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FITOPATOLOGIA

APLICAO DE FUNGICIDAS NO CONTROLE DE Pyricularia oryzae NA CULTURA DO ARROZ IRRIGADO


Lucas Navarini , Marcelo Gripa Madalosso , Leandro Jose Dallagnol , Marcelo Temp Moreira , (1) (*) (1) Guilherme de Almeida Rubin , Ricardo Silveiro Balardin . Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Cincias Rurais, Departamento de Defesa Fitossanitria, Santa Maria, CEP 97111-970, Cx. Postal 5025; navarini@gmail.com.
* Bolsista CNPq
(1) (1) (1) (1)

A cultura do arroz irrigado particularmente no estado do Rio Grande do Sul maior produtor do pas, com mais de 6 milhes de toneladas na safra 2003/04 (AGRIANUAL, 2005) e produtividade media de 6 ton/ha, mas com potencial produtivo de ate 10 ton/ha (IRGA, 2004). Dentre os fatores limitantes ao aumento de produtividade da cultura no estado destaca-se a incidncia de doenas, das quais o Brusone causado por Pyricularia oryzae uma das principais doenas de parte area na cultura, que em anos epidmicos pode causar perdas de ate 25%, afetando a formao de gros e diminuindo a produtividade industrial (BALARDIN, 2001). O fungo pode atacar toda a parte area da planta, entretanto os sintomas mais comumente encontrados so manchas foliares, alongadas com bordos irregulares e de colorao marrom com centro grisseo, onde podem se observar as frutificaes do patgeno. favorecida o por temperaturas entre 26 e 28 C e umidade relativa acima de 90% (GOMES et al., 2004). A alta variabilidade do patgeno dificulta a obteno de cultivares resistentes. Praticas culturais, como irrigao adequada, sementes livres do patgeno, evitar pocas tardias de semeadura e a eliminao de restos culturais, diminuem o inoculo inicial dificultando o estabelecimento da doena. A aplicao de fungicidas de parte area vem como uma alternativa eficaz, em anos epidmicos, de controle desta doena. Este trabalho procurou avaliar diferentes ingredientes ativos fungicidas no controle de Pyricularia oryzae na cultura do arroz irrigado. O experimento foi realizado em uma lavoura comercial de arroz irrigado no municpio de Dona Francisca com a cultivar Irga 417, utilizando uma densidade de semeadura de 350.000 plantas/ha, com 300 Kg/h de adubao de base e 350 kg/ha de uria em cobertura, semeadas dia 08 de novembro de 2004. Foram testados os ingredientes ativos: Tricyclazole (2,5 l/ha), Azoxystrobin (0,4 l/ha), Tebuconazole (0,7 l/ha), Trifloxystrobin + Propiconazole (0,6 l/ha), Carbedazin (1,0 l/ha), Azoxystrobyn + Cyproconazole (0,4 l/ha), Myclobutanil (0,5 l/ha), Tiofanato metlico (2,0 l/ha), flutriafol + tiofanato metilico (0,6 l/ha, 0,7 l/ha), Famoxadone + Flusilazole (0,6 l/ha; 0,7 l/ha), Tetraconazole (0,6 l/ha), aplicados no estdio fenologico de emisso de pancula. Foi utilizado o delineamento experimental de blocos ao acaso com quatro repeties e uma testemunha. A 2 unidade experimental mediu 3 m de largura por 5 m de comprimento, uma rea til de 8 m , onde foram realizadas as avaliaes. Foram avaliados a severidade de brusone, rendimento de gros, peso de 1000 gros e rendimento de engenho. Os dados de severidade foram obtidos pela (%) de rea foliar que apresentava sintomas da doena. O rendimento de gros cortando-se todas as plantas da rea til da parcela experimental trilhadas em batedor estacionrio, medida a umidade, ajustada posteriormente a 13% para o calculo do rendimento final, uma amostra de cada parcela foi utilizada para o peso de 1000 gros e o rendimento de engenho. Os dados obtidos foram submetidos a analise de comparao mltipla de medias de Tukey (p<0,05), com o software PlotIT verso 3.2 para ambiente Windows. Os melhores resultados foram obtidos pelos tratamentos Tricyclazole (2,5 l/ha) (99,3%), Trifloxystrobin + Propiconazole (0,5 l/ha) (99,0%), Azoxystrobyn + Cyproconazole (0,4 l/ha) (99,1), Famoxadone + Flusilazole (0,6 l/ha; 0,7 l/ha) (99,5% e 99,8). Os dados mostram que a variao na severidade da doena esta ligada a variao no rendimento (Figura 02), com uma correlao de 93%. Na Figura 01 observado que os tratamentos que obtiveram os maiores incrementos no rendimento de gros foram aqueles com as menores severidades, quando comparamos com a Tabela 01.

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Os melhores resultados foram alcanados com os tratamentos de misturas de ingredientes ativos quando comparados aos tratamentos isolados (Tabela 01; Figura 01). Tabela 01. Severidade Brusone considerando a 3 avaliao. Santa Maria RS (2005). Severidade de Brusone na 3 Avaliao Tratamentos (l/ha) 1 2 3 4 Tricyclazole 2,5 0,1 0,1 0,0 0,1 Azoxystrobin 0,4 0,9 0,6 1,1 0,7 Tebuconazole 0,6 0,7 0,5 0,8 0,6 Trifloxystrobin+Propiconazole 0,5 0,1 0,0 0,1 0,3 Carbedazin 1,0 2,8 2,6 2,4 2,7 Azoxystrobyn+Cyproconazole 0,4 0,0 0,3 0,0 0,3 Myclobutanil 0,5 1,4 1,1 1,6 1,2 Tiofanato metlico 2,0 1,3 1,0 1,4 1,5 Flutriafol+Tiofanato metilico 0,6 1,8 2,0 1,5 1,4 Flutriafol+Tiofanato metilico 0,7 1,0 0,9 1,2 1,4 Famoxadone+Flusilazole 0,6 0,1 0,0 0,1 0,0 Famoxadone+Flusilazole 0,7 0,0 0,0 0,1 0,0 Tetraconazole 0,6 2,4 2,2 1,6 2,2 14,1 Testemunha 14,0 14,6 13,8 CV (%) * Valores seguidos de mesma letra no diferem entre si Tukey 5%.
a a

Media 0,1 0,8 0,7 0,1 2,6 0,1 1,3 1,3 1,7 1,1 0,1 0,0 2,1 14,1

p<0,05%* a bc b a f a cd cd de bc a a e g

Efic. 99,3 94,1 95,4 99,0 81,5 99,1 90,6 90,8 88,2 92,1 99,5 99,8 85,2 0,0 10,7

4900,00 Rendim ento (kg/ha) 4700,00 4500,00 4300,00 4100,00

c bc bc abc abc abc abc abc ab abc abc abc a Tiofanato metlico 2 Flutriafol+Tiof.Met.0,6 Flutriafol+Tiof.Met.0,7 Tebuconazole 0,6 Triflox.+ Prop.0,5 Tricyclazole 2,5 Tetraconazole 0,6 Azoxystrobin 0,4 Carbedazin 1 Azox.+Cyproc.0,4 Myclobutanil 0,5 Famox.+ Flus.0,6 Famox.+ Flus.0,7 Testemunha abc

3900,00 3700,00

Figura 1. Rendimento de gros em Kg/ha para os diferentes tratamentos. Santa Maria RS (2005). (Colunas seguidas da mesma letra no diferem entre si a um nvel de 5% de probabilidade).

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105,0

100,0 Eficiencia (%)

95,0

90,0 y = -0,0299x 2 + 1,54x + 79,586 85,0 R2 = 0,9356

80,0 0,00

5,00

10,00

15,00

20,00

25,00

30,00

35,00

Dife renca de Rendimento (%)

Figura 2. Correlao entre a severidade de Brusone (% de rea atacada) e o rendimento de gros (Kg/ha).

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS AGRIANUAL. Anuario da Agricultura Brasileira. 10 Edio. FNP, So Paulo SP, 2005. 520p. GOMES A., S., MAGALHAES JUNIOR, A., M., et. al.. Arroz Irrigado no Sul do Brasil. Braslia DF: Embrapa informao tecnolgica, 2004. 899 p. BALARDIN, R., S., BORIN, R., C.. Doenas na Cultura do Arroz Irrigado. Santa Maria RS: O Autor, 2001. SOCIEDADE SUL-BRASILEIRA DE ARROZ IRRIGADO (SOSBAI). Arroz Irrigado: recomendaes tcnicas da pesquisa para o Sul do Brasil. Itaja, SC: SOSBAI, 2003.126. MENEZES, V., G., MACEDO, V., R., M., ANGHINONI, I.. Projeto 10: Estratgias de Manejo para o Aumento de Produtividade, Competitividade e Sustentabilidade da Lavoura de Arroz do RS. Cachoeirinha RS. IRGA, Diviso de Pesquisa - 2004. 32p.

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AVALIAO DO POTENCIAL DE ISOLADOS BACTERIANOS NO BIOCONTROLE DA MANCHA-PARDA E DA ESCALDADURA EM ARROZ IRRIGADO


Juliane Ludwig , Andra B. Moura , Candida R.J. de Farias , Daniel F. da Rosa , Vanessa N. 1 Soares . 1-Universidade Federal de Pelotas FAEM/DFs - Campus Universitrio s/n, C.P. 354, CEP:96010-900. juludwig@yahoo.com.br
1 1 1 1

O arroz um dos alimentos mais consumidos. plantado em praticamente todo territrio nacional, sendo o Rio Grande do Sul um dos principais produtores. Essa cultura, no entanto, geralmente atacada por inmeras doenas, que podem causar perdas significativas na produo. A doena conhecida como mancha-parda, causada pelo fungo Bipolaris oryzae (Breda de Hann) Shem, tem sido considerada a segunda doena mais importante para a cultura na maioria dos pases que cultivam o arroz (Ou, 1985), causando os maiores danos s lavouras gachas, quando da germinao das sementes, causando a morte das plntulas (Bedendo, 1997). Segundo Ou (1985), essa doena causa o enfraquecimento de plantas adultas, podendo afetar a formao dos gros. A escaldadura, causada por Gerlachia oryzae (Hashioka & Yokogi) W. Gams vem ocorrendo em nveis considerados altos em todas as regies produtoras de arroz no Brasil. Leses causadas por este patgeno provocam a destruio da rea fotossintetizante, esterilidade de flores, podrido das razes e coleptilo (Webster e Grunnel, 1992). A doena, alm de afetar folhas, tambm ataca colmo e panculas, manifestando-se nas fases de perfilhamento e emborrachamento (Prabhu e Filippi, 1997). A adoo de cultivares/variedades resistentes uma alternativa preconizada na maioria dos trabalhos, e, em muitos casos, torna-se a nica alternativa vivel para produtores de arroz no controle destas doenas. No entanto, a alta variabilidade dos isolados, verificada por Prabhu e Bedendo (1982) e por Artigiani Filho e Bedendo (1995), faz com que estas percam rapidamente a caracterstica desejvel. Assim sendo, torna-se essencial a busca de novas prticas que possibilitem o controle destas doenas, sendo que o controle biolgico aparece como uma alternativa vivel. Deste modo, o objetivo deste trabalho foi verificar o potencial de bactrias prselecionadas por Ludwig et al. (2004), sobre o biocontrole de B. oryzae e G. oryzae, em casa-devegetao. Os isolados bacterianos DFs185 (Pseudomonas sp.), DFs223 (P. amygdali), DFs306 (ainda no identificado), DFs416 (Bacillus cereus) e DFs418 (Bacillus subtilis), pr-selecionados para o biocontrole de B. oryzae (DFs185, DFs223 e DFs306) e de G. oryzae (todos) (Ludwig et al., 2004), aps 24 horas de crescimento, foram usados para microbiolizar as sementes de arroz da cultivar El Passo. A suspenso de cada um dos isolados foi preparada com soluo salina (NaCl 0,85%), com a concentrao ajustada para OD540=0,5. A microbiolizao ocorreu sob agitao por 30 minutos temperatura de 10C. O ensaio foi conduzido em casa-de-vegetao no climatizada, em vasos com capacidade para 5Kg. O delineamento do experimento foi inteiramente casualizado. Para a inoculao, utilizou-se a tcnica da asperso da suspenso de esporos na 5 4 concentrao de 10 condios/mL para B. oryzae e, 10 condios/mL para G. oryzae, aplicados no estdio de emborrachamento. Para ambos patgenos, as plantas foram mantidas em cmara mida 24 horas antes e 48horas aps a inoculao. A avaliao da severidade ocorreu aos 7, 14 e 21 dias aps a inoculao dos fungos, segundo escala desenvolvida pela IRRI (1985). Os resultados foram submetidos ao clculo da rea abaixo da curva de progresso da doena (AACPD) atravs do programa Gwbasic. No ponto de colheita, foram contados o nmero de panculas por planta (NPP), posteriormente os gros foram retirados e determinados os pesos frescos de gros cheios (PGC), de gros chochos (PGCH) e ainda foi dada uma nota que associa quantidade e intensidade de gros manchados (Farias, no publicado),

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No ensaio conduzido para a mancha-parda (Tabela 1), observou-se que o menor progresso da doena ocorreu nas plantas microbiolizadas com o isolado DFs306 e nas tratadas com o fungicida, reduzindo a severidade da mancha parda em at 74 e 68%, respectivamente. O isolado DFs185 mostrou a maior porcentagem de gros manchados, inclusive superior testemunha. Acredita-se que este fato tenha ocorrido devido desuniformidade de desenvolvimento entre os diferentes tratamentos. As plantas oriundas de sementes microbiolizadas com DFs185, sendo as nicas que se encontravam realmente no estdio de florescimento no momento da inoculao, que considerado o mais propcio infeco nos gros (Prabhu e Filippi, 1997), estariam mais predispostas que as demais, infeco pelo patgeno. Tabela 1. rea abaixo da curva de progresso da doena (AACPD), gros manchados (Nota), peso de gros cheios (PGC) (g), peso de gros chochos (PGCH) (g) e nmero de panculas (NP) de plantas inoculadas com B. oryzae no estdio de emborrachamento, oriundas de sementes microbiolizadas com diferentes bactrias, e conduzidas em casa-de-vegetao, em avaliao realizada 40 dias aps a inoculao. Tratamento DFs185 DFs223 DFs306 Test AACPD 40,7a 9,6a 36,7a
1

Nota* 2,04a 1,85a 1,85a 1,85a


1

PGC 19,15a 17,84a 11,24b


1

PGCH 1,52ab 0,75b 1,16ab 2,21a


1

NP 6,83a
1

13,2a

19,50a

5,50a 5,83a 5,50a

Test+Fung 11,8a 1,58a 18,38a 0,97ab 4,75a 1 Mdias seguidas de mesma letra, na coluna, no diferem entre si pelo teste de Tukey a 5%. Test= Testemunha tratada com salina; Test+Fung= Tratamento com salina mais o fungicida Vitavax+Thiran *Valores transformados para x + 0,5 Com relao ao peso de gros cheios, todos os isolados mostram-se significativamente superiores testemunha, sendo que os isolados DFs223, DFs185 e DFs306 proporcionaram incrementos de 74, 70 e 59%, respectivamente. O isolado DFs223 foi o nico que mostrou peso de gros chochos estatisticamente inferior testemunha, embora os demais tratamentos no tenham diferido entre si (Tabela 1). J no ensaio conduzido para a escaldadura (Tabela 2), verificou-se que todos os tratamentos reduziram o progresso da doena, destacando-se os isolados DFs416 e DFs185, que diferiram estatisticamente da testemunha e diminuram a escaldadura em at 64 e 60%, respectivamente, comportando-se de forma similar ao tratamento com fungicida. Embora todos os tratamentos tenham reduzido a porcentagem de gros manchados, nenhum tratamento diferiu significativamente da testemunha (Tabela 2). Foi observada, ainda, a reduo na produo das plantas oriundas de sementes microbiolizadas pelos isolados DFs416 e DFs418, possivelmente explicada pelo baixo nmero de panculas. Por outro lado, em trabalhos anteriores utilizando estes isolados, onde se avaliou o perfilhamento no se pde observar quaisquer diferenas entre a testemunha e os demais tratamentos quanto a este aspecto, entretanto as bactrias em questo permitiram o aumento do peso de gros secos (Santos et al., 2001). Os isolados utilizados apresentam potencial de uso, principalmente aqueles que se destacaram como controladores dos dois patgenos (DFs185, DFs223 e DFs306). H, portanto, razes para crer que estes isolados podero proporcionar efeitos similares aos obtidos em casade-vegetao quando forem testados a campo, gerando aumento de produo, como aqueles obtidos por Vidhyasekaran et al. (1997), utilizando P. fluorescens para controle de B. oryzae, com resultados similares ao do fungicida utilizado, bem como os obtidos por Johansson et al. (2003),

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microbiolizando sementes de trigo com Pantoea aglomerans para controle de Microdochium nivale resultando em mesmos nveis aos proporcionados pelo fungicida acetato de guazatina, Tabela 2. rea abaixo da curva de progresso da doena (AACPD), gros manchados (Nota), peso de gros cheios (PGC) (g), peso de gros chochos (PGCH) (g) e nmero de panculas (NP) de plantas inoculadas com G. oryzae no estdio de emborrachamento, oriundas de sementes microbiolizadas com diferentes bactrias, e conduzidas em casa-de-vegetao, em avaliao realizada 40 dias aps a inoculao. Tratamento DFs185 DFs223 DFs306 DFs416 DFs418 Test AACPD 25,1b 29,6ab 28,6ab 23,2b 46,8ab 63,0a
1

Nota 1,40a 1,40a 1,56a 1,22a 1,58a 2,12a


1

PGC 17,18a 16,67a 21,65a 5,22b 3,80b 7,28b


1

PGCH 1,86ab 2,41ab 1,08b 0,60b 0,58b 3,63a


1

NP 6,75a 6,50a 6,25a 3,00b 2,50b 2,12a


1

Test+Fung 32,7ab 1,40a 20,61a 1,58ab 1,40a 1 Mdias seguidas de mesma letra, na coluna, no diferem entre si pelo teste de Tukey a 5%. Test= Testemunha tratada com salina; Test+Fung= Tratamento com salina mais o fungicida Vitavax+Thiran *Valores transformados para x + 0,5 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ARTIGIANI FILHO, V.H.; BEDENDO, I.P. Patogenicidade de Helminthosporium oryzae a algumas espcies de gramneas. Scientia Agrcola, v.52, n.1, p.132-134, 1995. BEDENDO, I.P. Doenas do arroz (Oryza sativa L.). In KIMATHI, H.; AMORIM, L.; BERGAMIN FILHO, A.; CAMARGO, L.E.A.; REZENDE, J.A.M. Manual de fitopatologia: doenas de plantas cultivadas. So Paulo: Agronmica CERES, 1997, 3ed., v.2, p.85-89. INTERNACIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Stndart Evaluacin System for Rice. 4ed., Manilia, 1996. 52p. JOHANSSON, P.M.; JOHNSSON, L.; GERHARDSON, B. Supression of wheat-seedling disease caused by Fusarium culmorum and Microdochium nivale using seed treatment, Plant Pathology, v.52, p.219-227, 2003. LUDWIG, J.; MOURA, A.B.; SANTOS. A.S.; LIMA, N.; FARIAS, D.R. Biocontrole de manchaparda e escaldadura do arroz, em casa-de-vegetao, pela microbiolizao de sementes. SIMPSIO BRASILEIRO DE PATOLOGIA DE SEMENTES, 8, 2004, Joo Pessoa, Anais...Joo Pessoa, 2004. p.184. OU, S.H. Rice Disease. 2. ed. KEW: CMI, 1985. 380p. PRABHU, A.S.; FILIPPI, M.C. Arroz (Oryza sativa L.) controle de doenas. In: VALE, F.X.R.; ZAMBOLIM, L. Controle de doenas de plantas. Viosa: Ministrio da Agricultura e Abastecimento, 1997, v.1. 554p. PRABHU, A.S.; BEDENDO, I.P. Reao de diversos gneros e espcies de gramneas infeco por Rhynchosporium oryzae. Pesquisa Agropecuria Brasileira, v.17, n.5, p.703-708, 1982. SANTOS, A.S.; MOURA, A.B.; SILVEIRA, A.O. Promoo de crescimento de plantas de arroz induzida por bactrias pr-selecionadas para o biocontrole da mancha parda, Fitopatologia Brasileira, v.26 (Suplemento), p.300. 2001 (Resumo). VIDHYASEKARAN, P.; RABINDRAN, R.; MUTHAMILAN, M.; NAYAR, K.; RAJAPPAN, K.; SUBRAMANIANA, N.; VASUMATHI, K. Development of a powder formulation of Pseudomonas fluorescens for control of rice blast. Plant Pathology, v.46, p.291-297, 1997. WEBSTER, R.K. GRUNNEL, P.S. Compendium of rice disease. APS Press. ST Paul, Minessota, 62p. 1992.

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COMPARAO DE FUNGICIDAS PARA O CONTROLE DE DOENAS E INCREMENTO DE RENDIMENTO DO CULTIVAR IRGA 417 EM DONA FRANCISCA, RIO GRANDE DO SUL
Joo L. Nunes Maciel , Ezequiel Saraiva Pereira , Jos Mrio Tagliapietra , Catiane M. dos (2) (2) 1 Santos , Dieter Kempf . Embrapa Trigo, Embrapa Trigo, C.P. 451, CEP 99001-970, Passo 2 Fundo, RS, e-mail: jmaciel@cnpt.embrapa.br; Estao Experimental do Arroz, Instituto Rio3 Grandense do Arroz, (EEA-IRGA), C.P. 29, CEP 94930-030, Cachoeirinha, RS; Cooperativa Agrcola Mista Nova Palma Ltda. (CAMNPAL), CEP 97280-000, Dona Francisca, RS.
(*1) (*2) (3)

Um importante fator limitante para a cultura do arroz irrigado no Rio Grande do Sul a ocorrncia de doenas fngicas nos colmos, folhas, panculas e gros. Nesse aspecto, de todas as doenas que afetam a cultura, a brusone continua sendo a mais prejudicial devido, principalmente, ao seu alto potencial destrutivo. No entanto, perdas considerveis no rendimento e qualidade dos gros tambm tm sido atribudas a doenas como a mancha parda, as rizoctonioses, a escaldadura, a mancha de gros, a cercosporiose, entre outras (Maciel & Tronchoni, 2003). As principais medidas recomendadas para o controle dessas doenas esto relacionadas ao uso de cultivares resistentes e ao manejo da cultura, incluindo-se nesse item a utilizao de fungicidas (Ribeiro, 1989). No entanto, para que o emprego de fungicidas se torne uma alternativa eficiente e vivel de controle muito importante conhecer a eficincia dos produtos disponveis no mercado. Atualmente, existe pouca disponibilidade informaes sobre o efeito da aplicao de fungicidas, e, em especial, a ao de novas molculas, sobre o rendimento das cultivares lanadas nos ltimos 10 anos. Assim, este trabalho foi realizado com os objetivos de verificar a eficincia dos principais fungicidas comercializados, registrados ou em fase de pr-lanamento para a cultura do arroz irrigado sobre o rendimento de gros, e o controle de doenas desta cultura. O experimento foi conduzido em uma lavoura localizada no municpio de Dona Francisca, Rio Grande do Sul. O sistema de preparo do solo adotado foi o convencional, sendo que a semeadura foi realizada no dia 09 de novembro de 2003 com o cultivar IRGA 417, na densidade de 140 Kg/ha. O solo apresentava as seguintes caractersticas qumicas antes da semeadura: pH em gua, 5,1; ndice SMP, 6,5; matria orgnica, 1,1%; fsforo, 16,3 mg/L e potssio, 32 mg/L. A adubao de semeadura utilizada foi nas doses de 22, 44 e 75 Kg/ha de N, P2O5 e K2O, respectivamente. Utilizou-se 100 kg/ha de N em cobertura, sendo 2/3 aplicado no seco (3-4 folhas) e 1/3 antes da diferenciao da pancula (9 folhas). O delineamento experimental foi de blocos ao acaso, com 4 repeties e 9 tratamentos (Tabela 1). As dimenses de cada parcela 2 foram de 4,0 x 4,0 m (16 m ). Os herbicidas usados foram o Glifosato, antes da semeadura, na dose 2,5 L/ha, e o Clomazone e o Ethoxysulfuron, em ps-emergncia inicial, nas doses de 1 L/ha e 120 g/ha, respectivamente. Realizaram-se duas aplicaes de fungicidas, a primeira, no estdio inicial de emisso das panculas, com 10 a 15% das panculas emitidas, em 26 de janeiro de 2004, e a segunda, 15 dias aps. A aplicao dos fungicidas foi realizada com pulverizador costal, com presso de gs carbnico e com uma vazo de calda de 150 L/ha. O efeito dos tratamentos 2 sobre o rendimento de gros foi estimado com base na colheita de 4 m por parcela. O efeito desses mesmos tratamentos sobre a severidade das doenas foi determinado de acordo com a intensidade dos sintomas de escaldadura, rizoctoniose, mancha parda e mancha de gros. Para verificar a reao das plantas a cada uma das doenas, 10 plantas de cada parcela foram escolhidas ao acaso no estdio R7 da escala de Counce et al. (2000) e submetidas avaliao. Adotou-se escalas diagramticas preconizadas pelo sistema internacional de avaliao de doenas do arroz especficas para cada doena avaliada (IRRI, 1996). A anlise de varincia dos dados de rendimento foi realizada sem transformao, enquanto que os dados das avaliaes das quatro doenas avaliadas foram transformados em x + 10 . As mdias foram comparadas pelo teste de Tukey, ao nvel de 0,05 de probabilidade.

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No se verificou efeito significativo do tratamento qumico sobre o rendimento de gros (Tabela 2). No entanto, a mdia de rendimento, das parcelas submetidas aplicao com Tebuconazole, foi de 9763 Kg/ha, enquanto que a mdia das parcelas em que no houve a aplicao de fungicidas (testemunha) foi de 8961 Kg/ha, ou seja, uma diferena de 802 Kg/ha. O fungicida Azoxystrobin proporcionou uma diferena, em relao testemunha de 613 Kg/ha. A importncia desse aspecto est relacionada ao desempenho que este fungicida tem demonstrado em outros ensaios comparativos, caracterizando a estabilidade de sua eficcia. Os tratamentos promoveram diferenas na severidade das quatro doenas avaliadas. Com exceo da rizoctoniose, observou-se uma tendncia de que as plantas mais afetadas pelas doenas fossem aquelas localizadas nas parcelas testemunhas. Nesse aspecto, importante ressaltar, que, nos casos da mancha parda, mancha de gros e da escaldadura verificou-se diferena entre a severidade dessas doenas no tratamento testemunha e nos dois tratamentos em que se registraram os maiores valores absolutos de rendimento de gros (Tebuconazole e Azoxystrobin). Tal situao comprova a proposio de que determinados fungicidas tambm afetam significativamente a sanidade das folhas, panculas e gros.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS COUNCE, P.A., KEISLING, T.C., MITCHELL, A.J. A uniform, objective, and adaptive system for expressing rice development. Crop Science, v.40, p.436-443. 2000. INTERNATIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Standard evaluation system for rice. Manilla: INGER/genetic Resources Center, 1996. 52p. MACIEL, J.L.N., TRONCHONI, J.G. Avaliao de fungicidas para o controle de doenas da parte area do cultivar IRGA 417. In: III CONGRESSO BRASILEIRO DE ARROZ IRRIGADO e REUNIO DA CULTURA DO ARROZ IRRIGADO, 25, 2003, Cambori, SC. Anais ..., EPAGRI, 2003. p.332-334. RIBEIRO, A. S. Controle integrado das doenas do arroz irrigado. Pelotas. EMBRAPA-CPATB. 1989. 29p. Circular Tcnica, 3.

Tabela 1. Tratamentos utilizados para avaliao de fungicidas no controle de doenas da cultura do arroz irrigado no municpio de Dona Francisca, RS, safra 2003-04. Tratamentos Nome tcnico 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Tricyclazole Tricyclazole +Edinfenfs Edinfenfs Carbendazin Tebuconazole Azoxystrobin Kasugamicina Clorotalonil Testemunha Dose (i.a./ha) 225 g 225 g + 0,75 L 0,75 L 0,5 L 0,15 L 100 g 30 g 1,50 L --

Nome comercial Bim 750 BR Bim 750 BR + Hinosan 500 CE Hinosan 500 CE Derosal 500 SC Folicur 200 CE Priori Hokko Kasumin Dacostar 500 --

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Tabela 2. Rendimento de gros e severidade de doenas do cultivar de arroz IRGA 417 submetido ao tratamento com fungicidas no municpio de Dona Francisca, RS, safra 2003-04. Tratamento Dose PC/ha Rendimento Kg/ha Severidade Mancha parda 0,07 0,70 0,79 0,32 0,20 0,29 1,16 g* def cde efg fg efg cd Mancha de gros 0,22 b 0,25 b 0,27 b 0,20 b 0,29 b 0,32 b 0,27 b 0,70 a 0,44 ab 0,30 2,22 Escaldadura 0,74 cd 1,29 bc 2,36 a 1,55 b 1,20 bcd 1,37 bc 2,55 a 2,73 a 2,76 a 1,76 13,25 Rizoctoniose 0,48 1,47 a 0,95 abcd 0,90 abcd 0,53 bcd 0,52 cd 1,29 ab 0,65 bcd 0,82 1,69 d

Tebuconazole Azoxystrobin Kasugamicina Tricyclazole +Edinfenfs Carbendazin Edinfenfs Clorotalonil Tricyclazole Testemunha Mdia Coeficiente de variao (%)

0, 75 L 0,4 L 1,5 L 300 g + 1,5 L 1L 1,5 L 3L 300 g -

9763 9574 9331 9220 9086 9067 9010 8951 8961 9141 9,20

0,75 abcd

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1,72 ab 1,94 a 0,76 1,20

Probabilidade > F 0,42 <0,0001 <0,0001 <0,0001 <0,0001 * Mdias seguidas pela mesma letra no diferem estatisticamente pelo teste de Tukey ao nvel de 0,05 de probabilidade.

CONTROLE DE DOENAS EM LAVOURAS COMERCIAIS DE ARROZ IRRIGADO COM O FUNGICIDA AZOXYSTROBIN

Tatiana Brum Fontoura , Valmir Gaedke Menezes . Syngenta Proteo de Cultivos Ltda, Rua Gal. Lima e Silva, 234/509, CEP 90050-100, Porto Alegre, RS. 2 E-mail: tatyfontoura@yahoo.com.br. Estao Experimental do Arroz, Instituto Rio Grandense do Arroz (EEA IRGA), CEP 94930-030, Cachoeirinha, RS.

(1)

(2)

A importncia das doenas fngicas vem aumentando na cultura do arroz irrigado no Rio Grande do Sul, na medida em que elas podem causar reduo no rendimento e qualidade de gros. Balardin (2003) estima que as doenas possam reduzir em mdia, 10 a 15% do potencial de produo. A brusone considerada a doena mais importante do arroz. Sua distribuio bastante ampla, as perdas so variveis em funo da variedade cultivada, dos fatores climticos e do manejo que dado lavoura. Afeta diretamente a formao dos gros, diminuindo a produtividade e a qualidade de gros. Na maioria dos anos, os ataques dessa doena no Rio grande do Sul so endmicos. Em segundo lugar em importncia econmica esta a mancha parda (Prabhu; Filippi, 1997). Ela pode ocasionar sintoma nos gros e esterilidade de espiguetas, em ataques associados com a ocorrncia de temperaturas baixas durante a florao (Gomes et al., 2004). A escaldadura vem aumentando sua severidade medida que foi introduzida cultivares semi-ans. As lavouras atacadas apresentam amarelecimento geral e com as pontas das folhas secas. A mancha dos gros geralmente ocorre em lavouras semeadas em pocas tardias, podendo surgir em menor freqncia nas demais pocas. Os gros manchados causam reduo no rendimento de gros inteiros, depreciando a sua aparncia e qualidade (Gomes et al., 2004). O trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do fungicida Azoxystrobin (Priori) no rendimento e a qualidade de gros, na severidade dos sintomas de brusone, escaldadura, mancha parda e mancha do gro na cultura do arroz irrigado. O trabalho foi instalado em lavouras comerciais em seis regies orizcolas do estado do Rio Grande do Sul e diferentes cultivares de arroz. As seis regies, locais, cultivares e pocas de semeadura foram as seguintes: Zona Sul Arroio Grande IRGA 422CL 30/10/04, Fronteira Oeste Uruguaiana Qualimax 1 - 19/10/04 e So Borja IRGA 422CL 27/10/04, Plancie Costeira Externa Capivari do Sul BR IRGA 417 20/11/04, Campanha Dom Pedrito El Passo L 144 27/09/04, Plancie Costeira Interna Camaqu IRGA 422CL 22/10/04 e Eldorado do Sul IRGA 422CL -04/10/04, Depresso Central Cachoeira do Sul IRGA 422CL 27/10/04. -1 Realizou-se uma aplicao da dose recomendada de Azoxystrobin (400 ml p.c. ha ), aplicado no incio da emisso da pancula, com 3 a 5% das panculas emitidas. A aplicao foi -1 realizada via area, utilizando uma vazo de 30L ha e utilizao de adjuvante (leo mineral -1 especfico) Nimbus a 0,5 L ha e uma rea testemunha no aplicada. A dimenso da rea tratada foi de 20 ha. As reas experimentais seguiram o manejo proposto para alta produtividade Projeto 10 do IRGA (Menezes et al., 2004). Foram avaliados a severidade das doenas, a esterilidade de espiguetas, o rendimento e a qualidade de gros. O rendimento de gros foi estimado em algumas reas colhidas com mquina e em outras foram coletados amostras de 2 -1 6m , os resultados foram expressos em kg ha . A esterilidade das espiguetas foi obtida em amostras de 10 panculas coletadas em cada tratamento. Para avaliao das doenas, adotaramse escalas diagramticas preconizadas pelo sistema internacional de avaliao de doenas do arroz especficas para cada doena (IRRI, 1996). Os dados evidenciam que houve severidade de doenas em apenas trs lavouras (Tabela 1). A ocorrncia de brusone com severidade foi observada nas reas de Uruguaiana e Capivari do Sul. Na primeira lavoura, a cultivar semeada foi Qualimax 1 com uma densidade de semeadura alta e a irrigao foi por asperso. Na lavoura de Capivari do Sul, a cultivar utilizada foi BR Irga 417, semeada fora da poca recomendada para a obteno de altas produtividades.

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Nessa mesma lavoura de Capivari do Sul, houve ocorrncia severa de mancha parda e mancha dos gros. A terceira rea com problema de doena, foi lavoura de Dom Pedrito semeada com a cultivar El Passo L 144 , onde houve ataque severo de escaldadura. O rendimento de gros foi superior nas reas tratadas com fungicida e a esterilidade de espiguetas menor nas lavouras onde a presena de doenas foi avaliada com severidade (Tabela 2). A exceo foi lavoura de Eldorado do Sul, onde houve diferenas entre os tratamentos e no se constatou nvel de severidade para as doenas avaliadas. A variao do rendimento de gros -1 nessas reas foi de 29, 44, e 60 sacos ha , respectivamente, para as lavouras de Uruguaiana, Capivari do Sul e Dom Pedrito. O rendimento de gros inteiros foi similar nas reas tratadas e no tratadas com fungicidas em todas as lavouras avaliadas. O controle de brusone, mancha parda, mancha de gros e escaldadura com o fungicida Azoxystrobin nos em trs locais em que houve severidade de doenas foi satisfatrio (Tabela 1). Vale ressaltar tambm, que a sanidade da maioria das reas tratadas foi superior quelas em que no houve asperso do fungicida, embora no tenha contribudo para melhor a produtividade porque o grau de severidade das doenas era baixo. Considerando os resultados obtidos no trabalho conclui-se que: a aplicao do fungicida Azoxystrobin (Priori) contribui para reduzir a severidade das doenas avaliadas e para manter o potencial de rendimento de gros das lavouras com doenas em nvel de severidade.

Tabela 1. Severidade de brusone, escaldadura, mancha parda e mancha dos gros em oito lavouras comerciais no RS, em funo do tratamento com Azoxystrobin, Porto Alegre RS, safra 2004-05.
1

Severidade Brusone Escaldadura M. Parda M. Gro Arroio Grande Tratada 0 0 0 0 (IRGA 422CL) No tratada 00 1,06 0,63 0,57 Uruguaiana Tratada 0,73, 0 0,5 0 (Qualimax 1) No tratada 4,38 0 3,5 0 So Borja Tratada 0 0 0 0 (IRGA 422CL) No ratada 0 0 0,5 0,19 Capivari do Sul Tratada 3,35 1,12 5,12 6,13 (BR IRGA 417) No ratada 4,52 1,13 7,75 9,37 Dom Pedrito Tratada 0 0 0 0 (El Passo L 144) No ratada 0 5,87 0 0,88 Camaqu Tratada 0 1,13 0,5 0 (IRGA 422CL) No ratada 0 1,81 2,5 0,44 Eldorado do Sul Tratada 0 0,5 0,81 0 (IRGA 422CL) No tratada 0 0 1,13 0,5 Cachoeira do Sul Tratada 0 0 0,19 0,06 (IRGA 422CL) No tratada 0 0 2,82 0,63 1 Os valores de severidade referem-se a notas de escalas diagramticas que variam de 0 a 9. Locais Tratamento

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Tabela 2. Rendimento de gros de arroz irrigado em funo do tratamento com fungicida Azoxystrobin, em oito lavouras comerciais no RS, Porto Alegre RS, safra 2004-05. Locais Tratamento Rendimento -1 (kg ha ) 6117 6107 6734 5280 8909 8632 6133 3766 11096 8075 7950 7583 7225 5024 9530 9012
1

Arroio Grande Tratada (IRGA 422CL) No tratada Uruguaiana Tratada (Qualimax 1) No tratada So Borja Tratada (IRGA 422CL) No tratada Capivari do Sul Tratada (BR IRGA 417) No tratada Dom Pedrito Tratada (El Passo L 144 ) No tratada Camaqu Tratada (IRGA 422CL) No tratada Eldorado do Sul Tratada (IRGA 422 CL) No tratada Cachoeira do Sul Tratada (IRGA 422CL) No tratada 1 Umidade de gros corrida para 13%.

Esterilidade (%) 24,09 32,78 16,87 34,19 12,52 17,85 17,91 19,06 10,84 10,90 13,34 18,36 7,89 11,11 18,80 24,10

Diferena (sacos) 0,2 29 6 47 60 2,5 44 10

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS BALARDIN, R.S. Doenas do arroz. Santa Maria, Ed. Do Autor, 2003, 57p. GOMES, A. S.; JNIOR, A. M. M. Arroz irrigado no Sul do Brasil. Braslia, DF: Embrapa Informao Tecnolgica, 2004, p. 899. INTERNATIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Standard evaluation system for rice. Manilla: INGER/genetic Resources Center, 1996. 52p. MENEZES, V.G.; MACEDO, V.R.M.; ANGUINON I. Projeto 10:estratgias de manejo para o aumento de produtividade, competitividade e sustentabilidade da lavoura de arroz irrigada no RS. Cachoeirinha: IRGA. Diviso de Pesquisa, 2004, 32p. PRABHU, A.S.; FILLIPI, M.C. Arroz (Oryza sativa L.) Controle de doenas. In: Controle de Denas de Plantas: Grandes culturas. Ed.: VALE, F.X.R. do, ZAMBOLIN, L. Viosa: UFV, Departamento de Fitopatologia; Braslia: Ministrio da Agricultura e do Abastecimento, 1997. p. 51-79. Agradecimentos: Aos produtores e aos Tcnicos do IRGA.

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CONTROLE QUMICO DE DOENAS FOLIARES NA CULTURA DO ARROZ IRRIGADO


Guilherme de Almeida Rubin, Marcelo Temp Moreira, Lucas Navarini, Leandro Jos Dallagnoll, Marcelo Gripa Madalosso, Ricardo Silveiro Balardin. Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Cincias Rurais, Departamento de Defesa Fitossanitria, Santa Maria, CEP 97111-970, Cx.Postal 5025, guilherme.rubin@gmail.com

A orizicultura gacha responde por 50% da produo nacional com um rendimento mdio aproximado de 6 t/ha (safra 2003/2004). A manuteno de alta produtividade possibilita maior competitividade no mercado, sendo um dos maiores desafios na cultura de arroz irrigado. Entretanto, so diversos os fatores que podem reduzir significativamente o rendimento da cultura, destacando-se as doenas cujos trabalhos experimentais tm mostrado reduo no rendimento varivel entre 20% e 50% (BALARDIN 2001; CELMER, 2004). O uso de cultivares resistentes, sementes livres do patgeno, tratamento de sementes, e aplicao de fungicidas da parte area (BALARDIN 1999) so estratgias eficientes de controle. Contudo, a integrao destas medidas possibilita ganhos efetivamente econmicos. Este trabalho objetivou avaliar os danos causados por mancha marrom (Drechslera oryzae), escaldadura (Rhynchosporium oryzae) e mancha estreita (Cercospora oryzae), bem como a resposta a diferentes fungicidas quando aplicados na parte area no estdio B55 (estdio de emisso de pancula). O experimento foi conduzido em lavoura comercial no municpio de So Vicente do Sul, cultivar Epagri 108, com uma populao de 300.000 plantas/ha, utilizando o sistema de semeadura convencional. O delineamento experimental foi blocos ao acaso com quatro repeties e 14 tratamentos: Triciclazole (2,50 L/ha), Azoxistrobin (0,40 L/ha), Tebuconazole (0,60 L/ha), Trifloxystrobin + Propiconazole (0,50 L/ha), Carbendazim (1,00 L/ha), Azoxistrobin + Cyproconazole (0,40 L/ha), Myclobutanyl (0,50 L/ha), Cercobin (2,00 L/ha) , Flutriafol + tiofanato metlico (0,60 e 0,70 L/ha), Famoxadone + fluzilasole (0,60 e 0,70 L/ha), Tetraconazole (0,60 L/ha) e uma parcela testemunha. A unidade experimental mediu 3m de largura por 5m de comprimento, descartando-se a bordadura de 0,5m de cada lateral e de cada cabeceira da parcela, perfazendo uma rea til de 8 m. As avaliaes de severidade de doena foram realizadas aos 7, 14 e 21 dias aps a aplicao, considerando as doenas mais incidentes no tratamento testemunha. O rendimento de gros foi obtido a partir das plantas da rea til da parcela experimental, sendo trilhadas com batedor estacionrio marca Triton. Foi medindo a umidade do gro para permitir o clculo do rendimento final aps corrigida a 13%, para contagem de mil gros e rendimento de engenho. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de Tukey para comparao mltipla de mdias (p 0.05) utilizando o software Plotit (verso 3.2, Windows). Os resultados obtidos mostraram influncia do controle qumico no rendimento de campo, e rendimento industrial. O dano mximo observado foi de 47,6%, em quanto a menor resposta foi de 1,2%. Foi observado melhor desempenho das estrobilurinas (isoladas ou em mistura) em relao aos demais tratamentos, sendo que as parcelas tratadas com Trifloxystrobin + Propiconazole (0,50 L/ha), apresentaram maior rendimento.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS BALARDIN, R., S., BORIN, R., C. Doenas na Cultura do Arroz Irrigado. Santa Maria, 2001. 48p. il. MENEZES, V., G., MACEDO, V., R., M., ANGHINONI, I. Projeto 10: Estratgias de Manejo para o Aumento de Produtividade, Competitividade e Sustentabilidade da Lavoura de Arroz do RS. Cachoeirinha RS. IRGA, Diviso de Pesquisa - 2004. 32p.

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Tabela 1. Severidade mdia de mancha marrom (Drechslera oryzae), escaldadura (Rhynchosporium oryzae) e mancha estreita (Cercospora oryzae), eficcia (%) dos tratamentos devido aplicao de fungicidas. Santa Maria-RS, 2005. Tratamentos Fungicida Triciclazole Azoxistrobin Tebuconazole Trifloxystrobin + Propiconazole Carbendazim Azoxistrobin + Cyproconazole Dose 2,50 0,40 0,60 0,50 1,00 0,40 0,50 2,00 0,60 0,70 0,60 0,70 0,60 Mancha Marrom (%) Mdia 6,46 3,73 5,44 4,91 9,59 5,18 8,45 5,30 3,49 3,84 2,99 3,78 7,01 23,36 4,92 p 0,05 d ab c c f c e c ab b a ab d g Efi. 72,34 84,06 76,73 78,97 58,96 77,85 63,83 77,31 85,07 83,57 87,21 83,84 69,98 0,00 Escaldadura (%) Mdia 2,40 2,46 2,84 2,38 3,53 2,60 2,58 2,93 2,09 2,60 2,85 2,84 3,53 10,64 4,53 p 0.05 ab abc cd ab e bcd bcd d a bcd d cd ef g Efi. 77,44 76,85 73,33 77,67 66,86 75,56 75,79 72,50 80,38 75,56 73,21 73,33 66,86 0,00 Mancha Estreita (kg/ha) Mdia 0,38 0,38 0,09 0,30 0,19 0,30 0,50 0,48 0,16 0,30 0,18 0,09 0,55 3,53 15,18 p 0.05 cde cde a bcd abc bcd de de ab bcd abc a ef g Efi. 89,36 89,36 97,52 91,49 94,68 91,49 85,82 86,52 95,39 91,49 95,04 97,52 84,40 0,00

498

Myclobutanyl Cercobin Flutriafol + tiofanato metlico Flutriafol + tiofanato metlico Famoxadone + fluzilasole Famoxadone + fluzilasole Tetraconazole Testemunha C.V.(%)

Tabela 2. Rendimento obtido em plantas da cultivar Epagri 108 devido aplicao de fungicidas. Santa Maria-RS, 2005. Tratamentos Funguicida Triciclazole Azoxistrobin Tebuconazole Dose 2,50 0,40 0,60 0,50 1,00 0,40 0,50 2,00 0,60 0,70 0,60 0,70 0,60 1 4518,00 4741,16 3685,34 5038,28 3970,00 4420,86 4353,31 3557,93 4443,31 4153,79 4051,59 4651,33 3705,07 3463,48 2 3582,24 4286,90 3649,16 5822,66 3609,00 5468,90 4499,07 3726,00 4606,90 3985,00 3755,86 4232,41 3821,59 4385,38 Repeties 3 3875,86 4580,17 4452,41 5802,05 4099,48 4560,62 4901,07 4142,24 4086,21 4510,62 4062,28 4766,79 4118,03 3433,93 4 4003,75 4536,56 3923,54 5548,87 3892,90 4813,70 4584,37 3808,64 4379,87 4218,30 3956,58 4548,21 3881,57 3770,12 Rendimento (kg/ha) Media 3994,96 4536,20 3927,61 5552,96 3892,84 4816,02 4584,45 3808,70 4379,07 4216,93 3956,58 4549,69 3881,56 3763,23 6,91 p 0.05 abc bcd abc e abc de cd ab abcd abcd abc bcd abc a Dif. 6,16 20,54 4,37 47,56 3,44 27,98 21,82 1,21 16,36 12,06 5,14 20,90 3,14 0,00

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Trifloxystrobin + Propiconazole Carbendazim Azoxistrobin + Cyproconazole Myclobutanyl Cercobin Flutriafol + tiofanato metlico Flutriafol + tiofanato metlico Famoxadone + fluzilasole Famoxadone + fluzilasole Tetraconazole Testemunha C.V.(%)

DANOS CAUSADOS POR DOENAS FNGICAS EM CULTIVARES DE ARROZ IRRIGADO EM FUNO DA POCA DE SEMEADURA
(*1) (*2) (2) (2)

Joo l. Nunes Maciel , Ezequiel Saraiva Pereira , Catiane M. dos Santos , Dieter Kempf , (2) (2) (2) (2) 1 Valmir Menezes , Mector Ramirez , Marlos Mariot , Carlos Alberto Fagundes . Embrapa 2 Trigo, C.P. 451, CEP 99001-970, Passo Fundo, RS, e-mail: jmaciel@cnpt.embrapa.br; Estao Experimental do Arroz, Instituto Rio-grandense do Arroz (EEA-IRGA), C.P. 29, CEP 94930-030, Cachoeirinha, RS. No Rio Grande do Sul, o dano causado pelas doenas fngicas da parte area da cultura do arroz irrigado no tem sido estimado com preciso devido ausncia de trabalhos experimentais especficos. A maioria das informaes disponveis oriunda de observaes realizadas em lavouras comerciais em que as comparaes so feitas entre uma rea que se aplicou um determinado fungicida e outra que no se aplicou. Tais informaes so questionveis, pois os procedimentos para execuo de experimentos de campo, tais como, repetio, casualizao, entre outros, no so adotados. Um outro aspecto que tambm tem sido bastante questionado se o dano causado pelas doenas fngicas na cultura do arroz irrigado aumenta proporcionalmente ao avano da poca da semeadura da cultura. As avaliaes mais freqentes, baseadas principalmente em observaes de lavouras comerciais, so as que os danos aumentam consideravelmente na medida em que se atrasa a poca de semeadura. Dessa forma, a execuo de experimentos que permitam verificar a evoluo desses danos durante o ciclo da cultura torna-se muito importante. Assim este trabalho foi realizado na Estao Experimental do Arroz do IRGA, Cachoeirinha, RS, com os objetivos de quantificar o dano causado pelas doenas fngicas e avaliar a influncia da poca de semeadura na severidade da doena em trs cultivares de arroz irrigado. O experimento foi conduzido durante a estao de crescimento de 2003/04 na Estao Experimental do Arroz do Instituto Rio-Grandense do Arroz, em Cachoeirinha, RS. O solo da rea classificado como gleissolo hplico Ta Distrfico Tpico (EMBRAPA,1999) e o clima do local do tipo Cfa. As cultivares BR-IRGA 410, IRGA 417 E IRGA 420 foram semeadas em cinco datas distintas, em parcelas de 5,5 x 1,8 m. Em cada data, cada cultivar foi semeada em oito parcelas. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso, com quatro repeties, sendo que, para cada data, somente quatro parcelas de cada cultivar que foram tratadas com o fungicida. As cinco datas de semeadura foram as seguintes: 14 de outubro, 29 de outubro, 15 de novembro, 28 de novembro e 20 de dezembro. A semeadura foi realizada no sistema de plantio direto em linhas espaadas de 0,2 m, na densidade de 400 sementes aptas/m2 para as trs cultivares, com dessecao prvia da vegetao atravs da aplicao do herbicida glyphosate na dose de 1.440 g i.a./ha. Depois da emergncia das plantas, um dia antes da irrigao por inundao, aplicou-se os herbicidas Quinclorac e Pyrazosulforon, nas doses de 20 e 375 g i.a./ha, respectivamente. Utilizou-se 300 Kg/ha de adubo granulado durante a semeadura contendo 5, 20 e 30% de N, P2O5 e K2O, respectivamente. Em cobertura, se aplicou 105 Kg/ha de N na forma de uria, sendo a metade aplicada no estdio V3-V4, antes da entrada da gua de inundao nas parcelas, e a outra metade, no estdio (V8 e V9) (Counce et al., 2000). Realizou-se duas aplicaes de fungicidas na parte area das plantas, a primeira, no estdio inicial de emisso das panculas, com 10 a 15% das panculas emitidas, em 26 de janeiro de 2004, e a segunda, 15 dias depois. O fungicida utilizado foi o Azoxystrobin na dose de 100 g de i.a/ha. A aplicao do fungicida foi realizada com pulverizador costal, com presso de gs carbnico e com uma vazo de calda de 150 L/ha. As demais prticas culturais foram realizadas conforme as recomendaes tcnicas da pesquisa para o arroz irrigado no sul do Brasil (SOSBAI, 2003). O efeito dos tratamentos sobre o rendimento de gros foi estimado com base na colheita 2 de uma rea til de 5,6 m /parcela. O efeito desses mesmos tratamentos sobre a severidade das doenas foi determinado de acordo com a intensidade dos sintomas das doenas que foram observadas no ensaio e que foram as seguintes: escaldadura, rizoctoniose, mancha parda e

500

mancha de gros. Para verificar a reao das plantas a cada uma das doenas, 10 plantas de cada parcela foram escolhidas ao acaso no estdio r7 da escala de Counce et al. (2000) e submetidas avaliao. Para avaliao das doenas, se adotou escalas diagramticas preconizadas pelo sistema internacional de avaliao de doenas do arroz especficas para cada doena (IRRI, 1996). A anlise de varincia dos dados de rendimento foi realizada sem transformao, enquanto que os dados das avaliaes das quatro doenas avaliadas foram transformados em x + 10 . As mdias foram comparadas pelo teste de Tukey, ao nvel de 0,05 de probabilidade. Os resultados obtidos demonstraram que o rendimento de gros afetado negativamente pela poca de semeadura e que aplicao de fungicidas no proporcionou diferena estatstica no rendimento de gros para nenhuma das 3 cultivares e em nenhuma das 5 pocas (Figuras 1, 2 e 3). No entanto, verificou-se uma tendncia de incremento no rendimento a partir da terceira poca de semeadura (15 de novembro) para os cultivares IRGA 417 e IRGA 420. No caso do cultivar BR-IRGA 410, esse incremento j verificado desde a primeira poca de semeadura (14 de outubro). Uma explicao para esta diferena de resposta observada no cultivar BR-IRGA 410 pode ser a existncia de uma maior proporo de raas de fungos patognicos adaptadas a este cultivar implicando na ocorrncia de um dano desde as primeiras pocas de semeadura. De maneira geral, a severidade de todas as quatro doenas avaliadas aumentou gradativamente medida que avanou a poca de semeadura. A doena em que severidade foi maior em todas as cultivares foi a escaldadura. Comparando-se a reao das plantas das parcelas no tratadas com as plantas das parcelas que receberam tratamento verificou-se que a aplicao de fungicidas proporcionou uma reduo na severidade da maioria das doenas nas trs cultivares e nas cinco pocas avaliadas.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS COUNCE, P.A., KEISLING, T.C., MITCHELL, A.J. A uniform, objective, and adaptive system for expressing rice development. Crop Science, v.40, p.436-443. 2000. EMBRAPA. Centro Nacional de Pesquisa de Solos. Sistema Brasileiro de Classificao de Solos. Braslia: Embrapa Produo de Informao; Rio de Janeiro: Embrapa Solos, 1999b. 412p. INTERNATIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Standard Evaluation System For Rice. Manilla: INGER/Genetic Resources Center, 1996. 52p. SOSBAI. Sociedade Sul-Brasileira de Arroz Irrigado. Arroz irrigado: recomendaes tcnicas da pesquisa para o sul do brasil. Itaja, SC: SOSBAI, 2003. 126p.

501

10500

Re ndime nto (Kg/ha)

9500 8500 7500 6500 5500 4500 3500

417 T 417 NT

1 4 /ou t

2 9 /ou t

1 5 /n ov

28 /n ov

20 /d ez
T - Tratado com fungicida NT No tratado c/ fungicida

D a ta d e s e m e a d u r a

F igura 1. R endim ento de gr os do cultivar IR G A 417 sem e ado em difere ntes pocas e subm etido aplicao com fungicida na parte area . S afra 200 3-04 , E E A -IRG A , Cachoeirinha , RS .

R endime nto (K g/ha)

9600 8600 7600 6600 5600 4600 3600

420 T 420 NT

1 4 /o u t

2 9 /o u t

1 5 /n o v

2 8 /n o v

2 0 /d e z

D at a d e s e m e a d u r a

T - Tratado com fungicida NT No tratado c/ fungicida

F ig u ra 2 . R e n d im e n to d e g r o s d o c u lt iv a r IR G A 4 2 0 s e m e a d o e m d ife re n te s p o c a s e s u b m e tid o a p lic a o c o m fu n g ic id a n a p a rte a re a . S a f ra 2 0 0 3 -0 4 , E E A -IR G A , C a c h o e irin h a , R S .

10500

R e ndime nto (K g/ha)

9000 7500 6000 4500 3000

410 T 410 NT

14/out

2 9/ o u t

15/nov

2 8/ n o v

20/dez
T - Tratado com fungicida NT No tratado c/ fungicida

D a ta d a s e m e a d u r a

F ig u ra 3 . R e n d im e n to d e g r o s d o c u lt iv a r B R -IR G A 4 1 0 s e m e a d o e m d ife re n te s p o c a s e s u b m e tid o a p lic a o c o m fu n g ic id a n a p a rt e a re a . S a f ra 2 0 0 3 -0 4 , E E A -IR G A , C a c h o e irin h a , RS.

502

DESEMPENHO DO ARROZ IRRIGADO EM UNIDADES DEMONTRATIVAS EM FUNO DO TRATAMENTO DE SEMENTES COM VITAVAX-THIRAM 200 SC
Gomes, D. N. , Gomes, A. da S. ; Petrini, J. A. ; Bender, R. R. , Diniz, L. H. M. . Eng. de Desenvolvimento Tcnico da Crompton Ltda. Regio Sul do Brasil. Rua Antonio Bitencourt; 76, 2 3 CEP: 94015-600, Bela Vista, Gravata (RS). Pesquisador da Embrapa Clima Temperado. Aluno de Graduao, FAEM-UFPel e Estagirio da Embrapa Clima Temperado.
(1) (2) (2) (3) (3) 1

O arroz uma das mais importantes culturas anuais produzidas no Brasil, significando, em mdia, 17,5% do total de gros colhidos no pas. Na safra 2003/04 a produo nacional deste cereal atingiu 12,7 milhes de toneladas. O Rio Grande do Sul, principal Estado brasileiro produtor de arroz, tem sido responsvel por 50% desta produo. Difundido largamente no pas, o arroz ocupa posio de destaque do ponto de vista econmico e social, sendo responsvel por suprir a populao brasileira com um considervel aporte de calorias e protenas na sua dieta bsica (Azambuja et al., 2004). Na atualidade, embora a pesquisa, em parceria com a transferncia de tecnologia (Projeto Marca, por exemplo), venha contribuindo para que sejam alcanadas produtividades mais elevadas de arroz, por uma expressiva percentagem de orizicultores gachos, com uma melhor relao custo/benefcio, o setor orizcola do pas vem passando por enormes dificuldades, relacionadas, principalmente, a problemas de mercado (preo e demanda), mas tambm devidas a oscilaes climticas. Esta situao requer que sejam exercidas, alm de polticas governamentais mais ajustadas ao setor e a agregao de valores ao produto final, a utilizao de tcnicas de manejo mais racional da cultura, de forma que a cultivar de arroz utilizada possa expressar seu potencial produtivo. -2 Uma adequada populao de plantas (de 200 a 300 plantas m para o arroz irrigado), estabelecida desde a emergncia da cultura, uniformemente distribuda e, principalmente, sadia, condio fundamental para que qualquer tipo de cultivo agrcola possa expressar seu potencial produtivo. Para se obter um timo estande de plantas, vrios procedimentos podem ser adotados, destacando-se entre eles, a proteo da semente durante o perodo que vai da semeadura a emergncia, o que concorreria para reduzir, ou mesmo evitar, efeitos danosos decorrentes de estresses climticos e ou a infestao da semente por fungos patognicos que possam estar presentes no solo. Este procedimento, cada vez mais, vem sendo considerado imprescindvel para que seja assegurado o estabelecimento de uma populao inicial de plantas, considerada ideal. Trabalhos neste sentido j foram desenvolvidos por Gomes et al. (1999a) e Gomes et al. (1999b). A proteo de sementes visando o controle de doenas na cultura do arroz irrigado envolve o tratamento destas, normalmente com produtos de ao fungicida. Esta prtica tem concorrido para proteger as sementes durante os processos de germinao e emergncia, e tambm as plntulas de arroz. Alm de reduzir possveis infeces primrias nas sementes pode reduzir sensivelmente efeitos decorrentes das temperaturas baixas do solo e de estresses hdricos, assegurando um timo estande inicial de plantas. Em funo do exposto, foi conduzido este trabalho, objetivando avaliar o desempenho do arroz irrigado em funo do tratamento de semente com o fungicida de dupla ao Vitavax-thiram (carboxim sistmico + thiram contato), em Unidades Demonstrativas implantadas. Para consecuo do objetivo proposto foram conduzidas seis Unidades Demonstrativas: A; B; C; D; E; e F (Figura 1), compondo o quarteiro 1135 da Granja Bretanhas, propriedade do Grupo Extremo Sul, localizada no municpio de Jaguaro, RS, totalizando uma rea de 30,9 ha. As Unidades A, B e C receberam sementes da cultivar BRS Pelota, tratadas com Vitavax-thiram, -1 na dose de 250 mL p.c. 100 kg de semente . As Unidades D, C e F tambm foram semeados com a mesma cultivar, porm, as sementes no receberam tratamento (Tabela 1). A semeadura do arroz foi realizada em 17/11/2004, no sistema de cultivo mnimo, -1 utilizando-se um espaamento entre linhas de 17,5 cm e uma densidade de 130 kg ha de sementes, em todas as Unidades Demonstrativas. A adubao de pr-plantio constou da -1 aplicao a lano e incorporao de 200 kg ha da formula 02:18:18. Na adubao de cobertura

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com N, realizada em duas pocas, foram aplicados, na primeira poca (16/12/04), 100 Kg ha de uria, em solo seco, um dia antes da entrada da gua de irrigao. Na segunda adubao de cobertura, realizada na diferenciao da pancula (26/01/05), foi aplicada a mesma dose de uria sobre uma lmina de gua no circulante. Da semeadura entrada da gua de irrigao (perodo de 31 dias), no ocorreram precipitaes pluviomtricas, mesmo assim, em decorrncia do elevado banco de sementes de arroz-daninho existente na rea, no foram realizados banhos nas Unidades Demonstrativas, para no favorecer a sua emergncia. Os tratos culturais, adotados nas Unidades Demonstrativas, seguiram as recomendaes preconizadas pelo Projeto MARCA (Gomes et al., 2004) e as indicaes da pesquisa para o arroz irrigado (SOSBAI, 2003). A colheita do arroz foi realizada em 02/05/2005. Tabela 1. Unidades Demonstrativas de arroz irrigado (cv. BRS Pelota), rea e dose do produto utilizado. Granja Bretanhas, Jaguaro, 2005. Unidades Demonstrativas* A - Vitavax-thiram B - Vitavax-thiram C - Vitavax-thiram D - sem tratamento E - sem tratamento rea (ha) 4,1 4,5 4,5 5,0 6,0 Dose, i.a. -1 (g 100 kg de sem. ) 50,0 + 50,0 50,0 + 50,0 50,0 + 50,0 Dose, p. c. -1 (mL 100 kg de sem. ) 250 250 250 -

-1

F - sem tratamento 6,8 * As letras representam as Unidades Demonstrativas avaliadas.

Figura 1. Croqui da rea onde foram conduzidas as Unidades Demonstrativas. Granja Bretanhas, Jaguaro (RS). 2005.

As variveis analisadas, populao inicial de plantas (21 DAE) e o rendimento de gros de arroz, responderam positivamente ao tratamento de sementes com o fungicida Vitavax-thiram (Tabela 2). A populao inicial mdia de plantas, obtida com sementes tratadas (Unidades Demonstrativas A, B e C) foi 33% maior que a mdia observada nas Unidades Demonstrativas (D, E e F) que receberam sementes no tratadas (Tabela 2). Esta diferena de populao inicial se refletiu na produtividade de gros de arroz. Assim, a produtividade mdia de gros de arroz proporcionada pelas Unidades Demonstrativas, onde foram utilizadas sementes tratadas, foi 27% superior quela constatada nas Unidades cultivadas com sementes no tratadas. A partir destes

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resultados, pode-se inferir que o tratamento de sementes de arroz, com Vitavax-thiram, favoreceu a germinao, a emergncia e o estabelecimento das plntulas, assegurando uma mdia de 223 -2 plantas m (Tabela 2), considerada dentro da faixa recomendada. Esta populao mdia inicial contribuiu para que o rendimento mdio de gros atingisse, nas Unidades com sementes -1 tratadas, 7.581 kg ha . Estes resultados vm ao encontro daqueles observados por Gomes et al. (1999b). O melhor desempenho demonstrado pelas sementes de arroz tratadas com o Vitavaxthiram deve estar associado ao sistmica (carboxin) deste fungicida, que atua no controle de fungos que possam estar presentes no interior das sementes, e da ao de contato (thiram) que protege estas de patgenos do solo. Assim, a proteo do Vitavax-thiram viabilizou a germinao, a emergncia e o estabelecimento de um adequado estande inicial de plantas de arroz, mesmo em condies severas de estresse hdrico, ocorrido durante o perodo semeadura incio da irrigao (31 DAS). Tabela 2. Populao inicial de plantas e rendimento de gros da cultivar de arroz irrigado BRS Pelota, em funo do tratamento de sementes com Vitavax-thiram. Embrapa Clima temperado. Pelotas, RS. 2005 Unidades rea Dose, p. c. Popul. inicial -1 Demonstrativas* (ha) (mL 100 kg de sem. ) (21 DAE) A - Vitavax-thiram 4,1 250 220 B - Vitavax-thiram 4,5 250 234 C - Vitavax-thiram 4,5 250 216 Mdia (com tratam.) 223 D - sem tratamento 5,0 150 E - sem tratamento 6,0 178 F - sem tratamento 6,8 176 Mdia (sem tratam.) 168 *Letras A, B, C, D, E, e F, representam as unidades demonstrativas. Rend. gros -1 (kg ha ) 7.634 7.710 7. 399 7.581 5.584 6.091 6.271 5.982

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS AZAMBUJA, I.H.V.; VERNETTI Jr., F. de J.; MAGALHES Jr., A.M. de. Aspectos socioeconmicos da produo de arroz. In: Arroz irrigado no Sul do Brasil. GOMES A. da S.; MAGALHES Jr., A.M. (Ed.). Braslia, DF: Embrapa Informao Tecnolgica. 2004. p. 23-44. GOMES, A. da S.; FRANCO, D. F.; SILVA, G. F. dos F.; GONALVES, G. K.; GOMES, D. N.; FERREIRA, L. H. G. Desempenho do arroz irrigado em funo do tratamento de semente com Vitava-thiram 200 SC avaliao preliminar. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE ARROZ IRRIGADO, 1.; REUNIO DA CULTURA DO ARROZ IRRIGADO, 23., Pelotas, 1999. Anais. Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 1999a. p. 213-216. GOMES, D. N.; GOMES, A. da S. Desempenho de semente de arroz pr-germinado, em funo de doses e mtodos de tratamento com Carboxin + Thiram 200 SC. Agropecuria Clima Temperado, Pelotas, v. 2, n. 2, p. 213-222, 1999b. GOMES, A. da S.; PETRINI, J.A.; FAGUNDES, P.R. (Ed.). Manejo racional da cultura do arroz irrigado (Programa Marca). Pelotas: Embrapa Clima Temperado, 2004. 203 p. SOCIEDADE SUL-BRASILEIRA DE ARROZ IRRIGADO SOSBAI. Recomendaes tcnicas da pesquisa para o sul do Brasil. Itaja: SOSBAI, 2003. 126 p.

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DIFERENTES ESTDIOS DE APLICAO DE FUNGICIDAS NO CONTROLE DE DOENAS FOLIARES NA CULTURA DO ARROZ IRRIGADO
Marcelo T. Moreira, Leandro J. Dallagnol, Lucas Navarini, Marcelo G. Madalosso, Guilherme A. Rubin, Alisson Santos, Ricardo S. Balardin. Universidade Federal de Santa Maria, Centro de Cincias Rurais, Departamento de Defesa Fitossanitaria, Santa Maria, CEP 97111-970, Cx. Postal 5025, marcelotemp@gmail.com.

A produtividade media do Rio Grande do Sul de 6 t/ha na safra 2003/2004, pode ser superior tendo em vista o potencial produtivo de at 10 t/ha que a cultura do arroz geneticamente apresenta (MENEZES, MACEDO, ANGHINONI 2004). As doenas podem comprometer este potencial, pois conforme BALARDIN & BORIM (2001), as perdas no rendimento de gros devido s doenas foliares fngicas variam entre 20 a 50%. PRABHU & FILLIPI (1997) relatam perdas no peso de gro de at 30% e de at 22% no nmero de gros cheios por pancula. A utilizao de cultivares resistentes, sementes livres do patgenos, tratamento de sementes, e aplicao de fungicidas de parte area so medidas eficazes de controle. Como a eficcia do controle qumico depende do momento correto para aplicao dos fungicidas, foi desenvolvido este trabalho para verificar o estdio fenolgico que propicie a melhor diferena no ganho de rendimento. O experimento foi conduzido nos municpios de So Vicente do Sul, cultivar IRGA 422 CL (sistema convencional) e Dona Francisca, cultivar EPAGRI 108 (sistema pr-germinado). A populao mdia do experimento foi 300.000 plantas/h, e os tratos culturais seguiram as Indicaes Tcnicas (2003). Os tratamentos esto discriminados na Tabela 1, sendo aplicados com uma barra portando 04 pontas jato tipo leque (XR11002) propelido a CO2, e volume de calda -1 de 200 L.ha . As aplicaes foram realizadas no estdio B47 e no estdio 73 conforme a escala 2 de LANCASHIRE et al., (1991). A parcela experimental foi 15 m (3,0 x 5,0 m), rea til de 8 m . O delineamento experimental foi de blocos ao acaso com 4 repeties, e os dados obtidos submetidos ao teste de de Tukey para comparao mltipla de medias (p 0,05), utilizando o software PlotIT (v. 3.2) para ambiente Windows. A patometria utilizada foi a severidade das doenas foliares, avaliadas aos sete, quatorze, e vinte e um dias aps a aplicao. O rendimento de gros foi obtido a partir de plantas da rea til da parcela experimental, foram cortadas e trilhadas em trilhadeira estacionria marca Triton. O volume total de gros foi pesado e determinado umidade, para posterior converso a 13% e clculo do rendimento final. O peso de mil gros e rendimento de engenho foi obtido de amostras aleatrias do volume de gros de cada parcela. Os maiores rendimentos foram obtidos quando a aplicao do fungicida foi realizada de forma a beneficiar a cultura pela manuteno da rea foliar verde, embora o aumento na produtividade seja relacionado a cada cultivar. Os maiores incrementos no rendimento foram obtidos com aplicao de fungicida na cultivar IRGA 422 CL, provavelmente devido a menor tolerncia a doena, quando comparada a cultivar EPAGRI 108 (Tabela 1). O dano causado pelas doenas foliares no cultivar IRGA 422 CL foi de 31,76% enquanto na cultivar EPAGRI 108 foi de 17,56%. A maior tolerncia da cultivar EPAGRI 108, pode tambm ser observada em relao ao posicionamento do controle, onde no foi observado diferena nas aplicaes no estdio 47 e 73. O posicionamento da aplicao permitiu maximizar o beneficio do controle das doenas foliares. Neste caso, as aplicaes realizadas no estdio 47 apresentaram resultado superior, provavelmente por atuar sobre um baixo nvel de inoculo inicial, favorecendo o controle e proporcionando maior residual do fungicida. O ingrediente ativo utilizado tambm influenciou na magnitude de resposta, j que mistura de triazois com estrubilurinas proporcionou maior incremento no rendimento, em ambas cultivares. Este resultado provavelmente seja relacionado a sua forma de movimentao e sistemicidade na planta lhe conferindo liberao gradual com maior perodo residual. Igualmente, sua atuao sobre a fisiologia da planta, mantendo a rea foliar verde por maior perodo de tempo, refletindo em maior tempo de translocao de produto para o incremento na massa de gros provavelmente esteja relacionada com a eficincia desta classe de produtos. O maior

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espectro de controle dos patgenos tambm foi observado quando clorotolonil foi adicionado ao tetraconazole, em comprao a tetraconazole isolado.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS LANCASHIRE, P. D. H, BLEIHOLDER, P. LANGELUDDECKE, RSTAUSS, T. VANDENBOOM, E. WEBER UND A. WITVENDERGER.: Am Uniform Decial Cobe for Growth Stages of Crops and Weeds. Ann. Appl, Biol. 119,561-601. 1991 PRABHU, A. S., FILIPPI, M. C. Arroz (Oryza sativa L.) Controle de Doenas. In: Controle De Doenas de Plantas: Grandes culturas. Ed.: FALE, F.X.R. do, ZAMBOLIM, L, Viosa: UFV, Departamento de Fitopatologia; Braslia: Ministrio da Agricultura e do Abastecimento. 1997. p. 51-79. BALARDIN, R., S., BORIN, R., C. Doenas na Cultura do Arroz Irrigado. Santa Maria, 2001. 48 p. il. MENEZES, V., G., MACEDO, V., R., M., ANGHINONI, I.. Projeto 10: Estratgias de Manejo para o Aumento de Produtividade, Competitividade e Sustentabilidade da Lavoura de Arroz do RS. Cachoeirinha RS. IRGA, Diviso de Pesquisa - 2004. 32p.

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Tabela1: Severidade das doenas foliares e rendimento de gros das diferentes cultivares em funo do estdio fenolgico da aplicao dos fungicidas.
Cultivar Tratamentos Azoxistrobin + Cyproconazole Azoxistrobin + Cyproconazole Tryfloxistrobin + Propiconazole Tryfloxistrobin + Propiconazole Kresoxin-Methil Kresoxin-Methil Tryfloxistrobin + Tebuconazole Tryfloxistrobin + Tebuconazole Tetraconazole Tetraconazole Tebuconazole Tebuconazole Testemunmha CV L /ha 0,3 0,3 0,6 0,6 0,7 0,7 0,5 0,5 0,5 0,5 0,7 0,7 M. M. 3.25 c 4.58 f 3.03 bc 3.15 c 2.03 a 3.45 cde 2.58 b 5.18 g 3.93 e 3.90 e 6.38 h 3.80 de 24.65 i 4.16 IRGA 422 CL Esc. M. E. Severidade % 3.73 bcd 0.65 cd 4.03 cd 0.15 ab 3.65 bc 0.10 a 3.85 cd 0.10 a 2.65 a 0.98 de 4.65 e 0.18 ab 4.15 d 0.58 bcd 5.95 g 0.35 abc 6.03 g 0.10 a 6.03 g 0.10 a 5.50 f 0.18 ab 3.30 b 0.50 abc 21.00 i 6,40 f 2.35 24.54 EPAGRI 108 Esc. M. E. Rend. Severidade % 3.45 b 2.03 a 0.65 a 5874.77 b 3.80 b 2.05 a 0.78 a 5617.85 ab 1.98 a 1.45 a 0.55 a 6059.24 b 2.40 a 1.48 a 0.80 a 5811.29 b 5.63 cd 3.33 b 0.88 a 5571.07 ab 6.61 e 3.45 b 0.98 a 5226.92 ab 5.50 c 3.25 b 5.95 a 5639.84 b 6.38 cde 3.28 b 6.05 b 5520.73 ab 6.34 cde 4.88 c 6.13 bc 5407.02 ab 6.63 ef 5.03 cd 6.15 bc 5276.79 ab 5.55 cd 3.75 b 6.28 bc 5510.99 ab 6.09 cde 3.82 b 6.30 bc 5447.74 ab 35.48 g 15,25 e 21,67 d 4705.67 a 4,72 5,98 5,86 6,46 M. M.

Rend. 5942.97 bc 5459.89 b 5888.78 bc 5840.30 bc 5895.65 bc 5792.07 bc 6076.37 c 5666.01 bc 5693.19 bc 5680.76 bc 5913.01 bc 5486.28 b 5882.49 a 3,73

Dif% 26.61 16.32 25.46 24.43 25.61 23.40 29.46 20.71 21.29 21.03 25.98 16.88 0

Dif% 24.84 19.38 28.76 23.50 18.39 11.08 19.85 17.32 14.90 12.14 17.11 15.77 0

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Estdio 47 abertura da envoltura da folha bandeira. Estdio 73 gro leitoso

EFEITO DE ISOLADOS BACILLUS THURINGIENSIS EM FITOPATGENOS DO ARROZ IRRIGADO


UNISINOS Laboratrio de Neiva Knaak , Angelise Ana Rohr & Lidia Mariana Fiuza Microbiologia - Av. Unisinos, 950, CP 275, CEP: 93022 000, So Leopoldo,RS, Brasil, site: 2 www.saude.unisinos.br/laboratorios/microbiologia EEA Instituto Riograndense do Arroz C.P. 29, CEP: 94930-030, Cachoeirinha,RS, Brasil.
1 1 1, 2 1

O arroz uma cultura extensamente cultivada em todo o mundo e constitui a base da alimentao de muitos pases, inclusive o Brasil. Porm, na agricultura atual, com toda a tecnologia disponvel, ainda ocorrem grandes perdas provocadas por doenas e pragas. O controle dos mesmos ser sempre condio determinante para a sustentabilidade da cultura do arroz (BALARDIN, 2003). As diversas doenas que atacam a cultura do arroz irrigado podem provocar danos e perdas que geram instabilidade na produtividade das lavouras, atingindo, em mdia, 10 a 15% do potencial de produo. Entre estas molstias, destaca-se a brusone causada pelo fungo Pyricularia grisea, cujos danos podem causar perdas de 70 a 80% na produo, provocando manchas nas folhas, colmo, panculas e gros. Outra doena importante a queima de bainhas, causada pelo fungo Rhizoctonia solani, que pode causar a morte das folhas inferiores, cujas bainhas se mostrem intensamente atacadas, levando esterilidade de algumas espiguetas (BALARDIN, 2003). Outros fungos como Fusarium oxysporum, que causa o mal do colo, e Fusarium solani, que ocorre em sementes, (MENDES et al., 1998) podem ocasionar grandes perdas na cultura do arroz irrigado. O controle dessas doenas feito atravs do uso de fungicidas, mas a ausncia de especificidade e os riscos sade humana e ao ambiente apresentados por este tipo de defensivo agrcola acentuam a necessidade de novas formas de controle, principalmente o controle biolgico atravs de microrganismos, como vrus, bactrias e outros (ALVES, 1998). Bactrias do gnero Bacillus possuem um grande potencial para serem usadas como agentes de controle biolgico, pois mantm sua viabilidade quando estocados por longos perodos (ALVES, 1998). B. thuringiensis uma bactria Gram-positiva que produz incluses cristalinas de protenas durante a esporulao, sendo estas compostas de protenas Cry ou deltaendotoxinas (CRICKMORE et al., 1998). Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito inibitrio ou regulador do crescimento de organismos fitopatgenos associados ao arroz irrigado, em presena de Bacillus thuringiensis que sintetizam as protenas Cry1Ab e Cry1Ac. Os isolados de fungos fitopatognicos P. grisea, R. solani, F. oxysporum e F. solani foram cedidos pelo laboratrio de Fitopatologia Molecular da Universidade Federal do Rio Grande do Sul e repicados em placas com meio BDA (Batata dextrose agar), crescidos de acordo com a exigncia de cada espcie e mantidos a 4C. Nos ensaios, cada isolado fngico foi transferido com ala de platina para placas de Petri, com meio de cultura BDA em ponto centralizado. Esses experimentos foram realizados em triplicatas. Em seguida, os isolados bacterianos que sintetizam as delta-endotoxinas ou protenas Cry foram inoculados por estria com ala de platina, a uma distncia de 1,5cm do ponto onde o fungo foi inoculado previamente, com exceo das placas-controle, sem a bactria. O crescimento micelial, a 28C, foi avaliado aos sete e 14 dias de incubao atravs da determinao do dimetro da colnia fngica. Os dados obtidos foram submetidos anlise de varincia e teste de Tukey (P<0,05) para comparao entre as mdias. Os fungos R. solani, P. grisea, F. oxysporum e F. solani tiveram seu crescimento micelial reduzido aos sete dias aps a incubao em presena do isolado de B. thuringiensis kurstaki HD73 e Bacillus thuringiensis thuringiensis 407 (pH408), que sintetiza Cry1Ac e Cry1Ab, respectivamente, mantendo-se at 14 dias analisado (Tabela 1), quando comparado ao controle. Os dois isolados inibiram o crescimento dos fitopatgenos testados at sete dias aps a incubao, onde houve diferena significativa entre os isolados e o controle.

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Tabela 1. Efeito fungisttico de Bacillus thuringiensis sobre fungos fitopatognicos.


Tratamento Avaliao Crescimento micelial* R. solani Controle Bt thuringiensis 407 (pH 408) Bt kurstaki HD73 Controle Bt thuringiensis 407 (pH 408) Bt kurstaki HD73 14DAT 7 DAT 9a 2.36b 3,62c 9a 2,54b 3,62c P. grisea 6,8d 2,64b 2,56b 7,95d 2,56b 2,65b F. oxysporum 7,86d 4,34e 4,23e 9a 4,61e 4,37e F. solani 8,03a 4,75e 4,45e 9a 5,13f 4,65e

*dimetro em cm, DAT=dias aps o tratamento. Mdias seguidas pela mesma letra no diferem entre si pelo Teste de Tukey a 5% de probabilidade. In vitro, os dois isolados de B. thuringiensis inibiram o crescimento de P. grisea, R. solani, F. solani e F. oxysporum, no havendo diferenas significativas entre os mesmos. Este efeito inibitrio pode estar relacionado com a produo enzimas que podem ter ao contra a parede celular fngica j que algumas bactrias antagonistas de fungos fitopatognicos podem produzir quitinases (MAVINGUI & HEULIN, 1994). BETTIOL & KIMATI (1989) observaram a ocorrncia de grande nmero de microrganismos antagnicos a Pyricularia oryzae Cavana, sendo os mais eficientes os pertencentes ao gnero Bacillus. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ALVES, S. B. 1998. Controle microbiano de insetos. 2.ed. Piracicaba: FEALQ, 1163p. BALARDIN, R. S. 2003. Doenas do Arroz. Santa Maria: Ed. Do Autor. 59p. BETTIOL, W. & KIMATI, H. 1989. Seleo de microrganismos antagnicos a Pyricularia oryzae Cav. para o controle do Brusone do arroz (Oryza sativa L.). Summa Phytopathologica 15: 257-266. CRICKMORE, N.; ZEIGLER, D. R.; FEITELSON, J.; SCHNEPF, E.; VAN RIE, J.; LERECLUS, D.; BAUM, J. & DEAN, D. H. 1998. Revision of the literature for the Bacillus thuringiensis pesticidal crystal proteins. Mol. Biol. Rev. 62: 807-813. MAVINGUI, P.; HEULIN, T. 1994. In vitro chitinase and antifungal activity of a soil, rhizosphere and rhizoplane population of Bacillus polymyxa. Soil Biology & Biochemistry 26: 801-803. MENDES, M. A. S.; SILVA, V. L.; DIANESE, J. C.; FERREIRA, M. A. S.;SANTOS, C. E. N.; NETO, E. G.; URBEN, A. F. & CASTRO, C. Fungos em plantas no Brasil. Braslia: Embrapa-Cenargen. 1998. 569p.

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EFEITO DO CONTROLE QUMICO DAS DOENAS FOLIARES SOBRE A PRODUO E QUALIDADE DE ARROZ
Leandro Jose Dallagnol, Ricardo Silveiro Balardin, Marcelo Madalosso, Lucas Navarini, Marcelo T. Moreira, Etiane M. Kirinus & Guilherme Rubin. Departamento de Defesa Fitossanitria, Universidade Federal de Santa Maria, CX postal 5025, 9711-970, Santa Maria RS. E-mail: ljdallagnol@gmail.com

A produtividade da cultura do arroz afetada por diversos fatores, sendo as doenas causadas por fungos, responsveis por danos variveis entre 20 e 50% na produtividade das lavouras de arroz (BALARDIN & BORIN, 2001). As principais doenas da cultura so a Brusone (Pyricularia grisea), Mancha Marrom (Drechslera oryzaae), Mancha Estreita (Cerscopora oryzae), Escaldadura (Rhynchosporium oryzae), Mancha de Alternaria ( Alternaria padwickii), Mancha das Bainhas (Rhizoctonia oryzae) e Manchas das Glumas (Phoma sp., Drechslera oryzae, Curvularia lunata, Nigroppora oryzae, Alternaria sp., Fusarium sp.). O desenvolvimento de cultivares resistentes o mtodo mais vivel de controle das doenas. Entretanto, cultivares resistentes a Pyricularia grisea, bem como doenas de final de ciclo tm apresentado uma vida til limitada aps seu lanamento (CORREA-VICTORIA & ZEIGLER, 1993). Neste caso, o controle qumico surge com alternativa para reduo do dano causado pelas doenas. O beneficio do controle qumico das doenas foliares sobre o rendimento de gros da cultura de arroz foi medido atravs da aplicao de fungicidas na parte area. Para execuo do trabalho, a cultivar IRGA 422, foi semeada no sistema convencional em -1 So Vicente do Sul na safra 2004/2005, com densidade de 130 Kg.ha . Os tratos culturais seguiram as Recomendaes Tcnicas da Pesquisa para o Sul do Brasil (2003). Os fungicidas utilizados e as dosagens esto discriminados na Tabela 1. As aplicaes dos fungicidas foram realizadas com uma barra com 04 bicos do tipo leque (XR11002) propelido a CO2, conferindo um -1 volume de calda de 200 L.ha . A aplicao foi realizada no estdio B 55 (emisso de pancula), conforme a escala de LANCASHIRE et al., (1991). Os parmetros avaliados foram a severidade das doenas nas folhas e nas glumas, o rendimento de gros e o rendimento de engenho. As dimenses da parcela experimental foi 2 2 3,15m x 5,00m (15,75 m ), com rea til de 7,90 m . O delineamento estatstico foi blocos completamente casualizados, com quatro repeties. Para anlise dos dados foi utilizado o teste de comparao mltipla de Tukey (p0,05). A reduo da severidade e do progresso das doenas foliares e da severidade das manchas da gluma, devido aplicao de diferentes fungicidas na parte area da cultura, possibilitou a cultivar de arroz IRGA 422 expressar seu potencial produtivo de gros, alem de manter a qualidade industrial (rendimento de engenho). A severidade das manchas de glumas apresentou relao direta com a severidade das 2 2 doenas foliares, de acordo com o modelo y = 0,0146x + 0,0239x + 2,3568 (R = 0,96). A menor severidade das doenas foliares refletiu em menor severidade das manchas das glumas. Este fato mostra a importncia das doenas nas folhas como fonte de inoculo para as glumas e conseqentemente sobre a qualidade dos gros produzidos. A menor severidade das manchas foliares e manchas de glumas foi verificada quando foi aplicado Famoxadone + Fluzilazole, no diferindo de Azoxistrobin + Ciproconazole, Trifloxystrobin + Propiconazole (Tabela 1). A superioridade de controle das estruberulinas, isoladas ou em mistura pode ser observada quando analisado o rendimento de gros. Os maiores rendimentos foram obtidos com aplicao de Trifloxystrobin + Propiconazole, Azoxistrobin + Ciproconazole e Azoxistrobina (38,33; 32,52 e 32,10% respectivamente). O grupo qumico dos triazis proporcionou acrscimos no rendimento variveis entre 13,17 e 22,61%. O menor incremento foi verificado quando da aplicao de Carbendazim, 4,18%. Rendimento de engenho observado com a aplicao de Miclobutanil, Mancozeb+Tiofanato metilico foi de 71,2 e 75,2, respectivamente. Os melhores resultados proporcionados pela aplicao de estruberulinas, alem do amplo espectro de patgenos, possivelmente esteja relacionado ao efeito que a molcula confere sobre a fisiologia da planta por estimular rotas metablicas que reduzem a produo de etileno,

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mantendo assim a planta verde por um maior perodo de tempo, o que contribuiu para maior acumulo de reservas no gro.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS BALARDIN, R.S., BORIN, R.C. Doenas na cultura do arroz irrigado. Santa Maria, O autor, Livro, 2001. 48 p. il. CORREA-VICTORIA, F.J. & ZEIGLER, R.S. Pathogenic variability in Pyricularia grisea at a rice blast `hot spot' site. Plant Disease 77:1029-1034. 1993. LANCASHIRE, P. D., H. BLEIHOLDER, P. LANGELDDECKE, R. STAUSS, T.VAN DEN BOOM, E.WEBER und A.WITZENBERGER.: An uniform decimal code for growth stages of crops and weeds. Ann. appl. Biol. 119, 561601. 1991. SOCIEDADE SUL BRASILEIRA DE ARROZ IRRIGADO (SOSBAI). ARROZ IRRIGADO: recomendaes tcnicas da pesquisa para o sul do Brasil. Itaja, SC: SOSBAI, 2003. 126p.

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TABELA 1. Severidade das doenas foliares e mancha de gluma (MG) e rea abaixo da curva de progresso (AACPD) da mancha marrom (MM), escaldadura (Esc), rendimento de gros e rendimento de engenho da cultivar de arroz IRGA 422 submetida a aplicao de fungicida foliar. Santa Maria, 2005.
Severidade (%) Ingrediente Ativo MM Tricyclazole (2,5) Azoxistrobina (0,4) Tebuconazole (0,7) Trifloxistrobina+ propiconazole (0,6) Carbendazim (1,0) Azoxistrobina+ Propiconazole (0,4) Miclobutanil (0,4) Mancozeb+Tiofanato metilico (2,0) Fomoxadone + Flusilazole (0,6) Fomoxadone + Flusilazole (0,7) Tetraconazole (0,6) Testemunha CV (%) 6,03 f* 3,88 cde 3,03 ab 2,80 ab 4,23 de 2,85 a 3,03 ab 3,75 cd 3,58 bc 2,48 a 3,53 bc 26,23 g 4,73 Esc 3,53 de 2,58 bc 2,25 abc 2,05 ab 2,50 bc 1,75 a 2,03 ab 2,88 cd 2,28 abc 2,25 abc 2,03 ab 15,18 f 8,97 MG 3,03 d 2,65 bcd 4,28 e 2,20 ab 2,70 bcd 2,25 ab 2,98 cd 2,55 bcd 2,50 abcd 1,85 a 2,50 abcd 13,03 f 7,88 MM 70,00 f 37,26 cd 35,35 bcd 26,64 ab 46,84 e 26,99 ab 35,17 bcd 34,48 bc 34,83 bc 24,90 a 34,30 bc 325,44 g 6,33 Esc 37,96 bc 25,25 a 25,77 a 20,55 a 24,55 a 18,28 a 23,86 a 28,38 ab 24,20 a 23,68 a 22,46 a 192,76 d 11,57 AACPD Rend. -1 (Kg.ha ) 4823,61 cd* 5461,61 e 4678,93 cd 5719,01 e 4307,29 ab 5478,61 e 5068,90 d 4514,37 bc 4746,47 cd 4768,96 cd 4749,17 cd 4134,32 a 2,75 Dif % 16,67 32,1 13,17 38,33 4,18 32,52 22,61 9,19 14,81 15,35 14,87 0 Rend. Eng. 61,95 abc 65,70 bcde 65,30 abcde 55,94 ab 69,17 cde 62,92 abc 71,26 cde 75,20 e 64,69 abcd 65,06 abcde 68,67 cde 55,12 a 6,09 Dif % 12,39 19,2 18,47 1,48 25,49 14,15 29,29 36,43 17,37 18,04 24,59 0

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* mdias seguidas pela mesma letra no diferiram estatisticamente pelo teste de Tukey (P<0,05).

EFEITO DO TRATAMENTO DE SEMENTES E ADUBAO SOBRE OS DANOS E INCIDNCIA DA VIROSE DO ENROLAMENTO DO ARROZ
Joo L. Nunes Maciel , Ezequiel Saraiva Pereira , Jos Mrio Tagliapietra , Catiane M. dos (2) (2) (2) (2) (2) Santos , Dieter Kempf , Valmir Menezes , Hector Ramirez , Carlos Mariot . Embrapa Trigo, 1 Embrapa Trigo, C.P. 451, CEP 99001-970, Passo Fundo, RS, e-mail: jmaciel@cnpt.embrapa.br; 2 Estao Experimental do Arroz, Instituto Rio-Grandense do Arroz,(EEA-IRGA), C.P. 29, CEP 3 94930-030, Cachoeirinha, RS; Cooperativa Agrcola Mista Nova Palma Ltda (CAMNPAL), CEP 97280-000, Dona Francisca, RS
(*1) (*2) (3)

Durante a safra agrcola 2001-02, foi constatado o seguinte quadro sintomatlogico em diversas lavouras de arroz irrigado localizadas prximas ou no municpio de Dona Francisca, Regio da Depresso Central do Rio Grande do Sul: plntulas mortas, listras clorticas em folhas e retorcimento de folhas e panculas. Entre as hipteses sugeridas como causa para ocorrncia deste quadro de mal-formao de plantas, apontou-se a possibilidade de ser a virose de ocorrncia na Colmbia conhecida como entorchamiento, causada pelo vrus RSNV (Rice Stripe Necrosis Virus). Plantas sintomticas foram coletadas de vrias lavouras da regio e utilizadas em anlises para deteco do vrus ou de seu agente vetor. No Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT), em Cali, Colmbia, as plantas foram submetidas a procedimentos para visualizao de estruturas fngicas e virais por meio de microscpio tico e eletrnico, respectivamente. No Brasil, realizou-se a tcnica do Double Antybody SandwichEnzyme-Linked Immunosorbent Assay (DAS-ELISA) utilizando anticorpo policlonal reativo contra o vrus RSNV (Morales et al., 1999). Realizaram-se experimentos em casa de vegetao para verificar se os sintomas eram reproduzidos a partir do solo coletado de lavouras com a ocorrncia do problema. Observaes em clulas de razes de plantas de arroz para verificar a presena de estruturas do protozorio Polymyxa graminis, o agente vetor do vrus foram realizadas. Como todos os resultados obtidos indicaram que se tratava da mesma virose relatada na Colmbia, constatou-se a necessidade de se desenvolver estratgias para controlar ou minimizar os danos causados por esta doena em nossas condies. As principais linhas de pesquisa desenvolvidas na Colmbia pelos pesquisadores do CIAT para controlar a virose tm sido as seguintes: identificao de fontes de resistncia gentica doena; utilizao de fungicidas para controlar P. graminis atravs do tratamento de sementes; avaliao de manejos de adubao do solo diferenciados (CIAT, 2003). Todas essas alternativas tem demonstrado potencial para fornecer informaes ou gerar cultivares de arroz que permitam controlar ou minimizar os efeitos da doena. No entanto, deve-se ressaltar que os experimentos sobre o manejo da adubao do solo realizados naquele Pas tm sido bastante promissores, os quais tem indicado que a tolerncia doena maior em plantas de lavouras com boas condies nutricionais (Correa-Victoria, comunicao pessoal). Nesse sentido, na Regio de Dona Francisca, tambm tem sido registrado perdas menores no rendimento de gros em lavouras de arroz com a ocorrncia do quadro sintomatolgico descrito acima mas em que se aplicou doses mais elevadas de adubo, principalmente de nitrognio em cobertura. Assim, este trabalho foi realizado com os objetivos de verificar o efeito da adubao de base com nitrognio, fsforo e potssio; do nitrognio em cobertura e o do tratamento de sementes sobre a incidncia da virose e rendimento de gros em uma lavoura de arroz irrigado localizada em uma rea com histrico de ocorrncia da doena. O experimento foi conduzido na safra 2003-04 no municpio de Agudo, Rio Grande do Sul. A semeadura foi realizada em 16 de outubro de 2003 com a cultivar IRGA 417 e utilizandose 122 Kg de semente/ha. A anlise do solo indicou as seguintes caractersticas qumicas antes da semeadura: pH em gua, 5,5; ndice SMP, 6,4; matria orgnica, 1,4 %; fsforo, 6 mg/L e potssio, 27 mg/L. O sistema de cultivo do solo foi convencional e o delineamento experimental foi de blocos ao acaso, com 4 repeties e 8 tratamentos (Tabela 1). As dimenses de cada 2 parcela foram de 3,0 x 4,0 m (12,0 m ). A adubao de base foi aplicada a lano, durante a semeadura. A inundao ocorreu 25 dias depois da emergncia. Dois teros da dose de

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nitrognio de cobertura, sob a forma de uria, foi aplicada 3 dias antes da inundao e o 1/3 restante no estdio V8 da escala de Counce et al. (2000). Os herbicidas Pyrazosulforon e Quinclorac foram aplicados 2 dias antes da inundao nas doses de 20 e 375 g de i.a./ha, respectivamente. Alm do rendimento de gros, determinou-se, aos 15 dias aps a emergncia (dae), o nmero de plantas estabelecidas, e aos 30 dae, o peso seco das plantas afetadas e o nmero de plantas afetadas por metro linear e por metro quadrado. O efeito dos tratamentos 2 sobre o rendimento de gros foi estimado com base na colheita de uma rea til de 4 m /parcela. A anlise de varincia dos dados de rendimento foi realizada com os dados transformados para x e as mdias foram comparadas pelo teste de Tukey, ao nvel de 0,05 de probabilidade. Os nveis de adubao e tratamento de sementes proporcionaram diferenas no rendimento de gros e no teor de massa seca das plantas 30 dias aps a emergncia (Tabela 2). De maneira geral, observou-se que houve uma correlao positiva entre as doses mais elevadas de N, P2O5 e K2O e o rendimento de gros e o teor de massa seca das plantas indicando que, nos tratamentos com maior fornecimento de nutrientes, as plantas reagiram melhor severidade da doena. Nesse aspecto, cabe destacar que as maiores doses de P2O5 e K2O, fornecidas como adubao de base, tambm proporcionaram aumento de rendimento e teor de matria seca. Verificou-se que nenhum dos tratamentos proporcionou diminuio da incidncia de plantas sintomticas, embora tenha se verificado diferena bastante abrangente em valores absolutos entre o tratamento em que se empregou tratamento de sementes e o tratamento testemunha.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS CENTRO INTERNACIONAL DE AGRICULTURA TROPICAL. Capturado em 20 de maio de 2004. On line. http://www.ciat.cgiar.org/ COUNCE, P.A., KEISLING, T.C., MITCHELL, A.J. A uniform, objective, and adaptative system for expressing rice development. Crop Science, v.40, p.436-443. 2000. MORALES, F.J., ARROYAVE, J.A., VELASCO, A.C., CASTAO, M. Caracterizacion parcial del virus del entorchamiento o necrosis rayada del arroz em Colombia. Fitopatologia Colombiana, v.19, p.48-54, 1995. MORALES, F.J., WARD, E., CASTAO J., M., ARROYAVE, J.A., LOZANO, I., ADAMS, M.J. Emergence and partial characterization of rice stripe necrosis virus and its fungus vector in South America. European Journal of Plant Pathology, v.105, p.643-650, 1999. Tabela 1. Descrio dos tratamentos utilizados para avaliao do efeito da adubao e tratamento de sementes no controle de virose em plntulas de arroz. Agudo, RS, safra 2003-04.
Adubao de base* Tratamentos Nitrognio (N) 0 0 15 15 0 10 10 Fsforo (P2O5) 0 60 60 60 40 40 40 Potssio (K2O) 0 90 90 90 60 60 60 Adubao de coberutura Nitrognio (N) 0 0 85 185 0 80 170

1 2 3 4 5 6 7 8

Testemunha Nvel Maior de Fertilidade P e K sem N P e K + 100 kg de N/ha P e K + 200 kg de N/ha Nvel Menor de Fertilidade P e K sem N P e K + 90 kg de N/ha P e K + 180 kg de N/ha Tratamento de sementes + 100 kg de N/ha PeK{ + VitavaxThiram200 SC

15

60

90

85

Os valores de adubao referem-se a doses de N, P2O5 e K2O em Kg/ha.

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Tabela 2. Rendimento de gros, incidncia de sintomas e danos causados pela virose do enrolamento do arroz submetido a diferentes nveis de adubao e tratamento de sementes. Agudo, RS, safra 2003-04.
Rendimento Kg/ha
2

Tratamentos

Emergncia plntulas/m

Plantas com 2 sintomas/m 55,25 55,50 43,38 40,38 45,25 49,75 53,25 65,00 50,97 33,60 0,1224
3

Massa seca das plantas com sintomas/ m linear (g) 13,92 a 12,70 a 15,69 a 14,73 a 12,20 a 7,67 b 6,33 b 7,67 b 11,36 23,18 < 0,0001

4 7 3

P e K + 200 kg de N/ha P e K + 180 kg de N/ha P e K + 100 kg de N/ha + 100 kg de N/ha 8P e K { + VitavaxThiram 6 P e K + 90 kg de N/ha 2 P e K sem N 5 P e K sem N 1 Testemunha Mdia Coef. de variao (%) Probabilidade > F
1 2

7820 a 6483 ab 5340 bc 4723 bc 4350 cd 2831 de 2265 e 2060 e 4484 17,35 < 0,0001

78,44 82,75 80,69 83,75 75,94 77,38 75,50 87,12 80,07 8,82 0,1660

Os valores de adubao referem-se a doses de N, P2O5 e K2O em Kg/ha. Mdias seguidas pela mesma letra no diferem estatisticamente entre si pelo teste de Tukey, ao nvel de 0,05 de probabilidade. 3 As plantas foram avaliadas quanto incidncia de sintomas e concentrao de massa seca, 30 dias aps a emergncia.

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POCAS DE APLICAO E RENDIMENTO DE GROS INTEIROS DETERMINAM A EFICINCIA DE FUNGICIDAS NO CONTROLE DA BRUSONE
Lucas Miura , Luiz Augusto Martins Peruch , Cristiane Maria da Silva e Leonardo B. Scoz . 2 Epagri/Estao Experimental de Itaja, C.P. 277, 88.301-970, Itaja, SC. miura@epagri.rct-sc.br. 3 4 Epagri/Estao Experimental da Urussanga Fundagro/Epagri Estudante do curso de Biologia/Univali
1 2 3 4

A ocorrncia da brusone de pancula causada por Pyricularia grisea tem sido a responsvel por perdas importantes nos cultivos de arroz no litoral catarinense. Estas causas esto relacionadas principalmente ao uso intensivo de cultivares suscetveis (Epagri 108 e 109), a presena de raas fisiolgicas do fungo compatveis com as cultivares e a condies climticas extremamente favorveis ao desenvolvimento da doena. Krieger et al. (2004) e Silva et al. (2004) relatam que num universo de 628 raas, determinaram a prevalncia dos grupos B, D, G, H e I originadas principalmente destas cultivares e suas prognies. O desenvolvimento da planta de arroz, possui duas fases distintas, fase vegetativa e reprodutiva, identificadas pelos estdios V e R, (Sosbai, 2003). A fase reprodutiva fixa, pois independe do ciclo da cultivar. O ciclo varia na durao da sua fase vegetativa (V), onde cultivares de ciclo curto possuem menos folhas que cultivares de ciclo longo (Matsubayashi et al.,1966). Vrios fatores tornam o perodo final do emborrachamento o mais crtico aos danos ocasionados pela doenas: Pyricularia grisea infecta tecidos jovens da planta; o arroz possui um nico perodo de paniculamento (estdios R2 e R3); condies climticas favorveis e a presena de raas fisiolgicas compatveis. Segundo Sosbai, 2003, as aplicaes de fungicidas para o controle da doena devem ocorrer durante o estdio R2 (1 aplicao) e R4 (2 aplicao). Maciel et al. (2003), chamaram a ateno sobre o pequeno nmero de experimentos para comparao de fungicidas, pois em seu trabalho, aps uma safra agrcola, por utilizarem-se de uma nica cultivar e/ou uma nica poca de semeadura, no constataram a incidncia da doena e no encontraram diferenas estatsticas entre os tratamentos O objetivo deste trabalho foi avaliar o controle da brusone de pancula e a sua influncia na produtividade industrial do arroz pela aplicao de fungicidas nas cultivares Epagri 107 e 108, nas pocas R2 e R4. Os ensaios foram conduzidos na rea da Estao Experimental de Itaja/Epagri, no ano agrcola de 2004/5. As duas cultivares avaliadas, Epagri 107 (suscetvel a brusone, de ciclo de 135 dias ) e Epagri 108 (suscetvel a brusone, de ciclo de 150 dias) foram semeados no mesmo dia. O delineamento foi de blocos casualizados, com quatro repeties, sendo a parcela com 4 x 3 m e a rea til de 3 x 2 m. Realizaram-se duas adubaes nitrogenadas em cobertura, na base de 45 kg de N/ha/aplicao. Os tratamentos foram realizados com um pulverizador de presso constante com um gasto de 150 L/ha de calda, nas fases R2 e em R4, de acordo com as recomendaes. Os resultados, Tabelas 1 e 2, demonstram a eficincia dos fungicidas no controle da brusone de pancula. Os tratamentos com uma nica aplicao (R2), Tryciclazole e Azoxystrobin, embora eficientes, comprovam que o perodo crtico do arroz, ultrapassa a fase de enchimento de gros e entram nesta fase sem a devida proteo, pois os testes de rendimento de gros, demonstram que suas produes resultaram em menor quantidade de gros inteiros. Resultados idnticos j foram obtidos por Balardin et al., 2001, Considerando os perodos R2 e R4, como os mais sensveis ao ataque de P. grisea, os fungicidas devem atuar exatamente nestas duas fases. Nestes experimentos, verificou-se que todos os fungicidas, foram estatisticamente superiores aos tratamentos de Flavonides e a Testemunha, demonstrando serem estas fases extremamente sensveis a presena do patgeno. A brusone de pancula (Bpa), constante na Tabela 1, demonstra que a ocorrncia da brusone foi alta (11 a 25% de panculas infectadas ) na cultivar Epagri 107 e na Tabela 2, para a

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cultivar Epagri 108, a incidncia foi mdia (5 a 10%). Em ambas, os tratamentos com fungicidas permitiram produes at 50% superiores. O uso de duas cultivares suscetveis, porm de ciclos diferentes, permitiram a obteno de resultados viveis na comparao de diferentes fungicidas, superando os problemas citados por Maciel et al., 2003. Concluem-se que, o uso de fungicidas deve ocorrer nas duas fases indicadas e que o rendimento de engenho um timo instrumento como indicador da eficincia de fungicidas no controle da brusone de pancula, em arroz, muito mais do que a simples produo a 13% de umidade. Tabela 1. Epagri 107: Produtos, Nmero de aplicaes, Dosagens, Brusone de pancula (Bpa), Produo bruta (kg/ha a 13% de umidade), Rendimento de Engenho ** GI(%)* e Rendimento industrial (kg/ha de GI) . Epagri/EEI, 2005. Produto Trifloxystrobin + Propiconazole Trifloxystrobin + Tebuconazole Tricyclazole Mancozeb + Metil Tiofanato Tricyclazole Flavonides + Tricyclazole Azoxyxtrobin Azoxystrobin + Ciproconazole Azoxystrobin Flavonides Test. * GI(%) Gros Inteiros
1

N apl. 2 2 2 2 1 2 2 2 1 1 0

Dosagem 0,75 L/ha 0,75 L/ha 0,3 kg/ha 3,5 kg/ha 0,3 kg/ha 0,2 g/100 kg + 0,3 kg/ha 0,4 kg/ha 0,4 kg/ha 0,4 kg/ha 0,2 kg/100 kg X

Bpa 2,0 1,5 1,0 4,0 1,5 2,0 2,0 1,0 3,5 4,5 5,0

Kg/ha 8102,69 7671,28 7629,61 7410,17 6993,73 7232,43 7024,94 7165,01 6550,46 5914,49 6335,87

GI(%) 67,42 67,23 67,17 66,18 67,26 65,97 67,13 66,74 65,29 64,1 64,04

Kg/ha GI 5460,21 a 5169,19 ab 5079,54 abc 4902,43 abc 4889,34 abc 4847,64 abc 4801,24 abc 4781,29 abc

4187,62 bcd 3981,62 3636,86 cd d

** Rendimento Industrial kg/ha de Gros Inteiros

Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo Teste de Tukey em nvel de 5% de probabilidade de erro.

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Tabela 2. Epagri 108: Produtos, Nmero de aplicaes, Dosagens, Brusone de pancula (Bpa), Produo bruta (kg/ha a 13% de umidade), Rendimento de Engenho * ** GI(%) e Rendimento industrial (kg/ha de GI) . Epagri/EEI, 2005. Produto Tryfloxystrobin + Tebuconazole Tricyclazole Trifloxystrobin + Propiconazole Tricyclazole Azoxystrobin + Ciproconazole Azoxystrobin Mancozeb + Metil Tiofanato Azoxystrobin Flavonides Test. N apl. 2 2 2 1 2 2 2 1 2 0 Dose 0,750 L/ha 0,300 kg/ha 0,750 L/ha 0,300 kg/ha 0,400 kg/ha 0,400 kg/ha 3,50 kg/ha 0,400 kg/ha 0,200g/100 kg X Bpa 0,25 0,75 0,25 0,50 0,50 0,50 0,50 0,75 1,00 3,00 kg/ha 10454,58 9875,53 8894,35 9261,33 9172,94 9507,65 8815,60 8661,51 7599,37 8046,99 GI(%) kg/ha - G. I.
1

65,81 6769,58 a 65,17 6329,70 ab 65,00 6191,95 bc 62,86 5736,91 bc 63,54 5730,54 bc 62,04 5686,09 bc 61,56 5338,26 62,04 5290,55 56,57 4678,82 57,25 4345,87 cd cd de e

* GI(%) Gros Inteiros ** Rendimento Industrial kg/ha de Gros Inteiros 1 Mdias seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo Teste de Tukey em nvel de 5% de probabilidade de erro. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS BALARDIN, R.S; ASSUTI,J.; STRAIOTO, L. F. e SOUZA, A.D. Avaliao do fungicida Azoxystrobin (Priori) no controle de brusone (Pyricularia oryzae) na cultura do arroz irrigado. In.: CONGRESSO BRASILEIRO DE ARROZ IRRIGADO, 2,.; Reunio da Cultura do Arroz Irrigado, 24. 2001, Porto Alegre, RS. ANAIS..., Instituto Riograndense do Arroz, 2001, p. 341-3. IRRI INTERNATIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Standard Evaluation System for rice. Manilla: INGER/Genetic Resources Center, 1996. 52p. KRIEGER, I; SILVA,C.M. da e MIURA,L. Prevalncia de raas fisiolgicas de Pyricularia grisea no Estado de Santa Catarina. Fitopatologia Brasileira, v.29 (Suplemento), p.S74, Gramado, RS, agosto 2004. MACIEL, J.L.N. & OLIVEIRA, V.P. de. Avaliao de fungicidas para o controle de doenas da parte area do cultivar Epagri 108. In. CONGRESSO BRASILEIRO DE ARROZ,3.; Reunio da Cultura do Arroz Irrigado, 25.; 2003, Bal. Cambori, SC. ANAIS..., Epagri, 2003 p. 335 7. MATSUBAYASHI, M; ITO, R; TAKASE, T; NOMOTO, T. e YAMADA, N. (ed) Theory and Pratice of Growing Rice. Fuji Publishing Co Ltd. Tokyo, Japan, 1966. 527p. SILVA,C.M. da; KRIEGER,I. e MIURA, L. Prevalncia das raas fisiolgicas de Pyricularia grisea em condies de alta presso de inculo (Hot Spot). Fitopatologia Brasileira. V. 29 (Suplemento), p.S269, Gramado, RS. Agosto 2004. SOCIEDADE SUL-BRASILEIRA DE ARROZ IRRIGADO (SOSBAI). Arroz irrigado: recomendaes tcnicas da pesquisa para o Sul do Brasil. Itaja, S. SOSBAI, 2003.126p.

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FREQNCIA DE PATGENOS IDENTIFICADOS EM SEMENTES DE ARROZ (Oryzae sativa), NO ANO DE 2004, NA CLNICA FITOSSANITRIA
Tnia M. Bayer ; Lilian Cerbaro ; Caroline Gulart ; Giuvan Lenz ; Ivan F. D. Costa (DFS/CCR/UFSM)
1 1 1 1 1

O arroz o alimento mais produzido e consumido no mundo. Este cereal o terceiro mais plantado no planeta, atrs apenas do trigo e do milho, so 390 milhes de toneladas anuais. O cultivo feito em 113 pases, distribudos por todos os continentes. um alimento bsico para mais da metade da populao mundial e tambm a principal fonte de renda para cerca de 100 milhes de famlias na sia e frica. O arroz, no Brasil, alcanar uma produo estimada em aproximadamente 11.9 milhes de toneladas de gros na safra 2004/2005, com produtividade mdia de 3,4 ton/ha, em uma rea de aproximadamente 3.515 milhes de hectares. A demanda de consumo brasileiro, estimado em 2005, de 12.751 milhes de toneladas (Atualidades Agrcolas, 2004). A cultura do arroz irrigado no Sul do Brasil tem grande importncia econmica. Os estados do Rio Grande do Sul e Santa Catarina cultivam, juntos, aproximadamente 1,2 milhes de hectares, produzindo mais da metade do arroz brasileiro, cerca de 6.8 milhes de toneladas. O arroz irrigado cultivado nestas regies sob elevados padres tcnicos e as produtividades so superiores a 6 t/ha no RS e 7 t/ha em SC. Mesmo assim, os orizicultores deparam-se com grandes problemas nas lavouras decorrentes da presena de doenas. O arroz irrigado pode sofrer prejuzos com uma srie de doenas, causadas pelos mais diversos patgenos, e que influem decisivamente sobre a produo final da cultura. Estes prejuzos podem alcanar cifras entre 5 e 15% da capacidade produtiva. As principais doenas que podem causar estes danos esto relacionadas ao ataque da rea foliar, reduzindo o potencial fotossinttico e consequentemente a produtividade individual da planta (Bedendo, 1997). Portanto, o objetivo deste trabalho foi determinar a ocorrncia de patgenos associados s sementes e plantas de arroz no ano de 2004, realizado atravs de testes de patologias de sementes, na Clnica Fitossanitria do Departamento de Defesa Fitossanitria, Universidade Federal de Santa Maria. O trabalho foi desenvolvido na Clnica Fitossanitria, no Departamento de Defesa Fitossanitria, na Universidade Federal de Santa Maria, entre os meses de Maio a Dezembro de 2004, atravs de anlises de amostras de sementes de arroz, coletados por produtores de diversas localidades da regio central do Rio Grande do Sul. Para o desenvolvimento do trabalho, as amostras foram submetidas a testes de patologia, atravs do Blotter-test, que consiste na utilizao de caixas germ-box (devidamente esterilizadas), onde so dispostas as sementes de arroz, durante 7 dias (tempo necessrio para o aparecimento do patgeno), em temperatura constante (21C) e fotoperodo de 12/12. Foram feitas 48 anlises, com 8 repeties cada e 25 sementes por repetio, totalizando 384 caixas e 9.600 sementes analisadas. Transcorridos os 7 dias, estas amostras foram submetidas a microscopia estereoscpica e consultas bibliogrficas para a melhor identificao dos patgenos existentes na semente.

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Tabela 1. Freqncia de patgenos associados com sementes de arroz submetidas a anlise, na Clnica Fitossanitria. Santa Maria, 2004. Patgeno Fusarium sp. Cladosporium sp. Phoma sp. Alternaria sp. Helminthosporium sp. Curvularia sp. Nigrospora sp. Rizoctonia sp. Myrothecium sp. Penicilium sp. Trichoderma sp. Graphium sp. Rhizopus sp. Aspergillus sp. Epiccocum sp. Botrytis sp. Freqncia em sementes de arroz (5). 97,92 95,83 93,75 93,75 91,66 83,33 75,00 75,00 60,41 45,43 29,16 27,08 22,92 12,50 12.50 2,08

Os resultados das anlises mostraram alta freqncia de alguns patgenos associados com as sementes recebidas, sendo os mais encontrados Fusarium sp., Cladosporium sp., Phoma sp., Alternaria sp., Helminthosporium sp., Curvularia sp., Nigrospora sp. E Rhizoctonia sp., todos com ndices acima de 70%. Com os resultados obtidos, pode-se concluir que a freqncia de determinados patgenos nas sementes se mostra elevada, podendo comprometer significativamente a produtividade do arroz antes mesmo do perodo reprodutivo, sendo necessria a recomendao de medidas de controle contra estes patgenos, tais como o tratamento de sementes com fungicidas adequados para cada caso, e o manejo da cultura visando a diminuio da incidncia de doenas.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ATUALIDADES AGRCOLAS, O ano do arroz. BASF-S.A. p. 06-16. Agosto/2004. BEDENDO, I. P. Doenas do arroz. In: Kimati et al., 1997, Manual de Fitopatologia, vol. 2. , 3 ed. P. 85-99. http://www.cabi.org/compendia/cpc/ - Rice Datasheet - acessado dia 15/05/05.

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IDENTIFICAO DE GENES QUE CONFEREM RESISTNCIA DE AMPLO ESPECTRO ENVOLVIDOS NA INTERAO ENTRE Magnaporthe grisea E ARROZ
Caren Regina Cavichioli Lamb , Johannes Humbertus Falcade , Joo Leodato Nunes Maciel , (1) Marcelo Gravina de Moraes . Laboratrio de Fitopatologia Molecular, Faculdade de agronomia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, RS, C.P. 15100, CEP 91540-000 2 rcaren@terra.com.br; Embrapa Trigo.
(1) (1) (2)

Um dos obstculos para a manuteno da estabilidade da produo do arroz reside na suscetibilidade dos cultivares atualmente em uso a brusone causada pelo fungo Magnaporthe grisea, considerada a mais importante doena do arroz na maioria dos pases produtores, devido ao seu potencial destrutivo. A maior parte da resistncia explorada pelos programas de melhoramento envolve genes de efeito maior, os quais operam de acordo com a interao gene-a-gene (FLOR 1947, 1971). A resistncia tipicamente especfica raa e, portanto, facilmente perdida por alteraes na dinmica populacional do patgeno, tais como o aumento da freqncia de indivduos de determinadas raas e o surgimento de novas raas do patgeno. Assim, existe uma grande necessidade de desenvolver estratgias buscando resistncia durvel, permanecendo efetiva por mais tempo e permitindo proteo a um amplo espectro de patgeno. Entre as estratgias utilizadas, a resistncia governada por genes de efeito menor um exemplo de mecanismo de defesa que oferece resistncia durvel a doenas contra um amplo espectro de patgenos. As plantas respondem ao ataque de patgenos ativando respostas complexas de defesa atravs de mudanas estruturais e bioqumicas. Um grande nmero de genes relacionados defesa ativado durante a interao planta-patgeno. Em uma interao gene-a-gene, a qual conduz a resposta de hipersensibilidade (RH), ocorre a produo de compostos antimicrobianos, o reforo da parede celular e o estabelecimento de uma resistncia duradoura e de amplo espectro (LU et al., 2004). O objetivo desse trabalho foi o de identificar genes de resistncia de amplo espectro independente da raa do patgeno envolvidos na interao entre M. grisea e arroz atravs da tcnica de hibridizao subtrativa supressiva (SSH), segundo Diatchenko et al. 1996. Para anlise da expresso diferencial foram utilizadas duas linhas quase isognicas (NILs) de arroz: C101A51, que possui o gene de resistncia Pi-2, C104LAC, que possui o gene de resistncia Pi-1 e o cultivar recorrente suscetvel CO39. Os isolados utilizados foram 193.1.1 e 25. As plantas foram desenvolvidas em casa-de-vegetao sob um fotoperodo de 16 h de luz a 32C seguido por 8 h de escuro a 17C. Plantas com 3 a 4 folhas foram inoculadas com uma 5 -1 suspenso de 1,2 x 10 condios.mL . A avaliao da doena foi realizada 15 dias aps a inoculao conforme Irri, 1996. Folhas de plantas inoculadas e no inoculadas foram coletadas aps 72 h para a extrao de RNA, segundo Bugos et al.,1995. O mRNA foi obtido a partir do Kit PolyA Tract mRNA Isolation System IV (Promega) e convertido em cDNA de fita dupla (ds cDNA) atravs da transcrio reversa (RT), adio da causa de PoliA+ e uma extenso de PCR (Reao em Cadeia da Polimerase) utilizando um oligonucleotdeo iniciador oligodt/NOT. As amostras de ds cDNAs geradas foram utilizadas para a construo de quatro bibliotecas. A primeira biblioteca de cDNAs subtrativa foi construda no sentido direto, onde a NIL C101A51, que possui o gene de resistncia Pi-2, foi utilizada como tester e o parente recorrente suscetvel CO39 foi utilizado como driver. A segunda biblioteca foi construda no sentido reverso, onde o parental recorrente suscetvel CO39 foi utilizado como tester e a NIL C101A51 foi utilizada como driver. Dessa forma, os genes induzidos na resistncia sero identificados na primeira biblioteca e os induzidos na suscetibilidade sero identificados na segunda biblioteca. Duas outras bibliotecas idnticas para a NIL C104LAC que possui o gene de resistncia Pi-1, foram construdas, conforme Tabela 1. Os fragmentos de ds cDNAs de cada biblioteca foram digeridos com a enzima de restrio Rsa I (Gibco) a 37C por 3 h. A seguir a amostra de ds cDNAs tester foi dividida em

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duas partes, sendo cada uma ligada a um adaptador diferente, atravs da T4 DNA Ligase (Gibco) a 14C por 16 h. Cada um destes dois adaptadores inclui uma seqncia diferente de anelamento de oligonucleotdeos iniciadores. Aps a ligao dos adaptadores foi realizada a hibridizao subtrativa, em duas etapas. Na 1 hibridizao subtrativa os ds cDNAs foram desnaturados e adicionou-se cDNA driver em excesso de 30 vezes, a cada uma das amostras tester a uma temperatura de 68C por 12 h. A 2 hibridizao foi realizada misturando-se a duas amostras da 1 hibridizao, juntamente com a adio de mais driver desnaturado, durante 24 h a 68C. A seguir, foram realizados dois PCRs supressivos. O PCR primrio, para amplificao inicial dos fragmentos subtrados, foi realizado utilizando um oligonucleotdeo iniciador com seqncia complementar a regio mais externa dos adaptadores. Para obter-se uma especificidade maior, um PCR secundrio foi realizado para a amplificao de fragmentos diferencialmente expressos com uma alquota do PCR primrio reamplificado utilizando oligonucleotdeos iniciadores com stios de anelamento mais interno dos adaptadores. Os fragmentos de ds cDNAs das quatro bibliotecas subtrativas amplificados foram novamente digeridos com Rsa I (Gibco) e ligados no vetor pLITMUS 38i (New England BioLabs) digeridos com Eco RV (Gibco). A reao de ligao foi realizada a 14C por 20 h. Os produtos da reao de ligao foram utilizados para a transformao de Escherichia coli HT115(DE3) eletrocompetentes. Aps a transformao as clulas recombinantes foram incubadas a 37C em agitador orbital por 1 h, em meio LB lquido, antes de serem plaqueadas em meio LB slido seletivo, acrescido de 50 g/mL de ampicilina e 12,5 g/mL de tetraciclina e incubados overnight a 37C. A anlise de colnias recombinantes foi realizada por meio de reao de PCR utilizandose um inculo de cada colnia resistente ao meio seletivo. Os insertos clonados foram identificados com oligonucleotdeos iniciadores universais pUC/M13 baseados no vetor pLITMUS 38i (New England BioLabs). O produto da amplificao foi visualizado em gel de agarose 2% e as bandas visualizadas por meio de colorao com brometo de etdio sobre luz ultra-violeta. At o presente momento, foram obtidas 302 colnias resistentes ao meio seletivo nas quatro bibliotecas, das quais 72 colnias foram recombinantes, pois apresentaram um tamanho, em mdia de 300 a 600 pares de bases quando comparadas com o tamanho em pares de base do vetor vazio (254 pb), conforme Tabela 1 e Figura 1. Essas colnias recombinantes sero submetidas ao seqenciamento atravs do seqenciador automtico ABI-PRISM 3100 Genetic Analizer armado com capilar de 50 cm e polmero POP6 (Applied Biosystems) para posterior comparao das seqncias obtidas com as seqncias de nucleotdeos e protenas depositadas no GenBank: National Center of Biology Information (NCBI, Bethesda, MD, USA), www.ncbi.nlm.nih.gov, atravs do programa de BLAST (Altschul et al., 1997). A tentativa de novas clonagens dos ds cDNAs est sendo novamente executada a fim de obter colnias recombinantes, principalmente em funo dos resultados obtidos com a biblioteca 1. Devido a baixa freqncia de recombinantes com as bibliotecas 2, 3 e 4 novas clonagens sero realizadas. Dessa maneira, as prximas etapas do trabalho sero a clonagem dos ds cDNAs da biblioteca 1, seqenciamento das colnias recombinantes e a identificao de possveis genes de resistncia de amplo espectro envolvidos na interao entre M. grisea-arroz. O resultado esperado deste estudo ser o entendimento dos processos moleculares que ocorrem durante a interao M. grisea-arroz, bem como a caracterizao de genes envolvidos na resposta de resistncia. Posteriormente esses genes, podero ser convertidos em marcadores moleculares especficos, ou, at mesmo, serem utilizados para obteno de plantas transgnicas resistentes brusone e assim incorporados aos programas de melhoramento gentico.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ALTSCHUL, S.F.; MADDEN, T.L.; SCHAFFER, A.A. et al. Gapped BLAST and PSI-BLAST: A new generation of protein database search programs. Nucleic Acids Res, v.25, p.3389-3402, 1997.

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BUGOS, R.C.; CHIANG, V.I.; ZHANG, X.H. et al. RNA isolation from plant tissues recalcitrant to extraction in guanidine. BioThechniques, Natick, v.19, p. 734-737, 1995. DIATCHENKO, L.; LAU, Y.F.; CHAMPBELL, A.P. et al. Suppression subtractive hybridization: a method for generating differentially regulated or tissue-specific cDNA probes and libraries. Proceeding of National Academy of Science of USA, v.93, p.6025-6030, 1996. FLOR, H.H. Inheritance of reaction to rust in flax. Journal of Agricultural Research, Washington, v.74, p.241-262, 1947. FLOR, H.H. Current states of the gene-of-gene concept. Annual Review Phytopathology, v.9, p.275-296, 1971. International Rice Research Institute. Standard evaluation system for rice. Manilla: INGER/Genetic Resources Center, 1996, 52p. LU, G.; JANTASURIYARAT, C.; ZHOU, B.; et al. Isolation and characterization of novel defense response genes involved in compatible and incompatible interactions between rice and Magnaporthe grisea. Theoretical and Applied Genetics, v.108(3), p.525-534, 2004. OU, S.H. A Proposal for an International Program of Research on the Rice Blast Disease. In: ZEIGLER, R.S., LEONG, S.A.; TENG, P.S. (Eds) Rice blast disease. Manila: Cab International, p.109-201, 1985. Agradecimentos: CNPq, UFRGS e ao IRGA. Tabela 1. Modelos utilizados para a identificao de genes de resistncia de amplo espectro nas bibliotecas 1 e 3 e genes de suscetibilidade nas bibliotecas 2 e 4 envolvidos na interao entre Magnaporthe grisea e arroz atravs da tcnica de SSH e nmero de colnias resistentes e recombinantes de cada biblioteca amplificadas com oligonucleotdeos iniciadores pUC/M13. UFRGS, Porto Alegre, RS, 2005. Biblioteca Modelo Colnias Colnias resistentes recombinantes 1 C101A51 tester CO39 driver 127 0 2 CO39 tester C101A51 driver 116 52 3 C104LAC tester CO39 driver 40 16 4 CO39 tester C104LAC driver 25 5 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 P N

Figura

1.

Perfil eletrofortico de colnias no recombinantes (1, 4, 6, 8,9,10,12, 15 e 16) e recombinantes (2, 3, 5, 7, 11, 13, 14 e 16) amplificadas com oligonucleotdeos iniciadores pUC/M13 da biblioteca 3. P= controle positivo (vetor vazio) com tamanho de 254 pb e N= negativo (gua). M= marcador molecular 1 kb (Invitrogen). Os fragmentos foram separados em gel de agarose 2% e corados com brometo de etdio. UFRGS, Porto Alegre, 2005.

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IDENTIFICAO DO CRIE DO ARROZ (Tilletia barclayana) NA REGIO DE SANTA MARIA, RS


Llian Cerbaro ; Caroline Gulart ; Tnia M. Bayer ; Giuvan Lenz ; Carla Zemolin ; Ivan F. D. 1 Costa (DFS/CCR/UFSM)
1 1 1 1 1

A lavoura arrozeira tem se destacado devido modernizao, a qual mudou em aspectos como a introduo de novas cultivares, com maior potencial produtivo, manejo, gerenciamento e sistemas produtivos, que acrescentaram rentabilidade a essa lavoura. O Rio grande do Sul o maior produtor nacional, e sua participao na produo brasileira de aproximadamente 49% do total produzido. A produtividade mdia da lavoura gacha situa-se ao redor de 5.500 kg/ha (Atlas Socio-econmico Rio grande do Sul, 2005) A cultura do arroz, a exemplo das demais espcies cultivadas, est sujeita ao ataque de um grande numero de pragas e doenas, sendo o maior contingente causado por fungos. As doenas que atacam a cultura nos trs sistemas de plantio (terras altas, vrzea mida e irrigado) so praticamente as mesmas, porm com variaes na incidncia e severidade para os diferentes locais e manejo. Entre as diversas doenas que ocorrem atualmente na cultura, detectou-se a presena do fungo Telletia barclayana (Bref.) Saac.& Syd (Ou, 1985), causador da crie de arroz, sobre a cultivar IRGA 420 na safra 2004/2005, na regio de Santa Maria, RS. A sua primeira descrio deste fungo foi realizada em 1896, por Takahashi, que o denominou Neovossia horrida (Ou, 1985). Tem como sinnimos Neovossia barclayana Bref; Tilletia horrida Takah; Tilletia pulcherrima Ellis & L. D. Galloway e Tilletia ajrekari Mundk. A doena observada em campo durante a fase de maturao fisiolgica da semente. O sintoma caracteriza-se por mostrar pequenas pstulas pretas, atravs da ruptura das glumas, ou aparecendo sobre o gro, que fica quebradio como se fosse um dente cariado. Algumas vezes o gro inteiramente substitudo pela massa negra de esporos do carvo. A incidncia da doena favorecida em solos arenosos, chuvas freqentes e com alta luminosidade, alta umidade relativa do ar e temperaturas variando de 25C a 30C, na fase de antese (Singh 1975). Esta doena est presente nas lavouras orizcolas do Rio Grande do sul, causando pequenos danos. Normalmente, so atacados alguns gros de cada pancula sendo estes gros afetados parcialmente. Uma das caractersticas da crie do arroz no ser sistmica. Os telisporos vivem um ano ou mais em condies normais, e tm sido encontrados viveis aps trs anos em gros armazenados. Segundo Ou (1985), tambm podem sobreviver atravs da passagem do trato digestivo dos animais. Ribeiro (1988) afirma que o fungo pode hospedar-se nas sementes de arroz e em diversas gramneas, principalmente nos gneros Brachiaria, Digitaria, Echinochloa e Pennisetum. O objetivo deste trabalho foi relatar a ocorrncia do patgeno na regio central do Estado do Rio Grande do Sul, prximo ao municpio de Santa Maria, RS. Plantas localizadas em reas comerciais de plantio de arroz irrigado apresentaram sintomas da doena. Os esporos do fungo formam uma massa pulverulenta, produzida dentro do ovrio, que permanece coberto pelas glumas. O esporo globoso, irregularmente arredondado, ou as vezes elptico, possui tamanho aproximado de 18,5-23,0 ! m de dimetro e 26,0x18,0-22,0 !m de comprimento, penetra nas flores no momento da florao (antese), formando uma massa de telisporos no interior dos gros atacados. Os telisporos aparecem no gro atacado, na forma de uma massa negra, germinam produzindo espordios no promiclio. Destes, originam-se os espordios secundrios, que so facilmente disseminados pelo vento. Estas plantas foram levadas para a Clinica Fitosssanitaria, da UFSM, e submetidas a analise visual microscpica e estereoscopica, sendo identificada a doena de acordo com suas caractersticas morfolgicas. O principal dano da doena est relacionado com a qualidade dos gros e com a produo de sementes, j que as estruturas do patgeno ficam aderidas as mesmas, porm sem a invaso do embrio. Os espordios se alojam primeiramente no estigma, penetram no estilete alcanando o ovrio, e permanecem entre a camada de aleurona e as pelculas do gro; com a digesto do endosperma, forma-se uma cmara para o desenvolvimento dos soros (Singh &

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Pavgi,1973 apud Ou, 1985). Sendo assim o seu dano no tem grande importncia econmica, no necessitando de controle qumico, por ser uma doena de ocorrncia espordica. Como medida preventiva pode-se usar variedades tolerantes, sementes sadias e uma adubao nitrogenada adequada pois a incidncia da doena aumenta com a aplicao de fertilizantes nitrogenados em plantios tardios (Ou, 1985).

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ATLAS SOCIOECONOMICO RIO GRANDE DO SUL. 2005. Capturado em 25 Maio/2005. Online Disponvel na Internet http://www.scp.rs.gov.br/atlas/atlas.asp?menu=264 EMBRAPA. 1999. Recomendaes tcnicas da pesquisa para o Sul do Brasil.Pelotas: Embrapa Clima Temperado, IRGA/EPAGRI, , 124 p.(Embrapa Clima Temperado.Documento, 57) FORNASIERI FILHO, D. & FORSIERI, J. L. 1993. Manual da cultura do arroz. Jaboticabal, FUNEP, 221p. GALLI, F. 1980. Manual de Fitopatologia. v. 2. 2 ed, Ed. Agronmica Ceres, 587 p. MACHADO,J. C. 1994. Padres de tolerncia de patgenos associados a semente. Reviso Anual De Patologia de Plantas, 2:229-263. OU. S.H. 1985. Rice diseases. 2 ed. Kew, Surrey, England. Commonwealth Micological Society, p. 307-335. RIBEIRO 1988. Identificao de fontes de resistencia mancha parda em arroz irrigado. Pesquisa Agropecuria Brasileira. 21:393-397. SINGH, D.S. & PAVGI, M.S. 1973. Evaluation of some fungicides against Pyricularia penniseti causing brown leaf spot of bajra. Hindustan Antibiotics Bulletin. 16:97-100.

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INTERFERNCIA DE DOENAS NO RENDIMENTO DE GROS DO ARROZ IRRIGADO EM FUNO A POCA DE SEMEADURA


Hctor Vicente Ramrez, Joo Leodato Nunes Maciel, Carlos Henrique Paim Mariot, Valmir Gaedke Menezes, Alexandre Lul Lima, Catiane Mirapalhete dos Santos. IRGA Estao Experimental do Arroz, Caixa Postal 29, CEP 94930-030, Cachoeirinha-RS. E-mail: irgafito@viars.net Palavras-chave: manejo cultural, brusone, escaldadura, mancha parda.

Dentre os diversos fatores, as doenas fngicas podem interferir negativamente na produtividade da cultura do arroz irrigado no Rio Grande do Sul (RS). Destacam-se como principais doenas a brusone, mancha parda, mancha de gros, escaldadura, rizoctoniose, entre outras. A incidncia dessas doenas pode ser alterada por vrios fatores, tais como cultivares, manejo da lavoura (densidade de semeadura, adubao, manejo da gua) e poca de semeadura (temperatura e radiao solar). Esse trabalho teve como objetivo avaliar a incidncia das principais doenas do arroz irrigado sobre o rendimento de gros em funo de diferentes pocas de semeadura. O experimento foi conduzido durante a estao de crescimento de 2004/05 na Estao Experimental do Arroz (EEA) do IRGA, em Cachoeirinha-RS, localizada aproximadamente a 30 latitude sul e 51 de longitude oeste que apresenta clima tipo Cfa. As principais caractersticas fsico-qumicas da rea, conforme a anlise de solo so: 15% de argila; 1,2 % de matria -1 -1 -1 -1 orgnica; 13 mg L de fsforo; 36 mg L de potssio; 1,3 cmolc L de calcio; 0,5 cmolc L de magnsio. O delineamento experimental foi o de blocos ao acaso com quatro repeties e os tratamentos arranjados em parcelas sub-sub-divididas. Os tratamentos constaram de cinco pocas de semeaduras (09/10; 29/10; 19/11; 01/12 e 22/12/04); trs cultivares (BR-IRGA 410, IRGA 417 e IRGA 420) e dois tratamentos fungicidas: uma sem e outro com aplicao-fungicida. As pocas de semeadura foram locadas nas parcelas principais, as cultivares nas sub-parcelas e 2 a aplicao-fungicida nas sub-sub-parcelas. As unidades experimentais mediram 10 m de rea (2 m x 5 m), constitudas de 10 linhas de arroz. As semeaduras foram realizadas no sistema -1 convencional em linhas, espaadas em 20 cm entre si, na densidade de 120 kg ha de sementes. -1 Foi utilizado o fungicida azoxystrobin (priori) na dose de 100 g ia ha , aplicado em duas vezes, a primeira aplicao foi no inicio da emisso da pancula (3-5%) e a segunda, aos 15 dias aps a -1 primeira, usando uma vazo de 150 L ha . As demais prticas culturais foram realizadas conforme as recomendaes tcnicas da pesquisa para a cultura do arroz irrigado na regio sul do Brasil (SOSBAI, 2003). Os parmetros avaliados foram rendimento de gros em uma rea de 6,4 m (1,6 x 4m) e a severidade das doenas (mancha parda, escaldadura e brusone). Para a avaliao das doenas, adotaram-se escalas diagramticas preconizadas pelo sistema internacional de avaliao de doenas do arroz (International Rice Research Institute, 1996) em 10 plantas escolhidas ao acaso por parcela no estdio R7 da escala de Counce et al. (2000). A anlise estatstica dos parmetros foi atravs do F-teste e a comparao entre mdias dos tratamentos pelo teste de Duncan, ao nvel de 5% de probabilidade. O rendimento de gros variou em funo das pocas de semeadura, das cultivares e em funo do tratamento com fungicida (Tabela 1). O rendimento diminuiu na medida em que as semeaduras foram sendo atrasadas, independente da cultivar ou do tratamento com fungicida. O maior rendimento alcanado foi na semeadura do incio de outubro para todas as cultivares, com e sem fungicida. A semeadura de final de outubro foi similar do inicio do ms para as cultivares BR-IRGA 410 e IRGA 420 nas reas em que houve tratamento com fungicida. A cultivar IRGA 417 produziu menos na segunda poca, independente se as reas foram ou no tratadas com fungicida. Para as demais pocas de semeadura, houve reduo do rendimento para todas as cultivares, independente do tratamento com fungicida. Sendo que a cultivar IRGA 420 foi a que menos reduziu a produtividade em funo da poca de semeadura. Com relao ao tratamento

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para doenas fngicas, a cultivar que melhor respondeu ao uso de fungicida foi a BR-IRGA 410. Para as demais cultivares, o uso de fungicidas no proporcionou ganhos de rendimento. A presena de doenas foi mais acentuada medida que houve atraso nas pocas de semeadura, e a severidade de doenas diminuiu nas parcelas tratadas com fungicida (Figura 1). Das doenas avaliadas, as que apresentaram maior grau de severidade foram escaldadura, bruzone e mancha parda. Rizoctoniose e mancha dos gros a severidade foi muito baixa. Entretanto, o menor rendimento observado nas pocas semeadas mais tarde no deve ser atribudo somente maior severidade de doenas. Contriburam para tanto, a reduo da radiao solar, principalmente, e a ocorrncia de temperaturas menos favorveis para o desenvolvimento da cultura. Com base nos resultados desse experimento conclui-se que: o grau de severidade das doenas avaliadas mais acentuado medida que se atrasa a poca de semeadura; o fungicida azoxystrobin reduz o grau de severidade das doenas avaliadas e o impacto do uso de fungicida no rendimento de gros est relacionado com a cultivar e a poca de semeadura.

Tabela 1. Rendimento de gros do arroz irrigado, em funo da poca de semeadura e do tratamento com fungicida, EEA/IRGA, Cachoeirinha-RS, 2005. BR_IRGA 410 IRGA 417 IRGA 420 Com Sem Com Sem Com Sem fungicida fungicida fungicida fungicida fungicida fungicida -1 -----------------------------------------------(Mg ha )-------------------------------------------A 10,0 a A 10,0 a A 8,0 a A 8,3 a A 10,0 a A 10,3 a A 9,6 a B 8,4 b A 6,8 ab A 6,0 b A 9,8 a A 9,2 ab A 7,4 b B 6,3 c A 5,1 cd A 4,6 c A 8,0 b A 7,5 c A 6,9 b A 6,5 c A 6,2 bc A 5,5 bc A 8,2 b A 8,1 bc A 5,5 c B 4,5 d A 4,4 d A 4,3 c A 7,8 b A 8,1 bc 11,1

poca semeadura 09/10/04 29/10/04 19/11/04 01/12/04 22/12/04 CV (%)


1

Nas colunas, mdias seguidas pela mesma letra minscula ou nas linhas, mdias seguidas pela mesma letra maiscula no diferem entre si pelo teste de Duncan, a 10% de probabilidade.

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3,50 3,00 2,50 2,00 1,50 1,00 0,50 0,00 1 2 3 4 5 poca de sem eadura

C/ FUNGICIDA S/ FUNGICIDA

5,00 4,00 3,00 2,00 1,00 0,00 1 2 3 4 5 poca de sem eadura

C/ FUNGICIDA S/ FUNGICIDA

2,50 2,00 1,50 1,00 0,50 0,00 1 2 3 4 5 poca de sem eadura

C/ FUNGICIDA S/ FUNGICIDA

Figura 1. Grau de severidade das doenas Mancha Parda (A), Escaldadura (B) e Brusone (C) nos tratamentos com e sem fungicida, em funo de poca de semeadura, EEA/IRGA, Cachoeirinha-RS, 2004/05.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS COUNCE, P. A.; KEISLING, T. C.; MITCHELL, A. J. A uniform, objective, and adaptive system for expressing rice development. Crop Science, v. 40, p. 436-443, 2000. INTERNATIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Standard evaluation system for rice. Manila: INGER-Genetic Resources Center, 1996. 52 p. SOCIEDADE SUL-BRASILEIRA DE ARROZ IRRIGADO (SOSBAI). Arroz irrigado: recomendaes tcnicas da pesquisa para o Sul do Brasil. Itaja: SOSBAI, 2003, 126p.

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ISOLAMENTO E DETECO DO VRUS CAUSADOR DO ENROLAMENTO DO ARROZ


Marcos Vinicios de Souza, Jeferson Mateus Dariva, Marcelo Gravina de Moraes. Laboratrio de Fitopatologia Molecular, Departamento de Fitossanidade, Faculdade de Agronomia, UFRGS. Av Bento Gonalves, 7712, CEP 91540-000, Porto Alegre, RS. E-mail: marcos.souza@ufrgs.br

O enrolamento do arroz uma doena emergente no Estado do Rio Grande do Sul (RS). A partir da safra 2001/2002, a ocorrncia de sintomas dessa doena do arroz foi observada em diversas lavouras da Depresso Central do RS. Anlises das plantas doentes culminaram no primeiro diagnstico do enrolamento no territrio brasileiro (MACIEL et al., 2002, 2004). Na Colmbia, em algumas reas arrozeiras, o cultivo do arroz foi abandonado em funo da doena, que pode provocar perdas de at 50%. O agente causal do enrolamento do arroz o Rice stripe necrosis virus (RSNV), gnero Benyvirus. Os sintomas observados em plantas de arroz infectadas com o patgeno ocorrem no primeiro ms da semeadura (CALVERT & SEDANO, 2001) e so: morte de plntulas, folhas com listras clorticas ou amareladas, que depois se tornam necrticas, e retorcimento de folhas e panculas (HIBINO, 1996; Morales et al., 1999; Maciel et al., 2002). As razes de plantas infectadas podem apresentar-se dobradas e logo se tornarem necrticas (CALVERT & SEDANO, 2001). O exame do sistema radicular de plantas com sintomas revela a presena de cistosoros contendo agrupamentos irregulares de esporos de resistncia maduros do protozorio Polymyxa graminis, vetor de RSNV (MORALES et al., 1995a, 1995b, 1999). Pouco se conhece sobre o RSNV, sobretudo a seqncia do seu genoma. O objetivo deste trabalho a identificao de seqncias do genoma viral que possibilitem sua deteco em plantas de arroz atravs da tcnica de transcrio reversa acoplada reao em cadeia da polimerase (RT-PCR). Plantas do cultivar EPAGRI 108 apresentando sintomas de enrolamento foram coletadas em lavouras do municpio de Dona Francisca, RS, e submetidas a um protocolo de purificao parcial de vrus adaptado do Centro Internacional de la Papa - CIP (2004). A partir deste material enriquecido com RSNV, isolou-se o RNA total pelo mtodo de Bugos et al. (1995). Uma biblioteca de cDNAs foi construda a partir desse RNA pela sntese de cDNAs de fita dupla (ds cDNAs) pela transcrio reversa da primeira fita de cDNA atravs da utilizao de oligos poliT. A seguir realizou-se a polimerizao da segunda fita de cDNA utilizando oligos hexmeros. Os ds cDNAs foram digeridos com Eco RV e Alu I e ligados no plasmdeo pLITMUS 38i previamente digerido com Eco RV. Por fim, os produtos da ligao foram utilizados na transformao de Escherichia coli XL-1 por eletroporao (MicroPulser, Bio-Rad). Essa biblioteca foi usada para construir um macroarranjo de cDNAs que foi hibridizada contra trs sondas fluorescentes. Essas sondas foram sintetizadas atravs da reao de RT, sob condies similares s realizadas para construo da biblioteca, exceto pela adio de fluorescein-11-dUTP (FluoroGreen, Amersham Pharmacia Biotech). A segunda fita de cDNA tambm foi marcada com fluorescein-11-dUTP. A sonda denominada 108-RSNV foi preparada com o mesmo RNA usado na preparao da biblioteca descrita anteriormente. J as sondas denominadas 409-RSNV e 409 foram preparadas a partir dos RNAs de plantas do cultivar BR IRGA 409 infectado e no infectado com RSNV, respectivamente. Esse experimento biolgico com o cultivar BR IRGA 409 foi realizado sob condies controladas. Dois vasos, sendo um preenchido com solo coletado de lavouras com enrolamento e restos de razes de plantas doentes e outro com solo no inoculado, foram semeados com 25 sementes cada um e mantidos com umidade abaixo da saturao at as plntulas emergirem e atingirem entre 3-4 cm. A partir desse ponto o solo foi saturado. Os vasos foram mantidos em -1 estufas e adubados com N na forma de uria (50 Kg de N.ha antes da semeadura e 50 kg de N. -1 ha 15 dias aps a semeadura, d.a.s.). As plantas foram coletadas 40 d.a.s., quando os sintomas de enrolamento eram evidentes nas plantas conduzidas em vasos inoculados.

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Oitenta e seis clones foram obtidos na biblioteca de cDNAs. Destes, 39 hibridizaram seletivamente com sondas contendo RSNV (Figura 1). Dez clones foram seqenciados e apenas MV006 (249 pb), MV007 (206pb) e MV140 (431pb) no apresentaram similaridades com seqncias depositadas no banco de genes (GenBank) utilizando os programas Blast (ALTSCHUL et al., 1997) e Rpsblast (MARCHLER-BAUER & BRYANT, 2004). Esses resultados reforam sua associao com RSNV, pois esse no apresenta seqncias previamente descritas. Das seqncias candidatas a RSNV, o clone MV007 serviu como base para o desenho de oligos especficos (RSNV7-1 e RSNV7-2), complementares as extremidades do clone e orientados para amplificar sua regio interna. Uma RT-PCR utilizando esses oligos foi realizada para deteco de RSNV nas amostras de RNA analisadas (Figura 2) e amplificou um fragmento de 194 pb somente nas amostras contendo o vrus. Esse resultado indica a existncia de especificidade do mtodo de deteco. As prximas etapas do trabalho devero testar a especificidade e a sensibilidade da tcnica em um nmero maior de amostras de campo.
1 Sondas:: 409-RSNV . 409. 108-RSNV 2 3 1 4 5 6 7

Figura 1. Anlise por macroarranjo dos clones da biblioteca de EPAGRI 108 enriquecido com RSNV. Cada plasmdeo contendo inserto foi extrado de E. coli XL1 e aplicado na membrana de nitrocelulose. Foram produzidas trs membranas que hibridizaram contra as trs sondas originadas a partir dos RNAs poliA de BR IRGA 409 infectado com RSNV (409-RSNV), de BR IRGA 409 sem o vrus (409) e de EPAGRI 108 enriquecido com RSNV (108-RSNV). O Filme de Raio-X (Kodak) foi revelado aps 15 h de exposio s membranas e mostrou a ocorrncia de cada clone nas trs amostras de RNA. MV007 (2), MV006 (4) e MV140 (6) ilustram trs clones seletivamente com sondas contendo RSNV. (1) representa o cDNA de actina de arroz (controle positivo). (3, 5 e 7) representam trs clones no associados a RSNV.
P 1 2 3 4 5 6

Figura 2. Deteco de RSNV por RT-PCR. O RNA total de BR IRGA 409 infectado com RSNV (409-RSNV) e no infectado (409) e de EPAGRI 108 infectado com RSNV (108-RSNV) e no infectado (108) foram usados como molde para a sntese do cDNA na RT com o oligo RSNV7-1. Em seguida os cDNAs foram amplificados atravs da PCR com a combinao dos oligos RSNV7-1 e RSNV72. (P) Padro de peso molecular 1kb (Gibco); (1) 409-RSNV (2) 409; (3) 108RSNV; (4) 108; (5) Controle negativo; (6) Controle positivo (MV007). A seta indica o produto esperado (194 pb). O RNA de EPAGRI 108 no infectado foi gentilmente cedido por Flvia Vanina Ferreira, LFM/UFRGS.

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REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS: ALTSCHUL, S.F.; MADDEN, T.L.; SCHFFER, A.A. et al. "Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs". Nucleic Acids Research. v. 25, p.3389-3402, 1997. BUGOS, R.C.; CHIANG, V.L.; ZHANG, X.H. et al. RNA isolation from plant tissues recalcitrant to extraction in guanidine. BioTechniques, v. 19, p. 734-737, 1995. CALVERT, L.; SEDANO, R. Caracterizacin de la Enfermedad del Entorchamiento. Un complejo de Polymyxa graminis y el virus de la necrosis rayada del arroz. Proyecto IP-4. Mejoramiento del Germoplasma de Arroz para America Latina Y El Caribe. CIAT. Informe Anual, 2001. Disponvel na internet: <http://www.ciat.cgiar.org/riceweb/esp/pdf/ contenido_introduccion.pdf> Acesso em 13 set 2004. CIP. Lima, Peru, Centro Internacional de la Papa, 1996-2002. Techniques in plant virology. Disponvel na internet: <http://www.cipotato.org/training/Materials/PVTechs/ Fasc5.2(99). pdf> Acesso em 29 mar 2004. HIBINO, H. Biology and epidemiology of rice viruses. Annual Review of Phytopathology. v. 34, p. 249-274, 1996. MACIEL, J.L.N.; MENEZES, V.G.; RAMIREZ, H. et al. Ocorrncia do vrus RSNV (Rice Stripe o Necrosis Virus) em lavouras de arroz do Rio Grande do Sul. Anais do 1 Congresso da Cadeia Produtiva de Arroz/ VII Reunio Nacional de Pesquisa de Arroz. Florianpolis, SC, p. 491-492, 2002. MACIEL, J.L.N.; MORAES, M.G.; ALMANA, M.A.K. et al. Ocorrncia do vrus RSNV (Rice Stripe Necrosis Virus) em lavouras de arroz do Rio Grande do Sul. Fitopatologia Brasileira, 2004. (trabalho aceito para publicao 04115). MARCHLER-BAUER, A. e BRYANT, S.H. CD-Search: protein domain annotations on the fly. Nucleic Acids Research. v. 32, p. 327-331, 2004. MORALES, F.J.; ARROYAVE, J.A.; VARON F. et al. Entorchamiento: una nueva enfermedad viral del arroz en Colombia. Ascolfi Informa, v. 21, p. 52-54, 1995a. MORALES, F.J.; ARROYAVE, J.A.; VELASCO, A.C. et al. Caracterizacin parcial del entorchamiento o necrosis rayada del arroz en Colombia. Fitopatologia Colombiana, v. 19, p. 48-54, 1995b. MORALES, J.F.; WARD, E.; CASTAO, M. et al. Emergence and partial characterization of rice stripe necrosis virus and its fungus vector in South America. European Journal of Plant Pathology, v. 105, p. 643-650, 1999.

Agradecimentos: CAPES e UFRGS.

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POTENCIAL DE BIOCONTROLE DA QUEIMA-DAS-BAINHAS EM ARROZ IRRIGADO, PELA MICROBIOLIZAO DAS SEMENTES, EM CASA-DEVEGETAO
Juliane Ludwig , Andra B. Moura , Israel L. Medina . Universidade Federal de Pelotas FAEM/DFs - Campus Universitrio s/n, C.P. 354, CEP:96010-900. juludwig@yahoo.com.br
1 1 1 1

O arroz (Oryza sativa L.) uma gramnea anual, cultivada na maioria dos continentes (Chadler, 1984), sendo um dos principais componentes da dieta humana (FAO, 2005). No entanto, essa cultura geralmente atacada por vrias doenas cujos danos provocam perdas na produtividade, interferindo na qualidade fisiolgica e sanitria das sementes (Ribeiro, 1994). O fungo Rhizoctonia solani (Kuhn) agente causal da queima-das-bainhas, ataca primeiramente as bainhas foliares na altura da lmina dgua, onde surgem os primeiros sintomas (Lee & Rush, 1987). Dependendo da severidade da doena, pode ocorrer acamamento das plantas e esterilidade das espiguetas (Nunes et al, 2004). Uma das formas de controle seria o uso de cultivares resistentes, no entanto no h ainda a presena de fontes de resistncia para essa doena (Bonmann et al., 1992). As dificuldades de controle tambm so ocasionadas pela grande capacidade de sobrevivncia do patgeno (Prabhu et al., 1999) e sua ampla gama de hospedeiros (Nunes et al., 2004). Embora existam fungicidas registrados para o controle da queima-das-bainhas, seu uso eleva os custos de produo. Assim, a busca por outras formas de controle parece ser um caminho vivel, que poder aumentar o rendimento da cultura, sem, no entanto, aumentar os custos e os efeitos deletrios ao meio ambiente. Neste sentido, o presente trabalho objetivou avaliar o potencial de biocontrole de bactrias pr-selecionadas por Ludwig et al. (2004), no controle de R. solani, em casa-devegetao. Aps 24 horas de crescimento em meio de cultura 28C, os isolados bacterianos DFs185 (Pseudomonas sp.), DFs223 (P. amygdali) e DFs306 (ainda no identificado), foram preparados na forma de suspenso, adicionando-se soluo salina (NaCl 0.85%) a cada um dos isolados, sendo a concentrao ajustada para OD540=0,5. Sementes da cultivar El Passo foram microbiolizadas, sob agitao, em cada uma das suspenses, durante 30 minutos temperatura de 10C. Como testemunha, sementes foram imersas somente em soluo salina (T) e em salina mais o fungicida Carboxin+Thiran (T+F) na concentrao de 3mL/Kg de semente. O ensaio foi conduzido em casa-de-vegetao no climatizada, em vasos com capacidade para 5Kg. O delineamento do experimento foi inteiramente casualizado, com cinco repeties. Durante a conduo do ensaio, as plantas foram mantidas em solo encharcado, porm sem inund-lo. Quando as plantas atingiram o estdio V3 (Counce et al. 2000), o solo de cada vaso foi infestado com quatro gramas de substrato previamente colonizado com R. solani. O substrato foi composto por gros de arroz com casca (75%) e casca de arroz (25%), mantido umedecido por 24 horas, e posteriormente autoclavado (Dode, 1993). Aps resfriamento, o substrato foi transferido para placas de Petri estreis, onde foram repicados pores de meio de cultura colonizados por R. solani, e incubadas por 7 dias. As infestaes, num total de quatro, foram realizadas com intervalo de 30 dias, at a florao. A avaliao do ensaio foi realizada quando a maioria das plantas encontrava-se no ponto de colheita. Foram avaliados a severidade da doena, atribuindo-se notas de 1 a 9, de acordo com a intensidade de sintomas e porcentagem de rea atacada (IRRI, 1975) e determinados os pesos da matria seca de razes e da parte area, obtidos aps quatro dias de permanncia em estufa 60C. Aps avaliao, submetendo-se os resultados anlise estatstica, constatou-se a superioridade do isolado DFs223 em todas as variveis estudadas (Tabela 1). No que se refere severidade (nota), este proporcionou um nvel de controle de 59%, seguido pelo isolado DFs185, cujo controle foi de 30%, entretanto, apenas o primeiro foi estatisticamente superior testemunha, sem, no entanto, diferir significativamente do demais tratamentos. O impacto da

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microbiolizao possivelmente tenha sido subestimado, uma vez que em ensaio anterior a porcentagem de reduo da severidade, avaliada 47 dias aps o semeio, provocada por estes isolados foi maior (Ludwig, 2005). O perodo prolongado entre a aplicao do biocontrolador e a avaliao do presente ensaio pode ter contribudo para este comportamento, pois alguns biocontroladores apresentam efeitos por pequeno perodo de tempo, como foi relatado para Bacilllus megaterium, que passados 20 dias de sua aplicao, no possibilitou mais a reduo da queima-das-bainhas (Wiwattanapatapee et al., 2004). Ao avaliar-se o nmero de panculas (NPA) e o nmero de perfilhos (NPE), o isolado DFs223 foi superior aos demais tratamentos, mostrando-se estatisticamente superior apenas testemunha (Tabela 1). Relacionado ao peso da matria seca da parte area (PSA), todos os isolados mostraram-se estatisticamente iguais testemunha, no entanto, o isolado DFs223 foi o nico que diferiu estatisticamente do tratamento com fungicida, aumentando em 60% o peso em relao esta. Quanto ao peso da matria seca de razes (PSR), o isolado DFs223 mostrou-se significativamente superior a todos os tratamentos, incrementando em 112% o peso em relao testemunha (Tabela 1). Cogita-se a hiptese de que o fungicida possa ter afetado de forma negativa a microbiota do solo, resultando na diminuio do peso seco tanto da parte area quanto de razes. Tabela 1. Influncia da microbiolizao de sementes de arroz na severidade da doena (nota), nmero de panculas (NPA), nmero de perfilhos (NPE), peso da matria seca da parte area (PSA) (g) e peso da matria seca de razes (PSR) (g), de plantas conduzidas em casa-de-vegetao. Tratamento DFs185 DFs223 DFs306 Test Nota* 1,78ab 1,05a 2,19ab 2,54b
1

NPA 3,50b 5,0a 4,0ab 3,5b


1

NPE 4,0b
1

PSA 9,51ab
1

PSR 11,65bc 31,88a 17,72b 14,97b


1

7,25a 5,5ab 4,0b

12,76a 10,64ab 11,95a

Test+ Fung 2,11ab 3,75ab 5,5ab 7,97b 5,40c 1 Mdias seguidas de mesma letra, na coluna, no diferem entre si pelo teste de Tukey a 5%. Mdia de cinco repeties. Test= Testemunha tratada com salina; Test+Fung= Tratamento com salina mais o fungicida Vitavax+Thiran *Valores transformados para
x + 0,5

Como as sementes foram microbiolizadas, e estando os biocontroladores, presentes desde o incio do processo germinativo, e, sendo estes capazes de colonizar o sistema radicular das plantas de arroz (Zanatta et al., 2004), provavelmente estabeleceram-se no solo. possvel, portanto, pensar que essas bactrias possam tambm ter colonizado, a partir das sementes, tecidos da parte area como foi aventado por Mew e Rosales (1986). Os isolados DFs185, DFs223 e DFs306 podem ser considerados como promissores, mesmo quando seus efeitos so comparados aos proporcionados por isolados utilizados para o controle da queima-das-bainhas em arroz por outros pesquisadores. Os trabalhos em questo mostram que, em geral, necessrio a utilizao de combinao de bactrias eficientes (Commare et al., 2002) e/ou mtodos de aplicao dos biocontroladores (Commare et al., 2002; Nandakumar et al., 2001) para se alcanar resultados satisfatrios em termos de reduo de severidade e aumento de produo, tanto em casa-de-vegetao quanto a campo.

534

Assim, possvel concluir que, embora os isolados tenham apresentado bom potencial de controle da queima-das-bainhas do arroz, estudos no sentido de verificar seu potencial a campo so necessrios, bem como aqueles que visem verificar mecanismos de ao, colonizao e sobrevivncia destes.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS BONMANN, J.M.; KHUSH, G.S.; NELSON, R.J. Breeding rice for resistance to pests. Annual Review of Phytopathology, v.30, p.507-528, 1992. CHADLER, R.F. Arroz em los trpicos: guia para el desarollo de programas nacionales. San Jos. Costa Rica: IICA, 1984. 304p. COMMARE, R.J.; NANDAKUMAR, R.; KANDAM, A.; SURESH, S.; BHARATHI, M.; RAGUCHANDER, T.; SAMIYAPPAN, R. Pseudomonas fluorescens based bio-formulation for the management of sheath bligth disease and leaffolder insect in rice. Crop Protection, v.21, p.671-677. 2002. COUNCE, P.A.; KEISLING, T.C.; MITCHEL, A.J. A uniform, objective and adaptative system for expressing rice development. Crop Science, v.40, p. .2000. DODE, L.B. Avaliao da resistncia de arroz queima das bainhas (Rhizoctonia solani Knh) atravs de diferentes mtodos. Pelotas, UFPel, 1993. 97f. Dissertao de Mestrado. FAO. Disponvel em: http://apps.fao.org/page/collection/2005. Acesso: 9 de maio de 2005. INTERNACIONAL RICE RESEARCH INSTITUTE. Sistema de Evaluacin Stndart para Arroz. Los Baos, 1975. 64p. LEE, F.N.; RUSH, M.C. Rice sheath bligth: a major rice disease. Plant Disease, v.67, n.7, p.829832. 1987. LUDWIG, J.; MOURA, A.B.; SOUZA, A.S. Potencial de isolados bacterianos, no biocontrole de Rhizoctonia solani, em casa-de-vegetao, em duas pocas diferentes. CONGRESSO DE INICIAO CIENTFICA E ENCONTRO DE PS GRADUAO, 13, 2004, Pelotas. Anais...Pelotas, 2004. LUDWIG, J. Biocontrole de doenas no arroz irrigado (Oryza sativa L.) pela microbiolizao de sementes. Pelotas, UFPel, 2005. 36f. Dissertao de Mestrado MEW, T.W.; ROSALES, A.M. Bacterization of rice plants for control of sheath blight caused by Rhizoctonia solani. Phytopathology, v.76, n.11, p.1263-1264. 1986. NANDAKUMAR, R.; BABU, S.; VISWANATHAN. R.; RAGUCHANDER, T.; SAMIYAPPAN, R. Induction of sistemic resistance in rice against sheath blight disease by Pseudomonas fluorescens. Soil Biology & Biochemestry, v.33, p.603-612. 2001. NUNES, C.D.; RIBEIRO, A.S.; TERRES, A.L. Principais doenas do arroz irrigado e seu controle. In: GOMES, A.S.; MAGALHES JUNIOR, A.M. Arroz Irrigado no Sul do Brasil. Braslia: Embrapa Informao Tecnolgica, 2004, p. 579-633. PRABHU, A.S.; FILIPPI, M.C.; RIBEIRO, A.S. Doenas e seu controle. In: VIEIRA, N.R. de A.A.; SANTOS, A.B. dos; SANTANA, E.P. A cultura do arroz no Brasil. Santo Antnio de Gois. Embrapa Arroz e Feijo, 1999. p. 262-307. 1999. RIBEIRO, A.S. Avaliao crtica dos projetos do PNP-Arroz na rea de fitopatologia, no perodo de 1980 a 1990-Estados do Rio Grande do sul e Santa Catarina. REUNIO NACIONAL DE PESQUISA DO ARROZ IRRIGADO, 4,1994, Goinia. Anais...Goinia, 1994. p.177-213. WIWATTANAPATAPEE, R.; PENGOO, A.; KANJANAMANEESATHIAN, M.; MATCHVANICH, W.; NILRATANA, L.; JANTHARANGSRI, A. Floating pellets containing bacterial antagonist for control sheath blight of rice: formulations, viability and bacterial release studies. Journal of Controlled Release, v.95, p. 455-462. 2004. ZANATTA, Z.C.N.; SCHAFER, J.T.; MOURA, A.B.; LUDWIG, J.; SANTOS, A.S. Colonizao do sitema radicular de sementes de arroz por rizobactrias biocontroladoras e promotoras de crescimento. Fitopatologia Brasileira, v.29 (Suplemento), p. 175. 2004 (Resumo)

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PREVALNCIA DE RAAS FISIOLGICAS DE PYRICULARIA GRISEA NA SAFRA 2004/2005 EM SANTA CATARINA


Cristiane Maria da Silva , Lucas Miura , Izabel Krieger , Leonardo B. Scoz , Maycon Eduardo 5 Nicoletti . 1- Fundagro/Epagri, 2-Epagri-Estao experimental de Itaja, 3 - UDESC-Mestrado em Produo Vegetal, 4-Univali-Curso de Cincias Biolgicas, 5- Epagri/PRODETAB crisbiotec@terra.com.br, Rod. Antonio Heil, Km06. Cep: 88.301-970, cp:277, Itaja/ SC.
1 2 3 4

O arroz (Oryza sativa) uma cultura extensamente cultivada em todo o mundo e constitui a base da alimentao de muitos pases, incluindo o Brasil. A cultura do arroz destaca-se econmica e socialmente no contexto da agricultura catarinense, sendo que a produo no estado realizada principalmente na faixa litornea, e se caracteriza por adotar o sistema prgerminado de plantio. A planta de arroz, em qualquer fase de desenvolvimento, est sujeita a doenas que reduzem tanto a qualidade como a quantidade do produto final. A principal doena da cultura do arroz irrigado a brusone, cujo agente etiolgico o fungo Pyricularia grisea (Cooke) Sacc, A utilizao de cultivares resistentes o mtodo mais econmico e vivel para o manejo da doena. Porm, a suscetibilidade a brusone das cultivares atualmente em uso, persiste como um dos graves obstculos para a manuteno da produtividade do arroz irrigado. Muitas raas fisiolgicas de Pyricularia grisea tm sido identificadas em diferentes estados do Brasil. Esta variabilidade tem sido citada como a causa da perda da resistncia, o que torna a brusone uma doena complexa, capaz de produzir numerosas raas, dificultando assim o avano dos programas de melhoramento para resistncia ao patgeno. Pelas caractersticas de adaptao do fungo e para que o melhorista possa direcionar seu trabalho, fundamental que sejam identificadas as raas predominantes em um determinado local. Com objetivo de determinar a prevalncia das raas nas cultivares de arroz irrigado no estado de Santa Catarina foram avaliadas 193 amostras de plantas de arroz infectadas pela brusone oriundas da safra 2004/2005. Esses materiais foram coletados e fornecidos por produtores de diferentes regies do estado. As amostras foram registradas e estocadas em laboratrio em sacos de papel sob temperatura ambiente. Para o isolamento, as amostras foram submetidas cmara mida (placas de Petri, papel filtro e lmina) e incubadas (incubadora do tipo BOD), por 24-48h a 28C sob luz constante. Aps verificao do crescimento de P. grisea em microscpio estereoscpio (3,5X), os condios foram transferidos, com o auxlio de um estilete umedecido, para placas de Petri contendo AA (gargua), adicionado de sulfato de estreptomicina (100 g/l) durante 24h a 26C. Posteriormente, foram feitos isolamentos monospricos em meio de cultura BDA (200g de batata, 20g de dextrose, 18g de gar) e incubados a 28C sob luz constante. Esses isolados foram repicados e passados para placas de Petri contendo meio de cultura de farinha de arroz (20g farinha de arroz gros de arroz com casca, modos em liquidificador, 5g de dextrose e 15g de gar/L gua), para o armazenamento dos isolados monospricos, foram feitas repicagens nesse mesmo meio e adicionadas tiras de papel filtro esterelizadas (1x1cm) sobre as quais os isolados cresceram durante 10 dias. As tiras de papel foram estocadas em envelopes de papel alumnio e secas a 28C para posterior produo macia do inculo. As placas contendo os isolados no meio de farinha de arroz foram raspadas com o auxlio de um pincel para a retirada de miclios e restos indesejveis. Em seguida, as placas foram cobertas com papel filme plstico transparente perfurado e incubadas na BOD (fotoperodo de 12h a 28C) durante 7 dias, estimulando assim a esporulao. Para a inoculao dos condios, foram utilizadas as cultivares de arroz da Srie Internacional de Diferenciadoras (SID) composta pelas variedades: Raminad str. 3, Zenith, NP 125, Usen, Dular, Kanto 51, Sha-tiao-tsao, Caloro e mais sete cultivares locais (Fanny, Epagri 107, Epagri 108, Epagri 109, SCS BRS 111, SCS BRS 112 e SCS BRS 113). Oito sementes de cada cultivar foram semeadas em vasos plsticos contendo substrato adequado

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durante 20 dias. As plantas receberam aplicao de nitrognio na forma de uria equivalente a 45Kg de N/h. Aps esse perodo, as cinco melhores plantas foram selecionadas de modo a se obter cinco plantas/vaso, em casa de vegetao ficando expostas a alta umidade at 24 horas antes da inoculao. O inculo foi obtido pela lavagem das colnias desenvolvidas com gua destilada e ressuspenso dos esporos. A suspenso foi filtrada com gaze para a retirada de restos de miclios. Em seguida a suspenso celular foi ajustada para concentrao de 25 a 30 condios por 4 campo de 125X no microscpio (ocular 12,5X e objetiva 10), o que equivale a 2-3 x 10 condios/ml (Ribeiro et al., 1987). Trinta mililitros dessa suspenso foram pulverizados sobre as plantas com 21 dias de idade. As plantas foram incubadas em caixas plsticas sob alta umidade, e as avaliaes, em nmero de duas por isolado, foram realizadas dez dias aps. A combinao das reaes permitiu identificar e determinar a freqncia das raas. A avaliao foi realizada atravs da escala de danos do IRRI (1996). Com a finalidade de classificar as reaes verificadas nas folhas das cultivares em suscetvel (S), medianamente resistente (MR) e resistente (R) , foi empregada a escala de notas (0-9), sendo consideradas notas 0-3 plantas resistente, notas 4-6 intermediria e notas de 7-9 plantas suscetveis. Com bases nas reaes observadas na Srie Internacional de Cultivares Diferenciadoras aps inoculao dos isolados foi possvel a identificao de 13 raas de Pyricularia grisea pertencentes a quatro grupos (IB, IG, ID, II) dos nove grupos de raas internacionais. Reunindo as raas com seus respectivos grupos, verificou-se que 50,5% pertenciam ao grupo IB, 38% ao grupo IG, 7% ao grupo II e 4,5%ao grupo ID do total de 158 amostras analisadas, conforme figura 1. Relacionando a distribuio das raas no presente estudo, observou-se que dentro do grupo IB, a raa IB-45 apresentou 42,5% de prevalncia dos isolados testados, mostrando-se freqente na cultivar Epagri 109. Isoladamente, as raas IB-45, IB-41, IG-1, IG-2, II-1, foram as que ocorreram em maior nmero nas amostras avaliadas, conforme apresenta a figura 2. As raas IG-2 e IB-45 destacaram-se do total de amostras com 21,5 e 29,8% respectivamente, mostrando-se mais freqente nas cultivares Epagri 108, Epagri 109 e SCS BRS 113. Resultados similares foram apresentados em estudos anteriores por Scheurmann (2002), Krieger et al (2004) e Silva et al. (2004) que verificaram a incidncia das raas IB-45, IB-41, IG-1 e IG-2. Estes dados sugerem baixa variabilidade gentica do fungo no estado, devido a um nmero restrito de cultivares o que sugere uma relao estreita entre cultivares produzidas e a prevalncia dos grupos IB e IG no estado Santa Catarina.
60

50

40

30

20

10

0 IB ID IG II Grupos de raas

Figura 1. Porcentagem (%) dos grupos de raas de Pyricularia grisea, encontrados na safra 2004/2005.

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35

29,8
30 25 20 15 10 5 0 IG-2 IB-45 IB-41 Raas IG-1 II-1

21,5

10,8 8,2 7,0

Figura 2. Porcentagem (%) das principais raas ocorridas na safra 2004/2005.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS IRRI- international Rice Research institute. Standard Evaluation System for Rice. Manilla. INTER /Genetic Resources Center. 1996, 52p. KRIEGER, I.; SILVA, C. M.; MIURA. L. Prevalncia de raas fisiolgicas de Pyricularia grisea no Estado de Santa Catarina. Anais... Revista Fitopatologia Brasileira., v.29, p S74, 2004. RIBEIRO, A.S.; TERRES, A.L.S. Variabilidade do fungo Pyricularia grisea e sua relao com O cultivares resistentes brusone. Fitopatologia Brasileira, v.12, n .4 , 1987, p. 316-321. SCHEURMANN, K. K. Anlise da variabilidade de Magnaporthe grisea no estado de Santa Catarina. Porto Alegre, 2002. 73 p. Dissertao (Mestrado em Fitotecnia) Faculdade de Agronomia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul. SILVA, C. M.; KRIEGER, I.; MIURA. L. Prevalncia de raas fisiolgicas de Pyricularia grisea em condies de alta presso de inculo (Hot Spot) em Santa Catarina. Anais... Revista Fitopatologia Brasileira., v.29, p S269, 2004.

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QUALIDADE FITOSSANITRIA DE GROS PRODUZIDOS POR PLANTAS ORIGINADAS DE SEMENTES MICROBIOLIZADAS COM ISOLADOS DE BACTRIAS BIOCONTROLADORAS E INOCULADAS COM Bipolaris oryzae (BREDA DE HAAN) SHOEM
Jaqueline T. Schfer , Juliane Ludwig , Ana Paula S. Afonso , Andra B. Moura 1 Universidade Federal de Pelotas/FAEM/Departamento de Fitossanidade - Campus Universitrio s/n, C.P. 354, CEP: 96010-900. jaquelinets@ibest.com.br
1 1 1 1

O Brasil um dos maiores produtores de arroz, destacando-se o estado do Rio Grande do Sul, que na safra de 2004/2005 produziu 5.877,8 mil toneladas, ou seja, 45,8% do total de gros produzidos no pas (CONAB, 2005). No entanto, essa cultura atacada por inmeros patgenos incluindo fungos, bactrias, vrus e nematides (Prabhu et al., 1999). Richardson (1990) relata que os fungos formam o principal grupo de organismos patognicos que podem se associar aos gros de arroz. No Brasil, Amaral et al. (1985), citam Pyricularia oryzae e Bipolaris oryzae como os principais patgenos associados s sementes, seguidos de Gerlachia oryzae, Cercospora oryzae, Phoma spp., Alternaria padwickii, Fusarium spp., Nigrospora oryzae, Tilletia barclayana. O fungo Bipolaris oryzae (Cochliobolus miyabeanus (Ito & Kuribayashi)), agente etiolgico da mancha-parda do arroz, tem sido considerada a segunda doena mais importante para a cultura (Ou, 1985), podendo se manifestar j nas fases iniciais, causando a morte de plntulas originadas de sementes infectadas (Ribeiro, 1988). O ataque do patgeno na parte area pode acarretar grandes perdas, podendo afetar a produo dos gros, aumentar a esterilidade e diminuir a qualidade dos mesmos que apresentam-se menores e manchados (Ou, 1985). Alm da preocupao em foco da ocorrncia do fungo B. oryzae, ocorre tambm a associao de outras espcies fngicas com sementes/gros, da a necessidade de se conhecer os microrganismos associados a um dado lote de sementes ou gros, uma vez que esta associao poder implicar em problemas no armazenamento, reduo de germinao, sobrevivncia de fungos patognicos, bem como a introduo e acmulo destes em reas de cultivo, culminando como meio de disseminao de inculo a longa distncia (Machado, 1988). Atualmente, o biocontrole vem se destacando, e tem sido estudado por no causar danos ao meio ambiente e ser economicamente desejvel. Deste modo, com este trabalho objetivou-se a verificao da incidncia do fungo B. oryzae, bem como outros fungos associados aos gros produzidos por plantas originadas de sementes microbiolizadas com isolados de bactrias biocontroladoras e inoculadas artificialmente com esse patgeno. Para a microbiolizao dos gros de arroz da cultivar El Passo, suspenderam-se os isolados DFs185 (Pseudomonas sp.), DFs223 ( P. amygdali) e DFs306 (ainda no identificado) com 24 horas de crescimento em soluo salina (NaCl 0,85%). Padronizou-se a concentrao em OD540=0,5, medida em espectrofotmetro. Os gros foram imersos na suspenso de cada um dos isolados e agitados por 30minutos 10C. Uma das testemunhas foi imersa apenas em soluo salina e a outra no fungicida recomendado para tratamento de gros de arroz (Vitavax + Thiram, 3mL/Kg de gros) os quais tambm foram agitados por 30 minutos 10C. A semeadura ocorreu em vasos com capacidade para 5Kg onde foram depositadas 10 sementes por vaso, sendo desbastadas logo aps o aparecimento da segunda folha, deixando-se quatro plantas por vaso. As plantas foram mantidas em casa de vegetao. O fungo foi inoculado com esporos obtidos de colnias com 15 dias de crescimento pela 5 tcnica da asperso da suspenso (Massola e Bedendo, 1998) na concentrao de 10 condios/mL, no estdio V6 (emborrachamento). As plantas permaneceram em cmara mida, 24 horas antes e 48 horas aps a inoculao. Ao atingir o ponto de colheita, os gros foram retirados, separados e classificados em gros cheios e gros chochos.

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A avaliao da sanidade dos gros foi realizada pelo mtodo do papel de filtro (RAS, 1992) utilizando-se 200 sementes, com auxlio de microscpio estereoscpio com aumento de 50 a 60 vezes, verificando-se ou no a presena de fungos sobre as sementes de arroz. A identificao foi feita com base nas caractersticas morfolgicas do fungo. No foram utilizadas 400 sementes indicadas para o mtodo do papel de filtro, pois por se tratar de parcelas experimentais os lotes em questo chegaram ao tamanho mximo de 1165 sementes, neste caso, representando 17% do todo. Por outro lado, o nmero de gros produzido na parcela T+F e 203, representou o lote todo. Constatou-se a ocorrncia dos seguintes fungos: Alternaria spp., Aspergillus spp., Bipolaris spp., Chaetomium sp., Cladosporium sp., Curvularia sp., Epicoccum sp., Fusarium sp., Gerlachia sp., Nigrospora sp., Penicillium sp., Phoma sp. e Rizoctonia sp. Quando se observou a ocorrncia do fungo Bipolaris spp. e, deste e demais fungos classificados como manchadores de gros, verificou-se a eficcia dos tratamentos biolgicos bacterianos na reduo dos mesmos (Figura 1A). O tratamento DFs223 mostrou-se superior aos demais, pois alm de reduzir o nmero total de fungos, reduziu tambm os fungos no manchadores de gros (Figura 1B). Em todos os tratamentos que se microbiolizaram os gros, foi observado um aumento no nmero de gros, considerando principalmente os gros cheios (Figura 1C).
20 15 10 5 0 T+F T 185 223 306 Bipolaris manchadores 25 75

50

Total no manchadores

T+F

185

223

306

100 75 N gros X 10 50 25 0 T+F T 185 223 306 % gros cheios

Figura 1. Incidncia de fungos observados em gros produzidos por plantas originadas de sementes microbiolizadas com diferentes bactrias biocontroladoras e inoculadas posteriormente com B. oryzae, determinada pelo mtodo do papel de filtro. A: ocorrncia de Bipolaris spp. e total de fungos causadores de manchas em gros; B: total de ocorrncia fngica e de fungos no causadores de manchas em gros; C: nmero de gros produzidos e porcentagem destes que se encontravam cheios. T + F = tratamento com salina adicionada de Vitavax e Thiran, T = testemunha tratada com salina. Os resultados obtidos neste trabalho confirmam o comportamento verificado por Silveira et al. (2001) quando avaliou estas mesmas bactrias e 5 outras, em ensaio conduzido de forma similar ao aqui relatado, constatando que o mais promissor em melhorar a qualidade dos gros foi o isolado DFs223. Schfer et al. (2003) tambm microbiolizaram sementes com os isolados Dfs185 e DFs223, conduzindo ensaio a campo e avaliaram a qualidade sanitria dos gros produzidos, quando puderam observar que estes dois isolados proporcionaram a reduo de incidncia de vrios fungos, bem como do total de incidncia fngica. Vale ressaltar que nos

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trabalhos citados no foram realizadas quaisquer inoculaes com patgeno, ao contrrio da pesquisa em questo, que inoculou as plantas na fase de emborrachamento com B. oryzae. Deste modo, todos os tratamentos com isolados bacterianos foram capazes de reduzir a incidncia dos fungos e tambm foram eficazes em aumentar a quantidade e qualidade da produo dos gros das plantas provenientes de sementes tratadas biologicamente, alm de apresentar capacidade, j demonstratada em trabalhos anteriores, de biocontrole de Rhizoctonia solani, G. oryzae e B. oryzae quando incidindo em plantas (Ludwig, 2005) e de colonizar o sistema radicular de vrios cultivares de arroz (Schfer et al., 2004).

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS AMARAL, H. M.; FURLAN, S. H.; MENTEM, J. O. Localizao de Drechslera oryzae, Rhinchosporium oryzae e Trichoconiella padwickii em sementes de arroz (Oryza sativa L.). In: CONGRESSO BRASILEIRO DE SEMENTES, 4, 1985, Braslia. Resumos... Braslia: Associao Brasileira de Tecnologia de Sementes, 1985. p.118. CONAB. Disponvel em <http://www.conab.gov.br/download/safra/3levantamentoPlantio.pdf> Acesso em 09 mai. 2005. LUDWIG, J. Biocontrole de doenas do arroz irrigado (Oryza sativa L.) pela microbiolizao de sementes. Pelotas, UFPel, 2005. 36 f. (dissertao de mestrado). MACHADO, J. C. Patologia de sementes: Fundamentos e aplicaes. Braslia: Ministrio da Educao, Lavras: ESAL/ FAEP, 1988. 107p. MASSOLA Jr., N. S., BEDENDO, I. P. rea de leso foliar como parmetro para avaliao de resistncia de arroz mancha parda. Summa Phytopathologica, v. 24, n. 1, p. 30-34, 1998. OU, S.H. Rice Disease. 2. ed. KEW: CMI, 1985. 380p. PRABHU, A.S.; FILIPPI, M. C.; RIBEIRO, A. S. Doenas e seu controle. In: VIEIRA, N.R. de A.A.; SANTOS, A.B. dos; SANTANA, E.P. A cultura do arroz no Brasil. Santo Antnio de Gois. Embrapa Arroz e Feijo, 1999. p. 262-307. 1999. RABINDRAN, R.; VIDHYASEKARAN, P. Development of a formulation of Pseudomonas fluorescens PfALR2 for management of rice sheath bligth. Crop Protection, v.15, n.8, p.715721, 1996. REGRAS PARA ANLISE DE SEMENTES. Braslia, 1992. 365p. RIBEIRO, A.S. Avaliao crtica dos projetos do PNP-Arroz na rea de fitopatologia, no perodo de 1980 a 1990-Estados do Rio Grande do sul e Santa Catarina. REUNIO NACIONAL DE PESQUISA DO ARROZ IRRIGADO, 4,1994, Goinia. Anais...Goinia, 1994. p.177-213. RIBEIRO, A.S. Doenas do arroz irrigado. Pelotas, Embrapa-CPATB, 1988. 56p. (Circular Tcnica, 22). RICHARDSON, M. J. An annotated list of seed borne disease. 4 ed. Zrich, The International Seed Testing Association, 1990. 387p. SCHFER, J.T.; MOURA, A.B.; SILVEIRA, A.O.; LUDWIG, J.; FARIAS, C.R.J.; MAIA, L.C.; ANTUNEZ, D.M. Controle biolgico de fungos associados a gros e sementes de arroz produzidos por plantas originadas de sementes microbiolizadas. CONGRESSO DE INICIAO CIENTFICA, 12, 2003, Pelotas. Anais...Pelotas, 2003. (CD Rom) SCHFER, J.T.; MOURA, A.B.; LUDWIG, J.; ZANATTA, Z.G.C.N.; SANTOS, A.S. Colonizao do sistema radicular de arroz por rizobactrias biocontroladoras e promotoras de crescimento. CONGRESSO DE INICIAO CIENTFICA, 13, 2004, Pelotas. Anais...Pelotas, 2004. (CD ROM) SILVEIRA, A.O.; MOURA, A.B.; SANTOS, A.S.; SILVA, E.G.; AZAMBUJA, R.H.M.; AFONSO, A.P.S. Qualidade fitossanitria de gros produzidos por plantas desenvolvidos a partir de sementes microbiolizadas com PGPR. Fitopatologia Brasileira, n.26, suplemento, p. 299, 2001.

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QUALIDADE SANITRIA DE SEMENTES DE ARROZ DE DIFERENTES CULTIVARES ORIUNDAS DE QUATRO REGIES ORIZCOLAS DO RIO GRANDE DO SUL
Cndida Renata Jacobsen de Farias , Mirian Branco , Ana Paula Schneid Afonso , Carlos 1 Roberto Pierobom . Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitrio, s/n, Caixa postal 354 96010-900, Pelotas/RS. candidajacobsen@bol.com.br
1 1 1

O arroz um dos cereais mais cultivados no mundo, fazendo parte da alimentao bsica em mais da metade da populao mundial (FAO, 2002). O Brasil destaca-se como um dos maiores produtores, sendo que o estado do Rio Grande do Sul, na safra de 2004/2005 produziu 5.877,8 mil toneladas, ou seja, 45,8% do total de gros produzidos no pas (CONAB, 2005). No entanto, as sementes tambm se constituem no mais eficiente agente de disseminao e no mais seguro abrigo sobrevivncia dos patgenos, constituindo-se tambm na mais eficiente forma de preservao do inculo entre geraes do hospedeiro, em funo da transmisso direta das sementes aos rgos areos e/ou radiculares dos hospedeiros (Reis, 1986, Amaral, 1987, Reis, 1987, Reis, 1988). Muitos patgenos de plantas sobrevivem de um ano para outro, ou at mesmo, so disseminados a grandes distncias, atravs de sementes contaminadas. Igualmente, muitos fungos disseminados pelo solo tambm atacam sementes e as plntulas na fase inicial das culturas, resultando dessa situao lavouras com deficincia de estande e plntulas mortas ou doentes, cujos danos podero aumentar as perdas na produtividade (Ribeiro, 1996). Segundo Richardson (1990) os fungos constituem o principal grupo de organismos patognicos que podem associar-se s sementes de arroz, abrangendo aproximadamente 50 espcies j relatadas. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade sanitria de sementes de arroz de diferentes cultivares oriundas de quatro regies tradicionalmente produtoras de arroz no Rio Grande do Sul na safra 2003/2004. Foram analisados 93 lotes de sementes de arroz provenientes da Embrapa Clima Temperado, do Instituto Rio Grandense do Arroz IRGA Rosrio do Sul (SCS 112, El Passo L 144, BR IRGA 420, BRS 6, BR IRGA 417, Qualimax, BR IRGA 418, BRS 7, BR IRGA 409,BR IRGA 410 e Sabore), IRGA Uruguaiana (Arrank, Sabore, El Passo L 144, BRS Pelotas, BRS 409, BRS Taim, BR IRGA 410, BR IRGA 420, El Passo L 144, BR IRGA 417, Qualit, Embrapa 739, Enova, EPAGRI 112 e BR IRGA 409) e IRGA Camaqu (BR IRGA 410, BR IRGA 409, BR IRGA 419, BRS Pelotas, BR IRGA 417, BR IRGA 420, El Passo L 144, Embrapa Taim, BR IRGA 418, BR IRGA 421, Camaqu, Syngenta, BR IRGA 416 e El Passo L 144). As amostras foram analisadas no Laboratrio de Patologia de Sementes do Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel da Universidade Federal de Pelotas, pelo Mtodo do Papel de Filtro (Blotter) segundo Neergaad (1979). Atravs dos resultados verificam-se que as quatro regies orizcolas do Rio Grande do Sul estudadas, apresentaram fungos manchadores de gros como: Bipolaris sp. (12,88%), Phoma sp. (6,42%), Alternaria padwichii (18,48%), Nigrospora sp. (26,32%) e Curvularia sp. (2,04%) (Figura 1) e fungos de armazenamento como Aspergillus sp. (3,86) e Penicillium sp. (2,56) (Figura 2), sendo que a regio do IRGA Camaqu apresentou maior incidncia de fungos manchadores de gros (7,18%) e a regio do IRGA Rosrio do Sul de fungos de armazenamento (3,27%). Em estudos conduzidos por Farias et al. (2004) foi constatada baixa qualidade sanitria das sementes de arroz produzido no Rio Grande do Sul, indicando que h necessidade de melhorar o manejo de colheita e ps-colheita da cultura do arroz irrigado. Segundo a Embrapa (1993) a incidncia de fungos manchadores de gros vem aumentando nos ltimos anos, principalmente devido as cultivares utilizadas apresentarem elevada suscetibilidade, sendo que na regio sul do Brasil, as manchas de glumas causadas por B. oryzae e Phoma sp. ocupam o segundo lugar em importncia econmica. A presena do fungo Bipolaris encontrado nas quatro regies estudas (12,88%) pode resultar, alm da infeco dos gros, reduo na germinao das

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sementes, morte de plntulas originadas de sementes infectadas, destruio de rea foliar, reduo do nmero de gros por pancula e peso dos gros (Lee, 1992, Kimati et al., 1997, Balardin, 2003) fatores que podem levar a reduo na produo total do arroz irrigado. Em trabalhos conduzidos em So Paulo, na regio do Vale do Paraba, B. oryzae, Phoma sp. e A. padwichii, patgenos tambm verificados nas regies, proporcionaram perda de peso de 2,6 a 32,4% (Soave et al., 1984). Com este trabalho observa-se que a melhoria da qualidade sanitria das sementes de arroz um dos fatores indispensveis a qualidade fisiolgica (germinao e vigor), alta produtividade e reduo na disseminao patgenos pelas sementes.

6,00 Porcentagem (%) 4,50 3,00 1,50 0,00 Pelotas Uruguaiana R. doSul Camaqu Regies Bipolaris s p. Curvularia sp. Phom a s p. Alternaria padwichii Nigros pora s p.

Figura 1. Incidncia de fungos manchadores de gros em sementes de arroz de quatro regies orizcolas do Rio Grande do Su, safra 2003/2004l. Pelotas/RS, 2005.

1,20 Porcentagem (%)

0,90

0,60

0,30

0,00 Pelotas Uruguaiana R. doSul Camaqu Regies

Aspergillus s p.

Penicillium s p.

Figura 2. Incidncia de fungos de armazenamento em sementes de arroz de quatro regies orizcolas do Rio Grande do Sul, safra 2003/2004. Pelotas/RS, 2005.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS AMARAL, H. M. Testes de sanidade de sementes de arroz. In: SOAVE, J., WETZEL, M. M. V. das S. (eds.) Patologia de sementes. Campinas: Fundao Cargill, 1987. p. 358-370. BALARDIN, R. S. Doenas do arroz. Santa Maria, 2003. 53p.

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CONAB. Disponvel em <http://www.conab.gov.br/download/safra/3levantamentoPlantio.pdf> Acesso em 09 mai. 2005. EMBRAPA EMPRESA BRASILEIRA DE PESQUISA AGROPECURIA. Centro de Pesquisa Agropecuria de Clima Temperado (Pelotas, RS). Arroz irrigado: recomendaes tcnicas para o sul do Brasil. Pelotas, 1993. 87p. (EMBRAPA CPACT, Documentos, 3). FARIAS, C. R. J. DE; REY, M. S.; CORRA, C. L.; BERTONCELLO, M.R.; PIEROBOM, C. R. Qualidade sanitria de sementes de diferentes cultivares de arroz. Fitopatologia Brasileira. Vol. 29 (suplemento), 2004, p.147 th FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION OF UNITED NATIONS. 20 session of International Rice Comission (ICR). Bangkok, 2002. KIMATI H., AMORIN, L., BERGAMIN FILHO, A., CAMARGO, L. E. A., REZENDE, J. A. M. Manual de fitopatologia. 3 ed. So Paulo, Ed. Agronmica Ceres. 1997. 800p. LEE, F. N. Grain diseases grain discolaration. In: Compendium of rice diseases. Saint Paul, APS Press. 1992. 62p. NEERGAARD, P. Seed Pathology. London, Mac Millan Press Ltd, 1979. 839 p. REIS, E. M. Patologia de sementes de cereais de inverno. Um enfoque epidemiolgico. In: Simpsio Brasileiro de Patologia de Sementes. Gramado. Anais...Campinas: Fundao Cargill, 1986. p. 101-104. REIS, E. M. Patologia de sementes de cereais de inverno. So Paulo: CNDA, 1987. 32p. REIS, E. M. Doenas do trigo 1: podrido das razes (helmintosporiose) . So Paulo: CNDA, 1988. 20p. RICHARDSON, M. J. An annotated list of seed-borne diseases. 4 ed. Zrich: The International Seed Testing Association, 1990. 387p. RIBEIRO, A. Tratamento de Sementes. In: Simpsio Brasileiro de Patologia de Sementes, 4, 1996, Gramado. Anais.. . Campinas: Fundao Cargill, 1996. SOAVE, J., PIZZINATTO, M. A., USBERTI JR., J. A., CAMARGO, O. B. A., VILLELA, O. V. Selection of rice cultivars resistent to some pathogens using seed health testing. Pesquisa Agropecuaria Brasileira, Braslia, v. 19, p. 449-453, 1984.

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QUALIDADE SANITRIA DE SEMENTES DE ARROZ IRRIGADO EM DIVERSAS REGIES PRODUTORAS DO ESTADO DO RIO GRANDE DO SUL
Caroline Gulart ; Tnia M. Bayer ; Lilian Cerbaro ; Gilvan Lenz ; Carla Zamolin ; Ivan F.D. Costa 1 ( DFS/CCR/UFSM idresler@smail.ufsm.br)
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O arroz uma das mais importantes culturas anuais produzidas no Brasil, significando cerca de 15 a 20% do total de gros colhidos no pais. Em 2002, a produo nacional representou 1,8% do total mundial, e 52% da Amrica do Sul. Difundido largamente no pas, o arroz cultivado praticamente em todos os Estados, e consumido por todas as classes sociais, principalmente pelas de baixa renda. O arroz ocupa posio de destaque do ponto de vista econmico e social, sendo responsvel por suprir a populao brasileira com um considervel aporte de calorias na sua dieta bsica. Alm do crescimento fsico da rea de cultivo, parte da produo pode ser atribuda ao desenvolvimento e recomendao de novas cultivares, que atendem s exigncias de mercado e apresentam alta produtividade, boa qualidade de gro e estabilidade de produo, de melhor reao aos estresses biticos (doenas) e abiticos (frio, toxidez por ferro, salinidade), com resistncia s pragas, e adaptao s condies edafo-climticas predominantes em cada regio de cultivo. A sanidade das sementes de fundamental importncia para o sucesso no estabelecimento da cultura. Alm disso, elas, invariavelmente, so o veculo para transporte de muitos patgenos. Com isto ressalta-se a necessidade de identificar a presena destes organismos nas sementes, visando antecipar medidas de controle, tratamento qumico e inoculao de antagonistas, entre outras. Este trabalho teve a finalidade de avaliar a presena de patgenos em sementes de arroz coletadas diretamente no campo, imediatamente aps a colheita, sem qualquer beneficiamento. Coletou-se 10 amostras (homogneas), de cultivares no-especificadas, e de regies distintas: Alegrete, Bag, Cachoeira do Sul, Itaqui 1, Itaqui 2, Jaguari, Pelotas, Santa Vitria do Palmar, So Borja e Uruguaiana. As sementes foram dispostas em folhas de papel filtro umedecido com gua, acondicionadas em caixas plsticas (Germbox) previamente esterilizadas, e incubadas por sete dias em temperatura de 25C, com fotoperodo de 12 horas claro/escuro. Para evitar germinao, foi realizado um procedimento que consistiu em congelar as amostras por cerca de 24 horas, aps um breve perodo para embebio das sementes. As sementes foram avaliadas, uma a uma, em aumento mdio de 40 vezes, que permitiu a visualizao macroscpica da estrutura dos fungos encontrados, sendo identificados no total 11 gneros, variando conforme a amostra. Estes gneros podem ser classificados conforme a sua importncia em campo ou no pscolheita, sendo os gneros problemticos no campo agentes causais de quatro doenas: mancha das glumas (Alternaria sp., Curvularia sp., Phoma sp., Epicoccum sp. e Fusarium sp.), mancha parda (Drechslera oryzae), queima das bainhas (Rhizoctonia solani) e mancha das bainhas (Rhizoctonia oryzae). Os gneros considerados como problema em armazenamento so Aspergillus sp., Cladosporium sp. e Rhizopus sp. Os fungos de armazenamento apareceram em decorrncia de avaliao de sementes no beneficiadas, com alto teor de umidade. No relatada qualquer ocorrncia fitopatolgica destes organismos na cultura em questo. O nico inconveniente para fins de armazenamento em mdio prazo (entressafra), onde eles comprometem a viabilidade germinativa das sementes. Quanto aos demais, ao contrrio, apresentam srios problemas fitossanitrios, pois so fonte potencial de inculo para o estabelecimento de doenas que podero comprometer a mxima produtividade e/ou a qualidade final dos gros.

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Tabela 1. Resultados percentuais da presena de patgenos associados sementes de arroz irrigado, coletadas em diversas regies produtoras do Estado do Rio Grande do Sul. Santa Maria, 2005. Locais Patgenos (generos) Alternaria Aspergillus Cladosporium Curvularia Epiccocum Fusarium Drechslera Nigrospora Phoma Rhizoctonia Rhizopus Alegrete Bag 62 21 69 10 51 62 16 43 13 89 6 57 13 83 29 1 11 C. do Itaqui Itaqui Jaguari Pelotas Sul 1 2 47 42 68 17 68 60 1 35 25 25 61 5 62 19 43 67 1 26 5 97 19 35 44 31 52 2 37 4 49 13 20 8 22 2 13 6 38 22 11 9 20 13 1 30 S. V. So do Uruguaiana Borja Palmar 93 9 33 7 56 37 1 61 67 2 40 23 17 26 45 39 1 36 18 6 53 14 53 2

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS NUNES,C.D.M.; RIBEIRO,A.S; TERRES, A.L.S. Principais doenas em arroz irrigado e seu controle.Arroz irrigado no Sul do Brasil, Braslia DF: Embrapa informao tecnolgica, p.579-612, 2004.

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REDUO DE INCIDNCIA DE Gerlachia spp. E Bipolaris spp. EM LOTES DE SEMENTES INFESTADOS NATURALMENTE E MICROBIOLIZADOS COM ISOLADOS BIOCONTROLADORES
Juliane Ludwig , Andra B. Moura , Jaqueline T. Schfer . 1-Universidade Federal de Pelotas FAEM/DFs - Campus Universitrio s/n, C.P. 354, CEP:96010-900. juludwig@yahoo.com.br
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As sementes constituem-se em eficientes veculos de disseminao de patgenos, que causam grandes perdas em diversas culturas. Os fungos constituem-se no principal grupo de organismos patognicos que podem se associar s sementes (Richardson, 1990). Na cultura do arroz, Amaral et al. (1985), citam Pyricularia oryzae e Bipolaris oryzae como os principais patgenos associados s sementes, seguidos de Gerlachia oryzae, Cercospora oryzae, Phoma spp., dentre outros. B. oryzae causa mancha nas folhas e nos gros e morte de plntulas originadas de sementes infectadas e ou infestadas (Ribeiro, 1988). O ataque de G. oryzae vem aumentando sua expresso, manifestando-se em nveis considerados altos em todas as regies produtoras de arroz no Brasil, com potencial de reduzir significativamente a produo, pois ao afetar as panculas, provoca a esterilidade de flores e manchas nos gros (Prabhu, 1989). Visto que a introduo de um patgeno em uma nova rea de cultivo e a disseminao dos mesmos a longas distncias se d principalmente atravs de sementes infectadas ou infestadas (Machado, 1988). O tratamento destas se faz extremamente necessrio, sendo o controle qumico a nica alternativa encontrada. No entanto, atualmente, com uma maior preocupao com a proteo do meio ambiente aliada necessidade da diminuio dos custos de produo, a busca por outras formas de controle se intensifica e uma alternativa bastante aceita o uso de agentes de biocontrole, que mostra um grande potencial na reduo de patgenos. O objetivo deste trabalho foi verificar o potencial de biocontrole de bactrias prselecionadas para o biocontrole de B. oryzae (Moura et al.1998), sobre a incidncia de Gerlachia spp. e Bipolaris spp., em lotes naturalmente infestados por estes patgenos. Sementes das cultivares Chumbinho (lote 376/03) e Formosa (lote 375/03) com alta ocorrncia de Gerlachia spp. e Bipolaris spp., foram microbiolizadas com os isolados DFs185 (Pseudomonas sp.), DFs223 ( P. amygdali) e DFs306 (ainda no identificado), DFs418 (Bacillus subtilis), DFs419 (Bacillus cereus), DFs422 (B.subtilis ) e DFs471 (Xanthomonas malthophilia). As sementes foram imersas em suspenso preparada com soluo salina (NaCl 0,85%)e ajustada para OD540=0,5. A testemunha foi imersa somente em soluo salina. Aps um perodo de agitao de 30 minutos 10C, 400 sementes foram plaqueadas, pelo mtodo do papel de filtro em caixas do tipo gerbox (Brasil, 1992), incubadas 25C, sob regime de iluminao de 12 horas de luz/12 horas de escuro. A avaliao da incidncia dos patgenos ocorreu aps 7 dias, examinando-se individualmente as sementes em microscpio estereoscpico. A incidncia observada na cultivar Formosa foi de 36,75 e 11,25% e na Cultivar Chumbinho de 24,25 e 4,75% para Gerlachia spp. e Bipolaris spp. respectivamente. Para clculo da porcentagem de controle, a incidncia observada dos patgenos nas sementes da testemunha foi transformada em 100%. Para o fungo Gerlachia spp., vrios isolados foram eficientes (Figura 1), porm na cultivar Chumbinho todos estes apresentaram certa eficincia na reduo da incidncia, enquanto que na Formosa apenas trs controlaram o patgeno, embora que de uma forma mais intensa. Destacaram-se os isolados DFs223 e DFs185, pois foram capazes de controlar Gerlachia spp. em ambas as cultivares.

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90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 185 223 306 418 419 422 471 Chumbinho Formosa

Figura 1. Incidncia de Gerlachia spp. em sementes da cultivar Chumbinho e Formosa, microbiolizadas com isolados de bactrias biocontroladoras, determinada pelo mtodo do papel filtro, Test= Testemunha tratada com salina. A reduo de incidncia de Bipolaris spp. nas sementes ocorreu de forma generalizada na cultivar Formosa (Figura 2) contrapondo aos trs isolados eficientes para a Chumbinho. Para este patgeno, os isolados DFs223 e DFs419 apresentaram melhor conjunto de controle, contudo no propiciaram as maiores porcentagens de controle.

90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 185 223 306 418 419 422 471

Chumbinho Formosa

Figura 2. Incidncia de Bipolaris spp. em sementes da cultivar Chumbinho e Formosa, microbiolizadas com isolados de bactrias biocontroladoras, determinada pelo mtodo do papel filtro, Test= Testemunha tratada com salina. O comportamento diferenciado dos isolados em relao eficincia de controle nas duas cultivares avaliadas, possivelmente est associado capacidade de colonizao do tegumento das sementes pelos diferentes isolados, uma vez que a capacidade de colonizar o sistema radicular destas bactrias cultivar dependente (Zanatta et al., 2004). Alm da capacidade de colonizao, outros mecanismos de ao podem estar envolvidos, como a produo de antibiticos verificada por Silveira et al. (2001), parasitismo, competio por nutrientes, embora estes ltimos ainda no tenham sido investigados.

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O isolado DFs223 parece ser bastante verstil, pois foi eficiente no controle de Bipolaris spp. e Gerlachia spp. em ambas as cultivares avaliadas, confirmado por bioensaio onde este e demais isolados foram estudados (Moura et al., 1998), por inoculao artificial nas folhas (Ludwig et al., 2004, Moura et al., 2001). Este isolado tambm se mostrou promissor no controle de Rhizoctonia solani fungo causador da queima das bainhas do arroz, com evidncias de que atua por induo de resistncia (Ludwig, 2005).

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS AMARAL, H.M.; FURLAN, S.H.; MENTEM, J.O.M. Localizao de Drechslera oryzae, Rhynchosporium oryzae e Trichoconiella padwickii em sementes de arroz (Oryza sativa L.). In: CONGRESSO BRASILEIRO DE SEMENTES, 4, 1985, Braslia. Resumos...Braslia, D.F. Associao Brasileira de Tecnologia de Sementes, 1985. p.118. BRASIL. Ministrio da Agricultura e Reforma Agrria. Secretria Nacional de Defesa Agropecuria Departamento Nacional de Defesa Vegetal. Regras para nalise de sementes. Braslia, 1992. 365p. LUDWIG, J.; MOURA, A.B.; SANTOS. A.S.; LORENSI, J. Incidncia de Gerlachia oryzae em lotes de sementes microbiolizadas com isolados de bactrias biocontroladoras. SIMPSIO BRASILEIRO DE PATOLOGIA DE SEMENTES, 8, 2004, Joo Pessoa, Anais...Joo Pessoa, 2004. p.185. LUDWIG, J.; MOURA, A.B.; SANTOS. A.S.; LIMA, N; FARIAS, D.R. Biocontrole de mancha parda e da escaldadura do arroz, em casa-de-vegetao, pela microbiolizao de sementes. SIMPSIO BRASILEIRO DE PATOLOGIA DE SEMENTES, 8, 2004, Joo Pessoa, Anais...Joo Pessoa, 2004. p.184. LUDWIG, J. Biocontrole de doenas no arroz irrigado (Oryza sativa L.) pela microbiolizao de sementes. Pelotas, UFPel, 2005. 36f. Dissertao de Mestrado. MACHADO, J. C. Patologia de sementes: Fundamentos e aplicaes. Braslia: Ministrio da Educao, Lavras: ESAL/ FAEP, 1988. 107p. MOURA, A..B.; PIEROBOM, C.R.; NAVA, D.E.; AFONSO, A.P. Tratamento de sementes de arroz para seleo massal de procariotos potenciais antagonistas a Bipolaris oryzae. Fitopatologia Brasileira, v.23 (Suplemento). 1998. MOURA, A.B.; SILVA, E.G.; RIBEIRO, A.S. Biocontrole de Gerlachia oryzae e Bipolaris oryzae pela microbiolizao de sementes. Revista Brasileira de Sementes, v.11, n.2, p.148, 2001. PRABHU, A.S. Controle das principais doenas de arroz de sequeiro. Informe Agropecurio, v.14, n.161, p.58-63, 1989, RIBEIRO, A.S. Doenas do arroz irrigado. Pelotas, Embrapa-CPATB, 1988, 56p. (Circular Tcnica n.2). RICHARDSON, M.J. An annotatet list of seed borne disease. 4.ed. Zrich, The Internacional Seed Testing Association, 1990. 387p. SILVEIRA, A.O; MOURA, A.B.; SILVA, E.G.; RIBEIRO, A.S. Investigaes sobre aptides de RBPCs biocontroladoras de patgenos de arroz. REUNIO DE CONTROLE BIOLGICO DE FITOPATGENOS, 7, 2001, Bento Gonalves. Anais...Bento Gonalves, 2001. SCHFER, J.T.; MOURA, A.B.; SILVEIRA, A.O.; LUDWIG, J.; FARIAS, C.R.J.; MAIA, L.C.; ANTUNEZ, D.M. Controle biolgico de fungos associados a gros e sementes de arroz produzidos por plantas originadas de sementes microbiolizadas. CONGRESSO DE INICIAO CIENTFICA, 12, 2003, Pelotas. Anais...Pelotas, 2003. (CD ROM).

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TRATAMENTO DE SEMENTES DE ARROZ COM FUNGICIDA


Fabrcio, B. Peske; Fabio Mielezrski; Luis, E. Panozzo; Silmar Peske. Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel, Universidade Federal de Pelotas. Campus Universitario s/n. Cx. Postal 354. CEP 96010-900. Capo de Leo, Pelotas (RS). E-mail: fpeske@ufpel.edu.br

A produtividade do arroz em funo de diversos fatores, entre os quais o estande de 2 plantas. Recomenda-se uma populao de 300 plantas por m , quantidades acima ou abaixo iro afetar o rendimento. Essa recomendao pode variar, entretanto o excesso ou o dficit ter efeito no rendimento. O agricultor, para garantir-se de um bom estande, esta semeando em mdia 180kg/ha, Assim considerando que 37 sementes de arroz pesam uma grama, os 180kg significam 6,6 2 milhes de sementes/ha ou 660 sementes/m . Desta maneira o agricultor utiliza mais do que o dobro do necessrio para garantir-se de um estande, que necessariamente no o adequado. A utilizao de sementes com aproveitamento de menos de 50%, acarreta alguns inconvenientes como: 1- m distribuio da emergncia em que alguns espaos na lavoura ficaro sem sementes, enquanto outros estaro muito densos; 2- risco de se obter um estante abaixo ou acima do adequado; e 3- gasto desnecessrio em sementes. Levando em considerao ao exposto anteriormente, o objetivo do presente trabalho foi avaliar o desempenho de sementes de arroz tratadas com fungicidas em condies de campo e em condies controladas de laboratrio. Utilizou-se a cultivar BR-IRGA 410 de um lote de sementes com 95% de germinao, enquanto os estudos foram desenvolvidos em condies controladas de laboratrio e em nvel de campo. A Em condies de laboratrio - Variveis - Produtos 1 - Vitavax Thiram 200 SC dosagem de 250 ml/100kg e 2 - Thiram 480 TS, dosagem 200 ml/100kg. Formulaes e o o o o dosagens. 2 Temperaturas 16 C; 20 C; 24 C; e 30 C. Avaliaes: 1- ndice de velocidade de emergncia - Este ndice foi obtido dividindo-se o nmero de sementes emergidas pelo nmero de dias aps a semeadura e como foram feitas vrias contagem em diferentes dias, somaram-se as diferentes fraes at a contagem final das plntulas. 2-Emergncia - O material foi semeado em solo proveniente de um cultivo de arroz do ano anterior em que cada unidade experimental consistiu de 200 sementes. O solo foi peneirado e sua umidade homogeneizada. Em cada regime de temperatura, seis contagens foram realizadas. 3- Altura de plntula - A altura das plntulas foi determinada tomando com base o nvel do solo por ocasio da contagem final do teste de emergncia, para cada regime de temperatura. B Estudo de campo Variveis, 1 Produtos - Os mesmos utilizados no estudo em nvel de laboratrio. 2 - pocas de semeadura, trs foram as pocas de semeadura: 1- Segunda o o quinzena de outubro com umidade do solo adequada e temperatura mdia solo de 16 C 5 C ; 2 o - Primeira quinzena de novembro com umidade do solo adequada e temperatura mdia de 18 C o 6 C ; e 3 - Segunda quinzena de novembro com umidade do solo um pouco seco e temperatura o o mdia de 20 C 7 C . Avaliaes, 1- ndice de velocidade de emergncia. Este ndice foi obtido dividindo-se o nmero de sementes emergidas pelo dia aps a semeadura e como foram feitas vrias contagem em diferentes dias, somaram-se as diferentes fraes at a contagem final das plntulas. 2 Emergncia - O material foi semeado em solo cultivado com arroz o ano anterior, em que cada unidade experimental consistiu de 200 sementes. O solo foi preparado de forma convencional e os torres removidos manualmente. Em cada poca de semeadura seis contagens foram realizadas. 3- Altura de plntula. A altura das plntulas foi determinada tomando com base o nvel do solo por ocasio da contagem final do teste de emergncia, para cada poca de semeadura. A anlise estatstica dos dados revelou interao positiva entre os produtos de tratamento de sementes e o regime de temperatura ou poca de semeadura. Desta maneira os dados esto apresentados com o desempenho de cada tratamento dentro de regime de temperatura ou poca de semeadura.

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Os resultados de emergncia a 16 C revelaram efeito positivo dos tratamentos com Vitavax em que no teste de velocidade de emergncia apresentou valores mais de duas vezes superiores ao da testemunha. Em termos de percentual de emergncia os resultados foram similares em que a diferena foi superior a 20 pontos percentuais. A altura de plntula das sementes tratadas com Vitavax tambm foi superior apresentando 0,5 cm a mais ( tabela 01). Tabela 1. Emergncia de sementes de arroz em condies controladas de umidade do solo o o e temperatura de 16 C 2 C . UFPEL 2004. Tratamento IVG Emergncia Altura Plntula

Testemunha 3,56 a 58 a 5,85 a VITAVAX 11,31 c 87 b 6,80 b THIRAN 5,71 b 68 a 5,65 a Mdias na coluna seguidas da mesma letra no diferem estatisticamente a 5% de probabilidade de acordo com o teste de Duncan. A avaliao realizada a 20 C, tambm revelou efeito significativo do tratamento Vitavax, em que na velocidade de emergncia o ndice foi mais de 50 % superior ao da testemunha e um pouco menos em relao as sementes tratadas com Thiran. Para a avaliao da emergncia a diferena foi de 10 pontos percentuais em relao a testemunha e um pouco menos em relao ao tratamento com Thiran. Em relao a altura de planta o tratamento com Vitavax apresentou mais de 0,6 cm em relao a testemunha e no apresentando diferena estatstica em relao as sementes tratadas com Thiran (tabela 2) Tabela 2. Emergncia de sementes de arroz em condies controladas de umidade do solo o o e temperatura de 20 C 2 C . UFPEL 2004. Tratamento IVE Emergncia Altura Plntula
o

Testemunha 9,29 a 85 a 9,33 a VITAVAX 14,17 c 95 b 10,11 b THIRAN 12,58 b 88 a 9,85 ab Mdias na coluna seguidas da mesma letra no diferem estatisticamente a 5% de probabilidade de acordo com o teste de Duncan. Nos estudos a 24 C e 30 C o desempenho das sementes foi similar entre os tratamentos Estes resultados evidenciam que as sementes de arroz em condies adversas de temperatura sofrem redues considerveis em seu potencial de emergncia e isso pode ser evitado com a proteo das sementes com fungicidas. As sementes protegidas emergem mais rpido, apresentam maior emergncia e possuem uma maior altura. Os estudos em nvel de campo, com temperatura ainda considerada baixa, os tratamentos com fungicida apresentaram efeitos benficos em relao a testemunha, apresentando uma velocidade de emergncia 50% superior, e uma emergncia com mais de 20 pontos percentuais de diferena. Entretanto a altura de plntula foi semelhante (Tabela 3)
o o

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Tabela 3. Emergncia de plntulas de arroz em condies de campo em solo com boa o umidade e temperatura de 16 5 C. Tratamento IVE Emergncia Altura Plntula

Testemunha 7,14 a 51 a 11,5 a VITAVAX 11,45 b 72 b 11,6 a THIRAN 10,96 b 73 b 11,3 a Mdias na coluna seguidas da mesma letra no diferem estatisticamente a 5% de probabilidade de acordo com o teste de Duncan. O estudo de campo com temperatura um pouco mais elevada e com boa umidade do solo a testemunha apresentou uma baixa velocidade de emergncia em relao aos tratamentos com fungicida e em especial o com Vitavax que foi estatisticamente superior a todos o O experimento conduzido em nvel de campo com temperatura mdia superior a 20 C e em solo com pouca umidade, apresentou tambm efeitos benficos do tratamento de sementes, apesar do percentual de emergncia das sementes tratadas estar ao redor de 60% (tabela 4). Tabela 4. Emergncia de plntulas de arroz em condies de campo em solo com pouca o umidade e temperatura de 22 6 C. Tratamento IVE Emergncia Altura Plntula

Testemunha 4,16 a 36 a 11,7 a VITAVAX 6,72 b 53 b 11,8 a THIRAN 6,73 b 52 b 11,3 a Mdias na coluna seguidas da mesma letra no diferem estatisticamente a 5% de probabilidade de acordo com o teste de Duncan O estudo conduzido em condies de campo praticamente ratificou os resultados obtidos em nvel de laboratrio com condies controladas. A diferena foi que os resultados de campo foram inferiores, pois na melhor poca de campo o percentual de emergncia para o melhor tratamento no alcanou 80%, enquanto que em laboratrio obtiveram-se emergncias superiores a 90%. No campo, alm da temperatura como adversidade tambm h outros fatores, como umidade do solo e o maior gradiente de temperatura. Em termos de qualidade de sementes e produtividade, enfatiza-se que quanto maior o percentual de emergncia, melhor ser a distribuio das plantas no campo, acarretando um maior aproveitamento da luz e nutrientes, potencializando assim uma maior produtividade. Conclui-se que: - O tratamento de sementes de arroz, com fungicida Vitavax, benfico para a emergncia das plantas de arroz; - Os efeitos do tratamento de sementes so maiores em condies adversas de baixa temperatura e baixa umidade do solo; - Os benefcios podem ser constatados pela maior velocidade de emergncia, pelo percentual de emergncia e pela altura de plntula.

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Trichoderma sp. NO CONTROLE DO COMPLEXO Polymyxa graminis-RSNV E NA PROMOO DE CRESCIMENTO DE PLANTAS DE ARROZ
Marcus Andr Kurtz Almana , Aida Terezinha Santos Matsumura , Joo Leodato Nunes (2) (3) (4) (1) Maciel , Jos Mrio Tagliapietra , Ezequiel Pereira Saraiva . Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonalves, 7712, CEP 91540-000, Porto Alegre, RS, (2) (3) marcus.almanca@ufrgs.br. EMBRAPA/Centro Nacional de Pesquisa de Trigo. Cooperativa (4) Agrcola Mista de Nova Palma. Instituto Riograndense do Arroz. No Brasil, at alguns anos atrs no existia relato da ocorrncia de viroses em lavouras de arroz. Porm, na safra agrcola de 2001/02 foi identificada a presena do enrolamento do arroz, causada por Rice stripe necrosis virus (RSNV), que transmitido por Polymyxa graminis, em lavouras no municpio de Dona Francisca, da Depresso Central do estado do Rio Grande do Sul (Maciel et al., 2002). As perdas de produo causadas por esta doena podem chegar a 20%, conforme trabalhos realizados na Colmbia (Pardo & Muoz, 1994). No Brasil, estima-se que as perdas possam atingir em torno de 30% do rendimento. Algumas estratgias tm sido buscadas para o manejo desta virose, dentre as quais se destacam a obteno de cultivares resistentes, adequao das doses de adubao de base e de cobertura, uso de agentes de biocontrole e adequao da poca de semeadura (Morales, 2001). A ao de Trichoderma harzianum sobre os cistosoros de Polymyxa betae, vetor do vrus BNYVV em beterraba, j foi observada por DAmbra & Mutto (1986), em experimento in vitro, onde esses verificaram que o antagonista foi capaz de destruir os cistosoros fora e dentro das razes. Devido ao escasso conhecimento sobre as alternativas para o controle desta doena, esse trabalho objetivou a avaliao de bioformulados base de isolados de Trichoderma sp. como biocontroladores do complexo Polymyxa graminisRSNV e o efeito no crescimento das plantas de arroz em nvel de campo, sob diferentes doses e formas de aplicao. O experimento foi conduzido, de 16/10/2003 a 27/02/2004, em rea de vrzea com histrico de ocorrncia natural de enrolamento de arroz, no municpio de Agudo, RS. O delineamento experimental utilizado foi de blocos casualizados, com quatro repeties, com os tratamentos sendo organizados em fatorial 3x2x2, sendo utilizados trs isolados de Trichoderma -1 sp., duas formas de aplicao (via semente e via adubo) e duas doses do bioformulado (2 kg.ha -1 -1 e 4 kg.ha ). Os tratamentos utilizados foram os seguintes: T1 isolado 8, via semente e 2 kg.ha ; -1 -1 T2 isolado 8, via semente e 4 kg.ha ; T3 isolado 8, via adubo e 2 kg.ha ; T4 isolado 8, via -1 -1 adubo e 4 kg.ha ; T5 isolado 10, via semente e 2 kg.ha ; T6 isolado 10, via semente e 4 -1 -1 -1 kg.ha ; T7 isolado 10, via adubo e 2 kg.ha ; T8 isolado 10, via adubo e 4 kg.ha ; T9 isolado -1 -1 11, via semente e 2 kg.ha ; T10 isolado 11, via semente e 4 kg.ha ; T11 isolado 11, via -1 -1 adubo e 2 kg.ha ; T12 isolado 11, via adubo e 4 kg.ha ; T13 Testemunha. Para a forma de aplicao via semente, essas foram umedecidas com gua e posteriormente misturadas com bioformulado, cobrindo a superfcie das mesmas. Na aplicao via adubo o bioformulado foi misturado no adubo a seco. Em ambas as formas as misturas foram realizadas no momento da semeadura. A semeadura foi realizada pelo sistema de cultivo convencional de arroz irrigado por inundao utilizando-se a cultivar IRGA 417, em parcelas com dimenses de 3m x 4m, com -1 densidade de 122 Kg de semente.ha e espaamento de 0,20m. A data de semeadura foi dia 16/10/2003, com a emergncia das plntulas ocorrendo em torno do dia 26/10/2003. Cada parcela experimental foi isolada com taipas, evitando que a entrada de gua de irrigao descaracterizasse os tratamentos. A entrada de gua foi realizada 25 dias aps a emergncia. A adubao da rea foi baseada na anlise de solo e no Manual de Procedimentos do Projeto -1 10/IRGA. A adubao utilizada foi de 300 Kg.ha de NPK (5-20-30) na semeadura. Em cobertura -1 foram adicionados 100 Kg de N.ha , divididos em duas aplicaes, 2/3 da dose de nitrognio de cobertura, sob a forma de uria, foi aplicada trs dias antes da inundao e o 1/3 restante no estdio V8 da escala de Counce et al. (2000). A aplicao de herbicidas baseou-se nas recomendaes tcnicas para a cultura do arroz, sendo utilizados os herbicidas Pyrazosulforon -1 -1 (20g i.a.ha ) e Quinclorac (375 g i.a.ha ), aplicados dois dias antes da colocao da gua.
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As avaliaes foram as seguintes: I - estande de plantas aos 10 dias aps emergncia -1 dae (nmero de plantas emergidas.m ), foi realizada a contagem de quatro repeties de 1 m por parcela; II - peso seco de plantas aos 30 dae (g), foram pesadas duas repeties de 10 plantas por parcela; III - altura de plantas aos 30 dae (cm), foram medidas 10 plantas por parcela; IV -2 incidncia de enrolamento aos 30 dae (plantas com sintomas.m ), foram realizadas contagens de 2 -1 duas repeties de 1 m por parcela ; e V - rendimento de gros aos 120 dae (kg.ha ), foi colhida 2 uma rea de 3 m por parcela. Para avaliao de altura e peso seco de plantas foram coletadas amostras de plantas. Os dados obtidos foram submetidos anlise da varincia e as mdias dos tratamentos foram comparadas com a testemunha atravs do teste de Dunnett, ao nvel de 5% de probabilidade de erro. Os resultados de comparao das mdias pelo teste de Dunnett (Tabela 1), na qual a mdia de cada tratamento testada contra a mdia da testemunha, possibilitaram verificar que para todas as variveis, exceto rendimento de gros, nenhum tratamento diferenciou-se estatisticamente da testemunha. Na varivel rendimento de gros o tratamento 6 (Isolado 10, -1 tratamento de semente, 4 kg.ha ) diferenciou da testemunha, mostrando-se superior aos demais, portanto, infere-se que h, possivelmente, um efeito positivo do isolado 10 de Trichoderma sp. sobre as caractersticas que influenciam o rendimento, mesmo no tendo sido registrado efeito destes na reduo da incidncia de enrolamento. Efeito de promoo de crescimento proporcionado por isolados de Trichoderma sp. atravs do aumento no peso seco da parte area e razes e, na eficincia no uso de nutrientes, j foi verificado por Kleifeld & Chet (1992), Harman (2000). Outra provvel explicao para este fato, pode ser que a severidade da doena, apesar de valores de incidncia semelhantes, nas plantas tratadas com bioformulados tenha sido menor, portanto, proporcionando um maior rendimento de gros. Na avaliao de incidncia de enrolamento nenhum tratamento se diferenciou da testemunha. Observa-se tambm na Tabela 1, que o rendimento, para todos os tratamentos, foi relativamente baixo quando comparados com a -1 mdia da regio, em torno de 7000 kg.ha na safra 2002/03 (IBGE, 2003). Entretanto, a rea sobre a qual foi instalado o experimento apresentou, alm da ocorrncia de doena, problemas srios com manuteno de lmina de gua recomendada para a cultura, sendo este tambm um fator para reduo do rendimento. Conclui-se ento, que os bioformulados base de Trichoderma sp. apresentam potencial para o manejo do complexo Polymyxa graminis-RSNV, principalmente pelo maior rendimento proporcionado por esses e verificado nesse trabalho.
Tabela 1. Mdia da altura de plantas (AP), estande de plantas (EP), peso seco (PS10), incidncia de enrolamento (INCE) e rendimento de gros (REND) da cultivar de arroz IRGA 417 avaliada com aplicao de 12 tratamentos (trs isolados de Trichoderma sp., duas formas de aplicao e duas doses) e testemunha. Agudo, RS, UFRGS/IRGA, 2004.
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AP EP PS10 INCE REND -2 -1 -2 -1 (cm) (plantas.m ) (g.10 plantas ) (plantas.m ) (Kg.ha ) 1 25,01 a 450,31 a 1,56 a 46,50 a 4703 a 2 26,38 a 434,06 a 1,68 a 40,50 a 4903 a 3 28,52 a 397,81 a 1,72 a 84,50 a 5040 a 4 27,03 a 397,19 a 2,00 a 55,38 a 5478 a 5 26,64 a 394,06 a 1,61 a 64,25 a 5391 a 6 26,12 a 361,25 a 1,53 a 61,63 a 5859 7 25,08 a 422,19 a 1,81 a 50,25 a 5253 a 8 23,32 a 391,88 a 2,13 a 50,25 a 5094 a 9 27,12 a 374,38 a 1,77 a 38,38 a 5629 a 10 26,48 a 412,50 a 2,22 a 74,00 a 4960 a 11 24,97 a 415,94 a 2,40 a 63,50 a 5175 a 12 26,11 a 423,75 a 1,64 a 51,63 a 4988 a 13 25,44 a 380,31 a 1,72 a 63,63 a 3938 a (1) Mdias no seguidas por letra diferem da testemunha ao nvel de 5% de probabilidade pelo teste de Dunnett. Tratamento

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REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS COUNCE, P. A.; KEISLING, T. C.; MITCHELL, A. J. A uniform, objective, and adaptive system for expressing rice development. Crop Science, Athens, v.40, n.2, p.436-443, 2000. DAMBRA, V.; MUTTO, S. Parasitism of Trichoderma harzianum on cystosori of Polymyxa betae. Journal of Phytopathology, Berlin, v.115, p.61-71, 1986. HARMAN, G. E. Myths and dogmas of biocontrol Changes in perceptions derived from research on Trichoderma harzianum T-22. Plant Disease, St. Paul, v.84, n.4, p.377-393, 2000. IBGE. Levantamento Sistemtico da Produo Agrcola. Disponvel em: <http://www.sidra.ibge.gov.br>. Acesso em: jul. 2003. KLEIFELD, O.; CHET, I. Trichoderma harzianum interaction with plants and effect on growth. Plant and Soil, Dordrecth, v.144, n.2, p.267-272, 1992. MACIEL, J. L.N. et al. Ocorrncia do vrus RSNV (Rice stripe necrosis virus) em lavouras de arroz do Rio Grande do Sul. In: CONGRESSO DA CADEIA PRODUTIVA DE ARROZ, 2002, Florianpolis. Resumos ... Florianpolis, 2002. p.491-492. MORALES, F. J. El entorchamiento del arroz: un modelo para el manejo integrado de enfermedades virales. Foro Arrocero Latinoamericano, Cali, v.7, n.1, p.12-15, 2001. PARDO, F.; MUOZ, D. Agente causal del entorchamiento en el cultivo del arroz en los Llanos Orientales. Arroz, Bogot, v.43, p.16-22, 1994.

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VIRULNCIA DE HAPLTIPOS DE Magnaporthe grisea INOCULADOS EM CONDIES DE CAMPO


Alex da Silva Corra , Caren Regina Cavichioli Lamb , Johannes Humbertus Falcade , Joo (2) (1) 1 Leodato Nunes Maciel e Marcelo Gravina de Moraes , Faculdade de Agronomia, Departamento de Fitossanidade, Laboratrio de Fitopatologia Molecular, UFRGS, Av. Bento 2 Gonalves 7712, CEP 91540-000, Porto Alegre, RS, E-mail: alexcorrea@pop.com.br, EMBRAPA Trigo.
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O conhecimento da populao de Magnaporthe grisea, agente causal da brusone em arroz, fundamental para a seleo de gentipos resistentes, sendo de grande importncia para a estabilidade da produo arrozeira no Rio Grande do Sul. A resistncia dos cultivares em uso rapidamente perdida devido instabilidade gentica do fungo, aliada ao uso de mtodos inadequados para a seleo de gentipos resistentes. A ocorrncia e a freqncia de determinados hapltipos do patgeno em gentipos contendo genes de resistncia, possibilitam a identificao de genes que devero ser priorizados no programa de melhoramento gentico. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrncia e a freqncia de hapltipos de M. grisea preponderantes no estado do Rio Grande do Sul em linhas quase-isognicas de arroz (NILs), com os principais genes que conferem resistncia brusone, do Banco Ativo de Germoplasma de Arroz (BAG) do IRGA. O experimento foi realizado na subestao experimental do IRGA em Torres, onde, anualmente so plantados e avaliados, quanto ao grau de resistncia brusone, cerca de 6.000 gentipos de arroz. Nesse local, foi semeada a lano uma mistura de cultivares suscetveis (700 -1 Kg.ha ), em faixas de 1 m de largura distanciadas 3m. Aps quarenta e cinco dias, foram 2 5 submetidas inoculao 0,4 ml por m da suspenso composta pela mistura de 2 x 10 -1 esporos.ml de 7 hapltipos de M. grisea preponderantes no estado do RS. Foram coletadas folhas e panculas das linhas quase-isognicas C104 LAC, C101 A51 e IR 1529, contendo os genes Pi-1, Pi-2 e Pi-33, respectivamente. As amostras foram incubadas em cmaras midas a 28C por 48h, para posterior isolamento monosprico. Isolados monospricos foram crescidos em meio de farinha de arroz (farinha de arroz, 20g; gar, 15g; -1 dextrose, 5g.L ) e armazenados em papel de filtro a 70C (BARROMEO et al., 1993). O DNA genmico foi extrado pelo mtodo CTAB (MURRAY & THOMPSON,1980), a partir de miclios crescidos em meio lquido (VALENT et al., 1986). A anlise dos isolados foi realizada com base no polimorfismo dos fragmentos de DNA resultantes da amplificao por Pot2-PCR (GEORGE et al., 1998). Os produtos das amplificaes foram separados por eletroforese (47V por 18h) em gel de agarose 0,6% e corados com brometo de etdio. Foram obtidos 73 isolados monoconidiais provenientes de folhas e panculas com sintomas. A anlise do perfil eletrofortico de 42 isolados, baseada na ocorrncia de 27 fragmentos de DNA obtidos por Pot2-PCR, revelou a ocorrncia de oito padres distintos (hapltipos) (Figura 1). Foi verificada a presena dos 7 hapltipos inoculados em diferentes freqncias (Tabela 1), indicando que nenhumas das NILs foi resistente a todos os hapltipos utilizados. Uma vez que os trs genes de resistncia presentes nas NILs so considerados os mais importantes para incorporao em cultivares a fim de obter-se resistncia, pode-se concluir que os gentipos em avaliao nos programas de melhoramento ainda no possuem resistncia aos principais hapltipos do patgeno que esto presentes a campo. Alm dos 7 hapltipos inoculados, a caracterizao molecular indicou a presena do hapltipo no inoculado (E). Duas explicaes podem explicar essa observao. A primeira que o hapltipo (E) est presente na regio de Torres, mas no havia sido previamente identificado. Alternativamente, existe a possibilidade da ocorrncia de variabilidade atravs da compatibilidade vegetativa entre os isolados inoculados no BAG (ZEIGLER et al., 1997). A seleo de gentipos sob alta concentrao de inculo pode estar proporcionando ao patgeno condies ideais para o surgimento de novas raas atravs da recombinao parassexual, acarretando na perda de

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resistncia dos cultivares em to pouco tempo. Sendo assim, h necessidade de uma maior precauo na conduo de viveiros de infeco campo, pois esses podem servir como locais favorveis ao surgimento de novas raas com diferentes padres de virulncia.

A B C

D E

F G H M

2.000pb

1.000pb

Figura 1. Perfis moleculares de oito hapltipos de M. grisea (A-H) gerados por Pot2-PCR. Tabela 1. Ocorrncia e freqncia dos hapltipos nas linhas quaseisognicas (gentipos).
HAPLTIPOS

Gentipos

C104 LAC C101 A51 IR 1529

A 2

B 2 1

C 3 -

D 1 5

E 1

F 2 2

G 9 13 -

H 1 -

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS BORROMEO, E.S., NELSON, R.J., BONMAN, J.M. LEUNG, H. Genetic differentiation among isolates of Pyricularia infecting rice and weed hosts. Phytopathology, St. Paul v.83, p.393399, 1993 GEORGE, M.L.C; NELSON, R.J.; ZEIGLER, R.S.; LEUNG,H. Rapid population analysis of Magnaporthe grisea by using rep-PCR and endogenous repetitive DNA sequences. Phytopathology, St. Paul, v.88, n.3, p.223-229, 1998. MURRAY, M.G., THOMPSON, W.W. Rapid isolation of high molecular-wigh plant DNA. Nucleic Acids Res., Osford, v.8, p.746-749, 1980. VALENT, B., CRAWFORD, M.S., WEAVER, C.G., CHUMLEY, F.G. Genetics studies of pathogenicity and fertility of Magnaporthe grisea. Iowa State J. Res. v.60, p. 569-594, 1986. ZEIGLER, R.S.; SCOTT, R.P.; LEUNG, H. et al. Evidence of parassexual exchang of DNA in the rice blast fungus challenges its exclusive clonality. Phytopathology, St. Paul, v.87, n.3, p. 284-294, 1997.

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SUSCETIBILIDADE DE GENTIPOS DE ARROZ IRRIGADO MANCHA-NOSGROS NOS ENSAIOS DE VCU EM CONDIES TROPICAIS
Evane Ferreira, Anne Sitarama Prabhu, Alberto Baeta dos Santos, Paulo Hideo Nakano Rangel, Dino Magalhes Soares, Jos Alexandre F. Barrigossi.. Caixa postal 179 Santo Antnio de GoisGO, e-mail evane@cnpaf.embrapa.br

As manchas-nos-gros esto associadas patgenos fngicos e bacterianos e so um dos principais problemas do arroz, cultivado tanto em terras altas como em vrzea. O dano desses agentes patognicos tm maior importncia quando ocorrem com temperaturas de 15 a 17C, umidade alta e o percevejo Oebalus poecilus. No Rio Grande do Sul, o frio e o percevejo causam os danos fsicos iniciais, que favorecem a entrada dos microorganismos manchadores dos gros, sendo difcil identificar os patgenos envolvidos com o aparecimento de manchas-nosgros apenas pelo sintoma (Prabhu et al. 1999). Estes autores mencionam os fungos Alternaria padwuichii, Curvularia lunata,e Dreschslera oryzae e as bactrias Pseudomonas fiscovagina e Erwinia spp.como principais microorganismos manchadores de gros em arroz irrigado no Estado do Tocantins. Posteriormente essa relao foi ampliada por Prabhu (2002), com as seguintes espcies: Bypolaris oryzae, Phoma sorghina, Pyricularia grisea, Sarocladium oryzae, Dreschslera sp., Curvularia sp., Nigrospora sp., Fusarium spp., Coniothynium sp.,Epicoceum sp., Phytomyces sp., Chetomium sp. e Pseudomonas sp. Adultos e ninfas de percevejos Oebalus spp., ocorrem anualmente em todos os arrozais do Brasil e causam danos semelhantes (Ferreira 1998). Oebalus poecilus, geralmente o mais comum em arroz irrigado, por isso, mais prejudicial a este sistema de cultivo. Alimenta-se das panculas, sugando as suas espiguetas e ramificaes primrias e secundrias, deixando nos pontos picados uma secreo salivar conhecida por bainha de estilete. Espiguetas sugadas no inicio do estdio leitoso tm desenvolvimento anormal ou ficam vazias; se a alimentao ocorrer em espigueta em estdio de massa pode haver reduo e enfraquecimento da estrutura do endosperma e se infectado por certos fungos pode desenvolver mancha escura. Endospermas nestas condies podem quebrar durante o beneficiamento e reduzir a porcentagem de gros inteiros. Endosperma picado que no quebra durante o processo de beneficiamento aparecem no arroz principal, reduzindo o valor comercial do produto (Ferreira e Barrigossi 2001).Os fungos Bipolaris oryzae, Curvularia lunata, Fusarium spp. e Ppenicilium sp j foram isolados das pernas ou rostro de O. poecilus (Kennard 1966 ), e quando associados atividade alimentar do inseto contribuem para aumentar a incidncia de manchas nos gros. Neste trabalho procurou-se avaliar a suscetibilidade mancha-nos-gros de 14, 19,e 20 gentipos de arroz irrigado constituintes dos ensaios de Valor de Cultivo e Uso (VCU) de Brusone (VCU-Brusone), de ciclo precoce (VCU-Precoce) e de ciclo mdio (VCU-Mdio), respectivamente. Estes ensaios foram conduzidos em Flores de Gois_GO, no perodo de novembro a maro de 2003. Na metade final do ciclo das plantas foram constatadas infestaes de Diatraea saccharalis, Tibraca limbativentis e principalmente de Oebalus poecilus, alm de infeces por Pyricularia grisea, Bipolaris oryzae. Na colheita dos experimentos foram retiradas amostras de 40 a 74 colmos nas fileiras bordaduras das parcelas, nas quatro repeties de cada experimento. As amostras foram submetidas a debulha, limpeza, pesadas e depois, as quatro repeties de cada experimento foram bem misturadas por gentipo. Das misturas foram retiradas quatro amostras de 50 espiguetas por gentipo. Estas amostras foram mergulhadas numa soluo de hidrxido de sdio a 10%, 70C por 10 minutos, para evidenciar as manchas no endosperma e depois examinadas numa bandeja de loua branca sob uma camada de gua de aproximadamente um centmetro (Ra 1974). As manchas no endosperma foram observadas por transparncia das brcteas, graduadas na escala 0 = sem mancha, 1 = manchas ocupando at 25% do endosperma, 2 = manchas ocupando at 50% do endosperma, 3 = manchas ocupando at 75% do endosperma e 4 = manchas ocupando totalmente o endosperma. Com os dados obtidos foram calculadas as porcentagens de espiguetas com manchas no endosperma e massas mdias de 100 espiguetas tomadas ao acaso, em cada classe, para cada experimento. As porcentagens de espiguetas com

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manchas no endosperma foram analisadas, utilizando o programa SAS (1990) e as mdias comparadas pelo teste de Scott & Knott (1974) a 5% de probabilidade. Ocorreram diferenas significativas entre as mdias dos gentipos para a caracterstica manchas no endosperma (Tabela 1) em cada experimento. Os gentipos com menor porcentagem de espiguetas manchadas podem ser resistentes O. poecilus, ou aos patgenos ou a ambos. No VCU-Brusone destacou-se como mais resistente a linhagem CNAi 9621.No VCUPrecoce destacaram-se a CNAi 8859, CNAi 9834 e a IRGA 417, este ltimo j citado por Prabhu 1999 como resistente a mancha-nos-gros no Rio Grande do Sul. No VCU- Mdio destacaram-se a BRS Bigu, BRS Alvorada, CNAi 9150 e Cica 8. Em outro estudo (artigo no prelo) feita em campo com os mesmos gentipos dos ensaios VCU- Precoce e VCU - Mdio, mantendo panculas artificialmente infestadas com dois adultos de O. poecilus, desde o inicio da fase leitosa at a completa maturao das espiguetas, elevou as porcentagens de espiguetas com manchas no endosperma para 74,3% e 76,4%, respectivamente, existindo diferenas significativas entre os gentipos de cada ensaio. A massa por 100 espiguetas, tanto com casca como sem casca, diminuiu em todos experimentos a medida que aumentou a intensidade das manchas no endosperma (Tabela2). Os dados obtidos permitem concluir que possvel reduzir as perdas quantitativas e qualitativas provocadas por microorganismos e percevejos manchadores de gros que incidem durante o desenvolvimento das panculas, selecionando gentipos de arroz para resistncia a esses agentes casuais.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS FERREIRA,E. Manual de identificao de pragas do arroz. Santo Antnio de Gois: EmbrapaCNPAF,1998. 110 p. (Documentos, 90) KENNARD, C. Effect of the paddy bug, O. poecilus on rice yield and quality in British Guyana. Lanham: FAO, 1966. p.54-57. (Plant Protection Bulletin, 14) PRABHU, A. S.; FILIPPI, M. C.; RIBEIRO, A. S. Doenas e seu controle. P.262-307.In: Almeida, N. R.; SANTOS, A.B.; SANTANA E.P, : A cultura do arroz no Brasil. Santo Antnio de Gois: Embrapa Arroz e Feijo, 633 p.1999. PRABHU, A. S. Doenas e seu controle. P. 7-8. In:Arroz Irrigado: Recomendaes Tcnicas para o Estado do Tocantins. Santo Antnio de Gois: Embrapa Arroz e Feijo, 2002. (Embrapa Arroz e Feijo. Circular Tcnica, 57). RA, B. K. Losses caused by the paddy bug and red rice in Guyana. Lanham:FAO, 1974. p. 8286. (Plant Protection Bulletin, 22). SAS INSTITUTE (Cary, Estados Unidos).SAS insight users guide: version 6. Cary,1990. 441 p. SCOTT, A.J. & KNOTT, M.A. Cluster analysis method for grouping means in the analysis of variance. Biometrics, 30, 1974. p. 507-512.

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Tabela 1. Mdias de espiguetas com manchas no endosperma (ME) em amostras de 50 espiguetas dos gentipos constituintes de cada ensaio de valor de cultivo e uso, no agrcola 2002/2003. Flores de Gois-GO, 2003. VCU - Brusone ME(%) 1 Gentipos ( %) CNAi 9606 29,4 a CNAi 9608 28,3 a CNAi 9610 30,1 a BRSGO Guar 35,0 a BRS Alvorada 25,4 b CNAi 9612 25,0 b CNAi 9613 28,6 a CNAi 9614 29,9 a CNAi 9615 26,4 b CNAi 9616 24,1 b CNAi 9620 32,5 a CNAi 9621 17,1c Formoso 24,9 b Metica 1 32,0 a Mdias 27,6 CV% 17,0 1 Mdias com letras iguais nas significncia de 0,05. VCU - Precoce Gentipos ME 1 ( %) VCU - Mdio Gentipos ME 1 ( %) 13,0 b 10,0 c 25,5 a 23,0 a 7,5 c 22,0 a 27,0 a 31,5 a 4,5 c 15,5 b 16,5 b 24,0 a 26,5 a 16,5 b 25,0 a 25,0 a 22,0 a 10,0 c 22,0 a 16,0 b 19,2 23,2 Knott na

CNAi 8859 4,0 d BRS Jaburu CNAi 8860 18,5 a BRS Bigua CNAi 8870 8,0 c CNA 8569 CNAi 8879 10,5 c BRSGO Guar CNAi 8880 12,5 b BRS Alvorada CNAi 8886 10,5 c CNAi 9089 CNAi 8885 10,0 c CNAi 9090 CNAi 9867 14,0 b CNAi 9097 CNAi 9834 5,5 d CNAi 9150 CNAi 9838 14,5 b CNAi 9687 CNAi 9842 10,5 c CNAi 9705 CNAi 9853 10,5 c CNAi 9747 CNAi 9865 9,0 c CNAi 9748 BRS Pelota 13,0 b CNAi 9778 IRGA 417 5,5 d CNAi 9730 BR IRGA 409 8,5 c CNAi 10390 Taim 8,5 c CNAi 10393 Javae 9,5 c CICA 8 SCS BRS 111 22,0 a Formoso Metica 1 Mdia 10,8 Mdia CV% 31,4 CV% colunas no diferem pelo mtodo de Scott &

Tabela 2. Massa mdia de 100 espigueta com e sem casca nas classes utilizadas para cada experimento de VCU conduzido em 2002/2003. Flores de Gois-GO, 2003.
1

Experimento

Espiguetas

Classes/ Intensidade de mancha

Mdias

0, (0/4) 1, (1/4) 2, (2/4) 3, (3/4) 4, 4/4) VCU-Brusone Com casca 2,49 2,47 2,20 1,97 1,73 2,17 VCU-Brusone Sem casca 2,13 2,06 1,87 1,75 1,33 1,83 VCU- Precoce Com casca 2,58 2,40 2,20 1,88 1,47 2,11 VCU- Precoce Sem casca 2,05 1,87 1,57 1,36 0,99 1,57 VCU- Mdio Com casca 2,62 2,43 2,19 1,89 1,62 2,15 VCU- Mdio Sem casca 1,97 1,93 1,73 1,57 1,11 1,66 1 0/4= sem mancha, =mancha ocupando at 25% do endosperma, 2/4=mancha ocupando at 50% do endosperma, 3/4=mancha ocupando at 75% do endosperma e 4/4=mancha ocupando 100% o endosperma.

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MUTAGNESE POR RETROTRANSPOSIO EM ARROZ


Flavia Vanina Ferreira, Mnica de Medeiros Silva, Marcelo Gravina de Moraes. Laboratrio de Fitopatologia Molecular, Departamento de Fitossanidade, Faculdade de Agronomia, UFRGS. Av. Bento Gonalves, 7712, CEP 91540-000. fvferreira@hotmail.com.

Recentes avanos no conhecimento da gentica de arroz vm ocorrendo, em funo do aprimoramento de tcnicas de cultura de tecidos. O aumento do potencial produtivo da cultura de arroz via melhoramento gentico est relacionado ao aumento de resistncia dos gentipos a estresses biticos e tolerncia a estresses abiticos (MELHORAMENTO DE ARROZ, 1989). Para os diversos mtodos de melhoramento gentico vegetal, a cultura de tecidos in vitro um requerimento importante para que se possa obter variabilidade gentica. Neste caso pode ser utilizada a variabilidade gentica natural ou induzida atravs de agentes mutagnicos fsicos, qumicos ou biolgicos. A vantagem do uso de mutagnicos biolgicos, como os transposons e os retrotransposons, que ao serem inseridos interrompem um gene causando uma mutao, deixando uma marca que possibilita a identificao molecular do local de insero e, conseqentemente, permitem a avaliao do fentipo resultante. At o momento, foram identificados 32 membros da famlia de retrotransposons Tos em arroz, sendo que o retrotransposon Tos17 ativado durante o cultivo in vitro e responsvel pelas mutaes induzidas durante a cultura de tecidos (LIU, 2004). A grande vantagem do uso de Tos17 deve-se a sua mobilizao somente durante a cultura de tecidos sendo inativado aps a regenerao das plantas. A anlise de diferentes gentipos muito importante para poder identificar possveis gentipos doadores de retrotransposons, os quais podem ser uma ferramenta til para a introduo de variabilidade gentica nas populaes de arroz. Por outro lado, a presena de variabilidade gentica devido a eventos de retrotransposio em linhagens avanadas, com alto grau de homozigose indesejvel. Neste caso a identificao de gentipos com a presena de Tos17 ativo poderia constituir-se em uma ferramenta de eliminao de gentipos instveis. O presente trabalho tem como objetivo avaliar a ocorrncia do incremento de inseres do retrotransposon Tos17 em diferentes gentipos de arroz conduzidos em cultura de tecidos. Foram avaliadas cultivares com um histrico de variabilidade gentica, linhagens obtidas atravs de cruzamentos amplos com espcies silvestres e tambm ectipos de arroz vermelho (Tabela 1). Sementes maduras de diferentes gentipos foram descascadas e a assepsia foi realizada em cmara de fluxo laminar horizontal pela imerso das sementes em etanol 70% por 3 min, seguida de 20min de imerso em hipoclorito de sdio 4%. Aps, as sementes foram lavadas com gua destilada estril e inoculadas em meio MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962), suplementado -1 com 2,5 mg.L de 2,4-D (cido 2,4-diclorofenoxiactico) e incubadas no escuro a 25 C por seis meses, realizando-se sub-cultivos a cada 3 semanas. Foram colocadas cinco placas por gentipo, contendo 10 sementes cada. Aps 6 meses de cultivo, os calos embriognicos foram transferidos seqencialmente para os meios de regenerao MR3, MR2 e MR1 (Tabela 2), permanecendo durante 30 dias em cada um deles (IRALA, 2002). Os calos foram mantidos em BOD sob temperatura de 25C 2C, com 15 horas de luz e 9 horas de escuro. O DNA genmico de calos embriognicos de arroz e de folhas de plantas regeneradas foram utilizados para avaliar a presena de cpias de Tos17 atravs da utilizao da reao em cadeia da polimerase (PCR), utilizando oligonucleotdeos iniciadores que amplificam a seqncia do gene da transcritase reversa de Tos17 (HIROCHIKA H., 1993). Aps seis meses de cultivo foram obtidos no meio de induo de calos em mdia 84 calos por gentipo (Figura 1). Quando foram comparados os diversos gentipos no foi verificada diferena quanto resposta ao meio de induo de calos. Os calos sobreviventes aps o perodo de induo foram transferidos para o meio de regenerao. Dos 30 gentipos avaliados, somente nove (30%) apresentaram regenerantes. Utilizando-se como critrio a presena de plntulas medindo um centmetro de comprimento aps 30 dias em MR 3, foram obtidas aproximadamente

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5 plntulas por gentipos (Tabela 1). A dificuldade de regenerao gentipo-dependente, ou seja, uma grande variao de respostas a meios de cultivo observada de acordo com a cultura vegetal utilizada (JAN et al., 2001). O prolongado tempo em cultura in vitro um fator que dificulta a regenerao de plantas (IRALA, 2002). Porm, neste trabalho foram obtidas plantas regeneradas a partir de calos submetidos a 6 meses de cultivo in vitro. A partir do DNA genmico extrado de calos e folhas procedeu-se deteco da presena de Tos17, observando-se uma banda de 237 pb correspondente seqncia do gene da transcritase reversa de Tos17 em todos os gentipos testados (Figura 2). Para a identificao dos genes mutados pela insero do retrotransposon Tos17 procedeu-se amplificao das seqncias que flanqueiam o inserto Tos17 e isolamento da banda resultante. O produto obtido foi seqenciado para verificar o gene onde ocorreu insero e sua seqncia comparada com quelas depositadas nos bancos de genes. Os resultaram indicaram similaridade com determinadas regies do genoma do arroz, indicando o funcionamento do mtodo de identificao das inseres. As anlises em andamento visam avaliao fenotpica das plantas regeneradas, a determinao do incremento do nmero de inseres de Tos17 nas plantas regeneradas e o seqenciamento de regies que flanqueiam as inseres. Tabela 1. Gentipos utilizados no trabalho e o nmero de plantas regeneradas.
Gentipo N de regenerantes 1 Gentipo N de regenerant es

CNAi 9930(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9931(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9932(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9933(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9934(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9935(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9936(BG 90-2/Oryza glumepatula) CNAi 9937(BG 90-2/Oryza glumepatula) IRGA 421 Lemont BG 90-2 Oryza Rufipogos Oryza Glaberrima Bg90-2/ Oryza rufipogon Bg90-2/ Oryza rufipogon

10

8 2 2

Bg90-2/ Oryza rufipogon Bg90-2/ Oryza rufipogon Bg90-2/ Oryza rufipogon Bg90-2/ Oryza rufipogon Bg90-2/Oryza glaberrima Bg90-2/Oryza glaberrima Arroz Vermelho (Restinga Seca) Arroz Vermelho (Santa Victoria do Palmar) Arroz Vermelho (Camaqu) Arroz Vermelho (EEA Bloco B5 Porte Baixo) CT-13432-189 Pi 1/2/33 Arroz Vermelho (Dom Pedrito) Arroz Vermelho (Torres) Arroz Vermelho (Restiga Seca) Arroz Vermelho (Banhado do Colgio)

1 5 7

Tabela 2. Concentraes de cido #-naftalenoactico (ANA) e de benzilaminopurina (BAP) utilizados nos meios de regenerao (IRALA, 2002).
Meio M1 Reagentes 0,5 mg/ L BAP, 0,05 ANA (mg/L) 3% de sacarose, 0,2% de Phytagel (Sigma) e pH 5,8. 2 mg/ L BAP, 0,5 ANA (mg/L) 3% de sacarose, 0,2% de Phytagel (Sigma) e pH 5,8. 4 mg/ L BAP, 0,5 ANA (mg/L) 3% de sacarose, 0,2% de Phytagel (Sigma) e pH 5,8. Referncia VALDEZ et al (1996;1997)

M2

DODE (1999)

M3

SAHRAWAT & CHAND (1998)

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200,00 180,00 160,00 140,00 120,00 100,00 80,00 60,00 40,00 20,00 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 Gentipos

Figura 1. Nmero de calos obtido por gentipo aps seis meses de induo em meio MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962).

Nmero de calos

500 298 220

Figura 2. Perfil eletrofortico de gentipos de arroz amplificados com oligoniclotdeos iniciadores da seqncia da transcritase reversa de Tos17: (1) Padro de peso molecular 1 Kb, (2), (3) e (4) ilustra amplificao de 3 gentipos.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS HIROCHIKA, H. Activation of tobacco retrotransposons during tissue-culture. EMBO Journal, v.12, p.2521-2528, 1993. IRALA, P.B. Transformao gentica de Oryza sativa Subespcies indica cultivar BR-IRGA 409. Porto Alegre, 2002. Dissertao (Mestrado)-Programa de Ps-Graduao em Biologia Celular e Molecular da UFRGS, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, 2002. JAN, A.; HASSAN, Q.M.; FATIMA, T.; et al. Tissue culture response of local varieties of rice (Oryza sativa L.) of NWFP. Journal of Biological Sciences, v.5, p.387-390, 2001. LIU, Z.L.; HAN, F.P.; TAN, M.; et al. Activation of a rice endogenous retrotransposon Tos17 in tissue culture is accompanied by cytosine demethylation and causes heritable alteration in methylation pattern of flanking genomic regions. Theoretical and Applied Genetics, v.109, p.200-209, 2004. MELHORAMENTO DE ARROZ. Reunin sobre Mejoramiento de Arroz en el Cono Sur, Goiania (GO), Brasil, 1989. MURASHIGE, T; SKOOG, F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco cultures. Plant Physiology, v.15, p.473493, 1962. Agradecimentos a Caren Regina Cavichioli Lamb, Oneides Antnio Avozani.

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VERIFICAO DA EFICCIA DE CONTROLE QUMICO DA MANCHA PARDA NA CULTURA DO ARROZ IRRIGADO (ORYZA SATIVA L.)
Ione Carmen Pedrollo de Vasconcellos Chaves, Luiz Carlos de Vasconcellos Chaves, SANTAGRO - Santa Cruz Agrcola Com. Ltda Rua Joaquim Nabuco 149, Santa Cruz do Sul, RS, CEP 96820-550. E-mail: santagro@viavale.com.br Donizeti Aparecido Fornarolli, Alisson Francisco Celmer, Milenia Agro Cincias S.A. Rua Pedro Antonio de Souza, 400, Londrina PR. dfornarolli@milenia.com.br

Entre os mais importantes doenas da lavoura de arroz encontra-se o fungo Drechslera oryzae (B. de Hann) Subr. & Jain = Helminthosporium oryzae Breda de Hann (sin.) = Cochliobolus miyabeans (Ito & Kurib.) Drech. & Dast. = Bipolaris oryzae Breda de Haan), agente causal da mancha parda, que pode comprometer a produtividade e a qualidade do arroz. Mais do que a brusone, este fungo parece estar mais ligado fatores nutricionais, como a deficincia de potssio e de microelementos. Seus sintomas comeam com as folhas apresentando manchas ovais, de cor marrom, podendo apresentar o centro esbranquiado. Nos gros, estas manchas so marrom-escuras, ocasionando a reduo no peso dos gros, chochamento, e perda de qualidade, devido a gessamento e colorao escura. Esta doena transmitida principalmente pelas sementes, e o patgeno pode sobreviver muitos anos nos restos de cultura. Os danos provocados so resultantes da reduo da capacidade fotossinttica da planta, o que implica em menor desenvolvimento vegetativo, reduo no rendimento e diminuio na qualidade dos produtos. O presente trabalho teve por objetivo avaliar e comparar a eficincia agronmica de um grupo de fungicidas no controle da mancha parda em arroz (Oryza sativa L.). Foram instalados dois ensaios com este objetivo, em Santa Cruz do Sul e Rio Pardo. Um ensaio foi instalado na regio rizcola de Santa Cruz do Sul, RS, durante a safra 2004/05 sobre a cultura do arroz irrigado cultivar Br Irga 417, e outro trabalho foi instalado em Rio Pardo, na cultivar Br Irga 422 CL. Os tratos culturais foram os preconizados pelas Indicaes Tcnicas da Pesquisa de Arroz Irrigado. As parcelas foram compostas por quatorze linhas (2,45 m) de largura com 7,50 m de comprimento, com rea total de 18,375 m2. O delineamento experimental foi de blocos ao acaso com 6 tratamentos e quatro repeties. Em Santa Cruz do Sul, os tratamentos foram aplicados em 2 pulverizaes: no dia 14/01/2005 aos 40 DAE (Dias Aps Emergncia) na fase final de perfilhamento (UR 72% e temperatura 24C), e 12 dias aps na fase de emborrachamento (UR 68% e temperatura 26C). Em Rio Pardo, os produtos foram aplicados aos 48 e 64 DAE, respectivamente nas fases final de perfilhamento e incio de emborrachamento. Foram avaliadas Incidncia e Severidade da mancha parda aos 48, 64 e 82 DAE (Dias Aps Emergncia) em 50 folhas tomadas aleatriamente por parcela. Calculou-se o percentual de controle (%PC) pela frmula de Abbott. Com a finalidade de sua normalizao e aplicao dos testes estatsticos, os dados de percentual de controle foram transformados em raiz (x) + 0,5. 2 Para a determinao do rendimento, plantas de uma rea equivalente 4 m foram colhidas e separadas da palha manualmente. Os gros foram pesados e submetidos correo da umidade da massa de gros para 13%, e transformados em kg/ha, no sofrendo qualquer outra transformao para anlise estatstica. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de mdias pela anlise da varincia ao nvel de 5% de probabilidade. As anlises estatsticas para comparao de mdias necessrias foram efetuadas atravs do software SASM - Sistema para Anlise e Separao de Mdias, tendo-se utilizado o mtodo de Scott-Knott, para eliminao do efeito de confundimento.

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Tabela 1. Severidade da mancha parda Drechslera oryzae, em arroz (Oryza sativa) cv. Br Irga 417, na pr avaliao ( 48 DAE), 64 e 82 DAE (Dias Aps Emergncia) Santa Cruz do Sul, 2004/05. Doses L / ha Tratamentos % Severidade de mancha parda (pr avaliao) 48 DAE Mdia * 0,48 a 0,5 0,6 0,5 0,3 + 0,3 0,6 0,40 a 0,60 a 0,48 a 0,63 a 64 DAE Mdia * 11,95 a 1,80 b 1,55 b 2,15 b 1,50 b PC 0 84,94 87,03 82,01 87,45 82 DAE Mdia * 23,38 a 1,65 b 0,75 b 2,08 b 1,23 b PC 0 92,94 96,79 91,12 94,76

Testemunha Orius 250 EC Orius 250 EC Bendazol 500 SC Orius 250 EC + Bendazol 500 SC Stratego 250 EC

0,38 a

1,88 b

84,31

1,35 b

94,22

CV % 14,97 14,35 19,84 * Mdias seguidas pela mesma letra no apresentam significncia estatstica (Scott-Knott, 5%) Tabela 2. Severidade da mancha parda Drechslera oryzae, em arroz (Oryza sativa) cv. Br Irga 422 CL, aos 40 , 52 e 74 DAE (Dias Aps Emergncia) e incidncia na pr aplicao ( 40 DAE). Rio Pardo, RS. 2004/05. Doses % Tratamentos L / ha Incid. % Severidade de mancha parda (pr avaliao) 40 DAE Mdia * 78,5 a 77,5 a 76,5 a 79,5 a 40 DAE Mdia * 4,83 a 4,13 a 4,88 a 4,23 a 4,30 a 52 DAE Mdia * 19,63 a 3,30 c 1,98 c 6,15 b 4,58 b PC 0 83,18 89,94 68,66 76,69 74 DAE Mdia * 35,20 a 4,65 c 3,23 c 8,30 b 6,90 b Mdia * 0 86,79 90,84 76,42 80,40

Testemunha Orius 250 EC Orius 250 EC Bendazol 500 SC Orius 250 EC + Bendazol 500 SC Stratego 250 EC

0,5 0,6 0,5

0,3 + 79,5 a 0,3

0,6

77,5 a

4,25 a

2,93 c

85,10

3,95 c

88,78

CV % 5,14 13,73 14,92 a 16,05 * Mdias seguidas pela mesma letra no apresentam diferenas estatstica (Scott-Knott, 5%)

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Em Santa Cruz do Sul, percentuais de eficincia de controle de mancha parda (H. oryzae) variaram de 82,01% at 87,45% na primeira avaliao aos 64 DAE e de 91,12 a 96,79% na segunda avaliao aos 82 DAE. Todos os tratamentos fungicidas apresentaram diferena significativa de controle (tabela 1) e de rendimento (tabela 3) com relao ao tratamento testemunha, sendo que as parcelas tratadas apresentaram uma produtividade superior da testemunha, variando de 938 a 1599 Kg/ha a mais com relao a testemunha, no diferindo, entretanto, entre si. No ensaio de Rio Pardo, percentuais de eficincia de controle de mancha parda (H. oryzae) variaram de 68,66% at 89,94% na primeira avaliao aos 52 DAE e de 80,40% a 90,84% na segunda avaliao aos 74 DAE (Tabela 2).Todos os tratamentos fungicidas apresentaram diferena significativa de controle e de rendimento com relao ao tratamento testemunha (Tabela 3), sendo que as parcelas tratadas apresentaram uma produtividade superior da testemunha, e variaram de 965 a 1726 Kg/ha a mais com relao a testemunha, no diferindo, entretanto, entre si. No foram observados, durante o perodo de execuo do ensaio, efeitos fitotxicos que pudessem ser atribudos aos produtos e doses utilizadas. Tabela 3. Rendimento de arroz em Kg/ha, obtido no ensaio de controle de mancha parda em Santa Cruz do Sul e Rio Pardo. Santa Cruz do Sul, 2004-2005. Dose L/ha Rendimento observado Kg/ha de gros 2 Santa Cruz Acres Rio Pardo 1 1 Mdia Mdia 5453 b 0 4408 b 6766 a 7052 a 6648a 7003 a 6715 a 24,1 29,3 21,9 28,4 23,1 6091 a 6134 a 5373a 5567a 5862 a

Tratamentos

Acrs

1 Testemunha 2 Orius 250 EC 3 Orius 250 EC 4 Bendazol 500 SC 5 Orius 250 EC + Bendazol 500 SC 6 Stratego 250 EC
1

0,5 0,6 0,5 0,3 + 0,3 0,6

0 38,2 39,2 21,9 26,3 33,0

CV % 3,00 - Mdias seguidas pela mesma letra no apresentam significncia estatstica (ScottKnott, 5%) 2 Acrscimo de rendimento com relao testemunha

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS DHARAM, V.S.B. MATHUR, P. NEERGAARD, 1970. Control of seed-borne infection of Drechslera spp. on barley, rice and Oats with Dithane M-45. Indian Phytopathol., 23: 570572. ALTHAUS, R.A., CANTERI, M.G., GIGLIOTI, E.A. - Tecnologia da informao aplicada ao agronegcio e cincias ambientais: SASM - Sistema para Anlise e Separao de Mdias pelos mtodos de Duncan, Tukey e Scott-Knott. Anais do X Encontro Anual de Iniciao Cientfica, Parte 1, Ponta Grossa, p.280-281, 2001. EMBRAPA - Recomendaes Tcnicas da Pesquisa para o Sul do Brasil in: Centro de Pesquisa Agropecuria de Clima Temperado (CPACT - Pelotas, RS). Arroz Irrigado:. Pelotas, RS, 1993. 87 p. (EMBRAPA-CPACT.Documento, 3).

566

RAMOS, M.G. et alii. Manual de produo de arroz irrigado. Florianpolis, EMATER / EMPASC / ACARESC, 1985. RIBEIRO, A.S. - Doenas do Arroz Irrigado - Circular Tcnica n. 19 - Pelotas,RS, Brasil: EMBRAPA - CPATB,1988. RAO, M.N., D. LALITHAKUMARI, 1987. Effect of systemic fungicides on Drechslera oryzae, the brown spot pathogen of rice. Indian Phytopathol., 40: 168-173. RAO, S.S., K.G. RANGANATHAIAH, 1988. Control of seed-borne infection of Drechslera oryzae in paddy by seed treatment. Seed Res., 16: 193-199.

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BRANCA