapa 2. Aldolasa: dos clases Clase I: en animales y plantas Clase II: en hongos y bacterias. No forma estructura intermediaria necesaria para la condensacin aldolica inversa (llamada base de Schiff), como si sucede en plantas y animales, por lo que en su lugar requieren de un ion Zn+2 en el sitio activo.

5. Interconversion de las triosas fosfato: solo el gliceraldehido 3-fosfato puede ser degradado directamente en las siguientes etapas de la glucolisis. Por lo que la dihidroxiacetona fosfato se convierte rpido y reversiblemente en gliceraldehido 3-fosfato por la enzima tirosa fosfato isomersa.

(Una vez realizada esta conversin no hay distincin alguna entre los dos gliceraldehidos, por lo que no se podr identificar la numeracin de sus carbonos segn su origen en la glucosa, son idnticos) Fase de beneficios 6. Oxidacin (y fosforilacin) del gliceraldehdo 3-fosfato a 1,3-bifosfoglicerato: - Esta oxidacin (y fosforilacion simultanea) es realizada por la enzima gliceraldehido 3-fosfato deshidrogenasa, que utiliza un fosfato inorgnico Pi y un NAD+ por cada gliceraldehido-3P oxidado. NAD+, coenzima en su forma oxidada, acta como agente oxidante en la reaccin: oxidando al sustrato gliceraldehido-3P (al aumentar los enlaces C-O y disminuyendo los C-H). Mientras que el, NAD+, se reduce, ganando un protn H+ y dos electrones en forma de ion hidruro H-1, proveniente del hidrogeno de la parte aldehdo del gliceraldehdo 3P. Finalmente el fosfato inorgnico desprende un protn al unirse a la molcula sustrato. -El grupo aldehdo del gliceraldehido 3-P es oxidado, no a un grupo carboxlico libre, si no que a un anhdrido de ac. Carboxlico-fosfrico(o con ac. Fosfrico). Este tipo de anhdrido es denominado acil fosfato, en este caso especficamente se forma el 1,3bifosfoglicerato.

-Reaccin con energa libre muy pequea, reaccin reversible. 1. Primera de las dos reacciones de la glucolisis conservadoras de la energa, ya que conduce a la formacin de un compuesto con elevado potencial de transferencia del grupo fosfato (o elevada energa libre de hidrolisis), lo que conlleva a la formacin de ATP: Gran parte de la energa libre de oxidacin del grupo aldehdo del gliceraldehido-3P se conserva mediante la formacin del grupo acil fosfato en el C-1 del 1,3-bifosfoglicerato. El 1,3-bifosfoglicerato es el primer intermediario formado que posee elevada energa, muy inestable (muchas cargas negativas), posee un delta de energa libre de hidrolisis muy elevado: -49,3. La reaccin convierte un compuesto con un potencial relativamente bajo de transferencia de fosforilo (G` de hidrolisis del gliceraldehido-3P es pequea) en uno con un potencial de transferencia de grupo fosforilo muy alto (G` de hidrolisis del 1,3-bifosfoglicerato = -49,3). Esto nos indica que la hidrolisis del bifosfoglicerato, y la consecuente formacin de ATP, ser una reaccin muy favorecida 2. Adems se conserva energa mediante la formacin de dos molculas NADH transportadoras de electrones. -La cantidad de NAD+ de una clula es muy inferior a la cantidad de glucosa metabolizada en unos pocos minutos. La glucolisis pronto se detendr si el NADH formado en este paso de la glucolisis no se re oxidara y reciclara continuamente.

Mecanismo gliceraldehido 3-fosfato deshidrogenasa

7. Transferencia de fosforilo desde 1,3-bifosfoglicerato al ADP: La enzima fosfoglicerato quinasa transfiere el grupo fosforilo de alta energa desde el grupo carboxilo del 1,3-bifosfoglicerato (aldehdo) al ADP, obteniendo ATP (2 netos) y 3-fosfoglicerato (acido). 8. Fosforilacion a nivel de sustrato: cuando la formacin de ATP ocurre por transferencia del grupo fosforilo de un sustrato. Este tipo de fosforilacion implica enzimas solubles e intermediarios. 9. Fosforilacion ligada a la respiracin: formacin de ATP que necesita de enzimas de membrana y un gradiente transmembrana de protones. Fosfoglicerato quinasa: -Utiliza magnesio (tpico de enzimas que utilizan nucletidos) -Su nombre es debido a la reaccin inversa a la que realiza en esta etapa, es decir, a la reaccin de transferencia de un grupo fosforilo desde el ATP al 3-fosfoglicerato. La reaccin en la direccin que indica su nombre, se encuentra en la gluconeognesis y durante la asimilacin fotosinttica del CO2. - Por lo tanto cataliza en ambas direcciones

Etapas 6 y 7 son reacciones que constituyen conjuntamente un proceso de acoplamiento de energa, en donde el 1,3-bifosfoglicerato es el intermediario comn, se forma en la primera reaccin (que seria endergonica como sistema asilado, G=6,3), y se transfiere su grupo acil fosfato al ADP en la segunda reaccin (que es fuertemente exergonica, G=-18,5). La suma de estas dos reacciones: es una reaccin global exergonica. Sin embargo, ambas reacciones de etapa 6 y 7 son reversibles en condiciones celulares. . El resultado final de estas reacciones acopladas es que la energa liberada en la oxidacin de un grupo aldehdo a carboxilo se conserva mediante la formacin del 1,3-bifosfoglicerato (etapa 6) y su alta energa libre de hidrolisis. Luego en la etapa 7 la energa liberada por la hidrolisis del 1,3-bifosfoglicerato (G`= -49,3) se conserva en la formacin del enlace fosfoanhidrido del ATP (G`=-30,5), y el resto (G`= -18,8) es la fuerza propulsora que empuja al reaccin hacia la sntesis de ATP.

En otras palabras: el G de formacin de ATP es grande y positivo, por lo tanto para que ocurra necesita de ayuda, esta energa es aportada por la energa libre de hidrolisis del 1,3, que adems permite que la reaccin ocurra, con una energa libre negativa *Reaccin endergonica: reaccin no espontanea o desfavorable, *Reaccin exergonica: reaccin espontanea, favorable en el sentido indicado, *Variacin de energa libre d ela hidrolisis del ATP es grande y negativa. *Variacin de energa libre de sntesis del ATP, es grande y positiva. PROFE= Energa libre positiva (y relativamente pequea) debera ocurrir en condiciones de equilibrio en la direccin contraria. Sin embargo, al ir sacando el producto, para que este reaccione como reactante en la reaccin siguiente, la reaccin ya no se encontrara en equilibrio, y por lo tanto puedo cambiar la energa libre de la reaccin a negativa, parque la reaccin ocurra en la direccin indicada. 8. Conversin del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato: la enzima fosfoglicerato mutasa cataliza un desplazamiento reversible del grupo fosforilo entre el C-2 y el C-3 del glicerato. El Mg+2 es esencial para esta reaccin. La reaccin reversible que ocurre en dos pasos: 1. 1. Un grupo fosforilo inicialmente .

unido a un residuo His de la mutasa es transferido al grupo hidroxilo en C-2 del 3-fosfoglicerato, formando 2,3bifosfoglicerato (2,3-BFG). En esta etapa una segunda His acta como catalizador bsico general (acepta H+).

2. Se trasfiere a continuacin el grupo fosforilo del C-3 del 2,3-BFG al mismo residuo His de la enzima, mientras la segunda His acta como catalizador acido general (libera H+) Por lo tanto la mutasa es inicialmente fosforilada por transferencia de fosforilo desde el 2,3-BPG, que es necesario en pequeas cantidades para iniciar el ciclo cataltico y es continuamente regenerado por este ciclo. (Por lo tanto hay un intermediario esta fosforilado en posicin 2 y 3)

9.

Deshidratacin del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato (PEP): la enzima enolasa promueve la eliminacin reversible de una molcula de agua por cada 2-fosfoglicerato.

Segunda reaccin glucolitica conservadora de la energa a travs de al formacin de compuestos con elevado potencial de transferencia del grupo fosforilo, que conducen a la formacin de ATP. La primera ocurre en la etapa 6. PEP molcula con muchos electrones, muy inestable, y por lo tanto alta energa. La reaccin convierte un compuesto con un potencial relativamente bajo de transferencia de fosforilo (G` de hidrolisis del 2-fosfoglicerato = -17,6) en uno con un potencial de transferencia de grupo fosforilo muy alto (G` de hidrolisis del PEP = -61,9). Esto nos indica que la hidrolisis del PEP, y la consecuente formacin de ATP, ser una reaccin muy favorecida.

10. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP: este ltimo paso corresponde a una fosforilacion a nivel de sustrato catalizado por la piruvato quinasa que requiere K+1 y Mg+2 o Mn+2. G <0 reaccin irreversible. La reaccin global de esta etapa tiene una energa libere estndar negativa y grande. ((Debido en gran medida a la conversin espontanea de la forma enol del piruvato en la forma ceto, ver mas abajo)) Alrededor de la mitad de la energa liberada por la hidrolisis de la PEP (G`= -61,9) se conserva en la formacin del enlace fosfoanhidrido del ATP (G`= -30,5), constituyendo el resto (G`= -31,4) una gran fuerza propulsora que empuja al reaccin hacia la sntesis de ATP. El delta G de la reaccin general de glucolisis ser negativo, gracias al sistema de reacciones acopladas. ((En primer lugar el piruvato aparece en su forma enol y a continuacin se tautomeriza rpidamente y de forma no enzimtica para dar la forma ceto que es la que predomina a pH))((Imagen no sale en clases, solo libro))

Otras generalidades glucolisis

Destino NADH: En condiciones aerbicas el NADH es reoxidado a NAD+, donando sus electrones a la cadena respiratoria, cuyo ltimo aceptor es el O2, en la mitocondria. A la energa generada por el transporte de electrones, en la cadena respiratoria, esta acoplada la biosntesis o fosforilacion de ATP. Por lo tanto la transferencia de electrones desde el NADH al O2, en la mito, aportan la energa para la sntesis de ATP por fosforilacion acoplada a la respiracin. *recordar que los 4 electrones de los 2NADPH, provienen de los iones hidruros de los dos gliceraldehidos 3-fosfato* *En condiciones anaerbicas la velocidad y al cantidad de total de glucosa consumida es mucho mayor que en condiciones aerbicas. Estos se debe a que en condiciones anaerbicas en la glucolisis se producen 2ATP neto por cada glucosa consumida, sin embargo en condiciones aerbicas la oxidacin completa de la glucosa a CO2, produce de 30 a 32 ATP. Por lo que para conseguir la misma cantidad de ATP, en condiciones anaerbicas se deben consumir unas 15 veces mas glucosa que en condiciones aerbicas.* Regulacin de la glucolisis El flujo de glucosa a travs de la glucosa esta regulado con el objetivo de conseguir niveles casi constantes de ATP. Regulacin va: consumo de ATP, regeneracin de NADH y regulacin alostrica de varias enzimas glucoliticas, entre ellas la hexoquinsa, la PFK-1 y la piruvato quinasa. Adems de regulada por la fluctuacin segundo a segundo de la concentracin de metabolitos que indican el equilibrio entre el consumo y al produccin de ATP. A escala de tiempos ligeramente mas largo, la glucolisis esta regulada por las hormonas, glucagn, insulina y adrenalina. Tambin existe regulacin por cambios en al expresin de genes de varias enzimas glucoliticas. Profe: *Midiendo estequiometricamente la cantidad de NADH ya reducido (en etapa 6 de la glucolisis), puedo medir la concentracin de glucosa. *Kit de medicin glicemia: oxidan la glucosa, producen NADH, y miden esta concentracin de NADH.

Captacin de glucosa deficiente en diabetes mellitus tipo 1 (o dependiente de insulina)

Metabolismo de la glucosa esta limitado por: 1. La velocidad de captacin de glucosa por parte de las clulas. 2. La fosforilacion por parte de la hexoquinsasa. -Captacin de la glucosa en la sangre por familia de transportadores GLUT. -Los transportadores de hepatocitos (GLUT1, Y 2) y de las neuronas cerebrales (GLUT3) siempre estn presentes en al membrana plasmtica. -Transportadores de glucosa en clulas del musculo esqueltico, cardiaco y tejido adiposo (GLUT4) esta secuestrado en pequeas vesculas intracelulares y se desplaza a la membrana plasmtica solo en respuesta a una seal de insulina. Por lo que la captacin y metabolismo de la glucosa en estas clulas depende de la liberacin de la insulina, desde las clulas beta del pncreas, en respuesta a niveles elevado de glucosa sangunea. -Individuos con este tipo de diabetes, poseen demasiadas pocas clulas beta, por lo que no pueden liberar suficiente insulina, para provocar la captacin de glucosa por los tipos celulares indicados. Consecuencias: efectos sobre el metabolismo de glcidos y grasas. -Hiperglicemia: ya que no pueden captar glucosa por parte de musculo esqueltico, corazn y tejido adiposo. -Musculo y tejidos grasos utilizan los cidos grasos de los triacilgliceridos como combustible principal. -En el hgado, el acetilCoA procedente de la degradacin de los cidos grasos se convierte en cuerpos cetonicos (acetoacetato y B-hidroxibutirato) que se exportan a otros tejidos para su utilizacin como combustible. -Cuerpos cetonicos son utilizados por el cerebro como combustible alternativo cuando no hay glucosa a disposicin. (Ya que los ac grasos no pueden pasar a travs de la barrera hematoencefalica, por lo que no pueden usarse como combustible para las neuronas cerebrales). -Sobreproduccin de cuerpos cetonicos y su acumulacin en la sangre, hacen que descienda el pH sanguneo, lo que procede una cetoacidosis que pone en peligro la vida. Solucin: Inyeccin de insulina permite que GLUT4 se desplace a las membranas plasmticas de adipocitos y clulas musculares, y al glucosa sea captada y fosforilada, disminuyendo los niveles de glucosa sanguneos, y reducindose la produccin de los cuerpos cetonicos. (*Musculo, miositos, no almacenan triacilgliceroles, por el contrario captan acidos grasos liberados por los adipocitos a la sangre*)

La alta velocidad de la glicolisis en los tumores cancergenos: facilita el diagnostico y sugiere tratamientos.
En tejidos cancergenos tumorales la velocidad de consumo de glucosa, y la velocidad de la glucolisis es muy superior a la normal. Esto se debe a que: 1. Las clulas tumorales se dividen muy rpido y por lo tanto necesitan gran cantidad de ATP, y poseen un alto consumo de glucosa para realizar biosntesis (por ejemplo a travs de ciclo de las pentosas). 2. Como las clulas tumorales crecen en condiciones de hipoxia al menos inicialmente, ya que carecen de redes capilares que aporten el suficiente oxigeno, dependen tan solo de la glucolisis (y posterior fermentacin) para la obtencin de ATP, al menos hasta que tumor posea vasos sanguneos suficientes para alimentar el crecimiento del tumoral. Terapia cncer: inhibidores de la glucolisis podran seleccionar y matar tumores al eliminar su suministro de ATP. Por ejemplo: Inhibidores de la hexoquinsa: impiden formacin de glucosa 6-fosfato y por lo tanto inhiben la glucolisis, y adems la va de las pentosas, donde se forman, como veremos mas adelante, la sntesis de nucletido necesarios para divisin. -2-desoxiglucosa -Lonidamina -3-bromopiruvato Drogas contra el cncer, como lo son estos inhibidores, pueden causar efectos secundarios al actuar en clulas normales. Diagnostico del cncer: a travs de tomografa de emisin de positrones (PEP) Se inyecta anlogo inocuo de la glucosa marcado isotpicamente. Detecto radiacin en zonas donde la glucosa se acumul. Existen rganos que consumen mucha ms glucosa que otros, en este caso la persona esta en reposo, por lo que el nico gran consumidor de glucosa es el cerebro (msculos con sumen mucha glucosa, pero no estn activos en este caso) Deteccin del tumor: busco centros de gran consumo de glucosa que no corresponden a estado de reposo. Rutas alimentadoras de la glucolisis

1. Polisacridos y disacridos de la dieta: se hidrolizan a monosacridos Glucgeno: -Polisacrido de reserva ms importante en clulas animales. (tambin fabricado por clulas vegetales). -Composicin: Polmero con subunidades de glucosa unidas por enlace alfa 1,4,y con ramificaciones con enlace alfa 1,6 cada 8 a 12 residuos. Ms compacto y ramificado que almidn. Almidn: -Polmero de reserva fabricado por clulas vegetales (no por clulas animales, por lo tanto no se puede encontrar almidn dentro de clulas animales). -Principal fuente de glcidos de la dieta (por lo tanto el almidn puede ser digerido y utilizado como fuente de energa por animales, pero antes de incorpralos a las clulas debe ser degradado para asimilarlos a nivel celular como glucosa, esta glucosa puede posteriormente ser polimerizada nuevamente pero esta vez en forma de glicgeno, polmero que si se puede almacenar y procesar dentro de la clula). Composicin: dos polmeros -Amilosa; cadenas largas sin ramificar de residuos D-glucosa conectado por enlaces alfa 1,4. -Amilopectina; cadenas de glucosa altamente ramificada, unin de los residuos por enlace alfa 1,4, y en los puntos de ramificacin, presentes cada 24 a 30 residuos, enlaces alfa 1,6. Principal fuente de glcidos de la dieta humana. Digestin del almidn -Boca: alfa-amilasa de la saliva hidroliza uniones glicosidicas internas alfa 1,4, dando lugar a fragmentos cortos de polisacridos u oligosacridos. (Observar que en esta reaccin de hidrolisis la especie atacante es el agua, y no el Pi). -Estomago: alfa-amilasa de la saliva se inactiva. -Intestino delgado: pncreas secreta otra alfa-amilasa, que degrada a maltosa, maltotriosa (di y trisacridos de la glucosa) y oligosacridos llamados dextrinas limite, fragmentos de amilopectina que contienen puntos de ramificacin alfa-1,6. -Los disacridos y las dextrinas no pueden entrar a las clulas epiteliales del intestino sin haber sido previamente hidrolizados a monosacridos. Disacridos y dextrinas son hidrolizados por enzimas que estn unidas a la superficie externa de las clulas epiteliales. -Los monosacridos formados se transportan activamente al interior de las clulas epiteliales, desde las cuales pasan a la sangre para ser transportados a diferentes tejidos. All son fosforilados y canalizados hacia la secuencia glucolitica. El glucgeno de la dieta tiene bsicamente la misma estructura que el almidn y su digestin sigue el mismo proceso.

Intolerancia a la lactosa: desuso de la enzima lactasa hace que el genoma deje de expresar la enzima Se debe a la desaparicin despus de la infancia de la mayor parte o de toda la actividad lactasa de las clulas intestinales. Esto puede ser producto del cese de consumo de leche rica en lactosa despus de la infancia Sin esta enzima la lactosa no puede ser diferida y absorbida completamente en el intestino delgado y pasa al intestino grueso, donde es convertida por las bacterias en productos txicos que causan espasmos abdominales y diarrea. El problema se complica aun mas porque la lactosa no digerida y sus metabolitos aumentan la osmolaridad del contenido del intestino, lo que favorece la retencin de agua en el intestino. 2. Degradacin glucgeno (o almidn) intracelular o endgeno (no adquiridos va dieta) En dos pasos simples: 1. Rotura fosforolitica de un residuo de glucosa de un extremo del polmero, que formara una glucosa 1-fosfato (enzima glucgeno fosforilasa). 2. Conversin de la glucosa-1P en glucosa-6P (enzima fosfoglucomutasa) molecula que puede entrar a glicolisis. -Enzima glucgeno fosforilasa (almidn fosforilasa en vegetales) cataliza el ataque de un fosfato inorgnico Pi sobre el enlace glucosidico alfa-1,4 que une los dos ltimos residuos de glucosa en el extremo no reductor de un glicgeno. -Resultado: liberacin de glucosa 1-fosfato mas un glicgeno con un residuo menos de glucosa. -Esta reaccin es una llamada fosforolisis (no una hidrolisis). -La enzima acta repetitivamente hasta que alcanza un punto de ramificacin alfa-1,6 en el cual detiene su accin. -Enzima desramifcate elimina ramificaciones. -En la fosforolisis se conserva parte de la energa del enlace glucosidico en el ester fosfato, glucosa 1-fosfato. Conversin Glucosa 1-fosfato a glucosa 6-fosfato por la enzima fosfoglucomutasa. (Mecanismo de esta enzima es el mismo que la fosfoglicerato mutasa) Glucosa-6P puede entrar a la glicolisis o a otra va como la de las pentosas fosfato. La obtencin de la glucosa-6P mediante esta va (degradacin de glicgeno), proporciona un ahorro de ATP, ya que en este caso no es necesaria la utilizacin de un ATP, en la fase preparativa de la glicolisis, para fosforilar la glucosa en posicin 6. Por lo tanto se obtienen 3 ATP netos por cada glucosa siguiendo esta va para la entrada a la glucolisis.

*Isomerasas: tipo de enzimas que interconvierten estereoisomeros o ismeros estructurales o posicionales. *Mutasa: subtipo de isomerasa cataliza al transferencia de un grupo funcional desde una posicin a otra en al misma molcula. Si la degradacin del almidn y el glicgeno de dieta fuera mediante fosforolisis (y no mediante hidrolisis como ocurre realmente) no haba ahorro energtico, ya que para entrar a las clulas que recubren el intestino los azucares deben desfosforilarse previamente para entrar como azucares libres. 3. Monosacridos a ruta glicolitica: mayora de las hexosas pueden entrar en la glucolisis una vez fosforiladas. -D-fructosa pasa a: fructosa-6-fosfato (en rin y msculos) o gliceraldehido 3-fosfato (en hgado). -D-galactosa pasa a: glucosa 1-fosfato -D-manosa pasa a: fructosa 6-fosfato D-fructosa -Presente en su forma libre en las frutas. -Formada de la hidrolisis de la sacarosa. -Ruta entrada D-fructosa a glucolisis por ejemplo en rin y msculos. Hexoquinasa : -Esta hexoquinasa es la misma enzima que acta en el paso uno de la glucolisis, por lo tanto es un enzima que acta sobre dos sustrato diferentes, la glucosa y la fructosa. La diferencia esta en el Km que posee al enzima para los diferentes sustratos, ya que esta poseer una afinidad diferente para cada uno. -Ruta entrada de la D-fructosa a glucolisis en al hgado: Fosforilacion en C-1 (y no en C-6) por fructoquinasa Fructosa-1P se rompe formando gliceraldehido y dihidroxiacetona fosfato. Enzima Fructosa 1fosfato aldolasa: La dihidroxiacetona fosfato se convierte en gliceraldehido 3-fosfato. Enzima triosa fosfato izomerasa. Gliceraldehido es fosforilado por el ATP y la triosa quinasa a gliceraldehido-3P, que puede entrar a la glucolisis.

*Gliceraldehido tambin es el punto de partida para al formacin de los triglicridos*

D-galactosa -Epimero de la glucosa. Es una aldosa hexosa. -Disacrido lactosa hidroliza a lactosa y glucosa. Lactosa pasa por la sangre al hgado donde se fosforila primeramente en C1 a expensas de ATP por la accin de la enzima galactoquinsa: -Galactosa 1-fosfato se convierte seguidamente en su epimero en C4 (ver definicin epimero mas abajo), que es la glucosa 1-fosfato, mediante un conjunto de reacciones en las que la udrina difosfato (UDP) funciona como un transportador de tipo coenzimatico de grupos hexosa: -Mecanismo de reaccin de este proceso: la conversin ocurre a travs de un derivado de azcar-nucletido, UDP-galactosa, que se forma cuando la galactosa-1P desplaza la glucosa 1fosfato de la UDP-glucosa. - La UDP-galactosa se convierte en seguida en UDP-glucosa por la enzima UDP-glucosa 4-epimerasa en una reaccin que implica: la oxidacin del C4 por el NAD+, lo que implica una transformacin desde una OH a una cetona, y a continuacin la reduccin del C4 por el NADH, lo que implica un cambio desde una cetona a un OH, pero con inversin de la configuracin espacial. El resultado de estas reacciones es la inversin de la configuracin de C4. -La UDP-glucosa se recicla a travs de otra vuelta en la misma reaccin. El efecto neto de este ciclo es la conversin de galactosa 1P a glucosa 1P, no hay produccin o consumo neto de UDP-galactosa o UDP-glucosa.

(Epmero): es un estereoismero de otro compuesto que tiene una configuracin diferente en uno solo de sus centros estereognicos. Los epmeros ocurren con frecuencia en los carbohidratos, por ejemplo la D-glucosa y la D-manosa difieren en C2, el primer tomo de carbono quiral, por lo tanto son epmeros en C2: a la derecha D-manosa y a la izquierda Dglucosa Galactosemia: Cuando cualquiera de las tres enzimas de este ciclo posee defectos, que hacen que galactosa se acumule en al sangre. Deficiencia en galactoquinasa: -Se encuentran concentraciones elevadas de galactosa en la sangre y orina. -Recin nacidos desarrollan cataratas debido al depsito de galactitol, un metabolito de la galactosa, en el cristalino. Puede ser producido por un exceso en la ingesta de leche. Los dems sntomas en esta enfermedad son relativamente benignos y una limitacin estricta de la galactosa en la dieta disminuye notablemente su gravedad.

Deficiencia en la transferasa: Es ms grave, se caracteriza por poco crecimiento en los nios, anomalas del habla, deficiencia mental y lesin heptica que puede llegar a ser fatal, incluso cuando se suprime la galactosa de la dieta. D-manosa -Liberada de la digestin de diversos polisacridos y glucoproteinas presentes en el alimento. -Puede ser fosforilada en C6 por hexoquinasa. -Luego la manosa-6P se isomerisa por al accin de la fosfomanosa isomerasa, dando fructosa 6fosfato, intermediario de la glucolisis.

Rutas alimentadoras de la glucolisis

*Profe: Contraccin muscular baja. Solo realizo glicolisis anaerbica. Luego hgado produce glucosa a partir de piruvato (gluconeognesis). Este nivel de contraccin muscular no necesita oxigeno. Cuando la cantidad de glucosa que llega al msculo es baja, ya me gaste todo el glicgeno muscular paso a una contraccin aerbica.

*Nivel de glucosa en al sangre al despertar no debe ser menor de 1 gramo por litro* (Gluconeognesis) -Generacin de glucosa partir de: piruvato, lactato u oxalato ( o cualquier compuesto intermediario del ciclo de krebs que pueda transformarse en uno de estos tres) -En hgado, rin e intestino delgado. Glucosa para uso de cerebro, musculo y eritrocitos.

Destinos posibles para el piruvato

(1) En organismos o tejidos aerbicos en condiciones aerbicas: el piruvato formando en la glicolisis se oxida a acetato (acetiolCoA), el cual entra en el ciclo del acido ctrico y se oxida a CO2 y H2O. Mientas que el NADH + formado en la glicolisis se reoxida finalmente a NAD mediante el paso final de sus electrones al O2 en el proceso de la respiracin mitocondrial. Finalmente la energa procedente de las reacciones de transferencia electrnica impulsa la sntesis de ATP en la cadena respiratoria de la mitocondria. En condiciones anaerbicas o hipoxicas (baja concentracin de oxigeno): como sucede en msculos esquelticos muy activos, es decir en estado de contraccin vigorosa (en las plantas sumergidas o en las bacterias del acido lctico), el NADH generado en la glucolisis no puede ser reoxidado por el O2. La + incapacidad para regenerar NAD dejara a la clula sin aceptor de electrones para la oxidacin del gliceraldehido 3-fosfato, con lo que se detendran las reacciones de glucolisis que producen energa (ya que no son viables la oxidacin aerbica ni del NADH ni del piruvato). Por lo + tanto se ha de regenerar el NAD mediante otra va, para poder volver a generar ATP a travs de glucolisis (proceso anaerbico). Esta via es la fermentacin, que se puede dar de dos maneras: (2) En tejidos animales: el NAD se regenera a partir de NADH mediante la reduccin del piruvato a lactato. Proceso llamado fermentacin del acido lctico (3) En otros tejidos y organismos como tejido vegetal, protistas, y microorganismos como la levadura: + regeneran el NAD mediante al reduccin del piruvato a etanol y CO 2. Proceso llamado fermentacin etanolica o alcohlica. OJO: ciertos tejidos y tipos celulares (como la retina y los eritrocitos, estos ltimos no tienen mitocondrias y por lo tanto no pueden oxidar el piruvato a CO 2) producen lactato a partir de la glucosa en condiciones aerbicas. La fermentacin en general es un proceso que: -Ocurre en el citoplasma.
+

-Extrae energa a partir de la glucosa, (2 ATP, en la fase glucolisis) sin consumir oxigeno (en oposicin a la otra manera de obtener ATP con necesidad de O2, la cadena respiratoria). + + -Regenera el NAD , sin variar las concentraciones de NAD o NADH. -No produce oxidacin ni reduccin neta de los carbonos del piruvato, provenientes de la glucosa. Esto se comprueba porque la razn entre los H:C de los reactivos y productos permanece contante en las reacciones de ambas fermentaciones. (Entender concepto de oxidacin, como ganancia de oxigeno, y reduccin como ganancia de hidrogeno) -Fermentacin se utiliza en las industrias para obtener productos a partir de materias primas baratas. Ejemplos de productos; etanol, yogurt, cerveza etc.

Fermentacin lctica o del acido lctico -La lactato deshidrogenasa a pH 7 reduce el piruvato al ismero L del lactato. -La reaccin al poseer una energa libre fuertemente negativa, favorece la formacin de lactato.

Recordar que en al glucolisis la deshidrogenacin de las dos molculas de gliceraldehido 3-fosfato (ver etapa 6) procedentes de una molcula de glucosa transforma dos molculas + NAD en dos de NADH. Debido a que la reduccin de dos molculas de + piruvato a dos de lactato regenera dos molculas de NAD , no hay + cambio neto en la cantidad de NAD o NADH. Adems en las fermentaciones, aunque hay dos pasos de oxidoreduccin en la conversin de glucosa a lactato, en general no se produce reduccin u oxidacin neta de los carbonos de la glucosa, ya que en la glucosa (C6H12O6) y en el acido lactico (C3H6O3), la proporcin H:C es la misma. OJO: notar que la nica diferencia entre el acido lctico y el lactato, es que el lactato corresponde al acido lctico que ha perdido el protn del grupo carboxlico.. Reciclado del lactato: Lactato formado por msculos esquelticos activos (o por eritrocitos) se transporta por al sangre al hgado en donde se convierte en glucosa durante la actividad muscular vigorosa. Limites de la va fermentacin para regenerar NAD para glucolisis: Cuando se produce lactato en grandes cantidades, durante la contraccin muscular vigorosa, el acido lctico se ioniza a lactato, provocando
+

acidificacin en el musculo y en al sangre, limitando los periodos de actividad energtica. Por ejemplo los atletas no pueden mantener la velocidad lmite durante ms de un minuto. Lactato es una molcula extraordinariamente soluble y por esto es que es muy fcil liberarla al torrente sanguneo

Fermentacin alcohlica o etanolica En levadura (por ejemplo de la cerveza y panificacin) y mircoorganismos. (En pan CO2 hace que suba la masa. CO2 es el responsable de las burbujas de algunas bebidas alcohlicas como la champaa. Licores son producidos gracias a la fermentacin de granos, compuestos de azucares) Compuesta por dos reacciones 1. Piruvato se descarboxila liberando un CO2 en una reaccin irreversible. + -Enzima Piruvato descarboxilasa: necesita de Mg y posee unida una tiamina pirofosfato como coenzima. 2. Acetaldehdo se reduce a etanol, mediante el poder reductor proporcionado por el NADH (procedente de + la deshidrogenacion del gliceraldehido 3-fosfaro (etapa 6)), lo que permite regenerar el NAD . -Alcohol deshidrogenasa necesita de zinc. -Enzima alcohol deshidrogenasa, no esta presente solo en organismos que producen etanol a partir de piruvato (fermentacin), si no que tambin esta presente en muchos organismos que metabolizan el etanol (que es un toxico), entere ellos el humano, en donde esta enzima solo acta en la reaccin inversa, de etanol, a acetaldehido, ya que los humanos NO PRODUCIMOS ETANOL A PARTIR DE GLUCOSA (Por lo tanto la alcohol deshidrogenasa solo acta en un sentido en humanos). - Finalmente el acetaldehido lo eliminamos en la sangre y luego a travs de las vas respiratorias (El acetaldehido posee el olor caracterstico del halito alcohlico o tufo). -En el hgado humano se cataliza oxidacin del etanol, ya sea este digerido o producido por los + microrganismo intestinales, con al reduccin del NAD a NADH, ya que la reaccin transcurre en la direccin contraria a la de la fermentacin. -Enzima tetramerica que posee varias isoenzimas. Por ejemplo grupos tnicos asiticos poseen esta isoenzima con menor actividad cataltica, por lo que degradan ms lento el etanol a acetaldehdo, y se emborrachan ms rpido.

Ecuacin general fermentacin alcohlica: Se comprueba que proporcin H:C constante en reactivos y productos: razn H:C para la glucosa = 12/6 y para los dos etanol y 2 CO 2 combinados =12/6.

Etanol sirve como un biocombustible alternativo al petrleo. Ms rentable. -Produccin a partir de alimentos, que contienen algn tipo de azucares, los cuales son fermentados por microrganismos como al levadura. -Alimentos que pueden utilizarse: Maz , trigo, caa de azcar, arroz etc. Tiamina pirofosfato (TPP): -Proveniente de la vitamina B1 -Acta como coenzima (dentro del sitio activo de la enzima) en las reacciones de ruptura de enlace adyacentes a grupo carbonilo carbonilo (descarboxilacion de -cetoacidos, tranferencia de aldehido de un C a otro) (Desestabiliza grupo carbonilo). -Parte funcional es su anillo de tiazolio, que posee un protn levemente acido, que se desprende y forma una carboanion, que es la especie activa en las reacciones dependientes de TPP.

Ciclo de las pentosas fosfato: ruta del fosfogluconato o ruta de las hexosas mono fosfato
En la mayora de los tejidos el destino principal para la glucosa 6-fosfato es su degradacin en la glucolisis a piruvato, y a su vez la mayor parte del piruvato se oxida va ciclo de Krebs, lo que lleva a la generacin de ATP. -Esta ruta es una va alternativa, a la glucolisis, para la glucosa 6-fosfato que conduce a la formacin de productos especializados necesarios para la clula. -Especial importancia en: Tejidos con clulas de rpida divisin (como la medula sea, mucosa intestinal y tumores) Tejidos con una biosntesis reductora activa (biosntesis que necesita de poder reductor para funcionar) de cidos grasos (como el hgado, tejido adiposo, glndula mamaria lactante), colesterol y hormonas esteroidales (hgado, gnadas, glndulas adrenales). Tejidos susceptibles a dao por radicales libres generados por el oxigeno (como eritrocitos y clulas del cristalino y cornea, expuestas directamente al oxigeno).

-Productos: Pentosa ribosa 5-fosfato, especialmente importante para clulas en divisin: debido a que este azcar es precursor para sntesis de acidos nucleicos y nucletidos: RNA, DNA y coenzimas como: ATP, NADH, FADH2, y coenzima A. NADPH necesario en tejidos para la biosntesis reductora o para contrarrestar los efectos perniciosos de los radicales oxigenados (ya que el NADPH mantiene una atmosfera reductora).

Esta es la nica va citoplasmtica en la que se forma NADPH Va Controlada por la concentracin de NADPH. Si hay exceso de NADPH, la va se inhibe Dos etapas 1. Etapa oxidativa: Glucosa 6-fosfato se oxida a 6-fosfogluconato. Mientras que una molcula de NADP+ se reduce a NADPH, a travs de la enzima glucosa 6-fosfato deshidrogenasa (G6PD). Equilibrio de esta reaccin esta muy desplazado hacia la formacin de NADPH. Luego el 6-fosfogluconato se oxida y descarboxila a la cetopentosa ribulosa 5-fosfato, generando una segunda molcula de NADPH. Enzima: 6-fosfogluconato deshidrogenasa Finalmente la fosfopentosa isomerasa convierte la ribulosa 5-fosfato en su ismero aldosa ribosa 5-fosfato. En algunos tejidos el ciclo de las pentosas llega hasta este punto, resultando la produccin neta: dos NADPH como poder reductor, y la ribosa 5-fosfato, como precursor principalmente de

nucletidos. Ecuacin general:

Esquema general ruta pentosas fosfato

((*Se omiti que en realidad glucosa 6-fosfato se oxida primero a intermediario llamado 6-fosfogluconatolactona, y este es hidrolizado por enzima, lactonasa a 6fosfogluconato. Por eso en la ecuacin general ms arriba sale una H2O en reactivos. Esto si se muestra en imagen.*))

2. Etapa no oxidativa:

En los tejidos que requieren principalmente NADPH, ms que ribosa 5-fosfato para biosntesis, las pentosas fosfato producidas en al fase oxidativa (ribulosa o ribosa) se reciclan a glucosa 6-fosfato, especficamente a cinco molculas de la hexosa glucosa 6-fosfato, lo que permite la produccin continua de NADPH. En primer lugar la ribulosa 5 fosfato se epimeriza a xilulosa 5 fosfato gracias a la ribulosa 5 fosfato epimerasa.

Luego ocurre una serie de reordenamientos de los esqueletos carbonados de los azcares fosfato, donde 6 azcares fosfatos de 5 carbonos (ribulosa y xilulosa) se convierten en 5 azcares fosfato de seis carbonos, provocando la oxidacin de la glucosa 6 fosfato y la produccin de NADPH. En este fase hay 3 reacciones importantes dependientes de la transcetolasa(2) y la transaldolasa. 1Reaccin de la transcetolasa:

Tiamina pirofosfato(TPP): Coenzima que participa en la rotura de los enlaces adyacentes a un grupo carbonilo, como la descarboxilacin de alfa-cetocidos. Se sintetiza a partir de la tiamina (vitamina B1), una vitamina hidrosoluble presente en las verduras frescas y carnes

La transcetolasa, enzima dependiente de TPP, cataliza la transferencia de un fragmento de dos carbonos de la xilulosa 5 fosfato a la ribosa 5 fosfato, formando la seudoheptulosa 7- fosfato y el gliceraldehdo 3- fosfato(formado por los carbonos restantes de la xilulosa). En sntesis, se transfiri el grupo cetnico de la xilulosa a la aldosa receptora(ribosa) convirtindose la cetosa donadora en un aldehdo y la aldosa receptora en una cetosa.

Reaccin de la transaldolasa:

Se elimina un fragmento de tres carbonos de le seudoheptulasa 7- fosfato y se ene con el gliceraldehdo 3- fosfato formando la fructosa 6 fosfato, y los carbonos restantes que quedan (4), se utilizan para formar la eritrosa 4- fosfato En resumen, el grupo cetnico se transfiere a un aldehdo de tal manera para que se forme un azcar de 6 Carbonos y lo restante en un azcar de 4 Carbonos. La fructosa 6- fosfato puede intervenir en la gliclisis o en la gluconeognesis, donde en esta ltima la enzima fosfohexosa isomerasa la transforma en glucosa 6-fosfato y y as continuar con el ciclo. La eritrosa 4-fosfato va a interactuar con una xilulosa 5-fosfato, reaccin que se detallar a continuacin:

2 Reaccin de la transcetolasa:

La transcetolasa acta nuevamente formando fructosa 6-fosfato y gliceraldehdo 3-fosfato a partir de Xilulosa 5-fosfato y eritrosa 4-fosfato. Y luego 2 molculas de gliceraldehdo 3-fosfato pueden interactuar y formar la fructosa -1,6bifosfato. La fructosa- 1,6- bifosfatasa es capaz de transformarla a fructosa 6-fosfato, y la fosfohexosa isomeraza la convierte en glucosa6-fosfato

Esquema general

A partir del esquema se puede dar cuenta que en total reaccionan 4 azcares de xilulosa 5-fosfato y 2 de ribulosa 5 fosfato ( 6 azcares fosfato de cinco carbonos) y se producen a partir de estos 6 azcares de fructosa 6-fosfato que pueden participar tanto en la gliclisis como en la gluconeognesis.

6 pentosas

5 hexosas

Si se usa la fructosa 6 fosfato para producir glucosa 6 fosfato, esta ltima puede volver al punto de partida del ciclo para la formacin de ribosa 5 fosfato y continuando as con la produccin de NADPH, si es que el organismo lo necesita. Todas las reacciones de la parte no oxidativa del ciclo de las pentosas son fcilmente reversibles con lo que proporcionan de este modo un medio para convertir hexosas fosfato en pentosas fosfato.

Rol del NADPH y glutatin en proteccin contra estrs oxidativo:

El consumo de oxgeno es necesario, pero a su vez es capaz de producir dao, puesto que genera la aparicin del radical superxido, que debido a su alta toxicidad, es continuamente destruido por los mecanismos antioxidantes de la clula. Especficamente por la enzima superxido dismutasa (SOD), y como consecuencia de esto, se forma un residuo secundario, el perxido de hidrgeno o agua oxigenada. Esta molcula es muy txica, de hecho el dao que provoca es acumulativo, por lo que se debe eliminar, y es aqu donde es muy importante el ciclo de las pentosas ya que genera NADPH. Para eliminar el agua oxigenada se utiliza una enzima llamada glutatin peroxidasa que la convierte en agua, pero para que esta enzima funcione debe estar en su forma reducida, y para reducir el glutatin oxidado se requiere de otra enzima, la glutatin reductasa que utiliza el NADPH que proviene del ciclo de las pentosas y as formar el glutatin reducido. El agua oxigenada es txica porque es un lquido altamente polar que puede producir un hidroxilo que es capaz de alterar los lpidos(fundamentalmente los cidos grasos), las protenas, el DNA, etc, y ese dao que va generando es acumulativo. Este dao est relacionado con el proceso de envejecimiento, porque mientras mayor es la persona, el sistema de eliminacin del agua oxigenada ya no es tan efectivo, por ende, se va acumulando el H2O2 que es el responsable de la aparicin de las canas

Glicgeno

Uno de los aspectos importantes de la molcula del glicgeno, es que es ramificada y se caracteriza por lo siguiente: Tener enlace alfa glucosa glucosa alfa1 -> 4 Tener ramificaciones con enlaces alfa1->6

La enzima que degrada glucgeno a glucosa 1 fosfato, sacando residuos de glucosa desde los extremos no reductores, dejando alrededor de cuatro residuos de glucosa, antes de llegar a un enlace alfa1->6. Por lo tanto lo que vamos a ver, al observar al glicgeno, es una reaccin en la cual vamos a producir un golpe desde el enlace produciendo la glucosa 1 fosfato y dejando, adems, el glicgeno con un residuo menos. En esta reaccin el receptor no es la molcula de agua, como podramos pensar, sino, el fosfato; es decir, el grupo fosfato acta como catalizador, promoviendo el ataque del fosfato sobre el enlace glucosidico (fosforolisis de glucgeno). Este proceso lo realiza la glicgeno fosforilasa, utilizando fosfato obviamente. Sin embargo, este proceso tambin puede ser llevado a cabo por agua, pero bajo otras condiciones (en otros organismos). _______________________________________________________________________

OBTENCION DE GLUCOSA EN POLISACARIDOS RAMIFICADOS

Nosotros podemos degradar el glicgeno, hasta que la enzima desramificante corta el ultimo enlace alfa1->4, adyacente a la glucosa que est unida al enlace alfa1->6, y ponerlo al final de la cadena. Existe una glicosidasa que corta el enlace antes mencionado, y en este caso lo que se obtiene, es glucosa libre . Posteriormente se sigue degradando hasta liberar la cantidad necesaria de glucosa 1- fosfato. _____________________________________________________________________

La glucosa 1-fosfato, producto final de las reacciones de glicgeno fosforilasa, puede ser transformada en glucosa 6-fosfato. Esta reaccin esta mediada por la fosfoglucomutasa, que tiene normalmente, un grupo de Serina que esta fosforilado, y lo que hace es transferir el grupo que tiene en la Serina a la posicin 6 de la glucosa, produciendo un intermediario, el cual es, la glucosa 1,6 bifosfato. Luego, esta misma enzima, fosfoglucomutasa, cataliza el corte de este enlace fosfato, produciendo un extremo OH en la glucosa 1,6- bifosfato. La serina recupera su grupo fosfato. Esta reaccin es muy importante, ya que sin ella, nosotros no podramos utilizar la glucosa proveniente del glicgeno.

Si bien todas las celular puede producir glicolisis, no producen glucosa para otros rganos, solo para ellas mismas. Sin embargo en el caso del hgado, cuando los niveles de glucosa en la sangre estn bajos, l es el nico rgano que es capaz de trasportar su glucosa a otros sectores del cuerpo. La caracterstica especial del hgado, que hace posible que realice la actividad antes mencionada, es que es capaz de transportar la glucosa 6-fosfato (obtenida de la glicolisis) al interior del RE, gracias a una protena transportadora llamada T1; dentro del RE del hgado, existe una enzima llamada glucosa 6-fosfatasa, la cual se encarga de sacarle el fosfato, y as producir glucosa libre, la cual ser transportada al citosol, y de all al sistema sanguneo, a travs de una protena transportadora llamada GLUT2 _____________________________________________________________________

Ahora, Qu pasa cuando suben los niveles de glucosa? Los niveles de azucares bajan gracias al hgado, el cual convierte el exceso de glucosa a glicgeno o lo destina a otras vas metablicas que necesiten.

Este cientfico descubri que la conversin a glicgeno, bastaba con la formacin de una molcula llamada UDP Glucosa. Sntesis de glicogeno.

Se produce una reaccin de condensacin entre un nucleosido trifosfato (NTP) y un azcar fosfato. El oxgeno cargado negativamente del azcar acta como nucleofilo atacando el fosfato alfa del nucleosido trifosfato y desplazando pirofosfato. Se forma un enlace fosfato-fosfato entre el nucletido y el azcar. Esta reaccin es factible por que el delta G de la reaccin esta facilitado por la posterior hidrolisis del pirofosfato por la pirofosfato inorgnico hidrolasa a fosfato por lo tanto el delta G de esta reaccin es negativa. Un nucletido es portador de la glucosa.

Reaccin catalizada por la glicgeno sintasa.

Esta molcula de UDP-G (glucosa y nuclotico de uracilo es este caso) a travs de la enzima nucletido sintasa que rompe el enlace y transfiere el residuo de glucosa de UDP-G al extremo no reductor de una rama de glucgeno formando un nuevo enlace alfa 1-4 liberando la molecula de UDP Y generando un nuevo extremo no reductor. Podramos decir con esto que el UDP est actuando como un donante de glucosa al glicgeno. La glucgeno sintasa no puede formar enlaces alfa 1-6 que se encuentran en los puntos de ramificacin de glicgeno; la formacin de estos enlaces corren a cargo de una enzima ramificadora de glucgeno, esta cataliza la transferencia de un fragmento terminal de 6 o 7

residuos glucosilo desde el extremo no reductor de una rama de glucgeno. Con la ramificaciones la molecula de glucgeno es mas soluble a medida que tiene mas extremos no reductores.

Una molcula de glicgeno tiene entre 12 y 14 residuos de glucosa en cada una de las ramas. Una sola molcula de glucgeno tiene muchos ramas (almidn tiene cadenas lineales largas) y permite concentrar un mayor nmero de residuos de glucosas un en menor espacio y a partir de una molcula de glucgeno se tienen muchos extremos no reductores que permite que cuando haya que producir glucosa 1 fosfato tengo varios extremos de los cuales puedo utilizar y para que la molcula crezca voy a agregar residuos de glucosa en cada uno de los extremos. Se puede ver que el nmero de molculas de glucgeno es constante y lo nico que sucede es que se alargan y se acortan sus ramas en condiciones normales. (dia se alargan, noche se acortan). Hay uno molcula en la cual se inicia la sntesis de la molcula de glicgeno y esta es una protena llamada glicogenina. La glicogenina tiene un aminocido dentro del sitio activo (tirosina) que aporta el grupo hidroxilo, lo que permite utilizando una molcula de UDP-G atacar este enlace produciendo la unin entre la tirosina y el azcar liberando el UDP. Esto deja un extremo no reductor que se puede usar para ser centro de nucleacin para generar una molcula de glicgeno. (formacin de molculas nuevas glicgeno se da solo en condiciones extremas, ayunos largos etc..)

Patologas asociadas al metabolismo del glicgeno Tienen que ver con enfermedades genticas de las enzimas del metabolismo del glicgeno. Todas las enzimas que estn alteradas lo que afecta fundamentalmente en los nios es al hgado, las alteraciones hepticas que se producen si no son tratadas adecuadamente las nios no pasan las 10 aos. En forma secundaria se ve afectado el musculo esqueltico.

Aspectos iniciales de regulacin de la via glicolitica.

Dentro de una clula cuando se est sintetizando o degradando algo las concentraciones de los intermediarios de estas reacciones nunca varan. Por ejemplo si tomamos el metabolismo de los carbohidratos, cada una de las molculas que yo estoy haciendo en la glicolisis es precursor de una seria de otras reacciones (produccin de energa, metabolismo de lpidos, metabolismo de nucletidos). La nica forma de que cada va exista es que yo la est alimentando. La concentracin de cada compuesto es normalmente menos al km esto significa que siempre la reaccin va a poder alimentarse y poder traspasar a otra va.

Glicgeno y gluconeognesis vas opuestas.

Si la glucosa es alta y el piruvato bajo hay glicolisis y si es al revs hay gluconeognesis, pero siempre, independiente hacia donde acurra la reaccin la concentracin de 1,3-bisfosfoglicerato es la misma siempre. (los intermediarios no cambian la concentracin). (reacciones cuyo delta G es cercano a cero son reversibles).

De que manera se regula la demanda o exceso de glucosa? Factores que afectan la actividad de enzimas.

La concentracin de las enzimas de una va metablica debe ser cuidadosamente regulada La actividad de estas enzimas tiene que ser extraordinariamente bien regulada

Esto acurre a travs de demanda.

Ejemplo: de qu manera va a responder una clula al exceso o ausencia de glucosa? Responde utilizando muchos mecanismos y uno de ellos va a ser en respuesta de la presencia de insulina (hormona polipeptidica) que esta directamente relacionada con la mantencin de los niveles de glucosa cuando hay exceso de glucosa (cuando hay poca glucosa acta el glucagn). La insulina acta a varios niveles y son censadas a nivel de la superficie de la clula por un receptor proteico que logra unir la insulina, las consecuencias de esto es que se activan protenas a travs una cascada de eventos que producen que aumente la sntesis de ARN y producto de eso se sinteticen molculas que son capaces de actuar sobre las enzimas, estas enzimas puede ser modificada en su capacidad de actividad de varias maneras: Enzimas pueden ser degradadas ( es ms lento regular la cantidad de enzimas que los otros mecanismos) Fosforilacion y desfosforilacion Unir ligantes alostericos Inhibicin de la enzima por el producto

Regulacin con la modificacin de una enzima en distintos tejidos

Protena quinasa activada por AMP (AMPK)

la quinasa que fosforila esta enzima puede tener efectos distintos a nivel de los distintos organismos. Ejemplo de la foto:

En musculo esqueltico: estimula captacin de cidos grasos, aumentar la captacin de glucosa y generar ms mitocondrias. En el pncreas: inhibe la secrecin de insulina. En el hgado: inhibe la biosntesis de cidos grasos y de colesterol. En el tejido adiposo: inhibe la sntesis de cidos grasos. En el corazn: estimula la oxidacin de cidos grasos, la captacin de glucosa y la glicolisis. En el cerebro: activa el consumo de glucosa Podemos ver que una misma seal que implica la activacin de uan enzima, el efecto a nivel de los rganos puede ser muy distinto. La misma quinasa capas de fosforilar no va a actuar en todos los rganos de la misma manera.

En la siguiente tabla se nos muestra una medicin de la concentracin de ATP, ADP y AMP en una clula; esta medicin se realiza antes de dejar de darle ATP a la clula y despus de extraerlo.

Podemos concluir, que la seal que indica que la clula tiene hambre es la alta concentracin de AMP, y no la baja de ATP, como podramos pensar.

En la siguiente tabla se nos muestra la vida media de enzimas en distintos rganos, el hecho de que los valores sean distintos. Por lo tanto cada rgano por sus caractersticas, hace que las enzimas tengan un periodo de vida media sea distinta.

LAS HORMONAS NO FUNCIONAN IGUAL EN TODOS LOS ORGANOS, TODO VA A DEPENDER DE LA FUNCION DEL TEJIDO. Tomaremos el caso de la insulina: La accin de la insulina en clulas hepticas y adiposas es promover la captacin de glucosa, para bajar los niveles de glicemia en la sangre. Pero adems, en el mismo hgado, va a inhibir la accin de la glucosa 6-fosfatasa (enzima destinada a exportar glucosa). En el caso del miocito, hace que la glucosa entre lo ms rpido posible y estimular la actividad de la hexokinasa, de tal manera que la mayora de la glucosa se fosforile, y de esa manera, entre a glicolisis. Adems de lo mencionado anteriormente, la insulina tambin va a estimular la accin de la glicgeno sintetasa, para que pueda sintetizar, a base de glucosa, glucgeno.

El fallo de estos mecanismos provoca patologas, tales como:

DIABETES TIPO I: consiste en una falla en clulas del pncreas, para la produccin de insulina. Esto va a afectar el manejo de los cidos grasos y de la mitocondria DIABETES TIPO II (resistencia insulinica): falla en los transportadores de insulina, especficamente en molculas intermediarias, las cuales deberan permitir la salida de estos transportadores a la membrana. Ac se produce insulina, pero hay problemas para ser ingerida a la clula. Esta salida est determinada por dos tipos de mecanismo de transporte: 1.- mecanismo de endocitosis de vesculas de clatrina 2.- en miocitos: endocitosis dependiente de colesterol

El hgado para regular los altos niveles de glucosa, tambin posee dos enzimas, la hexokinasa I y la hexokinasa IV(glucokinasa)

Hexoquinasa II es alostericamente inhibida por G-6-P en miocitos, y la hexoquinasa IV es una enzima con regulacin alostrica por fructosa 6-P. Es decir, cuando la concentracin de glucosa en la sangre es alta, la glucosa sangunea en exeso es transportada a los hepatocitos, en donde la hexokinasa IV la convierte en glucosa 6-fosfato. Dado que la hexokinasa IV no esta saturada a los 10mM de glucosa, su actividas continua aumentando a medida que la concentracin de glucosa sube de 10mM o ms.

La grafica anterior demuestra la contribucin de la glicolisis principal es la hexokinasa IV.

La actividad de las enzimas es regulada a travs de variados mecanismos

Regulacin de la concentracin de enzima citoplasmtica por glucosa

No es inhibida por G-6-P

Qu pasa cuando la glucosa disminuye ?

La imagen anterior nos muestra la regulacin de la enzima alimentadora de la glicolisis (hexokinasa IV) mediante el secuestro en el ncleo; aqu el inhibidor de la hexokinasa IV de unin nuclear, toma la hexokinasa y la lleva al ncleo, unindola a una protena regulatoria cuando la concentracin de fructosa 6-fosfatoen el hgado es elevada, y as es secuestrada. Este mecanismo esta regulado por la alta concentracin de glucosa, lo que hace que ocurra una disociacin y la fructosa 6-fosfato sea liberada al citosol, facilitando el paso de glucosa 6fosfato, y a su vez estimulando la glicolisis. Sin embargo cuando la fructosa 6-fosfato se acumula, va a indicar que los otros metabolitos no estn siendo usados, por lo tanto no estaramos gastando la glucosa a raz de esto, se saca la hexoquinasa IV del citoplasma para que no siga el proceso.