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UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS FACULDADE DE CINCIAS AGRRIAS PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ZOOTECNIA

UTILIZAO DE PRPOLIS NA ALIMENTAO DE POEDEIRAS

MARIANA BELONI

Dissertao apresentada Universidade Federal da Grande Dourados UFGD, como parte das exigncias para obteno do ttulo de mestre do Programa de PsGraduao em Zootecnia.

Dourados - MS Agosto de 2011

UNIVERSIDADE FEDERAL DA GRANDE DOURADOS FACULDADE DE CINCIAS AGRRIAS PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM ZOOTECNIA

UTILIZAO DE PRPOLIS NA ALIMENTAO DE POEDEIRAS


MARIANA BELLONI Mdica Veterinria

Orientador: Profa. Dra. Irenilza de Alencar Ns Co-orientadores: Profa. Dra. Ibiara Correia de Lima Almeida Paz Prof. Dr. Rodrigo Garfallo Garcia

Dissertao apresentada Universidade Federal da Grande Dourados UFGD, como parte das exigncias para obteno do ttulo de mestre do Programa de PsGraduao em Zootecnia.

Dourados - MS Agosto 2011

BIOGRAFIA DO AUTOR

Mariana Belloni - filha de Elias Belloni e Thereza Aparecida Azedo Belloni, nasceu em 01 de novembro de 1984 na cidade de Adamantina, estado de So Paulo. Graduou-se no ano de 2009 no curso de Medicina Veterinria pela Faculdade Uniderp-Anhanguera Campus de Dourados Mato Grosso do Sul. Foi aprovada no processo de seleo do Programa de Ps - Graduao em Zootecnia da Universidade Federal da Grande Dourados, rea de concentrao Produo Animal, com incio em maro de 2010. No ms de abril de 2011 submeteu-se ao exame geral de qualificao, foi aprovada e teve sua defesa realizada no dia 18 de agosto de 2011.

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DEDICATRIA

Aos meus pais, Elias Belloni e Thereza Aparecida Azedo Belloni, pela dedicao, amor e incentivo ao longo de minha vida. s minhas irms, Slvia Mara Belloni, Ciliane Belloni e JulianaBelloni pela ajuda, estmulo e companheirismo; e meu sobrinho Gabriel Belloni Ceni que com sua alegria de criana ilumina meus dias.

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AGRADECIMENTOS A Deus, pela vida, coragem de enfrentar as dificuldades e oportunidade de realizar minhas conquistas. A meus pais Elias Belloni e Thereza Aparecida Azedo Belloni e as minhas irms Slvia Mara Belloni, Ciliane Belloni e Juliana Belloni Furlan que sempre me incentivaram. Agradeo, pois sou quem sou graas a essas pessoas maravilhosas que amo muito. Ao meu namorado Nlio Teixeira da Silva pelo amor, carinho, amizade, pacincia, compreenso, ajuda e apoio nestes anos de convivncia. Universidade Federal da Grande Dourados, Faculdade de Cincias Agrrias, ao Departamento de Zootecnia, ao Programa de Ps-Graduao em Zootecnia e a todos professores. Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES) pela concesso de bolsa de estudos. A orientadora Professora Dra. Irenilza de Alencar Nas pelo aprendizado, orientao permanente, confiana e amizade. A minha co-orientadora Professora Dra. Ibiara Correia de Lima Almeida Paz que sempre esteve pronta para ajudar e incentivar. Obrigada pela confiana, amizade, ensino e exemplo profissional. Ao meu co-orientador Professor Dr. Rodrigo Garfallo Garcia agradeo pelo aprendizado adquirido e pela sua disponibilidade. Ao Professor Dr. Leonardo de Oliveira Seno pela ateno e auxlio nas anlises estatsticas dos dados. A professora Dra Fabiana Cavichiolo pela ajuda no procedimento histolgico para elaborao das lminas e anlise das mesmas. A Faculdade de Cincia e Tecnologia de Alimentos (FACET) pela colaborao durante a anlise sensorial. Viviane Maria de Oliveira dos Santos Ferreira pela ajuda durante as anlises realizadas e pela amizade. Ao Secretrio da Ps-Graduao em Zootecnia Ronaldo Pasquim, pela ajuda e pela amizade. Ao Sr. Lzaro responsvel pelo avirio experimental de poedeiras da Faculdade de Cincias Agrrias. Aos alunos de graduao Leonardo Willian de Freitas, Natlia Correia Novaes da Silva e Grace Alessandra de Arajo Baldo pelo apoio, amizade e ajuda durante e aps o perodo experimental. Aos colegas de mestrado Nayara Spndola Francisco, Gisele Aparecida Flix e Mrcio Pilecco, pela grande amizade cultivada e incentivo. Luciene Tabaldi pela ajuda e amizade. E a todos que de alguma forma contriburam para a realizao deste trabalho.

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SUMRIO
LISTA DE FIGURAS ...................................................................................................................... vi LISTA DE TABELAS .................................................................................................................... vii RESUMO ......................................................................................................................................... ix ABSTRACT ..................................................................................................................................... xi CAPTULO 1 .................................................................................................................................... 1 1 CONSIDERAES INICIAIS ........................................................................................... 2 2 OBJETIVOS .................................................................................................................................. 4 2.1 Objetivo Geral ......................................................................................................................... 4 2.2 Objetivos Especficos .............................................................................................................. 4 3 REVISO DE LITERATURA .................................................................................................. 5 3.1 A Prpolis............................................................................................................................ 5 3.2 3.3 Produo de Ovos ............................................................................................................ 7 Caractersticas de Ambincia Trocas Trmicas ............................................................. 10

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ........................................................................................ 12 CAPTULO 2 .................................................................................................................................. 18 RESUMO .................................................................................................................................... 19 ABSTRACT ................................................................................................................................ 20 1 2 2.1 INTRODUO ................................................................................................................. 21 MATERIAL E MTODOS ............................................................................................... 22 Ambincia Trmica do Alojamento ............................................................................... 24 2.2 Desempenho das Aves ...................................................................................................... 25 2.3 Qualidade de Ovos ............................................................................................................ 25 2.4 2.5 3 3.1 3.2 3.3 4 Anlise Sensorial ........................................................................................................... 26 Anlise Estatstica .......................................................................................................... 26 RESULTADOS E DISCUSSO ....................................................................................... 26 Ambiente de Alojamento ............................................................................................... 26 Temperatura Superficial das Aves ................................................................................. 29 Desempenho das Aves ................................................................................................... 31 CONCLUSES ................................................................................................................. 38

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ........................................................................................ 39 CAPTULO 3 .................................................................................................................................. 45 RESUMO .................................................................................................................................... 46 ABSTRACT ................................................................................................................................ 47 2 2.1 2.2 3 MATERIAL E MTODOS ............................................................................................... 49 Morfometria e Microscopia ptica do Trato Digestrio ............................................... 50 Anlise Estatstica .......................................................................................................... 50 RESULTADOS E DISCUSSO ....................................................................................... 50

CONCLUSES ................................................................................................................. 56

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ........................................................................................ 57 CAPTULO 4 .................................................................................................................................. 60 RESUMO .................................................................................................................................... 61 ABSTRACT ................................................................................................................................ 62 2 MATERIAL E MTODOS...................................................................................................... 64 2.5 3 3.1 3.2 3.3 4 Anlise Estatstica .......................................................................................................... 66 RESULTADOS E DISCUSSO ....................................................................................... 66 Caractersticas Externas dos Ovos ................................................................................. 66 Caractersticas Internas dos Ovos .................................................................................. 69 Anlise Sensorial ........................................................................................................... 75 CONCLUSES ................................................................................................................. 78

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ........................................................................................ 78 CAPTULO 5 .................................................................................................................................. 82

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LISTA DE FIGURAS

CAPTULO 2
Figura 1 Imagem registrada por cmera de termografia infravermelho, com a marcao dos pontos de coleta da temperatura do telhado do galpo experimental. ........................ 28 Figura 2 Imagem termogrfica das aves (a) e marcao dos pontos de coleta da temperatura superficial (b). ............................................................................................... 31

CAPITULO 3 Figura 1 Peso mdio relativo de rgos de poedeiras alimentadas com diferentes nveis de prpolis. ............................................................................................................................ 51 Figura 2 Vilosidade de duodeno de poedeiras, evidenciando a largura das vilosidades. Aumento 20X. Em A: Tratamento 1 (controle). Em B: Tratamento 2 (1% de prpolis). Em C: tratamento 3 (2% de prpolis. Em D: Tratamento 4 (3% de prpolis). ................. 54

CAPTULO 4 Figura 1 Desdobramento da interao entre os tratamentos (% de prpolis) e condies de armazenamento (ambiente e refrigerao) para a varivel luminosidade. ........................ 71 Figura 2 Desdobramento da interao entre tratamento (% de prpolis) e perodo de estocagem para a varivel luminosidade. .......................................................................... 72 Figura 3 Interao entre tratamento (% de prpolis) e condies de armazenamento para a varivel vermelho.............................................................................................................. 73 Figura 4 Efeito dos tratamentos (% de prpolis) e perodo de estocagem para a varivel amarelo.............................................................................................................................. 74 Figura 5 Intensidade de amarelo para os diferentes perodos de estocagem. Letras diferentes, diferem entre si (p<0,05) pelo teste de Tukey. ................................................ 75

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LISTA DE TABELAS CAPTULO 2


Tabela 1 Composio calculada da rao experimental .........................................23

Tabela 2 Composio bromatolgica da prpolis. .................................................24 Tabela 3 Temperatura e umidade do avirio durante o perodo experimental. ......27 Tabela 4 Temperatura Superficial (Ts) mdia das aves durante o perodo experimental. ..........................................................................................................29 Tabela 5 Temperatura superficial (Ts) mdia de aves com pena (pescoo e peito) e sem pena (crista, barbela e olhos) em dois perodos (manh e tarde) em galinhas suplementadas com prpolis. .................................................................................30 Tabela 6 Produo de ovos (PR), converso alimentar para a produo de massa de ovos (CAPMO), converso alimentar para a produo de ovos (CAPO) e consumo de rao (CR) por ave nos diferentes tratamentos. .................................33 Tabela 7 Valores da gravidade especfica (GE) em gramas por cm3 dos ovos (g/cm3), porcentagem de casca (PC), teor de clcio (Ca) e fsforo (P) e peso dos ovos (PO) realizado durante o perodo experimental.............................................34 Tabela 8 Valores mdios do peso (g) e colorao da gema, obtidos avaliando-se o teor de luminosidade (L*), vermelho (a*) e amarelo (b*) de ovos de poedeiras suplementadas com prpolis. .................................................................................37

CAPTULO 3 Tabela 1 Mdia da altura de vilosidades (AV), da largura da vilosidade (LV) e profundidade da cripta (PC) do duodeno, jejuno e leo em micrmetro (m) de poedeiras alimentadas com prpolis. .....................................................................53

CAPTULO 4 Tabela 1 Mdias do peso inicial e peso final dos ovos em gramas mantidos sob temperatura ambiente e temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias).......................................................................................................................67

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Tabela 2 Porcentagem de casca dos ovos de poedeiras suplementadas com diferentes nveis de prpolis mantidos sob temperatura ambiente e sob temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). ...............................68 Tabela 3 Mdias da gravidade especfica (gramas por cm3) dos ovos de poedeiras suplementadas com diferentes nveis de prpolis mantidos sob temperatura ambiente e temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). .............69 Tabela 4 Mdias do peso (gramas) da gema dos ovos de poedeiras suplementadas com diferentes nveis de prpolis mantidos sob temperatura ambiente e temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). ...............................70 Tabela 5 Valores encontrados para a anlise sensorial aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle, para os diferentes tratamentos e condies de armazenamento: temperatura ambiente (TA) e temperatura de refrigerao (TR). ...................................................................................................76 Tabela 6 Valores encontrados para a anlise sensorial aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle com escores de variao de cor, odor e textura da gema e clara, em relao amostra controle para os diferentes tratamentos. ............................................................................................................76 Tabela 7 Valores encontrados para a anlise sensorial aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle com escores de variao de cor, odor e textura da gema e clara, em relao amostra controle, para as diferentes condies de armazenamento: temperatura ambiente (TA) e temperatura de refrigerao (TR). ...................................................................................................77

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RESUMO

O experimento foi realizado nas instalaes experimentais da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Grande Dourados (FCA/UFGD), Dourados MS. Tendo como objetivo, avaliar os efeitos da utilizao de prpolis em dietas de poedeiras semi pesadas sobre o desempenho e a qualidade de ovos, alteraes no trato digestrio e temperatura superficial das aves. Foram utilizadas 120 poedeiras vermelhas s 55 semanas de idade. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado com esquema fatorial 4x2x3 (4 nveis de incluso de prpolis na dieta (0, 1, 2, 3%); 2 temperaturas (ambiente e refrigerao) e 3 perodos de estocagem. Inicialmente, foram avaliadas caractersticas de desempenho das aves, qualidade e anlise sensorial de ovos frescos, temperatura superficial das aves, peso e porcentagens de rgos,

morfometria intestinal e qualidade e anlise sensorial de ovos armazenados em diferentes temperaturas (ambiente e refrigerao). As variveis de desempenho foram influenciadas pelos tratamentos para a produo de ovos, converso alimentar para a produo e massa de ovos e consumo de rao. A temperatura superficial no foi influenciada por diferentes nveis de incluso de prpolis na dieta. Para a avaliao de qualidade dos ovos frescos, somente a colorao da gema foi influenciada (p<0,05) pelos tratamentos para as variveis de luminosidade, teor de vermelho e amarelo. A anlise sensorial destes ovos mostrou que os avaliadores notaram moderada diferena entre eles Os resultados para a porcentagem de rgos em funo do peso corporal mostraram que o peso do fgado e da moela foram maiores com a adio de prpolis a 1%. A altura das vilosidades aumentou com a adio de prpolis a 3%, principalmente a altura das vilosidades do duodeno e do leo, assim como aumentou a largura das vilosidades no jejuno. Para as caractersticas avaliadas da qualidade dos ovos em diferentes temperaturas de armazenamento (ambiente e refrigerao) somente a colorao da gema foi influenciada (p<0,05). A luminosidade foi influenciada por todos os tratamentos e perodo de estocagem para os ovos mantidos em temperatura de refrigerao. O teor de vermelho foi influenciado por todos os tratamentos, perodo de estocagem e condio de armazenamento e o teor de amarelo foi

influenciado por todos os tratamentos nos ovos mantidos em temperatura de refrigerao. Na anlise sensorial destes ovos, quando as amostras experimentais foram avaliadas em relao amostra padro (ovo no armazenado e sem prpolis), os provadores notaram moderada diferena entre elas, demonstrando que os tratamentos alteraram a aparncia dos ovos. Portanto, conclui-se que a prpolis influiu sobre algumas variveis avaliadas, no entanto, de acordo com as condies em que foi conduzido este experimento e devido aos resultados encontrados se apresentarem divergentes conforme o nvel de prpolis empregado e parmetro estudado, no foi possvel inferir de forma precisa sobre a utilizao da prpolis nos nveis de 1, 2 e 3% na dieta das aves. Dessa forma, mais estudos so necessrios para identificao da melhor dose-resposta para incluso da prpolis como aditivo alimentar para poedeiras.

Palavras-Chave: intestino, produo e qualidade de ovos, prpolis, termografia

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ABSTRACT The experiment was conducted in the experimental facilities at the College of Agricultural Sciences of Federal University of Grande Dourados (FCA / UFGD), Dourados- MS. This work aimed to evaluate the effects of the use of propolis in the diet of laying hens, yield and quality of eggs, changes in the digestive tract and surface temperature. On the total of 120 Isa Brown strain laying hens at 55 weeks of age were used in this study. The experimental design was completely randomized with a factorial 4x2x3 (4 inclusion of levels of propolis in the diet (0, 1, 2, 3%), two temperatures (ambient and refrigeration) and three storage periods. Initially, some characteristics were evaluated such as bird performance, hens surface temperature, quality and sensory analysis of fresh eggs, weight and

percentage of organs, intestinal morphology and sensory analysis and quality of eggs stored at different temperatures (ambient and refrigeration). The variables related to birds performance that were affected by treatments were egg production, feed conversion for the production and egg mass and feed intake. The surface temperature was not influenced by inclusion of different levels of propolis in the diet. On the evaluation of the quality of fresh eggs, only the color of the yolk was influenced (p <0.05) by treatments for variable brightness, red and yellow content. The results of sensory analysis of eggs showed that the evaluators noted moderate difference among the treatments. The findings for the percentage of organs related to the body weight showed that the weight of the liver and gizzard were larger with the addition of 1% of propolis. The villus height increased with the addition of 3% propolis, especially the height of the villi in the duodenum and ileum, and increased the width of the villi in the jejunum. On the characteristics evaluated for the quality of eggs at different storage temperatures (ambient and refrigeration), only the color of the yolk was influenced (p <0.05). The brightness was influenced by all treatments and storage period for eggs kept at refrigeration temperature. The content of red was influenced by all treatments, storage period and storage condition, while the content of yellow was influenced by all treatments on the eggs kept at refrigeration temperature. In the sensory analysis of the stored eggs when the experimental samples were compared to the

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standard sample (eggs not stored and no propolis), the evaluators noted moderate difference between them, demonstrating that the treatments changed the quality of eggs. According to the conditions under which this experiment was conducted and due to divergent results presented as the level of propolis and studied parameter, it was not possible to infer precisely on the use of propolis in levels 1, 2 and 3% in the diet of birds. Thus, further studies are needed to identify the best doseresponse for inclusion of propolis as a food additive for laying hens

Key words: intestine, yield and quality of eggs, propolis, thermografy

CAPTULO 1

CONSIDERAES INICIAIS

A avicultura desenvolveu-se muito, buscando novos sistemas de criao, visando maior produtividade em menor tempo, passando por processo de evoluo tcnica e gentica, alimentao, manejo e sanidade, fatores considerados sustentculos da avicultura como atividade econmica e importante na produo de alimentos para a populao (ALBUQUERQUE, 2004). Portanto, para TRINDADE et al. (2007) quando se considera avicultura de postura, a qualidade da produo um dos principais interesses dos produtores e consumidores de ovos, uma vez que est diretamente relacionada a fatores, como os citados anteriormente e sade e bem-estar dos animais. O aumento do consumo de ovos e a utilizao de suas vantagens nutricionais pela populao dependem da qualidade do produto oferecido ao consumidor, determinada por um conjunto de caractersticas que podem influenciar o seu grau de aceitabilidade no mercado (BARBOSA et al., 2008). No entanto, aps a postura os ovos tendem a perder a qualidade rapidamente e esta dependente de aspectos externos e internos. A casca considerada sua embalagem e, independente da cor, deve estar sempre limpa, ntegra e sem deformaes, para proteger a parte interna. Os aspectos internos importantes so determinados pelo albmen, que deve ser lmpido, transparente, consistente, denso, com pequena poro fluida. Com o passar do tempo a clara torna-se lquida, espalhando-se com facilidade, alterando sua acidez. J a gema deve ser bem amarela, com odor e sabor caractersticos, e a cmara de ar em ovos frescos deve ser pequena (SARCINELLI et al., 2007). Outro fator de grande importncia para garantir a qualidade dos ovos o bem estar das aves. Poedeiras submetidas a estresse podem botar ovos com qualidade inferior. A habilidade apresentada pelas aves na troca trmica com o ambiente muito afetada pelas instalaes. Como os avirios brasileiros no so termicamente isolados, as amplitudes crticas de temperatura e umidade externas so imediatamente transferidas para o interior das instalaes, podendo provocar altos ndices de mortalidade (NS et al., 2000).

medida que a temperatura ambiente aumenta, a eficincia da perda de calor sensvel diminui, em razo do menor gradiente de temperatura entre a pele do animal e a do ambiente. A manuteno da temperatura corporal determinada pelo equilbrio entre o ganho e a perda de calor. Uma das formas de avaliar a capacidade fisiolgica dos animais em tolerar melhor o calor est na eficincia em dissip-lo, o que varia entre espcies, raas e indivduos (SOUZA et al., 2007). Uma maneira de tentar evitar que os danos causados por estresse em aves sejam agravados a incluso de aditivos dieta. A utilizao da prpolis na alimentao de frangos de corte quando submetidos a estresse calrico provou ser eficiente na reduo dos impactos sobre o desempenho e a qualidade de carcaa das aves (TATLI SEVEN et al., 2008; TATLI SEVEN et al., 2009). De maneira geral, a aplicao da prpolis na avicultura, devido as suas caractersticas benficas que podem auxiliar na manuteno da integridade do trato intestinal, funcionando como um alimento nutracutico, proporciona s aves sensao de bem estar, reduzindo problemas que afetaro sua sade e melhorando seu desempenho produtivo. A extrao da prpolis faz parte da apicultura que tem demonstrado ser uma excelente alternativa para complementao de renda, pois sua atividade, normalmente, no compete em recursos de produo com as atividades j existentes na empresa rural, sendo essencialmente ecolgica, comprovadamente rentvel e economicamente sustentvel (INABA & PASIN, 1998). Segundo WIESE (2005), uma nica colmia pode produzir por ano entre 50 a 400g de prpolis dependendo da raa da abelha, das condies geogrficas e clima da regio, assim como do manejo do apicultor. Apesar de uma produo modesta alcanada pelo pequeno produtor, a prpolis pode ser uma alternativa de renda importante devido ao seu alto valor comercial, podendo ser desenvolvida de maneira consorciada com outras culturas, ampliando efetivamente os ganhos na propriedade e no ecossistema local. Diante deste cenrio surgiu a proposta deste trabalho, que est dividido em cinco captulos. No primeiro captulo faz-se a apresentao da problemtica atravs das consideraes e reviso de literatura pertinente ao trabalho.

O segundo captulo intitulado Aspectos produtivos, qualitativos e fisiolgicos de poedeiras semipesadas suplementadas com prpolis tem por objetivo avaliar a influncia de diferentes nveis de prpolis na dieta de poedeiras semipesadas sobre as caractersticas de temperatura superficial, desempenho e qualidade dos ovos. O terceiro captulo intitulado Morfometria e avaliao por microscopia ptica do trato digestrio de poedeiras suplementadas com prpolis tem por objetivo estudar os efeitos de diferentes nveis de adio de prpolis sobre os ndices histolgicos e morfolgicos da mucosa intestinal de poedeiras s 55 semanas de idade. O quarto captulo intitulado Qualidade de ovos de poedeiras semipesadas suplementadas com prpolis e estocados em diferentes condies trmicas teve por objetivo avaliar os efeitos da temperatura e do tempo de armazenamento sobre a qualidade dos ovos de poedeiras comerciais alimentadas com diferentes nveis de prpolis. E no quinto captulo, so apresentadas as consideraes finais do trabalho como um todo, enfatizando as implicaes do uso da prpolis em cada um dos parmetros abordados nos referidos captulos. 2 OBJETIVOS 2.1 Objetivo Geral Avaliar os efeitos da utilizao de prpolis em dietas de poedeiras semi pesadas sobre o desempenho e a qualidade de ovos, alteraes no trato digestrio e temperatura superficial das aves. 2.2 Objetivos Especficos Avaliar os nveis de produo de ovos; Avaliar as caractersticas de temperatura superficial de poedeiras alimentadas com diferentes nveis de prpolis; Verificar a sade intestinal das aves nos diferentes tratamentos; Analisar se os diferentes tratamentos interferem na qualidade dos ovos e em seu tempo de estocagem.

3 REVISO DE LITERATURA

3.1 A Prpolis

Prpolis o nome genrico para a substncia resinosa de composio complexa coletada pelas abelhas, a partir dos mais heterogneos tipos de plantas. A palavra prpolis derivada do grego em que pro significa em defesa de e polis cidade, isto , em defesa da cidade ou da colmia (MARCUCCI, 1996; CASTALDO & CAPASSO, 2002; PRADO, 2008). ALENCAR (2009) citando o regulamento tcnico para fixao de identidade e qualidade Instruo normativa n. 3, de 19 de janeiro de 2001, afirmou que se entende por prpolis o produto oriundo de substncias resinosas, gomosas e balsmicas, colhidas pelas abelhas, de brotos, flores e exsudados de plantas, nas quais as abelhas acrescentam secrees salivares, cera e plen para elaborao final do produto. Segundo DE CASTRO (2001) prpolis uma resina, proveniente de rvores, coletada pelas abelhas e considerada um antibitico natural, sem efeitos colaterais graves, em comparao aos tratamentos sintticos, e apresenta diversas propriedades farmacolgicas. Outra definio da prpolis apresentada por ALENCAR (2009), como sendo uma substncia no txica, coletada de diversas partes das plantas por abelhas africanizadas Apis mellifera, muito utilizada por civilizaes chinesa, tibetana, egpcia e greco-romana. Na antiguidade era utilizada no antigo Egito para embalsamar os mortos, na confeco de violinos de qualidade e ainda utilizada na segunda guerra mundial em clnicas soviticas para cura dos pacientes. De acordo com SFORCIN (2007) as abelhas utilizam a prpolis para selar furos em suas colmias, alisar as paredes internas e para cobrir as carcaas de intrusos, que morreram dentro da colmia a fim de evitar sua decomposio. A prpolis protege a colnia de doenas devido a sua eficcia anti-sptica e propriedades antimicrobianas (SALATINO et al., 2005).

A cor da prpolis varia do verde e do vermelho ao castanho escuro, apresentando um cheiro caracterstico e propriedades adesivas, pois interage

fortemente com leos e protenas da pele (BURDOCK, 1998). Em geral, a prpolis in natura composta por 30% de cera, 50% resina e blsamo de vegetais, 10% de leos essenciais e aromticos, 5% de plen e 5% de outras substncias, inlcuindo resduos orgnicos (PRADO, 2008). Como relata PEA (2008) as propriedades biolgicas e farmacolgicas mais estudadas em relao a prpolis so aquelas que a descrevem como agente antiinflamatrio, antioxidante, anti-sptico e antineoplsico. O Brasil possui uma riqueza de biodiversidade de vegetao, resultando em muitos tipos de prpolis dependendo da localizao geogrfica, podendo-se ento encontrar caractersticas variadas e distintas. O pas exporta setenta toneladas de prpolis por ano, um mercado que movimenta 25 milhes de dlares, e seus principais compradores so o Japo, Estados Unidos, Alemanha e China (ALENCAR, 2009). Com o aumento na produo da prpolis nos ltimos dez anos, o Brasil se tornou o terceiro maior produtor mundial (INOUE et al., 2007). J que a apicultura tem se desenvolvido bastante nas ltimas dcadas, no somente visando produo de mel, mas tambm produo de prpolis, plen e gelia real (SANTOS et al., 2003), a demanda crescente por prpolis, tanto no mercado externo como interno, tem motivado os apicultores a diversificarem suas atividades. Sua composio varia de acordo com o local de coleta e da espcie vegetal utilizada pelas abelhas em sua produo. Alguns componentes esto presentes em todas as amostras, enquanto outros ocorrem somente em prpolis colhidas de espcies particulares de plantas. Pelo menos 200 componentes diferentes j foram identificados em amostras de prpolis de origens diversas, dentre esses, cidos graxos e fenlicos, steres, steres fenlicos, flavonides (flavonas, flavanonas, flavonis, dihidroflavonis, entre outros), terpenos, aldedos e alcois aromticos, sesquiterpenos e naftaleno (MARCUCCI, 1996). No entanto, os flavonides so os compostos fenlicos mais comuns, distribudos praticamente em todas as partes das plantas e no podem ser

sintetizados por humanos e animais. Os flavonides encontrados nos animais so provenientes das plantas que os alimentam ao invs de ser sintetizados in situ (Neves, 2004). Cerca de 4.000 substncias diferentes j foram listadas como flavonides, entre elas apigenina, quercetina, hesperetina, rutina, luteolina, genisteina, daidzeina, antocianidina, kampferol, entre outros. A presena e a concentrao destes compostos so utilizadas como ndice de qualificao de amostras de prpolis (LU et al., 2004). Os flavonides atuam em diversos processos fisiolgicos, auxiliando na absoro e na ao de vitaminas, atuando nos processos de cicatrizao como antioxidantes, alm de apresentarem atividade antimicrobiana e moduladora do sistema imune (WILLIAMS et al., 2004). SIKKEMA et al. (1995) sugerem que o principal mecanismo de ao destes componentes sua capacidade de aumentar a permeabilidade da parede celular do micrbio ou a desativao enzimtica das clulas. No entanto, apesar dos flavonides serem os componentes da prpolis mais extensivamente estudados, no so eles os nicos responsveis pelas suas propriedades farmacolgicas. Diversos outros compostos tm sido relacionados com as propriedades medicinais da prpolis (AWALE et al., 2005). Nos ltimos anos, a literatura cientfica vem relatando as propriedades farmacolgicas da prpolis de interesse mdico e farmacutico tais como atividades bacteriosttica e bactericida, fungisttica e fungicida, virusttica e virucida, antioxidante, antitumoral, cicatrizante, reparadora tissular, anestsica, contra parasitas intestinais e sanguneos, antimutagnica e contra doenas cardiovasculares e respiratrias (FONTANA et al., 2004; GARCIA et al., 2004; POTIN et al., 2008).

3.2

Produo de Ovos

A cadeia produtiva de ovos no Brasil se caracteriza pela produo para consumo in natura e industrializados. A produo feita predominantemente no

sistema de criao em gaiolas, com avirios de cria e recria separados dos avirios de produo. A maioria composta por produtores independentes de pequeno e mdio porte, que preparam a rao na propriedade e trabalham com avirios abertos, tradicionais, existindo entretanto, grandes produtores que esto partindo para a adequao climtica e automao das instalaes (UNIO BRASILEIRA DE AVICULTURA, 2008). A produo de ovos foi crescente em todos os meses do ano de 2010, alcanando 622.499.000 milhes de dzias no 3 trimestre, aumento esse de 1,8% em relao ao trimestre anterior e de 4% em relao ao mesmo trimestre de 2009. Entre os meses de janeiro e setembro de 2010 a produo chegou a 1,839 bilhes de dzias, sendo 4,5% superior comparado ao mesmo perodo de 2009 (IBGE, 2010). Segundo a Unio Brasileira de Avicultura (2008), boa parte da produo comercializada no mercado interno, tendo o setor se adequado nos ltimos anos para incrementar as exportaes. Entretanto, para atender as exigncias do consumidor nacional e do mercado internacional existe a necessidade da contnua implementao de programas que garantam elevado padro de qualidade dos ovos de mesa e dos produtos a base de ovo. Considerando que a atividade de produo de ovos tem, nos ltimos anos, apresentado grande evoluo em todos os seus segmentos, tornando-se cada vez mais competitiva, importante estar atento, pois necessrio empregar todos os recursos disponveis, para assim melhorar a produo (BARBOSA FILHO et al.., 2007). De acordo com MENEZES et al. (2009), as linhagens de poedeiras modernas diferenciam-se das antigas quanto ao temperamento, potencial produtivo, consumo de rao, ganho de peso, viabilidade e tipo dos ovos. Tambm pelo fato de que as aves, a cada ano, tornam-se mais precoces, com adiantamento da idade em que atingem a maturidade sexual, o que constitui um desafio para os tcnicos avcolas estimular o consumo de rao e o ganho de peso das frangas em cria e recria, principalmente em linhagens de baixo consumo de rao.

Para SARCINELLI et al. (2007), a composio do ovo depende de vrios fatores tais como idade, tamanho, alimentao, estado sanitrio das aves, sendo importante ressaltar que a idade influencia apenas no tamanho do ovo e no na composio do mesmo. O ovo considerado alimento rico em protena e com baixo teor de gordura, tendo na poro lipdica maiores concentraes de cidos graxos insaturados, pesando em mdia 60 gramas, onde encontrado apenas 1,5 g de gordura saturada. Segundo EMBRAPA (2004), alguns fatores que influenciam a produo dos ovos so o padro gentico e idade das aves na fase madura de postura,

resistncia a doenas, controle de iluminao, condies ambientais, avirios bem dimensionados, construdos com material adequado e com facilidades indispensveis como suprimento de gua e rao, ventilao, instalao eltrica e esgoto, alm de alimentao balanceada. Para produzir ovos de boa qualidade, j que este apresenta barreiras naturais para prevenir que bactrias penetrem em seu interior e se multipliquem, a casca considerada sua embalagem, que independente da cor, deve estar sempre limpa, ntegra e ainda sem deformaes, pois cascas resistentes protegem seu contedo (EMBRAPA, 2004). Segundo SOUZA et al. (2005), a formao da casca se d ativamente durante as ltimas 15 horas de permanncia do ovo no tero. A casca composta predominantemente por carbonato de clcio (98%) e uma matriz de glicoprotena (2%). A parte cristalina da casca consiste de colunas de materiais embutidos na membrana externa da casca. Essas colunas esto separadas por poros que se estendem desde o exterior do ovo at as membranas da casca, permitindo que o embrio realize trocas gasosas. Para SARCINELLI et al. (2007) a casca tem, em mdia, 5,6g de matria inorgnica, sendo que a maior parte carbonato de clcio (98%). O restante da matria orgnica composto por carbonato de magnsio e fosfato triclcico. A matria orgnica, bastante reduzida, apresenta-se na forma de protenas e gua. A colorao da casca do ovo uma caracterstica gentica, determinada pela linhagem da ave, sua cor varia do branco ao marrom escuro. No entanto, a cor da

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casca no apresenta relao com a colorao da gema, no havendo diferenas entre os ovos brancos e os vermelhos, ambos sendo igualmente ricos em protenas, vitaminas e sais minerais. A integridade da casca tem grande influncia na qualidade do ovo, sua espessura pode variar devido a vrios fatores, como a hereditariedade, j que algumas linhagens de aves produzem ovos com casca mais grossa que outras. Essas diferenas entre as aves, com relao qualidade da casca, so definidas pela capacidade das aves de utilizarem o clcio. Outro fator importante o clima, pois altas temperaturas reduzem a espessura da casca e os nveis de clcio ou bicarbonato de sdio do sangue so reduzidos, como resultado dos movimentos respiratrios mais acelerados, visto que as aves procuram, desta forma, controlar a temperatura corporal. Simultaneamente, o ambiente de temperatura elevada provoca diminuio no consumo de alimentos que, por sua vez, determina uma diminuio no consumo de clcio, fsforo e vitamina D3 (TRINDADE et al., 2007).

3.3

Caractersticas de Ambincia Trocas Trmicas

O desconforto trmico em aves de postura provoca uma srie de consequncias como a queda no consumo de rao, menor taxa de crescimento, maior consumo de gua, acelerao do ritmo cardaco, alterao da converso alimentar, queda na produo de ovos e maior incidncia de ovos com casca mole (BARBOSA FILHO et al., 2007). Os principais parmetros ambientais que afetam o desempenho so a temperatura ambiente, a umidade relativa e a velocidade do ar. Nas aves, o calor dissipado atravs da evaporao respiratria, evaporao cutnea e perda de calor sensvel atravs dos processos de radiao, conveco e conduo (OPHIR et al., 2002). A perda de calor por evaporao atravs da respirao ofegante associada com a perda de gua corporal, portanto, a perda de gua em excesso poder provocar desidratao, seguida de reduo de perda de calor por esta via (YAHAV, 2008).

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Segundo a UNIO BRASILEIRA DE AVICULTURA (2008), as condies ambientais dentro dos avirios devem ser manejadas para garantir o bem estar das aves e do trabalhador. A temperatura e nvel de ventilao do avirio devem ser apropriados ao sistema de criao, idade, peso e estado fisiolgico das aves, permitindo a manuteno da temperatura corporal sem dificuldades. Os nveis de odores, gases e poeiras devem ser mnimos, a fim de no causar desconforto para as aves e o trabalhador. Todo o avirio com ventilao mecnica deve ser desenhado e manejado para evitar uma elevao de temperatura acima da zona de conforto trmico. Para MORAES et al.. (1999), estudos direcionados para o conforto trmico de instalaes avcolas apontam para o fato de que uma das principais causas do estresse calrico das aves durante o vero advm da radiao solar, a qual, durante o dia, contribui com parcela substancial de calor, que penetra na construo. medida que a temperatura ambiente aumenta, a eficincia da perda de calor sensvel diminui, em razo do menor gradiente de temperatura entre a pele do animal e a do ambiente (SOUZA et al., 2007). Portanto, a capacidade de perda de calor est relacionada com o gradiente trmico entre a temperatura superficial e a do meio (SOUZA et al., 2005). A diferena entre a superfcie e a temperatura ambiente a principal fora motriz para a perda de calor sensvel. A adoo da radiometria como tecnologia de imagem trmica infravermelha nos sistemas biolgicos permitiu o registro da temperatura da superfcie e a avaliao da contribuio do calor sensvel na perda de equilbrio energtico do corpo (YAHAV, 2008). A termografia por infravermelho reconhece mudanas na temperatura da superfcie do corpo todo muito rapidamente e, portanto, til para determinar a temperatura superficial. Alm disso, pela introduo de um sistema de tratamento de imagem, possvel obter a temperatura mdia da pele de regies especficas (CHOI, 1997).

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CAPTULO 2 (Redigido de acordo com as normas da Brazilian Journal of Poultry Science)

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ASPECTOS PRODUTIVOS, QUALITATIVOS E FISIOLGICOS DE POEDEIRAS SEMIPESADAS SUPLEMENTADAS COM PRPOLIS

RESUMO

Este trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar a influncia de diferentes nveis de prpolis na dieta de poedeiras semipesadas sobre a temperatura superficial, caracterticas de desempenho e qualidade dos ovos, sendo realizado nas instalaes experimentais da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Grande Dourados (UFGD). Para isto foram utilizadas 120 poedeiras vermelhas, s 55 semanas de idade. O delineamento experimental adotado foi inteiramente casualizado com quatro tratamentos (0, 1, 2 e 3% de prpolis in natura na dieta) e trs repeties de 10 aves cada. Foram avaliadas caractersticas de desempenho (consumo de rao, converso alimentar para produo de ovos, converso alimentar para produo de massa de ovos e mortalidade), qualidade de ovos (gravidade especfica, porcentagem de casca, composio mineral da casca, peso e colorao de gema e anlise sensorial) e temperatura superficial das aves. As variveis de desempenho foram influenciadas pelos tratamentos para a produo de ovos, converso alimentar para a produo e massa de ovos e consumo de rao. A temperatura superficial no foi influenciada por diferentes nveis de incluso de prpolis na dieta. Para a avaliao de qualidade dos ovos, somente a colorao da gema foi influenciada (p<0,05) pelos tratamentos para as variveis de luminosidade, teor de vermelho e amarelo. A anlise sensorial mostrou que os avaliadores notaram moderada diferena entre eles. Portanto conclui-se que a prpolis no melhora as caractersticas de desempenho e piora a qualidade interna dos ovos.

Palavras chave: avicultura, produo de ovos, termografia infravermelha, troca trmica.

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PRODUCTIVE, QUALITATIVE AND PHYSIOLOGICAL ASPECTS IN LAYING HENS FED SUPPLEMENTAL PROPOLIS

ABSTRACT This research aimed to evaluate the influence of different levels of propolis in Isa Brown strain laying hens diet on their surface temperature, performance and egg quality. The experiment was carried out on the facilities of College of Agriculture Science at the Federal University of Grande Dourados (UFGD) in Dourados-MS. A total of 120 Isa Brown strain laying hens at 55 weeks of age were used in this study. A completely randomized experimental design with four treatments (0, 1, 2 e 3% in natura propolis) with three replications with 10 birds each was applied. The parameters, such as laying hens performance (feed intake, feed conversion for egg production, feed conversion for egg mass and mortality), egg quality (specific gravity, shell percentage, eggshell mineral composition, yolk color and weight and sensory analysis) and birds surface temperature were assessed. The hens performance parameters were statically significant such egg production, feed conversion for egg production and egg mass and feed intake. As regards the egg quality evaluation, the yolk color was the only parameter statically significant (p<0.05) considering the eggs brightness and red and yellow concentration. The sensory analysis showed that evaluators noted a slight difference among treatments. It was conclude that propolis does not improve the hens performance and worsens the internal egg quality.

Key words: poultry, egg production, infrared thermography, heat transfer

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INTRODUO

Vrios estudos relacionados ao bem-estar dos animais tm sido realizados, tanto por razes de ordem tica como pelo reconhecimento dos custos mais elevados que essas mudanas implicam para produtores e consumidores. Anlises de parmetros produtivos e da qualidade dos ovos so exemplos de algumas medidas adotadas para determinao dos efeitos do ambiente de criao sobre o desempenho e o bem-estar das aves (Alves et al., 2007). Segundo Rivero (1989), estudos direcionados para o conforto trmico de instalaes avcolas apontam para o fato de que uma das principais causas do estresse trmico das aves durante o vero advm da radiao solar, a qual, durante o dia, contribui com parcela substancial de calor, que penetra na construo; assim, a principal proteo contra a insolao direta, com o objetivo de amenizar a situao de desconforto trmico ambiental das aves, pode ser conseguida com utilizao de cobertura adequada. Relacionam-se alimentao novos conceitos sobre ambincia, economia, marketing e mercado consumidor, dentre outros, o que prope objetivos diferenciados para a alimentao das aves em granjas de postura comercial (Garcia et al., 2002). Portanto, torna-se importante pesquisar por aditivos que atuem melhorando a sade dos animais, a disponibilidade e a absoro dos nutrientes das raes e, desta forma, atuem reduzindo os impactos ambientais e o custo de produo alm de proporcionarem benefcios ao desempenho animal (Nunes, 2007). Uma alternativa pode ser a prpolis que uma mistura complexa, formada por material resinoso e balsmico coletado pelas abelhas dos ramos, flor, plen, brotos e exudatos de rvores, alm de secrees salivares e enzimas (Franco et al., 2000). A prpolis tem sido estudada e reconhecida por propriedades farmacolgicas, como antimicrobiana, antioxidante, antiinflamatria,

imunomodulatria, hipotensiva, cicatrizante, anestsica e anticarcinognica (Nieva Moreno et al., 1999).

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O uso da prpolis, especificamente o seu composto CAPE (Caffeic Acid Phenothyl Ester), tem sido empregado em pesquisas sobre estresse trmico. Em estudos realizados por Chen et al. (2009), os autores relataram a capacidade do CAPE em melhorar a tolerncia das clulas mononucleares hipertermia, devido aos seus efeitos antioxidantes, mitigando o impacto do estresse trmico sobre o organismo. Os efeitos deletrios do estresse trmico na fisiologia celular iniciam-se com o aumento da peroxidao lipdica como conseqncia do aumento da gerao de radicais livres, levando ao aumento da formao de espcies reativas do oxignio (ROS), induzindo o estresse oxidativo nas clulas (Altan et al.., 2003). O aumento da peroxidao lipdica diminui a taxa de antioxidantes disponveis no organismo (Tatli Seven et al.., 2008). As propriedades antioxidantes dos flavonides como o CAPE, presente na prpolis, so conhecidas por atuarem nos processos de oxidao das membranas celulares, bloqueando a produo de oxignio reativo (Hosnuter et al.., 2004). O presente trabalho tem como objetivo avaliar o efeito dos diferentes nveis da prpolis sobre a temperatura superficial, desempenho e qualidade dos ovos de poedeiras semipesadas.

MATERIAL E MTODOS

O trabalho foi realizado no Avirio Experimental de Postura da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Grande Dourados - FCA/UFGD, sendo realizado durante o ms de abril, com 120 poedeiras vermelhas da linhagem Isa Brown com 55 semanas de idade. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado com 4 tratamentos (porcentagem de prpolis na dieta 0, 1, 2 e 3% de prpolis in natura) e 3 repeties de 10 aves cada. O manejo utilizado foi o recomendado pelo manual da linhagem (ISA BROWN, 2006) e as aves receberam 17 horas de luz

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(natural e artificial), gua e rao ad libitum, e a coleta de ovos ocorreu diariamente, uma vez ao dia. Foram avaliadas as caractersticas de desempenho (consumo de rao, converso alimentar para produo de ovos, converso alimentar para produo de massa de ovos e mortalidade), temperatura superficial das aves e qualidade de ovos (gravidade especfica, porcentagem e composio mineral da casca, peso e colorao da gema crua e anlise sensorial dos ovos). Para a avaliao da temperatura superficial foram utilizadas todas as aves experimentais, sendo que as imagens termogrficas foram realizadas durante todo o perodo experimental uma vez por semana. As avaliaes de desempenho e qualidade de ovos foram realizadas semanalmente. Para a realizao do trabalho foram utilizados quatro tratamentos sendo eles: T1 = controle, T2 = adio de 1% de prpolis, T3 = 2% de prpolis e T4 = 3% de prpolis. As raes utilizadas eram isoproticas (16,50% de PB) e isocalricas (2750 kcal de EM kg-1), qual a prpolis era integrada em misturador do tipo Y. Cada tratamento foi dividido em trs repeties com 10 aves cada um. As raes foram produzidas na fbrica de raes da Faculdade de Cincias Agrrias UFGD (Tabela 1) e a prpolis adquirida de uma empresa comercial. Na Tabela 2 encontra-se a composio bromatolgica da prpolis.

Tabela 1 Composio calculada da rao experimental Composio Calculada da Rao Energia Metabolizvel (kcal/kg) Protena Bruta (%) Clcio (%) Fsforo disponvel (%) Fibra Bruta (%) Metionina (%) Aminoacidos sulfurados (%) Lisina (%) 2750 16,50 4,00 0,54 2,53 0,30 0,53 0,80

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Tabela 2 Composio bromatolgica da prpolis. Anlises Especificaes Massa mecnica Max. 40% Cera Max. de 25% Slidos solveis Mn. de 35 % Atividade de Oxidao Max. de 22 seg. Flavonides expressos em Mn. de 0,5% quercetina Minerais Max. de 5% Umidade Max. de 8% Fonte: Empresa Natucentro, 2010. Resultados 39,80% 2,59% 46,60% 16 seg. 3,34% 3,77% 7,55%

2.1

Ambincia Trmica do Alojamento

A temperatura ambiente (Ta) e umidade relativa (UR) foram registradas duas vezes por semana no perodo da manh (07h00min) e no perodo da tarde (13h00min), para avaliao das condies trmicas do alojamento. A luminosidade foi medida com um luxmetro digital uma vez por semana. Este registro teve como principal objetivo avaliar se a intensidade ou falta de luminosidade em algum ponto do avirio influenciou a produo das aves. Imagens termogrficas do telhado do avirio foram registradas

semanalmente com auxlio de cmera termogrfica infravermelho da marca Testo para avaliar o efeito de radiao solar na telha e sua possvel influncia na temperatura das aves. As imagens foram analisadas no programa Testo, marcando-se 31 pontos na imagem da superfcie do telhado para avaliao da temperatura mdia. O ndice de emissividade utilizado foi de 0,92 conforme metodologia indicada por Ns et al. (2001). Foram registradas imagens termogrficas das aves, para avaliao da sua temperatura superficial uma vez por semana duas vezes ao dia, uma no perodo da manh (07h00min) e outra no perodo da tarde (13h00min), com o intuito de avaliar se a temperatura pode interferir na produo e mantena das aves (calor metablico). As imagens marcando-se 10 pontos em reas com pena (pescoo e peito) e sem pena (crista, barbela e olhos), utilizando como ndice de emissividade 0,94 para reas com pena e 0,95 para reas sem pena, a uma distncia de 0,72 cm.

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2.2 Desempenho das Aves Os dados de desempenho foram calculados semanalmente (consumo de rao, converso alimentar para produo de ovos, converso alimentar para produo de massa de ovos e mortalidade). A produo de ovos foi registrada juntamente com o peso dos ovos para calcular a produo de massa de ovos. As converses alimentares (CA) foram calculadas dividindo-se o consumo de rao (CR) pela produo de ovos (PO) ou pela massa destes (PMO).

2.3 Qualidade de Ovos

Foram avaliadas a produo diria de ovos, o peso mdio dos ovos, gravidade especfica, porcentagem de casca, composio mineral da casca e peso e a colorao da gema. Para obteno da gravidade especfica foram elaboradas seis solues salinas com densidades de 1,060, 1,070, 1,080, 1,090, 1,100 e 1,110 e colocadas em ordem crescente em recipientes identificados, temperatura de 15C. Primeiramente os ovos foram colocados no recipiente de 1,060 e assim sucessivamente, at que os ovos flutuassem na soluo (Castell et al., 1989). A gravidade especfica do ovo foi representada pela soluo de menor densidade onde este emergiu. A porcentagem de casca foi avaliada considerando-se o peso total do ovo e o peso da casca, o qual foi medido aps as cascas serem secas em estufa a 60C por 3 dias, conforme metodologia descrita por Castell et al. (1989). A colorao da gema foi determinada com o auxlio de um colormetro Minolta modelo CR 410, avaliando-se os parmetros de L*(luminosidade), a* (vermelho) e b* (amarelo), efetuando-se assim a leitura em trs diferentes pontos da superfcie da gema.

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2.4

Anlise Sensorial

A anlise sensorial foi realizada no Laboratrio de Anlise Sensorial da Faculdade de Cincia e Tecnologia de Alimentos da Universidade Federal da Grande Dourados FACET/UFGD. Utilizaram-se dois ovos por tratamento, os quais foram cozidos por 10 minutos em gua fervente. As amostras foram oferecidas em metades de ovo cozido para que fossem avaliados por 15 avaliadores no treinados. Os ovos foram identificados por nmeros, aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle, no qual os avaliadores atribuem escores de variao em relao amostra controle, conforme metodologia descrita por ABNT (1995). Estes ovos foram coletados no perodo da manh (9h00min) e a avaliao foi realizada no perodo da tarde (13h00min) do mesmo dia.

2.5

Anlise Estatstica

A anlise estatstica foi realizada com o auxlio do programa computacional SAS Institute (1996). Assim, foram submetidos anlise de varincia e as mdias comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05). Os dados de avaliao sensorial foram avaliados por anlise de comparao de mdias para dados no paramtricos pelo teste de Kruskall-Wallis utilizando-se o mesmo programa e nvel significncia.

RESULTADOS E DISCUSSO

3.1 Ambiente de Alojamento

A umidade relativa do ar mdia no avirio durante o perodo de observao foi de 77% e a temperatura mdia foi de 27,9 4,9C (Tabela 3), e conforme

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indicam Ns et al. (2010) esta temperatura determinante nos valores de temperatura superficial das aves. Os valores de umidade diminuram com o aumento da temperatura nas duas primeiras semanas do experimento (Tabela 3). Este comportamento esteve dentro do esperado, uma vez que geralmente com o aumento da temperatura do ar ao longo do dia, ocorre diferena entre a temperatura de bulbo seco e de bulbo mido, reduzindo os valores de umidade relativa do ar (Ns et al., 2001). Apesar da variao dos valores mdios da umidade e da temperatura ao longo das semanas, estes no interferiram (p>0,05) nas variveis analisadas neste trabalho.

Tabela 3 Temperatura e umidade do avirio durante o perodo experimental.

Semana 1 2 3 4 Mdia

Umidade (%) 74,95 64,90 84,10 84,45 77

Temperatura (oC) 31,25 33,80 23,50 23,00 27,9

Na Figura 1 pode-se observar que a temperatura mdia do telhado foi de 56C e uma vez que o valor mdio da temperatura do ar na instalao foi 27,9C, observa-se uma diferena de 28,1C entre as duas temperaturas mdias. De acordo com Czarick (2006) estruturas de metal do telhado de avirios podem facilmente aquecer a temperaturas acima de 66C durante o vero em regies de alta latitude. Como relatado por Ns et al. (2001) o telhado o elemento construtivo mais significativo em uma instalao avcola para o controle da radiao solar incidente. No estudo realizado por Sarmento et al. (2005), os autores obtiveram valores mdios de 34 e 41,4C para a temperatura mdia da superfcie interna de telhados de galpes de frango de corte com e sem pintura reflexiva

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respectivamente. O valor mdio da temperatura do telhado encontrado foi superior a estes obtidos pelos referidos autores. Esta diferena pode estar atrelada radiao solar incidente, temperatura externa e outras variveis climticas que no foram monitoradas aqui neste trabalho. No entanto, estudos demonstram que apesar do uso de pinturas reflexivas e tcnicas de asperso sobre o telhado diminurem a sua carga trmica radiante e reduo da temperatura de superfcie, ainda assim no influenciaram os ndices de conforto trmico das instalaes, mensurados pela associao temperatura e umidade (Furtado et al., 2003; Sarmento et al., 2005 e Trindade et al., 2007) o que acabou no influenciando nos ndices produtivos, assim como neste trabalho.

Figura 1 Imagem registrada por cmera de termografia infravermelho, com a marcao dos pontos de coleta da temperatura do telhado do galpo experimental.

A luminosidade mensurada no avirio experimental foi de 91 lx, apresentando-se dentro do recomendado, onde considerado que o fluxo luminoso em galpes para aves de postura no deve ser inferior a 10 lx conforme IESNA (2001). Dessa forma, no presente estudo, a luminosidade no interferiu (p>0,05) nas variveis analisadas. Deve-se ressaltar que importante manter um bom programa de iluminao para que se proporcione mxima produo com o mnimo consumo de rao e gasto de energia eltrica (Freitas et al., 2010). Sabe-se que a iluminao

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artificial para aves reprodutoras e de postura comercial uma das mais poderosas ferramentas de manejo disponveis para o produtor avcola e a taxa de postura pode ser influenciada e seu intervalo alterado, melhorando a qualidade da casca, o tamanho do ovo e a maximizao da eficincia alimentar pelo fornecimento apropriado de um regime luminoso (Etches, 1996).

3.2 Temperatura Superficial das Aves

Os valores de temperatura superficial (C) das aves obtidos neste experimento e representados na Tabela 4 no foram influenciados pela adio de prpolis dieta das aves (p>0,05), mostrando que a prpolis no interferiu na produo de calor metablico das poedeiras. Sabe-se que a manuteno da temperatura corporal determinada pelo equilbrio entre o ganho e a perda de calor (Souza et al., 2008).

Tabela 4 Temperatura Superficial (Ts) mdia das aves durante o perodo experimental. Tratamento (Proplis, %) T1(controle) T2 (adio de 1% de prpolis) T3 (adio de 2% de prpolis) T4 (adio de 3% de prpolis) Mdia desvio padro. Ts mdia (C) 32,15 1,96 31,79 2,47 32,15 2,53 31,66 3,01

Avaliando-se a temperatura superficial mdia das reas com pena e sem pena (Tabela 5) observa-se que estes diferem dos resultados obtidos por Ns et al. (2010), quando analisaram as mesmas variveis em frango de corte, segundo os autores, os valores encontrados em rea com pena foram entre 31,8 e 39,2 C no perodo da manh, 31,6 e 39,2 C no perodo da tarde; enquanto nas reas sem pena 31,9 e 39,2 C no perodo da manh, e 31,5 e 39,0 C no perodo da tarde.

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Tabela 5 Temperatura superficial (Ts) mdia de aves com pena (pescoo e peito) e sem pena (crista, barbela e olhos) em dois perodos (manh e tarde) em galinhas suplementadas com prpolis. Ts (C) Perodo Manh Tarde Manh Tarde rea Com pena Com pena Sem pena Sem pena Com adio de prpolis 27,95 3,46 28,322,68 35,77 1,89 36,1321,65 Sem adio de prpolis 28,54 2,54 29,482,39 35,76 1,38 36,281,47

As temperaturas superficiais das poedeiras foram menores que aquelas encontradas em frangos de corte, provavelmente, por que estas possuem metabolismo menos acelerado e pela rao oferecida ter menor densidade nutricional que a rao oferecida para frangos de corte. Outro fator que deve ser levado em considerao que galinhas poedeiras apresentam crista e barbela mais desenvolvidas, portanto dissipam de forma mais eficaz o calor. Em um trabalho realizado por Mustaf et al. (2008) avaliando a temperatura de superfcie de reas sem pena, (a cabea), e com penas, (regio dorsal) de poedeiras submetidas a quatro diferentes temperaturas, no obtiveram diferena significativa entre as temperaturas das reas corporais em temperatura do ar inferior a 33C. No entanto, em temperaturas ambiente acima de 40 C, os autores obtiveram valores mdios significativos de 34,48 e 36,6 para regio com e sem pena respectivamente.

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(a)

(b)

Figura 2 Imagem termogrfica das aves (a) e marcao dos pontos de coleta da temperatura superficial (b).

A dificuldade em comparar a temperatura das reas superficiais das espcies est atrelada s diferentes condies trmicas ambientais a que so submetidas, uma vez que as perdas de calor sensvel so tambm influenciadas pelo gradiente trmico existente entre o animal e o meio no qual est inserido.

3.3 Desempenho das Aves Analisando a Tabela 6, observa-se que o consumo de rao (CR) foi influenciado pelos tratamentos (p<0,05), com diminuio para os tratamentos com adio de 2 e 3% de prpolis. Essa queda no consumo quando houve aumento na adio de prpolis na rao pode ser atribudo pelo fato de a prpolis modificar o odor e sabor da rao. Porm, com a diminuio no consumo, a produo de ovos tambm foi afetada, j que a menor produo de ovos foi observada para o tratamento com maior incluso de prpolis. Estes valores diferem e so superiores aos encontrados por Garcia et al. (2002) quando analisaram a incluso de diferentes nveis de cantaxantina na dieta de poedeiras e Faria et al. (2000) quando analisou as mesmas variveis com suplementao de farinha de casca de ostras, faz-se estas comparaes, pois a cantaxantina e a farinha de casca de ostras tambm modificam o odor e sabor da rao. De maneira geral quanto ao uso da prpolis nas suas diferentes concentraes sobre o consumo de rao, os achados da literatura apontam que a

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concentrao de prpolis a 50 mg kg-1 no difere quando comparada ao grupo controle tanto em experimentos com frangos de corte (Shalmany & Shivazad, 2006) quanto naqueles com poedeiras (Galal et al., 2008). No entanto, em Tatli Seven et al. (2008) apesar do consumo de rao de frangos de corte submetidos a estresse trmico e suplementados com 3 g de extrato de prpolis por kg ter sido similar ao consumo dos frangos em temperatura termoneutra, este achado demonstrou que a prpolis foi eficiente a partir desta concentrao no combate aos efeitos do estresse trmico sobre o consumo de rao. Os dados obtidos avaliando-se o desempenho das aves deste experimento diferem dos encontrados por Biavatti et al. (2003) quando utilizaram o extrato de prpolis como aditivo para frangos de corte, estes autores relataram que o poder antimicrobiano da prpolis melhorou a absoro dos nutrientes, o que pode ter ocorrido neste trabalho. A incluso de prpolis dieta influenciou a produo de ovos (PR), como observado na Tabela 6, este parmetro apresentou-se de forma inversamente proporcional porcentagem de prpolis adicionada dieta, sendo que o nvel de 3% de prpolis foi aquele no qual as poedeiras apresentaram o menor valor produtivo. Portanto, a prpolis no melhorou a produo dos ovos. Em um estudo realizado por Galal et al. (2008) ministrando 0, 50, 100 e 150 mg de proplis/kg a dieta de poedeiras de 46 a 54 semanas de idade, apesar dos autores no terem encontrado diferenas significativas entre os grupos para o ganho de peso, a produo de ovos foi significativamente maior nos grupos que receberam 100 e 150 mg de prpolis. Tambm como relatado por Bonomi et al. (1976) trabalhando com poedeiras de 22 semanas de idade que receberam 0, 10, 20 e 30 mg de prpolis/kg na dieta, a produo de ovos tambm foi 6% maior no grupo que recebeu 30 mg quando comparado ao grupo controle. Apesar dos dois trabalhos citados divergirem quanto s concentraes administradas s dietas, em ambos, as maiores concentraes apresentaram os melhores resultados quanto produo de ovos, diferente do encontrado neste estudo.

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Tabela 6 Produo de ovos (PR), converso alimentar para a produo de massa de ovos (CAPMO), converso alimentar para a produo de ovos (CAPO) e consumo de rao (CR) por ave nos diferentes tratamentos. Tratamento T1 PR (%) 89,90a CAPMO (g) 2, 160,24b CAPO (g) 94,750,01b CR/ave (g) 121,405,42a

T2 85,00ab 2, 310,20a 102,10,01a 124,306,57a T3 82,00ab 2, 290,32a 102,40,02a 114,607,71b T4 79,00b 2, 220,17b 93,650,01b 105,005,71b Valores seguidos de letras diferentes na mesma coluna diferem (p<0,05) significativamente. No entanto, em estudos com poedeiras em idades aproximadas ao deste experimento, como em Pedroso et al. (2001) quando avaliaram desempenho e qualidade de ovos de poedeiras de 50 a 66 semanas de idade suplementadas com Bacillus subtilis como agente probitico, os autores notaram que no houve melhora nos parmetros de desempenho das aves e relataram que talvez se obtenha melhores resultados realizando as mesmas avaliaes com aves mais jovens. Quanto converso alimentar para a produo de massa de ovos (CAPMO), apresentada tambm na Tabela 6, os tratamentos foram

estatisticamente significativos (p<0,05), onde os tratamentos controle e adio de 3% de prpolis foram aqueles que apresentaram melhores converses. Estes resultados diferem em parte dos encontrados por Galal et al. (2008), onde os dados de converso para a produo de massa de ovos foram melhores quanto maior a adio de prpolis dieta das poedeiras, ou seja a 100 e 150 mg, sendo que o pior resultado foi obtido no grupo controle. Ainda comparando resultados, apesar de diferentes aditivos, mas com o mesmo objetivo de melhorar a converso, no trabalho apresentado por Silva et al. (2003) quando avaliaram o efeito do alho (Allium sativum Linn.), probitico e virginiamicina antes, durante e aps o estresse induzido pela muda forada em poedeiras semipesadas, notaram que nos resultados obtidos antes da muda para a produo de ovos no foram afetados pelos tratamentos, mas o probitico

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melhorou a converso alimentar para a massa de ovos, o que no ocorreu no presente trabalho.

3.4 Caractersticas Externas dos Ovos

Analisando-se os valores da gravidade especfica (Tabela 7), estes no foram influenciados pelos tratamentos (p>0,05). No entanto, foram superiores aos obtidos por Silva et al. (2003) em trabalho avaliando o efeito do alho (Allium sativum Linn.), probitico e virginiamicina para poedeiras semipesadas. Isto pode ser explicado pelo fato de que as poedeiras utilizadas no trabalho de Silva et al. (2003) estavam em pico de produo e as utilizadas no presente trabalho estavam com 55 semanas de idade, uma vez que a idade das poedeiras tambm influencia na gravidade especfica dos ovos. Os tratamentos no influenciaram (p>0,05) a porcentagem da casca de ovos, como pode ser visto na Tabela 7. Estes valores tambm foram maiores que os obtidos por Fernandes et al. (2009) quando avaliaram a incluso de diferentes nveis de vitamina K na dieta de poedeiras da linhagem HyLine W36 as 67 semanas de idade. Tabela 7 Valores da gravidade especfica (GE) em gramas por cm3 dos ovos (g/cm3), porcentagem de casca (PC), teor de clcio (Ca) e fsforo (P) e peso dos ovos (PO) realizado durante o perodo experimental. Tratamento T1 T2 T3 GE (g/cm3
1,090,0072 1,090,0072 1,090,0084

PC %
9,64 9,72 9,88

Ca (mg/g)
378,25 4,72b 3850,82a 3771,83b

P(mg/g)
1,600,01b 1,620,01a 1,600,01b

PO (g)
66,06 3,31 65,73 3,75 64,65 4,32

1,090,0085 9,55 375,750,96b 1,600,01b 65,22 4,08 T4 Valores seguidos de letras diferentes na mesma coluna diferem (p<0,05) significativamente.

A comparao com poedeiras brancas foi utilizada, pois estas produzem casca mais fina que poedeiras vermelhas e, no entanto, esta caracterstica no foi

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influenciada pela idade das poedeiras, j que os resultados obtidos ainda foram melhores. Sendo estes resultados semelhantes queles encontrados por Costa et al. (2008) analisando a incluso de leo de linhaa na alimentao de poedeiras as 29 semanas de idade. Estes achados mostram que a porcentagem da casca no foi influenciada pela idade das poedeiras e nem pela adio de prpolis. Para Trindade et al. (2007) a integridade da casca tem grande influncia na qualidade do ovo, sendo um dos fatores que mais tm preocupado os produtores, pois a espessura da casca pode variar devido a vrios fatores, entre eles a hereditariedade, j que algumas famlias ou linhagens de aves produzem ovos com casca mais espessa que outras. Um estudo avaliando desempenho produtivo e comportamento de poedeiras Hy-Line W36 e Isa Brown foi conduzido por Roll et al. (2008), onde apesar de no ter ocorrido diferena estatstica quanto a produo de ovos das duas linhagens, o peso e a massa dos ovos foram significativos, sendo que os maiores valores para ambos os parmetros foram encontrados na linhagem Isa Brown. Os diferentes tratamentos no interferiram (p>0,05) no peso dos ovos (Tabela 7), resultados estes que foram tanto similares aos encontrados por Ting et al. (2011) avaliando a funo antioxidante da adio de flavonides provenientes de frutas ctricas em diferentes concentraes dieta de poedeiras s 22 semanas de idade onde tambm no observaram diferenas no peso dos ovos. Sendo, no entanto, superiores aos encontrados por Alves et al. (2007) quando realizaram experimento com poedeiras da mesma linhagem (Isa Brown) e, em pico de produo, atribuindo-se esse resultado ao fato de quanto maior a idade da galinha, maiores so seus ovos. Segundo Rosa & vila (2000) a gravidade especfica (GE) do ovo est basicamente relacionada espessura da casca, onde aves com idade entre 35 e 55 semanas produzem ovos com maior GE do que aves mais velhas. No entanto, outros fatores alm da idade, como a deficincia de clcio e vitamina D3, assim como a relao entre clcio e fsforo so os fatores que podem influenciar na diminuio da gravidade especfica.

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Quanto aos teores de clcio e fsforo, houve efeito (p<0,05) da adio de prpolis sobre os tratamentos (Tabela 7), com melhora na quantidade destes minerais na casca dos ovos das aves alimentadas com adio 1% de prpolis. No entanto esses teores no alteraram a qualidade dos ovos quando analisada a influncia dos mesmos nas demais variveis, esses resultados so coerentes com os encontrados por Couto et al. (2008) avaliando fontes alternativas de clcio e fsforo para poedeiras comerciais. J no estudo realizado por Galal et al. (2008), as diferentes concentraes de prpolis misturada rao de poedeiras no interferiu nos parmetros hematolgicos do sangue das aves, sendo que tanto a concentrao de clcio quanto a de fsforo no apresentaram diferenas significativas entre os tratamento. As diferenas entre as aves, com relao qualidade da casca, so definidas pela capacidade das aves de utilizarem o clcio. Outro fator que tambm pode interferir o clima, j que altas temperaturas reduzem a espessura da casca e os nveis de clcio ou bicarbonato de sdio do sangue so reduzidos como resultado dos movimentos respiratrios mais acelerados, visto que as aves procuram, desta forma, controlar a temperatura corporal (Trindade et al., 2007). Entre os nutrientes mais importantes para as aves, o clcio o mineral mais ativo, sendo essencial para uma srie de funes metablicas, principalmente no desenvolvimento da ave. A utilizao do clcio pelo organismo depende principalmente da idade e da espcie. Nas aves em fase de produo, o clcio utilizado na formao da casca do ovo, cujo peso mdio de 5 a 6 g, e destes aproximadamente 2 g so apenas de clcio (Nunes et al., 2006). O clcio e fsforo auxiliam na formao de ossos e das cascas dos ovos (Arajo et al., 2008).

3.5 Caractersticas Internas dos Ovos

Os tratamentos influenciaram (p<0,05) a colorao da gema (Tabela 8), onde o teor de luminosidade (L*) foi maior para os ovos de poedeiras suplementadas com prpolis. No entanto, o teor de vermelho (a*) foi maior para o

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tratamento controle, enquanto que o teor de amarelo (b*) foi pior para os ovos de poedeiras suplementadas com 3% de prpolis, resultados esses que diferem de Garcia et al. (2002) avaliando diferentes nveis de cantaxantina, um pigmento que garante a gema colorao acentuada. Nota-se, que com a incluso da prpolis a colorao da gema foi prejudicada, j que os teores de vermelho e amarelo foram menores e a luminosidade aumentada. Em um estudo Santos-Bocanegra et al. (2004) afirmaram que a cor da gema uma das caractersticas internas mais observadas pelo consumidor apesar de ser uma medida subjetiva, que varia do amarelo claro ao laranja avermelhado. A pigmentao o resultado da deposio de oxicarotenides na gema do ovo, sendo as xantofilas, a lutena e a zeaxantina aqueles que ocorrem naturalmente. A colorao mais forte na gema dos ovos de poedeiras comerciais desejvel e depende intimamente da alimentao fornecida, pois as galinhas so capazes de sintetizar esses pigmentos de cor, mas podem absorver de 20 a 60% dos pigmentos da rao (Lee et al., 2001). Os valores encontrados para o teor de amarelo esto abaixo daqueles recomendados para aceitao do consumidor, e este deve ser em torno de 47.

Tabela 8 Valores mdios do peso (g) e colorao da gema, obtidos avaliando-se o teor de luminosidade (L*), vermelho (a*) e amarelo (b*) de ovos de poedeiras suplementadas com prpolis. Colorao da Gema Peso da Gema Tratamento L* a* b* T1 64,451,22b 4,221,25a 37,060,87a 17,211,48 T2 65,401,47a 2,861,16b 36,890,83a 16,861,54 T3 65,651,62a 2,471,77b 36,740,82ab 17,201,54 T4 65,711,25a 2,181,00b 36,370,73b 17,041,68 Mdias seguidas de letras diferentes na mesma coluna diferem (p<0,05) significativamente. Tambm no houve efeito significativo (p>0,05) nos diferentes tratamentos para o peso da gema (Tabela 8). Resultados estes superiores aos encontrados por Viana et al. (2009) quando avaliaram o desempenho de poedeiras utilizando enzimas, que assim como a prpolis melhoram a absoro dos

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nutrientes. Deve-se levar em considerao que o peso da gema varia de acordo com o tamanho do ovo e com a idade das galinhas.

3.6 Anlise Sensorial Os dados da anlise sensorial mostrou que os provadores notaram moderada diferena entre os ovos submetidos aos tratamentos em relao amostra padro e so as caractersticas sensoriais que determinam a preferncia do consumidor pelo produto avaliado, sendo que a cor da gema comumente relacionada qualidade nutricional do ovo e muitas vezes ferramenta decisria para a aquisio do produto pelo consumidor. Atravs deste resultado nota-se que a adio de prpolis influenciou nas caractersticas de aceitabilidade do consumidor. O mesmo foi observado em estudo realizado por Hayat et al. (2010), onde os autores avaliaram a aceitabilidade de ovos de poedeiras suplementadas com sementes de linhaa mais adio de antioxidantes, os resultados mostraram que apesar de 70% dos consumidores no terem sido capazes de distingui-los, os avaliadores treinados perceberam as diferenas entre os tratamentos e a adio dos antioxidante no melhorou a aceitabilidade dos ovos por parte dos avaliadores. Os achados do citado trabalho, demonstram a importncia da caracterizao do avaliador em uma anlise sensorial, pois segundo Siebel et al. (2010) a validade dos resultados obtidos depende da correta seleo dos julgadores, e da sua habilidade de identificar e quantificar cada atributo avaliado.

CONCLUSES

A prpolis quando adicionada dieta de poedeiras no influenciou a temperatura superficial das aves e no alterou as caractersticas de desempenho. A qualidade interna dos ovos foi afetada com a adio de prpolis, a colorao da gema foi prejudicada e isso foi observado no parmetro de aceitabilidade na anlise sensorial pelos consumidores.

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No entanto, com base nestes resultados, no recomendada a utilizao de prpolis nos nveis aqui adicionados na alimentao de poedeiras, j que as caractersticas aqui avaliadas no foram melhoradas com a sua adio.

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CAPTULO 3 (Redigido de acordo com as normas da Brazilian Journal of Poultry Science)

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MORFOMETRIA DO TRATO DIGESTRIO DE POEDEIRAS SUPLEMENTADAS COM PRPOLIS

RESUMO

A mucosa intestinal responsvel pela digesto e absoro dos nutrientes, alm de servir de mecanismo de defesa do sistema imune. A busca por novos aditivos e ingredientes que promovam a integridade, desenvolvimento e o bom funcionamento da mucosa intestinal um dos maiores desafios na produo avcola. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi estudar os efeitos de diferentes nveis de adio de prpolis sobre os ndices histolgicos e morfolgicos da mucosa intestinal de poedeiras s 55 semanas de idade. Foram utilizadas 120 poedeiras semipesadas com 55 semanas de idade. O delineamento experimental adotado foi inteiramente casualizado com quatro tratamentos (0, 1, 2 e 3% de prpolis in natura na dieta) e trs repeties de 10 aves cada. Ao final do experimento foram avaliadas caractersticas de morfometria do trato

gastrintestinal. O peso do intestino, do fgado, pncreas, moela e proventrculo foram avaliados e estimadas as porcentagens em relao ao peso corporal das aves. Posteriormente foram retirados segmentos do intestino (duodeno, jejuno e leo) para o preparo de lminas histolgicas e medies de altura e largura das vilosidades e profundidade de cripta, por microscopia ptica. Os resultados para a porcentagem de rgos em funo do peso corporal mostraram que o peso do fgado e da moela foram maiores com a adio de prpolis a 1%. A altura das vilosidades aumentou com a adio de prpolis a 3%, principalmente a altura das vilosidades do duodeno e do leo, assim como aumentou a largura das vilosidades no jejuno. Conclui-se que a prpolis quando adicionada a dieta de aves poedeiras melhora a integridade do trato gastrintestinal.

Palavras chave: aditivos, duodeno, epitlio intestinal, vilosidades.

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MORPHOMETRY OF DIGESTIVE TRACT OF LAYING HENS FED SUPPLEMENTAL PROPOLIS

ABSTRACT The intestinal mucosa is responsible for digestion and absorption of nutrients, and also works as a defense mechanism of the immune system. The searching for new additives and ingredients that promote integrity, development and proper functioning of the intestinal mucosa is a challenge for poultry production. Thus, the aim of this study was to assess the effects of different levels of propolis on the histological and morphological traits of the intestinal mucosa of laying hens at the age of 55 weeks. 120 Isa Brown strain laying hens at 55 weeks of age were used in this study. A completely randomized experimental design with 4 treatments (0, 1, 2 e 3% in natura propolis) with 3 replications with 10 birds each was applied. At the end of experimental period, the morphometric traits of digestive tract of laying hens were evaluated. The organs weight, such as liver, spleen, gizzard and proventiculus were evaluated. Samples of small intestine (duodenum, jejunum and ileum) were removed for histological analysis and crypt depth, villi height and width were assessed by optic microscopy. The findings of organ percentage related to body weight showed that the liver and gizzard weight increased with the propolis supplementation at 1% on laying hens diet. The villus height increased with the propolis supplementation at 3%, mainly, at the duodenum and ileum segments, as well increased the width of villus at jejunum. It is conclude that propolis since supplemented on laying hens diet improves their digestive tract integrity.

Key words: additives, duodenum, intestinal epithelium, villi

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INTRODUO

Atualmente tm-se pesquisado novos aditivos e ingredientes que promovam a integridade, desenvolvimento e o bom funcionamento da mucosa intestinal, j que esta responsvel pela digesto e absoro dos nutrientes e, tambm tm importante papel no sistema imune que desenvolve mecanismos de defesa mediados por clulas e por fatores qumicos (Silva, 2006). O epitlio intestinal age como uma barreira natural contra a patogenicidade das bactrias e substncias txicas que esto presentes no lmen intestinal. Estressores, patgenos e substncias qumicas, entre outros, causam distrbios na microflora normal ou no epitlio intestinal. Estes distrbios podem alterar a permeabilidade da barreira natural, facilitando invaso de agentes patognicos e substncias prejudiciais ao metabolismo e capacidade de digerir e absorver nutrientes, levando a processos inflamatrios crnicos na mucosa intestinal (Oliveira et al., 1998) diminuindo as vilosidades intestinais, aumentando a renovao celular e deficincia nas atividades de absoro. O desenvolvimento da mucosa intestinal ocorre com o aumento da altura e densidade dos vilos, correspondendo ao aumento das clulas epiteliais tais como os entercitos, clulas caliciformes e enteroendcrinas. Esse processo decorre primariamente de dois eventos citolgicos associados: renovao celular na cripta e ao longo dos vilos e, ainda pela extruso celular, que ocorre normalmente no pice dos vilos (Uni et al., 1998). Na produo avcola, um dos maiores desafios a manuteno da integridade da mucosa intestinal e do equilbrio da microbiota em padres benficos ao hospedeiro. Ao longo dos anos, a utilizao dos antimicrobianos contribuiu muito singularmente para manuteno da sade intestinal de aves criadas em condies de produo intensiva. Contudo, com as restries ao uso dos antimicrobianos, alternativas passaram a ser pesquisadas para que os padres produtivos previamente estabelecidos fossem mantidos (Lima, 2010). Muitos pases, incluindo o Brasil, tm pesquisado produtos alternativos para substituir os tradicionais antibiticos, tais como os prebiticos e probiticos,

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pois a ao destes pode ser explicada pela produo de substncias antimicrobianas e cidos orgnicos, oferecendo proteo aos vilos e superfcies absortivas contra as toxinas produzidas por microrganismos patognicos, e estimulao do sistema imune (Pelicano et al., 2007). Uma opo seria os produtos naturais como a prpolis, que uma resina, proveniente de rvores, coletada pelas abelhas (De Castro, 2001) e considerado um "antibitico natural", sem efeitos colaterais graves, em comparao aos tratamentos sintticos, e apresenta diversas propriedades farmacolgicas. Diante do exposto, o objetivo do presente estudo foi estudar os efeitos de diferentes nveis de adio de prpolis dieta de poedeiras s 55 semanas de idade sobre os ndices histolgicos e morfolgicos da mucosa intestinal e peso relativo dos rgos.

MATERIAL E MTODOS

O trabalho foi realizado no avirio experimental de postura da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Grande Dourados - FCA/UFGD, durante o ms de abril de 2010, utilizando 120 poedeiras da linhagem Isa Brown com 55 semanas de idade. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado com quatro tratamentos (porcentagem de prpolis na dieta) e trs repeties de 10 aves cada, utilizando como tratamentos a adio de 0, 1, 2 e 3% de prpolis in natura. O manejo utilizado foi aquele recomendado pelo manual da linhagem (ISA BROWN, 2006). As aves receberam 17 horas de luz (natural e artificial), gua e rao ad libtum. As raes foram produzidas na fbrica de raes da Faculdade de Cincias Agrrias UFGD e a prpolis adquirida de uma empresa comercial.

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2.1 Morfometria e Microscopia ptica do Trato Digestrio

Aps o perodo de 28 dias de fornecimento das raes experimentais, retirou-se ao acaso quatro aves por tratamento, para realizar a pesagem de proventrculo, moela, fgado, pncreas e intestino delgado. Os clculos das porcentagens foram realizados com base no peso corporal da ave viva. Para avaliao morfomtrica do intestino retirou-se fragmentos de 2 cm da poro medial das trs regies do intestino delgado (duodeno, jejuno e leo). Os seguimentos foram fixados em soluo de Bouin e cortadas com 5 m de espessura, posteriormente corados com HE, seguindo o processamento histolgico padro (Junqueira & Carneiro, 2004). Os cortes foram avaliados com analisador de imagem que permitiu estimar o efeito dos tratamentos sobre o epitlio intestinal, principalmente a integridade e altura das vilosidades.

2.2 Anlise Estatstica

Os dados foram submetidos anlise de varincia e as mdias comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05). A anlise estatstica foi realizada com o auxlio do programa Sisvar para anlise dos dados.

RESULTADOS E DISCUSSO

Os valores mdios do peso relativo do fgado, moela, proventrculo, pncreas e intestinos so apresentados na Figura 1. Observa-se que o peso dos intestinos foram menores para os tratamentos com adio de 1% e 3% de prpolis. Oliveira & Moraes (2007) relatam que a reduo no peso do intestino decorrente da adio de antibiticos, promotores de crescimento e prebiticos na dieta das aves poderia ser proporcionada pela diminuio no nmero de bactrias presentes no trato gastrintestinal, desencadeando uma reduo na atividade e turnover dos

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entercitos, gerando como consequncia menor espessura de parede, explicando o menor peso dos intestinos.

Figura 1 Peso mdio relativo de rgos de poedeiras alimentadas com diferentes nveis de prpolis.

O peso relativo do fgado e da moela foram maiores no tratamento com adio de 1% de prpolis. Em trabalho realizado por Balog et al.. (2007) estudando o efeito da utilizao de simbitico sobre o desempenho e morfometria do epitlio gastrintestinal de frangos de corte, os autores encontraram diferenas na porcentagem do fgado em funo do peso corporal e concluram que o efeito do simbitico sobre os microrganismos patognicos, inibindo ou reduzindo a liberao de toxinas para a corrente sangunea e, consequentemente para o fgado, estimularia sua funo e aumentaria seu tamanho, explicando o fato de o fgado dos animais, que receberam o aditivo, apresentar maior peso em relao ao peso vivo que o das aves no suplementadas. O pncreas o rgo que tem menor valor de porcentagem em relao ao peso corporal por tratamento que todos os demais, no havendo diferena de um tratamento para o outro, assim como o proventrculo tambm no apresentou diferena entre os tratamentos. Dessa forma, no foi observado o efeito da

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adiao da prpolis sobre o peso relativo do proventrculo e do pncreas. Sendo assim, similar aos achados de Balog et al. (2007) em que o simbitico tambm no interferiu no peso destes rgos. Em estudo realizado com enzimas para frangos de corte, Gracia et al. (2009) no notaram diferena no peso dos rgos estudados, resultados estes que diferem dos encontrados neste trabalho, j que a prpolis melhorou o peso do fgado e da moela. Na Tabela 1 so apresentados os resultados da morfometria intestinal obtidas por anlises histolgicas realizadas nas amostras de intestino, com as mdias da altura de vilosidade, largura de vilosidade e profundidade de cripta. As imagens de microscopia ptica do duodeno das aves do experimento esto na Figura 2. Analisando-se a microscopia ptica para os valores de altura de vilosidade (AV), observa-se que houve efeito significativo (p<0,05) dos tratamentos com adio de 2% e 3% de prpolis nas vilosidades do leo, enquanto que o aumento das vilosidades do duodeno foi significativo apenas no tratamento com adio de 3% de prpolis. Contudo no houve efeito dos tratamentos (p>0,05) para a altura de vilosidade no jejuno. Resultado similar a este foi apresentado por Maiorka et al. (2000) avaliando a influncia da suplementao de glutamina sobre o desenvolvimento de vilos e criptas do intestino delgado de frangos de corte, onde foi observado que 1% de glutamina na rao foi capaz de aumentar a altura do vilo no duodeno e no leo sem, no entanto, apresentar efeito sobre o jejuno. Diferente do encontrado por Murakami et al. (2007) que tambm utilizaram glutamina mais vitamina E nas raes de frangos de corte e observaram o aumento acentuado do vilo dos segmentos do duodeno, seguido do jejuno e ento leo.

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Tabela 1 Mdia da altura de vilosidades (AV), da largura da vilosidade (LV) e profundidade da cripta (PC) do duodeno, jejuno e leo em micrmetro (m) de poedeiras alimentadas com prpolis. DUODENO Tratamento 0 1% 2% 3% Tratamento 0 1% 2% 3% Tratamento 0 1% 2% 3% AV 262,035,26b 274,429,20b 230,613,16b 582,4166,06a JEJUNO AV 225,747,19 233,816,30 268,017,93 260,229,39 LEO AV 13,70,58b 16,02,00ab 18,01,73a 18,71,15a LV 2,00,00 1,30,67 1,30,67 2,00,00 PC 1,70,58 3,01,00 4,03,46 2,30,58 LV 22,610,01a 26,45,86a 16,61,34b 25,34,63a PC 40,110,25a 48,813,54a 39,61,34ab 24,85,19b LV 31,221,99ab 18,04,85b 20,23,35b 42,85,17a PC 38,824,46 41,02,45 32,012,04 37,25,76

Mdias seguidas de letras distintas na mesma coluna diferem (p<0,05) entre si.

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Figura 2 Vilosidade de duodeno de poedeiras, evidenciando a largura das vilosidades. Aumento 20X. Em A: Tratamento 1 (controle). Em B: Tratamento 2 (1% de prpolis). Em C: tratamento 3 (2% de prpolis. Em D: Tratamento 4 (3% de prpolis).

Pode ser observado que os resultados descritos em literatura so contrastante de acordo com o aditivo usado, como observado por Lima (2010) avaliando diferentes nveis de levedura de cana de acar para frangos de corte aos 7 dias de idade, onde o uso da levedura tambm no influenciou a altura das

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vilosidades do jejuno, uma vez que

a levedura tem ao prebitica, e age

melhorando as pores proximais do intestino, esta, assim como a prpolis, deveria ter influenciado na melhoria deste segmento. Salazar et al. (2008) avaliando os efeitos da incluso de cido ltico e butrico sobre o desempenho e morfometria intestinal de frangos de corte com idade de 1 a 39 dias no notaram diferena para a altura das vilosidades nos diferentes segmentos (duodeno e leo). Dentre alguns fatores responsveis pelas alteraes nas vilosidades do intestino, alm das diferentes dietas, o estresse trmico representa um importante papel, onde estudos demonstram que aves mantidas sob estresse trmico apresentaram diminuio na altura dos vilos comparadas s criadas em conforto trmico (Mitchell & Carlisle, 1992). Os resultados encontrados com a adio de prpolis foram significativos principalmente na concentrao a 3% por ter agido em ambos os segmentos, duodeno e leo, possivelmente pelo fato da prpolis diminuir os microorganismos patognicos, melhorando assim, as caractersticas morfolgicas e,

consequentemente a absoro dos nutrientes. Tambm de acordo com Macari et al. (1998), o maior desenvolvimento do vilo no duodeno pode ser devido a maior renovao celular que ocorre neste segmento. Quanto influncia da prpolis sobre a largura dos vilos, a sua ao sobre este parmetro no ficou clara, uma vez que na poro do duodeno, apesar do tratamento 4, concentrao a 3%, ter sido significativo estatisticamente dos tratamento T2 e T3 com as concentraes a 1 e 2% respectivamente e ter apresentado o maior valor, este ainda assim, no se diferenciou do tratamento controle, T1. J na poro do jejuno, observado que o nico tratamento diferenciado o T3, que na verdade apresentou o menor valor mdio, no havendo, portanto influncia dos demais sobre as vilosidades do jejuno, nem mesmo se diferenciando do tratamento controle. Os tratamentos no influenciaram (p>0,05) a largura das vilosidades do leo, resultados estes que so coerentes com Balog et al. (2007) quando utilizaram

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diferentes nveis de simbitico na dieta de frangos de corte, o simbitico e a prpolis possuem propriedades farmacolgicas semelhantes e que melhoram as condies intestinais, mas neste segmento, no houve melhoria nas caractersticas descritas. Tambm Iji et al. (2001) no observaram efeito de diferentes nveis de suplementao de mananoligossacardeos (0,1%; 0,3%; 0,5%) sobre a largura do vilo no jejuno e leo de frangos de corte Com relao diversidade de resultados encontrados na literatura e aqui citados, podem ser listados vrios fatores envolvidos, entre eles: diferenas de estrutura qumica e propriedades fsico-qumicas dos aditivos, composio dos ingredientes da dieta e dosagens dos aditivos (Nunes et al., 2009). Os valores de profundidade de cripta foram influenciados pelo tratamento T2 adio de 1% de prpolis (p<0,05) somente para o jejuno, no entanto este no diferiu do controle e o menor valor foi encontrado na maior concentrao a 3% de prpolis. Estes resultados diferem de Pelicano et al. (2005) utilizando promotores de crescimento e Pelicano et al. (2007) avaliando a influncia de diferentes aditivos sobre a morfometria da mucosa intestinal de frangos de corte, e assim como a prpolis os promotores de crescimento, pro e prebiticos agem melhorando o desempenho e a eficincia intestinal, estimulando a produo de substncias antimicrobianas e de cidos orgnicos, protegendo as vilosidades e superfcies absortivas contra toxinas produzidas por patgenos, bem como a estimulao do sistema imunolgico. A importncia do aumento da cripta segundo Boleli et al. (2002) que esta responsvel por 55% da capacidade de proliferao celular do intestino. Assim, uma cripta maior indicativa de maior proliferao celular intestinal.

CONCLUSES

A prpolis a 1% agiu beneficiando o peso dos rgos, uma vez que aumentou o peso do fgado e da moela quando analisada a porcentagem de rgos em funo do peso corporal.

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As caractersticas de morfometria dos diferentes segmentos do intestino demonstraram que a prpolis a 3% aumentou a altura das vilosidades o que mostra que a prpolis melhorou esses parmetros, principalmente a altura das vilosidades do duodeno e do leo, assim como aumentou a largura das vilosidades no jejuno. Entretanto, as diferentes concentraes apresentaram aes distintas conforme o parmetro estudado, no sendo assim conclusiva qual melhor concentrao aplicada.

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CAPTULO 4 (Redigido de acordo com as normas da Brazilian Journal of Poultry Science)

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QUALIDADE DE OVOS DE POEDEIRAS SEMIPESADAS SUPLEMENTADAS COM PRPOLIS E ESTOCADOS EM DIFERENTES CONDIES TRMICAS RESUMO O presente experimento foi realizado nas instalaes experimentais da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Grande Dourados (FCA/UFGD), Dourados MS. Foram utilizadas 120 poedeiras vermelhas s 55 semanas de idade. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado com esquema fatorial 4x2x3 (4 nveis de incluso de prpolis na dieta (0, 1, 2, 3%); 2 temperaturas (ambiente e refrigerao) e 3 perodos de estocagem. Foram avaliadas caractersticas de qualidade de ovos (gravidade especfica, porcentagem de casca, porcentagem e colorao de gema) e anlise sensorial dos ovos. Para as caractersticas avaliadas da qualidade dos ovos em diferentes temperaturas de armazenamento (ambiente e refrigerao) somente a colorao da gema foi influenciada (p<0,05). A luminosidade foi influenciada por todos os tratamentos e perodo de estocagem para os ovos mantidos em temperatura de refrigerao. O teor de vermelho foi influenciado por todos os tratamentos, perodo de estocagem e condio de armazenamento, e o teor de amarelo foi influenciado por todos os tratamentos nos ovos mantidos em temperatura de refrigerao. Na anlise sensorial, quando avaliadas as amostras experimentais em relao amostra padro (ovo no armazenado e sem prpolis), os provadores notaram moderada diferena entre elas, demonstrando que os tratamentos alteraram a aparncia dos ovos. Para a avaliao de textura da gema e clara os provadores atriburam escores de normal a levemente mole para ovos em temperatura ambiente. Para a cor da gema e clara os provadores notaram que os ovos em temperatura ambiente estavam normais a levemente escuros. Para o odor da clara e da gema foram atribudos escores normais para os ovos mantidos sob temperatura de refrigerao. Portanto, conclui-se que a prpolis altera a qualidade dos ovos a qual pode ainda mais ser afetada quando estes so estocados em temperatura ambiente. Palavras chave: aditivo natural, anlise sensorial, perodo de estocagem.

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EGGS QUALITY OF LAYING HENS FED SUPPLEMENTAL PROPOLIS AND STORAGE AT DIFFERENT THERMAL CONDITIONS

ABSTRACT This experiment was conducted in the experimental facilities of the Faculty of Agrarian Sciences, Federal University of Grande Dourados (FCA / UFGD), Dourados - MS. On the total of 120 red hens at 55 weeks of age were used for this experiment. The experimental design was completely randomized 4x2x3 factorial scheme (four levels of inclusion of propolis in the diet - 0, 1, 2, 3%), two temperatures (ambient and refrigeration) and three storage periods. The quality of eggs (specific gravity, eggshell percentage, yolk percentage and staining) and sensory evaluation of eggs were evaluated. For the characteristics assessed for the quality of eggs at different storage temperatures (ambient and refrigeration) only yolk color was affected (p <0.05). The brightness was affected by all treatments and storage period for eggs kept at refrigerator temperature. The red content was influenced by all treatments, storage period and storage condition, and the yellowness was influenced by all treatments for the eggs kept under refrigeration. In the sensory analysis, taking all experimental samples compared to the standard sample (not stored egg and without propolis), panelists noted moderate difference between them, demonstrating that the treatments changed the appearance of eggs. For the evaluation of texture of the yolk, the panelists gave scores from normal to slightly soft to the eggs at room temperature. For the yolk color, the panelists noted that the eggs at room temperature were normal to slightly dark and for the evaluation of smell of albumen and yolk, normal scores were attributed to eggs kept under refrigeration. Therefore, it is concluded that propolis changes the quality of eggs and these may have affected their quality when stored at room temperature.

Key words: natural additive, sensory analysis, storage time, temperature.

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1 INTRODUO

O ovo de galinha um dos alimentos naturais mais perfeitos, oferecendo aos homens um balano quase completo de nutrientes essenciais com protenas de excelente valor biolgico, vitaminas, minerais e cidos graxos (Brugalli et al., 1998). So importantes fontes proticas, sendo considerados alimentos ricos em protena e com baixo teor de gordura, tendo em sua poro lipdica maiores concentraes de cidos graxos insaturados. Desempenham diversas propriedades funcionais, que proporcionam aos alimentos, cor, viscosidade, emulsificao, geleificao e formao de espuma (Sarcinelli et al., 2007). Como todos os produtos naturais de origem animal, o ovo tambm perecvel e comea a perder sua qualidade interna logo aps a postura, caso no sejam tomadas medidas adequadas para sua conservao, sendo assim a perda de qualidade um fenmeno inevitvel que acontece de forma contnua ao longo do tempo e pode ser agravada por diversos fatores (Barbosa et al., 2008). Algumas caractersticas so indesejveis no ovo, como por exemplo, o escurecimento em volta da gema quando cozidos, que ocorre geralmente em ovos mais velhos e com pH mais alto. Esta colorao devida produo de sulfereto de ferro, em que o ferro provm da gema e o enxofre da albumina da clara (Ferreira et al., 2009). No Brasil, por no ser obrigatria a refrigerao, os ovos comerciais so acondicionados, desde o momento da postura at a distribuio final, em temperaturas ambientes, sendo em alguns casos, refrigerados apenas nas casas dos consumidores (Xavier et al., 2008). Alguns fatores do sistema de produo podem afetar a qualidade do ovo, entre esses se destacam as condies de temperatura e umidade durante a estocagem (Barbosa et al., 2008). Devido s propriedades antibacterianas da prpolis, esta tem sido usada como aditivo a dietas de poedeiras, sendo averiguada sua influncia sobre parmetros qualitativos de ovos (Bonomi et al., 1976; Galal et al., 2008). Outra aplicao da prpolis quanto ao seu uso como revestimento de proteo de

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vrios produtos agrcolas durante os seus armazenamentos, dentre eles, ovos de galinha (Carvalho, 2009). Couper et al. (2008) verificaram que a partir do uso da prpolis a 10% como revestimento, aumentou o tempo de prateleira de ovos estocados a temperatura ambiente de 25C sem perda da qualidade interna dos ovos. Diante do exposto, este trabalho teve por objetivos avaliar os efeitos da temperatura e do tempo de armazenamento sobre a qualidade dos ovos de poedeiras comerciais da linhagem Isa Brown alimentadas com diferentes nveis de prpolis.

2 MATERIAL E MTODOS

O trabalho foi realizado nas instalaes da Faculdade de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Grande Dourados - FCA/UFGD no avirio experimental de poedeiras. Foram utilizadas 120 poedeiras vermelhas da linhagem Isa Brown as 55 semanas de idade com peso mdio de 2,100 kg, por um perodo de 28 dias, durante o ms de abril e maio de 2010. O manejo utilizado foi aquele recomendado pelo manual da linhagem (ISA BROWN, 2006) e as aves receberam 17 horas de luz (natural e artificial), gua e rao ad libtum. As caractersticas avaliadas no experimento foram a qualidade de ovos dos diferentes tratamentos estocados sob temperatura ambiente (23C) e sob refrigerao (8C), por 7, 14 e 21 dias. Para isto, utilizaram-se 18 ovos de cada tratamento (tratamento controle, adio de 1%, 2% e 3% de prpolis), em duas condies de armazenamento, um sob temperatura ambiente e outro sob temperatura de refrigerao. Foram ento, avaliados o peso inicial e final dos ovos, gravidade especfica, o peso e a colorao da gema, sendo as anlises realizadas semanalmente e os ovos acondicionados em suas respectivas temperaturas, analisando-se ovos acondicionados por 7, 14 e 21 dias e posteriormente, foi realizada a anlise sensorial dos mesmos.

65

2.1 Gravidade Especfica dos Ovos

Estas anlises ocorreram uma vez por semana, durante quatro semanas consecutivas, e para isto os ovos foram identificados. Para obteno da gravidade especfica foram elaboradas nove solues salinas com densidades de 1,060, 1,070, 1,080, 1,090 e 1,100 e colocadas em ordem crescente em recipientes identificados, temperatura de 15C. Primeiramente os ovos foram colocados no recipiente de 1,060, e assim sucessivamente, at que os ovos flutuassem na soluo (Castell et al.., 1989). A gravidade especfica do ovo foi representada pela soluo de menor densidade onde este emergiu.

2.2 Porcentagem da Casca

Obteve-se a porcentagem de casca considerando-se o peso total do ovo e o peso da casca, o qual foi medido aps as cascas serem secas em estufa a 60C por trs dias, conforme metodologia descrita por Castell et al. (1989).

2.3 Colorao da Gema

Determinou-se a colorao da gema com o auxlio de um colormetro Minolta, avaliando-se os parmetros de L*(luminosidade), a* (vermelho) e b* (amarelo), efetuando-se assim a leitura em trs diferentes pontos da superfcie da gema.

2.4 Anlise Sensorial

A anlise sensorial foi realizada no Laboratrio de Anlise Sensorial da Faculdade de Cincias e Tecnologia da Universidade Federal da Grande Dourados (FACET- UFGD). Os ovos foram cozidos por 10 minutos em gua fervente. As

66

amostras foram oferecidas em metade de ovo cozido a 15 avaliadores no treinados. O tratamento controle foi identificado com a letra P e os demais identificados por nmeros, aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle, quando os avaliadores deviam atribuir escores de variao em relao amostra controle, conforme metodologia descrita por ABNT (1995). E outra ficha foi entregue aos avaliadores e os mesmos deviam atribuir escores de variao de cor, odor e textura da gema e clara, em relao amostra controle, conforme metodologia descrita por ABNT (1998).

2.5

Anlise Estatstica A anlise estatstica foi realizada adotando-se um delineamento

experimental inteiramente casualizado com esquema fatorial 4x2x3 (4 nveis de incluso de prpolis na dieta (0, 1, 2, 3%); 2 temperaturas (ambiente e refrigerao) e 3 perodos de estocagem com trs repeties de 10 aves cada, utilizando como tratamentos a adio de 0, 1, 2 e 3% de prpolis in natura. Para esta anlise foi utilizado o programa computacional Minitab, na qual os dados foram submetidos anlise de varincia e as mdias comparadas pelo teste de Tukey (p<0,05) e para os resultados em que houve interao, aplicou-se anlise de regresso. Os dados da anlise sensorial foram submetidos anlise no-paramtrica com teste Kruskal Wallis (5% de significncia), utilizando-se o programa SAS Institute (1996).

RESULTADOS E DISCUSSO

3.1 Caractersticas Externas dos Ovos

A adio de prpolis, o perodo de estocagem e as condies de armazenamento no influenciaram (p>0,05) o peso inicial e final dos ovos (Tabela 1), diferindo dos resultados encontrados por Barbosa et al. (2008) quando

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avaliaram a qualidade de ovos provenientes de poedeiras comerciais armazenados sob diferentes tempos e condies ambientais. Nos resultados encontrados por estes autores, as condies e o perodo de estocagem diminuram o peso dos ovos. A perda de peso dos ovos de um perodo de estocagem para o outro tem a ver com a perda de gua e dixido de carbono que ocorre naturalmente com tempo maior de estocagem, principalmente em ovos mantidos em temperatura ambiente. natural que ocorra perda de peso dos ovos quando estes so armazenados por um longo perodo, devido reduo da gua da clara, que mais acentuada em ovos mantidos em temperatura ambiente (Santos, 2005).

Tabela 1 Mdia do peso inicial e peso final dos ovos em gramas mantidos sob temperatura ambiente e temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). Peso Inicial (g) Temperatura Ambiente Dias
Prpolis (%) 0

Temperatura de Refrigerao 21
60,523,67 68,361,64 63,073,25 64,393,62

7
65,507,17 69,378,81 68,143,81 64,133,68

14
62,972,79 64,853,44 65,801,87 64,838,71

7
67,548,10 68,571,91 64,75,96 67,592,97

14
63,612,47 61,933,00 62,823,19 62,732,73

21
65,465,35 65,458,28 65,771,63 61,100,30

1 2 3

Peso Final (g) Temperatura Ambiente Dias


Prpolis (%) 0

Temperatura de Refrigerao 21
59,173,65 66,921,56 61,413,25 62,993,42

7
64,817,16 68,409,01 67,423,86 63,513,60

14
61,842,83 60,718,02 64,891,95 64,048,73

7
66,828,02 68,161,88 64,325,96 67,182,97

14
62,732,46 60,623,61 61,672,97 61,502,70

21
64,255,10 64,188,03 64,821,81 62,213,75

1 2 3

Os diferentes nveis de prpolis, o perodo de estocagem e as condies de armazenamento no influenciaram (p>0,05) a porcentagem de casca (Tabela 2).

68

Esses resultados so coerentes com os encontrados por Garcia et al. (2002) avaliando o efeito dos nveis de cantaxantina na dieta sobre o desempenho e qualidade dos ovos de poedeiras comerciais. Ao avanar do perodo de postura, o peso do ovo aumenta, a casca tornase mais fina e a poedeira no consegue secretar carbonato de clcio em quantidade suficiente para acompanhar o aumento no tamanho do ovo (Garcia et al. 2010). Consequentemente, a casca do ovo perde espessura e resistncia justamente quando o peso do ovo maior o que pode aumentar a perda de umidade para o ambiente.

Tabela 2 Porcentagem de casca dos ovos de poedeiras suplementadas com diferentes nveis de prpolis mantidos sob temperatura ambiente e sob temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). Porcentagem de Casca Temperatura Ambiente Dias Prpolis (%) 0 1 2 3 7
9,58 9,26 9,81 9,73

Temperatura de refrigerao 21
10,64 9,49 9,81 10,07

14
9,36 9,89 9,81 9,08

7
9,53 9,43 10,15 9,92

14
9,62 10,54 9,53 8,97

21
9,94 9,71 9,68 10,39

No houve influncia (p>0,05) da adio de prpolis, do perodo de estocagem e das condies de armazenamento para a gravidade especfica dos ovos (Tabela 3). Resultados estes que diferem de Carvalho et al. (2003) quando avaliaram as mesmas variveis.

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Tabela 3 Mdias da gravidade especfica (gramas por cm3) dos ovos de poedeiras suplementadas com diferentes nveis de prpolis mantidos sob temperatura ambiente e temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). Gravidade Especfica (g/cm3) Sob Temperatura Ambiente Dias
Prpolis (%)

Temperatura de Refrigerao 21
1,070,00 1,070,00 1,060,01 1,070,01

7
1,080,01 1,070,01 1,080,00 1,080,01

14
1,070,00 1,070,01 1,070,01 1,070,01

7
1,080,01 1,080,01 1,080,00 1,080,00

14
1,070,00 1,080,01 1,070,01 1,070,00

21
1,070,01 1,070,00 1,080,01 1,080,01

0 1 2 3

Com o passar do tempo o ovo vai perdendo gua e dixido de carbono, atravs da casca. Dentro do ovo existe entre a membrana da clara e a casca a cmara de ar. Quanto mais fresco o ovo, menor ela , pois quase nenhuma gua saiu do seu interior. A clara perde gua atravs da casca, reduzindo-se, deixando mais espao para a cmara de ar expandir, diminuindo ento a densidade do ovo. Dessa forma, a densidade total do ovo fresco maior do que a do ovo mais velho, pois este ltimo contm maior volume ocupado por gs que baixa consideravelmente a densidade total (Sarcinelli et al., 2007).

3.2

Caractersticas Internas dos Ovos

No houve influncia (p>0,05) dos tratamentos, perodo de estocagem e condies de armazenamento sobre o peso da gema (Tabela 4). As caractersticas de colorao da gema foram influenciadas. Para a varivel luminosidade, houve interao (p<0,05) entre os nveis de prpolis e as diferentes condies de armazenamento, e entre os nveis de prpolis e perodo de estocagem.

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Tabela 4 Mdias do peso (gramas) da gema dos ovos de poedeiras suplementadas com diferentes nveis de prpolis mantidos sob temperatura ambiente e temperatura de refrigerao por perodo experimental (dias). Peso da Gema (g) Temperatura Ambiente Dias
Prpolis (%)

Temperatura de Refrigerao 21
16,632,20 19,401,65 16,560,43 16,791,95

7
17,944,14 17,732,92 18,851,63 17,301,03

14
18,072,28 17,120,80 17,460,49 16,941,95

7
17,861,99 17,880,70 18,270,73 19,531,60

14
15,641,78 17,021,65 16,931,43 17,470,06

21
18,270,77 19,931,41 18,922,10 17,130,07

0 1 2 3

Para a interao das concentraes de prpolis e condies de armazenamento (Figura 1), para os ovos estocados em temperatura ambiente, foi observado o aumento na luminosidade dos ovos de poedeiras alimentadas com menores nveis de prpolis e a reduo desta para os ovos com nveis de maior adio (Ponto de mxima= 1,49% de prpolis). Por outro lado, para o ambiente de refrigerao houve um aumento linear na luminosidade com o aumento da adio de prpolis. Pode-se observar que os ovos estocados em temperatura ambiente obtiveram altos valores de luminosidade, mostrando, que estes ovos tiveram a cor da gema mais clara. Para os ovos mantidos sob refrigerao a luminosidade foi menor, portanto a colorao da gema teve melhor aspecto, o que evidencia, que os ovos quando refrigerados tendem a manter sua qualidade interna.

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Figura 1 Desdobramento da interao entre os tratamentos (% de prpolis) e condies de armazenamento (ambiente e refrigerao) para a varivel luminosidade.

Para a interao entre os nveis de prpolis e perodo de estocagem (Figura 2), houve interao (p<0,05) somente para o perodo de estocagem de 14 dias com aumento na luminosidade dos ovos de poedeiras alimentadas com menor adio de prpolis (Ponto de mxima= 1,67% de prpolis).

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Figura 2 Desdobramento da interao entre tratamento (% de prpolis) e perodo de estocagem para a varivel luminosidade.

Para a varivel teor de vermelho houve interao (p<0,05) somente entre os tratamentos e condies de armazenamento (Figura 3). Para os ovos estocados em temperatura ambiente houve reduo no teor de vermelho naqueles provenientes de poedeiras alimentadas com maior adio de prpolis. Alguns estudos mostram que os ovos quando acondicionados em temperatura ambiente tendem a perder suas caractersticas mais rapidamente, o que pode ser evidenciado no presente trabalho. No entanto, no ambiente de refrigerao houve reduo linear no teor vermelho com o aumento da adio de prpolis dieta. Portanto, observa-se que a adio de prpolis em maior quantidade aliada refrigerao, alterou de forma mais intensa o aspecto de colorao da gema. Deve-se levar em considerao que a intensidade de colorao da gema um critrio de deciso em relao preferncia do consumidor, pois normalmente, associa-se a pigmentao da pele do frango ao seu estado de sanidade e a cor da gema a sua quantidade de vitaminas (Garcia et al.., 2002).

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Figura 3 Interao entre tratamento (% de prpolis) e condies de armazenamento para a varivel vermelho. Houve efeito isolado da adio de prpolis dieta (tratamentos) e do perodo de estocagem para o teor de amarelo da gema. Entre os nveis de adio de prpolis houve uma reduo no teor de amarelo no nvel de adio

intermediria de prpolis, 2%. O ponto mnimo para intensidade de amarelo ocorreu na adio de 2,49% de prpolis (Figura 4).

74

Figura 4 Efeito dos tratamentos (% de prpolis) e perodo de estocagem para a varivel amarelo. O perodo de 21 dias foi o que apresentou os melhores valores para o teor de amarelo, quando comparado aos demais perodos (Figura 5). Alguns autores dizem que a cor da gema de ovos para o teor de amarelo (b*) deve ser maior que 47,0 para que sua aceitao pelo consumidor no seja prejudicada (Biscaro & Canniatti-Brazaca, 2006), o que no ocorreu no presente trabalho, em que os valores de colorao da gema foram menores que os preconizados.

75

Figura 5 Intensidade de amarelo para os diferentes perodos de estocagem.


Letras diferentes, diferem entre si (p<0,05) pelo teste de Tukey.

Silva et al. (2000), em trabalho realizado para avaliar o efeito do extrato de urucum na pigmentao da gema dos ovos, concluram que as linhagens diferiram na capacidade de pigmentar a gema, sendo que as poedeiras semipesadas foram mais eficientes. Este resultado pode estar relacionado a diferenas na taxa de digesto, absoro e deposio de pigmentos do urucum na gema.

3.3

Anlise Sensorial

Os dados da anlise sensorial mostraram que os provadores notaram moderada diferena entre os ovos submetidos aos tratamentos em relao amostra padro (Tabela 5), mostrando que os tratamentos no melhoraram a aparncia dos ovos.

76

Tabela 5 Valores encontrados para a anlise sensorial aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle, para os diferentes tratamentos e condies de armazenamento: temperatura ambiente (TA) e temperatura de refrigerao (TR). Prpolis (%) 0 Diferena 3,121,22 1
3,331,01

Condio 2
3,341,16

3
3,141,01

TA
3,291,07

TR
3,181,13

Os dados da anlise sensorial referentes aos escores de variao de colorao, odor e textura da gema e clara, em relao amostra controle (Tabela 6), mostraram que os provadores quando avaliaram a cor da gema dos diferentes tratamentos no notaram diferena quanto a este aspecto para os tratamentos controle, 1 e 2% de adio de prpolis, mas no tratamento com maior adio de prpolis os provadores acharam a cor da gema levemente clara. Ao analisarmos os valores de colorao da gema, podemos ver que o teor de amarelo (b*) est abaixo do preconizado por alguns autores e esta diferena foi notada pelos provadores.

Tabela 6 Valores encontrados para a anlise sensorial aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle com escores de variao de cor, odor e textura da gema e clara, em relao amostra controle para os diferentes tratamentos. Prpolis (%) 0 Textura gema Textura clara Cor da gema Cor da clara Odor da gema Odor da clara
3,72 1,39 3,841,32 4,281,20a 3,96 0,95 3,78 0,92 3,78 0,84

1
3,961,38 4,171,41 4,011,46ab 3,72 1,21 3,9 1,07 3,87 1,07

2
3,68 1,28 3,811,05 3,971,37ab 4,01 1,13 4,00 1,02 3,91 1,06

3
4,03 1,38 4,16 1,15 3,59 1,38b 3,76 1,19 4,08 1,14 4,03 1,09

Mdias seguidas de letras diferentes na linha diferem (p<0,05) significativamente.

77

Para as condies de armazenamento (ambiente e refrigerao) na Tabela 7 nota-se que houve diferena significativa (p<0,05) entre estas. Os provadores notaram que o odor da gema e da clara dos ovos sob refrigerao apresentou-se normal em relao ao padro. Para as cores da clara e da gema dos ovos em temperatura ambiente notouse que estas se apresentaram de normal a levemente escura quando avaliadas em relao ao padro. Estes resultados so coerentes aos obtidos por Moura et al. (2009) na avaliao das caractersticas sensoriais de ovos de codornas japonesas suplementadas com pigmentantes sintticos e selenometionina. A textura da gema e da clara dos ovos sob temperatura de refrigerao recebeu dos provadores escores de normais a levemente mole em relao ao padro. Observa-se ento que a prpolis altera as caractersticas internas dos ovos, o que prejudica sua aceitabilidade pelo consumidor, j que a colorao da gema um dos aspectos que mais so observados.

Tabela 7 Valores encontrados para a anlise sensorial aplicando-se o teste de Comparao Mltipla ou Diferena do Controle com escores de variao de cor, odor e textura da gema e clara, em relao amostra controle, para as diferentes condies de armazenamento: temperatura ambiente (TA) e temperatura de refrigerao (TR). Condies de armazenamento Temperatura ambiente Textura gema Textura clara Cor da gema Cor da clara Odor da gema Odor da clara
4,12 1,44a 4,31 1,36a 4,16 1,35a 4,08 1,08a 3,83 1,11b 3,78 1,09b

Temperatura de Refrigerao
3,59 1,24b 3,68 1,19b 3,76 1,36b 3,64 1,13b 4,05 0,96a 4,01 0,94a

Mdias seguidas de letras diferentes na linha diferem (p<0,05) significativamente.

78

CONCLUSES As caractersticas de qualidade dos ovos foram afetadas com a adio de

prpolis dieta de poedeiras. As condies de armazenamento dos ovos influenciaram os aspectos de colorao da gema e anlise sensorial, notando-se diferenas nos aspectos de cor e textura da gema e clara de ovos estocados em temperatura ambiente e odor da clara e da gema de ovos estocados em temperatura de refrigerao. Os ovos acondicionados sob temperatura ambiente apresentaram alteraes na sua qualidade interna, o que seria resolvido, se os ovos assim que chegassem aos supermercados fossem acondicionados em temperatura de refrigerao para assim manter por mais tempo a integridade dos ovos.

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82

CAPTULO 5

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CONSIDERAES FINAIS

A prpolis possui potencial de utilizao e aplicao, principalmente em sistemas considerados orgnicos, por se tratar de um produto natural e economicamente vivel, pois, sua atividade, no compete em recursos de produo com as atividades j existentes na empresa rural. Mesmo quando produzida em baixa escala ou em atividades que no sejam direcionadas a sua produo, esta pode ser desenvolvida de maneira consorciada com outras culturas, agregando valor ao produto final, ampliando efetivamente os ganhos na propriedade e no ecossistema local. De acordo com as condies em que foi conduzido este experimento e devido aos resultados encontrados apresentaram-se divergentes conforme o nvel de prpolis empregado no foi possvel inferir de forma precisa sobre a utilizao da prpolis nos nveis de 1, 2 e 3% na dieta de poedeiras. Mais estudos so necessrios para identificao da melhor dose-resposta para incluso da prpolis como aditivo alimentar para poedeiras, alm das melhores formas de fornecimento, se in natura, extrato etanlico, assim como a descrio dos aspectos organolpticos e laboratoriais e, principalmente sua descrio levando em considerao a sua origem vegetal. Portanto, devem-se realizar mais trabalhos com diferentes nveis de adio de prpolis e em poedeiras em pico de produo, para assim avaliar a influncia da prpolis sobre as caractersticas de desempenho e qualidade dos ovos.