UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN FACULTAD DE CIENCIAS AGRCOLAS ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE AGRONOMA

RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS

CURSO: BIOQUIMICA PRACTICA: N 06 ALUMNO: CODIGO: PROFESOR: CESAR NICOLAS CASERES MUSAJA GRUPO:

TACNA- PERU 2013

I.

RESULTADOS:

A. ACCIN ENZIMTICA DE LA CATALASA En un tubo de ensayo colocar trocito de papa. Agregar 2ml de perxido de hidrgeno y dejar en reposo por 1 minuto. REACCION:

Observacin: En la papa se observa un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxgeno. En el geranio se observa un burbujeo dbil a comparacin de la papa.

B. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA CATALASA Hacer hervir pequeos trozos de papa a alta temperatura. Hacer lo mismo con el geranio. Lugo de hacerlo hervir enfriar un poco y agregarle 2ml. de perxido de hidrogeno.

Observacin: la alta temperatura inactiva la enzima catalasa de tal manera que no acta sobre el sustrato,ya que la catalasa qumicamente es una protena, podemos desnaturalizarla al someterla a altas temperaturas. Al perder la estructura terciaria, perder tambin la funcin cataltica, por lo que no podr

descomponer el agua oxigenada y no se observa ningn tipo de reaccin en el geranio y la papa.

C. ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LA AMILASA 1. Sistema de incubacion : En dos tubos de ensayo (I y II)agregar 2ml de solucion de almidon 1% y luego 2ml de agua destilada. Colocar los tubos a bao maria a 37 C por 2 minutos. Luego agregar al tubo II, 3ml. de amilasa salival. Incubar los tubos por 10 minutos a 37 C

Observacin:nose observa ninguna reaccin a simple vista molecularmente la amilasa desdobla al almidn en maltosa y dextrinas.

2. Control de la actividad enzimtica por el producto residual (sustrato) De los tubos I y II incubado transferir 2ml. a otros 2 tubos. Luego aadir dos gotas ml. de lugol diluido Mezclar ,

TUBO (I) Observacion:

TUBO (II)

En el tubo(I) la solucin toma un color negro ya que sefija el yodo en el almidn . En el tubo (II) la fijacin es de color amarillo porque hay presencia de maltosa y dextrina y el almidon desapareci.

3. Control de la actividad ensimatica de los productos formados. De los tubos I y II incubados transferir 1ml. a otros dos dos tubos previamente rotulados. Agregar a cada tubo 2ml. del reactivo de benedict. Colocar a bao maria en ebullicion por 5 minutos.

Observacion:reaccin o prueba de Benedict identifica azcares reductores. La reaccion con la maltosa tubo II da un color azul. La reaccion de ltubo dos es de color verde por la presencia de azucares reductores

D. SENSIBILIDAD DE LA AMILASA SALIVAL AL EFECTO DE PH.

Primer orden

En un tubo de ensayo colocar un poco de solucin de almidn Agregar 4 gotas de acido clorhidrico. Agregar 1ml. de saliva agregar 2 ml. de lugo Observacion:El acido inactiva la actividad de la enzima. por la presencia del almidon al echar gotas de lugol esta se pinta de color negro

Segundo orden

En un tubo de ensayo colocar un poco de solucin de almidn Agregar 1ml. de saliva Agregar 4 gotas de acido clorhidrico. agregar 2 ml. de lugo Observacion:La amilasa reacciona tan rpido que desdobla el almidn en maltosa y dextrina antes de tener contacto con el acido esto se confima con la aplicacin del lugol ya que no se fija el yodo en las cadenas del almidn ya que desaparecio.

II.

DISCUSION DE RESULTADOS: Los resultados de los experimentos son conformes a la bibliografa

III.

CUESTIONARIO: Indique las principales propiedades de las enzimas.

1. Son protenas que poseen un efecto catalizador al reducir la barrera energtica de ciertas reacciones qumicas. 2. Influyen slo en la velocidad de reaccin sin alterar el estado de equilibrio. 3. Actan en pequeas cantidades. 4. Forman un complejo reversible con el sustrato. 5. No se consumen en la reaccin, pudiendo actuar una y otra vez. 6. Muestran especificidad por el sustrato. 7. Su produccin est directamente controlada por genes. Cmo demostramos la actividad enzimtica experimentalmente? El H2O2 es txico para la mayora de los organismos vivos. Muchos organismos son capaces de destruir el H2O2 mediante la accin de enzimas antes de que pueda realizar mucho dao. El H2O2 se convierte en oxgeno y agua. Qu es un zimgeno? Cite al menos 4 ejemplos. Sustancia protenica especfica que origina una enzima. Los zimgenos son los precursores de las enzimas:ejemplo: el tripsingeno, el quimotripsingeno, el fibringeno, el tromboplastingeno, la proacelerina, etc. Cul es la diferencia entre hormona y enzima? Una hormona es una sustancia segregada por las diferentes glndulas de nuestro organismo. Una enzima es un catalizador que interviene en los procesos de transformacin del metabolismo de los seres vivos. Cuntas clases de inhibidores se conocen que afecta la actividad enzimtica? Inhibicin irreversible. Algunos inhibidores se combinan de modo permanente con el enzima unindose covalentemente a algn grupo funcional esencial para la catlisis con lo que el enzima queda inactivado irreversiblemente. Este tipo de inhibicin se conoce tambin como "envenenamiento" del enzima. Por ejemplo algunos compuestos organofosforados txicos

Inhibicin reversible. Los inhibidores reversibles se combinan transitoriamente con el enzima, de manera parecida a como lo hacen los propios sustratos. Algunos inhibidores reversibles no se combinan con el enzima libre sino con el complejo enzimasustrato. Se distinguen tres tipos de inhibicin reversible: 1. Inhibicin competitiva. El inhibidor es una molcula que presenta un cierto parecido estructural con el sustrato, de manera que puede competir con l por acceder al centro activo, pero que no posee ningn enlace susceptible de ser atacado por el enzima. El inhibidor forma con el enzima libre un complejo enzima-inhibidor de caractersticas cinticas anlogas a las del complejo enzima-sustrato, pero que, lgicamente, no puede descomponerse a continuacin para dar lugar al enzima libre y a los productos: 2. Inhibicin incompetitiva. El inhibidor no se combina con el enzima libre ni afecta a su unin al sustrato, sino que lo hace con el complejo enzima-sustrato dando lugar a un complejo inactivo enzima-sustrato-inhibidor, que no se descompone posteriormente para dar lugar a los productos. El inhibidor se coloca prximo al centro activo situado de tal manera que impide fsicamente la salida de los productos. 3. Inhibicin no competitiva. El inhibidor puede combinarse con el enzima libre o bien con el complejo enzimasustrato, interfiriendo en la accin de ambos. Los inhibidores no competitivos se unen a un lugar del enzima diferente del centro activo provocando en l una alteracin que dificulta bien la formacin del complejo enzima-sustrato o bien la descomposicin de ste para dar lugar a los productos. La unin con el inhibidor produce dos formas inactivas: los complejos EI y ESI, ninguna de las cuales puede descomponerse para dar lugar a los productos y al enzima libre:

IV.

CONCLUSIONES: Se demostr la solubilidad e insolubilidad de los lpidos. Realizamos el proceso de saponificacin.

V.

BIBLIOGRAFICA: http://jose-canel.blogspot.com/p/presencia-y-desnaturalizacion-de-la.html http://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_de_Benedict http://www2.vernier.com/sample_labs/CMV-03-enigma.pdf http://www.portalesmedicos.com/diccionario_medico/index.php/Zimogeno http://www.bionova.org.es/biocast/documentos/tema14.pdf