Fecha Miercoles 19 de Junio del 2013 U.M.S.A. | Microbiologia | CIV 358
1. Objetivos Generales. Comprender la importancia que tiene la toma de muestras microbiologicas, ademas de los requisitos que deben cumplir estas. Poner en practica las tecnicas correctas para una buena extraccion de toma de muestra.
2. Objetivos Especficos. Saber que tipo de muestra es necesaria y como se obtiene para el estudio microbiologico de sus diIerentes parametros. Conocer la correcta seleccion de recipientes segun sea el tipo de muestra. Conocer los metodos de obtencion de las muestras segun el tipo de Iuente. Conocer la extraccion, manejo y seleccion correcta de una muestra. 3. Introduccin. Para que un analisis microbiologico de aguas de resultados precisos es necesario tomar muestras representativas y ver que no se produzca una contaminacion accidental en el momento del muestreo y su conservacion de las mismas hasta el momento de su procesamiento.
Las personas encargadas de recolectar las muestras, deben estar debidamente entrenadas, tener conocimientos de saneamiento y mucha responsabilidad.
Cuando se toman muestras de agua desinIectada, en el momento de recogerlas debe determinarse la concentracion del cloro residual y el pH en el punto de toma.
En un muestreo que implique tanto los analisis Iisicoquimicos como los microbiologicos, primero se debe tomar la muestra para los analisis microbiologicos y luego para los otros parametros, esto con el Iin de evitar el riesgo de contaminacion local que pudiera ocurrir. Por tanto, es primordial que la toma de muestra se realice con todas las consideraciones mencionadas, esto para disminuir la probabilidad de obtener un resultado, Ialso positivo o Ialso negativo.
La recoleccion de las muestras es relativamente sencilla y debe cumplir determinados requisitos por Normas Internacionales que sealan: U.M.S.A. | Microbiologia | CIV 358
a) Numero de muestras b) Frecuencia con la que deben tomarse las muestras c) IdentiIicacion de las muestras d) Clases de recipientes que deben utilizarse. e) Transporte y conservacion
a) Nuero de muestras Las normas internacionales han propuesto guias generales que sealan un numero determinado de muestras y los intervalos en que deben ser tomadas para ser analizadas de acuerdo al numero de habitantes, de la poblacion abastecida por un sistema de agua, en el caso de agua distribuida por red. Pero, por otro lado en el caso de otros tipos de Iuente de agua el numero de muestras se debe adecuar a cada situacion particular.
b) Frecuencia de muestreo La Irecuencia de la toma de muestras de agua tratada que sale de las plantas de tratamiento dependera de la calidad de la Iuente y del tipo de tratamiento. Las Irecuencias minimas son: una muestra cada dos semanas en el caso de las plantas que utilizan aguas subterraneas, una muestra por semana cuando se usa una Iuente de agua superIicial.
El muestreo debe ser mas Irecuente cuando se abastece a gran numero de personas expuestas. De acuerdo a las guias de las OPS/OMS la Irecuencia minima de la toma de muestras de agua de consumo humano en el sistema de distribucion es la siguiente:
POBLACION ABASTECIDA No de MUESTRAS MENSUALES Menos de 5000 1 muestra De 5000 a 100000 1 muestra al mes por c/5000 personas Mas de 100000 1 muestra al mes por c/10000 personas mas 10 muestras adicionales
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Seria necesario incrementar el programa de muestreo en:
Casos de epidemias Inundaciones y operaciones de emergencia Despues de la interrupcion del servicio Despues de trabajos de reparacion en la red
c) Identificacin de las muestras Las muestras deben ser perIectamente identiIicadas con la mayor inIormacion posible como ser: Numero de muestra, lugar Iuente, Iecha, hora, sitio, cloro residual si se trata de aguas desinIectadas, el nombre de la persona encargada de tomar la muestra y cualquier otro dato que pueda ser necesario; todo esto debe ir en una etiqueta que se colocara en el Irasco de muestreo, para que los resultados puedan ser interpretados correctamente.
Medidas que se deben cumplir para entregar una muestra al IIS
Fuente. Elaboracion Propia U.M.S.A. | Microbiologia | CIV 358
d) Clases de Recipientes Para el muestreo es conveniente utilizar Irascos de vidrio, de una capacidad de 500 ml por lo menos, de boca ancha, que Iacilite el muestreo, tapa rosca, limpia y esteril.
Tambien pueden usarse Irascos de polipropileno de cuello ancho que soporten temperaturas de la autoclave.
Proteger la tapa del Irasco del muestreo de la contaminacion exterior cubriendolo adecuadamente con el papel especial u hoja de aluminio.
Si las muestras a ser analizadas son tratadas, los Irascos deberan contener un agente declorador pudiendo utilizarse 0.1 ml de una solucion al 1.8 de TiosulIato de sodio para cada 100 ml de muestra, esta cantidad es suIiciente para neutralizar concentraciones de hasta 5 mg/l de cloro residual.
Para el muestreo de aguas poluidas, que se sospeche que contengan concentraciones superiores a 0.01 mg/l de metales pesados tales como el cobre, Zinc, etc., adicionar al Irasco de muestreo antes de su esterilizacion, 0.3 ml de una solucion al 15 de EDTA, para cada 100 ml de muestra.
La solucion de EDTA se puede adicionar al Irasco de muestreo en Iorma separada o conjunta con el TiosulIato de sodio.
La concentracion de TiosulIato y EDTA, no tiene eIecto signiIicativo sobre los microorganismos indicadores durante el almacenamiento de las muestras de agua, ya sean estas cloradas o no.
e) Transporte y Conservacin Una vez realizada la recoleccion de muestras debe ser enviada al laboratorio en el menor tiempo posible. El tiempo maximo entre el muestreo y el analisis no debe exceder las 24 horas, las muestras no deberan ser expuestas a la luz y se las tiene que mantener a una temperatura preIeriblemente entre 4 y 10 C pero no congeladas, si no es imposible cumplir estas condiciones no se analizara la muestra.
El conservador que se use para el transporte debe limpiarse y desinIectar despues de cada uso para evitar cualquier contaminacion durante la recoleccion de muestras. U.M.S.A. | Microbiologia | CIV 358
4. Seleccin de los puntos de Muestreo. Los puntos de muestreo deberan ser seleccionados de tal manera que sean representativos de las diIerencias Iuentes. Estos puntos deberan estar distribuidos uniIormemente.
Los puntos de muestreo deberan estar ubicados en los tres tipos de distribucion (abiertos, cerrados, mixtos). Debera haber por lo menos un punto de muestreo inmediatamente despues de la salida de agua limpia de cada planta de tratamiento. Cuando se tomen muestras del sistema de distribucion, deben elegirse los griIos con un cuidado especial.
Deben provenir directamente de las tuberias de la red publica. Descartar aquellos que tengan Iugas entre el tambor y el cuello y sean de uso inconstante.
5. Toma de Muestras. Toma de Muestras en GriIos. El Irasco para la toma de estas muestras debera tener un agente declorador Se elegira el griIo de mayor uso y que no presente Iugas. Se desinIecta la boca del griIo con la ayuda de un algodon embebido en alcohol Se abre el griIo y se hace chorrear el agua durante dos a tres minutos. Se reduce el chorro de agua al grosor de un lapiz, se Ilamea la boca del Irasco y se procede a recolectar la muestra, teniendo cuidado de no tocar con los dedos la boca del Irasco, con objeto de no contaminarlo. Se toma la muestra dejando por lo menos un espacio de 12 mm por encima, esto con el objeto de poder homogenizar la muestra antes de realizar el analisis. Con la ayuda del termometro se toma la temperatura de la muestra, realizado previamente la desinIeccion del termometro. Se Ilamea la boca del Irasco, se tapa y se cubre con el papel madera a manera de capucha que se sujeta con la ayuda de un cordel. Se anota en una etiqueta la hora, la Iecha y el lugar de captacion de la muestra, Iuente, condiciones de transporte, temperatura, nombre de la persona que tomo la muestra, ciudad y zona. U.M.S.A. | Microbiologia | CIV 358
Desinfeccion de la boca del grifo con alcohol embebido en alcohol
Fuente. Elaboracion Propia
Toma de Muestra de una Fuente.
Cuando se toman muestras directamente de un rio, arroyo, lago, reservorio, manantial, vertiente o pozo poco proIundo, el objetivo debe ser obtener una muestra que sea representativa del origen, en ese sentido no es conveniente tomar muestras demasiado proximas a la orilla, o muy distantes del punto de extraccion, o del sedimento cerca del Iondo. Deberan evitarse los lugares donde el agua este estancada.
Para tomar la muestra sumergir el Irasco en el agua, de preIerencia con el cuello hacia abajo, hasta una proIundidad de 15-30 |cm|. Para evitar asi los desechos Ilotante. Despues debera enderezarse el Irasco colocando el cuello hacia arriba, con la boca contra la corriente; cuando no haya corriente, el Irasco se empujara horizontalmente a traves del agua.
Cuando se tomen muestras de un pozo, o de las proIundidades de un lago, resevorio o cisterna, debera utilizarse un Irasco o jarra de muestreo esterilizado, especialmente lastrado para Iacilitar su inmersion.
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Toma de Muestra de Pozo
Cuando se toma muestra de un pozo que cuenta con una bomba de mano o mecanica, es necesario conectar la bomba antes de tomar la muestra para vaciar toda el agua que podria haberse quedado retenida en las tuberias. De ser posible, la boca de la bomba debe Ilamearse o desinIectar, debe bombearse y dejar corre una cantidad adicional de agua antes de tomar la muestra, la misma que se hara dejando que el agua de la bomba Iluya directamente al interior del Irasco del muestreo.
6. Equipo y Material.
Algodon Alcohol FosIoro Probeta Reloj o cronometro Frasco con tapa esmerilada, esteril Papel madera y cordel Marcador Termometro Conservador Frascos que se utili:an para la recoleccion de muestras
Fuente. Elaboracion Propia U.M.S.A. | Microbiologia | CIV 358
7. Procedimiento y Resultados. Puesto que la muestra tiene la siguiente etiqueta:
Grupo AlIa Fecha No recuerdo** Hora No recuerdo** Temperatura 14 |C| Lugar Laboratorio del Instituto de Sanitaria Sitio GriIo del Laboratorio de Microbiologia Fuente Milluni
** Eso me pasa por realizar los inIormes a ultima hora
Se procedio a realizar la toma de muestra de acuerdo a lo mencionado en el punto 5 en lo que reIiere a toma de muestras de griIos.
8. Conclusiones.
La muestra obtenida es representativa puesto que se tomaron las debidas consideraciones de muestreo para toma de muestras en griIos.
Con respecto al tipo de envase usado este es de caracter esteril, sin ningun tipo de contaminante, pero con una solucion de TiosulIato ya que se trata de agua tratada o desinIectada.