Los experimentos de Mendel

Los experimentos de Mendel se publicaron en 1865 y 1866. El organismo empleado fue el guisante (Pisum sativum), que fue elegido por una serie de caractersticas. Los guisantes son baratos y fciles de obtener en el mercado. Ocupan poco espacio y tienen un tiempo de generacin relativamente corto (un ao). Producen muchos descendientes. Existen variedades diferentes que muestran distinto, color, forma, tamao, etc. (en trminos actuales, diramos que presentan Variabilidad Gentica) Es una especie Autgama, es decir, se autopoliniza de manera que el polen de las anteras de una flor cae sobre el estigma de la misma flor. Es fcil realizar cruzamientos entre distintas variedades a voluntad. Es posible evitar o prevenir la autopolinizacin castrando las flores de una planta (eliminando las anteras).

Las caractersticas que deban reunir las plantas experimentales eran: Poseer caracteres diferenciales constantes (color forma, textura) Los hbridos entre variedades deben poder protegerse de la influencia de polen extrao durante la floracin (embolsando las flores, por ejemplo)

Diseo experimental Experimento control:

Las 34 variedades empleadas fueron sometidas a prueba durante dos aos (dos generaciones sucesivas obtenidas por autofecundacin) para comprobar que todas producan descendencia constante. Por ejemplo, si las caractersticas de una variedad eran que todas las plantas producan semillas redondas y amarillas, comprobaba durante dos generaciones sucesivas de autofecundacin que todas las semillas de la variedad eran redondas y lisas (solo una variedad de las 34 probadas no produjo descendencia constante y fue eliminada del estudio). Estas variedades utilizadas por Mendel eran Lneas Puras constituidas por individuos idnticos para los caracteres analizados.

Diseo experimental
Se realizaba siempre el mismo esquema de cruzamientos: Cruzaba dos variedades o lneas puras (P1 y P2) que diferan en uno o varios caracteres y obtena la 1 generacin filial (F1) Seguidamente, autofecundaba () los hbridos de la 1 generacin filial (F1) y obtena la 2 generacin filial (F2) Por ltimo, autofecundaba () las plantas de la 2 generacin filial (F2) y consegua la 3 generacin filial (F3) El cruzamiento inicial lo llevaba a cabo en las dos direcciones posibles, es decir, en un caso utilizaba como donador de polen al P2 y en otro al P1, realizando cruzamientos recprocos (P1 x P2 y P2 x P1) P1 x P2 F1 F2 F3 P2 x P1 F1 F2 F3

Adems, llev a cabo Retrocruzamientos, es decir, cruzamientos de los hbridos de la 1 generacin filial (F1) por los dos parentales utilizados, en las dos direcciones posibles: F1 x P2 y P2 x F1 (cruzamientos recprocos) F1 x P1 y P1 x F1 (cruzamientos recprocos)

Los principales aciertos de Mendel fueron:

Utilizar en sus experimentos una especia autgama, ya que de esta manera aseguraba que las variedades que manejaba eran Lneas Puras, constituidas por individuos idnticos (homocigticos, diramos hoy) Elegir caracteres cualitativos fcilmente discernibles en sus alternativas. Por ejemplo, flores color blanco o prpura. Iniciar los experimentos fijndose cada vez en un slo carcter. De esta manera obtena proporciones numricas fciles de identificar. Utilizar relaciones estadsticas en varias generaciones sucesivas. Contar el nmero de individuos de cada tipo en las sucesivas generaciones y deducir proporciones sencillas. Llevar a cabo experimentos control y retrocruzamientos para comprobar sus hiptesis. Analizar caracteres independientes para demostrar su principio de la combinacin independiente (esto ltimo fue, ms bien, una cuestin de suerte)

CARACTERES DEL GUISANTE ANALIZADOS POR MENDEL a) b) c) d) e) f) g) Forma de la semilla: lisa o rugosa Color de la semilla: amarillo o verde. Color de la Flor: prpura o blanco. Forma de las legumbres: lisa o estrangulada. Color de las legumbres maduras: verde o amarillo. Posicin de las flores: axial o terminal. Talla de las plantas: normal o enana.

Antes de seguir, un poco de nomenclatura actual.

Genotipo: constitucin gentica para el conjunto de los genes de un individuo. Normalmente se refiere a uno o muy pocos genes. En las especies diploides (dos juegos de cromosomas, uno de origen materno y otro de origen paterno), como es el cado del guisante, en un locus (posicin del genoma) en el que solamente se han encontrado dos alelos (alternativas de un gen) distintos (A y a), hay tres genotipos posibles: Homocigoto A: AA (habitualmente, el alelo mayscula es dominante) Heterocigoto: Aa Homocigoto a: aa (habitualmente, el alelo minscula es recesivo)

Antes de seguir, un poco de nomenclatura actual.

Fenotipo: apariencia externa para el carcter analizado. Es la expresin del genotipo en un determinado ambiente. En especies diploides como el guisante, en un locus en el que solamente se han encontrado dos alelos distintos (A y a) y con dominancia completa de A sobre a (A>a), existen dos fenotipos posibles: Fenotipo A (Dominante) Fenotipo a (Recesivo) Cuando existe dominancia completa (A>a), la relacin entre genotipo y fenotipo es: Los genotipos AA y Aa presentan fenotipo dominante A El genotipo aa muestra fenotipo recesivo a

CRUZAMIENTOS DE UN SOLO CARCTER O MONOHBRIDO En primer lugar, Mendel analiz cada carcter por separado, cruzando variedades que diferan en un slo carcter. Por ejemplo, analiz el carcter color de las flores y para ello cruz una variedad de flores de color prpura por otra variedad de color de flores blanca. Cruzamiento inicial: Parentales Prpura x Blanca F1 Prpura Cruzamiento recproco: Parentales Blanca x Prpura F1 Prpura El cruzamiento de plantas con flores prpura por plantas con flores blancas, en cualquiera de las dos direcciones, di lugar a una 1 generacin filial (F1) uniforme, todas las plantas de la F1 tenan flores de color prpura.

La autofecundacin de los hbridos de la F1 origin una 2 generacin filial (F2) con 3/4 parte de plantas de color prpura y 1/4 de plantas con flores blancas.

Prpura

Blanca

Blanco

Prpura

F1 Prpura

F1 Prpura

F2 Genotipo 1/4 AA 3/4 A 1/2 Aa Fenotipo 1/4 a 1/4 aa 1/4 AA 3/4 A

F2 Genotipo 1/2 Aa Fenotipo 1/4 a 1/4 aa

Mendel adems autofecund todas las plantas de la (F2) y obtuvo la 3 generacin filial (F3). Todas las plantas de flores blancas de la F2 daban lugar solamente a plantas con flores blancas en la F3 (se comportaban como la variedad parental de flores blancas). Sin embargo, las plantas con flores de color prpura en la F2 daban en la F3 resultados distintos, 1/3 de la plantas con flores prpuras de la daban en la F3 solamente plantas de color prpura (se comportaban como la variedad parental prpura), mientras que 2/3 de las plantas de flores prpuras de la F2 daban lugar en la F3 a 3/4 de plantas con flores prpura y 1/4 de plantas con flores blancas (se comportaban como los hbridos de la F1) F2 Genotipos 1/4 AA 1/2 Aa Fenotipos 3/4 Prpuras 1/3 2/3 1/4 Blancas 1/4 aa

Todas Prpuras 3/4 Prpuras

F3 Fenotipos 1/4 Blancas

Todas Blancas

Utilizando la nomenclatura actual podemos escribir de la siguiente forma los resultados obtenidos por Mendel: Parentales Genotipo Fenotipo Gametos 1 Generacin filial Genotipo Fenotipo Gametos F1 2 Generacin filial Genotipos Fenotipos Fenotipos 1/4 AA 3/4 A 3/4 Prpuras 1/2 A Prpura AA A Todos A
X

Blanca aa a

F1 Prpura Aa A

Todos a

F2 1/2 Aa 1/ aa 1/4 a 1/4 Blancos 1/2 a

Basndose en estos resultados Mendel propuso las dos siguientes Leyes de la Transmisin de los caracteres de una generacin a la siguientes: 1 Ley de Mendel o Principio de la Uniformidad: Las plantas hbridas (Aa) de la 1 generacin filial (F1), obtenidas por el cruzamiento de dos lneas puras que difieren en un solo carcter, tienen todas la misma apariencia externa (fenotipo) siendo idnticas entre si (uniformes) y se parecen a uno de los dos parentales. Al carcter que se manifiesta en las plantas de la F1 (hbridos Aa) se le denomina Dominante y al carcter que no se manifiesta se le denomina Recesivo. Este resultado es independiente de la direccin en la que se ha llevado a cabo el cruzamiento.

2 Ley de Mendel o Principio de la Segregacin: La autofecundacin de las plantas hbridas (Aa) procedentes del cruzamiento entre dos lneas puras que difieren en un carcter origina una 2 generacin filial (F2) en la que aparecen 3/4 partes de plantas de apariencia externa (fenotipo) Dominante y 1/4 de plantas con apariencia externa (fenotipo) Recesiva, de manera, que el carcter Recesivo reaparece en la F2 en una de cada cuatro plantas. Este resultado se debe a que cuando los hbridos de la F1 forman sus gametos, los alelos del mismo locus segregan (se separan) dando lugar dos clases de gametos en igual proporcin, mitad del gametos con el alelo dominante (A) y mitad con alelo recesivo (a). Esto sucede tanto por el lado femenino como por el lado masculino.

Gametos Femeninos F1 Principio de la Segregacin 1/2 A 1/2 a 1/4 Aa (Fenotipo (A)

1/2 A Gametos Masculinos F1 1/2 a

1/4 AA (Fenotipo A)

1/4 Aa (Fenotipo A)

1/4 aa (Fenotipo a)

Los siete caracteres analizados por Mendel, cuando los analizaba por separado, se comportaron de la misma forma en cada uno de los cruzamientos realizados. Los resultados que obtuvo fueron los siguientes:
Fenotipo parental F1 F2 Relacin

1 Semilla lisa x rugosa 2 Semilla amarilla x verde 3 Flores prpuras x blancas 4 Legumbre lisa x estrangulada 5 Legumbre verde x amarilla 6 Flores axiales x terminales 7 Talla normal x enana

Todas lisas Todas amarillas Todas prpuras Todas lisas Todas verdes Todas axiales Todas normal

5474 lisas y 1850 rugosas 6022 amarillas y 2001 verdes 705 prpuras y 224 blancas 882 lisas y 299 estranguladas 428 verdes y 152 amarillas 651 axiales y 207 terminales 787 largos y 277 cortos

2.96 : 1 3.01 : 1 3.15 : 1 2.92 : 1 2.82 : 1 3.14 : 1 2.84 : 1

CRUZAMIENTO PRUEBA
Con objeto de comprobar que su Principio de la Segregacin era correcto, Mendel decidi realizar cruzamiento adicionales para corroborarlo. Realiz retrocruzamientos de los hbridos de la F1 por el parental recesivo (aa), en las dos direcciones posibles. Este tipo de retrocruzamientos se denominan Cruzamientos Prueba, ya que permiten probar o averiguar el tipo y proporcin de gametos que producen los heterocigotos, debido a que la apariencia externa (fenotipo) de los descendientes del Cruzamiento Prueba coincide con los gametos producidos por el hbrido (el parental recesivo solamente produce gametos de tipo a, recesivo; cuando estos se unan con los gametos producidos por el hbrido no enmascararn el fenotipo de los descendientes) C. Prueba Gametos Genotipo Fenotipo F1 (Aa) 1/2 A y 1/2 a 1/2 Aa 1/2 aa
X

Parental recesivo (aa) Todos a 1/2 Fenotipo A 1/2 Fenotipo a

Descendencia

Los resultados que se obtienen en el cruzamiento recproco son los mismos.

CRUZAMIENTOS DE DOS CARACTERES O DIHBRIDO Una vez que averiguadas las leyes que rigen la transmisin de cada carcter por separado, Mendel comenz a estudiar parejas de caracteres. Para ello realiz cruzamiento entre variedades de guisante (lneas puras) que diferan simultneamente en dos caracteres. Dado que para observar el color de flor es necesario sembrar las semillas y esperar que produzcan plantas adultas, para ahorrar tiempo y esfuerzos, decidi empezar por estudiar caracteres que se manifestaban en las semillas, como la forma y el color de las semillas. Por tal motivo, cruz plantas de semilla lisa y verde (AAbb) por plantas de semilla rugosa y amarilla (aaBB). La F1 que obtuvo fue uniforme (genotipo AaBb) y todas las semillas eran lisas y amarillas (Fenotipo AB), indicando este resultado que el carcter dominante para cada carcter, liso para la forma de la semilla (A), y amarillo para el color de la semilla (B) eran los mismos que en el cruce monohbrido. Posteriormente, autofecund las plantas de la F1 y la descendencia obtenida (F2) estaba formada por 9/16 de semillas lisas y amarillas, 3/16 de lisas verdes, 3/16 de rugosas amarillas y 1/16 de rugosas verdes. En el siguiente esquema se resumen los resultados del cruzamiento realizado por Mendel:

Mendel explic los datos de esta descendencia como la Combinacin independiente de lo que le sucede a cada carcter por separado. El carcter forma de la semilla est controlado por el locus (A,a) y el carcter color de la semillas por el locus (B,b). Las plantas diheterocigticas (AaBb) de la F1 segregan simultneamente para el locus (A,a) y para el Locus (B,b), de manera que las segregacin fenotpica en la F2 para el carcter forma de la semilla es 3/4 A y 1/4 a y la segregacin fenotpica para el carcter color de la semilla es 3/4 B y 1/4 b. La segregacin conjunta para ambos caracteres se obtiene combinando de forma independiente la segregacin de cada locus (o haciendo el producto cartesiano de las dos segregaciones:

Forma semilla (3/4 A + 1/4 a) Locus A,a X

Color semilla (3/4 B + 1/4 b) Locus B,b

Segregacin combinada en la F2 = 9/16 AB 3/16 Ab 3/16 aB 1/16 ab

La segregacin fenotpoca 9:3:3:1 observada en la F2 para dos caracteres se obtena debido a que cuando el diheterocigoto de la F1 formaba sus gametos, los alelos de diferentes loci se combinan de forma independiente para producir cuatro clases de gametos en igual proporcin. Es decir, en los diheterocigotos AaBb, el locus A,a produce dos clases de gametos en igual proporcin (1/2 A y 1/2 a) y el locus B,b, produce tambin dos clases de gametos en igual proporcin (1/2 B y 1/2 b). Los alelos el locus A,a se combinan de forma independiente con los del locus B,b de manera que se producen cuatro clases de gametos en igual proporcin (1/4 AB, 1/4 Ab, 1/4 aB y 1/4 ab) que, al combinase independientemente producen la segregacin fenotpica observada. Gametos (1/2 A + 1/2 a) Locus A,a X Gametos (1/2 B + 1/2 b) Locus B,b = Gametos Diheterocigoto AaBb 1/4 AB 1/4 Ab 1/4 aB 1/4 ab

En el siguiente esquema se indican los genotipos y fenotipos obtenidos en la F2 de un cruzamiento entre plantas con semillas lisas y verdes y otras plantas con semillas rugosas y amarillas, suponiendo que tanto por el lado masculino como por el femenino se producen las cuatro clases de gametos en igual proporcin. Esta forma de representacin del cruzamiento en forma de tabla se debe a Punnet.

Mazorca F2 cruzamiento: Prpura, liso X Amarillo, rugoso

Basndose en estos resultados Mendel propuso su 3 ley o Principio de la Combinacin Independiente. 3 Ley o Principio de la Combinacin independiente: los miembros de parejas allicas diferentes se distribuyen o combinan de forma independiente cuando se forman los gametos de un heterocigoto para los caracteres correspondientes. Es decir, en el caso de un diheterocigoto (AaBb), los alelos del locus A,a y los del locus B,b se combinan de forma independiente para formar cuatro clases de gametos en igual proporcin.

Gametos (1/2 A + 1/2 a) Locus A,a X

Gametos (1/2 B + 1/2 b) Locus B,b =

Gametos Diheterocigoto AaBb 1/4 AB 1/4 Ab 1/4 aB 1/4 ab

CRUZAMIENTO PRUEBA PARA COMPROBAR LA COMBINACIN INDEPENDIENTE

Con objeto de corroborar su principio de la combinacin independiente Mendel realiz cruzamientos prueba de los hbridos de la F1 (AaBb) por el parental recesivo (aabb) en las dos direcciones posibles. Los resultados obtenidos para los caracteres forma y color de las semillas se resumen en la siguiente tabla: C. Prueba Gametos Genotipo Fenotipo N semillas Fenotipo F1 (AaBb) semilla lisa, amarilla 1/4 AB, 1/4 Ab, 1/4 aB, 1/4 ab 1/4 AaBb 1/4 AB 29 lisa, amarilla 1/4 Aabb 1/4 Ab 25 lisa, verde
X

Parental recesivo (aabb) semilla rugosa, verde Todos ab 1/4 aaBb 1/4 aB 22 1/4 aabb 1/4 ab 26 rugosa, verde

Descendencia

rugosa, amarilla

Los resultados obtenidos en el cruzamiento recproco fueron similares, en ambos casos, la apariencia externa de los descendientes coincide con los gametos producidos por la planta diheterocigtica (AaBb) de la F1, tanto si actua por el lado masculino como si lo hace por el femenino.

Cruzamiento prueba dihbrido en maiz

R/R L/L
Prpura liso

x R/r L/l

r/r l/l
Amarillo rugoso

r/r l/l
Amarillo rugoso

Prpura liso

R/r L/L
1 Prpura liso :

R/r l/l
1 Prpura rugoso :

r/r L/l

r/r l/l

1 Amarillo : 1 Amarillo liso rugoso

CRUZAMIENTOS DE TRES CARACTERES O TRIHBRIDO Finalmente, Mendel realiz cruzamientos entre variedades o lneas puras que diferan en tres caracteres (AABBCC x aabbcc). La segregacin fenotpica obtenida en la F2 estos casos se calcula combinando de forma independiente lo que le sucede a cada locus por separado, mediante el producto cartesiano de las tres segregaciones:
1 3 1 3 1 3 A : a B : b C : c = 4 4 4 4 4 4 27 9 9 9 3 3 3 1 = ABC : ABc : AbC : aBC : Abc : aBc : abC : abc 64 64 64 64 64 64 64 64

O, de forma alternativa:

(3A:1a)x(3B:1b)x(3C:1c) = 27 ABC : 9 ABc : 9 AbC : 9 aBC : 3 Abc : 3 aBc : 3 abC : 1abc

CRUZAMIENTO PRUEBA TRIHBRIDO

El cruzamiento prueba de un triheterocigoto (AaBbCc) por un homocigoto recesivo (aabbcc) produce una segregacin fenotpica compuesta por 8 fenotipos distintos en igual proporcin:

1 1 1 1 1 1 1 1 ABC : ABc : AbC : aBC : Abc : aBc : abC : abc 8 8 8 8 8 8 8 8

El resultado obtenido se explica mediante el producto cartesiano de las tres segregaciones de cada locus por separado 1/2 Dominante + 1/2 recesivo.
1 1 1 1 1 1 A : a B : b C : c = 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 = ABC : ABc : AbC : aBC : Abc : aBc : abC : abc 8 8 8 8 8 8 8 8

CONSECUENCIAS DE LA AUTOFECUNDACIN Mendel trabajaba con una especie autgama (Pisum sativum) y, por ello, trat de explicar lo que suceda con una lnea despus de varias generaciones de autofecundacin. Supuso que parta de una planta hbrida (heterocigtica Aa) que se autofecundaba y dejaba 4 descendientes. Las cuatro plantas de la 1 generacin de autofendacin volvan a autofecundarse dejando cada una de ellas otros 4 descendientes, y as sucesivamente durante las siguientes generaciones de autofecundacin. Los resultados obtenidos al cabo de n generaciones se muestran en la siguiente tabla:
GENERACIN a partir del hbrido 1 2 3 4 5 n N DE DESCENDIENTES AA 1 6 28 120 496 Aa 2 4 8 16 32 aa 1 6 28 120 496 PROPORCIONES AA 1: 3: 7: 15: 31: 2n-1: Aa 2: 2: 2: 2: 2: 2 aa 1 3 7 15 31 2n-1:

Se puede observar que: 1. A medida que aumenta el nmero de generaciones de autofecundacin disminuye la proporcin de individuos heterocigticos. 2. Por cada generacin de autofecundacin, la proporcin de heterocigotos se reduce a la mitad, de manera que 3. La proporcin de heterocigotos en la generacin n de autofecundacin es 1/2n. Por tanto, la autogamia (sistema de reproduccin por autofecundacin) conduce a la homocigosis, de manera que en pocas generaciones de autofecundacin la inmensa mayora de los individuos de la poblacin son homocigotos. Esta es la razn por la cul Mendel encontr tan fcilmente lneas puras (constituidas por individuos homocigticos) pues el guisante es una especie autgama.