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Fundao de Ensino de Contagem FUNEC/CENTEC Ensino Mdio Integrado ao Ensino Tcnico Anlises Clnicas

MICROBIOLOGIA

UROCULTURA

Professor: Jefferson Rodrigues Data: 30/9, 2/10, 7/10 Nomes: Maria Luiza Pereira Nathlia Viviane Raphaela Valeska Oliveira Sara Esther Vanessa de Arajo Moreira Turma: 2 A 26 29 30 Data de entrega: 21/10 Nmero: 18 23

Contagem Outubro/2013

RESUMO O presente relatrio se relaciona com a aplicabilidade das tcnicas para a execuo da urocultura, que consiste em colocar-se uma pequena quantidade de urina em um meio que favorece o crescimento de eventuais bactrias presentes, como os meios de E.M.B., Mac Conkey e C.L.E.D., e assim facilitar a deteco e a identificao delas. Ao mesmo tempo, as bactrias encontradas so submetidas a diferentes antibiticos, indicando as quais deles so sensveis ou resistentes. Este relatrio focaliza assim, as prticas laboratoriais dentro da rea microbiolgica, onde ficam explcitos as tcnicas e os resultados encontrados depois do exame de urocultura.

INTRODUO

Os testes bioquimicos servem para identificar grupos ou espcies de bactrias ou leveduras atravs da verificao das transformaes qumicas.Para a realizao das provas bioqumicas necessrio utilizar meios de cultivo especiais contendo o substrato a ser analisado e fornecer ao microrganismo as condies nutritivas e ambientais necessrias ao seu desenvolvimento. Os testes realizados foram:Teste do citrato,Teste do Rugai,Teste do T.S.I., Teste do S.I.M, e o Teste da Rhamnose. O antibiograma importante pois indicador dos medicamentos a que a bactria sensvel e aos medicamentos a que o organismo est resistente. Foi realizado o teste com Ciprofloxacina, Aztreonam, Ampicilina e Sulfametoxazol trimetoprim.

Objetivo
O objetivo da experincia foi ampliar e aprimorar os conhecimentos na rea de Microbiologia onde colocado em pauta tcnicas para a cultura de urina ou urocultura, atravs de processos como provas bioqumicas e antibiograma, para diagnosticar uma possvel infeco do trato urinrio (ITU), alm de aprimorar tcnicas cotidianas nos laboratrios como a semeadura. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Procedimento Experimental Os procedimentos realizados nas aulas prticas foi primeiramente a preparao dos meios de cultura a serem utilizados entre eles Mack Conkey ,EMB e Citrato. Procedimentos de Preparao dos Meios de Cultura: Mack Conkey:Foi pesado na balana 25gramas do p de Agar Mac Conkey para ser dissolvido em 500ml de gua purificada.Em um balo volumtrico a soluo foi aquecida at ferver em seguida foi agitada levemente para dissolver completamente o Agar,para esterilizar autoclavando a 15lbs de presso a 121C por 15 minutos,foi tomado todo cuidado para evitar o superaquecimento.Apos estes

procedimentos o meio preparado foi esfriado em 45-50C para serem colocados nas placas de Petri estreis. Obs:O balo volumtrico ao decorrer de todo procedimento,foi tampado com algodo hidrofbico. EMB : Para preparao deste meio,o procedimento foi igual o da preparao do meio de Mack Conkey descrito acima,diferenciando somente pelo p de EMB a ser pesado,para ser dissolvido em gua

purificada,sendo assim 18gramas de EMB dissolvidos em 500ml de gua purificada. Citrato: Foi pesado 12.1 gramas do p de Citrato para ser dissolvido em 500ml de gua purificada.Apos o p ser pesado foi colocado no balo volumtrico,juntamente com 200ml de gua purificada.A soluo foi agitada e logo em seguida colocada na autoclave aberta por 5minutos para ferver,para em seguida ser acrescentado o restante da gua purificada,agitando a soluo novamente.O balo foi tampado com algodo hidrofbico para ocorreu a autoclavao a 15lbs de presso a 121C por 15 minutos,foi tomado todo cuidado para evitar o superaquecimento.Apos estes procedimentos o meio preparado foi esfriado em 45-50C para serem colocados nso tubos. Aps as preparaes dos meios de cultura cada grupo escolheu uma amostra biolgica(urina)para atravs desta realizar as provas bioqumicas. A amostra escolhida pelo nosso grupo foi a amostra 1,esta amostra foi repicada nos meios: Raminose,Citrato,SIM,TSI, e Rugai. Antibiograma: Foi feita a diluio da bactria a 0,05ml de soluo salina para poder em seguida pescar de 3 a 4 bactrias e homogeneizar na salina. Introduzir a swab na salina e plantar no meio de Mueller Hinton. Colocar os antibioticos: Ciprofilaxacina,Bactrim,aztreonam e ampicilina.

RESULTADOS E DISCUSSES Identificao das bactrias: Meio Mac Conkey: o meio ficou rosa nas bactrias 1 e 3, pode-se assim concluir que so fermentadoras de lactose, diferente da bactria 2, que no fermentadora de lactose. Amostra 1: E. coli Amostra 2: Proteus Amostra 3: Klebsiella pneumoniae Caractersticas das colnias: Mac Conkey: Foram observadas colnias grandes rosadas brilhantes, agrupadas e algumas isoladas. C.L.E.D.: Foram observadas colnias pequenas amareladas brilhantes, agrupadas e algumas isoladas.

E.M.B.: Foram observadas colnias mdias rosadas brilhantes, agrupadas e algumas isoladas. Foi feita a contagem das colnias e obteve-se o resultado de 2.480.00 colnias de bactrias.

Antibiograma: Meio de Mueller-Hinton Ampicilina: Critrios: Resistente: Halo igual ou inferior a 13 mm Intermedirio: Halo entre 14 16 mm Sensvel: Halo igual ou superior a 17 mm Resultado: Bactria resistente sem presena de halo ao redor do antibitico. Aztreonam: Critrios: Resistente: Halo igual ou inferior a 15 mm Intermedirio: Halo entre 16 21 mm Sensvel: Halo igual ou superior a 22 mm Resultado: Bactria sensvel com o halo medindo 38 mm Ciprofloxacin: Critrios: Resistente: Halo igual ou inferior a 15 mm Intermedirio: Halo entre 16 20 mm Sensvel: Halo igual ou superior a 21 mm Resultado: Bactria sensvel com o halo medindo 35 mm Sulfametoxazol + Trimetoprim: Critrios: Resistente: Halo igual ou inferior a 10 mm Intermedirio: Halo entre 11 15 mm Sensvel: Halo igual ou superior a 16 mm Resultado: Bactria resistente sem presena de halo ao redor do antibitico.

CONCLUSO Ao final deste relatrio pode-se observar o quo importante esse exame para o Laboratrio de Anlises Clnicas. Normalmente, os rins e a bexiga so ambientes estreis e por isso a presena de bactrias na cultura de urina fortemente indicativa de infeco urinria, mas no quer dizer que sempre haja uma infeco de urina, porque algumas bactrias podem colonizar a uretra ou a bexiga sem produzir sintomas ou serem oriundas de contaminaes exteriores. Porm um resultado pode considerado positivo quando so isolados 100.000 colnias de bactrias por 1 ml de urina e dessa forma constatar infeco do Trato Urinrio. Verifica-se tambm que o exame de urina pode indicar a presena ou ausncia de micro-organismos, mas no capaz de identific-los, sendo necessrios outros

procedimentos, e conclui-se que um exame no muito simples de se realizar, porm muito frequente em um laboratrio de Anlises Clnicas.

REFERNCIAS BILIOGRFICAS Pginas da internet: http://www.abc.med.br/p/exames-eprocedimentos/352669/urocultura+o+que+e+para+que+serve+como+este+exame+e+feito.htm , acessado em outubro de 2013.