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Ingeniera Gentica Produccin intencionada de nuevos genes y alteracin de genomas, mediante la sustitucin o adicin de material gentico nuevo. La ingeniera gentica es un campo de la ciencia que se dedica a investigar la posibilidad de recombinar artificialmente genes o grupos de genes para producir nuevas combinaciones que no aparecen biolgicamente. Por ejemplo, es posible aislar genes que especifican dos protenas diferentes a partir de dos especies distintas de organismos, y unirlos entre s para dar lugar a una nueva combinacin. Los !"s resultantes, llamados recombinantes, son instrumentos e#traordinariamente $tiles en la investigacin gentica. %ambin pueden tener una utilidad pr&ctica, con aplicaciones importantes en medicina y agricultura. La complejidad de los genomas eucariticos 'ace que el estudio de un gen y de su e#presin sea muy difcil. Las tcnicas de recombinacin permiten actualmente el estudio de un gen aislado y amplificado mediante su transplante a un sistema bacteriano. Las posibilidades de conseguir un beneficio pr&ctico son numerosas. Por ejemplo, la insercin en bacterias de un gen sinttico que codifica la 'ormona somatostatina induce a aquellas a la produccin de la 'ormona, es decir, que el gen sinttico se puede replicar, transcribir y traducir por el 'usped. dem&s, las tcnicas recombinantes pueden ser adaptadas para la sntesis de vacuna( )la vacuna de la 'epatitis * est& siendo obtenida por ingeniera gentica, introduciendo en levaduras el fragmento de !" que codifica para las protenas de la superficie viral+. !e la misma manera, el gen que codifica la proinsulina 'umana se 'a recombinado adecuadamente y se 'a 'ec'o reproducir en ,. coli. ,l resultado es que la bacteria produce proinsulina. ctualmente, se est&n consiguiendo muc'os logros en ingeniera gentica. La potencialidad de

2 las tecnologas de beneficios es enorme. !" recombinante para obtener

islamiento de genes y preparacin de complementario

!"

,l aislamiento de genes especficos de cromosomas eucariticos es un proceso muy difcil y lento, para el cual se conocen dos mtodos principales( -todo for.ado )s'otgun+ y obtencin de !" complementario ) !"c+ a partir del /"m del gen. -todo for.ado )s'otgun+ !e aislamiento de genes y preparacin de !" complementario( el !" celular se trata con una en.ima de restriccin de las que producen e#tremos escalonados. !espus los fragmentos de !" resultantes se unen en los pl&smidos de ,. coli abiertos con la misma endonucleasa de restriccin. ,l !"c se inserta en un pl&smido o en un vector viral. 0i el !"c 'a de incorporarse a un pl&smido, se le debe proveer de 1colas1 o e#tremos co'esivos apropiados. ,so se consigue a2adiendo a los e#tremos 34 opuestos de las dos 'ebras del !" doble, una serie de residuos deso#irribonucleotdicos repetidos de la misma clase, por ejemplo residuos , gracias a una transferasa terminal. 0eguidamente, el pl&smido e#perimenta una apertura en un solo punto, dando lugar a su forma lineal, por accin de una endonucleasa de restriccin que produce e#tremos nivelados. Luego, se a2aden colas de poli % a los e#tremos 34 del pl&smido lineal, complementarias de las colas del !"c .

0e me.clan el pl&smido lineal y el !"c y se deja que se apareen. ,ntre los productos obtenidos se encuentra un

3 pl&smido circular agrandado que contiene el nuevo gen. continuacin se forman los enlaces covalentes por adicin de !" ligasa. %ransformacin. 5 ,sta etapa consiste en introducir la molcula de !" recombinante )el inserto y el vector unidos+ en una clula 'ospedadora, donde puede ser replicado6 por ejemplo, la insercin de pl&smidos en el cromforo de ,. coli. Los pl&smidos recombinados se me.clan con las bacterias. La colonia o clon de bacterias de ,. coli que adquiere el pl&smido recombinado se deja crecer durante muc'as generaciones a gran escala, lo que incrementa el n$mero de pl&smidos recombinados. !e esta forma se 'a reali.ado un clonado de un determinado gen, es decir, la formacin de muc'as copias idnticas que se replican a partir de un solo gen introducido en una clula 'usped. ,l !" recombinado, portador de genes procedentes de dos especies distintas, se denomina !" quimrico. Las bacterias que poseen el nuevo gen son capaces de e#presarlo en forma de protenas que son vertidas al medio de cultivo, de donde se pueden recuperar sin dificultad para su uso. *ibliotecas de !".

Los procesos de clonaje molecular y aislamiento de estos fragmentos se inician con la construccin de una biblioteca de !" o un banco de !". 7stas est&n formadas por todas las molculas de pl&smidos o fagos recombinantes originados al unir un !" a un vector. Las bibliotecas deben cumplir la caracterstica de poder introducirse en clulas donde cada recombinante pueda replicarse in vivo.

,#isten varios tipos de bibliotecas en funcin de la naturale.a de las molculas utili.adas y del tipo de estudio cientfico que se quiera reali.ar. s por ejemplo, las bibliotecas del !" del genoma se construyen mediante el clonaje de todo el !" del genoma de un organismo.

4 Las bibliotecas de !"c son un tipo de bibliotecas de !", muy utili.adas para el estudio de genes eucariticos que codifican protenas. dem&s, son m&s sencillas y ventajosas que las bibliotecas genmicas, ya que se obtienen de /"m maduros y, por tanto, no contienen intrones ni secuencias que flanquean a los genes. 7ste es un dato importante, al tener en cuenta que los 'ospedadores procariticos, como las bacterias, carecen de una maquinaria para el procesamiento del /". Los clones de !"c permiten el estudio de las distintas poblaciones de molculas de /"m que se encuentran en diferentes tipos celulares. Las bibliotecas de !" deben ser grandes para ser $tiles, y la probabilidad de encontrar una secuencia determinada de un genoma depende de varios factores, entre ellos el tama2o de los insertos, el tama2o del genoma y la abundancia del /"m que interese.

plicaciones de la ingeniera gentica. 5 ctualmente, se presta muc'a atencin a los posibles usos pr&cticos del !" recombinado. ,n general, e#iste entre la poblacin un cierto 1miedo1 a los e#perimentos genticos. Pero 'ay que decir que el clonado de genes y su e#presin en forma de productos proteicos por clulas de ,. coli o de levaduras 'ace posible la produccin comercial de muc'as protenas de utilidad pr&ctica que, de otro modo, son muy difciles de obtener en abundancia. Los genes de algunas protenas necesarias en medicina 'an sido clonados. La insulina, que se obtena a partir de p&ncreas de cerdo, se puede 'oy obtener de cultivos bacterianos que contienen el gen 'umano clonado, con lo cual proporcionan una insulina con la misma secuencia de amino&cidos que la 'umana, cosa que no ocurra con la insulina porcina. La insulina obtenida en ,. 8oli se utili.a actualmente en el tratamiento de la diabetes mellitus. Igualmente ocurre con la 'ormona de crecimiento )somatotropina+ que se administra a pacientes que padecen enanismo.

5 Los interferones, agentes antivirales naturales y potenciales anticancergenos, pueden aislarse a partir de leucocitos de la sangre, pero el rendimiento es de tan solo 9 microgramo por litro, y por ello son productos muy caros. Los genes de los interferones pueden ser clonados y e#presados en bacterias, que crecen con facilidad y producen interfern en grandes cantidades. %ambin podran producirse en gran cantidad varias protenas de utilidad en agricultura. La incorporacin de los genes de las en.imas y de otras protenas, que participan en la fijacin de nitrgeno en los genomas de las plantas de cultivo que normalmente no fijan el elemento, podra tener un #ito mundial absoluto. -odificacin gentica en bacterias. 5 Las bacterias son capaces de adaptarse a cambios de temperatura, presin o nutrientes del medio, gracias al desarrollo de nuevos procesos metablicos y productos gnicos que les confieren resistencia para vivir en esas condiciones. ,stos cambios suelen producirse en los pl&smidos bacterianos, los cuales se pueden aislar e introducir en otras bacterias que asimilar&n estas nuevas propiedades. -ediante la ingeniera gentica y la utili.acin de pl&smidos bacterianos, los cientficos pueden construir nuevas bacterias para un determinado fin. ,s el caso de los trabajos reali.ados por :en %immis y sus colaboradores, en los que mediante la utili.acin de tcnicas de recombinacin del !", 'an conseguido combinar las en.imas claves de cinco rutas distintas de degradacin de compuestos contaminantes del medio ambiente, pertenecientes a tres bacterias diferentes )Pseudomonas putida, Pseudomonas sp. *93 y lcaligenes eutrop'us+, para originar una nueva bacteria desarrollada sobre me.clas letales de ciertos compuestos )8lorobencenos, tolueno, clorofenoles y #ileno+. La ruta metablica resultante es estable y regulada en respuesta a la presencia de ciertos compuestos arom&ticos. -odificacin gentica en plantas. 5 Las plantas 'an sido siempre objeto de estudio, con el fin de mejorar sus

6 caractersticas y obtener cultivos que permitan una mejora en la alimentacin y en la ornamentacin. ;no de los grandes avances en la biologa molecular de las plantas se 'a conseguido mediante la utili.acin de un pl&smido bacteriano perteneciente a la bacteria del suelo grobacterium tumefaciens. ,l pl&smido %i, as denominado, puede transformar una gran variedad de plantas. ,l !" transformante del pl&smido %i se llama %5 !" y puede subclonarse en un vector compatible con la bacteria ,. coli, dando lugar a la formacin de vectores transbordadores planta5,. coli. Los vectores transbordadores son pl&smidos vectores que pueden transformarse tanto en clulas procariticas como eucariticas. ,n este caso, el pl&smido recombinante pueden transformar clulas de . tumefaciens y, cuando la bacteria infecta a una planta, transfiere el %5!" , que se inserta en el genoma de la clula y por tanto puede ser e#presado por la maquinaria gentica de dic'a clula. unque la insercin solo 'aya tenido lugar en una clula, el gen puede 'eredarse gracias a que muc'as plantas pueden regenerarse a partir de tejidos diferenciados, que pueden 'aber sido infectados. ,stos organismos donde se produce la integracin estable de genes e#tra2os se denominan organismos transgnicos. La tecnologa del clonaje del %5 !" es utili.ada para conseguir cultivos con mayores ventajas nutritivas, as como para transmitir al genoma de muc'as plantas genes implicados en la resistencia a 'erbicidas, con la ventaja de que no se producen da2os en el medio ambiente. La investigacin est& principalmente dirigida a la posible introduccin de genes e#tra2os de plantas resistentes o de origen bacteriano, cuya e#presin origine protenas capaces de cataboli.ar dic'o 'erbicida. ctualmente, tambin se investiga la posibilidad de que plantas no leguminosas, como el trigo y el ma., realicen la fijacin bacteriana del nitrgeno, fenmeno de gran importancia para la produccin de alimentos.

7 -odificacin gentica en animales. 5 La manipulacin gentica y las tcnicas de clonaje molecular constituyen procesos y 'erramientas muy utili.ados en la investigacin b&sica, como demuestran los siguientes estudios( La introduccin de un gen 'umano o de ratn en la mosca del vinagre )!rosop'ila melanogaster+ permitira demostrar que los procesos genticos que controlan el desarrollo embrionario de las diferentes especies son muy similares6 las formas corporales de todos los animales se definen por mecanismos casi idnticos, y estos mecanismos est&n dirigidos por un grupo de genes relacionados entre s, genes <=- en invertebrados y genes <o# en vertebrados. %ericamente, la sustitucin de un gen <=- de una mosca por su 'omlogo <o# permitira que ste se e#presara cuando y donde lo 'ubiera 'ec'o el gen <=-6 sin embargo, la tcnica actual no nos permite manipular genes enteros, por lo que solo se 'an utili.ado secuencias de !" de <o# unidas a elementos reguladores inducibles por calor. 8on este e#perimento se 'a conseguido que todas las clulas de una mosca en desarrollo e#presaran una protena <o#. dem&s, una de esas protenas es la <=>!? 'umana y se sabe que el gen que la codifica tiene un 'omeodominio semejante al de la protena !eformded de la mosca. 8uando el gen !eformed de !rosop'ila se e#presa fuera de sus lmites normales provoca anomalas cef&licas, y sorprendentemente, la e#presin de la protena 'umana en las clulas de la mosca en desarrollo causa las mismas deformidades6 aunque este resultado puede ser debido a que la protena 'umana active la e#presin del gen !eformed en la mosca, siendo ste uno de los efectos de la propia protena !eformed. %erapia gnica. 5 =tra lnea de investigacin muy interesante en la biologa de mamferos es la llevada a cabo por una nueva tcnica que permite crear ratones portadores de mutaciones controladas de cualquier gen conocido. ,l proceso mediante el cual se introducen cambios especficos en la secuencia de nucletidos de un gen se denomina sustitucin dirigida de genes )gene targeting+, y con ella se pretende conseguir informacin sobre las etapas del desarrollo embrionario 'umano, la

8 constitucin de nuestro sistema inmunitario, el funcionamiento del cerebro y la forma en que ciertos defectos gnicos se traducen en enfermedad. ,#isten m&s de @.AAA enfermedades 'umanas , entre ellas el c&ncer, atribuidas a defectos genticos6 la identificacin de los genes y las mutaciones responsables de esas enfermedades permitira conseguir las mismas mutaciones en ratones )por sustitucin dirigida de genes+. ,sto permitira estudiar con m&s claridad los procesos que ocurren entre el funcionamiento anmalo de un gen y la manifestacin de la enfermedad. ,l mejor conocimiento de la patologa molecular de la enfermedad ofrecer& la posibilidad de elaborar terapias m&s eficaces, sobre todo las dirigidas a corregir defectos. ctualmente, la terapia consiste en la insercin aleatoria de genes sanos en los cromosomas, pero stos no funcionan con la misma eficacia que los que ocupan su lugar correcto en el cromosoma. !ise2o de f&rmacos por ingeniera gentica. 5 -ediante la tecnologa del !" recombinante se producen actualmente grandes cantidades de productos gnicos teraputicos a partir de genes clonados, tales como insulina, interferones, interleuquinas y 'ormonas del crecimiento. dem&s, gracias a los procedimientos de clonaje, e#presin y purificacin, se trata de identificar la protena clave en un proceso patolgico, aislarla en grandes cantidades, determinar su estructura tridimensional mediante cristalografa de rayos >, y finalmente dise2ar molculas que in'iban su funcin. ctualmente, los f&rmacos que se utili.an son poco selectivos y act$an por igual en todas las especies, con lo cual resultan t#icos para el agente patgeno pero tambin para el 'ospedador. ;no de los principales objetivos de la biotecnologa es el desarrollo de f&rmacos, cuya accin sea m&s selectiva sobre determinadas especies. )Base biotecnologa+. ;no de estos casos es la enfermedad del 0I! , en la que se investiga para desarrollar f&rmacos selectivos contra el virus que la produce. ctualmente, se 'an

9 identificado dos protenas claves propias del virus( una proteasa y una transcriptasa inversa6 mediante ingeniera gentica se consigue una elevada produccin de estas protenas en ,. coli, y se est& investigando profundamente estas protenas para obtener f&rmacos m&s efectivos y especficos, con la ayuda de mtodos cristalogr&ficos y de dise2os de f&rmacos que funcionen como potentes in'ibidores. Proyecto Genoma <umano. 5 ,s un proyecto coordinado por numerosas instituciones, que se inici en 9CCA con el fin de obtener el genoma 'umano completo. ,l genoma 'umano ser&, en un futuro, cartografiado y totalmente secuenciado, de forma que se clonar& y se construir& un mapa de cada cromosoma 'umano. -ediante el empleo de endonucleasas de restriccin se cortan los clones y se obtienen los mapas de clones contiguos. Los datos obtenidos acerca del tama2o de los fragmentos de restriccin de cada clon se introducen en un ordenador, que compara esos tama2os en todos los clones anali.ados y determina qu clones presentan sitios de restriccin comunes, por lo que dic'os clones pueden ordenarse seg$n este criterio. Los mapas que se obtengan ser&n de gran valor en investigaciones acerca de la organi.acin gnica y cromosmica, as como en la identificacin de genes implicados en ciertas enfermedades genticas. La correlacin de estos mapas con datos de secuencias obtenidas por otros estudios permitira la secuenciacin de todo el genoma 'umano. Para que este enorme proyecto obtenga buenos resultados es necesario que se investigue en el desarrollo de nuevos vectores de clonaje y en la tecnologa necesaria para anali.ar un gran n$mero de clones. !e 'ec'o, ya se 'an obtenido mapas de los cromosomas que pertenecen a organismos m&s sencillos, como ,. coli y el mo'o limoso !ictyostelium. 0in embargo, en los 'umanos las tcnicas de secuenciacin autom&tica deben perfeccionarse, pues el n$mero de pares de bases de que consta nuestro genoma es de 3.3 # 9AC. <erencia biolgica.

10 La ingeniera gentica le permite a los cientficos arrancar genesDsegmentos de !"Dde un tipo de organismo y combinarlos con los genes de un segundo organismo. !e esta manera, organismos relativamente simples tales como las bacterias o levaduras pueden ser inducidos a fabricar grandes cantidades de protenas 'umanas, incluyendo los interferones y las interleuquinas. ,llos pueden fabricar tambin protenas de agentes infecciosos tales como el virus de la 'epatitis o el virus del 0I! , para su uso en vacunas. %odo organismo, a$n el mas simple, contiene una enorme cantidad de informacin. ,sa informacin se repite en cada una de sus clulas organi.ada en unidades llamadas genes, los cuales est&n formados por !". Los genes controlan todos los aspectos de la vida de cada organismo, incluyendo metabolismo, forma, desarrollo y reproduccin. !e ellos depende la continuidad de la vida, porque constituyen el enlace esencial entre generaciones. ,sta transmicin de informacin gentica de los padres a los 'ijos se denomina 'erencia. !esde principios de siglo, la ciencia de la Ingeniera Gentica 'a e#perimentado notables avances. La Ingeniera Gentica es un trmino que abarca distintos caminos para cambiar el material gentico. ,l !" )codigo en el organismo vivo+ es el cual contiene toda la informacin almacenada en una larga cadena de una molcula quimica que determina la naturale.a del organismo asi sea una amiba, un arbol de pino, una vaca o un 'ombre y el cu&l caracteri.a las particularidades individuales. diferencia de los gemelos el mapa gentico de cada uno de nosotros es $nico. Los genes individuales son secciones particulares de esta cadena, quienes determinan las caracteristicas y funciones de nuestro cuerpo. Los defectos de los genes individuales pueden causar malfunciones en el metabolismo del cuerpo, y es el origen de muc'as enfermedades genticas.

11 ,n la ingeniera gentica se busca el conocimiento de lo que son los cada uno de los genes de un mapa gentico. ,sto no est& tan lejos como parece, la capacidad de eliminar el factor a.ar de nuestro perfil, gentico esta cada ve. mas cerca. 0eg$n Erenc' nderson )FA a2os+, pionero de la terapia gentica, 1ya e#iste toda la base cientfica necesaria, pero no tendremos 'asta dentro de 9A o @ a2os la eficiencia y seguridad para llevar a cabo transferencias genticas en forma tica1. =tro factor limitante es que todava el banco de genes no tiene 1depocitados1 a la espere de clientes todos los complejos conjuntos de genes que determinan la inteligencia, el buen comportamiento y la 'igiene mental perfecta. claro que lo ideal de recurrir a la ingenieria genetica es que la utilicen para prevenir o corregir enfermedades serias y no para tener un 'ijo mas inteligente, o para que sea alto y de ojos celestes. ,l problema es que la ciencia sigue progresando a velocidad de un tren bala, llegando a menudo a una estacin determinada muc'o antes de que 'ayan podido anali.arce y comprenderse a fondo todas las concecuancias derivadas de los adelantos. Los descubrimientos en materia gentica son asunto de todos los das, 'ay bancos de datos que poseen la codificacin parcial de m&s de la mitad de los genes 'umanos. -illones de nuevas entradas del cdigo gentico ingresan al banco p$blico de genes del 8entro "acional de Informacin *iotecnolgica. La $nica terapia gentica permitida 'oy para su aplicacin en seres 'umanos es la vinculada a las enfermedades. La ingeniera gentica puede definirse como 1La manipulacin deliberada de la informacin gentica, con miras al an&lisis gentico o al mejoramiento de una especie1. 8on el descubrimiento de la estructura del material gentico, en 9C@3, nace la biologa molecular y con ello se inicia una nueva etapa en la 'istoria de la biologa. ,l a2o de 9CGA marca otra etapa importante( el comien.o de la manipulacin en.im&tica del material

12 gentico, y por consiguiente, la aparicin de la ingeniera gentica molecular, que constituye la m&s reciente evolucin de la manipulacin gentica. Los procedimientos que se utili.an reciben el nombre de mtodos del !" recombinante o clonacin molecular del !".

,n el pasado se utili.aban en forma emprica los sistemas biolgicos e#istentes, 'oy ya no solamente se seleccionar& uno de esos sistemas para llevar a cabo un proceso, sino que se dise2ar&n genticamente atendiendo a la posibilidad real de manejar su informacin gentica y la de incorporarles la de otros organismos. La ingeniera gentica de plantas ofrece la posibilidad de modular la e#presin de genes especficos, que son importantes para un cierto proceso metablico. ,s posible incrementar la e#presin de un determinado gene al transformar plantas con una gen quimrico con un promotor fuerte6 o disminuir la e#presin usando la tecnologa del /" en sentido inverso )anti5/" + y as, alterar cuantitativamente el control de flujo de un proceso especfico. La ingeniera gentica tiene un gran potencial. Por ejemplo, el gen para la insulina, que por lo general slo se encuentra en los animales superiores, se puede a'ora introducir en clulas bacterianas mediante un pl&smido o vector. !espus la bacteria puede reproducirse en grandes cantidades constituyendo una fuente abundante de la llamada insulina recombinante a un precio relativamente bajo. La produccin de insulina recombinante no depende del, en ocasiones, variable suministro de tejido pancre&tico animal. =tros usos de la ingeniera gentica son el aumento de la resistencia de los cultivos a enfermedades, la produccin de compuestos farmacuticos en la lec'e de los animales, la elaboracin de vacunas, y la alteracin de las caractersticas del ganado. *,// 8IH" 8/=-=0H-I8 5 nomala en el n$mero o en la estructura, que concierne a uno o varios cromosomas y que es causa de diversasenfermedades genticas.

13 !" 5 -olcula de la informacin gentica que tiene I funciones fundamentales( 9+ replicarse y transmitirse sin errores, sea desde el cigoto 'asta las 9A9? clulas de un individuo adulto, o para transmitirse a travs de las generaciones6 y I+ contener en su secuencia de bases la informacin de las decenas de miles de genes que codifican todas las protenas de nuestro organismo. Los avances de la biologa molecular 'an permitido determinar las mutaciones )errores+ en genes que producen protenas anmalas, o que son e#presadas en cantidades anormales en diversas patologas genticas. Los pinguinos no tienen !". L,L= 5 Gen alelomorfo. L,L=-=/E= 5 !cese de un car&cter 'ereditario opuesto a otro. Gen alelomorfo, una de entre dos o varias formas de un gen que ocupa el mismo lugar en un cromosoma particular. 0I".( alelo. /" )/" +( -olcula formada por un poli5ribonucletido de longitud variable que contiene ;racilo en ve. de %imina. <ay tres tipos( /" mensajero ) /"m+, /" ribosomal ) /"r+ y /" transferente ) /"t+. /" mensajero( -olcula de /" que es el resultado de la transcripcin de una secuencia de !". ,l /" mensajero madura en el n$cleo y es e#portado al citoplasma para ser traducido en protena. /" polimerasa( 8omplejo en.im&tico que catali.a la sntesis de /" )transcripcin+ utili.ando como molde la cadena antisentido de una molcula de !". ;%=0=- 5 Bariedad de cromosoma que no interviene en la determinacin del se#o. 8="%/.( gonosoma. *I=%,8"=L=GJ 5 8iencia aplicada, formada por el conjunto de tcnicas derivadas de la biologa celular y la bioqumica, que se emplea con fines industriales y cientficos. La biotecnologa engloba las diferentes

14 tcnicas de utili.acin de las propiedades de los seres vivos en procesos productivos. 0u uso, en un sentido amplio, es muy antiguo( procesos como la fabricacin del vino, del queso, la cerve.a o el pan utili.an las propiedades de microorganismos para su elaboracin. <oy en da el concepto de biotecnologa se encuentra asociado al de ingeniera gentica. ,l perfeccionamiento de las tcnicas de biologa molecular )manejo de en.imas de restriccin, pl&smidos, etc+ unido a un e#tenso conocimiento del genoma de diferentes organismos biolgicos 'a 'ec'o posible el 1dise2o1 de los mismos para diferentes tipos de procesos. ,l campo inmenso. de aplicacin de la biotecnologa es

s, frente a los m&s tradicionales como es el sanitario )fabricacin de medicametos, medios diagnsticos, etc.+, la ganadera y la agricultura, aparecen nuevos campos como es la minera )concentracin de gangas+, la depuracin de aguas residuales, etc. ctualmente, la biotecnologa 'a adquirido un potencial enorme como consecuencia del desarrollo de la ingeniera gentica. Gracias a sta se podr&n 1dise2ar1 los organismos m&s adecuados para cada tipo de proceso. La biotecnologa, con la utili.acin tcnicas de gentica molecular, 'a permitido la obtencin de protenas tan $tiles en medicina como la insulina 'umana, la 'ormona somatotropina u 'ormona del crecimiento, utili.ada para tratar cierta forma de enanismo en los ni2os. =tras veces el inters es econmico, como en el caso de la en.ima renina, que se encuentra en el estmago de los terneros, y que a'ora se produce mediante la tecnologa del !" recombinante y es usada en la industria l&ctea para elaborar queso. %ambin se 'a logrado recientemente la sntesis bacteriana de la en.ima celulasa, producida en la naturale.a por ciertos 'ongos, y con la capacidad de catali.ar la reaccin que convierte la celulosa en glucosa,

15 una molcula alimenticia de gran importancia. =tro #ito interesante de la biotecnologa es la produccin de vacunas empleadas para combatir enfermedades virales. !e esta manera, se pueden obtener vacunas a partir de cubiertas de protenas sintticas que son m&s seguras, al no contener material gentico viral. *iotecnologa vegetal 5 !urante milenios se 'an empleado diferentes tcnicas en plantas, a fin de mejorar determinadas caractersticas de los cultivos utili.ados en la alimentacin. ,n los $ltimos cien a2os los avances 'an sido muy significativos, gracias a las tcnicas de reproduccin, ya que los cru.amientos controlados de individuos de la misma especie proporcionan mayores rendimientos de las cosec'as, as como los cru.amientos entre especies diferentes y de la misma familia. <oy en da, gracias a la ingeniera gentica, podemos obtener plantas de gran inters, por ejemplo plantas de algodn que toleran 'erbicidas, plantas de tabaco resistentes a insectos, plantas de tomate con frutos que resisten el reblandecimiento, plantas resistentes a virus, as como cereales m&s nutritivos y econmicos6 todo ello utili.ando la tecnologa del !" recombinante. La aparicin de cultivos transgnicos es bastante reciente debido, sobre todo, a la dificultad que presenta un genoma de gran tama2o como el de las plantas. ;no de los ejemplos m&s tpicos respecto a la transferencia de genes es el caso de la planta de tabaco resplandeciente. La infeccin de esta planta por la bacteria grobacterium tumefaciens causa la enfermedad de agalla de corona, producida por el pl&smido %i bacteriano. ,ste pl&smido es utili.ado como vector para introducir genes en las clulas de las plantas. La incorporacin del gen para la en.ima luciferasa en el pl&smido %i, permite determinar visualmente si los genes llevados por el pl&smido 'an sido transferidos con #ito a las clulas vegetales y si est&n siendo e#presados. La presencia de los genes bacterianos *t, manipulados genticamente, en plantas de algodn permite controlar las

16 principales plagas de orugas. 0e trata de plantas obtenidas mediante ingenira gentica y se estima que este tipo de plantas pueden reducir el uso de insecticidas en el algodn en un ?A o FA K. La bacteria *. t'uringiensis 'a sido muy estudiada con el objetivo de encontrar estirpes que puedan resistir ataques de insectos distintos de los desencadenados por las orugas. ;na de esas estirpes 'a permitido dise2ar un gen que es efica. contra el escarabajo de la patata )Leptinotarsa decemlineata+. %ambin se 'an descubierto genes *t activos contra nem&todos par&sitos de plantas y contra mosquitos. La inocuidad y especificidad de las protenas *t 'ace que stas sean muc'o m&s eficaces que los insecticidas de uso. Por otra parte, otro de los aspectos en los que la ingeniera gentica esta investigando es en el control de las malas 'ierbas, que compiten con los cultivos en cuanto a 'umedad, nutrientes o lu. solar, lo que provoca una reduccin en el rendimiento potencial de una plantacin. Para evitar esto, se estudia la posibilidad de crear plantas capacitadas para tolerar la e#posicin de un $nico 'erbicida de amplio espectro e inocuo desde el punto de vista ambiental6 esto permitira reducir la masa total de 'erbicidas en uso. =tras investigaciones est&n dirigidas a conseguir frenar el deterioro de los frutos y aumentar su tiempo de almacenamiento. ,n este sentido, ya se 'an identificado y aislado algunos genes que intervienen en la biosntesis del etileno, la molcula que activa el proceso de maduracin de los frutos. *IB L,"%, 5 %ambin divalente. ,n gentica par de cromosomas 'omlogos unidos entre s por entrecru.amiento durante la primera profase de la meiosis de la gametognesis. 8 /L8%,/ 5 8ar&cter adquirido 5 /asgo distintivo que aparece en un individuo bajo influencia de factores e#teriores6 el individuo est& desprovisto cuando nace y la adaptacin al medio le 'ace surgir.

17 8 /I=%IP= 5 8onjunto de los cromosomas de una clula despus de 'aber sido reunidos por pares idnticos y clasificados seg$n ciertos criterios. 8,"%/H-,/= 5 Granulacin que e#iste en cada cromosoma y que participa en la formacin del 'uso durante la mitosis. 8< P,/=" 0 5 "ueva familia de f&rmacos que act$an corrigiendo defectos conformacionales )defectos de plegamiento o formacin de agregados+ de algunas protenas producidas por alteraciones genticas y que son la causa de enfermedades como la diabetes inspida nefrognica, la enfermedad 'ep&tica crnica o el enfisema. 8I0%/H" 5 funcional. Eragmento de gen que forma una unidad

8I%=G,"7%I8 ,studia las estructuras y los mecanismos celulares relacionados con la gentica. nali.a profundamente los cromosomas, pues se encuentran en el n$cleo de la clula y contienen los genes que son los portadores del material 'ereditario. ,sta rama de la gentica est& teniendo un gran #ito, sobre todo por la utili.acin de nuevas tcnicas, tales como cultivos in vitro de tejidos y de sangre, que permiten obtener clulas en divisin o mitosis, principalmente en la etapa de metafase, que es donde mejor se observan los cromosomas, y as observar los posibles desrdenes estructurales o numricos de los cromosomas. ;na de las alteraciones cromosmicas 'umanas m&s importante es el sndrome de !oMn, que consiste en la presencia de un cromosoma e#tra en el par I9. =tras enfermedades producidas por alteraciones cromosmicas son( el sndrome de :linefelter, con la presencia de tres cromosomas se#uales )>>N+6 el sndrome de %urner, con un solo cromosoma se#ual )>+6 o el sndrome de ,dMard, cuyos individuos poseen un cariotipo de ?G cromosomas.

18 8L=" 8IH" 5 Proceso mediante el cual se obtiene un conjunto de genes, clulas o individuos genticamente idnticos al de la muestra original. La palabra proviene del ingls cloning, que significa reproduccin, y es muy utili.ada en biologa, no solo en el &rea de la biologa molecular sino tambin en muc'os otros campos, ya que de forma natural muc'os organismos unicelulares, como por ejemplo los proto.oos, provienen de un organismo $nico por reproduccin ase#ual y son genticamente idnticos a l6 otros organismos inferiores, como bacterias, ciertas algas y plantas se reproducen tambin por clonacin. ,n otros casos de organismos diferenciados se#ualmente, la clonacin se produce cuando 'ay reproduccin sin fecundacin, como ocurre con la divisin de las clulas som&ticas de los organismos superiores, o en los procesos de reproduccin partenognica de algunos insectos y crust&ceos. ,n todos estos casos, lo que obtenemos es un clon, es decir, una poblacin de clulas todas ellas surgidas de una misma clula $nica, a travs de repetidas divisiones, o bien una poblacin de individuos producidos por reproduccin ase#ual a partir de un solo antecesor. 0in embargo, estos clones tambin pueden conseguirse en el laboratorio, de forma artificial, con la utili.acin de las modernas tcnicas de biologa molecular )manejo de en.imas de restriccin, pl&smidos, etc.+, unido a los avances actuales de la biologa reproductiva. Las aplicaciones de este proceso pueden verse en el campo sanitario, con la obtencin de productos gnicos teraputicos a partir de genes clonados, como por ejemplo la insulina, empleada para tratar las enfermedades diabticas, y en la ganadera y agricultura, con la obtencin de animales y plantas totalmente ntegros, como el conocido caso de la clonacin de la oveja 1!olly1, que se convirti en la protagonista del mundo cientfico en 9CCG, y que fue la principal causa de los numerosos debates acerca de los beneficios y peligros que conllevara la pr&ctica de la clonacin en los seres 'umanos.

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8lonacin de genes La tcnica que permite clonar el !" )&cido deso#irribonucleico+ que forma los genes se denomina tecnologa del !" recombinante, y permite producir segmentos idnticos de genes en grandes cantidades. *&sicamente consiste en la obtencin del inserto de !" que interesa, mediante la utili.acin de las endonucleasas de restriccin6 despus, se promueve la unin de ste a un !" vector )que puede ser un pl&smido o un !" viral+, el cual act$a como ve'culo de clonaje, ya que transporta el inserto de !" a una molcula 'ospedadora donde puede ser replicado6 y finalmente, la transformacin, que se produce en una clula procaritica o eucaritica.

plicaciones de la clonacin de genes 5 Las primeras aplicaciones pr&cticas de la clonacin molecular tuvieron lugar en plantas, por ser m&s f&cil su manipulacin. "umerosos &rboles frutales y plantas ornamentales 'an sido modificados mediante la introduccin de genes obtenidos por clonacin, con el fin de mejorar sus caractersticas y obtener una mejora en la alimentacin y en la ornamentacin.

,n otros casos, se 'an conseguido cultivos de cereales con mayores ventajas nutritivas y econmicas6 plantas con genes implicados en la resistencia a 'erbicidas, sin producir da2os en el medio ambiente6 y actualmente se investiga la posibilidad de que plantas no leguminosas, como el trigo y el ma., realicen la fijacin bacteriana del nitrgeno, fenmeno de gran importancia para la produccin de alimentos. N todo ello, utili.ando las tcnicas de recombinacin del !". %ambin mediante esta tecnologa se producen actualmente grandes cantidades de productos gnicos

20 teraputicos, a partir de genes clonados y e#presados en bacterias que crecen con facilidad y producen el producto deseado en grandes cantidades. ,ntre esos productos se encuentran insulina, interferones, interleuquinas y 'ormona del crecimiento, sta $ltima utili.ada para tratar cierta forma de enanismo en los ni2os. dem&s, gracias a los procedimientos de clonaje, e#presin y purificacin, se trata de identificar la protena clave en un proceso patolgico, aislarla en grandes cantidades, determinar su estructura tridimensional mediante cristalografa de rayos >, y finalmente dise2ar molculas que in'iban su funcin. La clonacin molecular permite tambin construir nuevas bacterias para un determinado fin, y as por ejemplo, se 'an combinado las en.imas claves de varias rutas distintas de degradacin de compuestos contaminantes del medio ambiente, pertenecientes a tres bacterias diferentes, para originar una nueva bacteria que las tiene todas, y se desarrolla sobre me.clas letales de numerosos compuestos.

8lonacin de mamferos( ,l primer mamfero superior desarrollado por clonacin de una clula adulta es una oveja, a la que bauti.aron con el nombre de 1!olly1, obtenida en febrero de 9CCG por los investigadores del Instituto /oslin de ,dimburgo, ,scocia. ,ste equipo de investigacin ya era conocido por conseguir ovejas clnicas a partir de clulas obtenidas de embriones y cultivadas en el laboratorio, antes de ser implantadas nuevamente en otros animales. 0in embargo, el caso de la oveja !olly es novedoso, por cuanto 'an utili.ado clulas de seres vivos adultos, muc'o m&s complejas que las clulas embrionarias para producir seres vivos genticamente iguales. unque esto ya se 'aba practicado con #ito en anfibios y ratones, el caso de las ovejas produjo una gran conmocin en la poblacin, por tratarse de organismos superiores, de muc'as m&s similitudes con

21 los seres 'umanos. ,l evento tuvo lugar gracias a la aplicacin de una novedosa tcnica de transferencia nuclear de !". La oveja fue desarrollada a partir del n$cleo )con su dotacin completa de cromosomas+ de una clula de la gl&ndula mamaria, el cual fue e#trado e implantado en otra clula )vulo+ a la que se le 'aba eliminado su propio n$cleo, la cual sera despus implantada en una madre adoptiva, desarroll&ndose el embara.o. Las clulas de la gl&ndula mamaria fueron previamente sometidas a una escase. prolongada de nutrientes, con el objetivo de que sus genes entraran en una fase de inactivacin6 de esta manera, se intentaba reproducir la misma fase del ciclo de divisin celular que tenan las clulas de los vulos receptores. ;na ve. se produjo la transferencia nuclear, el !" inactivado se reprogram y recuper as su capacidad para crear todos los rganos y tejidos diferenciados de un organismo vivo. "o obstante, el e#perimento se llev a cabo con #ito en tan slo uno de los IGG vulos utili.ados para su reali.acin, y que culmin con el nacimiento de la oveja !olly. Por lo tanto, a$n queda muc'o por conocer sobre la totalidad de los factores implicados en el proceso. Los cientficos opinan que los ganaderos podran beneficiarse de esta tcnica al conseguir clones a partir de animales adultos de sus ganaderas que 'an demostrado ser m&s productivos y resistentes a enfermedades que otros. La ventaja para los ganaderos de poder emplear clulas adultas en lugar de embriones es que permite conocer, con antelacin, la capacidad productiva y de resistencia a enfermedades de los animales resultantes. ,l empleo de esta tecnologa abre las puertas para investigar el c&ncer, la biologa del desarrollo y los mecanismos moleculares del envejecimiento, entre otros muc'os aspectos de la ciencia. Por otra parte, unos cientficos de =regn ),,.;;.+ 'an conseguido clonar dos monos, uno mac'o y otro 'embra, con una tcnica diferente a la utili.ada con la

22 oveja !olly, ya que los monos fueron clonados a partir de clulas embrionarias obtenidas por procedimientos de fecundacin 1in vitro1, y no a partir de clulas adultas. ;no de los objetivos de esta investigacin era conseguir animales e#actos, elimin&ndose as el factor de la variabilidad gentica, y poder estudiar la elaboracin de nuevos medicamentos y vacunas efectivas contra el 0I! .

8lonacin y terapia gnica 5 La clonacin, combinada con otros medios utili.ados en biotecnologa, podra reali.ar importantes aportaciones a la terapia gnica, y principalmente a la terapia gnica de la lnea germinal. ,llo permitira convertir a un embrin con fallos genticos en un gemelo completamente sano con los defectos genticos corregidos, y as prevenirle de enfermedades mortales o debilitantes, como por ejemplo de la fibrosis qustica o la anemia falciforme. 0e trata de una lnea de investigacin muy interesante en el campo de la biologa de mamferos, pero que todava no es objeto de investigacin en 'umanos. ,l procedimiento consiste b&sicamente en cultivar las clulas del embrin inicial, que se encuentran en un estado temprano, e introducirlas un vector que porte el gen funcional que se desea corregir. Luego, el !" de una de esas clulas modificadas se implantara dentro de un vulo al que se le 'a e#trado su propio n$cleo, comen.ando el embara.o de nuevo. !e esta manera, se 'a reempla.ado el embrin original por un clon m&s sano de s mismo. "o obstante, a este respecto 'ay que tener en cuenta los problemas ticos que el proceso pueda conllevar, pues tambin podra reali.arse con fines eugensicos, racistas, etc. dem&s, algunos cientficos piensan que crear embriones con la sola finalidad de reali.ar diagnsticos genticos y destruir gemelos idnticos en beneficio de los dem&s puede ser moralmente sospec'oso. ;na aplicacin de la terapia gnica con perspectivas de futuro m&s

23 cercanas, es su utili.acin para combatir la 'epatitis, que afecta a una gran parte de la poblacin. ,n los $ltimos a2os, se est&n reali.ando importantes investigaciones sobre la posibilidad de utili.ar terapia gnica contra el virus de la 'epatitis 8, ya que no todos los pacientes responden correctamente al tratamiento con interfern. La terapia gnica consiste en usar fragmentos de virus con capacidad para in'ibir y que puedan multiplicarse. Los e#perimentos reali.ados en tubos de ensayo 'an logrado frenar al CO K de los virus, y se espera su aplicacin en 'umanos en pocos a2os. =tra lnea de investigacin futura consiste en la utili.acin de virus modificados por ingeniera gentica, para ser utili.ados como vectores que transporten genes especficos en el interior de las neuronas, de forma que puedan aportar genes teraputicos al cerebro 'umano, y as poder tratar numerosas enfermedades neurolgicas, como el ParPinson o la enfermedad de l.'eimer. lgunas tcnicas de este tipo ya se 'an puesto de manifiesto con #ito en animales de e#perimentacin. Por otra parte, el empleo de animales de e#perimentacin permite introducir, controladamente, genes 'umanos en sus clulas, y as conseguir informacin sobre la forma en que ciertos defectos gnicos se traducen en enfermedad. ,#isten m&s de @.AAA enfermedades 'umanas, entre ellas el c&ncer, atribuidas a defectos genticos. ctualmente, la terapia consiste en la insercin aleatoria de genes sanos en los cromosomas, pero stos no funcionan con la misma eficacia que los que ocupan su lugar correcto en el cromosoma. ;n caso particular, en esta lnea de investigacin, es el de oveja 1Polly16 una oveja clonada que, antes de la clonacin, fue tratada por ingeniera gentica para que portara en su genoma el gen 'umano que codifica la protena factor I>, un componente de la sangre que constituye el principal tratamiento para la 'emofilia. 'ora se espera que estos animales secreten la protena teraputica en su lec'e. Las clonaciones de las

24 ovejas y de los monos 'an levantado intensos debates entre los cientficos y en la sociedad en general, debido a que nunca se 'aban clonado especies de animales, sobre todo en el caso de los monos, tan estrec'amente relacionadas con el gnero 'umano, y se temen las repercusiones ticas de una supuesta futura investigacin en el 'ombre. ctualmente, e#iste una legislacin establecida por 9C pases, entre ellos ,spa2a, que pro'be la creacin de seres 'umanos mediante tcnicas de clonacin. Las aplicaciones potenciales de la clonacin 'umana se centraran b&sicamente en el diagnstico y curacin de defectos genticos, y ayudaran a solucionar ciertos problemas a las personas que se someten a una fecundacin in vitro, pues aumentara las probabilidades de conseguir un embara.o. -uc'os cientficos slo consideran lcita esta manipulacin gentica si es utili.ada e#clusivamente para fines teraputicos. 8H!IG= G,"7%I8= 5 ) 8%G+ Instrucciones contenidas en un gen que le dicen a la clula cmo 'acer una protena especfica. , %, G, y 8 son las 1letras1 del cdigo gentico y representan las bases nitrogenadas adenina, timina, guanina y citosina, respectivamente. ,stas bases junto con un a.$car y un enlace fosfato constituyen los nucletidos que son la unidad fundamental del !". ,n cada gen se combinan las cuatro bases en diversas formas, para crear palabras de 3 letras que especifican cu&l amino&cido es necesario en cada paso de la elaboracin de la protena. 8=!=" 5 %res bases en una secuencia de cuales especifican un solo amino&cido. !" o /", las

8/=00I"G5=B,/ 5 8ru.amiento de dos cromosomas, en el transcurso de la formacin de las clulas reproductoras, que permite nuevas combinaciones de caracteres 'ereditarios. 0I".( entrecru.amiento.

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!elecin 5 ,s una mutacin estructural en la que se produce prdida de material gnico. 0u efecto depende de si el individuo es 'eterocigoto u 'omocigoto respecto a la variacin estructural. ,n general, cuanto mayor es la deficiencia o delecin, mayor es el desequilibrio gnico producido, pudiendo llegar a ser inviable el gaineto o cigoto portador del cambio. 0i sobreviven, la delecin se transmite a la descendencia como un factor mendeliano. !,/IB 5 !eriva gentica 5 ,n una poblacin limitada, evolucin debida al a.ar. !I0,Q= !, E /- 8=0 5 -ediante la tecnologa del !" recombinante se producen actualmente grandes cantidades de productos gnicos teraputicos a partir de genes clonados, tales como insulina, interferones, interleuquinas y 'ormonas del crecimiento. dem&s, gracias a los procedimientos de clonaje, e#presin y purificacin, se trata de identificar la protena clave en un proceso patolgico, aislarla en grandes cantidades, determinar su estructura tridimensional mediante cristalografa de rayos > y, finalmente, dise2ar molculas que in'iban su funcin. ctualmente, los f&rmacos que se utili.an son poco selectivos y actuan por igual en todas las especies, con lo cual resultan t#icos para el agente patgeno pero tambin para el 'ospedador. ;no de los principales objetivos de la biotecnologa es el desarrollo de f&rmacos cuya accin sea m&s selectiva sobre determinadas especies. ;no de estos casos es la enfermedad del 0I! , en la que se investiga para desarrollar f&rmacos selectivos contra el virus que la produce. ctualmente, se 'an identificado dos protenas claves propias del virus( una proteasa y una transcriptasa inversa, que mediante ingeniera gentica se consiguen en una elevada produccin en ,. coli, y que se est&n investigando profundamente para obtener f&rmacos m&s efectivos y especficos con la ayuda de mtodos

26 cristalogr&ficos y de dise2os de f&rmacos que funcionen como potentes in'ibidores. !=-I" "%, 5 !cese de un car&cter 'ereditario que, cuando se posee, siempre se manifiesta en el fenotipo. !;PLI8 8IH" 5 -ecanismo por el cual a partir de una sola molcula de !" es posible obtener dos molculas idnticas de !". Las dos 'ebras de !" son separadas por una en.ima)'elicasa+6 entonces, la clula suministra los nucletidos que se alinean y son enla.ados por otra en.ima )!" 5plimerasa+, esto ocurre a lo largo de cada 'ebra separada de !" , que sirve de molde para una nueva. ,s por tanto, la presencia repetida de un segmento cromosmico. Puede ser directa o inversa seg$n el segmento cromosmatico se repita en el mismo orden o invertido. Los segmentos repetidos pueden estar m&s o menos distantes dentro del cromosoma, o bien seguidos. ,n este $ltimo caso, la duplicacin se llama en t&ndem. La duplicacin puede producirse por una serie de roturas y reuniones. ,l efecto de una duplicacin depende de los genes a los que afecte. Los genes duplicados producir&n generalmente las mismas consecuencias en el fenotipo que si estuvieran en su posicin normal, y la transmisin de las duplicaciones es mendeliana. ,8; %=/I L Placa ecuatorial 5 Pllano mediano de una clula en el que los cromosomas fisurados se agrupan durante la mitosis, antes de separarse en dos grupos iguales. ,"!=";8L, 0 0 !, /,0%/I88IH" 5 ,l descubrimiento de estas en.imas capaces de reconocer y cortar el !" en puntos determinados, fue la pista que orient 'acia el modo en que se podan recombinar los genes en el laboratorio. 0i se quieren unir dos !"s, cada uno de los cuales procede de una especie diferente, podemos utili.ar dic'as en.imas como 'erramientas. 8ada !" se trata con una endonucleasa de restriccin que origina en este caso un corte escalonado en las dos 'ebras dobles de !". Los

27 e#tremos escalonados del !"9 y el !"I son complementarios, con lo cual, una condicin que tienen que tener los dos !"s que se quiere unir es que tengan un peque2o fragmento igual en sus secuencias. Los dos !" s as cortados se me.clan, se calientan y enfran suavemente. 0us e#tremos co'esivos se aparear&n dando lugar a un nuevo !" recombinado, con uniones no covalentes. Las uniones covalentes se consiguen a2adiendo !" ligasa y una fuente energtica para formar los enlaces. )8orresponde a la forma del esquema+. =tra en.ima clave para unir !"s es la transferasa terminal, que puede adicionar muc'os residuos de deso#irribonucletidos sucesivos al e#tremo 34 de las 'ebras del !". !e este modo pueden construirse colas de poli G )nucletidos de guanina+ en los e#tremos 34 de las dos 'ebras de !" d$ple# y colas de poli 8 )nucletidos de citosina+ en los e#tremos 34 del otro !". 8omo estas colas son complementarias, permitir&n que los dos !"s se unan por complementareidad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por la !" ligasa. ,"E,/-,! !,0 <,/,!I% /I 0 5 0on causadas por falta, deficiencia o distorsin de protenas que a su ve. 'an sido provocadas por errores en la informacin gentica contenida en la secuencia de !". La gentica molecular nacida de la conjuncin de la gentica y las tcnicas de biologa molecular 'a permitido anali.ar directamente los genes y protenas que est&n involucradas en enfermedades 'ereditarias. La mayora de las enfermedades 'ereditarias carecen de causa primaria conocida, es decir no se 'a caracteri.ado el genRla protena deficiente que las produce, aunque a la fec'a decenas de genes y protenas 'an sido identificados como causa o predisposicin de algunas de ellas. ,jemplos como los genes cuyas mutaciones provocan la mucoviscidosis )8E%/+, la enfermedad de <untington )<!+ u otros genes que predisponen a la diabetes )I"0, !S*, G8:+. La comparacin entre los genes normales y mutados dan una e#plicacin del mecanismo causal en estas enfermedades.

28 ,PI0=5 Partcula celular del citoplasma, portadora de informacin gentica. ,PI0% 0I0 5 8ar&cter dominante de un gen sobre otro no alelo. E 8%=/ 5 gente causal 'ereditario que determina cierto car&cter en la descendencia. G," o G,", 5 ;nidad b&sica de material 'ereditario, que ocupa un locus en un cromosoma, y determina la aparicin de los caracteres 'ereditarios en plantas y animales. Germen transmitido de un car&cter o rudimento del mismo, invisible 'asta que, en 9C3I, fue fotografiado por el bilogo norteamericano To'n *elling. 0e 'an locali.ado en los cromosomas. Por ello transmiten los padres a los 'ijos sus cualidades propias a travs del n$cleo de las clulas germinativas, en las cuales previamente se 'a reali.ado la segregacin de caracteres, ya que es imposible acumular en un individuo todas las cualidades de dos. Los genes son subdivisiones funcionales del !". ,n biologa cl&sica se definan como una parte del cromosoma que determinaba o especificaba un car&cter, por ejemplo, el color de los ojos. <oy sabemos que un gen codifica para una protena determinada o para un /" determinado. Los genes que codifican para cadenas polipeptdicas o para /" s se denominan genes estructurales, ya que determinan la estructura de alg$n producto final del gen, tal como una en.ima o una molcula de /" estable. ,l !" contiene adem&s otros segmentos o secuencias, cuya funcin es e#clusivamente reguladora( segmentos que delimitan el comien.o y el final de los genes estructurales y segmentos que participan en la puesta en marc'a de la transcripcin de genes estructurales. Por lo tanto, los cromosomas contienen genes estructurales y secuencias reguladores. -ediante diversos procedimientos genricos se 'an podido reali.ar mapas que muestran la disposicin secuencial de muc'os genes en los cromosomas.

29 ,l sitio del cromosoma en que se locali.a un gen determinado se llama locus gentico y cuando un gen que ocupa un locus determinado puede e#istir en dos o m&s formas diferentes, stas se llaman alelos. lgunos genes est&n repetidos muc'as veces en los cromosomas. s, por ejemplo, los genes que codifican para las 'istonas tienen m$ltiples copias, ya que los embriones tempranos deben fabrican 'istonas muy r&pidamente durante este perodo de r&pido crecimiento. La mayor parte de los genes eucariticos que 'an sido estudiados tienen una caracterstica estructural distintiva, que no se da en los procariontes, y consiste en que sus secuencias de !" contienen uno o m&s segmentos de !" que no codifican para la secuencia de amino&cidos del polipptido. ,stos segmentos que no se traducen se denominan intrones, mientras que los segmentos codificadores del gen se llaman e#ones. G,"7%I8 5 8iencia que se ocupa del estudio de la 'erencia biolgica, y estudia la forma en que los genes act$an y se transmiten de ascendientes a descendientes. Los seres vivos se encuentran en un continuo estado de adaptacin a los cambios que se producen constantemente en su ambiente. Las m$ltiples combinaciones que se pueden establecer entre las cuatro bases nitrogenadas del !" )adenina, timina, guanina, y citosina+ son la causa de los cambios producidos en la composicin gentica de las poblaciones y de la diversidad de los seres vivos. ,stos cambios dan como resultado final el proceso de evolucin de las especies, y como consecuencia de sta los descendientes pueden ser muy distintos de sus antepasados. !e creciente importancia son los estudios genticos encaminados a prevenir la aparicin de defectos fsicos de tipo 'ereditario en los descendientes antes de su nacimiento. <istoria de la gentica U La <istoria de la Gentica( es casi tan antigua como la <umanidad. !esde bien temprano, el 'ombre 'a podido observar que un organismo vivo solo engendra otro

30 semejante, y que tanto el mac'o como la 'embra eran necesarios para producir 'ijos, a los que trasmitan una serie de caractersticas, tales como el color de los ojos, el color del pelo, una nari. grande, etc6 adem&s, en la organi.acin social de la 'umanidad, la 'erencia biolgica 'a sido siempre un factor muy importante, determinando la posesin de tierras, de rique.as y de poder. Los antiguos egipcios ya saban cmo producir frutos por fecundacin artificial, mediante el cru.amiento de las flores masculinas de una palmera datilera con las femeninas de otras. !esde pocas muy remotas, el 'ombre 'a manipulado animales domsticos y plantas, mediante la reproduccin selectiva, para mejorar ciertas caractersticas en beneficio de una mejor alimentacin. La observacin de ciertos animales o plantas daba lugar a la fabulacin de leyendas que intentaban dar una e#plicacin sobre la e#istencia de ciertos individuos. s por ejemplo, los primeros naturalistas e#plicaban que el camello y el leopardo se apareaban de ve. en cuando, para dar lugar a un animal tan e#traordinario y tan poco com$n como la jirafa6 y de 'ec'o, la jirafa com$n a$n lleva el nombre cientfico de Giraffa camelopardalis. Las primeras teoras sobre la 'erencia fueron e#puestas por <ipcrates )?FA53GG a.8.+, para el cual e#istan una especie de semillas repartidas por todo el cuerpo y que se transmitan a los 'ijos en el momento de la concepcin, por lo que stos se parecan a sus padres. ;n siglo despus, ristteles rec'a. estas teoras y propuso otras que permanecieron durante muc'o tiempo vigentes. 0eg$n l, el semen de los mac'os poda contener partculas 'eredadas de generaciones pasadas6 en la fecundacin se produca una me.cla del flujo masculino con lo que l llam el semen femenino )flujo menstrual+, y a partir de esa me.cla se formaba la carne y la sangre de los individuos. <asta el siglo >BII no aparece la teora de la generacin espont&nea, seg$n la cual algunas formas de vida, como moscas o gusanos, pueden surgir espont&neamente en el polvo o en el cieno.

31 s, los ratones se desarrollan a partir de los granos '$medos y los piojos de las plantas se condensaban a partir de una gota de roco. ,sta teora permaneci vigente 'asta que Pasteur, en 9OF?, demostr que los microorganismos aparecan por causa del aire contaminado y no espont&neamente, como sostenan sus opositores. ,n 9FGI, el 'olands /einer Graaf describi los folculos producidos por los ovarios, que 'oy en da llevan su nombre, pero fue en 9OIG cuando :arl ,rnst von *aer descubri el 'uevo )vulo+ en el interior de los folculos de !e Graaff. Por aquella poca 'aba dos tendencias( por una parte, los espermistas, que afirmaban que en el lquido seminal del mac'o visto en el microscopio e#istan unas criaturas diminutas denominadas 'um$nculos u 'ombrecitos, y por otra parte, los ovistas, que afirmaban que era el 'uevo femenino el que contena el futuro ser 'umano en miniatura, y los anim&culos del mac'o slo servan para estimular el crecimiento del 'uevo. Los posteriores estudios reali.ados est&n muy ligados a la e#plicacin de la evolucin de las especies. s por ejemplo, LamarcP en 9OAC, admite la influencia del medio sobre el desarrollo de los rganos de los animales y sostiene que esos caracteres adquiridos se 'acen 'ereditarios, como ocurre con el cuello largo de la jirafa. La evolucin, seg$n !arMin, se produce cuando la seleccin natural act$a sobre los caracteres que pueden ser 'eredados, por tanto las mutaciones son para l responsables de la evolucin de las especies. La 'iptesis m&s aceptada en el siglo >I> fue la de 'erencia por me.cla, de tal forma que al unirse los vulos y espermato.oides se produce una combinacin, cuyo resultado es una me.cla equitativa de ambos. Por ejemplo, la descendencia de un animal de pelo blanco con otro de pelo negro slo podra ser gris, y su progenie tambin lo sera pues, al me.clar el material 'ereditario blanco y gris, ste ya no podra volver a separarse. ,videntemente, esta teora era incompatible con los estudios sostenidos por !arMin sobre la seleccin

32 natural y las variaciones 'ereditarias. 0in embargo, fue tambin durante la primera mitad del siglo >I>, cuando se reali.aron los primeros estudios de la transmisin de los caracteres biolgicos en plantas. Gregor -endel es el verdadero fundador de la gentica y sus e#perimentos de 'ibridacin, reali.ados en el jardn de un monasterio del que lleg a ser abad, llevaron a una nueva comprensin del mecanismo de la 'erencia biolgica y al nacimiento de la gentica como ciencia. s, el concepto de me.cla fue reempla.ado por el concepto de unidad. -endel reali. sus e#perimentos con el guisante com$n )Pisum sativum+, una planta f&cil de cultivar y de r&pido crecimiento. -endel demostr que la 'erencia de los caracteres, por l estudiados, era debida a la trasmisin, efectuada seg$n unas leyes establecidas por l mismo, llamadas leyes de -endel, de unas unidades que se redistribuyen en cada generacin, a las cuales denomin ,lemente y que 'oy son conocidas como genes. )Base Gentica mendeliana+. -endel public sus resultados en 9OFF, pero stos pasaron desapercibidos durante 3@ a2os, 'asta que en 9CAA su trabajo fue redescubierto independientemente por tres cientficos a la ve. )!e Bries, 8orrens y %sc'ermaP+. partir de entonces, fue tambin comprobada por otros investigadores mediante e#perimentos reali.ados tanto en plantas como en animales. Gracias a los avances en microscopa, en algunas disciplinas como la citologa, se reali.aron grandes progresos. !e tal forma que durante este perodo, se descubrieron los cromosomas y tambin se observaron sus primeros movimientos durante la mitosis celular, as como el proceso por el cual se forman los gametos, que son los portadores de la informacin gentica que se trasmite a la siguiente generacin )ver Gametognesis+. Los e#perimentos reali.ados en la mosca de la fruta )!rosop'ila melanogaster+ reali.ados por %'omas <unt -organ y sus colaboradores, ayud a establecer la teora cromosmica de la 'erencia. ,stos investigadores propusieron que los

33 factores 'ereditarios se disponan de forma lineal en los cromosomas. Posteriores investigadores contribuyeron a la afirmacin de que los genes est&n en los cromosomas y, por tanto, los genes que est&n en el mismo cromosoma tienden a 'eredarse juntos, por lo que se denominan genes ligados. Posteriormente, se acept que los genes son los responsables de la sntesis de protenas, sosteniendo la teora un gen5una en.ima, y por tanto, al alterar la secuencia de nucletidos de un gen faltara una en.ima determinada )vase *iosntesis de protenas en la vo. *iosntesis+. ,n 9C@?, Vatson y 8ricP descubren la estructura del !", que representa el soporte del material 'ereditario. partir de este momento se reali.an numerosos estudios sobre replicacin, biosntesis de protenas, biosntesis de /", etc. Posteriormente, Erancis Tacob y Taques -onod demostraron la e#istencia de un sistema de regulacin gentica, en el que intervienen los denominados genes estructurales, genes reguladores y genes operadores )vase La 'iptesis del opern en la vo. Gentica molecular+. La aportacin de los conocimientos genticos combinados con los de otras ciencias, como bioqumica, fisiologa, etc., 'an supuesto decisivos avances para la comprensin del fenmeno de la vida y la evolucin de los seres vivos. La gentica molecular y la ingeniera gentica permiten modificar a voluntad el material gentico de un organismo vivo.

Gentica cuantitativa 5 ,studia los caracteres continuamente variables, tanto en cantidad como en e#tensin. ,stos caracteres pueden estar bajo la influencia de numerosos genes )'erencia polignica+, as como de las influencias del medio. 8uando se combinan ambos casos se tiene una 'erencia multifactorial. ,l efecto de esos genes sobre un determinado car&cter puede ser diferente, adem&s, los genes pueden interactuar entre s. ,jemplos de caracteres estudiados por la gentica cuantitativa son el

34 peso, la altura o el grado de pigmentacin. Gentica 'umana 5 ,studia la 'erencia biolgica del 'ombre. *&sicamente, se trata de un estudio entre las semejan.as y diferencias 'ereditarias de los 'umanos, las causas que lo producen y la forma de transmisin. ,s bien sabido que muc'as enfermedades tienen un componente gentico muy importante, entre ellas el c&ncer6 por ello, e#iste un gran inters en el estudio e identificacin de genes implicados en enfermedades especficas. 0in embargo, las limitaciones que e#isten en el estudio de la gentica 'umana son grandes, en relacin con otras especies. Los e#perimentos de cruce, llevados a cabo tan f&cilmente con guisantes, no son posibles con seres 'umanos. Por ello, numerosas interpretaciones admitidas en el estudio de la gentica 'umana proceden de e#perimentos reali.ados en animales y plantas. ;no de los grandes booms de la gentica se est& produciendo actualmente con el denominado Proyecto Genoma <umano, proyecto coordinado por numerosas instituciones que se inici en 9CCA con el fin de obtener el genoma 'umano completo )construir un mapa de cada cromosoma+, y en abril del a2o IAAA ya se 'aba conseguido secuenciar todo el genoma completo, el cual est& formado por @A millones de fragmentos de !"6 a'ora queda la tarea m&s difcil que es la de ensamblar esos @A millones de fragmentos. La gentica 'umana consta b&sicamente de tres bloques muy importantes( gentica de poblaciones, gentica bioqumica y citogentica. Gentica de poblaciones 5 ,studia los caracteres 'ereditarios y su frecuencia en grandes muestras de poblaciones de una especie. Incluye los estudios de frecuencias gnicas, genotipos, fenotipos y sistemas de cruces. -ediante el c&lculo estadstico, se 'an establecido importantes conclusiones respecto a la 'eredabilidad o la frecuencia de ciertos caracteres en una determinada poblacin. ,n 9CAO, un matem&tico ingls y un mdico alem&n establecieron la ley de <ardy5Veinberg, seg$n la cual en una poblacin ideal, con un apareamiento al a.ar,

35 sin mutaciones, seleccin ni migracin diferencial, la frecuencia de alelos para un locus determinado se mantendra igual en sucesivas generaciones6 la frecuencia de los genotipos alcan.a el equilibrio. Por lo tanto, si dos alelos de un gen autosmico ) y a+ se presentan en una poblacin con una frecuencia p y q respectivamente y p W q X 9, en la pr#ima generacin la frecuencia de los genotipos , a y aa ser& pI, Ipq y qI respectivamente, y permanecera constante de generacin en generacin. 0on muy numerosas las consecuencias que se derivan de este equilibrio gentico. ;na nueva dimensin de la gentica de poblaciones comprende el estudio de los factores que intervienen en la evolucin biolgica y concretamente en la 'umana )vase ,volucin 'umana+. Gentica bioqumica U ,studia la variacin 'ereditaria con respecto a las caractersticas bioqumicas. !e los caracteres m&s estudiados 'an sido los grupos sanguneos y los antgenos implicados en rec'a.o de transplantes, puesto que ambos est&n determinados por componentes genticos. La inmunogentica es precisamente la rama de la gentica que estudia las relaciones entre la inmunidad y los factores genticos en la enfermedad. Los grupos sanguneos constituyen un estudio muy importante en la gentica 'umana, por su contribucin al establecimiento de los principios genticos y por su importancia clnica en las transfusiones sanguneas y en los casos de incompatibilidad entre la madre y el feto. dquiere tambin gran importancia el estudio de las protenas plasm&ticas, que permiten establecer diferencias 'ereditarias entre los individuos. ,#isten, en el organismo, muc'os trastornos bioqumicos, debidos a la ausencia de una determinada en.ima o a alg$n defecto en su elaboracin. ,stos procesos metablicos est&n genticamente regulados y actualmente son objetos de importantes estudios. ,ntre las en.imopatas m&s destacadas se encuentran la galactosemia y la alcaptonuria.

36

Gentica fisiolgica 5 %ambin llamada fenogentica, estudia los efectos fenotpicos del material gentico, es decir, los efectos que produce sobre los caracteres y la morfologa de los seres vivos. Gentica mendeliana 5 /eali.a un estudio cientfico de la 'erencia, en relacin y concordancia con las leyes de -endel. Los descubrimientos de -endel dieron lugar al nacimiento de la Gentica y 'oy siguen vigentes muc'as de sus afirmaciones, si bien se 'an encontrado e#cepciones y variantes. -endel formul dos grandes principios( el principio de la segregacin, seg$n el cual las caractersticas 'ereditarias son determinadas por los genes, que se presentan en pares, un miembro de cada par 'eredado de cada padre6 y el principio de la distribucin independiente, seg$n el cual los alelos de un gen segregan independientemente de los alelos de otro gen. -endel no conoci las estructuras biolgicas responsables de la 'erencia6 se conocieron a2os despus, cuando la teora cromosmica de la 'erencia vino a afirmar la responsabilidad de los genes en la transmisin de los caracteres 'ereditarios, y la locali.acin de dic'os genes en el interior de los cromosomas del n$cleo celular. Gentica molecular 5 ,studia los aspectos moleculares que subyacen a los mecanismos de la 'erencia, su e#presin, regulacin, variacin y evolucin. 0u mtodo e#perimental consiste en aislar fragmentos de !", locali.ar en ellos los genes a estudiar, establecer en ellos la secuencia de sus bases, y estudiar las secuencias codificantes, las no codificantes, y las reguladoras, as como las protenas que controlan la e#presin de dic'os genes. 8ontrariamente a la gentica mendeliana y a la gentica cl&sica, la gentica molecular parte del genotipo y deduce el fenotipo.

Informacin gentica 5 Informacin contenida en una secuencia de nucletidos de &cidos nucleicos, !". o /". G,"=5 8onjunto de genes que especifican todos los caracteres de un organismo. = sea, es todo el material gentico de un ser vivo. ,s el juego completo de

37 instrucciones 'ereditarias para la construccin y mantenimiento de un organismo, que pasa a la siguiente generacin. ,n la mayora de los seres vivos, est& 'ec'o por un qumico llamado !". ,l genoma contiene genes que son parte del !" y est&n empacados en cromosomas que afectan caractersticas especficas del organismo6 por ejemplo, el color de los ojos o la forma de la nari.. Imagine esta relacin como un juego de cajas c'inas, una dentro de otra. La m&s grande representa al genoma. ,n su interior, una m&s peque2a contiene los cromosomas y en el interior de sta se encuentra la caja que representa a los genes. !entro de sta, finalmente, est& la m&s peque2a, el !". ,n resumen, el genoma se divide en cromosomas que contienen genes y los genes son peda.os de !". ,n total, el 'umano tiene tres mil millones de pares de bases del genoma. Los cientficos creen que su descripcin completa abre las puertas a una nueva percepcin del 'ombre como sujeto de e#perimentacin en s mismo, para alcan.ar la vida eterna, libre de enfermedades. Los gobiernos implicados en su desciframiento aseguran que el estudio y la aplicacin de sus potencialidades tiene implicancias sociales, polticas, econmicas y culturales.

Genoma <umano 5 ,st& formado por I3 pares de cromosomas, que se encuentran dentro del n$cleo de cada una de las clulas, y est& formado por el !" )3AAAAAAAAA pares de bases, cada 'ebra+ y protenas. G,"=%IP= 5 8onjunto de factores 'ereditarios constitucionales de un individuo o de una especie. <,/,"8I 5 %ransmisin de caracteres genticos de una generacin a las siguientes. <erencia mendeliana 5 Eorma en que se transmiten los genes y por ende los rasgos de padres a 'ijos. ,ntre los ejemplos de 'erencia mendeliana est&n la autosmica dominante, la autosmica recesiva y los genes ligados al se#o. <,%,/=8IG=%= o <,%,/=8IGH%I8= 5 !cese de un sujeto o de uno de sus caracteres cuyos alelos son diferentes.

38

<,%,/=8/=-=0=se#o del cigoto.

5 8romosoma del cual depende el

<,%,/=0I0 5 ,n un cru.amiento de ra.as, valor medio de los descendientes, superior al valor medio de las ra.as que se cru.an. <I*/I! 8IH" 5 Eecundacin entre dos individuos de ra.as o, m&s raramente, de especies diferentes6 proceso de generacin de una molcula, clula u organismo combinado con material gentico procedente de organismos diferentes. ,n las tcnicas tradicionales, los 'bridos se producan mediante el cru.amiento de variedades distintas de animales y plantas por alineacin o apareamiento de bases de dos molculas de !" de cadena sencilla que son 'omlogas o complementarias. La tecnologa de fusin celular y la manipulacin transgnica son las nuevas modalidades de 'ibridacin introducidas por la manipulacin gentica. <=-=8IG=%= u <=-=8IGH%I8= 5 !cese del organismo cuyos genes alelomorfos, para un mismo car&cter, son iguales. I"G,"I,/J 5 Ingeniera gentica( conjunto de tcnicas que permiten la recombinacin fuera de un organismo de cromosomas pertenecientes a organismos diferentes. Inversin 5 0e produce por un mnimo de dos roturas y dos reuniones. ,n las inversiones no 'ay ganancia ni prdida de material gentico y por lo tanto no 'ay alteracin del equilibrio, pero e#isten inversiones con efecto fenotpico que en un principio se ac'acaron a peque2as deleciones en los puntos de rotura. Luego, al conseguirse reproducir la inversin e#perimentalmente y su reversin a la estructura primitiva, se 'a visto que se recupera el efecto fenotpico primitivo, por lo tanto no se 'aba perdido material gentico. Por eso se ac'acan los cambios fenotpicos a un efecto de posicin.

39 I0=G -I 5 Eusin entre dos gametos semejantes, que se efect$a en diversas especies de algas y de 'ongos inferiores. L,% L 5 !cese de un gen que, en estado 'omocigoto, produce la muerte m&s o menos preco. de quien lo lleva. LIG != 5 !cese de cualquiera de los caracteres adscritos a un determinado cromosoma, especialmente los se#uales, que se distinguen por peculiaridades de la 'erencia. LI": T, 5 sociacin constante, en una especie animal o vegetal, de dos caractersticas individuales que no tienen ning$n vnculo lgico. L=8;0 5 Posicin absoluta que ocupa un determinado gen en un cromosoma. ,l !" se organi.a en cromosomas, por lo que se puede asignar un lugar )o locus+ a cada gen en el conjunto de cromosomas de un individuo. Para un gen dado, un individuo diploide tiene dos loci )plural de locus+ en los dos cromosomas 'omlogos, punto de un cromosoma ocupado por un gen. - "IP;L 8IH" G,"7%I8 5 Eormacin de nuevas combinaciones de material 'ereditario por insercin de molculas de &cido nucleico, generadas fuera de la clula, en el interior de cualquier virus, pl&smido bacteriano u otro sistema vector fuera de la clula. !e esta forma se permite su incorporacin a un organismo 'usped en el que no aparecen de forma natural pero en el que dic'as molculas son capaces de reproducirse de forma continuada. l referirse al proceso en s, puede 'ablarse de manipulacin gentica, ingeniera gentica o tecnologa de !" recombinante. %ambin admite molecular o clonacin de material 'eredable puede cultivo de una lnea idnticos. la denominacin de clonacin genes, dado que la formacin de propagarse o crecer mediante el de organismos genticamente

40 - %,/I L 5 -aterial 'ereditario, conjunto de estructuras que en los organismos vivos constituyen el soporte de la 'erencia. ),st& formado por !". o /".+ -,"!,LI0-= 5 %eora derivada de los trabajos de -endel, relativa a la transmisin de ciertos caracteres 'ereditarios y resumida en las leyes de -endel. ),l mendelismo condujo a la teora cromosmica de la 'erencia y a la nocin de gen.+ -,"0 T,/= 5 Ya.r.n. mensajeroZ -ongolismo

-="=0=-J 5 8ondicin de un organismo diploide que 'a perdido un cromosoma de su dotacin crom&tica. -;% 8IH" 5 8ualquiera de los cambios que aparecen bruscamente en el genotipo de un ser vivo, que se transmiten por 'erencia a los descendientes. ,l material gentico puede sufrir alteracin cualitativa o cuantitativa, o redistribucin. -;% 8I=",0 5 8ambios bruscos en el genotipo de un organismo, no debido a recombinacin. La alteracin puede ser cuantitativa, cualitativa, o de redistribucin. La aparicin de estos cambios 'aba sido observada por los bilogos desde 'aca muc'os a2os, pero su interpretacin correcta se debe al bot&nico !e Bries, que en 9CA9 les dio el nombre de mutaciones. !e Bries, que estudi las mutaciones en la planta =enot'era lamarPiana, consider que consistan siempre en cambios bruscos del genotipo, pero posteriormente las detalladas investigaciones de -organ y su escuela en !rosop'illa melanogaster demostraron que e#isten mutaciones de muy diversos grados, ya que los cambios provocados por ellas pueden incluso ser tan peque2os que no resulta f&cil descubrirlos. ,l estudio de las mutaciones es de gran importancia porque constituyen una de las bases fundamentales del proceso evolutivo. La estabilidad de las molculas 'ereditarias es muy relativa. La variabilidad de formas de vida que e#isten, 'a sido posible gracias a la aparicin de

41 errores en el material 'ereditario, lo que 'a permitido la diversificacin de los organismos. dem&s, las mutaciones son para muc'os seres la manera de defenderse de las agresiones del medio en que viven o de adaptarse mejor a las condiciones ambientales. La parte negativa de las mutaciones es que muc'as veces son responsables de determinadas enfermedades que no slo van a afectar al organismo que sufre la mutacin, sino que pueden afectar tambin a su descendencia. 0i la mutacin se da en una clula de un individuo en desarrollo, todas las clulas a las que d origen la mutada ser&n de diferente constitucin gentica, form&ndose un mosaico )individuo en el que coe#isten varios tipos de clulas genticamente distintas, que derivaron de un mismo cigoto+. unque las causas de las mutaciones en el 'ombre son en gran parte desconocidas, entre los factores que se 'an se2alado se encuentran factores ambientales como radiaciones, virus y productos qumicos. 8l&sicamente se 'an venido distinguiendo varios tipos de mutaciones de acuerdo con la forma de sufrir cambios el material gentico. -utaciones ancuploides o desequilibradas 5 ,l n$mero cromosmico resultante no es m$ltiplo de n$meros 'aploides. Para designar este fenmeno, se nombra primero su constitucin cromosmica b&sica y luego un calificativo compuesto por un prefijo que indica la ploida del cromosoma que no est& en cantidad euploide, seguido del sufijo smico. Para el ejemplo anterior, el individuo *888 sera un diploidemonosmico para * y trismico para 8. 8omo ejemplo cl&sico de mutacin aneuploide tenemos la trisoma del cromosoma I9 'umano, que da lugar al sndrome de !oMn o mongolismo. La monosoma del cromosoma se#ual > da lugar al sndrome de %urner, caracteri.ado por estatura corta, resistente al tratamiento, infantilismo genital, gnadas sin clulas germinales, anormalidades renales, esquelticas y cardiacas. -utaciones cariotpicas o genmicas.

42 5 %ambin denominadas mutaciones numricas, afectan al cariotipo o dotacin cromosmica en su conjunto y se deben a la aparicin de un n$mero de series 'aploides distinto del normal )triploide, tetraploide, 'eteroploide, etc.+ o aumento o disminucin de alg$n cromosoma. 0upongamos un individuo cuya dotacin cromosmica 'aploide es de tres cromosomas * 8. ;n individuo diploide normal tendr& dos juegos cromosmicos completos y su dotacin ser& ** 88. Por una mutacin numrica se pueden producir clulas, tejidos u organismos enteros con tres o m&s juegos completos. ,sos individuos se denominan autoploides o autopoliploides. 0eg$n su grado de ploida, stos podr&n ser triploides, tetraploides, pentaploides, etc., seg$n tengan tres, cuatro, cinco, etc., juegos de cromosomas. Las mutaciones autoploides son muc'o m&s frecuentes en plantas. 7ste sera un cambio euploide, porque cada juego de cromosomas est& completo y es equilibrado en sus genes. -utaciones cromosmicas 5 8aracteri.adas por cambios en la estructura de los cromosomas, las cuales lgicamente son observables microscpicamente. %ales cambios pueden consistir en la prdida de un tro.o )deleccin+, o en su adicin, con lo cual e#iste un segmento repetido )duplicacin+ o bien en el traslado de una porcin de un cromosoma a otro no 'omlogo )translocacin+, e incluso que un tro.o de cromosoma invierta su posicin )inversin+. -utaciones espont&neas 5 0on mutaciones que tienen lugar por errores en el manejo interno del material gentico en las clulas, es decir, que ocurren de un modo natural. %ienen lugar en la naturale.a con frecuencia relativamente baja, ya que, a pesar de las continuas mutaciones espont&neas que sufren los seres vivos, la identidad de los organismos se transfiere de generacin en generacin con una fidelidad e#traordinaria. ,sto se consigue gracias a la notable capacidad de ciertas en.imas

43 para proteger y reparar la secuencia de bases especfica de los cromosomas de cada organismo. ,l papel de las en.imas reparadoras es muy importante, ya que la mayor parte de las mutaciones que se producen son autom&ticamente reparadas por ellas. -utaciones estructurales 5 8uando el cambio estructural se verifica en un solo cromosoma, se llama intracromosmico. 0i afecta a dos o m&s cromosomas, es intercromosmico. -utaciones gnicas 5 ,n las cuales el cambio afecta a la constitucin qumica de los genes. Lgicamente, por tratarse de cambios moleculares, este tipo de mutaciones a diferencia de las anteriores no son observables ni siquiera con el microscopio electrnico. ctualmente slo se consideran verdaderas mutaciones las gnicas.

-utaciones inducidas 5 0on aqullas que se producen por influencia de factores e#ternos. Los principales son radiacin ultravioleta, radiaciones ioni.antes y mut&genos qumicos. -utaciones puntuales 5 0on cambios que afectan a un gen o, como muc'o, a varios genes vecinos al mismo tiempo. %ambin se llaman mutaciones gnicas. ,l gen primitivo se llama alelo salvaje y el mutado alelo. ,n el 'ombre e#isten numerosas enfermedades cuya base gentica es una mutacin de este tipo. ,jemplos de ello los tenemos en la 'emofilia, la talasemia y el albinismo.

Las mutaciones que se originan cuando una base es reempla.ada por otra incorrecta se llaman mutaciones por sustitucin. 8uando no producen cambios en las propiedades biolgicas de la protena para la que codifica el gen, la mutacin se llama silenciosa. Las mutaciones por insercin y por supresin son muc'o m&s numerosas y letales. ,n el punto en que se produce la ganancia o la prdida de una base tendr& lugar un despla.amiento de la pauta de lectura de !", en consecuencia, el producto

44 polipeptdico tendr& la secuencia amino&cida correcta 'asta llegar al lugar de la mutacin, pero a partir de este punto, poseer& una secuencia amino&cida falseada. ,ste fenmeno se conoce como corrimiento de arma.n. -;% G7",0I0 -utagnesis y carcinognesis 5 ,l c&ncer consiste en una alteracin del ciclo vital de las clulas, que pasan a dividirse de forma incontrolada y adquieren ciertas transformaciones que pueden conducir a poblaciones celulares que invaden y alteran regiones y rganos del cuerpo. ,l c&ncer se produce como consecuencia de una perturbacin en el funcionamiento de ciertos genes. La destruccin de genes reguladores del crecimiento celular es una de las causas del c&ncer6 otra es la intrusin del genoma o de parte del genoma de ciertos virus llamados oncognicos en el genoma 'umano. La e#posicin continua de los seres 'umanos a ciertos agentes qumicos, en especial en el lugar de trabajo, da lugar a un aumento de la incidencia de determinados tipos de c&ncer. 0e est& dedicando actualmente un gran esfuer.o a la evaluacin de la posible implicacin en la gnesis del c&ncer de gran cantidad de sustancias( productos qumicos industriales, aditivos de alimentos, cosmticos, colorantes, gases liberados por los tubos de escape, etc. -;%LG,"= 5 -ut&genos qumicos 5 Pueden actuar de varias maneras, por ejemplo reaccionando y alterando las bases del !" )&cido nitroso, 'idro#ilamina, gas mosta.a, ep#idos, dietilsulfonato+, sustituyendo las bases durante la replicacin )@5bromouracilo y I5aminopurina+ o distorsionando las molculas de !" por introducirse en ellas, causando prdida o adicin de bases )acridina+. -;% "%, 5 !cese del individuo que presenta en su genotipo caracteres producidos por medio de una mutacin y que, por consiguiente, se diferencia genticamente de sus progenitores. !cese del nuevo gen, cromosoma o genoma que 'a surgido por mutacin de otro pree#istente.

45 ";8L,I8= 5 0e dice de los &cidos fosforados, que son uno de los constituyentes fundamentales del n$cleo de la clula. ,#isten dos tipos de &cidos nucleicos( el &cido deso#irribonucleico ) .!.".+ y el &cido ribonucleico ) ./.".+. ,l primero, vector de la 'erencia, y, como tal, presente en los cromosomas, est& formado por una doble 'lice de a.$cares y grupos fosforados, a la cual est&n fijados pares de bases, una p$rica y otra pirimdica, unidas entre s por un puente de 'idrgeno. La secuencia de estas bases )en n$mero de cuatro+ constituye la informacin gentica propiamente dic'a. ,l ./.". es an&logo al .!."., pero consta de una sola 'lice y en l el a.$car y las bases son distintos. <ay tres variedades de ./."(

,l ./." m )mensajero+, que transmite la informacin gentica al citoplasma. ,l ./." r )ribosmico+ que descifra el cdigo gentico del ./.". mensajero y ayuda a la construccin y mantenimiento del ribosoma . ,l ./." t de )transferencia+ que transfiere los amino&cidos del medio celular 'asta la cadena de montaje de las protenas.

=btencin de 1 !" complementario1 ) !"c+ a partir del /"m del Gen travs de la en.ima transcripta.a inversa5 !e aislamiento de genes y preparacin de !" complementario( se asla de las clulas el /"m que codifica para la protena que nos interesa, buscando las clulas que puedan contener mayor cantidad de /"m del que necesitamos. Por ejemplo, los /"m que codifican para las cadenas de la 'emoglobina pueden aislarse de reticulocitos y eritrocitos en gran cantidad. Los /"m que codifican para la proinsulina se aslan de clulas pancre&ticas 'umanas. ,l /"m as obtenido se utili.a a'ora como patrn para la sntesis de un !"c, utili.ando la transcriptasa

46 inversa. 0in embargo, es necesario construir primero el !" cebador sin el cual la transcriptasa inversa no puede actuar. %odos )nucletidos /"m se le timina+, que /"m. los /"m contienen una cola de poli de adenina+ en el e#tremo terminal 34. l a2ade una molcula de poli % )nucletidos de aparea sus bases con la cola de poli del

,l peque2o tro.o de !" as obtenido act$a como cebador de la transcriptasa inversa y as se puede transcribir el /"m en una cadena complementaria de !". Para que el proceso se pueda dar, 'ay que proporcionar al sistema los nucletidos correspondientes( d %P, d%%P, !G%P y d8%P. continuacin se elimina del 'brido el /"m, y el !"c mono'ebra se replica por accin de la !" polimerasa l dando lugar a un !"c doble, especfico par la protena que queremos obtener. ,ste !" as obtenido no contiene intrones ni se2ales de iniciacin y terminacin. =btencin de 1 !" recombinante 5 )molcula de &cido deso#iribonucleco, generalmente de origen bacteriano , al que se le 'a insertado un gen procedente de otra especie+. 8omprende las siguientes etapas( obtencin del inserto de !" que interese, mediante la utili.acin de las en.imas de restriccin6 unin de ste a un !" vector6 y la transformacin en una clula procaritica o eucaritica. =btencin de plantas transgnicas 5 0e utili.an principalmente dos procedimientos para obtenerlas( la tcnica mediada por la bacteria grobacterium y el mtodo del ca2n. grobacterium posee un pl&smido inductor de tumores, en el cual se inserta el !" portador del caracter deseado. 8uando la bacteria infecta a las clulas de la planta transfiere el !". ,n el mtodo del ca2n se disparan partculas met&licas ba2adas en !" sobre las clulas vegetales. ,n ambos casos, las clulas incorporan el !" en sus cromosomas y regeneran una planta completa. ;no de los aspectos m&s interesantes de la tranferencia

47 gentica se refiere a la resistencia a enfermedades y, en este sentido, se investiga en la lnea de conseguir plantas resistentes a virus, ya que actualmente no 'ay manera de tratar directamente los cultivos infectados con virus. %ambin e#isten importantes limitaciones en el campo de la ingeniera gentica, ya que los ingenieros genticos no consiguen modificar caractersticas e#presadas por m&s de tres a cinco genes, por lo que la dificultad para aislar genes deseados es muy elevada en algunos casos, y adem&s, algunos cultivos no responden a los mtodos actuales de transferencia de genes. "o obstante, las investigaciones siguen progresando y cada ve. se consiguen mejores resultados.

Por otra parte, la biotecnologa puede ser una solucin de futuro para el problema de la alimentacin 'umana, puesto que la produccin anual de alimentos deber& aumentar considerablemente para satisfacer las necesidades de una poblacin que va en aumento, se necesitar&n productos alimenticios econmicos y de gran calidad. ="8=G7" 5 canceroso. Gen celular desencadenante del tumor

=P,/H" 5 8onjunto de genes vecinos de un cromosoma, que concurren en el cumplimiento de una misma funcin celular en el momento en que sta es $til. PLL0-I!= 5 c$mulo de .!.". que se replica en el citoplasma bacteriano independiente de la replicacin del cromosoma e interfiriendo en el cdigo gentico de ste. 0on peque2os !"s de cadena doble y circular, que se encuentran en el citoplasma de la mayora de las bacterias. 8ada pl&smido contiene entre I.AAA y 9AA.AAA pares de bases. ,n una sola bacteria puede 'aber IA o m&s copias de pl&smidos peque2os y uno o dos pl&smidos grandes. 8ada pl&smido contiene varios genes que se replican, transcriben y traducen independientemente de los genes del cromforo bacteriano, pero simult&neamente en el

48 tiempo. Los pl&smidos pasan de una clula a otra, y tambin de una especie bacteriana a otra. Por ejemplo, las resistencias de las bacterias a determinados antibiticos se adquieren gracias a ciertos genes que muc'as veces se transfieren de unas a otras bacterias incluidas en pl&smidos. 0e pueden unir genes e#tra2os a los pl&smidos con muc'a facilidad, y despus ser transportados como pasajeros al interior de las clulas de ,. coli. /,0;-," ,s posible e#traer genes especficos de los cromosomas de su portador natural e insertarlos en los cromosomas de otras especies que duplicar&n el gen a medida que se reprodu.can, dando lugar a cantidades enormes del producto gentico que entonces puede ser cosec'ado. 8uando el !" original, que contiene un gen de inters , se inserta en un !" anfitrin, el producto es una recombinacin del !". P 0=0 ," L /,8=-*I" 8IH"(

9. Eragmentar los cromosomas que contienen el gen de inters I. ;na en.ima de restriccin corta el !" en lugares especficos, llamadas e#tremidades llamadas pegajosas ) porque sus bases no apareadas tienden a unirse con otros fragmentos que tienen una secuencia complementaria de nucletidos + 3. 8ada peda.o de cromosoma se inserta en un cromosoma anfitrin de una clula diferente. La clula que fabrica el producto gentico, contiene un fragmento de !" con el gen de inters. ?. Los fragmentos se transfieren a clulas bacterianas en donde se pueden 'acer muc'as copias e#actas con la clonacin ) un clon es un grupo de organismos idnticos con un ancestro com$n +.

49 @. La transferencia requiere un vector que es un organismo utili.ado para transferir el !" original al !" anfitrin. F. ,l m&s com$n utili.ado es la bacteria ec'ericia coli. La cual contiene un cromosoma circular y un peque2o circulo de !" llamado plasmido. G. Los plasmidos, se empalman con los fragmentos de !" y mediante una en.ima de restriccin transportan este !" insertado a nuevas clulas bacterianas anfitrionas para su clonacin. Puesto que los plasmidos contienen genes de resistencia a los antibiticos, se seleccionan las clulas que contienen pl&smidos mediante su e#posicin a antibiticos ) cultivo y antibiograma + Las clulas que contienen el gen de inters, se identifican mediante la seleccin del producto gentico o gracias con su correspondencia en la secuencia b&sica en el !" . ,sta tcnica de Ingeniera Gentica se 'a utili.ado para obtener grandes cantidades de proteinas $tiles, tales como la Insulina, la creacin de plantas resistentes a la plaga, ganados con aumento en la cantidad de lec'e. %erapia de reposicin Gentica ,n la terapia de reposicin gentica se reempla.an los genes defectuosos por genes normales. [til en ciertos transtornos metablicos, transtornos con manifestacin relegada o tarda como la enfermedad de l.'eimer corea de <untington y otra enfermedades de origen gentico que sean susceptibles de reali.arse la %/G. P=LI-,/J 5 Eorma particular de 'erencia en que diversos genes alelos pueden sumar sus efectos para dar una gama de variantes en el grado de intensidad de un car&cter 'ereditario determinado. P=LIPL=I!, 5 !cese del n$cleo de una clula que posee un n$mero de cromosomas que es m$ltiplo de la dotacin cromosmica normal.

50 / !I 8IH" 5 /adiacin ioni.ante 5 0e destaca las radiaciones csmicas, las de istopos radiactivos y los rayos >. Pueden inducir cambios en la complementacin de las bases y roturas en las molculas y en los cromosomas. La frecuencia de mutaciones provocadas es proporcional a la dosis de radiacin recibida por el organismo y e#isten diferencias de sensibilidad entre unos y otros tejidos.

/adiacin ultravioleta 5 ,l efecto de la lu. ultravioleta )longitud de onda entre IAA y ?AA+, que constituye una parte importante del espectro solar, es de los m&s conocidos y consiste en una e#citacin de los electrones en las bases del !" que puede dar lugar a dos tipos de consecuencias( 9. 8ambio de una base por su forma tautomrica. I. Eormacin de dmeros de timina, por reaccin de dos timinas adyacentes. ,ste 'ec'o distorsiona la doble 'lice del !", pudiendo producir roturas en la cadena complementaria. Puede causar mutaciones groseras y afectar, no a peque2as .onas de unos pocos pares de bases, sino a regiones m&s largas de !" e incluso llegar a producir cambios estructurales cormosmicos. /,8,0IB= 5 0e dice del gen o car&cter 'ereditario que no se manifiesta en el fenotipo del individuo que lo posee, pero que puede aparecer en la descendencia de ste. /,8=-*I" 8IH" G7"I8 5 Proceso por el que se produce una nueva asociacin de caracteres en un individuo descendiente de padres que los portaban por separado. /,!;88IH" 8/=-L%I8 o cromosmica 5 !isminucin de la mitad del n$mero de cromosomas de una clula que tiene lugar durante una de las divisiones previas a la formacin de las clulas reproductoras. /,=/!," 8IH" 8/=-=0H-I8 5 8ambio de estructura de uno o m&s cromosomas, que lleva aparejado la adquisicin, la prdida o el despla.amiento de segmentos cromosmicos.

51 0,8;,"8I 5 0ecuencia de !" 5 orden de encadenamiento de las bases nitrogenadas de los nucletidos que constituyen el !" y que cifra toda la informacin gentica. 8uando es codificante )e#n+, define el orden de los amino&cidos que forman la protena correspondiente. 0I-P=/% !=/ 5 0importador o protena simportadora. quella protena transportadora que lleva a cabo el transporte de dos sustancias a la ve. o secuencialmente en la misma direccin. 0I-P=/%,. %ipo de transporte a travs de membrana en el que se transportan dos solutos a la ve. o secuencialmente y en la misma direccin. la protena que lleva a cabo este tipo de transporte se le conoce como simportadora. 0I0%,5 0istema inmune 5 8onjunto de defensas que funcionan para repeler los grmenes patgenos y destruir los agresores que 'ayan conseguido entrar en el organismo. 0=- 8IH" 5 Bariacin que afecta slo al soma de un organismo, por consiguiente, no transmisible por 'erencia. %,/ PI 5 %erapia som&tica celular ) %.0.8 + ;no o m&s tejidos son sometidos a la adicin de uno o m&s genes teraputicos, mediante tratamiento directo o previa e#tirpacin del tejido. ,sta tcnica se 'a utili.ado para el tratamiento de c&nceres o enfermedades sanguneas, 'ep&ticas o pulmonares. %,%/ PL=I!, 5 !cese de los individuos mutantes cuya dotacin cromosmica es doble de la de sus progenitores. %I-I" 5 ;na de las cuatro bases nitrogenadas contenidas en los &cidos nucleicos y que intervienen en el cdigo gentico.

52 %/ "0!;88IH" 5 %ipo particular de intercambio gentico, que se reali.a por mediacin de un bacterifago. %/ "0L=8 8IH" 5 berracin cromosmica por la cual un segmento de cromosoma se separa y se fija sobre un cromosoma no 'omlogo. 0on transposiciones de un segmento cromosmico que se coloca en otra posicin dentro del mismo cromosoma. 0e necesita un mnimo de tres roturas. La translocacin puede producirse tambin entre dos cromosomas distintos. ,ste es el caso de la mutacin que da lugar a la leucemia nucleoide crnica, en la que se 'a producido una translocacin del bra.o largo de los cromosomas C y II. Las translocaciones, en el caso de que no sean letales, se 'eredan de forma mendeliana. %/IPL=I!, 5 !cese del organismo cuyas clulas poseen tres dotaciones cromosmicas en lugar de dos. %/I0=-J 5 nomala caracteri.ada por la aparicin de un cromosoma superfluo en un par. ),l mongolismo se debe a una trisoma.+ > 5 8romosoma se#ual )gonosoma+, que se presenta en n$mero de un ejemplar en el 'ombre y en n$mero de dos en la mujer. N 5 8romosoma se#ual )gonosoma+ presente $nicamente en el 'ombre, que posee un par celular. ) 'aploide +