III ESTUDIO PARA DETERMINACIN DE PREVALENCIA DE INFECCIN DE NEWCASTLE EN LAS GRANJAS AVCOLAS COMERCIALES EN OCHO ZONAS DEL PAS

SEBGERENCIA DE PROTECCIN ANIMAL DIRECCIN TCNICA DE SANIDAD ANIMAL

2011

CONTENIDO 1. INTRODUCCION 2. INFORMACION GENERAL 3. PROCEDIMIENTO PARA LA RECOLECCION, CONSERVACION Y ENVO DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE DIAGNSTICO REGIONAL DEL ICA Y AL LABORATORIO DE MEDICINA AVIAR DEL LNDV. 4. INTERPRETACION DE RESULTADOS 5. INVESTIGACION SEROEPIDEMIOLOGICA COMPLEMENTARIA 6. GERENCIA DEL ESTUDIO ANEXOS. Anexo 1. Oficio sociabilizacin estudio. Anexo 2. Formulario de visita inicial Anexo 3. Instructivo para el diligenciamiento del formulario de visita inicial Anexo 4. Formulario de Recoleccin de muestras Anexo 5. Instructivo para el diligenciamiento del formulario de recoleccin de muestras. Anexo 6. Lista de materiales para la toma de muestras y envo al Laboratorio. Anexo 7. Oficio comunicacin de resultados del estudio de prevalencia al propietario o responsable de la granja. Anexo 8. Formulario de investigacin epidemiolgica complementaria Anexo 9. Instructivo para el diligenciamiento del formulario de investigacin epidemiolgica complementaria. Anexo 10. Distribucin del muestreo por Regiones Programadas, direcciones de centros de diagnstico regionales y lderes aviares departamentales Anexo 11. Relacin y Direcciones de Contacto con el Nivel Central de Coordinacin

II ESTUDIO PARA DETERMINACION DE PREVALENCIA DE INFECCION DE NEWCASTLE EN LAS GRANJAS AVCOLAS COMERCIALES EN OCHO ZONAS DEL PAIS.

1. INTRODUCCIN

Considerando que la enfermedad de Newcastle ha sido declarada de inters social nacional de acuerdo a la Ley 1255 de 2008 y al conocimiento del comportamiento cclico de esta enfermedad, se hace necesario continuar con el estudio de prevalencia de infeccin, no solo para conocer el comportamiento epidemiolgico de la enfermedad de Newcastle en Colombia a travs del tiempo, sino para evaluar las medidas de mitigacin de riesgo en las diferentes zonas del pas y evaluar su impacto por medio de este indicador. Los resultados del primer estudio se resumen en el siguiente cuadro, el cual fue llevado a cabo en el ao 2009. Parmetros del muestreo No de granjas Prevalencia Poder Confianza Tamao de muestra Nmero de granjas monitoreadas Prevalencia Zona Frontera nororiental 187 50% 90% 95% 64 139 8x100 Zona Norte 498 50% 90% 95% 81 193 20x100 Zona Centro 686 50% 90% 95% 84 187 25x100 Zona Oriental 2.867 50% 90% 95% 93 188 15x100 Zona Frontera Sur 212 50% 90% 95% 67 262 9x100

PARAMETROS DEL MUESTREO Nmero de granjas monitoreadas Prevalencia

GUADUAS

MESA DE LOS SANTOS 322

NORTE DEL TOLIMA 20

118

14x100

17x100

25x100

Resultados por departamento de RT PCR o pruebas directas. NO TIPIFICABLE 1 1 7 1 5 1 3 10 1 1 1 1 7 1 8 3 1 5 2 9

ZONA FRONTERA NORORIENTAL

NORTE

CENTRO

ORIENTE

SUR GUADUAS

DEPARTAMENTO Arauca Norte de Santander Atlntico Bolvar Crdoba Sucre Antioquia Caldas Cauca Quindo Valle Boyac Cundinamarca Huila Santander Tolima Nario Putumayo

ALTA

ALTA+BAJA

1 1 1 1

BAJA 1 8 12 1 1 2 6 1 1 7 2 7 3 1 7

4 1

10

MESA DE LOS SANTOS

19

34

NORTE DEL TOLIMA

De igual manera, en la tabla 2, se presentan los resultados del II estudio de prevalencia llevado a cabo durante el ao 2010 Parmetros del muestreo No de granjas Prevalencia Poder Confianza Tamao de muestra Nmero de granjas monitoreadas Prevalencia Zona Frontera nororiental 239 15 x 100 90% 95% 42 Zona Frontera Sur 232 15 x 100 90% 95% 42 Mesa de los Santos 128 20 X 100 90% 95% 42

Zona Norte 664 30 x 100 90% 95% 75

Zona Centro 954 30 x 100 90% 95% 79

Zona Oriental 2.982 30 x 100 90% 95% 79

Norte Tolima 29 30 X 100 90% 95% 19

Guaduas 64 20 X 100 90% 95% 33

42 19.23 x 100

75 17.5 x 100

79 18,6 x 100

79 13.5 x 100

42 22 x 100

19 15,3 x 100

33 16,8 x 100

42 26 x 100

Resultados por departamento de RT PCR o pruebas directas. ZONA FRONTERA NORORIENTAL DEPARTAMENTO Arauca Norte de Santander Atlntico Cesar Crdoba Magdalena Sucre Antioquia Caldas Cauca Quindo Risaralda Valle Boyac Caquet Cundinamarca Huila Meta Santander Tolima Nario Putumayo ALTA ALTA+BAJA NO TIPIFICABLE 3 1 BAJA 1 11 5 1 2 1 14 3 2 3 2 23 1 3 10 1 1 5 1 27 1 8 24 8 5

NORTE

3 1

CENTRO

1 1

ORIENTE

1 2 4 1 1 2

FRONTERA SUR GUADUAS MESA DE LOS SANTOS NORTE DEL TOLIMA

Este manual tiene como objetivo estandarizar las acciones y metodologas necesarias para continuar con el estudio de determinacin de la prevalencia de infeccin de Newcastle (NC) en ocho zonas del pas: Zona de frontera nororiental, Zona norte, Zona centro, Zona oriente, Zona frontera sur, Municipio de Guaduas en el departamento de Cundinamarca, La Mesa de Los Santos en el departamento de Santander, Norte del departamento del Tolima. El segundo estudio contempla las siguientes etapas: Diseo del estudio y distribucin de la muestra Recoleccin de la informacin Recoleccin y envo de las muestras a los laboratorios de diagnstico, Emisin e interpretacin de resultados Anlisis de resultados

Investigacin epidemiolgica complementaria Clculo de la prevalencia de infeccin de Newcastle en las zonas mencionadas anteriormente.

2. INFORMACIN GENERAL Objetivo del estudio. Continuar con el estudio prevalencia de infeccin de Newcastle en las granjas comerciales en ocho zonas del pas. Estos resultados permitirn definir y evaluar las estrategias de control de manera diferencial para cada una de las zonas. Hiptesis de trabajo. La zonificacin del pas responde a caractersticas de la produccin y comercializacin de aves y sus productos, circuitos avcolas, caractersticas geogrficas y manejo sanitario especifico para la enfermedad de Newcastle. Dos de las zonas determinadas, Guaduas y Mesa de los Santos, integran un proyecto piloto de tipo sanitario en donde desde hace seis aos se han realizado acciones para disminuir la presentacin de la enfermedad de Newcastle reforzando la bioseguridad entre otras medidas. En la zona norte del Tolima se concentra el 70% de la gentica avcola del pas siendo de gran importancia. De acuerdo a los resultados obtenidos en el primero y segundo estudio de prevalencia que se realiz durante el 2008 - 2009 y 2010 se estableci como hiptesis de trabajo que la prevalencia esperada en el tercer estudio en las zonas ser la siguiente: Zona Frontera Nororiental: 20 x 100 Zona Frontera Sur: 30 x 100 Zona Norte: 20 x 100 Zona Centro: 20 x 100 6

Zona Oriente: 20 x 100 Zona Especial Norte del Tolima: 20 x 100 Zona Especial Guaduas: 20 x 100 Zona Especial Mesa de los Santos: 30 x 100

Se continuar con el diseo muestral independiente con una distribucin dentro de la zona de acuerdo a los sistemas productivos existentes en los departamentos que las conforman. Regin de estudio: El presente estudio de prevalencia se realizara en las ocho zonas en que se dividi el pas, as:

Figura 1. Zonificacin de Colombia para el estudio de prevalencia de infeccin a Newcastle virulento.

En total, 5.759 granjas se encuentran en el censo avcola 2010, distribuidas en los diferentes departamentos de produccin avcola en Colombia. Tabla 2. Ubicacin de granjas en zonas del pas ZONA DEPARTAMENTO MUNICIPIOS Arauca Nte Santander Total Nario Putumayo Total Caldas Risaralda Quindo Valle del cauca Cauca Total Antioquia Atlntico Bolvar Cesar Crdoba Guajira Magdalena Sucre Total Boyac Caquet Cundinamarca Huila Meta Santander Tolima Total Cundinamarca Santander Tolima 7 40 47 64 13 77 27 14 12 42 42 137 125 23 45 25 28 15 30 26 317 123 16 116 37 29 87 47 455 1 2 8 1044 MUNICIPIOS AVICOLAS 4 20 24 32 9 41 17 7 10 41 17 92 53 19 13 16 13 6 4 13 137 47 2 75 29 8 48 31 240 1 2 6 543 No. DE GRANJAS 29 148 177 220 45 265 62 71 145 588 170 1036 235 111 44 67 79 8 34 60 638 270 13 1,461 235 164 1086 205 3.434 70 115 24 5.759

Frontera Norte

Frontera Sur

Zona centro

Zona Norte

Zona Oriente

Guaduas Mesa de los Santos Norte Tolima TOTAL

Poblacin objeto del muestreo: Granjas avcolas comerciales del pas de los sistemas productivos de Engorde, postura y material gentico. 8

Parmetros del muestreo: Con base en el nmero total de granjas del pas y el nmero total de granjas de cada una de las zonas. se calcul el tamao de muestra.

z 21 / 2 p(1 p) n d2
Donde: p es el valor de la prevalencia esperada, z corresponde al valor del percentil 95 para la distribucin normal, es el valor del error tipo I y d, la diferencia mnima esperada entre la estimacin y el verdadero valor de la prevalencia. Tabla 1. Parmetros del muestreo. Estudio de prevalencia de infeccin de Newcastle en cinco zonas del pas. Parmetros del muestreo No de granjas Prevalencia Poder Confianza Tamao de muestra Zona Frontera nororiental 177 20 x 100 90% 95% 46 Zona Centro 1.036 20 x 100 90% 95% 59 Zona Oriental 3.434 20 x 100 90% 95% 61 Zona Frontera Sur 265 30 x 100 90% 95% 63

Zona Norte 638 20 x 100 90% 95% 58

Parmetros del muestreo No. de granjas Prevalencia Poder Confianza Tamao de muestra

Guaduas 70 20 x 100 90% 95% 33

Mesa de los Santos 115 30 x 100 90% 95% 49

Norte del Tolima 24 20 x 100 90% 95% 18

Diseo del estudio: Muestreo aleatorio simple con reposicin. El tamao de muestra lo constituye el nmero de granjas las cuales sern distribuidas en forma proporcional por sistema productivo.

Tabla 2. Distribucin proporcional de la muestra por tipo de explotacin y por Zona. Granjas a monitorear Frontera Nororiental Frontera Sur Centro Norte Oriente Guaduas Mesa Santos Norte Tolima total 46 63 59 58 61 33 49 18 387 engorde postura gentica 16 58 41 37 33 28 38 7 258 30 4 16 20 26 0 8 3 107 0 1 2 1 2 5 3 8 22 9

Tabla 3. Distribucin proporcional de la muestra por departamento y tipo de explotacin DEPARTAMENTO ENGORDE POSTURA GENETICA FRONTERA NORTE ARAUCA 5 3 0 NTE 11 27 0 SANTANDER TOTAL 16 30 0 FRONTERA SUR NARIO 47 4 1 PUTUMAYO 11 0 0 TOTAL 58 4 1 CENTRO CALDAS 2 2 0 RISARALDA 3 1 0 QUINDIO 6 2 0 VALLE 21 10 2 CAUCA 9 1 0 TOTAL 41 16 2 ZONA NORTE ANTIOQUIA 10 10 1 ATLANTICO 7 3 0 BOLIVAR 3 1 0 CESAR 5 1 0 CORDOBA 4 3 0 GUAJIRA 1 0 0 MAGDALENA 2 1 0 SUCRE 5 1 0 TOTAL 37 20 1 ZONA ORIENTE BOYACA 1 4 0 CAQUETA 0 0 0 C/MARCA 12 13 1 HUILA 3 1 0 META 3 0 0 SANTANDER 12 7 1 TOLIMA 2 1 0 TOTAL 33 26 2 GUADUAS GUADUAS 28 0 5 MESA DE LOS SANTOS MESA SANTOS 38 8 3 NORTE DEL TOLIMA NTE TOLIMA 7 3 8 TOTAL 258 107 22 TOTAL 8 38 46 52 11 63 4 4 8 33 10 59 21 10 4 6 7 1 3 6 58 5 0 26 4 3 20 3 61 33 49 18 387

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Frecuencia del Muestreo: Pollo de engorde: Tres muestreos en la zona norte, en la zona oriente y en la zona centro, Mesa de los Santos, Guaduas y Norte del Tolima. Cuatro muestreos en la zona frontera nororiental y en la zona de frontera sur. En cada uno de los muestreos se har una distribucin aleatoria de las granjas a muestrear, exceptuando las zonas de Guaduas, Mesa de los santos y norte del Tolima. Ponedoras y material gentico: Un muestreo en todas las zonas.

Pruebas diagnsticas a utilizarse: Indirecta: Inhibicin de la Hemaglutinacin (HI) en ocho UHA (Unidades hemaglutinantes) en sueros recolectados en las granjas de pollos de engorde. Directa: RT-PCR de hisopos cloacales recolectados en las granjas de ponedoras y en las granjas de material gentico. Como pruebas confirmatorias se realizaran el aislamiento viral y RT-PCR de lquido alantoideo.

Los resultados positivos a estas pruebas sern indicadores de actividad viral en la granja o unidad primaria de muestreo. En las granjas de pollos de engorde que resulten positivas o sospechosas por la prueba de Inhibicin de la Hemaglutinacin (HI) se realizar una investigacin epidemiolgica de acuerdo a lo consignado en el documento sobre la Investigacin Epidemiolgica complementaria en granjas positivas o sospechosas a infeccin. Duracin del Estudio: Un ao. Criterios de Inclusin: Los criterios de inclusin determinan cuales son las aves que van a ser objeto de muestreo. Son diferentes para las aves que estn en las granjas de pollos de engorde y para las aves que estn en las granjas de ponedoras y material gentico. Criterios de inclusin para pollos de granjas de engorde : Sern objeto de muestreo las aves mayores de 30 das de edad y menores de 35, y que hayan transcurrido mnimo 15 das despus de la ltima vacunacin con vacuna viva contra Newcastle. La inclusin de aves de menor edad puede resultar en interferencia diagnostica por cercana a la vacunacin contra NC.

Criterios de Inclusin para gallinas de granjas de ponedoras y de material gentico: Sern objeto de muestreo las aves mayores de 12 semanas de edad donde hayan transcurrido mnimo tres semanas despus de la ultima vacunacin con vacuna viva contra NC.

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Nmero de aves a muestrear en cada una de las granjas de pollo de engorde seleccionadas

15 aves por granja. Este es un nmero adecuado que tiene en cuenta la variabilidad entre las aves con respecto a la presencia de anticuerpos contra la enfermedad de Newcastle. La reduccin de esta variabilidad contribuir a una mayor precisin en la estimacin posterior. Nmero de aves a muestrear en cada una de las granjas de postura y material gentico seleccionadas

30 aves por granja. Distribucin proporcional del tamao de muestra en la granja seleccionada.

En granjas de pollos de engorde se deben seleccionar los galpones donde se alojan las aves que cumplen con los criterios de inclusin, entre estos elegir al azar un galpn para realizar el muestreo. Ejemplo: Si la granja cuenta con 10 galpones que alojan aves mayores de 30 das de edad y que hayan transcurrido mnimo 15 das despus de la ultima vacunacin con vacuna viva contra Newcastle se elige uno de estos 10 galpones y se realiza el muestreo en este galpn. En granjas de ponedoras y material gentico donde se maneja ms de una edad, se identifican los galpones que tienen aves que cumplen con los criterios de inclusin para participar en el estudio: mayores de 12 semanas de edad donde hayan transcurrido mnimo tres semanas despus de la ltima vacunacin con vacuna viva contra NC. Entre estos elegir al azar un galpn para realizar el muestreo. Ejemplo: Si la granja cuenta con 20 galpones que alojan aves de dos edades: 8 semanas y 14 semanas distribuidas as: 12 galpones con aves de 14 semanas y 8 galpones con aves de 8 semanas y en estos hayan transcurrido por lo menos tres semanas despus de la ltima vacunacin con vacuna viva contra Newcastle. Se deben descartar los galpones de las aves que tienen 8 semanas porque no cumplen con los criterios de inclusin, En los 14 galpones restantes, se elegir un galpn al azar y se realizar el muestreo en el galpn seleccionado. Para todos los casos es indispensable que se cumplan los dos criterios de inclusin dados: Edad y tiempo post vacunacin. Seleccin del numero de aves objeto de muestreo en cada galpn Las aves se seleccionan al azar en diferentes reas del galpn. Es preciso no limitarse a seleccionar las aves ubicadas en un solo punto. Niveles Operacionales para el flujo de las muestras cole ctadas y el envi de los resultados:

Se adoptan dos niveles de ejecucin: o Nivel Central: conformado por el Lder Nacional del Proyecto, el coordinador del Laboratorio de aviares del LNDV y el epidemilogo de la coordinacin de epidemiologa.

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El Nivel Departamental: conformado por los Lderes departamentales del proyecto aviar, los mdicos veterinarios de oficinas locales, los epidemilogos regionales y los responsables de los Centros de Diagnostico Regional.

Flujo de la informacin

El lder nacional de la especie aviar enviar el listado de las granjas objeto de estudio al lder aviar departamental, coordinador seccional, epidemiologa nacional, a los centros de diagnstico regional y laboratorio de medicina aviar (LNDV). Una vez recibida la informacin de las granjas a muestrear, el lder aviar departamental complementara el oficio de comunicacin al propietario de la granja seleccionada. Anexo 1. Oficio Comunicacin Muestreo Newcastle. El oficio deber ser firmado por el coordinador seccional. Es responsabilidad del lder aviar departamental asegurar que el productor reciba el oficio y coordinar el cronograma para la visita y toma de muestras. En la primera visita a la granja se diligenciar completamente el Formulario de Informacin Inicial anexo 2, el cual ser enviado a la mayor brevedad al lder aviar departamental, el cual enviar el formato original ( y guardar una copia para su archivo) al lder nacional de la especie aviar quien validar y consolidar toda la informacin en una base de datos.

3. Procedimiento para la recoleccin, conservacin y envo de muestras a los Centros de Diagnostico Regionales del ICA y al Laboratorio de Medicina Aviar del LNDV Preparacin de materiales:

El material requerido para los muestreos se debe preparar con la debida anticipacin teniendo en cuenta las granjas que se van a visitar y el nmero de animales a muestrear. Anexo 6: Lista de materiales para la toma de muestras. Es responsabilidad del Laboratorio de medicina aviar enviar el material de toma de muestras a los lderes departamentales relacionados en el Anexo 10: Distribucin del muestreo por Regiones Programadas y direcciones de Centros de Diagnstico Regionales y lderes aviares departamentales de acuerdo al nmero de granjas que les corresponde a cada departamento. Es responsabilidad del lder aviar departamental entregar el material de toma de muestras a los miembros de su equipo de trabajo verificando que todo est limpio y completo, se debe disponer de overoles desechables, polainas, gorros y tapabocas en cantidad suficiente. Anexo 6: Lista de materiales para toma de muestras y envo al laboratorio. Recoleccin de las muestras:

Se debe diligenciar completamente el Formulario de recoleccin de muestras. Anexo 4., de acuerdo al instructivo. Anexo 5., Instructivo para el diligenciamiento del formulario de recoleccin de muestras.

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Sangra.

Las muestras de sangre de las aves se deben tomar en fase de ayuno con el fin de disminuir los sueros lipmicos.

Se deber obtener una cantidad de sangre mnima de 2 centmetros y mximo 3. La sangre se toma con jeringa o aguja calibre 20, de la vena del ala. Cuando se tome con jeringa la sangre retire la aguja y deposite la sangre en el tubo sin anticoagulante, permitiendo que esta se deslice por las paredes del mismo (no utilice frascos de vacunas que contienen sustancias extraas que interfieren con la prueba). Cuando la sangre sea tomada nicamente con aguja, acerque el tubo a la base de la aguja e inclnelo de manera que la sangre se deslice por las paredes de este. Despus de la sangra, coloque los tubos tapados en posicin horizontal y djelos en reposo aproximadamente por 10 minutos para permitir la retraccin del coagulo. Despus colocar los tubos en gradillas, refrigerar y transportar en termos apropiados para remitir al laboratorio en las siguientes 6 horas. Si la oficina local cuenta con una centrfuga, obtenga el suero centrifugando a 3000 revoluciones por minuto durante 5 minutos y debe transvasar a viales, sellar con papel parafilm, refrigerar y enviar al Centro de Diagnostico Regional o la LNDV segn corresponda. Tiempo mximo de llegada al Centro de Diagnostico Regional o al LNDV una vez tomadas las muestras: 6 Horas. Los sueros debern ser analizados en los Centros de Diagnostico Regional cumpliendo la ruta crtica establecida para la prueba de IH: 48 HORAS mximo. Las muestras deben ser enviadas con un rtulo que contenga la siguiente informacin: Nmero de registro de la granja (Numeracin de 11 dgitos correspondiente al cdigo del lder aviar departamental, 2 dgitos del Departamento, 3 del Municipio y 4 del consecutivo de la granja dado por el ICA, nombre de la granja, departamento, municipio, sistema productivo.

Nmero de registro de la Granja: Nombre de la Granja: Departamento: Municipio: Sistema Productivo:

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Descarte de material:

Se deben descartar las agujas utilizadas en un frasco plstico o un guardin. Las jeringas y todo el material empleado en la toma de muestras debe ser empacado en una bolsa plstica roja y llevarlo a la oficina local del ICA o al Centro de Diagnstico Regional correspondiente. El destino final debe ser el descarte o incineracin en lugares adecuados. Toma de hisopos:

Para la toma de hisopos: tome un hisopo de dacron estril y realice un hisopado cloacal si el ave no presenta signos respiratorios. Si el galpn seleccionado para la toma de muestras tiene signos clnicos tome hisopos cloacales y traqueales y remtase al manual de control de la enfermedad de Newcastle. Introduzca el hisopo en la cloaca y realice una frotacin de la mucosa. Sacdalo para descartar residuos de material fecal e introduzca el hisopo en el medio de transporte. Enjuague el hisopo y escrralo por las paredes. Con el mismo hisopo repita el hisopado en otra ave. Utilice 1 hisopo por cada dos aves. Vierta el hisopo en la vnula que contiene 3ml del medio de transporte: Infusin Cerebro-corazn (BHI) o Caldo Triptosa y retrelo exprimindolo cuidadosamente sobre las paredes de la vnula. Guarde el hisopo usado en una bolsa estril de cierre hermtico (bolsa Nasco) hasta completar 5 hisopos lo cual conforma un pool. Repita lo anterior hasta completar 5 hisopos por vnula y 5 hisopos por bolsa estril de cierre hermtico (bolsa Nasco). Se deben completar 3 pools por granja. Estas vnulas deben cerrarse y ser selladas con papel parafilm, para evitar la prdida del lquido durante el envo al Laboratorio de Medicina Aviar del LNDV. Marque con marcador indeleble la bolsa estril de cierre hermtico (bolsa Nasco) que contiene los hisopos y marque la bolsa plstica que contiene los frascos con el medio de transporte, con un rotulo elaborado con cinta de enmascarar y que contenga la siguiente informacin: Nmero de registro de la granja(Numeracin de 11 dgitos correspondiente al cdigo del lder aviar departamental, 2 dgitos del Departamento, 3 del Municipio y 4 del consecutivo de la granja dado por el ICA, nombre de la granja, departamento, municipio, sistema productivo.

Nmero de registro de la Granja: Nombre de la Granja: Departamento: Municipio: Sistema Productivo:

Tiempo mximo para el envo al laboratorio .

Los hisopos refrigerados deben ser enviados al laboratorio en las siguientes 24 horas a la toma para evitar contaminacin y desnaturalizacin del virus. 15

Descarte del material:

Todo el material empleado en la toma de muestras debe ser empacado en una bolsa plstica roja y llevarlo a la oficina local del ICA o al centro de diagnstico regional correspondiente. El destino final debe ser el descarte o incineracin en lugares adecuados. Distribucin de muestras para serologa y de hisopos a los Diagnostico Regionales del ICA. diferentes Centros de

Para efectos administrativos y de organizacin del muestreo se distribuy el envo de muestras a los diferentes Centros de Diagnostico Regionales quienes sern los encargados de procesar los sueros por la tcnica de Inhibicin de la Hemoaglutinacin (HI). Anexo 10. Distribucin del muestreo por Regiones Programadas y direcciones de Centros de Diagnstico Regionales y lderes aviares. Grfico 9. Representacin del flujo de toma y envo de muestras. Granjas de pollos de engorde

TOMA DE MUESTRAS POLLO DE ENGORDE (IH)

FORMULARIO DE MUESTREO

Sueros

Lder Aviar departamental/ M.V Oficina Local Copia Centros de diagnstico Regionales originales Resultados L.N.D.V (Medicina Aviar) Base de Datos Laboratorio de Medicina Aviar

Verificacin Permanente
Lder Aviar Nacional

Base de Datos Lider Aviar

Reporte Lder Aviar departamental

EL lder Aviar o los veterinarios de las oficinas locales del ICA que visiten las granjas sern los responsables del envo de la informacin y de las muestras siguiendo el conducto regular definido. 16

Grfico 10. Representacin del flujo de toma y envo de muestras. Granjas de reproductoras y ponedoras

TOMA DE MUESTRA REPRODUCTORA O PONEDORA (rt-PCR)

MUESTRA (HISOPO CLOACAL)

Lder Aviar departamental*

Base de Datos L.N.D.V (Medicina Aviar)

Verificacin Permanente

Resultados Base de Datos Lder Aviar Nacional Resultado a Lder Aviar departamental

* El lder Aviar o los veterinarios de las oficinas locales del ICA que visiten las granjas sern los responsables del envo de la informacin y de las muestras siguiendo el conducto regular definido.

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Requisitos para el envo de las muestras recolectadas a los laboratorios de diagnstico del ICA asignados. Adjunte el original del formato Anexo 4. Formulario de Recoleccin de muestras. debidamente diligenciado y conserve una fotocopia en un archivo debidamente organizado exclusivamente para el muestreo de prevalencia. Los sueros deben ser enviados al Centro de Diagnstico Regional asignado.

Los hisopos deben ser enviados al Laboratorio de Medicina Aviar del LNDV en Bogot. Las muestras enviadas sin el orig inal del formato de recoleccin de muestras debidamente diligenciado no sern procesadas por el laboratorio. En casos espordicos en donde se presente algn inconveniente para el procesamiento de las muestras en el Centro de Diagnstico Regional asignado , se solicitar autorizacin escrita al lder nacional del proyecto para cambiar de laboratorio y se enviar copia de esta solicitud a la Coordinacin Nacional de Diagnstico Veterinario en el LNDV. (Bogot). Flujo de informacin para la toma de muestra s tanto en las granjas de pollo de engorde como en las granjas de postura y material gentico.

Se debe tener en cuenta y seguir el flujo de informacin que se presenta en los siguientes diagramas:

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Grafico 11. Flujo de Informacin para la toma de sueros en granjas de pollo de engorde

FLUJO DE INFORMACION POLLOS DE ENGORDE (IH)

FORMULARIO DE INFORMACION INICIAL

FORMULARIO DE MUESTREO (F.M.)

Lder Aviar departamental/ M.V Oficina Local CDx. Regional

Lder Aviar departamental/ M.V Oficina Local

F.M Original y Resultado Lder Nacional Resultados y formulario de muestras

L.N.D.V (Medicina Aviar)

Resultados a Lideres Dptales, Epidemiolog a Regional

Inf. Sem.

Base de Datos

FENAVI-FONAV Epidemiologa L.N.D.V Centros de dx Reg. Subgerencia Pecuraria Lideres aviares dptales

Base de Datos Laboratorio de Medicina Aviar Verificacin permanente

*El Lder Aviar o los veterinarios de las oficinas locales del ICA que visiten las granjas y sern los responsables del envo de la informacin y de las muestras siguiendo el conducto regular definido.

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Una vez procesadas las muestras por serologa para pollos de engorde, cumpliendo las rutas crticas establecidas, el Centro de Diagnstico Regional enviar los resultados en original al laboratorio de medicina aviar (LNDV) y una copia a lder aviar departamental, el cual informara de forma inmediata al epidemilogo regional los casos positivos o sospechosos. Los resultados sern validados, consolidados en una base de datos y comunicados al lder nacional de la especie aviar, quien consolida los resultados. Semanalmente en reunin conjunta el Lder Nacional de la especie aviar, el grupo de Epidemiologa Veterinaria y el de Medicina Aviar, se revisar la informacin de los Formularios de Visita inicial y Toma de Muestras junto con el resultado serolgico. Posterior a esta reunin el lder nacional de la especie aviar comunicar la interpretacin final de los resultados a los lideres aviares departamentales. El lder aviar del departamento comunicar los resultados al productor mediante un oficio, Anexo 7: Oficio Comunicacin de Resultados del Estudio de Prevalencia de Newcastle ., con los respectivos soportes emitidos por el Centro de Diagnostico Regional. Semanalmente se realizar la validacin de las bases de datos del laboratorio y del lder nacional de la especie aviar. Adicionalmente, el lder nacional realizar un informe de avance semanal y uno final de cada uno de los cuatro muestreos programados y el Informe Final del Estudio de Prevalencia, los cuales sern enviados a las siguientes personas: Lder aviar departamental, epidemilogo nacional encargado de la especie aviar, responsable del Laboratorio de Medicina Aviar, responsables Centros de Diagnstico Regionales, Subgerente de Proteccin y Regulacin Pecuaria y Departamento Tcnico Fenavi Fonav. En cada oficina seccional se deber crear un archivo fsico para el monitoreo de prevalencia donde reposaran las copias del Formulario de visita inicial, Anexo 2., Formulario de recoleccin de muestras, Anexo 4., Resultados y Formulario de investigacin Epidemiolgica Complementaria, Anexo 8, Estos deben ser organizados por granja.

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Grafico 12. Flujo de Informacin para la toma de hisopos cloacales en granjas de ponedoras y granjas de reproductoras

FLUJO DE INFORMACION PONEDORA Y REPRODUCTORA (rt-PCR)

FORMULARIO DE INFORMACION INICIAL

FORMULARIO DE MUESTREO

Lder Aviar departame ntal /M.V Oficina local

Foco Alta Virulencia

Comunicacin inmediata Resultados

Lder Nacional

Resultados

L.N.D.V (Medicina Aviar)

Inf. Sem.
FENAVI Epidemiologa L.N.D.V Centros de dx Reg. Subgerencia

Lider aviar Nacio nal

Epidemio logia Nacional

Epidemiol ogia regional

Resultados a Lideres dptal.

Base de Datos

Base de Datos

Verificacin Permanente

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Los lideres aviares departamentales y los veterinarios de las oficinas locales del ICA, enviaran las muestras de hisopados cloacales tomadas en las granjas de ponedoras y de material gentico directamente al Laboratorio Nacional de Diagnostico Veterinario (Laboratorio de Medicina Aviar), en Bogot, acompaadas del Formulario de Recoleccin de Muestras Anexo 4. Debidamente diligenciado. Los resultados sern validados, consolidados en una base de datos en el laboratorio y comunicados al lder nacional de la especie aviar quien consolida los resultados en una base de datos. Semanalmente en reunin conjunta el Lder Nacional de la especie aviar, el grupo de Epidemiologa Veterinaria y el de Medicina Aviar revisar la informacin de los Formularios de Visita inicial y Toma de Muestras junto con el resultado de hisopados cloacales. Posterior a esta reunin el lder nacional de la especie aviar comunicara la interpretacin final de los resultados a los lideres aviares departamentales. El lder aviar del departamento comunicara los resultados al productor mediante un oficio Anexo 7. Oficio Comunicacin de Resultados del Estudio de Prevalencia de Newcastle con los respectivos soportes emitidos por el LNDV, Laboratorio de medicina aviar. Semanalmente se realizar la validacin de las bases de datos del laboratorio y del lder nacional de la especie aviar. Adicionalmente, el lder nacional realizar un informe de avance semanal y uno final de cada uno de los muestreos programados y el Informe Final del Estudio de Prevalencia, los cuales sern enviados a las siguientes personas: Lder aviar departamental, Epidemilogo nacional encargado de la especie aviar, responsable del Laboratorio de Medicina Aviar, responsables centros de diagnstico regionales, Subgerente de Proteccin y Regulacin Pecuaria y Departamento Tcnico Fenavi Fonav. En cada oficina seccional se deber crear un archivo fsico para el monitoreo de prevalencia donde reposarn las copias de los formatos de: Formulario de informacin inicial, toma de muestras y resultados e investigacin epidemiolgica complementaria. Estos deben ser organizados por granja 4. Interpretacin de resultados para granjas de pollos de engorde Granja de engorde positiva a infeccin: Cuando 2 de los 15 sueros procesados superan el punto de corte. Punto de Corte: Aves vacunadas con vacuna viva: 128 Aves vacunadas con vacuna inactivada: 256

Granja de engorde negativa a infeccin. Cuando el 100% de los 15 sueros procesados, tienen resultados con ttulos por debajo del punto de corte. Granja de engorde sospechosa a infeccin: Cuando de los 15 sueros procesados, uno tiene ttulos por encima del punto de corte. Tambin se considera granja sospechosa a infeccin, aquella que tenga tres sueros o ms con ttulos iguales a 128 si vacunan con vacuna viva y tres ttulos o ms iguales a 256 si vacunan con vacuna oleosa. Todas las granjas de pollo de engorde POSITIVAS SOSPECHOSAS a infeccin entraran a investigacin complementaria por la prueba de RT- PCR de hisopos cloacales. 22

Grfico 12. Interpretacin de resultados en granjas de pollo de engorde.

INTERPRETACION DE RESULTADOS PARA POLLO DE ENGORDE

SUEROS

INHIBICION DE LA HEMAGLUTINACION

POSITIVO 2 Sueros > 128 (Viva) > 256 (Inactiva.)

Hisopos cloacales rt PCR

SOSPECHOSO 1 Sueros > 128 (Viva) >256 (Inactiva.) 3 Sueros o ms ttulos iguales a 128 (Viva) Ttulos Iguales a 256 (oleosa)

NEGATIVO Todos Los sueros < 128 (Viva) < 256 (Inactiva.)

NEGATIVO POSITIVO : Alta Virulencia Baja Virulencia Mezcla Atpica

Aislamiento Viral

POSITIVO al virus de Newcastle

NEGATIVO al tercer pase

rt PCR A partir de Liquido Alantoideo

Alta Virulencia Baja Virulencia Mezcla Atpica

Interpretacin de resultados en granjas de postura y de material gentico

Tcnica de RT- PCR directamente de hisopos cloacales para determinar la presencia o ausencia del virus de Newcastle y su virulencia. Los resultados negativos a RT-PCR pasan a aislamiento viral. Si el lquido alantoideo presenta actividad hemoaglutinante pasa a RT-PCR para determinar la virulencia.

Granja de postura o de material gentico positivas a infeccin: Cuando el resultado de RT-PCR es positivo. Granjas de postura o material gentico negativas a infeccin: Aquellas con resultado de prueba directa RT- PCR negativo y aislamiento negativo.

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Grfico 13. Interpretacin de resultados para granjas de ponedoras y material gentico.

INTERPRETACION DE RESULTADOS PARA PONEDORA Y REPRODUCTORA

HISOPOS CLOACALES

rt PCR

POSITIVO : Alta Virulencia Baja Virulencia Mezcla Atpica

NEGATIVO

AISLAMIENTO VIRAL

Positivo al virus de Newcastle

Negativo al tercer pase

rt PCR A partir de Liquido Alantoideo

Alta Virulencia Baja Virulencia Mezcla Atpica

5. Investigacin complementaria en granjas de pollo de engorde. Esta investigacin se realizara nicamente en las granjas de pollos de engorde con resultados positivos o sospechosos por la prueba de HI, instrumento indirecto de diagnstico, que da una evidencia de infeccin pero no permite concluir la tipificacin del virus de Newcastle. La investigacin complementaria mediante la prueba de RT PCR y el formulario de investigacin epidemiolgica complementaria en granjas positivas o sospechosas a infeccin de Newcastle para pollo de engorde Anexo 8., estn diseados para establecer la presencia del virus de Newcastle y realizar su tipificacin, permitiendo definir las estrategias diferenciales de control. Los procedimientos establecidos dependen de la situacin encontrada en el momento de la segunda visita a la granja de la siguiente manera:

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Considerando la ruta crtica de diagnstico de HI (3 das) y que el tiempo de toma de muestras inciales en granja es hasta los 35 das de edad, siempre y cuando se cumpla con los criterios de inclusin (edad, fecha de aplicacin vacuna) se deber tomar las muestras del estudio complementario en el mismo lote, antes que las aves sean trasladadas a la planta de beneficio. Si los animales anteriormente muestreados ya salieron para sacrificio, se tomarn muestras de hisopos cloacales de las aves que an se encuentran en la granja y que cuentan con los criterios de inclusin. En caso de encontrar presencia de signos clnicos; se tomarn 15 hisopos traqueales de 30 aves (un hisopo por cada dos aves agrupados en tres pools) de los lotes que estn en la fase ms aguda de la enfermedad, es decir aquellos que estn iniciando o que presenten signos clnicos respiratorios, neurolgicos o diarrea. Debe remitirse al manual de Control de la enfermedad de Newcastle. En caso de no encontrar signos clnicos; se tomarn 15 hisopos cloacales de 30 aves (un hisopo por cada dos aves agrupados en tres pools) del lote inicialmente muestreado serolgicamente. En caso de que las aves de la granja positiva o sospechosa ya hayan salido para sacrificio, y la granja se encuentre desocupada, se tomaran muestras de cama sin tratar, es decir antes de que la cama haya sido sometida al proceso de sanitizacin: aumento de temperatura, biolgico o productos qumicos.

En todos los casos anteriormente mencionados, se deber diligenciar en su totalidad y con base en la verificacin de registros, el formulario de Investigacin Epidemiolgica Complementaria en Granjas Positivas o Sospechosas a Infeccin de Newcastle. Anexo 8. Los focos positivos por RT-PCR sern atendidos de acuerdo a lo establecido en el Programa de Control de la enfermedad de Newcastle. 6. Gerencia del Muestreo. El objetivo de establecer tanto los niveles operativos como el flujo de la informacin, es proporcionar un orden y dar agilidad al proceso para garantizar que la informacin sea homognea y que las muestras colectadas lleguen a su destino lo ms pronto posible y conservadas adecuadamente. Cada uno de estos niveles tiene sus propias responsabilidades que se presentan a continuacin: Nivel Central: Se encuentra representado por:

Lder nacional, epidemilogo nacional, coordinador del Laboratorio de Enfermedades Aviares del LNDV. Nivel departamental: Se encuentra representado por. Coordinadores seccionales, Lderes departamentales aviares, Responsables de los Centros de Diagnostico Regional, Epidemilogo Regional, mdicos veterinarios oficinas locales del ICA

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Responsabilidades Por Nivel:

El Lder Nacional de la especie aviar es el responsable del diseo de muestreo y anlisis estadstico de los resultados. Coordina las reuniones para establecimiento de metodologa y supervisa las actividades relacionadas con el muestreo a nivel nacional. Disea la base de datos para consolidacin de la informacin y resultados del muestreo. Recibe el formulario de Informacin Inicial y los resultados de diagnostico del LNDV para alimentar la base de datos, enva los resultados a los lideres departamentales aviares, emite y enva los informes semanales de avance del muestreo a FENAVI-FONAV, Subgerencia de Proteccin y Regulacin Pecuaria, Epidemiologa Nacional, LNDV, Centros de diagnostico regionales y lideres aviares. Organiza el archivo fsico de soportes. El Laboratorio de Medicina Aviar del LNDV es el responsable de la capacitacin y seguimiento del personal de Laboratorio en las diferentes pruebas diagnsticas necesarias para este trabajo, enva los materiales de laboratorio y reactivos a los diferentes centros de diagnstico regionales que participan en el muestreo, realiza las pruebas moleculares, enva los resultados en original al Lder Nacional, recibe, valida y consolida en una base de datos los resultados de las pruebas serolgicas realizadas a nivel regional y enva los resultados originales al lder Nacional del Proyecto. Realiza la verificacin final de la base de datos con el Lder Nacional del proyecto aviar. Participa en el anlisis e interpretacin de los resultados. Es el responsable del cumplimiento de las rutas crticas de diagnstico. El epidemilogo del nivel central recolecta, valida y analiza la informacin de los episodios de Newcastle detectados. Tiene la responsabilidad de direccionar y efectuar el seguimiento de la investigacin epidemiolgica de los casos de Newcastle de alta virulencia detectados a travs del muestreo, participa en el Anlisis e interpretacin de los resultados del muestreo. Los anteriores Grupos dependen de la Subgerencia de Proteccin y Regulacin Pecuaria y estarn a cargo de la capacitacin de todos los funcionarios del ICA involucrados en el estudio. Nivel Departamental:

Coordinador Seccional: Facilita el desarrollo del muestreo a nivel regional Es el encargado de dirigir el oficio a los propietarios o gerentes de las granjas seleccionadas, informndoles su participacin en el estudio as como de comunicar los resultados del muestreo. Tambin emite las resoluciones o actos administrativos que se deriven de los resultados del muestreo. Los lideres aviares departamentales: sern los encargados de informar y asesorar al Coordinador Seccional las actividades relacionadas con el muestreo, realizar un cronograma de visita a granjas, diligenciar y validar los formatos Informacin Inicial y Formulario de Recoleccin de muestras y envo de las muestras al laboratorio de diagnostico regional asignado o envo directo de las muestras al LNDV en Bogot. Es el responsable de solicitar al Centro de Diagnostico Regional o al LNDV los resultados validados. Los responsables de los Centros de Diagnostico Regional: sern los encargados de coordinar la realizacin de las pruebas de diagnostico serolgico, de la emisin y envi de los resultados al LNDV. Tambin sern los encargados de coordinar todo lo relacionado con la recepcin de muestras, empaque y envo al LNDV en la ciudad de Bogot. Ser el responsable del cumplimiento de las rutas criticas en las pruebas de diagnostico.

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Los veterinarios de las Oficinas Locales: debern apoyar al lder departamental en la visita a granjas y toma de muestras segn indicaciones de este. A los epidemilogos regionales les corresponde el direccionamiento y el seguimiento de la investigacin epidemiolgica de los focos positivos a Newcastle virulento junto con el lder departamental de la especie aviar.

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ANEXOS Anexo 1. Oficio sociabilizacin estudio

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Anexo 2. Formulario de informacin inicial

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Anexo 3. Instructivo para el diligenciamiento del formulario de visita inicial INSTRUCTIVO PARA EL DILIGENCIAMIENTO DEL FORMULARIO DE INFORMACION INICIAL Este formulario ser diligenciado en el momento de visita a la granja seleccionada para el muestreo de prevalencia. La informacin recolectada ser la base de la interpretacin de resultados cuyo anlisis permitir decidir si es pertinente llevar a cabo una investigacin complementaria Es imprescindible que sea diligenciado en su totalidad, en letra imprenta y con esfero de tinta negra indeleble. Campo 01: Cdigo de la granja: El lder aviar nacional asignar este cdigo de identificacin a las granjas que participan en el muestreo. Consta de 11 dgitos de los cuales los dos primeros corresponden al cdigo asignado a cada uno de los lderes aviares departamentales. Los cinco dgitos siguientes son dados por el DANE para la identificacin de Departamento y municipios en Colombia y los 4 restantes corresponden al nmero de registro de la granja ante el ICA Campo 02: Fecha de visita. Representa el da/mes/ao en que se realiza la visita a la granja y el se recopila la informacin respectiva. campo 03: Informacin General. Campo de identificacin bsica que contiene la siguiente informacin: 1. INFORMACION PROPIETARIO Y GRANJA 1.1. Propietario del predio: nombre completo del propietario de la granja; Nmero de cdula y lugar de expedicin. 1.2.Nombre de la Granja, vereda, municipio, departamento, latitud, longitud (coordenadas obtenidas en el GPS configurado en formato WGS 84 2 enteros y 5 decimales, los cuales permiten una distribucin espacial de las unidades muestrales. Al dato correspondiente a la longitud se le debe anteponer el signo negativo. 1.3. Tipo de granja: Escriba una (X) en donde corresponda 1.4. Escriba el nombre de la persona o empresa arrendataria y el tipo de arrendamiento

1.5. Asistencia Tcnica: Marque con una (X) quien realiza la asistencia tcnica y escriba el nombre completo y el nmero de tarjeta profesional. 1.6. Tipo de explotacin: marque con una (X) la explotacin a la cual estn destinadas la aves de la granja. 1.7. Escriba la raza de las aves y la capacidad ocupada de la granja 1.8. Escriba una (X) en el lugar que corresponda segn la procedencia de las aves de la granja. Si son de incubadora, escriba el departamento y municipio en donde se encuentra la incubadora.

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2. PARAMETROS SANITARIOS DE LA GRANJA. Estos deben ser confirmados mediante los registros existentes en la granja: 2.1. % Mortalidad acumulada: escriba el porcentaje de mortalidad acumulada existentes en la granja en el momento de la visita. de los lotes se han se han

2.2. Presencia de signos respiratorios en los ltimos 15 das: escriba SI o No, presentado signos respiratorios. 2.3. Presencia de signos neurolgicos en los ltimos 15 das: escriba SI o No, presentado signos neurolgicos.

2.4. Presencia de diarrea en los ltimos 15 das: escriba SI o No, se ha presentado diarrea. 3. PARAMETROS PRODUCTIVOS DE LA GRANJA. Verificables nicamente con los registros existentes en la granja 3.1. Eficiencia (europea o americana) del lote anterior. Escriba la eficiencia en el campo que corresponda. Esto para granjas de pollo de engorde. 3.2. Semana de edad: Marque con una (X) la semana en la cual se encuentra el lote. Esto para granjas de pollo de engorde. 3.3. Peso por semana. Escriba en cada casilla el peso alcanzado por el lote de acuerdo a la semana de edad de la primera a la cuarta. Esto para granjas de pollo de engorde. 3.4. Consumo por semana. Escriba el consumo de alimento en gramos del lote para cada semana. Esto para granjas de pollo de engorde. 3.5. Porcentaje de produccin de huevo semanal. Escriba el porcentaje de produccin del lote de las ltimas cuatro semanas. nicamente para el caso de granjas de postura y reproduccin. 4. VACUNACIN CONTRA LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE Este campo debe ser diligenciado cuidadosamente ya que es imprescindible para la interpretacin de resultados de laboratorio. Esta informacin deber ser confirmada con los registros de la granja. 4.1. Aplicacin de vacuna viva: marque con una (X) si aplican o no vacuna viva contra el virus de NC y el laboratorio productor. Diligencie el cuadro indicando la cantidad de dosis recibidas, la edad de aplicacin (en das para pollo de engorde y en semanas para postura y reproduccin); escriba la cepa utilizada y la va de aplicacin para cada dosis. 4.2. Aplicacin de vacuna Inactivada: marque con una (X) si aplican o no vacuna inactivada (oleosa) contra el virus de NC y el laboratorio productor. Diligencie el cuadro indicando la cantidad de dosis recibidas, la edad de aplicacin (en das para pollo de engorde y en semanas para postura y reproduccin); escriba la cepa utilizada y la va de aplicacin para cada dosis. 5. RESPONSABLE DEL LEVANTAMIENTO DE LA INFORMACIN: Debe diligenciarse obligatoriamente. No se aceptan formularios sin la identificacin del responsable.

NOTA: Este formulario no debe tener manchas, enmendaduras ni tachones. 32

DEFINICIONES: GRANJA INTEGRADA: Cuando el productor esta vinculado con una empresa avcola comercial GRANJA EN ARRIENDO: Cuando el productor es diferente al propietario del predio. GRANJA INDEPENDIENTE: Cuando el productor es tambin el propietario del predio. PESO POR SEMANA: Peso promedio de las aves - peso promedio inicial. CONSUMO POR SEMANA: Kilogramos consumidos en la semana/ No. De aves PORCENTAJE DE MORTALIDAD: No. de aves muertas/ No. de aves iniciales EFICIENCIA EUROPEA: Viabilidad x peso vivo (Kg.)________ x 100 Edad (das) x conversin alimenticia

EFICIENCIA AMERICANA: Viabilidad x peso vivo (Kg.) ________ x 100 Edad (das) x consumo total ave

VIABILIDAD: 100 - % mortalidad

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Anexo 4. Formulario de Recoleccin de muestras

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Anexo 5. Instructivo para el diligenciamiento del formulario de recoleccin de muestras. INSTRUCTIVO PARA EL DILIGENCIAMIENTO DEL FORMULARIO DE RECOLECCION DE MUESTRAS. Este formulario debe ser diligenciado en su totalidad al momento de la toma de las muestras conservando su integridad fsica, evitando contacto con material de los galpones o de la granja que pueda vehiculizar agentes patgenos o que altere la legibilidad de la informacin. El diligenciamiento debe realizarse con un esfero de tinta negra indeleble y con letra imprenta clara que permita su transcripcin al llegar al laboratorio. Este formulario debe siempre acompaar a las muestras mantenindolo protegido del contacto directo con las muestras para que no se altere la calidad del formulario. Este documento hace parte del historial de registro documental el cual debe anexarse a los resultados de laboratorio para ser enviados al lder nacional y deben guardarse copias para el archivo del laboratorio. Cdigo de la granja: El lder aviar nacional asignar este cdigo de identificacin a las granjas que participan en el muestreo. Consta de 11 dgitos de los cuales los dos primeros corresponden al cdigo asignado a cada uno de los lderes aviares departamentales. Los cinco dgitos siguientes son dados por el DANE para la identificacin de Departamento y municipios en Colombia y los 4 restantes corresponden al nmero de registro de la granja ante el ICA Fecha de visita. Representa el da/mes/ao en que se realiza la visita a la granja y el se recopila la informacin respectiva. 1. INFORMACIN DEL PROPIETARIO Y DE LA GRANJA Campo de identificacin bsica que contiene la siguiente informacin: 1.1. 1.2. Propietario del predio: nombre completo del propietario de la granja; Nmero de cdula y lugar de expedicin. Nombre de la Granja, vereda, municipio, departamento, latitud, longitud (coordenadas obtenidas en el GPS configurado en formato WGS 84 2 enteros y 5 decimales, los cuales permiten una distribucin espacial de las unidades muestrales. Al dato correspondiente a la longitud se le debe anteponer el signo negativo. Tipo de granja: Escriba una (X) en donde corresponda Escriba el nombre de la persona o empresa arrendataria y el tipo de arrendamiento Asistencia Tcnica: Marque con una (X) quien realiza la asistencia tcnica y escriba el nombre completo y el nmero de tarjeta profesional. Tipo de explotacin: marque con una (X) la explotacin a la cual estn destinadas las aves de la granja. Escriba la raza de las aves y la capacidad ocupada de la granja Escriba una (X) en el lugar que corresponda segn la procedencia de las aves de la granja. Si son de incubadora, escriba el departamento y municipio en donde se encuentra la incubadora. 35

1.3. 1.4. 1.5. 1.6. 1.7. 1.8.

2.

FECHA DE RECOLECCIN, ENVO Y RECIBO DE MUESTRAS, EMISIN Y RECEPCIN DE RESULTADOS. a. Recoleccin de muestras: escriba el da, mes, ao de la toma de muestras en la granja. b. Envo de muestras al laboratorio: se debe registrar la fecha en la cual la muestra fue remitida al laboratorio. Se debe contar con los soportes en los casos en que la muestra es enviada va servicio de mensajera o aeropuerto - aeropuerto, segn sea el caso. El envo de las muestras debe ser inmediato con el fin de preservar la calidad de la muestra y la emisin oportuna de resultados por parte del laboratorio. Itinerario de vuelos. Anexo 13. c. Recibo de muestras en el laboratorio: Espacio para ser diligenciado en el laboratorio que procesa la muestra. Se debe registrar el da-mes- ao y la hora en la cual fue recibida. Esta informacin debe corresponder a la registrada en los libros de ingreso de muestras en el laboratorio. d. Emisin de resultados del laboratorio: Espacio para ser diligenciado en el laboratorio que procesa la muestra. Se debe registrar el da-mes- ao y la hora en la cual se emiti el resultado internamente y entregado para su trascripcin en el formato establecido. Deben existir los soportes escritos sobre la entrega del resultado para su trascripcin y envo. e. Comunicacin de resultados a nivel nacional: Espacio para ser diligenciado por el laboratorio que procesa la muestra, se debe registrar el da-mes- ao y la hora en la cual el laboratorio regional envi los resultados de HI por correo fsico al laboratorio de medicina aviar del LNDV. Tambin se diligencia cuando el laboratorio de medicina aviar del LNDV envi los resultados de RT PCR a lder nacional de la especie aviar. Los resultados debern ser enviados siguiendo la ruta establecida. El Laboratorio debe guardar los soportes de la fecha y hora en la cual el resultado fue enviado.

3. TIPO DE MUESTRA -Toma de sueros: Marque con una (X) si toma muestras de sangre en caso de tratarse de granjas de pollo de engorde. - Nmero de sueros: Escriba el nmero de muestras de sangre tomadas en la visita a la granja - Toma hisopos: Marque con una (X) si toma muestras de hisopos en caso de tratarse de granjas postura, de reproduccin o en caso de ser prueba complementaria. - Pool: por cada pool que tome de hisopos, identifique nmero del mdulo, galpn, corral, lote, la fecha de entada del lote y la edad de los animales muestreados. 4. RESULTADOS Estos espacios deben ser diligenciados por el laboratorio que procesa las muestras. - HI (Anexo): Marque con una (X) si el resultado es por la tcnica de Inhibicin de la Hemaglutinacin a las granjas de pollo de engorde. El original de este resultado debe ser anexado a este formato.

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- RT-PCR: Este espacio es diligenciado por el laboratorio de medicina aviar del LNDV. Los resultados se registrarn en trminos de virulencia (Alta, Baja, Mezcla, No tipificable, Negativo) para cada uno de los pools examinados mediante esta metodologa. - AISLAMIENTO VIRAL: Debe registrarse el resultado de aislamiento en trminos de Positivo o Negativo en los casos en que la investigacin complementaria as lo haya indicado. - RT- PCR Lquido Alantoideo: Los resultados se registrarn en trminos de virulencia (Alta, Baja, Mezcla, No tipificable, Negativo) segn corresponda. 5. RESPONSABLE DEL LEVANTAMIENTO DE LA INFORMACIN: Debe diligenciarse obligatoriamente. No se aceptan formularios sin la identificacin del responsable.

NOTA: Este formulario no debe tener manchas, enmendaduras ni tachones.

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Anexo 6. Lista de materiales para la toma de muestras y envo al Laboratorio N. 1 Material Jeringas desechables de 3 o 5 cm aguja calibre 20 Viales plsticos eppendorf de 2 cm Rollo de parafilm Informacin y Objetivos Se utilizan para sangrar los pollos de engorde Para empacar los sueros Para sellar los viales que contienen los sueros Para la toma de muestras en ponedoras y en reproductoras Para sellar las bolsas y marcarlas Para empacar los hisopos y viales Para empacar cada paquete de sueros o de hisopos por granja Para el lavado de los hisopos luego de tomar la muestra Para el transporte de las muestras al laboratorio. Para la conservacin de las muestras

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Hisopos de dacron Cinta de enmascarar Bolsas estriles de cierre hermtico (Bolsas Nasco) Bolsas plsticas Vnulas de 15 ml con 3 ml de medio de transporte viral BHI Nevera de icopor Refrigerante

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Anexo 7. Oficio comunicacin de resultados del estudio de prevalencia al propietario o responsable de la granja.

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Anexo 8. Formulario de investigacin epidemiolgica complementaria

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Anexo 9. Instructivo para el diligenciamiento del formulario de investigacin epidemiolgica complementaria. INSTRUCTIVO DE DILIGENCIAMIENTO CODIGO ASIGNADO A LA GRANJA: El lder aviar nacional asignar este cdigo de identificacin a las granjas que participan en el muestreo. Consta de 11 dgitos de los cuales los dos primeros corresponden al cdigo asignado a cada uno de los lderes aviares departamentales. Los cinco dgitos siguientes son dados por el DANE para la identificacin de Departamento y municipios en Colombia y los 4 restantes corresponden al nmero de registro de la granja ante el ICA 1. INFORMACION PROPIETARIO Y GRANJA 1.1Propietario del predio: Escriba el nombre del propietario de la granja, el numero de la cedula de ciudadana, el sitio donde fue emitida1.2 Nombre de la Granja: Escriba el nombre de la granja, la vereda donde est ubicada , el nombre del municipio y el departamento coordenadas obtenidas en el GPS configurado en formato WGS 84 (2 enteros y 5 decimales), los cuales permiten una distribucin espacial de las unidades muestrales. El dato correspondiente a la longitud se le debe anteponer el signo negativo... 1.3 Tipo de granja: Seale con una x si la granja se encuentra en arriendo a una empresa, hace parte de un integrado u otra opcin. 1.4 Nombre de la persona que arrienda la granja, Escriba el nombre de la persona que tiene en arriendo la granja. Empresa que arrienda la granja: Escriba el nombre de la empresa que tiene en arriendo la granja. Y el tiempo en meses de que lleva la granja arrendada a la empresa. 1.5 Asistencia Tcnica: Marque con una x si el profesional que presta asistencia tcnica es Mdico Veterinario o es Mdico Veterinario Zootecnista. Nombre: Escriba el nombre del Profesional. Tarjeta profesional: Escriba el nmero de la tarjeta profesional. 1.6 Raza: Escriba la raza de las aves. Capacidad ocupada: escriba el nmero de aves que estn actualmente en la graja 1.7 Procedencia de las aves: Marque con una x si las aves provienen de incubadora, si las aves provienen de otra granja o de almacn agropecuario. Ubicacin de la incubadora: Escriba el departamento y el municipio donde se encuentra ubicada la incubadora

2. PARAMETROS SANITARIOS DE LA GRANJA 2.1 % de mortalidad actual: Escriba en nmeros el porcentaje de mortalidad en el da de la visita 2.2 Presencia de signos respiratorios en los ltimos 15 das: Escriba Si o No segn corresponda 2.3 Presencia de signos nerviosos en los ltimos 15 das: Escriba SI o NO segn corresponda 43

2.4 Presencia de diarrea en los ltimos 15 das: Escriba SI o No segn corresponda 3. PARAMETROS PRODUCTIVOS DE LA GRANJA 3.1Eficencia europea o Americana del lote anterior. Escriba en nmeros la eficiencia segn corresponda 3.2 Semana de edad. Corresponde a la primera, segunda, tercera y cuarta semana de edad 3.3 Peso: Escriba en gramos el peso alcanzado en la primera, segunda, tercera y cuarta semana de edad. 3.4Consumo: Escriba en gramos el consumo promedio de la primera, segunda, tercera y cuarta semana de edad 4 FACTORES DE RIESGO DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE PRESENTES EN LA GRANJA 4.1 Reutilizacin de la cama: Seleccione con una X la opcin que corresponda 4.2 Procedimiento de sanitizacin de la gallinaza o de la pollinaza: Seleccione con una x si la gallinaza es sometida a tratamiento trmico, si la gallinaza es sometida a otro tipo de tratamiento y escriba cual es ese tratamiento o si la gallinaza no es tratada. 4.3 Tipo de vehculo que transporta la pollinaza: Seleccione con una x segn corresponda si el vehculo que transporta la pollinaza es carpado, utiliza polisombra o si es otro tipo de vehculo anote cual. 4.4 Destino de la pollinaza: Escriba el departamento y el municipio al cual es transportada la gallinaza o pollinaza cuando es retirada de la granja, Uso final de la pollinaza o gallinaza: Escriba para que es utilizada la gallinaza o pollinaza una vez es retirada de la granja 4-5 Compostaje de la mortalidad: Seleccione con una x la opcin que corresponda dependiendo de si la mortalidad de la granja es sometida a compostaje o no. 4.6 Densidad de las aves por metro cuadrado: Escriba la densidad actual de las aves por metro cuadrado 4.7 Fecha de diagnsticos confirmados de enfermedades en la granja: 4.7.1 Enfermedad de Gumboro: Escriba la fecha en que fue confirmada la enfermedad. Si no ha habido un diagnostico de enfermedad de Gumboro en la granja escriba N/A 4.7.2 Enfermedad de Bronquitis infecciosa: Escriba la fecha en que fue confirmada la enfermedad. Si no ha habido un diagnostico de enfermedad de Bronquitis infecciosa en la granja escriba N/A 4.7.3 Enfermedad de Micoplasma: Escriba la fecha en que fue confirmada la enfermedad. Si no ha habido un diagnostico de enfermedad de Micoplasma en la granja escriba N/A 4.7.4 Enfermedad de Laringotraqueitis aviar: Escriba la fecha en que fue confirmada la enfermedad. Si no ha habido un diagnostico de enfermedad Laringotraqueitis aviar en la granja escriba N/A 4.7.5Otra cual? Escriba el nombre de otra enfermedad diferente a las ya mencionadas y que haya sido diagnosticada en la granja

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4.8 Presencia de otros animales en la granja: Seleccione con una x si observa la presencia de animales diferentes a las aves en la granja. Cuales: Escriba el nombre del animal o los animales diferentes a las aves y que observa estn presentes en la granja, 4.9 Presencia de roedores: Seleccione con una x si observa la presencia o no de roedores en la granja 4.10 Programa de control de roedores: Verificacin visual de la presencia o no de roedores 4.11 Presencia de Alphitobius Diaperinus. Verificacin visual de la presencia o no del Alphitobius 4.12 Programa de control de moscas. Verificacin visual del programa escrito del control de moscas. 4.13 Uso exclusivo de dotacin de ropa y calzado para los trabajadores de la granja. Seale con una X si en los vestieres encuentra ropa y calzado de uso exclusivo para los trabajadores de la granja. Verificacin visual. 4.14 Cuenta con comederos exclusivos para la granja. Seale con una x si la granja utiliza o no comederos exclusivos para la granja. 4.15 Cuenta con bebederos exclusivos para la granja. Seale con una X si la granja utiliza o no bebederos exclusivos para la granja. 4.16 Lleva un registro de ingreso de personas y vehculos a la granja. Seale con una X si se lleva un registro de ingreso de personas y vehculos a la granja. Verificacin visual 4.17 Cuenta con un sistema de desinfeccin de vehculos a la entrada de la granja. Seale con una X el sistema de desinfeccin de vehculos que se encuentra instalado en la entrada de la granja. 4.18 Cuenta con pediluvios a la entrada de galpones : Seale con una x si a la entrada de los galpones se encuentran en funcionamiento dos pediluvios uno con desinfectante y otro con agua. 4.19 La fuente de agua de bebida de los animales proviene de: seale con una x la fuente de agua de bebida de los animales en la granja. Otro (cual): Escriba otra fuente de agua de bebida diferente a las mencionadas 4.20 El tratamiento de agua est documentado y con registros: Verificacin visual del registro de tratamiento del agua y seale con una X segn corresponda. 4.21 Se observa presencia de aves silvestres dentro del galpn: Verificacin visual de la presencia de aves silvestres en los galpones. Seale con una X segn corresponda. 4.22 La Batera de baos es independiente y para uso exclusivo de trabajadores y visitantes: Verificacin visual de las instalaciones de los baos. Seale con una x segn corresponda. 5. FACTORES DE RIESGO EXTERNOS PARA LA PRESENTACIN DE ENFERMEDAD DE NEWCASTLE EN LA GRANJA 5.1 Escriba la distancia en metros entre los galpones de la granja y la carretera(principal o secundaria):

5.2 La carretera de acceso a la granja es una va comn a otras granjas: Seale con una x la opcin segn corresponda.

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5.3 La carretera de acceso es va comn a plantas de sacrificio: Seale con una x la opcin segn corresponda. 5.4 Cuantos aos de construccin tiene la granja. Escriba los aos de construccin que lleva la granja. 5.5 A 5 kilmetros alrededor de la granja hay presencia de: Galleras, Basureros, Rellenos sanitarios, Plantas de beneficio, Mercado de aves vivas. Seale con una x las diferentes opciones que correspondan. 5.6 Es de propiedad de la empresa el camin que distribuye el alimento: Seale con una x la opcin que corresponda. 5.7 El camin del alimento corresponda. visita varias granjas el mismo da: Seale con una x la opcin que

6. Responsable del levantamiento de la informacin. Escriba el nombre y firma de la persona que realiza la encuesta. DEFINICIONES: GRANJA INTEGRADA: Cuando el productor esta vinculado con una empresa avcola comercial GRANJA EN ARRIENDO: Cuando el productor es diferente al propietario del predio. GRANJA INDEPENDIENTE: Cuando el productor es tambin el propietario del predio. PESO POR SEMANA: Peso promedio de las aves - peso promedio inicial. CONSUMO POR SEMANA: Kilogramos consumidos en la semana/ No. De aves PORCENTAJE DE MORTALIDAD: No. de aves muertas/ No. de aves iniciales EFICIENCIA EUROPEA: Viabilidad x peso vivo (kg)________ x 100 Edad (das) x conversin alimenticia

EFICIENCIA AMERICANA: Viabilidad x peso vivo (kg)________ x 100 Edad (das) x consumo total ave VIABILIDAD: 100 - % mortalidad

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Anexo 10. Distribucin del muestreo por Regiones Programadas y direcciones de centros de diagnstico regionales y lderes aviares departamentales
Centro Cdigo Total Diagnostico lder Granjas a Asignado aviar monitorear CcutaBogot AraucaBogota 02 8 Calle 15 #14-42 01 61 Direccin Centro de Diagnostico Avenida del Aeropuerto, Corral de Piedra

Departamento Norte de Santander

Lder avcola Alfredo Yez alfredo.yanez@ica.gov.co Ruth Sarmiento ruth.sarmiento@ica.gov.co

1.Zona frontera con Venezuela

Arauca

Adalberto Mallama 2.Zona frontera con Ecuador Nario amallama73@gmail.com Norma Fajardo Putumayo gerencia.putumayo@ica.gov.co German Snchez Guajira germanrioh@hotmail.com

PastoBogota Bogot

03

62

Calle 19 A# 42 A45 Barrio Pandiaco Calle 10 # 32-84 Barrio Alvernia Calle 22 # 14-30 Barrio 12 de Octubre Calle 22 #14-30 Barrio 12 de Octubre

04

11

ValleduparBogota

05

Joaqun Guillermo Mendoza Cesar joaquin.mendoza@ica.gov.co ValleduparBogota 06 11

Teresa Catao Alarcn Bolvar teresa.catano@ica.gov.co BarranquillaBogota 07 6 Calle 18#50-32 Soledad

Adal Alfaro 3.Zona Norte Magdalena adal.alfaro@ica.gov.co BarranquillaBogota 08 7 Calle 18#50-32 Soledad

Juan Diego Rodrguez Atlntico juan.rodriguez@ica.gov.co BarranquillaBogota 09 32 Calle 18# 50-32 Soledad

Jos Vctor Castaeda Crdoba jose.castaneda@ica.gov.co MonteraBogota 10 9 Km. 13 Va CereteCrdoba

Fredy Ordogostia Sucre fredy.ordosgoitia@ica.gov.co MonteraBogot 11 7 Km. 13 va CereteCrdoba

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Zona

Departamento Antioquia Caldas

Lder avcola Silvia Rico silvia.rico@ica.gov.co Gustavo Crdenas Aviares.caldas@ica.gov.co Luisa Marina Grisales luisa.grisales@ica.gov.co

Centro Diagnostico Asignado MedellnBogot ManizalesBogot ArmeniaBogota

Cdigo Total Direccin Centro de lder Granjas a Diagnostico aviar monitorear Carrera 45#31-03 12 21 Bello 13 5 Carrera 30#65-15 Manizales Avenida Bolvar 28 Norte Sector Regivit Avenida Bolvar 28 Norte Sector Regivit Carrera 30 Morales Carrera 30 Morales, Tula Avenida Quebrada Seca # 31-39 Carrera 28# 9-160 Sogamoso Avenida el Dorado 42-42 Predios UNAL Bogota Transversal 23 # 1902 Frente Antigua Licorera Villavicencio Barrio Santa Helena Predios Universidad del Tolima Calle 21 # 3-87 Neiva Avenida el Dorado 42-42 Predios UNAL Bogota Avenida el Dorado 42-42 Predios UNAL Bogota

Quindo Risaralda Valle Cauca Santander Boyac Cundinamarca

14 15 16 17 18 19 20

10 6 42 4 23 7 45

4.Zona Centro

Francisco Londoo Armeniagerencia.risaralda@ica.gov.co Bogota Carlos Llanos Tula-Bogot carlos.llanos@ica.gov.co Andrs Osejo Tula-Bogot andres.osejo@ica.gov.co Joaqun Horacio Florez Bucaramangajoaquin.florez@ica.gov.co Bogota Julio Bez Bogota tunja.boyaca@ica.gov.co Andrs Serrato aviares.cmarca@ica.gov.co Hctor Palacios hector.palacios@ica.gov.co Diana Alexandra Garca diana.garcia@ica.gov.co Omar Silva Silva omar.silva@ica.gov.co Timolen Snchez timoleon.sanchez@ica.gov.co Bogota VillavicencioBogota Ibagu-Bogot Neiva-Bogota

Meta 5.Zona Oriente

21

Tolima Huila

22 23

7 7

Caquet

Bogot

27

Casanare

Ricardo Tabares ricardo.tabares@ica.gov.co

Bogot

28

Guaduas 6.7.8.Zonas especiales

Adriana Paola Garzn (APOYO A LIDER AVIAR) adriana.garzon@ica.gov.co Joaqun Horacio Florez joaquin.florez@ica.gov.co

Bogota

24

56

Mesa de los Santos

BucaramangaBogota

25

125

Norte del Tolima

Diana Alexandra Garca diana.garcia@ica.gov.co

Ibagu-Bogot

26

20

Avenida el Dorado # 4242 Predios UNAL Bogota Avenida Quebrada Seca Barrio Santa Helena predios Universidad del Tolima

Laboratorio Nacional de Diagnostico Veterinario ICA-LNDV. Avenida el Dorado No. 42-42 Bogot D.C. Conmutador 2697547- 2607587-3686827 Ext.2119-2123 Laboratorio de Medicina Aviar.Medicina.aviar@ica.gov.co.Telefono: 2444627 48

Anexo 11. Relacin y Direcciones de Contacto con el Nivel Central de Coordinacin

Nivel

Nombre Deyanira Barrero L. Miryam Luz Gallego A. Olga Lucia Daz Martnez Carolina Linares Paula Castaeda G. Nstor Mossos

Central

Cargo Subgerente de Proteccin Animal Directora Tcnica de Sanidad Animal Directora Tcnica de Epidemiologa Veterinaria Profesional Direccin tcnica Epidemiologa Lder Nacional sanidad aviar Coordinador Laboratorio de aviares LNDV

Telfono 3323700 Ext. 1201 3323700 Ext. 1251

e.-mail subgerencia.pecuaria@ica,gov.co

control.zoosanitario@ica,gov.co

3323700 Ext. 1273

epidemi.pecuaria@ica.gov.co

3323700 Ext. 1278

jorge.ortiz@ica.gov.co

3323700 Ext. 1256 3686827

aviares@ica.gov.co paula.castaneda@ica.gov.co nestor.mosos@ica.gov.co medicina.aviar@ica.gov.co

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