UNIVERSIDAD TCNICA PARTICULAR DE LOJA La Universidad Catlica de Loja

MTODOS DE EXTRACCIN SANGUNEA

Ulises D. Cueva, Cristian M. Cabrera, William R. Sauca, Fernando E. Obaco. Alexis F. Sanchez, Darwin O. Villamar
Escuela de Bioqumica y Farmacia, Universidad Tcnica Particular de Loja, Loja, Ecuador

(Fecha: Noviembre 19, 2013)

Los glbulos rojos o eritrocitos son clulas con forma de una rodaja circular con doble depresin que carecen de ncleo. Son, por tanto, las nicas clulas sin ncleo del cuerpo humano. Tienen un dimetro de, aproximadamente, 7 por 7 micrmetros de grosor. En comparacin, el dimetro de un pelo tiene 100 micrmetros. La funcin principal de los glbulos rojos es el transporte de oxgeno (O2) y de dixido de carbono (CO2) entre los pulmones y los rganos. Su tiempo de vida es de 100 a 120 das. Los glbulos rojos circulan por el cuerpo hasta que cumplen su ciclo vital. En este momento, el bazo se encarga de apartarlos de la circulacin general y de degradarlos. El mtodo que se utiliz para la deteccin de eritrocitos y su recuento fue el mtodo manual.

INTRODUCCION Para preservar la constancia del medio interno, las clulas hemticas han de

El recuento de clulas hemticas, tanto de eritrocitos como de leucocitos, es una de las pruebas clsicas en analtica clnica. El recuento de plaquetas no se suele hacer, salvo cuando se sospecha que el paciente tiene alguna anomala grave (normalmente de tipo leucmico). Estas pruebas tienen por objeto determinar la concentracin de los distintos tipos celulares presentes en la sangre. Permiten detectar anomalas como anemias y policitemias en el caso de los glbulos rojos,

mantenerse constantes. Por eso las clulas viejas o desgastadas son destruidas y renovadas continuamente. La cantidad de cada tipo de clulas sanguneas constituye un parmetro constante para cada especie, con las variaciones normales debidas a la edad y al sexo. Este parmetro slo se ver alterado en determinadas circunstancias ambientales o patolgicas.

y leucopenias y leucocitosis en glbulos blancos.

el

de

los

venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA

La importancia clnica atribuida al recuento, sobre todo en el caso de los eritrocitos, ha fluctuado a lo largo de la historia.

Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar en la pipeta

Actualmente se le da un valor menor, debido sobre todo a su inexactitud. Para determinar la anemia se considera ms exacto y simple el valor hematocrito (relacin entre el volumen de eritrocitos y el volumen total de sangre). OBJETIVOS Conocer el procedimiento para el recuento de glbulos rojos Aprender a realizar el recuento de eritrocitos por el mtodo manual. Identificar los eritrocitos al

Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilucin ser 1/100. Limpiar la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente

microscopio a travs de la cmara de Neubauer. Interpretar los resultados. MATERIALES Y METODOS Equipo para venopuncin Pipeta de G. Rojos Absorvedor Agitador Cmara de neubauer Microscopio Contador manual para recuento Papel absorbente SUSTANCIAS Y REACCTIVOS Lquido de Turk Muestra de sangre Alcohol

Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (Hayem) y llenar de lquido de dilucin hasta la marca de 101

Se tapa la punta y se coloca en un rotador automtico o se hace rotar manualmente de 23 minutos

METODOLOGA Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica puncin

Inferior Derecha:

54 180

Promedio: 174+180= 354 2 =177x10000(Factor dilucin) = 1770000 gr/mm3

Destapar la pipeta y descartar 3 gotas, luego colocar una gota pequea cerca de un extremo de la cmara para que por

Mtodo de recuento: Es muy importante observar que en la cmara de Neubauer las reas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes. Los glbulos rojos se cuentan en las reas coloreadas de rojo, mientras que los glbulos blancos se cuentan en las reas coloreadas de azul.

capilaridad se llene exactamente. Dejar 2 minutos que los eritrocitos se sedimenten

Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x y contar los eritrocitos en un rea de 0.2mm2 utilizando solamente 4 cuadrantes se debe incluir en el recuento las clulas que se observan sobre las lneas de cada cuadro revisado CLCULO DEL RESULTADO Contar los 2 campos de la cmara de Neubaur la misma que se encuentra divida por cuadrantes: Superior Derecha: Superior Izquierda: Inferior Izquierda: Inferior Derecha: 40 49 41 44 174 Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 10x, y se localiza el cuadro central con el condensador bajo y luz dbil. Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los cuadrados pequeos del retculo marcado en color rojo, contando las clulas en cada cuadro, en barrido o fila.

Superior Derecha: 43 Superior Izquierda: 41 Inferior Izquierda: 42

CONCLUSIONES: La pipeta de glbulos rojos al ser cargada con el diluyente, se debe absorber las cantidades precisas para no alterar la dilucin. El mtodo manual nos permite contar los glbulos blancos sin la necesidad del uso de equipos automatizados. Logramos repasar y conocer mejor esta tcnica y sobre todo la

Limpiar bien la cmara de neubauer con alcohol con el fin de eliminar posibles artefactos que nos puedan impedir la visualizacin correcta de los blancos. Utilizar medidas de bioseguridad para evitar posibles accidentes.

BIBLIOGRAFIA: Cmara de Neubauer, disponible en la web: http://2l2mlaboratoristaclinico.blogspot.com/200 9/04/camara-de-neubauer.html Martnez Fragoso, Vicente. Manual de Biometra Hemtica.CBTis199, Mxico, 2012. Pp. 9-11 Manual de Tcnicas Bsicas para un Laboratorio de SaludN2. Organizacin Organizacin mundial de la salud Organizacin Panamericana de la N

importancia de conocer bien los procedimientos y de estudiarlos y comprenderlos correctamente, no

solo a la hora de estudiar la materia, sino para poder ponerlos en prctica y tener un conocimiento general acerca del recuento de glbulos rojos.

RECOMENDACIONES Se recomienda utilizar la tcnica de absorcin con cautela para evitar resultados errneos.

Salud.

Publicacin

Cientfica

439;1993.