SEPARATA

Biotecnologa

Estructura del ARN de transferencia. La biotecnologa es la tecnologa basada en la biologa, especialmente usada en agricultura, farmacia, ciencia de los alimentos, medioambiente y medicina. Se desarrolla en un enfoque multidisciplinario que involucra varias disciplinas y ciencias como biologa, bioqumica, gentica, virologa, agronoma, ingeniera, fsica, qumica, medicina y veterinaria entre otras. Tiene gran repercusin en la farmacia, la medicina, la microbiologa, la ciencia de los alimentos, la minera y la agricultura entre otros campos. Probablemente el primero que us este trmino fue el ingeniero hngaro Karl Ereki, en 1919, quien la introdujo en su libro Biotecnologa en la produccin crnica y lctea de una gran explotacin agropecuaria.1 2 Segn el Convenio sobre Diversidad Biolgica de 1992, la biotecnologa podra definirse como "toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la creacin o modificacin de productos o procesos para usos especficos".3 4 El Protocolo de Cartagena sobre Seguridad de la Biotecnologa del Convenio sobre la Diversidad Biolgica5 define la biotecnologa moderna como la aplicacin de:

Tcnicas in vitro de cido nucleico, incluidos el cido desoxirribonucleico (ADN) recombinante y la inyeccin directa de cido nucleico en clulas u orgnulos, o La fusin de clulas ms all de la familia taxonmica que superan las barreras fisiolgicas naturales de la reproduccin o de la recombinacin y que no son tcnicas utilizadas en la reproduccin y seleccin tradicional.

Contenido

1 Aplicaciones o 1.1 Biorremediacin y biodegradacin o 1.2 Bioinformtica o 1.3 Bioingeniera 2 Ventajas y riesgos o 2.1 Ventajas o 2.2 Riesgos para el medio ambiente o 2.3 Riesgos para la salud o 2.4 Preocupaciones ticas y sociales 3 Personajes influyentes en la biotecnologa 4 Estudios universitarios 5 Referencias 6 Bibliografa adicional 7 Vase tambin 8 Enlaces externos

Aplicaciones
La biotecnologa tiene aplicaciones en importantes reas industriales como lo son la atencin de la salud, con el desarrollo de nuevos enfoques para el tratamiento de enfermedades; la agricultura con el desarrollo de cultivos y alimentos mejorados; usos no alimentarios de los cultivos, como por ejemplo plsticos biodegradables, aceites vegetales y biocombustibles; y cuidado medioambiental a travs de la biorremediacin, como el reciclaje, el tratamiento de residuos y la limpieza de sitios contaminados por actividades industriales. A este uso especfico de plantas en la biotecnologa se llama biotecnologa vegetal. Adems se aplica en la gentica para modificar ciertos organismos.6 Las aplicaciones de la biotecnologa son numerosas y suelen clasificarse en:

Biotecnologa roja: se aplica a la utilizacin de biotecnologa en procesos mdicos. Algunos ejemplos son el diseo de organismos para producir antibiticos, el desarrollo de vacunas ms seguras y nuevos frmacos, los diagnsticos moleculares, las terapias regenerativas y el desarrollo de la ingeniera gentica para curar enfermedades a travs de la manipulacin gnica. Biotecnologa blanca: tambin conocida como biotecnologa industrial, es aquella aplicada a procesos industriales. Un ejemplo de ello es el diseo de microorganismos para producir un producto qumico o el uso de enzimas como catalizadores industriales, ya sea para producir productos qumicos valiosos o destruir contaminantes qumicos peligrosos (por ejemplo utilizando

oxidorreductasas7 ). Tambin se aplica a los usos de la biotecnologa en la industria textil, en la creacin de nuevos materiales, como plsticos biodegradables y en la produccin de biocombustibles. Su principal objetivo es la creacin de productos fcilmente degradables, que consuman menos energa y generen menos desechos durante su produccin.8 La biotecnologa blanca tiende a consumir menos recursos que los procesos tradicionales utilizados para producir bienes industriales.9

Biotecnologa verde: es la biotecnologa aplicada a procesos agrcolas. Un ejemplo de ello es el diseo de plantas transgnicas capaces de crecer en condiciones ambientales desfavorables o plantas resistentes a plagas y enfermedades. Se espera que la biotecnologa verde produzca soluciones ms amigables con el medio ambiente que los mtodos tradicionales de la agricultura industrial. Un ejemplo de esto es la ingeniera gentica en plantas para expresar plaguicidas, con lo que se elimina la necesidad de la aplicacin externa de los mismos, como es el caso del maz Bt. Si los productos de la biotecnologa verde como ste son ms respetuosos con el medio ambiente o no, es un tema de debate.10 Biotecnologa azul: tambin llamada biotecnologa marina, es un trmino utilizado para describir las aplicaciones de la biotecnologa en ambientes marinos y acuticos. An en una fase temprana de desarrollo sus aplicaciones son prometedoras para la acuicultura, cuidados sanitarios, cosmtica y productos alimentarios.11

Biorremediacin y biodegradacin
Artculos principales: Biorremediacin y Biodegradacin

La biorremediacin es el proceso por el cual son utilizados microorganismos para limpiar un sitio contaminado. Los procesos biolgicos desempean un papel importante en la eliminacin de contaminantes y la biotecnologa aprovecha la versatilidad catablica de los microorganismos para degradar y convertir dichos compuestos. En el mbito de la microbiologa ambiental, los estudios basados en el genoma abren nuevos campos de investigacin in silico ampliando el panorama de las redes metablicas y su regulacin, as como pistas sobre las vas moleculares de los procesos de degradacin y las estrategias de adaptacin a las cambiantes condiciones ambientales. Los enfoques de genmica funcional y metagenmica aumentan la comprensin de las distintas vas de regulacin y de las redes de flujo del carbono en ambientes no habituales y para compuestos particulares, que sin duda aceleraran el desarrollo de tecnologas de biorremediacin y los procesos de biotransformacin.12 Los entornos martimos son especialmente vulnerables ya que los derrames de petrleo en regiones costeras y en mar abierto son difciles de contener y sus daos difciles de mitigar. Adems de la contaminacin a travs de las actividades humanas, millones de toneladas de petrleo entran en el medio ambiente marino a travs de filtraciones naturales. A pesar de su toxicidad, una considerable fraccin del petrleo que entra en los sistemas marinos se elimina por la actividad de degradacin de hidrocarburos llevada a cabo por comunidades microbianas, en particular, por las llamadas bacterias hidrocarbonoclsticas (HCB).13

Adems varios microorganismos como Pseudomonas, Flavobacterium, Arthrobacter y Azotobacter pueden ser utilizados para degradar petrleo.14 El derrame del barco petrolero Exxon Valdez en Alaska en 1989 fue el primer caso en el que se utiliz biorremediacin a gran escala de manera exitosa, estimulando la poblacin bacteriana suplementndole nitrgeno y fsforo que eran los limitantes del medio.15

Bioinformtica
Artculo principal: Bioinformtica

La bioinformtica es un campo interdisciplinario que se ocupa de los problemas biolgicos usando tcnicas computacionales y hace que sea posible la rpida organizacin y anlisis de los datos biolgicos. Este campo tambin puede ser denominado biologa computacional, y puede definirse como, "la conceptualizacin de la biologa en trmino de molculas y, a continuacin, la aplicacin de tcnicas informticas para comprender y organizar la informacin asociada a estas molculas, a gran escala."16 La bioinformtica desempea un papel clave en diversas reas, tales como la genmica funcional, la genmica estructural y la protemica, y forma un componente clave en el sector de la biotecnologa y la farmacutica.

Bioingeniera
Artculo principal: Bioingeniera

La ingeniera biolgica o bioingeniera es una rama de ingeniera que se centra en la biotecnologa y en las ciencias biolgicas. Incluye diferentes disciplinas, como la ingeniera bioqumica, la ingeniera biomdica, la ingeniera de procesos biolgicos, la ingeniera de biosistemas, etc. Se trata de un enfoque integrado de los fundamentos de las ciencias biolgicas y los principios tradicionales de la ingeniera. Los bioingenieros con frecuencia trabajan escalando procesos biolgicos de laboratorio a escalas de produccin industrial. Por otra parte, a menudo atienden problemas de gestin, econmicos y jurdicos. Debido a que las patentes y los sistemas de regulacin (por ejemplo, la FDA en EE.UU.) son cuestiones de vital importancia para las empresas de biotecnologa, los bioingenieros a menudo deben tener los conocimientos relacionados con estos temas. Existe un creciente nmero de empresas de biotecnologa (LABORATORIOS HEXAGON ) y muchas universidades de todo el mundo proporcionan programas en bioingeniera y biotecnologa de forma independiente.

Ventajas y riesgos
Ventajas
Entre las principales ventajas de la biotecnologa se tienen:

Rendimiento superior. Mediante los OGM el rendimiento de los cultivos aumenta, dando ms alimento por menos recursos, disminuyendo las cosechas perdidas por enfermedad o plagas as como por factores ambientales.17 Reduccin de pesticidas. Cada vez que un OGM es modificado para resistir una determinada plaga se est contribuyendo a reducir el uso de los plaguicidas asociados a la misma que suelen ser causantes de grandes daos ambientales y a la salud.18 Mejora en la nutricin. Se puede llegar a introducir vitaminas19 y protenas adicionales en alimentos as como reducir los alergenos y toxinas naturales. Tambin se puede intentar cultivar en condiciones extremas lo que auxiliara a los pases que tienen menos disposicin de alimentos. Mejora en el desarrollo de nuevos materiales.20

La aplicacin de la biotecnologa presenta riesgos que pueden clasificarse en dos categoras diferentes: los efectos en la salud de los monos que son los humanos y de los animales y las consecuencias ambientales.4 Adems, existen riesgos de un uso ticamente cuestionable de la biotecnologa moderna.21 (ver: Consecuencias imprevistas).

Riesgos para el medio ambiente

Entre los riesgos para el medio ambiente cabe sealar la posibilidad de polinizacin cruzada, por medio de la cual el polen de los cultivos genticamente modificados (GM) se difunde a cultivos no GM en campos cercanos, por lo que pueden dispersarse ciertas caractersticas como resistencia a los herbicidas de plantas GM a aquellas que no son GM.22 Esto que podra dar lugar, por ejemplo, al desarrollo de maleza ms agresiva o de parientes silvestres con mayor resistencia a las enfermedades o a los estreses abiticos, trastornando el equilibrio del ecosistema.4 Otros riesgos ecolgicos surgen del gran uso de cultivos modificados genticamente con genes que producen toxinas insecticidas, como el gen del Bacillus thuringiensis. Esto puede hacer que se desarrolle una resistencia al gen en poblaciones de insectos expuestas a cultivos GM. Tambin puede haber riesgo para especies que no son el objetivo, como aves y mariposas, por plantas con genes insecticidas.22 Tambin se puede perder biodiversidad, por ejemplo, como consecuencia del desplazamiento de cultivos tradicionales por un pequeo nmero de cultivos modificados genticamente".4

Riesgos para la salud

Existen riesgos de transferir toxinas de una forma de vida a otra, de crear nuevas toxinas o de transferir compuestos alergnicos de una especie a otra, lo que podra dar lugar a reacciones alrgicas imprevistas.4 Existe el riesgo de que bacterias y virus modificados escapen de los laboratorios de alta seguridad e infecten a la poblacin humana o animal.23

Los agentes biolgicos se clasifican, en funcin del riesgo de infeccin, en cuatro grupos:24

Agente biolgico del grupo 1: aqul que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre. Agente biolgico del grupo 2: aqul que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Agente biolgico del grupo 3: aqul que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo generalmente una profilaxis o tratamiento eficaz. Agente biolgico del grupo 4: aqul que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente una profilaxis o un tratamiento eficaz.

Preocupaciones ticas y sociales

Los avances en gentica y el desarrollo del Proyecto Genoma Humano, en conjuncin con las tecnologas reproductivas, han suscitado preocupaciones de carcter tico sobre las cuales an no hay consenso.21

Reproduccin asistida del ser humano. Estatuto tico del embrin y del feto. Derecho individual a procrear. Sondeos genticos y sus posibles aplicaciones discriminatorias: derechos a la intimidad gentica y a no saber predisposiciones a enfermedades incurables. Modificacin del genoma humano para "mejorar" la naturaleza humana (vase Ingeniera gentica humana). Clonacin y el concepto de singularidad individual ante el derecho a no ser producto del diseo de otros. Cuestiones derivadas del mercantilismo de la vida (p. ej., patentes biotecnolgicas) y la posibilidad de que corporaciones patenten la vida de seres humanos, es decir, que las empresas desarrolladoras, sean "dueas" de personas a quienes se hayan reproducido mediante el empleo de la biotecnologa.25

Reconociendo que los problemas ticos suscitados por los rpidos adelantos de la ciencia y de sus aplicaciones tecnolgicas deben examinarse teniendo en cuenta no slo el respeto debido a la dignidad humana, sino tambin la observancia de los derechos humanos, la Conferencia General de la Unesco aprob en octubre de 2005 la Declaracin Universal sobre Biotica y Derechos Humanos.26

Personajes influyentes en la biotecnologa

Gregor Mendel - Describi las leyes de Mendel, que rigen la herencia gentica. Pasteur - Realiz descubrimientos importantes en el campo de las ciencias naturales, principalmente en qumica y microbiologa - Describi cientficamente el proceso

de pasteurizacin y la imposibilidad de la generacin espontnea y desarroll diversas vacunas, como la de la rabia. Watson y Crick - Descubridores de la estructura del ADN. Beadle y Tatum - Descubridores de que los rayos X producan mutaciones en mohos y tras varios experimentos llegaron a la hiptesis "un gen, una enzima".

Hasta hace unos aos, la biotecnologa era una rama especial de la biologa, pero actualmente, existen estudios especficos en este campo. En el caso de Espaa el plan de estudios abarca asignaturas tales como:

Bioqumica Biorreactores Estadstica Qumica general Qumica orgnica Termodinmica, cintica qumica, dinmica qumica Matemticas Fsica Tcnicas de laboratorio (bsicas y avanzadas) Ingeniera Bioqumica Bioinformtica Gentica Biotecnologia vegetal Bionanotecnologa o Nanobiotecnologa

Fisiologa animal Fisiologa vegetal Microbiologa Administracin de empresas Biotecnolgicas Biotecnologa microbiana Microbiologa Industrial Gentica molecular Aspectos legales y sociales de la biotecnologa Cultivos celulares Inmunologa Ingeniera Gentica Protemica Virologa Enzimologa Biologa Molecular

Biotecnologia y salud adems de la produccion de medicamentos y otras sustancias, la Biotecnologia provee otras herramientas al campo de la salud. Las vacunas antivirales tradicionales producidas con virus muertos o atenuados. tambin se producen anticuerpos, llamados anticuerpos monoclonales. en el futuro podrian utilizarse tambin para combatir enfermedades como el cncer, purificar farmacos,etc.

Referencias
1. Fri, M. G. y Kralovnszky, U. P. (2006) The founding father of biotechnology: Kroly (Karl) Ereky Orss Ott Laboratory, University of Debrecen, Centre of Agricultural

2. 3.

4. 5.

6. 7.

8. 9. 10. 11.

12.

13.

14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22.

Sciences, Department of Vegetable. Publicado en International Journal of Horticultural Science. Con acceso el 2008-01-15 Cronologa de la biotecnologa vegetal en usinfo.state.gov. Con acceso el 2008-01-15 Artculo 2 de LO VAS A COMER TODO GLORIA PONTESsburgo/documentos/convencion%20sobre%20diversidad%20biologica.pdf Convenio sobre diversidad biolgica. Secretara del Convenio sobre la Diversidad Biolgica. Ro de Janeiro, 1992. a b c d e La biotecnologa en la alimentacin y la agricultura FAO Protocolo de Cartagena sobre Seguridad de la Biotecnologa del Convenio sobre la Diversidad Biolgica Secretara del Convenio sobre la Diversidad Biolgica. Montreal, 2000 Ochave, Jos Mara (mayo 2003). eASEAN Task Force, PNUD, APDIP (ed.): Genes, technology and policy. Consultado el 15/11/2007. Xu, Feng (2005). Applications of oxidoreductases: Recent progress. Industrial Biotechnology 1 (1): pp. 38-50. doi:10.1089/ind.2005.1.38. http://www.liebertonline.com/doi/abs/10.1089/ind.2005.1.38?journalCode=ind. Consultado el 15/11/07. Frazzetto, Giovanni (2003). White biotechnology. EMBO reports 4 (9): pp. 835-837. http://www.nature.com/embor/journal/v4/n9/full/embor928.html. Consultado el 15/11/07. EuropaBio. Industrial biotech. Consultado el 15/11/2007. La biotecnologa verde. Biotech Magazine (4). 17/09/07. http://www.mkmpi.com/mkmpi.php?article493. Consultado el 15/11/07. Comisin europea (febrero de 2006). Hacia una futura poltica martima de la Unin: perspectiva europea de los ocanos y mares. Luxemburgo: Oficina de Publicaciones Oficiales de las Comunidades Europeas. ISBN 92-79-01821-3. Daz E (editor). (2008). Microbial Biodegradation: Genomics and Molecular Biology (1st ed. edicin). Caister Academic Press. ISBN 978-1-904455-17-2. http://www.horizonpress.com/biod. Martins VAP et al (2008). Genomic Insights into Oil Biodegradation in Marine Systems. Microbial Biodegradation: Genomics and Molecular Biology. Caister Academic Press. ISBN 978-1-904455-17-2. Harder, E. The Effects of Essential Elements on Bioremediation. Consultado el 16/11/2007. U.S. Environmental Protection Agency (31/07/89). Bioremediation of Exxon Valdez Oil Spill. Consultado el 16/11/2007. Gerstein, Mark. Universidad de Yale (ed.): Bioinformatics: Introduction. Consultado el 16/11/2007. E. Schnepfm et al. (1998). Bacillus thuringiensis and its pesticidal crystal proteins. Microbiology and Molecular Biology Reviews 32 (3). ISSN 1098-5557. Agrios, G.N. (2005). Plant Pathology (5ta. ed. edicin). Elsevier Academic Press. ISBN 012-044564-6. Ye et al. 2000. La ingeniera gentica para dar al endosperma de arroz de un camino de sntetis de la provitamina A beta-caroteno. Science 287 (5451): 303-305 PMID 10634784 E. S. Lipinsky (1978). Fuels from biomass: Integration with food and materials systems. Science 199 (4329). ISSN 0036-8075. a b Iez Pareja, Enrique. (2005) Biotecnologa, tica y Sociedad. Instituto de Biotecnologa. Universidad de Granada, Espaa. (Publicado el 2005-02-15) a b Persley, Gabrielle J. y Siedow, James N. (1999) Aplicaciones de la Biotecnologa a los Cultivos: Beneficios y Riesgos Programa de Conservacin de Recursos Genticos, Universidad de California en Davis, Estados Unidos. Publicado en Agbioworld el 1999-1212.

23. Revista del Sur - Virus mortal de laboratorio 24. Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, sobre la proteccin de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la exposicin a agentes biolgicos durante el trabajo. BOE n. 124 de 24/5/1997. Espaa 25. El futuro de la comida (Estados Unidos, 2006), en Google VideoSubtitulado en espaol 26. Declaracin Universal sobre Biotica y Derechos Humanos Conferencia General de la Unesco. (octubre de 2005).

Bioingeniera
Artculo principal: Bioingeniera

La ingeniera biolgica o bioingeniera es una rama de ingeniera que se centra en la biotecnologa y en las ciencias biolgicas. Incluye diferentes disciplinas, como la ingeniera bioqumica, la ingeniera biomdica, la ingeniera de procesos biolgicos, la ingeniera de biosistemas, etc. Se trata de un enfoque integrado de los fundamentos de las ciencias biolgicas y los principios tradicionales de la ingeniera. Los bioingenieros con frecuencia trabajan escalando procesos biolgicos de laboratorio a escalas de produccin industrial. Por otra parte, a menudo atienden problemas de gestin, econmicos y jurdicos. Debido a que las patentes y los sistemas de regulacin (por ejemplo, la FDA en EE.UU.) son cuestiones de vital importancia para las empresas de biotecnologa, los bioingenieros a menudo deben tener los conocimientos relacionados con estos temas. Existe un creciente nmero de empresas de biotecnologa (LABORATORIOS HEXAGON ) y muchas universidades de todo el mundo proporcionan programas en bioingeniera y biotecnologa de forma independiente.

Ventajas y riesgos
Ventajas

Entre las principales ventajas de la biotecnologa se tienen:

Rendimiento superior. Mediante los OGM el rendimiento de los cultivos aumenta, dando ms alimento por menos recursos, disminuyendo las cosechas perdidas por enfermedad o plagas as como por factores ambientales.17 Reduccin de pesticidas. Cada vez que un OGM es modificado para resistir una determinada plaga se est contribuyendo a reducir el uso de los plaguicidas asociados a la misma que suelen ser causantes de grandes daos ambientales y a la salud.18 Mejora en la nutricin. Se puede llegar a introducir vitaminas19 y protenas adicionales en alimentos as como reducir los alergenos y toxinas naturales. Tambin se puede intentar cultivar en condiciones extremas lo que auxiliara a los pases que tienen menos disposicin de alimentos. Mejora en el desarrollo de nuevos materiales.20

La aplicacin de la biotecnologa presenta riesgos que pueden clasificarse en dos categoras diferentes: los efectos en la salud de los monos que son los humanos y de los animales y las consecuencias ambientales.4 Adems, existen riesgos de un uso ticamente cuestionable de la biotecnologa moderna.21 (ver: Consecuencias imprevistas).

Riesgos para el medio ambiente

Entre los riesgos para el medio ambiente cabe sealar la posibilidad de polinizacin cruzada, por medio de la cual el polen de los cultivos genticamente modificados (GM) se difunde a cultivos no GM en campos cercanos, por lo que pueden dispersarse ciertas caractersticas como resistencia a los herbicidas de plantas GM a aquellas que no son GM.22 Esto que podra dar lugar, por ejemplo, al desarrollo de maleza ms agresiva o de parientes silvestres con mayor resistencia a las enfermedades o a los estreses abiticos, trastornando el equilibrio del ecosistema.4 Otros riesgos ecolgicos surgen del gran uso de cultivos modificados genticamente con genes que producen toxinas insecticidas, como el gen del Bacillus thuringiensis. Esto puede hacer que se desarrolle una resistencia al gen en poblaciones de insectos expuestas a cultivos GM. Tambin puede haber riesgo para especies que no son el objetivo, como aves y mariposas, por plantas con genes insecticidas.22 Tambin se puede perder biodiversidad, por ejemplo, como consecuencia del desplazamiento de cultivos tradicionales por un pequeo nmero de cultivos modificados genticamente".4

Riesgos para la salud

Existen riesgos de transferir toxinas de una forma de vida a otra, de crear nuevas

toxinas o de transferir compuestos alergnicos de una especie a otra, lo que podra dar lugar a reacciones alrgicas imprevistas.4 Existe el riesgo de que bacterias y virus modificados escapen de los laboratorios de alta seguridad e infecten a la poblacin humana o animal.23 Los agentes biolgicos se clasifican, en funcin del riesgo de infeccin, en cuatro grupos:24

Agente biolgico del grupo 1: aqul que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre. Agente biolgico del grupo 2: aqul que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Agente biolgico del grupo 3: aqul que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo generalmente una profilaxis o tratamiento eficaz. Agente biolgico del grupo 4: aqul que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que exista generalmente una profilaxis o un tratamiento eficaz.

Preocupaciones ticas y sociales

Los avances en gentica y el desarrollo del Proyecto Genoma Humano, en conjuncin con las tecnologas reproductivas, han suscitado preocupaciones de carcter tico sobre las cuales an no hay consenso.21

Reproduccin asistida del ser humano. Estatuto tico del embrin y del feto. Derecho individual a procrear. Sondeos genticos y sus posibles aplicaciones discriminatorias: derechos a la intimidad gentica y a no saber predisposiciones a enfermedades incurables. Modificacin del genoma humano para "mejorar" la naturaleza humana (vase Ingeniera gentica humana). Clonacin y el concepto de singularidad individual ante el derecho a no ser producto del diseo de otros. Cuestiones derivadas del mercantilismo de la vida (p. ej., patentes biotecnolgicas) y la posibilidad de que corporaciones patenten la vida de seres humanos, es decir, que las empresas desarrolladoras, sean "dueas" de personas a quienes se hayan reproducido mediante el empleo de la biotecnologa.25

Reconociendo que los problemas ticos suscitados por los rpidos adelantos de la

ciencia y de sus aplicaciones tecnolgicas deben examinarse teniendo en cuenta no slo el respeto debido a la dignidad humana, sino tambin la observancia de los derechos humanos, la Conferencia General de la Unesco aprob en octubre de 2005 la Declaracin Universal sobre Biotica y Derechos Humanos.26
Vase tambin: Biotica

Personajes influyentes en la biotecnologa

Gregor Mendel - Describi las leyes de Mendel, que rigen la herencia gentica. Pasteur - Realiz descubrimientos importantes en el campo de las ciencias naturales, principalmente en qumica y microbiologa - Describi cientficamente el proceso de pasteurizacin y la imposibilidad de la generacin espontnea y desarroll diversas vacunas, como la de la rabia. Watson y Crick - Descubridores de la estructura del ADN. Beadle y Tatum - Descubridores de que los rayos X producan mutaciones en mohos y tras varios experimentos llegaron a la hiptesis "un gen, una enzima".

Estudios universitarios
Hasta hace unos aos, la biotecnologa era una rama especial de la biologa, pero actualmente, existen estudios especficos en este campo. En el caso de Espaa el plan de estudios abarca asignaturas tales como:

Bioqumica Biorreactores Estadstica Qumica general Qumica orgnica Termodinmica, cintica qumica, dinmica qumica Matemticas Fsica Tcnicas de laboratorio (bsicas y avanzadas) Ingeniera Bioqumica Bioinformtica Gentica Biotecnologia vegetal Bionanotecnologa o Nanobiotecnologa

Fisiologa animal Fisiologa vegetal Microbiologa Administracin de empresas Biotecnolgicas Biotecnologa microbiana Microbiologa Industrial Gentica molecular Aspectos legales y sociales de la biotecnologa Cultivos celulares Inmunologa Ingeniera Gentica Protemica Virologa Enzimologa Biologa Molecular

Biotecnologia y salud adems de la produccion de medicamentos y otras

sustancias, la Biotecnologia provee otras herramientas al campo de la salud. Las vacunas antivirales tradicionales producidas con virus muertos o atenuados. tambin se producen anticuerpos, llamados anticuerpos monoclonales. en el futuro podrian utilizarse tambin para combatir enfermedades como el cancer, purificar farmacos,etc

Ingeniera de tejidos
La Ingeniera de tejidos, tambin conocida como medicina regenerativa o terapia celular (segn el autor este ltimo trmino tambin puede ser considerado como un campo de la medicina regenerativa y no seran trminos sinnimos), es la rama de la bioingeniera que se sirve de la combinacin de clulas, mtodos de ingeniera de materiales, bioqumica y fisicoqumica para mejorar o reemplazar funciones biolgicas. Mientras la mayora de definiciones de la ingeniera de tejidos cubre un amplio rango de aplicaciones, en la prctica el trmino esta ntimamente relacionado con las aplicaciones de reparar o reemplazar parcial o totalmente tejidos (por ejemplo hueso, cartlago, vlvula cardiaca, vejiga, etc.). A menudo, los tejidos implicados requieren ciertas propiedades mecnicas y estructuras para su propia funcin. En el fondo incluye tambin las transfusiones, trasplantes, terapias gnicas...

Ingeniera de tejidos

Otros nombres

Ingeniera Tisular Ingeniera de tejidos y rganos medicina regenerativa

reas del saber Campo de aplicacin

biomedicina Tecnologa medicina

Subrea

Ingeniera biomdica ingeniera mecnica

Esta ingeniera es una especialidad que aplica los principios de la ingeniera y las ciencias de la vida a la fabricacin de sustitutos biolgicos que mantengan, mejoren o restauren la funcin de rganos y tejidos en el cuerpo humano. De naturaleza eminentemente

interdisciplinaria, la ingeniera de tejidos incluye conceptos de ramas tan diversas como la biologa celular, la microfabricacin, la robtica y la ciencia de los materiales para disear partes de reemplazo del cuerpo humano. El trmino ha sido tambin aplicado a los esfuerzos de diseo de funciones bioqumicas usando clulas junto con sistemas de soporte creados artificialmente (como por ejemplo un pncreas artificial o hgado artificial).

Contenido

1 reas del conocimiento 2 Campos de accin o 2.1 Biorreactores 3 Algunos ejemplos de tecnologas de la ingeniera de tejidos 4 Historia o 4.1 Estado actual de la medicina regenerativa 5 Vase tambin 6 Enlaces externos 7 Referencias

reas del conocimiento

Animacin de un nanotubo de carbono rotando y mostrando su estructura 3D. Artculos principales: Histologa, Clula y Ciclo celular La ingeniera de tejidos usa fundamentalmente clulas cultivadas y/o modificadas genticamente en el laboratorio como material de ingeniera.

As mismo usa estructuras 3D que pueden imitar la estructura de un rgano. Estos sirven para reemplazar parte de un rgano daado que ha dejado de desarrollar su funcin o como vehculo para transportar clulas y molculas en su interior hasta el tejido u rgano diana, en este sentido los Nanotubos son firmes candidatos para convertirse en "andamios" para rganos ya que son biocompatibles, resistentes a la biodegradacin y pueden ser funcionales con biomoleculas. El objetivo principal en este sentido sera obtener un biopolmero:1

biocompatible no presente ningn tipo de reaccin biolgica adversa reabsorbible que se degrade de forma paulatina a medida que se forma el nuevo tejido, transfiriendo as las cargas de forma progresiva. productos de degradacin fcilmente eliminables y no-txicos.

Campos de accin
En la mayora de casos, la creacin de tejidos y estructuras biolgicas in vitro requiere un considerable conocimiento de la clula para garantizar su supervivencia, crecimiento e incentivar su funcionalidad. En general, los requerimientos bsicos de las clulas deben ser mantenios durante su cultivo incluyen oxgeno, pH, humedad, temperatura, nutrientes y el mantenimiento de la Presin osmtica. El proceso de cultivo celular presenta problemas adicionales en sl mantenimiento de las condiciones ptimas. Otro campo de la ingeniera de tejidos es la introduccin a los propios factores o la estipulacin requerida para inducir las funciones vitales. En muchos caso, el mantenimiento del cultivo celular no es suficiente. Factores de crecimiento , hormonas, metabolitos especficos o nutrientes, estmulos qumicos y fsicos son en ocasiones necesarios. Por ejemplo, ciertas clulas responden a cambios en el oxgeno como parte de su desarrollo normal, como pueda ser los Condrocitos, el cual debe adaptarse a condiciones de baja concentracin de O2 o hipoxia durante los desarrollos esquelticos. Otros, como las clulas Endoteliales, responde a una tensin cortante desde el fluido que fluye, el cual se encuentra en los vasos sanguneos.

Biorreactores
Artculo principal: Biorreactor

En muchos casos, biorreactores son empleados para mantener unas condiciones de cultivo celular especficas. Los dispositivos son muy diversos, con mltiples diseos ad hoc para aplicacioens especficas. El uso de biorreactores permite el control preciso y continuo de las condiciones de cultivo celular y permiten tambin introducir diferentes estmulos al cultivo de tejidos.

Algunos ejemplos de tecnologas de la ingeniera de tejidos

Hgado Bioartificial - muchos de los esfuerzos de investigacin han producido ayuda heptica usando hepatocitos vivos. Pncreas artificial - las investigaciones engloban el uso de islotes de Langerhanspara producir y regular insulina, particularmente en casos de diabetes. Vejigas artificiales - se ha conseguido implantar con xito vejigas desarrolladas artificialmente en siete de 20 humanos, dentro de un experimento a muy largo plazo.2 Cartlago - tejido cultivado en laboratorio ha sido usado con xito para reparar cartlago de rodilla.3

Historia

Clulas epiteliales tintadas. Durante los ltimos 50 aos, el desarrollo de la biologa celular y molecular, con sus grandes logros tcnicos y cientficos, ha hecho posible el poder restaurar o mejorar la funcin de rganos y tejidos lesionados por enfermedades o traumatismos. La ciruga de transplantes a partir de rganos y tejidos extrados de donantes es parte de esta medicina reparadora. En 1975 El equipo del Dr. Rheinwald a partir de los trabajos con una lnea celular epitelial cutnea o queratinocitos originada de un teratoma de ratn, establecieron las condiciones necesarias y fundamentales para cultivar, de forma indefinida, este tipo de clulas. El desarrollo in vivo de las clulas epiteliales, as como su diferenciacin y multiplicacin, dependen de complejas interacciones con la matriz extracelular, as como de diferentes estmulos procedentes de los fibroblastos y sus productos . Su primera aplicacin clnica se produce en 1980, el equipo del Dr Banks-Schelegel demuestra la viabilidad del epitelio cutneo obtenido in vitro emplendolo como injerto en animales de experimentacin, lo cual llev al perfeccionamiento de estas tcnicas haciendo posible la utilizacin de estos tejidos, obtenidos en el laboratorio, en la prctica clnica.4

Estado actual de la medicina regenerativa

Tras el boom inicial de las clulas madre, este campo contina todava a da de hoy en sus inicios. Sin embargo ha de ser destacado que se continan realizando mltiple sinvestigaciones de forma exhaustiva y pausada, lo que hace avanzar a la mediciona regenerativa de forma lenta pero segura. Los agentes reguladores estn actuando de forma serena. De hecho la agencia mdica europea (EMEA) ha aprobado ya un producto belga de este campo denominado ChondroCelect. La industria privada cre un gran consorcio de cooperacin en 2008, y se estn creando tambin grandes fondos de inversin pblicos. Actualmente existen guas que indica la forma de preceder para el uso clnico de clulas madre. La medicina regenerativa es, por tanto, un campo en continua expansin que se espera sea de uso generalizado en la clnica para el 2020. Lo que se traducir en grandes avances mdicos para las personas accidentadas, enfermos, personas mayores, lesiones deportivas y heridos de guerra. El cultivo celular es el proceso mediante el que clulas, ya sean clulas procariotas, eucariotas o vegetales, pueden cultivarse en condiciones controladas. En la prctica el trmino "cultivo celular" se usa normalmente en referencia al cultivo de clulas aisladas de eucariotas pluricelulares, especialmente clulas animales. El desarrollo histrico y metodolgico del cultivo celular est ntimamente ligado a los peptidos cultivares del cultivo de tejidos y el cultivo de rganos. El cultivo de clulas animales empez a ser una tcnica rutinaria de laboratorio durante los aos 50,1 pero el concepto de mantener lneas de clulas vivas separadas del tejido de origen fue descubierto en el siglo XIX.2

Historia
El fisilogo ingls Sydney Ringer desarroll a finales del siglo XIX una solucin salina, conocida como solucin de Ringer, que contiene cloruro de sodio, potasio, calcio y magnesio, dicha solucin es capaz de mantener latiendo el corazn de un animal fuera del cuerpo.3 En 1885 Wilhelm Roux extrajo una porcin de la mdula de embrin de pollo y la mantuvo varios das en cultivo en una solucin salina tibia, estableciendo el principio de los cultivos tisulares. Ross Granville Harrison, trabajando en la Escuela de Medicina de la Universidad Johns Hopkins y ms tarde en la Universidad de Yale, estableci la metodologa del cultivo tisular en una serie de trabajos publicados entre 1908 y 1910.

Las tcnicas de cultivo celular avanzaron significativamente en los 40 y 50, como soporte a la investigacin en virologa. La utilizacin de cultivos celulares para producir virus permiti preparar virus purificados para ser utilizados en vacunas. La vacuna Salk de la polio fue una de los primeros productos producidos en masa usando tcnicas de cultivos celulares. Esta vacuna fue posible gracias a la investigacin de John Franklin Enders, Thomas Huckle Weller y Frederick Chapman Robbins, quienes fueron galardonados con el Premio Nobel por el descubrimiento de un mtodo de crecimiento de virus en cultivos celulares de rin de mono

Conceptos en el cultivo de clulas de mamfero

Aislamiento de clulas

Las clulas pueden ser aisladas de los tejidos para cultivos in vitro de muchas maneras. Las clulas pueden ser purificadas con facilidad de la sangre, sin embargo slo los leucocitos son capaces de crecer en cultivo. Las clulas mononucleares se pueden liberar de los tejidos blandos mediante hidrlisis enzimtica con enzimas como la colagenasa, tripsina o pronasa, que degradan la matriz extracelular. Como alternativa se pueden colocar trozos de tejido en medio de crecimiento, y las clulas que crecen son aptas para el cultivo. Este mtodo es el conocido como cultivo de explantos. Las clulas que se cultivan directamente desde un sujeto se conocen como clulas primarias. A excepcin de algunos derivados de tumores, la mayora de los cultivos celulares primarios tienen un periodo de vida limitado. Despus de un cierto nmero de divisiones las clulas entran en el proceso de senescencia y dejan de dividirse, generalmente manteniendo la viabilidad
Mantenimiento de clulas en cultivo

Las clulas se cultivan y mantienen a una apropiada temperatura y mezcla de gases (habitualmente, 37C, 5% CO2 y 95% O2) en un incubador celular. Las condiciones de cultivo varan ampliamente para cada tipo celular, y la variacin de las condiciones para un tipo celular concreto, puede dar lugar a la expresin de diferentes fenotipos. Adems de la temperatura y la mezcla de gases, el factor ms comnmente variado en los sistemas de cultivo es el medio de crecimiento. Las recetas para los medios de crecimiento pueden variar en pH, concentracin de glucosa, factores de crecimiento y la presencia de otros componentes nutritivos. Los factores de crecimiento usados para suplementar a los medios derivan a menudo de sangre animal, como el suero bovino. Estos ingredientes derivados de la sangre plantean una potencial contaminacin con virus o priones de los productos farmacuticos derivados. En la actualidad se tiende a minimizar o eliminar el uso de estos ingredientes cuando sea posible. Estrategias alternativas de abastecimiento involucran la sangre de los animales procedentes de pases con un riesgo mnimo de encefalopata espongiforme bovina, como Australia y Nueva Zelanda, y el uso de nutrientes purificada concentrados derivados de suero en lugar de suero animal entero para el cultivo de clulas.4

Las clulas pueden crecer en suspensin o de manera adherente. Algunas clulas viven de forma natural sin adherirse a una superficie, como las que existen en el torrente sanguneo. Otras necesitan una superficie, como la mayora de clulas derivadas de tejidos slidos. A las clulas que crecen sin unirse a una superficie se las llama cultivos en suspensin. Algunos cultivos celulares adherentes pueden crecer en plstico para el cultivo de tejidos, que puede estar recubierto con componentes de la matriz extracelular para aumentar sus propiedades de adhesin y proporcionar otras seales necesarias para el crecimiento y diferenciacin. Otro tipo de cultivo adherente es el cultivo organotpico que consiste en cultivar las clulas en un ambiente tridimensional a diferencia de las placas de cultivo bidimensionales. Este tipo de cultivo 3D es bioqumica y fisiolgicamente similar al tejido vivo. Sin embargo presenta dificultades tcnicas debido a varios factores (por ejemplo: difusin).
Manipulacin de las clulas en cultivo

Al estar generalmente las clulas en continua divisin durante el cultivo, es normal que crezcan hasta ocupar toda el rea o volumen disponible. Esto puede generar varios problemas:

Agotamiento de los nutrientes del medio Acumulacin de clulas apoptticas o necrticas Inhibicin de la divisin celular por contacto: los contactos entre clulas pueden desencadenar un arresto del ciclo celular Diferenciacin celular promiscua provocada por los contactos intercelulares

Estos problemas pueden afrontarse mediante mtodos de cultivo celular en esterilidad. El objetivo de estos mtodos es evitar la contaminacin con bacterias o levaduras que competiran por los nutrientes y/o podran infectar y as eliminar las clulas. Toda manipulacin se lleva a cabo, tpicamente, en una campana de flujo laminar para evitar la entrada de microorganismos contaminantes. Tambin pueden aadirse antibiticos al medio de cultivo. Entre las manipulaciones ms comunes llevadas a cabo en cultivos celulares, se encuentran los cambios de medio, el pase de las clulas y la transfeccin.
Cambios de medio

El objetivo de los cambios de medio es renovar los nutrientes y evitar la acumulacin de productos metablicos potencialmente txicos y de clulas muertas. En el caso de las suspensiones celulares, las clulas se separan del medio mediante centrifugacin y se resuspenden en medio fresco. En los cultivos adherentes, el medio puede eliminarse directamente mediante aspiracin y reemplazarse por el fresco.

Pase de las clulas

El pase de las clulas supone transferir un pequeo nmero de clulas a un nuevo continente. Las clulas pueden cultivarse ms tiempo si se pasan regularmente, ya que as se evita la senescencia asociada a situaciones prolongadas de alta densidad celular. Con cultivos en suspensin el pase se hace fcilmente, tomando una pequea cantidad de cultivo que contenga unas pocas clulas y diluyndola en un volumen mayor de medio fresco. En cultivos adherentes, las clulas han de ser inicialmente despegadas; esto se efecta comnmente con una mezcla de tripsina y EDTA, aunque actualmente existen otras mezclas de enzimas para esto. Un pequeo nmero de las clulas despegadas pueden sembrarse en un nuevo continente.
Transfeccin y transduccin Artculos principales: Transfeccin y Transduccin (gentica)

Otro mtodo comn en la manipulacin de las clulas es la introduccin de un DNA externo por transfeccin. Esto se lleva a cabo a menudo para conseguir que las clulas expresen una protena de inters. Ms recientemente, la transfeccin de RNA interferentes se han llevado a cabo como mecanismos adecuados para suprimir la expresin de un particular gen. El DNA tambin puede ser introducido en las clulas usando virus, en mtodos llamados transduccin, infeccin o transformacin. Los virus, como agentes parsitos, son adecuados para introducir DNA en clulas, ya que esto forma parte de su ciclo normal de reproduccin.
Lneas celulares humanas establecidas

Una de las primeras lneas celulares humanas, obtenida de Henrietta Lacks, quien falleci de cancer de tero a partir de cul se obtuvieron estas clulas. El cultivo de clulas HeLa que se muestra en la imagen fue teido con Hoescht que se une al ADN coloreando de azul el ncleo.

Las lneas celulares originadas a partir de tejido de seres humanos presentan controversias bioticas, ya que pueden sobrevivir a los organismos parentales y ser utilizadas para el descubrimiento de tratamiento mdicos muy lucrativos luego del falleciemiento de las personas que las produjeron. Una decisin pionera en este aspecto fue el fallo de la Suprema Corte de California que en 1990 determin que los pacientes no tienen derechos propietarios sobre las lneas celulares derivadas de rganos retirados con su consentimiento.5 Se estima que aproximadamente el 20% de las lneas celulares humanas no corresponden al tipo de clulas que generalmente se asume que son.6 Esto se debe a que algunas lneas celulares crecen ms rpido que otras y pueden contaminar cultivos de otras lneas celulares y, con el tiempo, sobrecrecer y desplazar a las clulas originales. El contaminante ms comn es la lnea celular HeLa. Este hecho no es significativo cuando se estudian la propiedades generales del metabolismo celular pero es muy importante en la investigacin mdica enfocada en un tipo especfico de clulas. Los resultados de tales investigaciones contendrn errores, si no estn completamente equivocados en sus conclusiones, con posibles consecuencias para los desarrollos terapeticos basados en ellos.7 8
Generacin de hibridomas Artculo principal: Hibridoma

Es posible fusionar clulas normales con una lnea celular inmortalizada. Con este mtodo se produce anticuerpos monoclonales. Brevemente, los linfocito aislados del bazo o mdula sea de un ratn inmunizado se combinan con una lnea celular de mieloma inmortalizada (clulas del linaje B) para producir un hibridoma el cual posee la especificidad de anticuerpos de los linfocito primarios y la inmortalidad de la lnea celular de mieloma. Las clulas de mieloma sin fusionar se seleccionan en un medio de cultivo selectivo (HA o HAT), de esta manera los linfocitos primarios mueren rpidamente y solamente las clulas fusionadas sobreviven. Los hibridomas productores del anticuerpo deseado se seleccionan a partir de grupos hasta llegar a colonias individuales.

Aplicaciones del cultivo celular

El cultivo masivo de lneas celulares animales es fundamental para la manufactura de vacunas virales y diversos productos biotecnolgicos. Los productos biolgicos producidos mediante la tecnologa del ADN recombinante en cultivo celular incluyen enzimas, hormonas sintticas, inmunobiolgicos (anticuerpos monoclonales, interleucinas, linfoquinas y agentes anticancergenos). A pesar de que muchas protenas pueden producirse mediante ADN recombinante en cultivos bacterianos, las protenas ms complejas que son glicosiladas (modificadas mediante el agregado de carbohidratos) deben producirse en clulas animales. Un ejemplo relevante de tales protenas complejas es la hormona eritropoyetina. Actualmente, se estn realizando investigaciones para producir tales protenas complejas en clulas de insectos o de plantas superiores, debido al alto costo que implica producir tales protenas complejas en clulas de mamferos.

Ventajas y desventajas de los cultivos celulares

Los cultivos celulares tienen una serie de ventajas innegables, pero al mismo tiempo tienen desventajas que hay que tener en consideracin. Como ventajas podemos citar: - Permiten un control preciso y fino del medio ambiente. En un cultivo se pueden controlar todos los factores del medio: Fsico-qumicos (pH, temperatura, presin osmtica, niveles de O2, CO2, tensin superficial...), y fisiolgicos (hormonas, factores de crecimiento, densidad celular,...) - Caracterizacin y homogeneidad de la muestra. Las clulas en cultivo de una lnea celular, o de una lnea continua son homogneas, con morfologa y composicin uniformes. Se pueden obtener con facilidad un nmero elevado de rplicas idnticas, con lo que se supera el grave problema de heterogeneidad de las muestras inherente asociado al uso de animales de experimentacin. - Economa. Suponen una economa en el uso de reactivos o drogas a estudiar pues al realizarse en volmenes reducidos, y con un acceso directo de las clulas a la droga las concentraciones requeridas son mucho ms bajas que en el animal completo. En cuanto a las desventajas del cultivo celular: - Tcnica sensible. El crecimiento de las clulas animales es mucho ms lento que el de los contaminantes ms habituales (hongos, levaduras, bacterias, micoplasmas...) y adems dado que proceden de organismos pluricelulares son incapaces de crecer en ausencia de una compleja mezcla de nutrientes que simula el plasma o el fluido intersticial. Esto supone la necesidad de mantener las condiciones de asepsia en todo momento, lo cual es limitante a nivel tanto del instrumental requerido como del personal calificado para su manipulacin. - Cantidad y costo. El costo de produccin de 1 g de tejido en cultivo es ms de 10 veces superior al obtenido en el animal. Asimismo existe una limitacin de produccin, que es del orden de 10 g de clulas en un laboratorio normal, y que para ser superior a 100 g requiere instalaciones de tipo industrial. - Inestabilidad. Muchas de las lneas celulares continuas son inestables, como consecuencia de la dotacin cromosmica aneuploide. La poblacin celular puede variar su composicin si alguna de las subpoblaciones celulares es capaz de crecer con una tasa ligeramente superior, es decir podemos encontrar diferencias significativas en la lnea celular de una generacin a la siguiente. La nica manera de evitarlo es emplear lneas estables que se resiembran a partir de un stock congelado cada determinado tiempo, o despus de un determinado nmero de generaciones. - La investigacin biomdica supone el sacrificio cada ao de muchos miles de animales de experimentacin. El cultivo celular no puede reemplazar siempre el ensayo "in vivo" pero es una alternativa vlida en muchas situaciones.

Estudios que emplean cultivos celulares

Los estudios que emplean cultivos celulaes abarcan gran nmero de disciplinas y aproximaciones al estudio del fenmeno celular. Son: Actividad celular. Estudia los mecanismos implicados en los diferentes procesos intracelulares, como por ej: transcripcin de DNA, sntesis de protenas, metabolismo energtico... Flujo intracelular. Estudia los movimientos intracelulares de sustancias y seales asociadas a los diferentes procesos fisiolgicos, como por ejemplo: ensamblaje y desensamblaje de los diferentes componentes intracelulares, movimientos del RNA: ncleo-citoplasma, movimiento de protenas. Ecologa celular. Estudio de las condiciones ambientales responsables del mantenimiento de la funcionalidad celular, de su diferenciacin..., como por ej. estudio de las necesidades nutricionales, infecciones, estudio de la transformacin celular (inducidad por virus o agentes qumicos), cintica de la poblacin celular,... Interacciones celulares. Estudia los procesos de induccin embrionaria, cooperacin metablica, inhibicin por contacto o por adhesin, interacciones clula-clula. Como ejemplo de reas de investigacin fuertemente dependientes de las tcnicas de cultivo celular son: - Virologa: establecimiento de condiciones de cultivo de virus animales y de plantas, produccin de vacunas antivirales,... - Investigacin del cncer - Inmunologa - Ingeniera de protenas. Por la produccin de protenas en lneas celulares: interfern, insulina, hormona de crecimiento. - Estudios de interaccin y sealizacin celular, en la diferenciacin y en el desarrollo. - Aplicaciones diagnsticas. Por ejemplo en medicina y farmacologa destacan el anlisis cromosmico de clulas crecidas a partir de muestras de amniocentesis, deteccin de infecciones virales, ensayos de toxicidad,... - Aplicaciones mdicas: mantenimiento y produccin de tejido para transplantes. - Aplicaciones industriales y agronmicas: produccin pro reproduccin "in vitro" de clones de plantas de inters cormecial.

Salud ocupacional: Mediante ensayos citogenticos que permiten detectar dao gentico a nivel celular, donde los cultivos de linfocitos de sangre perifrica son una herramienta para aplicar ensayos como: Ensayo de Micronucleos(MN), aberraciones cromosmicas (AC), Intercambio de Cromatides Hermanas (ICH, a trabajadores expuestos a algn agente citotxico.
Cultivo de tejidos e ingeniera

El cultivo celular es un componente fundamental del cultivo de tejidos y la ingeniera de tejidos, ya que establece los conocimientos bsicos del crecimiento y mantenimiento de clulas ex vivo.
Vacunas

En la actualidad las vacunas para enfermedades como el polio, sarampin, paperas, rubola y varicela se producen en cultivos de clulas de mamferos. El peligro que representa una posible pandemia de influenza por la cepa H5N1 se estn realizando activas investigaciones con el fin de producir dicho virus en cultivos celulares, financiadas por el gobierno de Estados Unidos. En 2009 se us esta tcnica para producir la primer partida de vacunas (destinadas al testeo) para la influenza H1N1.9 Entre las ideas novedosas se encuentra el uso de vacunas basadas en ADN recombinante con vectores derivados de adenovirus humanos, causantes del resfro comn,10 11 o el uso de adjuvantes.12

Cultivo de clulas provenientes de organismos no mamferos

Mtodos de cultivo de clulas de plantas

Las clulas de plantas se crecen normalmente en suspensiones clulares en medio lquido o como cultivo de callos en medio slido. El cultivo de clulas de plantas no diferenciadas y callos requiere de un adecuado balance de las hormonas de crecimiento vegetales auxina y citoquinina.
Mtodos de cultivo de bacterias y levaduras Artculo principal: cultivo (microbiologa)

Usualmente, las cantidades pequeas de bacterias y levaduras se crecen en medio slido que contiene los nutrientes necesarios embebidos en un gel, tal como el agar. Mientras que grandes cantidades son crecidas en medio lquido con las clulas en suspensin.
Mtodos de cultivo de virus

El cultivo de los virus requiere un sustrato de clulas de mamferos, plantas, hongos o bacteria como hospedadores para el crecimiento y replicacin de los virus. En las condiciones adecuadas se pueden generar virus enteros, virus recombinantes o productos

virales en clulas diferentes a los hospedadores naturales. Dependiendo de la especie del virus y el tipo clular que se utiliza como sustrato, la replicacin viral puede resultar en la lisis de la clula hospedadora y la formacin de placas de lisis virales.

Lneas celulares comunes

Lneas celulares humanas

60 lneas de cncer del Instituto Nacional del Cancer de Estados Unidos Base de datos ESTDAB http://www.ebi.ac.uk/ipd/estdab/directory.html (en ingls) Hep-G2(cancer de higado) DU145 (cncer de prstata) Lncap (cncer de prstata) MCF-7 (cncer de mama) MDA-MB-438 (cncer de mama) PC3 (cncer de prstata) T47D (cncer de mama) THP-1 (leucemia mieloide aguda) U87 (glioma) SHSY5Y clulas de neuroblastoma humano, clonadas a partir de mieloma mltiple Saos-2 cells (cncer seo)

Lneas celulares de Primates

Vero (clulas epiteliales de rion de mono verde Africano Chlorocebus. Lnea celular iniciada en 1962)

Lneas celulares de tumor de Rata

GH3 (tumor de hipfisis) PC12 (feocromocitoma)

Lneas celulares de ratn

MC3T3 (embrionaria craneal)

Lneas celulares de plantas

Nicotiana tabaccum cv. BY-2 (mantenida como un cultivo de celulas en suspensin, sirven como modelo de estudio en clulas vegetales)

Lneas celulares de otras especies

pez cebra clulas ZF4 y AB9. Lnea celular de epitelio de rion canino Madin-Darby (MDCK) Clulas epiteliales de rion de Xenopus A6.

Ingeniera biomdica

Otros nombres reas del saber Campo de aplicacin

Ingeniera mdica Biomedicina Tecnologa tecnologa sanitaria medicina

Reconocida en Subrea

Todo el mundo Ingeniera electrnica Ingeniera mecnica Ingeniera informtica Ingeniera qumica Ingeniera de telecomunicacin

La ingeniera biomdica es el resultado de la aplicacin de los principios y tcnicas de la ingeniera al campo de la medicina. Se dedica fundamentalmente al diseo y construccin de productos sanitarios y tecnologas sanitarias tales como los equipos mdicos, las prtesis, dispositivos mdicos, dispositivos de diagnstico (imagenologa mdica) y de terapia. Tambin interviene en la gestin o administracin de los recursos tcnicos ligados a un sistema de hospitales. Combina la experiencia de la ingeniera con las necesidades mdicas para obtener beneficios en el cuidado de la salud. El cultivo de tejidos, lo mismo que la produccin de determinados frmacos, suelen considerarse parte de la bioingeniera.
o

Esquema de un amplificador de instrumentacin usado en biomedicina para controlar las seales biolgicas de pequeo voltaje.

La ingeniera biomdica es ampliamente reconocida como un campo multidisciplinar, resultado de un largo espectro de disciplinas que la influencian desde diversos campos y fuentes de informacin. Debido a su extrema diversidad, no es extrao que la bioingeniera se centre en un aspecto en particular. Existen muy diversos desgloses de disciplinas para esta ingeniera, a menudo se desgrana en:1

biomagnetismo y tcnicas cerebrales creacin de imagnes y ptica biomdicas biomateriales biomecnica y biotransporte instrumentacin mdica ingeniera molecular y celular biologa de sistemas

Implantes de pecho de silicona, ejemplo de aplicacin de material biocompatible y ciruga esttica. En otros casos, las disciplinas dentro de la biongeniera se dividen en la cercana con otros campos de la ingeniera ms arraigados, los cuales suelen incluir:

Ingeniera qumica - a menudo asociada con la ingeniera bioqumica, celular, molecular, nuevos materiales y tejidos, etc. Ingeniera clnica- a menudo asociada con la ingeniera mdica o la ingeniera hospitalaria, administracin y mantenimiento de equipos mdicos en una clnica u hospital. Ingeniera electrnica - a menudo asociada con la bioelectricidad, bioinstrumentacin, creacin de imgenes, e instrumentacin mdica. Ingeniera mecnica - a menudo asociada con la biomecnica, biotransporte y con el modelado de sistemas biolgicos. ptica e ingeniera ptica - ptica mdica, imagen e intrumentacin.

Campos de accin

Una bomba para la inyeccin subcutnea continua de insulina, un ejemplo de ingeniera biomdica basada en la aplicacin de ingeniera electrnica en un dispositivo mdico. En sus inicios, esta disciplina estuvo ligada fundamentalmente a la aplicacin de tcnicas de ingeniera elctrica y electrnica para la construccin de equipos mdicos (instrumentacin mdica), as como al diseo de prtesis y ortesis (biomecnica y rehabilitacin). Posteriormente, una parte muy importante de las aplicaciones de la ingeniera a la medicina fue la instrumentacin para la adquisicin de imgenes del cuerpo humano (imagenologa mdica). A partir del desarrollo de los ordenadores, la importancia de la instrumentacin fue disminuyendo, mientras que el procesamiento de las seales adquiridas cobr mayor mpetu debido a que fue posible obtener informacin adicional a partir de las seales que la instrumentacin proporcionaba, y que no era visible directamente a partir de los trazos puros (procesamiento de seales biomdicas). En la actualidad la disciplina est ligada tambin a otras como la genmica y protemica (biologa computacional).Hoy en da tambin existen las especialidades en ingeniera clnica. 2

Historia
Hay autores que indican que existe la ingeniera biomdica desde que se aplicaron remedios a problemas particulares del individuo como una prtesis del dedo gordo del pie que fue descubierta en una tumba egipcia con una antigedad de ms de 3000 aos[cita requerida]. Otros autores mencionan a los dibujos anatmicos de Leonardo Da Vinci y sus aproximaciones a brazos de palanca o los trabajos de Luigi Galvani y de Lord Kelvin sobre la conduccin elctrica en los seres vivos[cita requerida]. No obstante, el desarrollo de la instrumentacin elctrica y electrnica produjo una explosin de resultados y se puede considerar como uno de los orgenes ms cercanos de la ingeniera biomdica. Esto se da principalmente entre los aos de 1890 y 1930. Ejemplos de esto son los diseos para el registro de seales electrofisiolgicas, comenzando por los registros de A.D. Waller en corazones de humanos (1887), el refinamiento de la tcnica por parte de W. Einthoven al desarrollar un galvanmetro de cuerda (1901) y la aplicacin de este al registro de seales electroencefalogrficas en humanos por Berger (1924). La instrumentacin electrnica a partir de tubos de vaco se emple por E. Lovett Garceau para amplificar estas seales elctricas y el primer sistema de electroencefalgrafo comercial de tres canales fue construido por Alfred Grass en 1935. Otro ejemplo es el desarrollo de la instrumentacin en imagenologa. Desde el descubrimiento de los rayos-X por Rntgen en 1895 hasta su primera aplicacin en biomedicina pas una semana. Desde 1896, Siemens y General Electric ya vendan estos sistemas. En la actualidad, los nuevos desarrollos en imagenologa han tomado mucho ms tiempo en lograr su aplicacin clnica. El principio de resonancia magntica se descubri en 1946, pero no fue sino hasta 30 aos despus, que se pudo desarrollar un sistema para uso en humanos.

Bionanotecnologa

La bionanotecnologa es la rama de la tecnologa que trata de aprovechar el conocimiento de la biologa molecular para construir mquinas a escala nanomtrica, tambin llamadas nanomquinas. Ejemplos de bionanotecnologa son el uso de versiones modificadas artificialmente de la ATP-sintasa o la kinesina como motores.

Nanobiotecnologa
De Wikipedia, la enciclopedia libre Saltar a: navegacin, bsqueda La nanobiotecnologa es una rama de la nanotecnologa con aplicaciones o usos biolgicos y bioqumicos. A menudo la nanobiotecnologa estudia elementos existentes en la naturaleza para fabricar nuevos dispositivos.1 El trmino bionanotecnologa es usado a menudo como sinnimo de nanobiotecnologa, aunque a veces se hace una distincin entre ambas. Si hacemos la distincin entre ambas, la nanobiotecnologa se refiere a usar la nanotecnologa para alancanzar las metas de la biotecnologa, mientras que la bionanotecnologa puede referirse a cualquier superposicin entre la biologa y la nanotecnologa, incluyendo el uso de biomolculas como parte o inspiracin de dispositivos nanotecnolgicos.

Ejemplos

Nanomedicina Nanosensores basados en biomolculas como ADN o protenas. Nanopartculas

Referencias
1. NBTC: Nanobiotechnology Center

Una punta de prueba de nanosensor que lleva un rayo lser (azul) penetra una clula viva para detectar la presencia de un producto que indica que la clula se ha expuesto a una sustancia que causa cncer. Los nanosensores son cualquier punto sensorial biolgico, qumico, o fsico usado para transportar informacin acerca de nanopartculas al mundo macroscpico. Aunque los seres humanos todava no han podido sintetizar nanosensores, las predicciones para su uso principalmente incluyen varios propsitos medicinales y como entradas a construir otros nanoproductos, tales como chips de computadores que trabajen a nanoescala y los nanobots. Actualmente, hay propuestas varias maneras para hacer nanosensores, incluyendo la litografa de arriba hacia abajo, ensamblaje de abajo hacia arriba, y autoensamblado molecular. (Foster 2006:166)

Nanomedicina
De Wikipedia, la enciclopedia libre Saltar a: navegacin, bsqueda La nanomedicina es la rama de la medicina que aplica los conocimientos de nanotecnologa en las ciencias y procedimientos mdicos. En teora con la nanotecnologa se podran construir pequeos nano robots nanobots que seran un ejrcito a nivel nanomtrico en nuestro cuerpo, programados para realizar casi cualquier actividad.1 Por ejemplo, una de las aplicaciones ms prometedoras sera la habilidad de programar estos nanobots para buscar y destruir las clulas responsables de la formacin del cncer.2 Los nanobots de la nanomedicina podran producirse con la funcin de reestructurar o reparar tejidos msculosos u oseos. Las fracturas podran ser cosa del pasado, los nanobots

podran programarse para identificar fisuras en los huesos y arreglar stos de dos formas; realizando algn proceso para acelerar la recuperacin del hueso roto o fundindose con el hueso roto o inclusive las dos.3 Y as con infinidad de enfermedades de varios tipos disolviendo sustancias de mltiples variedades segn, en sangre o en la zona a tratar especficamente, inyectando pequeas cantidades de antibiticos o antispticos en caso de resfriados o inflamaciones, etc. Actualmente, las nanopartculas de plata se estn usando como desinfectantes y antispticos, en productos farmacuticos y quirrgicos, en ropa interior, guantes, medias y zapatos deportivos, en productos para bebs, productos de higiene personal, cubiertos, refrigeradores y lavadoras de ropa. Un problema derivado de estas aplicaciones es su impacto ambiental, ya que en 2005, un estudio encontr que la plata en nanopartculas es 45 veces ms txica que la corriente y adems, en 2008, otro estudio indic que pueden pasar nanopartculas sintticas a los desages, con fuerte toxicidad para la vida acutica, eliminando tambin bacterias benignas en los sistemas de drenaje.4

Ingeniera celular o Bioingeniera

Es la rama de la bioingeniera que se sirve de la combinacin de clulas, mtodos de ingeniera de materiales, bioqumica y fisicoqumica para mejorar o reemplazar funciones biolgicas. Ejm. La Ingeniera de tejidos, tambin conocida como medicina regenerativa o terapia celular (segn el autor este ltimo trmino tambin puede ser considerado como un campo de la medicina regenerativa). Mientras la mayora de definiciones de la ingeniera de tejidos cubre un amplio rango de aplicaciones, en la prctica el trmino est ntimamente relacionado con las aplicaciones de reparar o reemplazar parcial o totalmente tejidos (por ejemplo hueso, cartlago, vlvula cardiaca, vejiga, etc.). A menudo, los tejidos implicados requieren ciertas propiedades mecnicas y estructuras para su propia funcin. En el fondo incluye tambin las transfusiones, trasplantes, terapias gnicas. Esta ingeniera es una especialidad que aplica los principios de la ingeniera y las ciencias de la vida a la fabricacin de sustitutos biolgicos que mantengan, mejoren o restauren la funcin de rganos y tejidos en el cuerpo humano. De naturaleza eminentemente interdisciplinaria, la ingeniera de tejidos incluye conceptos de ramas tan diversas como la biologa celular, la microfabricacin, la robtica y la ciencia de los materiales para disear partes de reemplazo del cuerpo humano. El trmino ha sido tambin aplicado a los esfuerzos de diseo de funciones bioqumicas usando clulas junto con sistemas de soporte creados artificialmente (como por ejemplo un pncreas artificial o hgado artificial).

La ingeniera de tejidos usa fundamentalmente clulas cultivadas y/o modificadas genticamente en el laboratorio como material de ingeniera. As mismo usa estructuras 3D que pueden imitar la estructura de un rgano. Estos sirven para reemplazar parte de un rgano daado que ha dejado de desarrollar su funcin o como vehculo para transportar clulas y molculas en su interior hasta el tejido u rgano diana, en este sentido los Nanotubos son firmes candidatos para convertirse en "andamios" para rganos ya que son biocompatibles, resistentes a la biodegradacin y pueden ser funcionales con biomoleculas. El objetivo principal en este sentido sera obtener un biopolmero:1

biocompatible no presente ningn tipo de reaccin biolgica adversa reabsorbible que se degrade de forma paulatina a medida que se forma el nuevo tejido, transfiriendo as las cargas de forma progresiva. productos de degradacin fcilmente eliminables y no-txicos. El cultivo celular es el proceso mediante el que clulas, ya sean clulas procariotas, eucariotas o vegetales, pueden cultivarse en condiciones controladas. En la prctica el trmino "cultivo celular" se usa normalmente en referencia al cultivo de clulas aisladas de eucariotas pluricelulares, especialmente clulas animales. El desarrollo histrico y metodolgico del cultivo celular est ntimamente ligado a los peptidos cultivares del cultivo de tejidos y el cultivo de rganos. El cultivo de clulas animales empez a ser una tcnica rutinaria de laboratorio durante los aos 50,1 pero el concepto de mantener lneas de clulas vivas separadas del tejido de origen fue descubierto en el siglo X

Historia
El fisilogo ingls Sydney Ringer desarroll a finales del siglo XIX una solucin salina, conocida como solucin de Ringer, que contiene cloruro de sodio, potasio, calcio y magnesio, dicha solucin es capaz de mantener latiendo el corazn de un animal fuera del cuerpo.3 En 1885 Wilhelm Roux extrajo una porcin de la mdula de embrin de pollo y la mantuvo varios das en cultivo en una solucin salina tibia, estableciendo el principio de los cultivos tisulares. Ross Granville Harrison, trabajando en la Escuela de Medicina de la Universidad Johns Hopkins y ms tarde en la Universidad de Yale, estableci la metodologa del cultivo tisular en una serie de trabajos publicados entre 1908 y 1910. Las tcnicas de cultivo celular avanzaron significativamente en los 40 y 50, como soporte a la investigacin en virologa. La utilizacin de cultivos celulares para producir virus permiti preparar virus purificados para ser utilizados en vacunas. La vacuna Salk de la polio fue una de los primeros productos producidos en masa usando tcnicas de cultivos celulares. Esta vacuna fue posible gracias a la investigacin de John Franklin Enders, Thomas Huckle Weller y Frederick Chapman Robbins, quienes fueron galardonados con el

Premio Nobel por el descubrimiento de un mtodo de crecimiento de virus en cultivos celulares de rin de mono

Conceptos en el cultivo de clulas de mamfero

[editar] Aislamiento de clulas

Las clulas pueden ser aisladas de los tejidos para cultivos in vitro de muchas maneras. Las clulas pueden ser purificadas con facilidad de la sangre, sin embargo slo los leucocitos son capaces de crecer en cultivo. Las clulas mononucleares se pueden liberar de los tejidos blandos mediante hidrlisis enzimtica con enzimas como la colagenasa, tripsina o pronasa, que degradan la matriz extracelular. Como alternativa se pueden colocar trozos de tejido en medio de crecimiento, y las clulas que crecen son aptas para el cultivo. Este mtodo es el conocido como cultivo de explantos. Las clulas que se cultivan directamente desde un sujeto se conocen como clulas primarias. A excepcin de algunos derivados de tumores, la mayora de los cultivos celulares primarios tienen un periodo de vida limitado. Despus de un cierto nmero de divisiones las clulas entran en el proceso de senescencia y dejan de dividirse, generalmente manteniendo la viabilidad
Mantenimiento de clulas en cultivo

Las clulas se cultivan y mantienen a una apropiada temperatura y mezcla de gases (habitualmente, 37C, 5% CO2 y 95% O2) en un incubador celular. Las condiciones de cultivo varan ampliamente para cada tipo celular, y la variacin de las condiciones para un tipo celular concreto, puede dar lugar a la expresin de diferentes fenotipos. Adems de la temperatura y la mezcla de gases, el factor ms comnmente variado en los sistemas de cultivo es el medio de crecimiento. Las recetas para los medios de crecimiento pueden variar en pH, concentracin de glucosa, factores de crecimiento y la presencia de otros componentes nutritivos. Los factores de crecimiento usados para suplementar a los medios derivan a menudo de sangre animal, como el suero bovino. Estos ingredientes derivados de la sangre plantean una potencial contaminacin con virus o priones de los productos farmacuticos derivados. En la actualidad se tiende a minimizar o eliminar el uso de estos ingredientes cuando sea posible. Estrategias alternativas de abastecimiento involucran la sangre de los animales procedentes de pases con un riesgo mnimo de encefalopata espongiforme bovina, como Australia y Nueva Zelanda, y el uso de nutrientes purificada concentrados derivados de suero en lugar de suero animal entero para el cultivo de clulas.4 Las clulas pueden crecer en suspensin o de manera adherente. Algunas clulas viven de forma natural sin adherirse a una superficie, como las que existen en el torrente sanguneo. Otras necesitan una superficie, como la mayora de clulas derivadas de tejidos slidos. A las clulas que crecen sin unirse a una superficie se las llama cultivos en suspensin. Algunos cultivos celulares adherentes pueden crecer en plstico para el cultivo de tejidos,

que puede estar recubierto con componentes de la matriz extracelular para aumentar sus propiedades de adhesin y proporcionar otras seales necesarias para el crecimiento y diferenciacin. Otro tipo de cultivo adherente es el cultivo organotpico que consiste en cultivar las clulas en un ambiente tridimensional a diferencia de las placas de cultivo bidimensionales. Este tipo de cultivo 3D es bioqumica y fisiolgicamente similar al tejido vivo. Sin embargo presenta dificultades tcnicas debido a varios factores (por ejemplo: difusin).
Manipulacin de las clulas en cultivo

Al estar generalmente las clulas en continua divisin durante el cultivo, es normal que crezcan hasta ocupar toda el rea o volumen disponible. Esto puede generar varios problemas:

Agotamiento de los nutrientes del medio Acumulacin de clulas apoptticas o necrticas Inhibicin de la divisin celular por contacto: los contactos entre clulas pueden desencadenar un arresto del ciclo celular Diferenciacin celular promiscua provocada por los contactos intercelulares

Estos problemas pueden afrontarse mediante mtodos de cultivo celular en esterilidad. El objetivo de estos mtodos es evitar la contaminacin con bacterias o levaduras que competiran por los nutrientes y/o podran infectar y as eliminar las clulas. Toda manipulacin se lleva a cabo, tpicamente, en una campana de flujo laminar para evitar la entrada de microorganismos contaminantes. Tambin pueden aadirse antibiticos al medio de cultivo. Entre las manipulaciones ms comunes llevadas a cabo en cultivos celulares, se encuentran los cambios de medio, el pase de las clulas y la transfeccin.
Cambios de medio

El objetivo de los cambios de medio es renovar los nutrientes y evitar la acumulacin de productos metablicos potencialmente txicos y de clulas muertas. En el caso de las suspensiones celulares, las clulas se separan del medio mediante centrifugacin y se resuspenden en medio fresco. En los cultivos adherentes, el medio puede eliminarse directamente mediante aspiracin y reemplazarse por el fresco.
Pase de las clulas

El pase de las clulas supone transferir un pequeo nmero de clulas a un nuevo continente. Las clulas pueden cultivarse ms tiempo si se pasan regularmente, ya que as se evita la senescencia asociada a situaciones prolongadas de alta densidad celular. Con cultivos en suspensin el pase se hace fcilmente, tomando una pequea cantidad de cultivo que contenga unas pocas clulas y diluyndola en un volumen mayor de medio fresco. En cultivos adherentes, las clulas han de ser inicialmente despegadas; esto se efecta

comnmente con una mezcla de tripsina y EDTA, aunque actualmente existen otras mezclas de enzimas para esto. Un pequeo nmero de las clulas despegadas pueden sembrarse en un nuevo continente.
Transfeccin y transduccin Artculos principales: Transfeccin y Transduccin (gentica)

Otro mtodo comn en la manipulacin de las clulas es la introduccin de un DNA externo por transfeccin. Esto se lleva a cabo a menudo para conseguir que las clulas expresen una protena de inters. Ms recientemente, la transfeccin de RNA interferentes se han llevado a cabo como mecanismos adecuados para suprimir la expresin de un particular gen. El DNA tambin puede ser introducido en las clulas usando virus, en mtodos llamados transduccin, infeccin o transformacin. Los virus, como agentes parsitos, son adecuados para introducir DNA en clulas, ya que esto forma parte de su ciclo normal de reproduccin.
[editar] Lneas celulares humanas establecidas

Una de las primeras lneas celulares humanas, obtenida de Henrietta Lacks, quien falleci de cancer de tero a partir de cul se obtuvieron estas clulas. El cultivo de clulas HeLa que se muestra en la imagen fue teido con Hoescht que se une al ADN coloreando de azul el ncleo.

Las lneas celulares originadas a partir de tejido de seres humanos presentan controversias bioticas, ya que pueden sobrevivir a los organismos parentales y ser utilizadas para el descubrimiento de tratamiento mdicos muy lucrativos luego del falleciemiento de las personas que las produjeron. Una decisin pionera en este aspecto fue el fallo de la Suprema Corte de California que en 1990 determin que los pacientes no tienen derechos propietarios sobre las lneas celulares derivadas de rganos retirados con su consentimiento.5 Se estima que aproximadamente el 20% de las lneas celulares humanas no corresponden al tipo de clulas que generalmente se asume que son.6 Esto se debe a que

algunas lneas celulares crecen ms rpido que otras y pueden contaminar cultivos de otras lneas celulares y, con el tiempo, sobrecrecer y desplazar a las clulas originales. El contaminante ms comn es la lnea celular HeLa. Este hecho no es significativo cuando se estudian la propiedades generales del metabolismo celular pero es muy importante en la investigacin mdica enfocada en un tipo especfico de clulas. Los resultados de tales investigaciones contendrn errores, si no estn completamente equivocados en sus conclusiones, con posibles consecuencias para los desarrollos terapeticos basados en ellos.78
Generacin de hibridomas Artculo principal: Hibridoma

Es posible fusionar clulas normales con una lnea celular inmortalizada. Con este mtodo se produce anticuerpos monoclonales. Brevemente, los linfocito aislados del bazo o mdula sea de un ratn inmunizado se combinan con una lnea celular de mieloma inmortalizada (clulas del linaje B) para producir un hibridoma el cual posee la especificidad de anticuerpos de los linfocito primarios y la inmortalidad de la lnea celular de mieloma. Las clulas de mieloma sin fusionar se seleccionan en un medio de cultivo selectivo (HA o HAT), de esta manera los linfocitos primarios mueren rpidamente y solamente las clulas fusionadas sobreviven. Los hibridomas productores del anticuerpo deseado se seleccionan a partir de grupos hasta llegar a colonias individuales.

Aplicaciones del cultivo celular

El cultivo masivo de lneas celulares animales es fundamental para la manufactura de vacunas virales y diversos productos biotecnolgicos. Los productos biolgicos producidos mediante la tecnologa del ADN recombinante en cultivo celular incluyen enzimas, hormonas sintticas, inmunobiolgicos (anticuerpos monoclonales, interleucinas, linfoquinas y agentes anticancergenos). A pesar de que muchas protenas pueden producirse mediante ADN recombinante en cultivos bacterianos, las protenas ms complejas que son glicosiladas (modificadas mediante el agregado de carbohidratos) deben producirse en clulas animales. Un ejemplo relevante de tales protenas complejas es la hormona eritropoyetina. Actualmente, se estn realizando investigaciones para producir tales protenas complejas en clulas de insectos o de plantas superiores, debido al alto costo que implica producir tales protenas complejas en clulas de mamferos.
Ventajas y desventajas de los cultivos celulares

Los cultivos celulares tienen una serie de ventajas innegables, pero al mismo tiempo tienen desventajas que hay que tener en consideracin. Como ventajas podemos citar: - Permiten un control preciso y fino del medio ambiente. En un cultivo se pueden controlar todos los factores del medio: Fsico-qumicos (pH, temperatura, presin osmtica, niveles de O2, CO2, tensin superficial...), y fisiolgicos (hormonas, factores de crecimiento, densidad celular,...)

- Caracterizacin y homogeneidad de la muestra. Las clulas en cultivo de una lnea celular, o de una lnea continua son homogneas, con morfologa y composicin uniformes. Se pueden obtener con facilidad un nmero elevado de rplicas idnticas, con lo que se supera el grave problema de heterogeneidad de las muestras inherente asociado al uso de animales de experimentacin. - Economa. Suponen una economa en el uso de reactivos o drogas a estudiar pues al realizarse en volmenes reducidos, y con un acceso directo de las clulas a la droga las concentraciones requeridas son mucho ms bajas que en el animal completo. En cuanto a las desventajas del cultivo celular: - Tcnica sensible. El crecimiento de las clulas animales es mucho ms lento que el de los contaminantes ms habituales (hongos, levaduras, bacterias, micoplasmas...) y adems dado que proceden de organismos pluricelulares son incapaces de crecer en ausencia de una compleja mezcla de nutrientes que simula el plasma o el fluido intersticial. Esto supone la necesidad de mantener las condiciones de asepsia en todo momento, lo cual es limitante a nivel tanto del instrumental requerido como del personal calificado para su manipulacin. - Cantidad y costo. El costo de produccin de 1 g de tejido en cultivo es ms de 10 veces superior al obtenido en el animal. Asimismo existe una limitacin de produccin, que es del orden de 10 g de clulas en un laboratorio normal, y que para ser superior a 100 g requiere instalaciones de tipo industrial. - Inestabilidad. Muchas de las lneas celulares continuas son inestables, como consecuencia de la dotacin cromosmica aneuploide. La poblacin celular puede variar su composicin si alguna de las subpoblaciones celulares es capaz de crecer con una tasa ligeramente superior, es decir podemos encontrar diferencias significativas en la lnea celular de una generacin a la siguiente. La nica manera de evitarlo es emplear lneas estables que se resiembran a partir de un stock congelado cada determinado tiempo, o despus de un determinado nmero de generaciones. - La investigacin biomdica supone el sacrificio cada ao de muchos miles de animales de experimentacin. El cultivo celular no puede reemplazar siempre el ensayo "in vivo" pero es una alternativa vlida en muchas situaciones.
Estudios que emplean cultivos celulares

Los estudios que emplean cultivos celulaes abarcan gran nmero de disciplinas y aproximaciones al estudio del fenmeno celular. Son: Actividad celular. Estudia los mecanismos implicados en los diferentes procesos intracelulares, como por ej: transcripcin de DNA, sntesis de protenas, metabolismo energtico...

Flujo intracelular. Estudia los movimientos intracelulares de sustancias y seales asociadas a los diferentes procesos fisiolgicos, como por ejemplo: ensamblaje y desensamblaje de los diferentes componentes intracelulares, movimientos del RNA: ncleo-citoplasma, movimiento de protenas. Ecologa celular. Estudio de las condiciones ambientales responsables del mantenimiento de la funcionalidad celular, de su diferenciacin..., como por ej. estudio de las necesidades nutricionales, infecciones, estudio de la transformacin celular (inducidad por virus o agentes qumicos), cintica de la poblacin celular,... Interacciones celulares. Estudia los procesos de induccin embrionaria, cooperacin metablica, inhibicin por contacto o por adhesin, interacciones clula-clula. Como ejemplo de reas de investigacin fuertemente dependientes de las tcnicas de cultivo celular son: - Virologa: establecimiento de condiciones de cultivo de virus animales y de plantas, produccin de vacunas antivirales,... - Investigacin del cncer - Inmunologa - Ingeniera de protenas. Por la produccin de protenas en lneas celulares: interfern, insulina, hormona de crecimiento. - Estudios de interaccin y sealizacin celular, en la diferenciacin y en el desarrollo. - Aplicaciones diagnsticas. Por ejemplo en medicina y farmacologa destacan el anlisis cromosmico de clulas crecidas a partir de muestras de amniocentesis, deteccin de infecciones virales, ensayos de toxicidad,... - Aplicaciones mdicas: mantenimiento y produccin de tejido para transplantes. - Aplicaciones industriales y agronmicas: produccin pro reproduccin "in vitro" de clones de plantas de inters cormecial. Salud ocupacional: Mediante ensayos citogenticos que permiten detectar dao gentico a nivel celular, donde los cultivos de linfocitos de sangre perifrica son una herramienta para aplicar ensayos como: Ensayo de Micronucleos(MN), aberraciones cromosmicas (AC), Intercambio de Cromatides Hermanas (ICH, a trabajadores expuestos a algn agente citotxico.

Cultivo de tejidos e ingeniera

El cultivo celular es un componente fundamental del cultivo de tejidos y la ingeniera de tejidos, ya que establece los conocimientos bsicos del crecimiento y mantenimiento de clulas ex vivo.
Vacunas

En la actualidad las vacunas para enfermedades como el polio, sarampin, paperas, rubola y varicela se producen en cultivos de clulas de mamferos. El peligro que representa una posible pandemia de influenza por la cepa H5N1 se estn realizando activas investigaciones con el fin de producir dicho virus en cultivos celulares, financiadas por el gobierno de Estados Unidos. En 2009 se us esta tcnica para producir la primer partida de vacunas (destinadas al testeo) para la influenza H1N1.9 Entre las ideas novedosas se encuentra el uso de vacunas basadas en ADN recombinante con vectores derivados de adenovirus humanos, causantes del resfro comn,10 11 o el uso de adjuvantes.12

Cultivo de clulas provenientes de organismos no mamferos

Mtodos de cultivo de clulas de plantas

Las clulas de plantas se crecen normalmente en suspensiones clulares en medio lquido o como cultivo de callos en medio slido. El cultivo de clulas de plantas no diferenciadas y callos requiere de un adecuado balance de las hormonas de crecimiento vegetales auxina y citoquinina.
Mtodos de cultivo de bacterias y levaduras cultivo (microbiologa)

Usualmente, las cantidades pequeas de bacterias y levaduras se crecen en medio slido que contiene los nutrientes necesarios embebidos en un gel, tal como el agar. Mientras que grandes cantidades son crecidas en medio lquido con las clulas en suspensin.
Mtodos de cultivo de virus

El cultivo de los virus requiere un sustrato de clulas de mamferos, plantas, hongos o bacteria como hospedadores para el crecimiento y replicacin de los virus. En las condiciones adecuadas se pueden generar virus enteros, virus recombinantes o productos virales en clulas diferentes a los hospedadores naturales. Dependiendo de la especie del virus y el tipo clular que se utiliza como sustrato, la replicacin viral puede resultar en la lisis de la clula hospedadora y la formacin de placas de lisis virales.

Lneas celulares comunes humanas

60 lneas de cncer del Instituto Nacional del Cncer de Estados Unidos

Base de datos ESTDAB http://www.ebi.ac.uk/ipd/estdab/directory.html (en ingls) Hep-G2(cancer de higado) DU145 (cncer de prstata) Lncap (cncer de prstata) MCF-7 (cncer de mama) MDA-MB-438 (cncer de mama) PC3 (cncer de prstata) T47D (cncer de mama) THP-1 (leucemia mieloide aguda) U87 (glioma) SHSY5Y clulas de neuroblastoma humano, clonadas a partir de mieloma mltiple Saos-2 cells (cncer seo)

Lneas celulares de Primates

Vero (clulas epiteliales de rion de mono verde Africano Chlorocebus. Lnea celular iniciada en 1962)

Lneas celulares de tumor de Rata

GH3 (tumor de hipfisis) PC12 (feocromocitoma)

Lneas celulares de ratn

MC3T3 (embrionaria craneal)

Lneas celulares de plantas

Nicotiana tabaccum cv. BY-2 (mantenida como un cultivo de clulas en suspensin, sirven como modelo de estudio en clulas vegetales)

Lneas celulares de otras especies

pez cebra clulas ZF4 y AB9. Lnea celular de epitelio de rion canino Madin-Darby (MDCK) Clulas epiteliales de rion de Xenopus A6.

Algunos datos histricos 6.000 a. C.: Se emplea la levadura para la fabricacin de vino y cerveza. 4.000 a. C.: Se emplea la levadura en la elaboracin del pan. 1.000 a. C.: Los babilonios celebraban con ritos religiosos la polinizacin de las palmeras. 323 a. C.: Aristteles especula sobre la naturaleza de la reproduccin y la herencia. 1676: Se confirma la reproduccin sexual de las plantas.

1838: Se descubre que todos los organismos vivos estn compuestos por clulas. 1859: Darwin hace pblica su teora sobre la evolucin de las especies. 1866. Mendel descubre en los guisantes las unidades fundamentales de la herencia. 1871: Se asla el ADN en el ncleo de una clula. 1876: Se identifica los microorganismos intervinientes en la elaboracin del pan. 1883: Francis Galton acua el trmino eugenesia. 1887: Se descubre que las clulas reproductivas constituyen un linaje continuo, diferente de las otras clulas del cuerpo. 1897: E. Buchner descubre enzimas de las levaduras capaces de convertir el azcar en etanol. 1909: Las unidades fundamentales de la herencia biolgica reciben el nombre de genes. 1910: Un bilogo americano, Thomas Morgan presenta sus experimentos con la mosca de la fruta, que revelan que algunos fragmentos genticos son determinados por el sexo. Se establece el sistema de purificacin de aguas residuales empleando microorganismos. 1914: Se obtienen acetona, butanol y glicerina empleando microorganismos. 1925: Se descubre que la actividad del gen est relacionada con su posicin en el cromosoma. 1927: Se descubre que los rayos X causan mutaciones genticas. 1928: A. Fleming descubre la penicilina. 1933: La Alemania nazi esteriliza a 56.244 "defectuosos hereditarios". 1933 a 1945: El holocausto nazi extermina a seis millones de judos por medio de su poltica eugensica. 1943: El ADN es identificado como la molcula gentica. 1944: se produce la penicilina industrialmente. 1940 a 1950: Se descubre que cada gen codifica una nica protena. 1953: El bioqumico americano James Watson y el biofsico Francis Crick anuncian la estructura en doble hlice del ADN o cdigo gentico. 1956: Se identifican 23 pares de cromosomas en las clulas del cuerpo humano. 1950 a 1960: se introducen nuevos antibiticos producidos por organismos. 1961: Desciframiento de las primeras letras del cdigo gentico. 1962: Canad extrae uranio con ayuda de microorganismos. 1966: Se descifra el cdigo gentico completo del ADN. 1972: Se crea la primera molcula de ADN recombinante en el laboratorio: genes de una especie son introducidos de otras especies y funcionan correctamente. 1973: Brasil inicia un programa para sustituir el petrleo por alcohol producido por levaduras. 1975: La Conferencia de Asilomar evala los riesgos biolgicos de las tecnologas de ADN recombinante, y agrupa una moratoria de los experimentos con estas tecnologas. Se fund Genentech Incorporated, primera empresa de ingeniera gentica. 1977: Se fabric con xito una hormona humana en una bacteria. 1978: Se clon el gen de la insulina humana. 1980: El Tribunal Supremo de los Estados Unidos de Amrica dictamina que se pueden patentar los microbios obtenidos mediante ingeniera gentica. 1981: Primer diagnstico prenatal de una enfermedad humana por medio del anlisis del ADN. 1982: Se crea el primer ratn transgnico, llamado "superratn", insertando el gen de la hormona del crecimiento de la rata en vulos de ratona fecundados. Se produce insulina utilizando tcnicas de ADN recombinante. 1983: Se inventa la tcnica PCR (reaccin en cadena de la polimerasa), que permite copiar genes especficos con gran rapidez. Es una tcnica muy poderosa para producir millones de copias de una regin especfica de ADN, que permite analizarla tan rpido como se puede

purificar una sustancia qumica. PCR ha sido el instrumento esencial en el desarrollo de tcnicas de diagnstico, medicina forense y la deteccin de genes asociados con errores innatos del metabolismo. 1984: Creacin de las primeras plantas transgnicas. 1985: Se inicia el empleo de interferones en el tratamiento de enfermedades vricas. Se utiliza por primera vez la "huella gentica" en una investigacin judicial en Gran Bretaa. 1986: Se autorizan las pruebas clnicas de la vacuna contra la hepatitis B obtenida mediante ingeniera gentica. 1987: Propuesta comercial para establecer la secuencia completa del genoma humano, Proyecto Genoma Humano. Comercializacin del primer anticuerpo monoclonal de uso teraputico. 1988: La Universidad de Harvard patenta por primera vez un organismo producido mediante ingeniera gentica, un ratn. Se crea la organizacin HUGO para llevar a cabo el Proyecto Genoma Humano: identificar todos los genes del cuerpo humano. 1989: Comercializacin de las primeras mquinas automticas de secuenciacin del ADN. 1990: Primer tratamiento con xito mediante terapia gnica en nios con trastornos inmunolgicos (nios burbuja). Se ponen en marcha numerosos protocolos experimentales de terapia gnica para intentar curar enfermedades cancerosas y metablicas. 1994: Se comercializa en California el primer vegetal modificado genticamente, un tomate, y se autoriza en Holanda la reproduccin del primer toro transgnico. 1995: Se completan las primeras secuencias de genomas de bacterias. 1996: Por primera vez se completa la secuencia del genoma de un organismo eucaritico, la levadura de cerveza. 1997: Investigadores, liderados por Ian Wilmut clonan al primer mamfero, la oveja Dolly. 1998: Anlisis de DNA de restos de semen cogido de ropas de Mnica Lewinsky incriminan al presidente Bill Clinton. 2001: Se publica el mapa provisional del genoma humano. 2002: Se detecta una enzima que tiene relacin directa con las auxinas para el crecimiento de la planta. Clasificacin, aplicaciones y tcnicas usadas en biotecnologa De acuerdo al campo de aplicacin la biotecnologa puede ser distribuida o clasificada en cinco amplias reas que interactan a saber: Biotecnologa en salud humana, Biotecnologa animal, Biotecnologa Industrial, Biotecnologa Vegetal, Biotecnologa ambiental, Biotecnologa alimentara Las tcnicas biotecnolgicas utilizadas son comunes en los diferentes campos de aplicacin de la biotecnologa, estas se pueden agrupar en dos grandes grupos de tcnicas: Cultivo de tejidos y Tecnologa del DNA. La primera trabaja a un nivel superior a la clula (con sus componentes - membranas, cloroplastos, mitocondria, etc) e incluye clulas, tejidos y rganos que se desarrollan en condiciones controladas. La segunda, involucra la manipulacin de genes que determinan las caractersticas celulares ( de plantas, animales y microorganismos), lo que significa el trabajar al nivel de DNA: Aislamiento de genes, su recombinacin y expresin en nuevas formas y su transferencia a clulas apropiadas. El principal impacto de las modernas biotecnologas ha sido en el rea farmacutica. El nmero de productos y servicios disponibles permanentemente se est incrementando para las reas farmacutica, agrcola, alimentaria, produccin de energa y tratamientos de desechos, limpieza de aguas y biorremediacin entre otros. Las tecnologas de DNA recombinante han tenido asombrosas repercusiones en los ltimos aos. Los bilogos moleculares han mapeado genomas enteros, se han desarrollado y comercializado nuevas medicinas y producido plantas

con nuevos tipos de resistencia a enfermedades que no podan ser desarrolladas por los mtodos tradicionales. Muchos ejemplos como la papa libre de amilosa y la bacteria que produce ndigo, tambien incluyen el uso de organismos modificados genticamente por tecnologas de DNA recombinante. Tambin Muchas enzimas son rutinariamente producidas por la tecnologa del DNA recombinante. Dada la abrumadora diversidad de especies, biomolculas y vas metablicas en este planeta, la ingeniera gentica puede en principio ser una herramienta muy poderosa para crear alternativas amistosas ambientales en productos y procesos que actualmente contaminan el ambiente o acaban con los recursos no renovables. Factores polticos, econmicos y sociales en ltimas, determinarn que posibilidades cientficas se harn realidad La transformacin gentica y otras tcnicas de mejoramiento de cultivos han sido utilizados para lograr cuatro objetivos principales: cambiar las caractersticas de productos, mejorar la resistencia a patgenos y plagas en vegetales, incrementar la produccin e incrementar el valor nutricional de alimentos. Los cultivos transgnicos tienen el potencial para contribuir a incrementar la calidad en los alimentos y la produccin, la calidad en el ambiente (reduciendo los requerimientos de qumicos) y la salud humana. Biotecnologa humana Puesto que cada criatura es nica, cada una posee una composicin nica de ADN. Cualquier individuo puede ser identificado por pequeas diferencias en su secuencia de ADN, este pequeo fragmento puede ser utilizado para determinar relaciones familiares en litigios de paternidad, para confrontar donantes de rganos con receptores en programas de trasplante, unir sospechosos con la evidencia de ADN en la escena del crimen (biotecnologa forense). El desarrollo de tcnicas para el diagnstico de enfermedades infecciosas o de desordenes genticos es una de las aplicaciones de mayor impacto de la tecnologa de ADN. Al utilizar las tcnicas de secuenciacin de ADN los cientficos pueden diagnosticar infecciones vricas, bacterianas o mapear la localizacin especfica de los genes a lo largo de la molcula de ADN en las clulas. El primer tratamiento exitoso en terapia gnica fue en 1990, cuando se trat una enfermedad del sistema inmune de nios llamada "Deficiencia de ADA". Clulas sanguneas con los genes correctos de ADA fueron inyectadas al cuerpo del paciente donde produjeron suficientes clulas normales que permitieron mejorar el sistema inmune. Hoy, la terapia gnica esta tratando enfermedades tales como tumores cerebrales malignos, fibrosis qustica y HIV. Con esta tcnica se pretende tambin reparar rganos, como por ejemplo un hgado cirrtico a partir de las pocas clulas sanas que le quedan, un par de ventrculos nuevos para reemplazar los efectos devastadores de un infarto, la regeneracin de una mano amputada o disponer de una fuente inagotable de neuronas para corregir los efectos de enfermedades tan graves como el Alzheimer o el Parkinson. En estos momentos existen tres lneas de investigacin: La clonacin de clulas madre.: James Thonson, de la Universidad de Wisconsin (EEUU) descubri en 1998 cmo obtener clulas madre a partir de un embrin humano. En el embrin esas clulas son las destinadas a formar todos los rganos del cuerpo, y estimuladas adecuadamente pueden reparar rganos daados. El inconveniente de este mtodo, es que el embrin de partida debe ser un clon del paciente. La clonacin humana suscita un gran rechazo y mas an en este caso cuando un embrin de pocos das, que nunca va a ser implantado en un tero, es utilizado nicamente para este fin y despus se destruye. Esto plantea grandes problemas ticos y religiosos.

La reprogramacin de clulas adultas sin necesidad de clonar. La empresa britnica PPL Therapeutics est a la cabeza de esta tcnica, que les salva de todos los escollos morales y legales que existen al respecto. El esclarecimiento y manipulacin del mecanismo gentico que dispara la formacin de rganos y extremidades en el embrin. En esta tcnica nos encontramos con un espaol, Juan Carlos Izpisa, que dirige un laboratorio en el Instituto Salk de La Jolla (California). El mecanismo consiste en determinar la relacin existente entre dos familias de protenas (llamadas Wnt y FGF) cuya unin en forma de parejas dispara la formacin de un determinado miembro. Una pareja concreta formada por un miembro de Wnt y un miembro de FGF dispara la formacin de un brazo, otra pareja distinta dispara la de una pierna, otra la del hgado, etc. El ser humano slo tiene activas estas parejas cuando es un embrin, pero anfibios como el axolote mexicano las tiene activas toda la vida, por ello pueden regenerar sus miembros amputados. La investigacin de Izpisa est encaminada a encontrar la forma de reactivar estas parejas en los humanos adultos. Genoma humano Desde el siglo pasado, investigadores de todo el mundo no han cejado en su empeo de descifrar el lenguaje de la vida, cmo unas mismas caractersticas pasan de una generacin a la siguiente. Para entender este lenguaje es esencial comprender la estructura de un organismo vivo y cul es su estructura. Todos los seres vivos estamos compuestos por clulas. En el ncleo o centro de cada clula, hay muchas parejas de cromosomas, que desplegados muestran el ADN, que est formado por largas cadenas de cuatro bases, Adenina, Citosina, Timina y Guanina, llamadas bases nucletidas, que compartimos todos los seres vivos. Estas bases se unen entre s formando cadenas, de las cuales, algunos trozos se denominan genes o segmentos con la suficiente informacin para que las clulas produzcan protenas. El ADN contiene toda la informacin necesaria para que las clulas produzcan cada protena de un ser vivo y por lo tanto, es el responsable de las caractersticas del ser. El ADN transmite esta informacin hereditaria de una generacin a la siguiente. El gran descubrimiento El pasado da 12 de Febrero de este mismo ao, se hizo pblico uno de los mayores descubrimientos de la historia de la ciencia y de la medicina: la presentacin del mapa gentico por los dos equipos de investigacin que trabajaban en el Proyecto Genoma Humano (en adelante PGH) desde hacia una dcada. Estos dos equipos son Consorcio Internacional Genoma Humano, integrado por 20 grupos de diferentes pases (entre los que no est Espaa) y la empresa privada Celera Genomics. Por PGH se denomina a una multitud de subproyectos desarrollados en diversos centros de investigacin de diferentes pases, encaminados a obtener la secuencia completa de toda la informacin gentica humana contenida en los cromosomas. Los tres objetivos del PGH eran (puesto que ya se ha conseguido): La creacin de mapas genticos (con el fin de identificar cules son los genes existentes). El desarrollo de mapas fsicos (con el fin de situar a los genes en los cromosomas). La determinacin de la secuencia completa del genoma humano. Este proyecto se inici, oficialmente en 1990, y por entonces se crea que el genoma podra tener alrededor de 100.000 genes. El borrador ha demostrado que disponemos de 30.000 a 40.000 genes, menos de la mitad de lo que se crea.

Aunque el mapa gentico es, oficialmente, una obra conjunta de la empresa Celera y el Consorcio Pblico, cada uno de ellos cuenta con una versin propia. La principal beneficiada por el reciente logro cientfico es Celera. Su fundador, Craig Venter particip durante tres aos en el Instituto Nacional de Salud, subvencionado por el Gobierno Estadounidense, tras los cuales, decidi en 1988, abandonarlo, dejando en la estacada al director, Francis Collins, y fundar su propia empresa. Craig lanz la noticia de que en el 2001 tendra la descodificacin del genoma humano, su ex jefe, Collins se qued de piedra, puesto que sus resultados no se esperaban hasta el 2005. Analistas del sector, aseguran que el trabajo de investigacin desarrollado por Celera, es mucho ms rico y complejo que el realizado por los cientficos del sector pblico. Aprovechando esta circunstancia, no ha tardado en poner a disposicin del pblico en Internet la secuenciacin, pero de forma ininteligible, por lo que slo podrn acceder a su base de datos a aquellas compaas biotecnolgicas que estn interesadas en ella, previo pago, claro est, de 900 millones de pesetas. El negocio de los genes. Empresas farmacuticas de la categora y la importancia como Pzifer o American Home Products, podran estar pagando hasta 2.700 millones de pesetas por los archivos genticos de Celera, que ha de recuperar todo lo invertido en este descubrimiento, y no piensa dejar pasar la oportunidad de llenarse los bolsillos. Todas aquellas empresas que dirigan sus investigaciones al descubrimiento del mapa del genoma humano han de cambiar su actividad, puesto que Celera se les ha adelantado. Ya ha pasado la hora de las empresas meramente genmicas. Estas empresas pueden desarrollar herramientas de lectura del genoma, especializarse en el anlisis de protenas (empresas denominadas protemicas) o dar el salto a la produccin de frmacos. Esto es lo que debe hacer tambin Celera, ya que de lo contrario perder el inters y la confianza de sus accionistas. Espaa est situada a la cola de esta industria. Hay muy pocas sociedades biotecnolgicas y uno de los principales motivos de su escasez es la falta de inversin, tanto pblica como privada. Otra de las industrias que se va a ver muy beneficiada son las empresas bioinformticas. La rapidez en la consecucin de nuevos medicamentos va a depender de la velocidad de interpretacin de las secuencias genticas y las relaciones de las protenas. Son necesarios mejores programas informticos y ordenadores ms potentes para poder tratar las enormes bases de datos generadas por esta industria. Empresas como Rosetta, Informax o Lion Bioscience compiten por la elaboracin de software de lectura y interpretacin de las secuencias genticas. Patentar la vida. Una de las consecuencias del descubrimiento de la secuencia del genoma humano es la problemtica surgida en torno a la viabilidad y la conveniencia de patentar los genes humanos. En la actualidad el marco jurdico al que hacen referencia todos los requisitos de patentabilidad industrial de mbito internacional el es definido en el denominado Convenio de Munchen y en el caso Espaol en la Ley 11/1986, de 20 de Marzo, de Patentes. Toda invencin ha de cumplir con unos requisitos que justifiquen su registro como tal a travs de una solicitud de patente. Entre ellos est el de novedad y el de aplicacin industrial. Es necesario distinguir entre invento, que es susceptible de ser patentado y descubrimiento, que no lo es. Gran parte de la discusin gira en torno a la aplicacin de estos criterios al material gentico. La identificacin de secuencias de ADN debe comprenderse dentro de la categora de los

descubrimientos y stos, como es sabido, no son patentables. Los derechos de patentes norteamericano y europeo difieren en aspectos esenciales, lo cual impide establecer criterios claros y homogneos a la hora de aceptar o rechazar solicitudes de patente: En EEUU se considera aceptable la patentabilidad de los productos de la naturaleza as como los procedimientos de obtencin de stos, siempre y cuando el producto en cuestin no se haya logrado con anterioridad. En Europa, la Oficina Europea de Patentes ha establecido criterios ms restrictivos que los aplicados habitualmente en EEUU ante la aceptacin de solicitudes de patentes de material gentico, aunque en los ltimos aos ha ido ganando fuerza corriente menos restrictiva y ms proclive a aceptar este tipo de solicitudes. De esta forma se desdibuja la frontera entre invento y descubrimiento. En Espaa, la Ley de Patentes establece que slo son patentables las invenciones (artculo 4), por lo que identificacin de secuencias de ADN no son susceptibles de patente. Entonces, son patentables los procedimientos llevados a cabo para su descubrimiento? Si este procedimiento puede calificarse como de "invencin" sera posible, siempre y cuando cumpla con los requisitos del artculo 5, es decir siempre que su publicacin o explotacin no sea contraria al orden pblico o a las buenas costumbres, que no suponga una raza animal, etc. Adems, la constitucin espaola establece en su artculo 10.1 que :La dignidad de la persona, los derechos inviolables que le son inherentes, el libre desarrollo de la personalidad, el respeto a la ley y a los derechos de los dems, son fundamento del orden poltico y de la paz social. En este tema aparecen dos posturas enfrentadas: Gran parte de la comunidad cientfica y biotica, y de las organizaciones no gubernamentales (ONG) especializadas son contrarias a la patentabilidad. La otra parte de la comunidad cientfica, junto a la de la industria privada a travs de gigantescas inversiones, est dispuesta a aceptar tal prctica. Entre los argumentos esgrimidos por las ONG podemos sealar: La concesin de patentes sobre seres vivos supone la apropiacin de una parte de ella para su explotacin, reduciendo la relacin de la sociedad con la naturaleza a meros intereses econmicos. Los derechos de una persona a decidir sobre su propio cuerpo y su vida se veran gravemente daados si los seres humanos, partes de su cuerpo, sus rasgos fsicos y psicolgicos, y la informacin gentica pueden convertirse en propiedad exclusiva del titular de una patente. Los animales estarn expuestos a nuevas formas de sufrimiento y se convertirn en autnticas "fbricas" animales para la produccin farmacutica. La libertad para publicar y el libre intercambio de descubrimientos est desapareciendo ante la necesidad de mantener en secreto la informacin con vistas a la solicitud de una patente. Los pases del tercer mundo se encontrarn con muchas dificultades para acceder a la informacin cientfica y a la transferencia de tecnologa. Entre los argumentos de los que estn a favor cabe destacar: La prohibicin en el patentamiento de invenciones gnicas (incluidas las secuencias gnicas) comportara inevitablemente que las empresas, o cualquier parte, interesadas en emplear el conocimiento para crear productos se enfrentara al secreto comercial, lo cual hara mas lento el avance cientfico en detrimento de la comunidad investigadora en su conjunto. Los antibiticos han sido patentados durante aos sin las exigencias aplicadas a las secuencias

de ADN, y sin embargo son tambin producidas por organismos vivos. Por ello si una empresa encuentra un organismo y a partir de l elabora un mtodo para fabricar un producto y usarlo, es clasificado como una invencin, y por lo tanto susceptible de patente. 8. Biotecnologa animal La biotecnologa animal ha experimentado un gran desarrollo en las ltimas dcadas. Las aplicaciones iniciales se dirigieron principalmente a sistemas diagnsticos, nuevas vacunas y drogas, fertilizacin de embriones in vitro, uso de hormonas de crecimiento, etc. Los animales transgnicos como el "ratn oncognico" han sido muy tiles en trabajos de laboratorio para estudios de enfermedades humanas. Existen tres reas diferentes en las cuales la biotecnologa puede influir sobre la produccin animal: -El uso de tecnologas reproductivas -Nuevas vacunas y -Nuevas bacterias y cultivos celulares que producen hormonas. En animales tenemos ejemplos de modelos desarrollados para evaluar enfermedades genticas humanas, el uso de animales para la produccin de drogas y como fuente donante de clulas y rganos, por ejemplo el uso de animales para la produccin de protenas sanguneas humanas o anticuerpos. Para las enfermedades animales, la biotecnologa provee de numerosas oportunidades para combatirlas, y estn siendo desarrolladas vacunas contra muchas enfermedades bovinas y porcinas, que en los ltimos tiempos han hecho mella en estos animales. 9. Biotecnologa Industrial Las tecnologas de ADN ofrecen muchas posibilidades en el uso industrial de los microorganismos con aplicaciones que van desde produccin de vacunas recombinantes y medicinas, tales como insulina, hormonas de crecimiento e interfern, como enzimas y produccin de protenas especiales. Desde hace varias dcadas las grandes multinacionales de la biotecnologa tienen puestos sus ojos en el control de algo vital para todos los pueblos del planeta, las plantas. Ya que, tanto las plantas silvestres como los cultivos encierran unas posibilidades de hacer negocio verdaderamente insospechadas. Y esta posibilidad la han visto claramente dos empresas como: Pharmagenesis es una empresa Americana que une, en la investigacin de las plantas, la biologa y la informtica. Esta empresa basa sus estudios en el anlisis de una planta china, llamada "Liana del Dios del Trueno", ha sido analizada qumica y genticamente y se ha descubierto que es eficaz contra la artritis y adems es anticancergena, ya que la molcula extrada de la planta provoca el suicidio de las clulas cancergenas de distintos tumores. Los chinos llevan muchos aos (muchsimos) utilizando de forma natural estas plantas, pero Pharmagenesis tiene la patente para explotar el principio activo de la "Liana del Dios del Trueno" y los chinos no obtienen ningn beneficio de ello, en cambio, esta empresa ganar mucho dinero por los derechos de autor en la venta de cada caja de medicamento que se venda. Pharmagenesis piensa que de alguna forma compensa a los ciudadanos chinos, puesto que les compra las plantas y porque todos sus empleados, en China, son nacionales de pas. Otra de estas industrias es Monsanto. Esta empresa americana es una de las gigantes de la qumica y los plsticos, y desde hace poco, de los genes. Ha creado cerca de dos hectreas de invernaderos en los que ha recreado los distintos climas existentes en el mundo, incluso las estaciones, y ha plantado en ellas una gran variedad de

plantas, arroz, soja, maz, tabaco, etc., a las que somete a estudios y pruebas. En sus estudios, cultiva plantas transgnicas, y las sita junto a otras plantas que no han sido modificadas genticamente, y el resultado es asombroso. La planta de patata transgnica ha soportado una plaga de escarabajos, debido a que en sus hojas existe una sustancia letal para ellos, en cambio la planta no modificada ha quedado destrozada por el ataque. Monsanto se fund en 1901, en ese momento era una de las cinco mayores empresas qumicas americanas. Fabric muchos productos que despus se demostr que eran txicos. En la guerra de Vietnam la aviacin norteamericana derram un potente herbicida, "el agente naranja" y uno de los principales proveedores fue Monsanto. Hoy hace lo que puede por cambiar de imagen, pero parece que no lo est logrando del todo, ya que se sabe que cada ao destina un 20% ms al desarrollo y elaboracin de herbicidas. Todos los beneficios que obtiene los est destinando al descubrimiento de nuevos genes y puesta a punto de nuevas plantas. En 1998 obtuvo unos beneficios de 118.000.000 millones de pesetas. Monsanto ha declarado que para el 2002 producir algodn coloreado genticamente, ser de color amarillo, rojo, blanco y azul. No ser necesario tintarlo despus. Es uno de los principales productores de soja transgnica. Los agricultores que adquieren semillas transgnicas contratan con ella deben firmar un contrato por el que se comprometen a pedir otro stock de semillas al ao siguiente, no tiene derecho a revender las semillas a otros, ya que tienen que devolverlas a la empresa, tampoco pueden volver a utilizarlas, los agricultores estn atrapados por la empresa ya que crean en ellos una dependencia total. Mediante una tarjeta de socio o cliente controlan a los agricultores, saben cuntos kilos de semillas se han llevado, dnde la cultivan, en qu fecha la cultivan, etc. Nueve de cada diez agricultores siguen a Monsanto y nueve de cada diez venden su soja a una empresa que, curiosamente, pertenece a Monsanto desde hace unos pocos aos. Es una prisin para los agricultores ya que entran en un crculo vicioso del que es difcil salir. Estos agricultores de soja transgnica utilizan un herbicida, propiedad de Monsanto, lo esparcen sobre el terreno y lo dejan limpio para sembrar, esparcen las semillas y tres meses despus vuelven a echar el herbicida, que mata todo menos la planta de soja. Monsanto les prometa cosechas abundantes y grandes beneficios, los agricultores se quejan de la escasez de las mismas y de lo caras que son las semillas, pero la gran empresa alega que ha de proteger sus obras cientficas y quien quiera utilizarlas ha de pagar su precio: "La poblacin mundial crece, por lo que hay que producir ms alimentos pero el terreno de cultivo sigue siendo el mismo, por ello es necesario cultivar ms y mejor." (Monsanto) Ha patentado una semilla que esteriliza las semillas que produce, por lo que stas no servirn para poder plantar al ao siguiente. Esta semilla es denominada por los ecologistas como "terminator". Tambin ha modificado una mala hierba que ahora produce plstico flexible. Adnde va a llegar esto?. En la India ya produce efectos negativos. Los agricultores de este pas quemaron una plantacin de algodn transgnico porque no produca la cantidad que le haban asegurado, sino todo lo contrario y adems muchos de ellos no pueden pagar el precio de la semillas, se sienten engaados. Es muy probable que se produzcan graves problemas y ya se estn produciendo los efectos negativos. En Australia las malas hierbas mutantes invaden los cultivos, en EEUU el maz transgnico amenaza con extinguir una mariposa protegida y en Inglaterra los cientficos han demostrado que el consumo de alimentos modificados genticamente puede producir alergias. Qu pasar dentro de dos o tres aos cuando el mundo este lleno de plantas que fabriquen

plsticos, vacunas y sustancias qumicas, qu va a ser de los pjaros, los mamferos que entran en contacto con estas plantas? Los Gobiernos han de pensar en ello antes de que sea tarde. 10. Biotecnologa vegetal Con las tcnicas de la biotecnologa moderna, es posible producir ms rpidamente que antes, nuevas variedades de plantas con caractersticas mejoradas, produciendo en mayores cantidades, con tolerancia a condiciones adversas, resistencia a herbicidas especficos, control de plagas, cultivo durante todo el ao. Problemas de enfermedades y control de malezas ahora pueden ser tratados genticamente en vez de con qumicos. La ingeniera gentica (proceso de transferir ADN de un organismo a otro) aporta grandes beneficios a la agricultura a travs de la manipulacin gentica de microorganismos, plantas y animales. Una planta modificada por ingeniera gentica, que contiene ADN de una fuente externa, es un organismo transgnico. Un ejemplo de planta transgnica es el tomate que permite mantenerse durante mas tiempo en los almacenes evitando que se reblandezcan antes de ser transportados En el mes de Enero del pasado ao 2000, se lleg a un acuerdo sobre el Protocolo de la Bioseguridad. Europa y Estados Unidos acordaron establecer medidas de control al comercio de productos transgnicos. Mas de 130 pases dieron el visto bueno al acuerdo de Montreal, sin embargo, en este acuerdo existen partes con posiciones, que si no son incompatibles, s son contradictorias en lo relativo al etiquetado y comercializacin de estos productos: De una parte encontramos a EEUU y a sus multinacionales, que acompaados por otros grandes pases exportadores de materias primas agrcolas, quieren una legislacin abierta y permisiva, en la que el mercado sea quien imponga su ley. EEUU defiende el uso de la biotecnologa y pone de relieve la importancia de su industria, que crea nuevos puestos de trabajo y fomenta la innovacin tecnolgica y podra acabar con el hambre del mundo. En el lado opuesto se encuentra la Unin Europea y otros pases desarrollados de Asia, que pretenden poner orden y lmite a ese comercio, empezando por un etiquetado riguroso que diferencie, tanto las materias primas como los productos elaborados en los que se incluyan organismos modificados genticamente (OMG). As mismo pretenden controlar y limitar el desarrollo de las patentes, propugnando incluso, una moratoria de 10 aos, debido a que no se conoce con certeza los verdaderos efectos de esas manipulaciones genticas sobre el resto de variedades vegetales y sobre el ecosistema. Espaa ha sido acusada por grupos ecologistas y organizaciones agrarias como, COAG y UPA de ser uno de los pases ms permisivos en este aspecto. El sector ms radical lo constituye aquellos los grupos conservacionistas y colectivos cientficos que abogan por la prohibicin de cualquier tipo de alteracin de los cdigos genticos. Las multinacionales de la biotecnologa son las que, por ahora se estn llevando el gato al agua. Los cinco gigantes son: AstraZeneca. DuPont. Monsanto. Novartis. Aventis. Suponen el 60%_________________del mercado de pesticidas.

23%_________________del mercado de semillas. 100%_________________del mercado de semillas transgnicas. Entre los cultivos transgnicos autorizados en la Unin Europea: PRODUCTO EMPRESA Tabaco Selta Soja Monsanto Colza PGS Maz Novartis Colza AgrEvo Maz (T25) AgrEvo Maz (MON 810) Monsanto Maz (MON 809) Ploneer Achicoria Bejo Zaden Colza AgrEvo Maz Novartis Colza PGS Patata AVEBE Remolacha DLF-Trifolium Clavel Florigene Tomate Zeneca Algodn Monsanto Maz DeKalb Patata Amylogene Clavel Florigene Fuente.Unesco, Emst & Young, SEBIOT. En Europa, los casos de Soja y Maz transgnicos resultan de especial relevancia. La soja se utiliza en un 40 a 60% de los alimentos procesados: aceite, margarina, alimentos dietticos e infantiles, cerveza, etc. Espaa importa de EEUU 15 millones de toneladas, el cuarto pas importador detrs de Japn, Taiwan y Holanda. La comercializacin del maz transgnico est autorizada en EEUU, Canad, Japn y tambin en la Unin Europea desde Enero de 1997. Qu consecuencias puede traer el consumo de plantas y alimentos transgnicos? China planea plantar tomates, arroz, pimientos y patatas por lo menos en la mitad de todas sus tierras de labor (500.000 kilmetros cuadrados) en el plazo de cinco aos. Sus investigadores analizaron el efecto de los pimientos y los tomates transgnicos en ratas de laboratorio, comparando el peso y el estado de los mismos con los de otros no alimentados, y no observaron diferencias significativas. La creacin o elaboracin de este tipo de alimentos depende del nivel de desarrollo del pas, de los intereses polticos del mismo y del grado de presin que ejerzan las grandes industrias privadas del sector. Hay un gran debate en torno a la conveniencia o no de este tipo de organismos. Entre los posibles beneficios que sus defensores alegan podemos sealar: Alimentos con ms vitaminas, minerales y protenas, y menor contenido en grasas. Cultivos ms resistentes al ataque de virus, hongos insectos sin la necesidad de emplear productos qumicos, lo que supone un mayor ahorro econmico y menor dao al medio ambiente. Mayor tiempo de conservacin de frutas y verduras.

 Cultivos tolerantes al sequa y estrs (Por ejemplo, un contenido alto de sal en el suelo). Hay quien asegura que estos alimentos ponen en peligro la salud humana, provocando la aparicin de alergias insospechadas. Por ejemplo, se han citado casos de alergia producida por soja transgnica manipulada con genes de la nuez de Brasil o de fresas resistentes a las heladas por llevar incorporado un gen de pescado (un pez que vive en aguas rticas a bajas temperaturas) En este caso, las personas alrgicas al pescado podran sufrir una crisis alrgica al ingerir las fresas transgnicas. Estas situaciones motivaron que organizaciones de consumidores y ecologistas pidieran que los productos elaborados con plantas transgnicas lleven la etiqueta correspondiente. Esta peticin fue concedida con la aprobacin el 15 de Mayo de 1997 del Reglamento CE n 258/97 "sobre nuevos alimentos y nuevos ingredientes alimentarios" aprobado por el Parlamento Europeo y el Consejo de la Unin Europea el 27 de Enero de 1997. En principio este Reglamento consideraba fuera de su aplicacin a los productos derivados de la soja y maz transgnicos, cuya comercializacin haba sido permitida con anterioridad, el 26 de Mayo de 1998 se aprob el Reglamento n1139/98/CE del Consejo por el que se exige el etiquetado de los alimentos e ingredientes alimentarios fabricados, total o parcialmente, a partir de maz y de semillas de soja modificados genticamente. Sin embargo esta regulacin es muy necesaria, ya que calmar, en cierto modo la alarma social existente en torno a las plantas y alimentos transgnicos. La sociedad conocer poco a poco las caractersticas de estos productos y su temor ya no podr basarse en el desconocimiento y temor a lo desconocido y novedoso, pudiendo entonces, aceptarlos o rechazarlos. 11. Biotecnologa ambiental La biotecnologa ambiental se refiere a la aplicacin de los procesos biolgicos modernos para la proteccin y restauracin de la calidad del ambiente. El uso de microorganismos en procesos ambientales se encuentra desde el siglo XIX. Hacia finales de 1950 y principios de 1960, cuando se descubri la estructura y funcin de los cidos nuclicos, se puede distinguir entre biotecnologa antigua tradicional y la biotecnologa de segunda generacin, la cual, en parte, hace uso de la tecnologa del ADN recombinante. Actualmente, la principal aplicacin de la biotecnologa ambiental es limpiar la polucin. La limpieza del agua residual fue una de las primeras aplicaciones, seguida por la purificacin del aire y gases de desecho mediante el uso de biofiltros. La biorremediacin (uso de sistemas biolgicos para la reduccin de la polucin del aire o de los sistemas acuticos y terrestres) se est enfocando hacia el suelo y los residuos slidos, tratamientos de aguas domsticas e industriales, aguas procesadas y de consumo humano, aire y gases de desecho, lo que est provocando que surjan muchas inquietudes e interrogantes debido al escaso conocimiento de las interacciones de los organismos entre s, y con el suelo. Los sistemas biolgicos utilizados son microorganismos y plantas. Cada vez mas compaas industriales estn desarrollando procesos en el rea de prevencin, con el fin de reducir el impacto ambiental como respuesta a la tendencia internacional al desarrollo de una sociedad sostenible. La biotecnologa puede ayudar a producir nuevos productos que tengan menos impacto ambiental. En definitiva, la biotecnologa puede ser utilizada para evaluar el estado de los ecosistemas, transformar contaminantes en sustancias no txicas, generar materiales biodegradables a partir de recursos renovables y desarrollar procesos de manufactura y manejo de desechos ambientalmente seguros. 12. Biotecnologa en los alimentos

Los Europeos y en especial los Espaoles, vivimos muy preocupados por su alimentacin. El consumidor tiende a asimilar alimento natural con alimento sano y seguro y a mitificarlo cuando lo compara con los transgnicos, sin pensar que stos han pasado por mayor nmero de evaluaciones sanitarias antes de su comercializacin. Centenares de cientficos de distintas disciplinas (qumica, farmacolgica.) trabajan en los centros de investigacin de la industria alimentara para desarrollar productos adaptados a nuestros sentidos. Detrs de los alimentos de aspecto y sabor perfecto, se esconde un largo y complejo proceso de elaboracin en el laboratorio. Si un sorbete a base de agua resulta cremoso o si una pizca de polvo marrn se convierte, al disolverse en el agua, en un capuchino, es gracias a recetas basadas en conocimientos de microfsica y de la qumica. Vamos a ver algunos ejemplos curiosos que se dan en algunos de los alimentos que tomamos cada da:

La multinacional Nestl est realizando un estudio para lograr que los cereales crujan ms, ya que a los consumidores no les gusta que sean demasiado silenciosos. Para que los espaguetis se cuezan por dentro, es necesario un tiempo de elaboracin de ocho o diez minutos, lo que provoca que la parte exterior se reblandezca demasiado, provocando que no queden al dente. Para evitarlo los cientficos del Centro de Investigaciones Nestl han creado unos espaguetis seccionados en forma de trbol, que se cuecen de forma uniforme en slo tres minutos. Las gominolas se elaboran a partir de macromolculas semejantes a las de los polmeros que forman los materiales plsticos. Las patatas fritas de bolsa se hicieron ms apetitosas gracias a un experimento de David Parker, de la Universidad de Birmingham, que las someti a una pequea dosis de radioactividad. Young Hwa Kim, fsico de la Lehig University Bethlem, en Pensilvania, ha logrado, sin aadir ningn ingrediente secreto al maz, palomitas gigantes, multiplicando su tamao por diez, simplemente reduciendo la presin existente en el ambiente en que se cuece. Otros cientficos Alemanes de la Universidad Tcnica de Berln, tratan de solucionar uno de los mayores problemas de la cerveza, su espuma se desvanece rpidamente. Para resolverlo pretenden modificar directamente un gen de la cebada, para as conservar por ms tiempo su espuma.

Objetivos de la biotecnologa de alimentos. El objetivo fundamental de la Biotecnologa de Alimentos es la investigacin acerca de los procesos de elaboracin de productos alimenticios mediante la utilizacin de organismos vivos o procesos biolgicos o enzimticos, as como la obtencin de alimentos genticamente modificados mediante tcnicas biotecnolgicas. reas de aplicacin. Los aportes de la Biotecnologa para apoyar los procesos productivos de la industria alimentara y agroalimentaria se enfocan a dos grandes lneas prioritarias de investigacin:

Tecnologa de alimentos y Biocatlisis.

El rea de Tecnologa Enzimtica y Biocatlisis incluye el extenso campo de las Fermentaciones en procesamiento de alimentos, as como la Mejora gentica de microorganismos de aplicacin en tecnologa de alimentos y la Produccin de protenas y enzimas de uso alimentario.

Fermentaciones La Fermentacin es la transformacin de una sustancia orgnica (generalmente un carbohidrato) en otra utilizable, producida mediante un proceso metablico por microorganismos o por enzimas que provocan reacciones de oxidacin-reduccin, de las cuales el organismo productor deriva la energa suficiente para su metabolismo. Las fermentaciones pueden ser anaerbicas, si se producen fuera del contacto con el aire, o aerbicas, que slo tienen lugar en presencia de oxgeno. Las fermentaciones ms comunes en la industria de alimentos es la del azcar, con formacin de alcohol etlico, en la elaboracin de vino, cerveza, sidra; la del alcohol, con formacin de cido actico, en la elaboracin del vinagre; y la fermentacin lctica, en la elaboracin de quesos y yogures. Actualmente en la industria fermentativa se utilizan tanques de fermentacin en los que sta se realiza en condiciones controladas de temperatura y presin y que permiten regular constantemente la entrada y salida de productos. Los diversos tipos de fermentaciones en la industria de alimentos se pueden clasificar de la siguiente manera: - Fermentaciones no alcohlicas: Panadera (fermentacin por levaduras de panadera) Vegetales fermentados (encurtidos en general) Ensilado (fermentacin de forraje) - Fermentaciones alcohlicas: Vino (fermentacin alcohlica y malolctica). Cerveza. Sidra. Destilados. Vinagre (transformacin de alcohol en cido actico por fermentacin con Acetobacter) - Fermentaciones crnicas: Embutidos crudos curados (salame, chorizo espaol, etc.) Jamn Serrano (producto curado) Productos de pescado fermentado (fermentacin en filetes de pescado ahumado) - Fermentaciones lcticas: Leches fermentadas en general. Yogur (fermentacin de leche con microorganismos acidificantes, como Lactobacillus) Quesos (fermentacin con determinados cultivos bacterianos inoculados) Bebidas lcticas alcohlicas (Kefir) - Fermentaciones locales especiales: Salsa de soya. Miso. Tofu. Otros productos. Otras aplicaciones en Tecnologa Enzimtica y Biocatlisis - Mejora gentica de microorganismos: Obtencin de cepas recombinantes de microorganismos de utilidad en tecnologa de alimentos, mediante tcnicas de ingeniera gentica. Se obtienen as microorganismos como levaduras industriales que poseen una mayor adaptacin y eficacia en los procesos fermentativos, o bacterias capaces de producir determinadas enzimas de utilidad en procesamiento de alimentos. - Produccin de protenas y enzimas de uso alimentario:

Produccin de enzimas con una actividad enzimtica dada, a partir de clulas microbianas. Esta actividad se vale de varias disciplinas, como la microbiologa, la ingeniera gentica, ingeniera de protenas e ingeniera bioqumica. Se obtienen as enzimas que transforman el azcar en polmeros, enzimas que hidrolizan la lactosa de la leche para hacerla ms digerible, enzimas que se utilizan en enologa, etc. - Diseo de procesos enzimticos: Con los catalizadores disponibles o desarrollados, enzimas o clulas, libres o inmovilizadas, se pueden llevar a cabo procesos enzimticos o fermentativos en reactores de diversas caractersticas, las que se determinarn para cada proceso especfico. As, se ha desarrollado, por ejemplo, una lnea de procesos de extraccin enzimtica de principios activos vegetales para la transformacin de materias primas. Tal es el caso de un proceso biolgico para la extraccin de aceite de coco, sin usar solventes ni extractores mecnicos. Lneas de Investigacin en Tecnologa Enzimtica y Biocatlisis En la actualidad se estn llevando a cabo diversos avances en los campos de investigacin referentes a Tecnologa Enzimtica y Biocatlisis, en particular el estudio del metabolismo y mejoramiento gentico de Levaduras Industriales, as como la expresin de enzimas especficas mediante cepas microbianas recombinantes. Algunas de las lneas de investigacin en desarrollo actual son las que se describen a continuacin: - Bacterias Lcticas: Utilizacin de tcnicas y desarrollo de mtodos para la deteccin e identificacin de bacterias lcticas, utilizadas como cultivos iniciadores de fermentaciones alimentaras. Estudios sobre el metabolismo de bacterias lcticas, incluyendo metabolismo de azcares, regulacin de la gluclisis e incidencia en la produccin de voltiles y la calidad de productos lcteos. - Biologa Molecular de Levaduras Industriales: Estudio de mecanismos moleculares implicados en la fisiologa de levaduras industriales durante los procesos fermentativos que llevan a cabo. Estudio de los mecanismos moleculares de la respuesta a estrs osmtico en levaduras industriales. Modificacin gentica de cepas de levaduras industriales para conseguir una mayor adaptacin y eficacia en los procesos fermentativos. - Enzimas y Levaduras Vnicas: Utilizacin de tcnicas de seleccin e identificacin de levaduras vnicas. Estudios de la fisiologa de levaduras vnicas durante los procesos de fermentacin. Modificacin gentica de levaduras vnicas. Estudios sobre la aplicacin de enzimas en enologa. Produccin de enzimas de inters enolgico. - Estructura y Funcin de Enzimas: Estudios de la relacin entre estructura y funcin de protenas. Produccin heterloga de enzimas por cepas microbianas. - Levaduras de Panadera: Aislamiento y caracterizacin de microorganismos con aplicacin potencial en la industria de panadera. Estudios sobre el metabolismo de levaduras de panadera. Expresin heterloga de genes que codifican enzimas de inters en los procesos de panificacin.

- Taxonoma Molecular: Aplicacin de tcnicas moleculares para la deteccin e identificacin de bacterias en alimentos. Deteccin e identificacin de bacterias patgenas por PCR.

Alimentos genticamente modificados.

Qu son los Alimentos Genticamente Modificados? La demanda de alimento global ha aumentado la necesidad de cultivos mejorados. La Biotecnologa ofrece la tecnologa necesaria para producir alimentos ms nutritivos y de mejor sabor, rendimientos ms altos de cosecha y plantas que se protegen naturalmente contra enfermedades, insectos y condiciones adversas. La tecnologa de Alimentos Genticamente Modificados (tambin llamados Alimentos Transgnicos) permite efectuar la seleccin de un rasgo gentico especfico de un organismo e introducir ese rasgo en el cdigo gentico del organismo fuente del alimento, por medio de tcnicas de ingeniera gentica. Esto ha hecho posible que se desarrollen cultivos para alimentacin con rasgos ventajosos especficos u otros sin rasgos indeseables. En lugar de pasar 10 o 12 aos desarrollando plantas a travs de mtodos de hibridacin tradicional, mezclando millares de genes para mejorar un cultivo determinado, la Biotecnologa actual permite la transferencia de solamente uno o pocos genes deseables, obteniendo cultivos con las caractersticas deseadas en tiempos muy cortos. Principales aplicaciones en Alimentos Genticamente Modificados Las ventajas ofrecidas por la Biotecnologa de modificacin gentica se aplican fundamentalmente en el mejoramiento de cultivos agrcolas. Las principales aplicaciones se ven en cultivos con las siguientes caractersticas: Resistencia a enfermedades y plagas Resistencia a sequas y temperaturas extremas Aumentos en la fijacin de nitrgeno (permitiendo reducir el uso de fertilizantes) Resistencia a suelos cidos y/o salinos Resistencia a herbicidas (permitiendo eliminar malezas sin afectar el cultivo) Mejoramientos en la calidad nutricional. Modificaciones para obtener cosechas ms tempranas. Mejor manejo de postcosecha. Otras caractersticas de valor agregado. Ventajas de los Alimentos Genticamente Modificados Las ventajas ofrecidas por los Alimentos GM pueden resumirse en los siguientes aspectos principales: - Mejoras nutricionales: Se pueden efectuar modificaciones genticas para obtener alimentos enriquecidos en aminocidos esenciales, alimentos con contenido modificado de cidos grasos, alimentos con alto contenido de slidos, o alimentos enriquecidos en contenido de determinadas vitaminas o minerales, entre otras caractersticas de calidad nutricional. - Mayor productividad de cosechas: Se pueden obtener cultivos para alimentacin genticamente modificados que presenten resistencia natural a enfermedades o plagas, condiciones climticas adversas o suelos cidos o salinos, aumento en la fijacin de nitrgeno de las plantas, resistencia a herbicidas. Todo esto permite reducir notablemente el dao a los cultivos y aumentar la productividad agrcola en cifras cercanas al 25%.

- Proteccin del medioambiente: Los cultivos biotecnolgicos que son resistentes a enfermedades e insectos reducen la necesidad del uso de pesticidas agroqumicos, lo que se traduce en una mucho menor exposicin de aguas subterrneas, personas y ambiente en general a residuos qumicos. - Alimentos ms frescos: Cultivos a los cuales se ha modificado los genes que regulan la velocidad de maduracin de frutos permiten obtener variedades de maduracin lenta, de modo de permitir manejos de postcosecha o transportes de ms larga duracin sin que los alimentos lleguen al consumidor en estados avanzados de madurez. Principales especies cultivadas de Alimentos Genticamente Modificados Los principales cultivos genticamente modificados para alimentacin que se utilizan hoy en da son soya, maz, canola, tomate, papas y calabaza; considerndose los tres principales soya, canola y maz. Por su repercusin en Europa, los casos de la soya y el maz transgnicos resultan de especial relevancia. La soya se utiliza en un 40-60% de los alimentos procesados: aceite, margarina, alimentos dietticos e infantiles, cerveza, etc. El 2% de la soya producida en Estados Unidos es transgnica, de la que un 40% se exporta a Europa. La utilizacin de plantas transgnicas en programas de mejora se va incrementando da a da. Algunos expertos han llegado incluso a predecir que hacia el ao 2005, el 25% de la produccin agrcola en Europa lo ser de plantas transgnicas. Nota: "Canola" es una combinacin de dos palabras: canadiense y aceite (oil). La canola fue desarrollada por cultivadores canadienses con tcnicas tradicionales de cultivo, especficamente por sus cualidades nutricionales. Las semillas se prensan, obtenindose el aceite de canola para consumo humano, y el resto se procesa para obtener alimento para ganado. Reconocida ya por sus beneficios para la salud, la investigacin ahora se est llevando a cabo para mejorar aun ms el perfil nutricional de la canola. Algunos ejemplos destacables de Alimentos GM - Soya resistente a glifosato: Es una variedad de soya transgnica obtenida por la compaa estadounidense Monsanto, a la que se le ha transferido un gen que produce resistencia al glifosato, componente activo del herbicida "Roundup". Esto permite la utilizacin del herbicida sin afectar el cultivo, permitiendo que se alcancen mayores niveles de productividad. - Maz resistente a glufosinato y a Ostrinia nubilabis: Maz transgnico producido por la multinacional Ciba-Geigy (hoy Novartis), resistente al glufosinato de amonio (componente activo del herbicida "Basta"), y resistente adems al Ostrinia nubilabis, un insecto que horada el tallo de la planta destruyndola. - Tomate de maduracin lenta: Se han obtenido plantas transgnicas de tomate con genes que alargan el perodo de conservacin y almacenamiento evitando la sntesis de la poligalacturonasa que produce el reblandecimiento del fruto. As, se tienen ventajas en cuanto al manejo postcosecha de tomates, que pueden soportar perodos ms largos de almacenamiento o transporte y llegar en buenas condiciones al consumidor final. - Arroz Dorado: Es una variedad de arroz obtenida por modificacin gentica para contener Betacaroteno, una pro-vitamina que en el organismo se transforma en vitamina A. Esto puede significar una gran ayuda para pases en vas de desarrollo en los que se sufre masivamente de deficiencia de

vitamina A, condicin que puede llevar a muchos casos de ceguera. Muchos de estos pases, adems, tienen justamente al arroz como la base de su alimentacin. Consideraciones de seguridad para Alimentos GM El uso de procesos biotecnolgicos, particularmente modificacin gentica, es extremadamente importante al idear nuevas maneras de aumentar la produccin de alimentos, mejorar la calidad nutricional y proporcionar mejores caractersticas de proceso o almacenaje. Cuando se desarrollan nuevos alimentos o componentes de alimentos usando Biotecnologa, hay requisitos legales nacionales y expectativas del consumidor para que existan sistemas y procedimientos eficaces de evaluacin de la seguridad de los alimentos para el consumo. Las tcnicas tradicionales de evaluacin de la seguridad de los alimentos, basadas en pruebas toxicolgicas (segn lo utilizado para los aditivos alimentarios, por ejemplo), pueden no aplicarse siempre a los alimentos o componentes de alimentos obtenidos por Biotecnologa. De acuerdo a una reunin de consulta conjunta de la FAO y la OMS en 1996, las consideraciones de seguridad de alimentos con respecto a los organismos producidos por las tcnicas que cambian los rasgos hereditarios, como la tecnologa de DNA recombinante, son bsicamente las mismas que se relacionan con otras maneras de alterar el genoma de un organismo, tal como la hibridacin convencional. stas incluyen: Las consecuencias directas (nutricionales, txicas o alergnicas) de la presencia en los alimentos de nuevos productos genticos codificados por los genes introducidos durante la modificacin gentica. Las consecuencias de los niveles alterados de productos genticos existentes codificados por los genes introducidos o modificados durante la modificacin gentica. Las consecuencias indirectas de los efectos de cualquier nuevo producto gentico, o de niveles alterados del producto gentico existente, en el metabolismo del organismo fuente del alimento, que conduzca a la presencia de nuevos componentes o de niveles alterados de componentes existentes. Las consecuencias de las mutaciones causadas por el proceso de modificacin gentica del organismo fuente del alimento, como interrupcin de secuencias de codificacin o control, o la activacin de genes latentes, conduciendo a la presencia de nuevos componentes o de niveles alterados de componentes existentes. Las consecuencias de la transferencia gentica a la microflora gastrointestinal desde organismos genticamente modificados o alimentos o componentes alimenticios derivados de ellos. El potencial de efectos adversos para la salud asociados a los microorganismos genticamente modificados de los alimentos. La presencia en alimentos de genes nuevos o introducidos per se no es considerada como un riesgo a la seguridad de los alimentos, puesto que todo el DNA se compone de los mismos elementos. Aplicaciones ventajosas de Alimentos GM para el mundo en desarrollo En muchos pases en vas de desarrollo existen graves de problemas de hambre, subalimentacin, enfermedades y problemas de salud pblica en general. Las causas del hambre y malnutricin en el mundo en desarrollo son variadas y sistmicas, y hay pocas soluciones inmediatas y sostenibles. Sin embargo, en las prximas dcadas, la Biotecnologa ayudar a encontrar soluciones, y por lo tanto proporcionar opciones realistas para las naciones del mundo subdesarrollado. Naciones Unidas estima que ms de 100 millones de nios en todo el mundo tienen deficiencia de vitamina A, lo que puede conducir a tanto como 250.000 casos de ceguera infantil. El Arroz

Dorado, que fue creado por Biotecnologa para producir Betacaroteno, una pro-vitamina que se transforma en vitamina A, fue desarrollado especficamente para tratar esta crisis de salud. Para las poblaciones cuya fuente de alimentacin primaria es el arroz, este avance nutricional puede significar una mejora enorme en salud pblica. La deficiencia de hierro afecta a 400 millones de mujeres en edad de maternidad, lo que conduce a niveles ms altos de nacimiento prematuro, mortalidad perinatal y retraso mental y de crecimiento. Para dar solucin a este problema, investigadores en Biotecnologa estn intentando producir un arroz con niveles ms altos de hierro. Los cientficos tambin estn intentando mejorar el perfil nutricional de muchos de los alimentos del mundo, desde aceite de canola con niveles ms altos de Betacaroteno, a frutas y hortalizas que contengan ms vitaminas C y E. Los cultivos generados por Biotecnologa tambin poseen el potencial de transformar la productividad en el mundo en vas de desarrollo. Cultivos que son tpicamente daados por enfermedades, parsitos, malezas y sequas pueden causar la ruina de las economas de subsistencia. Nuevos cultivos genticamente modificados, que pueden resistir estas amenazas, estn siendo creados. Segn el Banco Mundial, la Biotecnologa podra elevar la productividad alimentara del mundo hasta en un 25%, alimentando a ms gente mientras se consumen menos recursos. Un ejemplo sobresaliente del impacto potencial de la biotecnologa agrcola se da en frica, donde los trabajos de desmalezamiento de cultivos prcticamente esclavizan a grandes cantidades de personas, impidiendo muchas veces que los nios asistan a la escuela. Una solucin la constituiran los cultivos resistentes a los herbicidas, que permitiran la eliminacin de malezas slo por rociamiento con estos agroqumicos. Quizs la ms significativa ventaja potencial de la Biotecnologa para el mundo en desarrollo se presenta en la forma de alimentos capaces de vacunar contra enfermedades. Los cientficos ya han demostrado que un alimento se puede utilizar para administrar vacunas contra enfermedades especficas. El virus Norwalk provoca una enfermedad poco conocida que afecta a nios y ancianos con gastroenteritis a veces mortales. Investigadores de la Universidad de Cornell desarrollaron recientemente una variedad de papa que inmuniza contra el virus Norwalk. Adems, ya se est anticipando la produccin de una variedad de pltano que puede entregar una vacuna contra la hepatitis B. Incluso en el mundo desarrollado, no todos los nios reciben las inmunizaciones necesarias. En las regiones del mundo donde la inmunizacin es prcticamente inexistente y el conocimiento de los conceptos de salud pblica es limitado, el desarrollo de estos nuevos alimentos podra combatir la significativa desnutricin y paliar las deficiencias en salud. El futuro de la Biotecnologa de Alimentos Genticamente Modificados La prxima generacin de productos obtenidos por Biotecnologa, muchos de los cuales ya han sido desarrollados pero no estn todava en el mercado, se concentran en una cantidad de caractersticas que subrayarn su uso en sistemas de produccin de alimentos, como tambin mejorarn sus aspectos de calidad final. Estos alimentos posibles incluyen soya con cualidades nutricionales mejoradas mediante un incremento en el contenido de protenas y aminocidos; cultivos con aceites, grasas y almidones modificados para mejorar el procesamiento y la digestibilidad, tales como canola con alto contenido de estearato, maz bajo en fitato o cido ftico. Otros productos que estn siendo desarrollados incluirn nuevas caractersticas de calidad para el consumidor, como los llamados alimentos funcionales, que son cultivos desarrollados para producir medicinas o suplementos alimentarios dentro de la planta. Estos podrn proporcionar inmunidad contra enfermedades o mejorar caractersticas saludables de los alimentos

tradicionales. Una investigacin substancial tambin se ha dedicado al desarrollo de pescado genticamente modificado, como el salmn. Algunos de estos productos ya estn disponibles para el uso, no obstante la mayora est a aos de la produccin comercial generalizada. Algunos ejemplos destacables de Alimentos Genticamente Modificados que podran desarrollarse en el futuro son los siguientes: Leche con biodisponibilidad de calcio mejorada. Huevos con menos colesterol. Papas y tomates con mayor contenido de slidos. Maz y soya con contenido aumentado de aminocidos esenciales para ser utilizados en alimentacin humana y animal. Caf descafeinado naturalmente. Cultivos con contenido modificado de cidos grasos que permitan la produccin de aceites ms saludables. Rasgos que controlan la maduracin de pimientos y fruta tropical, permitiendo un aumento en los tiempos necesarios para transportes de larga distancia. Las ventajas generales que se visualizan en la agricultura de Alimentos GM incluyen bsicamente la proteccin de cultivos contra prdida de productividad, reduccin en el uso de pesticidas, mayor proteccin medioambiental, proteccin contra insectos por temporadas largas, y ahorros de trabajo y energa porque los agroqumicos seran aplicados con menor frecuencia. Resumiendo, se puede decir que la Biotecnologa tiene un amplsimo rango de aplicacin en la industria de alimentos, ofreciendo los medios para producir alimentos de mejor calidad en forma ms eficiente y segura para la salud y el medio ambiente. Una de las promesas de la Biotecnologa es generar innovaciones y mejoras en los alimentos conduciendo a prcticas agrcolas ms ecolgicas, contribuyendo a una agricultura sustentable que utiliza con respeto los recursos del medioambiente. El rea de mayor aplicacin de la Biotecnologa en alimentos, y la ms antigua, corresponde a las Fermentaciones, de gran importancia dentro de la Tecnologa de Alimentos y que abarca varios campos, como fermentaciones alcohlicas, fermentaciones crnicas y fermentaciones lcticas. El rea ms reciente y de mayor proyeccin dentro de la Biotecnologa de Alimentos est en el desarrollo de Alimentos Genticamente Modificados o Transgnicos, cuyas principales ventajas se ven en mejoras nutricionales, mayor productividad de cosechas y mayor proteccin medioambiental. Adems, los Alimentos GM poseen hoy en da gran importancia en las soluciones de graves problemas de escasez de alimentos, desnutricin y problemas de salud pblica en general del mundo en vas de desarrollo. Utilizacin de enzimas en la industria de alimentos.
INDUSTRIA Cervecera ENZIMAS Amilasas Papaina, Pepesina Fiscina, Bromelina INCIDENCIA TECNOLOGICA Mejoran los procesos de liquefaccin y de sacarificacin. Evitan la turbidez durante la conservacin de ciertos productos.

Vinificacin

Glucosa-oxidasa Enzi. Ppticas Glucosa-oxidasa

Evitan el oscurecimiento y los sabores desagradables. Mejoran la clarificacin y extraccin de jugos. Evita el oscurecimiento y los sabores desagradables.

Bebidas no alcohlicas

Glucosa-isomerasa Enzi. Ppticas Tannasa Glucosa-oxidasa

Utilizacin de jarabes de alto contenido de fructuosa. Mejoran la clarificacin extraccin de jugos. Aumenta la solubilidad y disminuye la turbidez del t. Evita el oscurecimiento y los sabores desagradables.

Lechera

Tripsina Lactasa

Enmascara el gusto a oxido. Fabricacin de leche delactosada, evita la cristalizacin de leche concentrada. Precipitacin de la casena. Influencia el sabor de los quesos. Influencia el sabor de los quesos. Evita la cristalizacin. Permite la utilizacin de jarabes de alta concentracin de fructuosa. Ablandamiento de carnes. Produccin de hidrolizados. Mejora la calidad del pan. Mejora la coloracin de la superficie, debido a la reaccin de Maillard. Disminuye la viscosidad de la pasta. Produce una miga muy blanca.

Quesera

"Cuajo" Lactasa Lipasa

Helados

Lactasa Glucosa-isomerasa

Industrias crnicas

Papaina, Fiscina bromelina

Panificacin

Amilasa Lactasa Proteasa Lipoxidasa

Confitera

Amilasas, Pullulanasa Isoamilasas,

Hidrlisis de almid y produccin de jarabes de alto contenido de fructuosa. Acenta el sabor en chocolates.

Invertsa y Glucosa-isomersa lipasa Industria azucarera Alfa-galactosidasa Hidrolisa la rafinosa y permite la cristalizacin normal del azcar.

Biotecnologa ambiental. La biotecnologa ambiental se refiere a la aplicacin de los procesos biolgicos modernos para la proteccin de la calidad del ambiente. Las aplicaciones al medio ambiente son: -Eliminacin de los materiales pesados. -Eliminacin de las mareas negras. -Obtencin de energa no contaminante. -Tratamientos de residuos urbanos e industriales. -Tratamientos de diferentes tipos de contaminacin asociados a la industria del petrleo. -Tratamiento de la contaminacin producida por herbicidas, pesticidas y insecticidas -Ensayos sobre la toxicidad de diversos compuestos en la naturaleza. -Detencin de metales. -Recuperacin de metales preciosos. -Degradacin de aceites. -Separaciones selectivas de mezclas de hidrocarburos. La biotecnologa vegetal: La ingeniera gentica (proceso de transferir ADN de un organismo a otro) aporta grandes beneficios a la agricultura a travs de la manipulacin gentica de microorganismos, plantas y animales.

Una planta modificada por ingeniera gentica, que contiene ADN de una fuente externa, es un organismo transgnico. Un ejemplo de planta transgnica es el tomate que permite mantenerse durante mas tiempo en los almacenes evitando que se reblandezcan antes de ser transportados. Los objetivos de la ingeniera gentica son: -Prevencin y cura de enfermedades. -Desarrollo de microorganismos, plantas o animales fines distintos. Los microorganismos que son fruto de otros se les llama microorganismos recombinantes. Los animales y plantas que son fruto de manipulaciones genticas reciben el nombre de plantas y animales transgnicos.

Los plsmidos de bacterias

A. Introduccin ..........1. los plsmidos y episoma (plsmidos F). ..........2. conjugacin, sexduccin y el plsmido R. ..........3. tipos de plsmidos ..........4. estructura de los plsmidos ..........5. transformacin ..........6. Los marcadores de seleccin ..........7. el replicn y el orgen de replicacin ..........8. clonacin y los sitios de clonaje ..........9. cualidades de un vector de clonaje B. Algunas tcnicas de clonaje ..........1. insercin de un gen de resistencia ..........2. insercin de un LacZa ..........3. clonaje direccional ..........4. desfosforilacin C. El opron lactosa ..........1. la -galactosidasa: ..........2. el pptido alfa LacZ (lacZa) ..........3. los inductores: lactosa y IPTG: ..........4. el operador ..........5. La fijacin del represor-lac en el operador ..........6. la lactosa estorba al represor de reaccionar ..........7. los otros gens del opern lactosa

A. Introduccin 1. Los plsmidos de bacterias Son molculas de ADN circular o lineal de 1 kb a 250 kb, contienen de 2 hasta 30 genes. Los plsmidos se rplican y se transmiten independientemente del cromosoma bacteriano. La replicacin y la transcripcin de los plsmidos dependen de las protenas de la clula husped. Los gens codificados por los plsmidos le donan ciertos privilegios a la clula husped. El nmero de plsmidos puede variar, dependiendo de su tipo, desde una sola copia hasta algunos cientos por clula. Los plsmidos se utilizan en ingeniera gentica por la facilidad con la que se manipulan. Los plsmidos usados en Ingeniera Gentica contienen uno o dos genes que les confieren resistencia a antibiticos (marcadores seleccin) y permiten seleccionar clones recombinantes

Episoma: Si el plsmido posee la capacidad de insertarse en el cromosoma bacteriano se le denomina episoma. Dentro de este grupo de plsmidos se encuentran los factores de fertilidad o plsmidos F, que regulan el proceso de conjugacin bacteriana.. 2. Conjugacin, sexduccin y plsmido R

La conjugacin bacteriana es un proceso por el que se transfiere material gentico (un plsmido o el genoma bacteriano) entre bacterias. La clula que aporta el material gentico se llama donadora y aqulla que lo recibe receptora. La bacteria donadora debe tener un plsmido, el factor F, que contenga la informacin gentica necesaria para la formacin del pili sexual. Un pilus es un "tubo" que se extienden desde la superficie de la clula bacteriana donadora. Se llama (F-) a las bacterias que no poseen el plsmido F, (F+) si poseen dicho factor en su citoplasma y (Hfr) (High frequency of recombination) si el plsmido F est integrado en su cromosoma (episoma), lo que aumenta la frecuencia de la transferencia

La restriccin limita en todos los casos la conjugacin (ver el captulo sobre las enzimas de restriccin). Una bacteria receptora recibe ADN de la clula donante. Una vez que el fragmento de ADN de la donante est dentro de la clula receptora es posible la recombinacin: el ADN de la donante se alinea con el de la receptora y por entrecruzamiento (crossing over) se intercambian genes, pasando a formar parte del genoma. Una variante de la conjugacin es la sexduccin. En la sexduccin un trozo definido de material gentico de la donadora es transferido como parte de un plsmido conjugativo.

El plsmido F contiene 25 genes que controlan la produccin de los pilis. Los pili se observan prcticamente solo en bacterias Gram negativas y solo escasos organismos Gram-positivos los poseen. El plsmido R confiere, a las clulas que lo poseen, resistencia a los antibiticos o drogas. Un plsmido R puede llegar a tener hasta 10 genes que confieren resistencia y pueden transferirse a otra bacteria por la conjugacin. El plsmido R pueden tambin ser transmitidos por virus, por ejemplo el fago P1: un error de encapsidation del fago P1 permite la integracin del plsmido en el capside. 3. Tipos de plsmidos: Podemos clasificar los plsmidos basndose en su funcin. a. "Fertility - (F) plasmids" son capaz de conjugacin. b. " Resistance - (R) plasmids " contienen los gens que pueden construir una resistencia contra antibiticos o venenos. c. "Col-plasmids" contiene gens que codifican colicinas, protenas que pueden matar otra bacteria. d. " Degrative plasmids " permiten la digestin de sustancias inslitas como el toluole o el

cido salicylico. e. " Virulence plasmids " giran la bacteria en un patgeno. Plasmids que existe slo como una copia sola en cada bacteria es, sobre la divisin de clula, en el peligro de ser perdido en una de la bacteria de segregar. Tal copia sola plasmids tiene los sistemas que intentan activamente distribuir una copia a ambas clulas de hija. Algn plasmids incluye un sistema de aficin. Ellos producen tanto veneno duradero como su antdoto efmero. La clula que mantiene una copia del plasmid sobrevivir, mientras la clula sin el plasmid morir porque esto se queda sin el ant4. estructura de los plsmidos Las formas de ADN Los plsmidos se encuentran principalmente en forma superenrollada en las bacterias. Las formas de ADN pueden visualizarse en el microscopio electrnico como crculos relajados o superenrollados. Adems, pueden identificarse por electroforesis o por centrifugacin. En estos casos, la estructura compactada del ADN superenrollado aumenta su migracin electrofortica y su velocidad de sedimentacin, lo cual permite diferenciarlo del A

DN circular relajado o del ADN lineal.

Las topoisomerasa I y II La topoisomerasa II tiene la propiedad de transformar un ADN circular relajado en superenrollado. Este proceso implica pasar de una forma sin almacenamiento de energa

a una forma con alto contenido energtico, y por lo tanto es necesaria la presencia de adenosinatrifosfato (ATP) como donante energtico. Por el contrario, la transformacin de ADN superenrollado en relajado con subsecuente liberacin de energa es catalizada directamente por la topoisomerasa I sin necesidad de ATP. La ADN girasa es una de las topoisomerasas I. La ADN girasa La ADN girasa, como las topoisomerasas, tiene una funcin muy importante en la modulacin del estado topolgico del ADN, pues regula su estructura supA diferencia de la topoisomerasa 1, la ADN girasa, corta las dos cadenas de la doble hlice del ADN; y acta en la replicacin del ADN. Mientras, la topoisomerasa 1 corta una cadena del ADN para aliviar el superenrrollamiento, y acta durante la transcripcin del ADN. ________________________ almacenamiento, m: storage, warehousing relajar verbo transitivo: to relax electroforesis: separacin de partculas en suspensin con la ayuda de un campo elctrico. centrifugacin: separacin de partculas en suspensin con la ayuda de un campo gravitacional. 6. Los marcadores de seleccin Para identificar las bacterias transformadas, se utilizan marcadores de seleccin proporcionados por plsmidos. Los marcadores de seleccin ms utilizados son los gens de resistencia a antComo regla, las bacterias transformadas se cultivan en presencia del antibitico para evitar que la bacteria pierda el plsmido que se le ha introducido antibiticos, como la ampicilina, la tetraciclina, el cloramfenicol y la kanamicina. Como regla, las bacterias transformadas se cultivan en presencia del antibitico para evitar que la bacteria pierda el plsmido que se le ha introducido 7. el replicn y el orgen de replicacin El elemento gentico que controla el nmero de copias del plsmido se encuentra en una regin del ADN plasmdico que incluye el orgen de replicacin. El orgen de replicacin y los elementos de control asociados definen la unidad gentica llamada replicn . 8. Clonacin vector de clonaje: El principio de la clonacin en biologia molecular consiste en insertar un segmento de ADN extranjero en una molcula pequea capz de replicarse automtica. A se tipo de molcula de ADN se lo denomina vector de clonaje. plsmidos recombinados:

Los plsmidos son excelentes vectore de clonaje. Puede ser "cortado" con una dos enzimas de restriccin puede incorporrsele un fragmento de ADN que ha sido previamente cortado usando mas mismas enzimas de restriccin. Los plsmidos as modificados se los denomina plsmidos recombinados. En ste estado, se los introduce entonces en una bacteria donde sern replicados Clonado en bacterias es (en biologia molecular) insertar un segmento de ADN extrangeros en un vector, transformar las bacterias con este vector y seleccionar las bacterias transformadas.

-------------------------------Clonacin: Quiere decir multiplicacin ori: orgen de replicacin. f1 ori: orgen de replicacin del fago f1. Serva antao para la secuenciacin

pGEM-13Zf(+) Vector sequence reference points. Sitio de initiacin la transcripcin por la RNA polimerasa T7 Sitio de initiacin la transcripcin por la RNA polimerasaSP6 Promotor de la RNA polimerasa T7 (nt 31633) Promotor de la RNA polimerasa SP6 (nt 49-68) sitio de clonaje (nt 1143) codon inicial operon lacZ (nt 90) secuencia 30003160 de lac Z (nt 76323) operator 1de lac (nt 10126) beta-lactamase coding region (nt 12472107) fago f1 regin (nt 25442999)

Las ARN polimerasas T7 y SP6. Las ARN polimerasas T7 y SP6 son ADN dependiente ARN polimerasas. Son muy especficos de sus promotores. Estas dos enzimas permiten la sntesis de sondas ARN para cada cadena del insert. Si ciertos nucletidos son marcados, las sondas son tambin marcadas. Los sitios de clonaje (polylinker): Los sitios de restriccin (Not Im Sfi I y Hind III) han sido obtenidas sin cambiar el nmero de los nts. Simplemente se cambian el uno o el otro de ellos.

3. seleccin de bacterias transformadas 9. cualidades de los plsmidos como vector de clonaje La mayora de los plsmidos en uso contienen un replicn derivado del plsmido pMB1, inicialmente aislado de una muestra clnica. En condiciones normales de cultivo, se encuentra un mnimo de 15 a 20 copias de plsmido que contienen el replicn en cada clula bacteriana. Los plsmidos deben contener marcadores genticos particulares, como gens de resistencia a antibiticos el gen que codifica la -galactosidasa. Los plsmidos deben contener tambin uno ms sitios de restriccin nicos en una regin que no sea esencial para la replicacin del plsmido. Los plsmidos deben tener tambin sitios de restriccin nicos en los gens codantes de marcadores selectivos. Esos marcadores son inactivados cuando en ellos se inserta un fragmento de ADN extranjero. B. Algunas tcnicas de clonaje

1. insercin en un gen de resistencia Se puede clonar un fragmento de ADN en un gen de resistencia a un antibitico, con la condicin de que el plsmido porte al menos 2 gens de resistencia (como pBR 322). En el ejemplo siguiente, el ADN plasmdico se corta con la enzima Bam HI donde la

secuencia de reconocimiento se localiza en el gen de resistencia a la tetraciclina (tetr). El vector digerido por Bam HI se une al fragmento de ADN "b" cuyas extremidades han sido genradas tambin por la enzima BamHI. La ligacin se realiza por la ligasa de ADN T4 y ATP. El riesgo de que un vector vaco se forme es bin elevado. El producto de la ligado es transformado por la E. coli. Las bacterias son sembradas en medio que contiene la ampicilina. Entre las colonias que sobreviven a la ampicilina, se encuentran plsmidos recombinados y tambin vectores vacos que son recirculados sin inserto.

Para diferenciar los 2 tipos de transformados, se replican los cultivos y se siembran en medios que contienen antibiticos, ya sea ampicilina tetraciclina. Las bacterias que no crecen en presencia de tetraciclina pero que crecen en presencia de

ampicilina son las que contienen un plsmido recombinado. Este mtodo sinembargo es poco utilizado.

pBR322 es un plsmido comercial de este tipo. El sitio Bam HI y su posicin han sido escrita en rojo. Este plsmido es un vector de 4361 bp. Ahora, es poco utilizado, pero, a menudo, se citan en muchos artculos. 3. clonaje direccional La mayora de plsmidos utilizados actualmente (como el vctor pGEM del ejemplo precedente) contienen polilinkers con varios sitios de restriccin nicos que permiten varios usos experimentales. Permite as tambin de encontrar sitios de restriccin compatibles con las extremidades del fragmento a clonar. Por ejemplo, el vctor pUC19 puede ser digerido por BamHI y HindIII y, luego de la digestin, el gran fragmento del vector puede ser separado del pequeo fragmento correspondiente a partir de un polinker, por electroforsis en gel de agarosa. El vector puede unirse por ligado a un fragmento de ADN que tiene extremidades compatibles con aquellas genradas por BamHI y HindIII. Las molculas de ADN circular obtenidas sont transformadas en la E. coli. Las bacterias transformadas son identificadas por su capacidad de resistencia a la ampicilina. En tanto que no halla complementaridad entre las extremidades adhesivas BamHI y HindIII del vector, la circularizacin de aquel no es posible. A pesar de que el vector ser transformado con poca eficiencia, la mayora de las bacterias resistentes a la ampicilina contendran el plsmido recombinado

4. defosforilacin La T4 DNA ligasa cataliza la formacin de un enlace fosfodister entre los nucletidos adyacentes solamente si uno de los nucletidos contiene un grupo 5'-fosfato y el otro un 3'-OH. Los 5'-fosfatos de las 2 extremidades de una hebra linear de ADN en presencia de una fosfatasa intestinal de ternero (CIP) alcalina de camarones (SAP) : no permite ms la recircularizacin del vector. Si se une un fragmento de ADN con las extremidades 5'fosfato al vector desfosforilado, se obtiene entonces una molcula de ADN circular con 2 cortes. Esos cortes son reparados cuADNo el plsmido recombinado se introduce en la bacteria. Como el ADN plasmdico circular es ms eficientemente transformado que el ADN linear, la mayora de transformantes contendrn el plsmido recombinado. Debido a la facilidad de uso, los plsmidos son los vectores ms empleados en ingenra gentica. Son los vectores ms eficientes de todos si el tamao del ADN a clonar es inferior a 10 kb. Para fragmentos con tamao superior a 10 Kb, la eficiencia de transformacin se hace demasiado dbil.

C. El opron lactosa 1. la -galactosidasa: La E. coli no utiliza la lactosa como tal, sino cuando sta es hidrolizada en glucosa y galactosa. La -galactosidasa hidrolisa la lactosa a partir de un substrato sinttico denominado X-gal. Si la galactosa no est presente en el medio de cultivo, la E. coli exprime solamente muy poco de -galactosidasa. En cambio, en presencia de lactosa, exprime la -galactosidasa abundantemente. Es por sto que se dice que puede regular la expresin de la -galactosidasa. Cuando la -galactosidasa entra en contacto con el producto X-gal, ella lo convierte en un producto coloreado de azl. La -galactosidasa es codificado por el gne LacZ. 2. el pptido LacZ alfa: El pptido LacZ-alfa es la parte de la -galactosidasa que no tiene actividad por s misma, pero que es necesaria para la accin de la enzima. Existen cultivos comerciales de E. coli a los cuales se les ha eliminado el gen del pptido alfa. Cuando los plsmidos contenientes ste gen son introducidos en sas bacterias, le donan el LacZ alfa que les faltaba. 3. los inductores: lactosa y IPTG: La lactosa cuando presente induce la expresin de -gal. Existen tambin otros compuestos as capces de provovar la misma respuesta inductrz. En el laboratorio, uno de los ms utilizados es el isopropil- -D-tiogalactsido (IPTG). El IPTG no es metabolizado. 4. el operador El estudio de E. coli mutantes, incapces de modular la produccin de la -galactosidasa conducieron a Monod y Jacob a postular la existencia de un sitio de ADN cercano al gen codificador de la -galactosidasa sobre el cual se fijara un represor. Es as, que el adjetivo operador fu donado.

5. El represor-lac puede fijarse en el operador El ajuste espacial producido por la fijacin del represor-lac en el operador no permite que la ARN polimerasa se una al ADN y de comenzar la transcripcin del gen que codifica la -galactosidasa. El represorlac es una protena constitutiva codificada por el gen "i".

6. la lactosa impide al represor de reaccionar La lactosa se une al represor y le impide de liarse al operador. En presencia de lactosa el represor es inactivado y el ARNm lac es transcripto. Si la lactosa es eliminada del medio, el represor recupera su capacidad de fijarse al operador y de impedir la transcripcin del gen. 7. los otros gens del opron lactosa: los otros gens del opron lactosa: El gen de E. coli que codifica la -galactosidasa (Z) se encuentra adyacente a 2 otros gens implicados tambin en el metabolismo de la lactosa la lactosa permeasa: el gen lacY codifica la lactosa permeasa que facilita la entrada de lactosa en la clula. la thiogalactosida transacetilasa: El gen lacA, codifica la thiogalactosida transacetilasa, una enzima probablemente implicada en la eliminacin de compuestos similares a la lactosa, pero que la galactosidasa no puede separar en metabolitos nutritivos.

Qu es la clonacin?
Hay que diferenciar el uso de la palabra clonacin en distintos contextos de la biologa: Si nos referimos al mbito de la Ingeniera Gentica, clonar es aislar y multiplicar en un tubo de ensayo un determinado gen o, en general, un trozo de ADN. Sin embargo, Dolly no es producto de Ingeniera Gentica. En el contexto a que nos referimos, clonar significa obtener uno o varios individuos a partir de una clula somtica o de un ncleo de otro individuo, de modo que los individuos clonados son idnticos o casi idnticos al original. En los animales superiores, la nica forma de reproduccin es la sexual, por la que dos clulas germinales o gametos (vulo y espermatozoide) se unen, formando un zigoto (o huevo), que se desarrollar hasta dar el individuo adulto. La reproduccin sexual fue un invento evolutivo (del que quedaron excluidas las bacterias y muchos organismos unicelulares), que garantiza que en cada generacin de una especie van a aparecer nuevas combinaciones de genes en la descendencia, que posteriormente ser sometida a la dura prueba de la seleccin y otros mecanismos evolutivos. Las clulas de un animal proceden en ltima instancia de la divisin repetida y diferenciacin del zigoto. Las clulas somticas, que constituyen los tejidos del animal adulto, han recorrido un largo camino "sin retorno", de modo que, a diferencia de las clulas de las primeras fases del embrin, han perdido la capacidad de generar nuevos individuos y cada tipo se ha especializado en una funcin distinta (a pesar de que, salvo excepciones, contienen el mismo material gentico). El primer experimento de clonacin en vertebrados fue el de Briggs y King (1952), en ranas. En los aos 70, Gurdon logr colecciones de sapos de espuelas (Xenopus laevis) idnticos a base de insertar ncleos de clulas de fases larvarias tempranas en ovocitos (vulos) a los que se haba despojado de sus correspondientes ncleos. Pero el experimento fracasa si se usan como donadoras clulas de ranas adultas. Desde hace unos aos se vienen obteniendo mamferos clnicos, pero slo a partir de clulas embrionarias muy tempranas, debido a que an no han entrado en diferenciacin (y por lo tanto poseen la propiedad de pluripotencia). No es extrao pues el revuelo cientfico cuando el equipo de Ian Wilmut, del Instituto Roslin de Edimburgo comunic que haban logrado una oveja por clonacin a partir de una clula diferenciada de un adulto.[1][2] Esencialmente el mtodo (que an presenta una alta tasa de fracasos) consiste en obtener un vulo de oveja, eliminarle su ncleo, sustituirlo por un ncleo de clula de oveja adulta (en este caso, de las mamas), e implantarlo en una tercera oveja que sirve como "madre de alquiler" para llevar el embarazo. As pues, Dolly carece de padre y es el producto de tres "madres": la donadora del vulo contribuye con el citoplasma (que contiene, adems mitocondrias que llevan un poco de material gentico), la donadora del ncleo (que es la que aporta la inmensa mayora del ADN), y la que pari, que genticamente no aporta nada.[2][3] Cientficamente se trata de un logro muy interesante, ya que demuestra que, al menos bajo determinadas circunstancias es posible "reprogramar" el material gentico nuclear de una clula diferenciada (algo as como volver a poner a cero su reloj, de modo que se comporta como el de un zigoto). De este modo, este ncleo comienza a "dialogar" adecuadamente con el citoplasma del vulo y desencadena todo el complejo proceso del desarrollo intrauterino.

Tipos de clonacin
CLONACIN REPRODUCTIVA. La clonacin reproductiva consiste en la generacin de seres humanos mediante tcnicas de clonacin (reproductiva), o sea, aplicar en los humanos las mismas tcnicas que se llevaron a cabo en Edimburgo con la oveja Dolly. Hasta donde se sabe, esta tcnica no se ha practicado an en el mundo, ya que existe un consenso generalizado entre varios pases, considerando que es "inaceptable" tica y jurdicamente. Ha habido uno que otro anuncio aislado de haberla practicado en Estados Unidos, pero nunca se ha presentado los "supuestos" nios clonados. Existen abismales diferencias entre la clonacin reproductiva y la clonacin teraputica. En este sentido, en muchos pases europeos ya han elaborado un protocolo facultativo adicional que ampla la convencin europea sobre biotica y en ese protocolo se prohbe expresamente cualquier forma de clonacin que implique una clonacin reproductiva". No obstante, la Unesco tambin adhiere a este criterio generalizado mediante un documento referido al Genoma Humano y Derechos Humanos, difundido en el ao 1997. CLONACIN NO REPRODUCTIVA Clonacin no reproductiva: se realiza la manipulacin celular como en la anterior, pero el embrin no se implanta en tero, sino que puede servir a distintos objetivos, principalmente de investigacin:

Sobre fertilidad, anticoncepcin, etc. Desarrollo embrionario. Obtencin de clulas madre e induccin de diferenciacin a diferentes tejidos.

Clonacin humana con fines no reproductivos

Investigaciones bsicas de duracin limitada con embriones humanos clonados. Algunos pases permiten que se investigue, dentro de los plazos prescritos, con los embriones sobrantes de los programas de reproduccin asistida, destinados a ser destruidos. No obstante, muchos de esos y otros pases prohben la produccin de embriones humanos destinados especficamente a la investigacin. En algunos casos esa restriccin se aplica a las investigaciones financiadas con fondos pblicos, pero no as a la investigacin privada. En otros pases se estn estudiando medidas legislativas que afectaran tanto al sector pblico como al privado. Miembros de las comunidades cientfica y mdica de distintos pases y regiones se han interesado por el uso de las tcnicas de transferencia nuclear con clulas somticas para la obtencin de clones de embriones humanos destinados a investigaciones bsicas sobre el envejecimiento y las enfermedades genticas. Es necesario determinar el valor de esas investigaciones y la probabilidad de que proporcionen informacin de utilidad dentro de los plazos autorizados. Produccin de tejidos y rganos humanos clonados. Despierta inters el posible empleo de las tcnicas de clonacin para obtener tejidos y rganos con miras a futuras operaciones de trasplante en el donante del ncleo y quiz en otros receptores histocompatibles. El uso de tcnicas de transferencia del ncleo de clulas somticas

para la obtencin directa de clulas o tejidos diferenciados clonados, por ejemplo piel, no suscita problemas ticos. S los suscita, en cambio, el posible uso de la clonacin para la obtencin de rganos totalmente formados y operativos, pues es difcil imaginar de qu otro modo podran obtenerse tales rganos si no es produciendo primero un embrin clonado y dejndolo crecer, al menos parcialmente, durante la fase fetal del desarrollo. Aplicaciones de la clonacin de genes Las primeras aplicaciones prcticas de la clonacin molecular tuvieron lugar en plantas, por ser ms fcil su manipulacin. Numerosos rboles frutales y plantas ornamentales han sido modificados mediante la introduccin de genes obtenidos por clonacin, con el fin de mejorar sus caractersticas y obtener una mejora en la alimentacin y en la ornamentacin. En otros casos, se han conseguido cultivos de cereales con mayores ventajas nutritivas y econmicas; plantas con genes implicados en la resistencia a herbicidas, sin producir daos en el medio ambiente; y actualmente se investiga la posibilidad de que plantas no leguminosas, como el trigo y el maz, realicen la fijacin bacteriana del nitrgeno, fenmeno de gran importancia para la produccin de alimentos. Y todo ello, utilizando las tcnicas de recombinacin del ADN. Tambin mediante esta tecnologa se producen actualmente grandes cantidades de productos gnicos teraputicos, a partir de genes clonados y expresados en bacterias que crecen con facilidad y producen el producto deseado en grandes cantidades. Entre esos productos se encuentran insulina, interferones, interleuquinas (un tipo de citoquina) y hormona del crecimiento, sta ltima utilizada para tratar cierta forma de enanismo en los nios. Adems, gracias a los procedimientos de clonacin, expresin y purificacin, se trata de identificar la protena clave en un proceso patolgico, aislarla en grandes cantidades, determinar su estructura tridimensional mediante cristalografa de rayos X, y finalmente disear molculas que inhiban su funcin. La clonacin molecular permite tambin construir nuevas bacterias para un determinado fin, y as por ejemplo, se han combinado las enzimas claves de varias rutas distintas de degradacin de compuestos contaminantes del medio ambiente, pertenecientes a tres bacterias diferentes, para originar una nueva bacteria que las tiene todas, y se desarrolla sobre mezclas letales de numerosos compuestos.

Clonacin de mamferos
El primer mamfero superior desarrollado por clonacin de una clula adulta es una oveja, a la que bautizaron con el nombre de "Dolly", obtenida en febrero de 1997 por los investigadores del Instituto Roslin de Edimburgo, Escocia. Este equipo de investigacin ya era conocido por conseguir ovejas clnicas a partir de clulas obtenidas de embriones y cultivadas en el laboratorio, antes de ser implantadas nuevamente en otros animales. Sin embargo, el caso de la oveja Dolly es novedoso, por cuanto han utilizado clulas de seres vivos adultos, mucho ms complejas que las clulas embrionarias para producir seres vivos genticamente iguales. Aunque esto ya se haba practicado con xito en anfibios y ratones, el caso de las ovejas produjo una gran conmocin en la poblacin, por tratarse de organismos superiores, de muchas ms similitudes con los seres humanos. El evento tuvo lugar gracias a la aplicacin de una novedosa tcnica de transferencia nuclear de ADN.

La oveja fue desarrollada a partir del ncleo (con su dotacin completa de cromosomas) de una clula de la glndula mamaria, el cual fue extrado e implantado en otra clula (vulo) a la que se le haba eliminado su propio ncleo, la cual sera despus implantada en una madre adoptiva, desarrollndose el embarazo. Las clulas de la glndula mamaria fueron previamente sometidas a una escasez prolongada de nutrientes, con el objetivo de que sus genes entraran en una fase de inactivacin; de esta manera, se intentaba reproducir la misma fase del ciclo de divisin celular que tenan las clulas de los vulos receptores. Una vez se produjo la transferencia nuclear, el ADN inactivado se reprogram y recuper as su capacidad para crear todos los rganos y tejidos diferenciados de un organismo vivo. No obstante, el experimento se llev a cabo con xito en tan slo uno de los 277 vulos utilizados para su realizacin, y que culmin con el nacimiento de la oveja Dolly. Por lo tanto, an queda mucho por conocer sobre la totalidad de los factores implicados en el proceso. Los cientficos opinan que los ganaderos podran beneficiarse de esta tcnica al conseguir clones a partir de animales adultos de sus ganaderas que han demostrado ser ms productivos y resistentes a enfermedades que otros. La ventaja para los ganaderos de poder emplear clulas adultas en lugar de embriones es que permite conocer, con antelacin, la capacidad productiva y de resistencia a enfermedades de los animales resultantes. El empleo de esta tecnologa abre las puertas para investigar el cncer, la biologa del desarrollo y los mecanismos moleculares del envejecimiento, entre otros muchos aspectos de la ciencia. Por otra parte, unos cientficos de Oregn (Estados Unidos) han conseguido clonar dos monos, uno macho y otro hembra, con una tcnica diferente a la utilizada con la oveja Dolly, ya que los monos fueron clonados a partir de clulas embrionarias obtenidas por procedimientos de fecundacin "in vitro", y no a partir de clulas adultas. Uno de los objetivos de esta investigacin era conseguir animales exactos, eliminndose as el factor de la variabilidad gentica, y poder estudiar la elaboracin de nuevos medicamentos y vacunas efectivas contra el SIDA.

Clonacin y terapia gnica

La clonacin, combinada con otros medios utilizados en biotecnologa, podra realizar importantes aportaciones a la terapia gnica, y principalmente a la terapia gnica de la lnea germinal. Ello permitira convertir a un embrin con fallos genticos en un gemelo completamente sano con los defectos genticos corregidos, y as prevenirle de enfermedades mortales o debilitantes, como por ejemplo de la fibrosis qustica o la anemia falciforme. Se trata de una lnea de investigacin muy interesante en el campo de la biologa de mamferos, pero que todava no es objeto de investigacin en humanos. El procedimiento consiste bsicamente en cultivar las clulas del embrin inicial, que se encuentran en un estadio temprano de desarrollo, e introducirlas un vector que porte el gen funcional que se desea corregir. Luego, el ADN de una de esas clulas modificadas se implantara dentro de un vulo al que se le ha extrado su propio ncleo, comenzando el embarazo de nuevo. De esta manera, se ha reemplazado el embrin original por un clon ms sano de s mismo. No obstante, a este respecto hay que tener en cuenta los problemas ticos que el proceso pueda conllevar, pues tambin podra realizarse con fines eugensicos, racistas, etc. Adems, algunos cientficos piensan que crear embriones con la sola finalidad de realizar

diagnsticos genticos y destruir gemelos idnticos en beneficio de los dems puede ser moralmente sospechoso. Una aplicacin de la terapia gnica con perspectivas de futuro ms cercanas es su utilizacin para combatir la hepatitis, que afecta a una gran parte de la poblacin. En los ltimos aos, se estn realizando importantes investigaciones sobre la posibilidad de utilizar terapia gnica contra el virus de la hepatitis C, ya que no todos los pacientes responden correctamente al tratamiento con interfern. La terapia gnica consiste en usar fragmentos de virus con capacidad para inhibir y que puedan multiplicarse. Los experimentos realizados en tubos de ensayo han logrado frenar al 98 % de los virus, y se espera su aplicacin en humanos en pocos aos. Otra lnea de investigacin futura consiste en la utilizacin de virus modificados por ingeniera gentica, para ser utilizados como vectores que transporten genes especficos al interior de las neuronas, de forma que puedan aportar genes teraputicos al cerebro humano, y as poder tratar numerosas enfermedades neurolgicas, como el Parkinson o la enfermedad de Alzheimer. Algunas tcnicas de este tipo ya se han puesto de manifiesto con xito en animales de experimentacin. Por otra parte, el empleo de animales de experimentacin permite introducir, controladamente, genes humanos en sus clulas, y as conseguir informacin sobre la forma en que ciertos defectos gnicos se traducen en enfermedad. Existen ms de 5.000 enfermedades humanas, entre ellas el cncer, atribuidas a defectos genticos. Actualmente, la terapia consiste en la insercin aleatoria de genes sanos en los cromosomas, pero stos no funcionan con la misma eficacia que los que ocupan su lugar correcto en el cromosoma. Un caso particular en esta lnea de investigacin es el de oveja "Polly"; una oveja clonada que, antes de la clonacin, fue tratada por ingeniera gentica para que portara en su genoma el gen humano que codifica la protena factor IX, un componente de la sangre que constituye el principal tratamiento para la hemofilia. Ahora se espera que estos animales secreten la protena teraputica en su leche. Cabe destacar tambin el trabajo realizado por unos cientficos de Oregn, en enero del 2001, que consiguieron la clonacin de un gen de medusa en el cromosoma de un mono Rhesus, al que le pusieron el nombre de ANDi. Para ello infectaron el material gentico de un vulo no fertilizado con un retrovirus modificado para no ser infeccioso y que contena el gen de la fluorescencia correspondiente al invertebrado, un gen muy utilizado porque hace brillar las clulas que lo contienen; luego el vulo se fertilz in vitro y se obtuvo un embrin viable que se implant y se desarroll en una hembra Rhesus. La importancia del mono transgnico radica en que ste es un primate, grupo animal al que pertenece el hombre; ello abre una va para la investigacin del funcionamiento de los genes, las caractersticas de las enfermedades y los posibles tratamientos.

Repercusiones ticas, cientficas y sociales de la clonacin en la salud humana. Posicin de la Organizacin Mundial de la Salud (OMS).
1. En la resolucin WHA50.37 se peda al Director General de la OMS, que aclarase las aplicaciones potenciales de las tcnicas de clonacin en la esfera de la salud humana y sus repercusiones ticas, cientficas y sociales. Habida cuenta de la diversidad de los conocimientos tcnicos necesarios para abordar una gama tan amplia de cuestiones, se organizaron varias

reuniones a fin de preparar el terreno para un grupo de expertos que se encargara de estudiar el tema desde una perspectiva global. Esas reuniones preparatorias interregionales e interdisciplinarias se han centrado en las siguientes esferas: la clonacin y la salud reproductiva humana, los productos biolgicos, el trasplante de rganos, la investigacin y la gentica mdica. El Director General ha establecido un grupo de estudio y ha designado dos relatores para coordinar los trabajos sobre esas cuestiones. Adems, la OMS ha tomado parte en diversas reuniones sobre temas afines promovidas por rganos internacionales como la UNESCO, la Comisin Europea, la OCDE y el Consejo de Europa. Las clonaciones de las ovejas y de los monos han levantado intensos debates entre los cientficos y en la sociedad en general, debido a que nunca se haban clonado especies de animales, sobre todo en el caso de los monos, tan estrechamente relacionadas con el gnero humano, y se temen las repercusiones ticas de una supuesta futura investigacin en el hombre. Actualmente, existe una legislacin establecida por 19 pases, entre ellos Espaa, que prohbe la creacin de seres humanos mediante tcnicas de clonacin. Las aplicaciones potenciales de la clonacin humana se centraran bsicamente en el diagnstico y curacin de defectos genticos, y ayudaran a solucionar ciertos problemas a las personas que se someten a una fecundacin in vitro, pues aumentara las probabilidades de conseguir un embarazo. Muchos cientficos slo consideran lcita esta manipulacin gentica si es utilizada exclusivamente para fines teraputicos.

Trabajo de Biologa: Aplicaciones de la Gentica Molecular Introduccin La gentica molecular avanza da a da, a pasos agigantados, y evoluciona en cada momento. Esta nos entrega muchas ventajas y beneficios, y de eso es lo que vamos a tratar en este trabajo. En este trabajo veremos algunas aplicaciones que nos entrega actualmente, la gentica molecular, algunas maneras de manejar nuestras cosas del diario vivir como animales y plantas o tambin tratar y solucionar enfermedades. Este tema se puede tratar, de dos formas, ya sea, mostrando los beneficios o las contraindicaciones y nosotros trataremos de mostrar los dos enfoques. En este trabajo, expondremos las Plantas y animales trangnicos, tambin la aplicacin de la Gentica molecular en la medicina. Las Aplicaciones de la Gentica Molecular en la Agricultura I. Biotecnologa La Biotecnologa incluye cualquier tcnica que utilice organismos vivos o partes de los organismos para fabricar o modificar productos, para mejorar plantas o animales o para desarrollar microorganismos para usos especficos. La Biotecnologa posee la capacidad de cambiar a la comunidad industrial del ya prximo siglo XXI debido a su potencial para producir cantidades prcticamente ilimitadas de:

sustancias de las que nunca se haba dispuesto antes ; productos que se obtienen normalmente en cantidades pequeas ; productos con coste de produccin mucho menor que el de los fabricados por medios convencionales ; productos que ofrecen mayor seguridad que los hasta ahora disponibles ; productos obtenidos a partir de nuevas materias primas ms abundantes y baratas que las utilizadas anteriormente.

La manipulacin gentica de las plantas en beneficio del hombre es parte de la Biotecnologa. Ingeniera Gentica Molecular Mediante la ingeniera gentica han podido modificarse las caractersticas de gran cantidad de plantas para hacerlas ms tiles al hombre, son las llamadas plantas transgnicas. Las primeras plantas obtenidas mediante estas tcnicas fueron un tipo de tomates, en los que sus frutos tardan en madurar algunas semanas despus de haber sido cosechados. Recondando que la clula vegetal posee una rgida pared celular, lo primero que hay que hacer es obtener protoplastos Vamos a ver las tcnicas de modificacin gentica en cultivos celulares . Estas clulas pueden someterse a tratamientos que modifiquen su patrimonio gentico. Las tcnicas se clasifican en directas e indirectas.

 Entre las tcnicas indirectas cabe destacar la transformacin de clulas mediada por Agrobacterium tumefaciens. Esta bacteria puede considerarse como el primer ingeniero gentico, por su particular biologa. Biologa de Agrobacterium tumefaciens

Esta bacteria, presente en el suelo, es patgena de muchas plantas a las que produce un tumor conocido como "agalla de cuello". Penetra en los tejidos vegetales causando una proliferacin celular. Durante el contacto con las clulas vegetales la bacteria transfiere a las clulas vegetales un plsmido llamado Ti (inductor de tumores). Este plsmido se integra en el ADN del cromosoma de la clula vegetal. Este plsmido transferido o T-ADN contiene los genes oncognicos (onc) cuya expresin provoca una mayor produccin de hormonas de crecimiento, stas son las que inducen las divisiones celulares que dan origen a la formacin del tumor o agalla.

Este fenmeno natural es empleado para utilizar a la bacteria Agrobacterium tumefaciens como vector de los genes que se desean introducir en una clula vegetal, con lo que se transforma dicha clula, la cual puede regenerar, por micropropagacin, una planta entera que ser transgnica. Agrobacterium: un precursor natural de los biotecnlogos

La bacteria Agrobacterium tumefaciens contiene como ya vimos en un punto anterior, un plsmido Ti, que contiene los genes responsables de su virulencia, llamados genes onc. Cuando la bacteria infecta a la planta, provocando en ella un tumor, una parte del plsmido Ti, llamada T-

ADN, que contiene los genes onc, es transferida al ncleo de la clula vegetal y se inserta en un cromosoma de la planta. De esta manera, la bacteria modifica la informacin gentica de la planta, aadindole los genes onc. Agrobacterium se comporta , de esta forma, como un ingeniero gentico natural. Si en el plsmido Ti se eliminan artificialmente los genes onc y se sustituyen por otros genes que interese clonar, se habr obtenido un sistema muy eficaz para introducir ADN interesante a la planta, al mismo tiempo que se habr evitado la aparicin de la enfermedad. Plantas que se iluminan

En la transfeccin vegetal con Agrobacterium se ha ensayado un marcador inusual: el gen de la enzima luciferasa, de las lucirnagas. El sustrato de esta enzima es una proteina llamada luciferina, que con ATP y oxgeno desprende luz. Plsmidos Ti con este marcador, se transfirieron a clulas de tabaco, con las que se formaron nuevas plantas. Las nuevas plantas obtenidas se regaron en la oscuridad con agua y luciferina disuelta. El resultado fue sorprendente: las plantas se iluminaron como si fuesen unas bombillas de poca potencia o un dibujo de un anuncio fluorescente.

Entre las tcnicas directas, se pueden citar la electroporacin, microinyeccin, liposomas y mtodos qumicos. PLANTAS TRANSGNICAS

Entre los principales caracteres que se han transferido a vegetales o se han ensayado en su transfeccin, merecen destacarse:

Resistencia a herbicidas, a insectos y a enfermedades microbianas .

Ya se dispone de semillas de algodn, que son insensibles a herbicidas. Para la resistencia a los insectos se utilizan cepas de Bacillus thuringiensis que producen una toxina (toxina - Bt) daina para las larvas de muchos insectos, de modo que no pueden desarrollarse sobre las plantas transgnicas con este gen. Respecto a los virus se ha demostrado que las plantas transgnicas con el gen de la proteina de la cpsida de un virus, son resistentes a la invasin de dicho virus.

Incremento del rendimiento fotosinttico

Para ello se transfieren los genes de la ruta fotosinttica de plantas C4 que es ms eficiente.

Mejora en la calidad de los productos agrcolas

Tal es el caso de la colza y la soja transgnicas que producen aceites modificados, que no contienen los caracteres indeseables de las plantas comunes.

Sntesis de productos de inters comercial

Existen ya plantas transgnicas que producen anticuerpos animales, interfern, e incluso elementos de un polister destinado a la fabricacin de plsticos biodegradables

Asimilacin de nitrgeno atmosfrico

Aunque no hay resultados, se ensaya la transfeccin del gen nif responsable de la nitrogenasa, existente en microorganismos fijadores de nitrgeno, y que permitira a las plantas que hospedasen dicho gen, crecer sin necesidad de nitratos o abonos nitrogenados, aumentando la sntesis de proteinas de modo espectacular. Aspectos bioticos de la utilizacin de las plantas y alimentos transgnicos. Cul es la perspectiva biotica de la produccin y utilizacin de las plantas transgnicas? En el contexto biotico hay que tener en cuenta dos aspectos: el sanitario y el ecolgico. a) Punto de vista sanitario Desde el punto de vista sanitario, el riesgo terico que supone que el gen que da resistencia a los antibiticos beta-lactmicos (ampicilina) pase a bacterias del tracto intestinal humano directa o indirectamente va bacterias del tracto intestinal de los animales que se alimenten con el maz transgnico no procesado. Justificara ese riesgo potencial con una probabilidad prcticamente nula la prohibicin del maz transgnico con el gen Bt de Bacillus thuringiensis ?. Posiblemente no. Por otro lado, nunca se ha demostrado que un gen consumido por boca haya sido transmitido a una bacteria del tracto intestinal. Otro aspecto sanitario es el de la aparicin de alergias insospechadas por el consumo de alimentos transgnicos. Por ejemplo, se han citado casos de alergia producidas por soja transgnica manipulada con genes de la nuez de Brasil o de fresas resistentes a las heladas por llevar incorporado un gen de pescado (un pez que vive en aguas rticas a bajas temperaturas). En este segundo supuesto, las personas alrgicas al pescado podran sufrir una crisis alrgica al ingerir las fresas transgnicas. B) Punto de vista ecolgico Desde el punto de vista ecolgico se ha denunciado la posibilidad de que al crear las variedades transgnicas resistentes a herbicidas se incrementar notablemente el uso de stos con los posibles efectos secundarios negativos de contaminacin del suelo y del agua. Por otro lado, en especies algamas (de fecundacin cruzada) existe la posibilidad de que una parcela sembrada con plantas transgnicas contamine con su polen a otras parcelas vecinas no transgnicas del mismo cultivo. Por ejemplo, si el polen de un campo de maz transgnico poliniza plantas normales de una parcela prxima, la semilla que se produzca en esta parcela puede haber incorporado el gen Bt transmitido por el polen ; es decir, sera transgnica. Tambin podra ocurrir que la resistencia al herbicida de una variedad transgnica se transfiriera por fecundacin interespecfica espontnea a una especie silvestre afn, con el consiguiente dao para la agricultura. Las plantas transgnicas son un reto de la Biotecnologa actual que han creado un cierto grado de alarma social consecuencia, en cierto modo, del temor a lo desconocido y novedoso. De todas formas, es bueno que se plantee en la sociedad un debate serio y riguroso -sin ecologismos demaggicos- que permita el avance de la ciencia, evitando a la vez peligros y riesgos innecesarios. 3. Riesgos potenciales que pueden implicar las plantas transgnicas Efecto directo sobre el hombre:

 La protena codificada por el transgn no debe ser txica para el hombre Posibles efectos alergnicos La aprobacin de los productos transgnicos debe ser analizada caso por caso Efecto ambiental: Dispersin incontrolada de la descendencia de la planta transgnica Transferencia del transgn a otras variedades no transgnicas o a otras especies afines Induccin de resistencia a los productos transgnicos por parte de los agentes patgenos y plagas 4. El riesgo cientfico En general, la ciencia ha avanzado a ciegas en cuanto al riesgo, pero alerta a sus sntomas Hay que distinguir entre el riesgo de la investigacin bsica y el riesgo de la aplicacin del conocimiento adquirido Hay discrepancias entre la importancia objetiva de un riesgo y su percepcin subjetiva: El riesgo voluntario causa menos temor que el riesgo impuesto El riesgo de origen natural causa menos temor que el de origen industrial El riesgo que se produce en un entorno familiar causa menos temor que el que se produce en un escenario extico El riesgo que es difuso en el tiempo o en el espacio causa menos temor que el que se concreta en hora y lugar No existe el riesgo cero: Toda actividad humana conlleva un cierto riesgo que ha de ser evaluado en funcin de los beneficios que tal actividad reporta Natural no es sinnimo de inocuo: Hay productos naturales que llevan substancias mutagnicas y cancergenas (por ejemplo: pimienta negrasafrol; setas comestibleshidrazinas; apio psolareno; frutos secosaflatoxinas de hongos; etc.) No todo lo artificial es nocivo : Ninguno de los conservantes autorizados llega a ser tan peligroso como las toxinas que pueden producir las bacterias y los hongos que el conservante evita Catastro de modificaciones genticas Carcter Tolerancia herbicidas Porcentaje 27 %

Resistencia virus Resitencia insectos Retraso maduracin Resistencia insectos + tolerancia herbicidas Sntesis almidn Resistencia sequa

18 % 14 % 11 % 7% 4% 1%

La Trangenesis en los Animales La transgnesis se puede definir como la introduccin de ADN extrao en un genoma, de modo que se mantenga estable de forma hereditaria y afecte a todas las clulas en los organismos multicelulares. Generalmente, en animales, el ADN extrao, llamado transgen, se introduce en zigotos, y los embriones que hayan integrado el ADN extrao en su genoma, previamente a la primera divisin , producirn un organismo transgnico; de modo que el transgn pasar a las siguientes generaciones a travs de la linea germinal (gametos). Entre las aplicaciones de los animales transgnicos se pueden destacar:

La posibilidad de estudiar a nivel molecular el desarrollo embrionario y su regulacin. Manipular de forma especfica la expresin gnica in vivo. Estudiar la funcin de genes especficos. Poder utilizar a mamferos como biorreactores para la produccin de proteinas humanas.

La correccin de errores innatos de metabolismo mediante terapia gnica.

La transgnesis puede efectuarse siguiendo dos estrategias distintas: Transgnesis por microinyeccin de zigotos Desde que en 1982 se obtuviera un ratn transgnico, la produccin de animales transgnicas es cada vez ms cotidiana, existiendo ya animales transgnicos de las siguientes especies: ratn, rata, conejo, cerdo, vaca, cabra y oveja. La tcnica se realiza, fundamentalmente por microinyeccin y se realiza de la siguiente forma:

En la primera fase, se aislan un nmero grande de vulos fertilizados. Se consigue sometiendo a las hembras a un tratamiento hormonal para provocar a superovulacin. La fertilizacin puede hacerse in vitro o in vivo. En la segunda fase, los zigotos obtenidos se manipulan uno a uno y con una micropipeta a modo de aguja, se introduce una solucin que contiene ADN. En la tercera fase, estos vulos son reimplantados en hembras que actuarn como nodrizas permitiendo la gestacin hasta trmino.

o o

Por ltimo, tras el destete de los recin nacidos, stos se chequean, para ver si ha ocurrido la incorporacin del transgn. Transgnesis por manipulacin de clulas embrionarias . Una estrategia ms poderosa para la transgnesis implica la introduccin de ADN extrao en clulas embrionarias totipotentes(clulas ES) o clulas embrionarias madres (clulas EM). Estas clulas se toman del interior de la blstula en desarrollo y se pasan a un medio donde se tratan con distintos productos con lo que se conseguir que las clulas no se diferencien, y se mantiene su estado embrionario.

El ADN extrao se introduce en las clulas es mediante diversas tcnicas,posteriormente las clulas transfectadas son reintroducidas en una blstula y sta reimplantada en una hembra. Con esta tcnica los neonatos son quimeras ; pero mediante el cruce de stas se consiguen animales transgnicos con aquellas quimeras que hayan incorporado el transgn en su linea germinal Obtencin de una cerda transgnica

Un gen hbrido que contiene el gen humano que codifica la sntesis de una protena de inters biolgico junto con el promotor del gen que codifica una protena de la leche de rata, se introducen por microinyeccin en un vulo de cerda fecundado. El desarrollo de ese vulo da lugar a un animal transgnico que tiene en todas sus clulas el gen hbrido. Debido al promotor elegido, ese gen solamente se expresa en la glndula mamaria de la cerda induciendo la produccin de la proteina humana en la leche.

CLONACIN DE ANIMALES El principio de la clonacin est en la obtencin de organismos idnticos genticamente, y por tanto morfolgica y fisiolgicamente, como lo son dos gemelos univitelinos. Esto ha sido el sueo de muchos ganaderos, que han deseado que todo su ganado tuviera las cualidades de algn ejemplar especialmente bueno. Se pueden utilizar dos mtodos para conseguir clones de animales: Por DISGREGACIN DE CLULAS EMBRIONARIAS. Se basa en el mismo principio por el que nacen gemelos de forma natural. Se pueden separar las clulas de un embrin en diferentes estados de desarrollo, desde el estado de 2 clulas hasta el estado de mrula. Cada clula separada puede funcionar como un zigoto que puede desarrollarse para dar un individuo completo. Por TRANSFERENCIA NUCLEAR. Se toman clulas embrionarias en fase de mrula o blstula, obtenidas por disgregacin, se cultivan in vitro, y despus se transfieren a ovocitos a los que se les ha quitado el ncleo. Se provoca la fusin de las dos clulas animales de modo que el ncleo de la clula embrionaria quede en el interior del ovocito, pudiendo ste empezar a funcionar como un zigoto. As se han obtenido 470 embriones clnicos de terneros de un nico embrin donante de clulas.

Cuanto ms diferenciadas estn las clulas donantes de material gentico, ms difcil es conseguir la reprogramacin de dicho material gentico para que pueda iniciar la diferenciacin de la clula receptora. Actualmente es posible obtener clones de clulas totalmente diferenciadas de un animal adulto que actan como donantes de su material gentico, como ocurri en el caso de la famosa oveja Dolly. Aplicaciones Mdicas

Entre ellas de pueden citar: 1.- OBTENCIN DE PROTEINAS DE MAMFEROS Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de coagulacin, etc ... tienen un inters mdico y comercial muy grande. Antes, la obtencin de estas proteinas se realizaba mediante su extraccin directa a partir de tejidos o fluidos corporales. En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas proteinas humanas en microorganismos adecuados para su fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina que se obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae, en la cual se clona el gen de la insulina humana.

2.- OBTENCIN DE VACUNAS RECOMBINANTES El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial.

Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por ingeniera gentica. Como la mayora de los factores antignicos son proteinas lo que se hace es clonar el gen de la proteina correspondiente.

3.- OBTENCIN DE ANTICUERPOS MONOCLONALES. Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el cncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros sntomas. 4.- DIAGNTICO DE ENFERMEDADES DE ORIGEN GENTICO: Conociendo la secuencia de nucletidos de un gen responsable de una cierta anomala, se puede diagnosticar si este gen anmalo est presente en un determinado individuo. En el siguiente dibujo se explica brevemente la base del diagnstico.

Conclusin Ya demostradas algunas de las aplicaciones de la gentica molecular, podemos decir que a pesar que tienen algunas contraindicaciones, es un muy buen sistema para mejorar y aumentar producciones de plantas y vegetales, tambin sirve para corregir errores genticos, etc. Y una de las aplicaciones que mas nos afectas son las relacionadas con la medicina, ya que se crean nuevas maneras de detener enfermedades que nos afectan tan duramente como el cncer. Creemos que por el gran auge y avences que estn tomando, creemos que a los Ingenieros Genticos Moleculares, les queda una gran tarea por delante, ya que demostrando los avances que llevan hasta el momento, nos podemos dar cuenta que dan para mucho mas. Ojal que pudieran encontrar mas soluciones para enfermedades que nos afectan en la actualidad