CENTRO FEDERAL DE EDUCAO TECNOLGICA DE MINAS GERAIS DEPARTAMENTO DE QUMICA COORDENAO DE ENSINO TCNICO DISCIPLINA Qumica Orgnica Aplicada

da - Turma: QUI 3A T2 Prof. Thiago Freitas Borgati Alunos: Joo Pedro Peixoto Rios Marco Thlio Pimentel Alexandrino Julia Tiemi Data das prticas: 15, 22 e 29/05/2013

Cromatografia em Papel

Belo Horizonte 1 Semestre de 2013

Introduo Terica

A cromatografia faz parte de um importante grupo de mtodos de separao, anlise e purificao de sistemas, permitindo-nos separar, identificar e quantificar substncias, mesmo em misturas muito complexas. 1 A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao dos componentes de uma mistura, realizada atravs da distribuio destes componentes entre duas fases, que ento em contato ntimo. Uma das fases permanece estacionria, enquanto a outra se move atravs desta. Durante a passagem da fase mvel pela fase estacionria, os componentes da mistura so distribudos entre outras duas fases, de tal forma que cada um dos componentes seletivamente retido pela estacionria de acordo com a fora de sua interao com esta, resultando em migraes diferentes destes componentes. O mtodo de cromatografia em papel consiste em gotejar a soluo contendo a mistura a ser analisada prxima extremidade de uma folha de papel (fase estacionria) e esta colocada em contato com o solvente = eluente (fase mvel) que se encontra em um recipiente fechado (cuba ou cmara cromatogrfica) de maneira a facilitar a ascenso do solvente por capilaridade. O eluente passa sobre a mancha arrastando os componentes com velocidades diferentes. O sistema um complexo envolvendo o eluente e a mistura de compostos, o papel e a gua que normalmente est no papel. A separao ou distribuio dos componentes de uma mistura, na cromatografia em papel, relaciona-se com as diferentes solubilidades relativas destes componentes na fase mvel e na fase estacionria. Os componentes que menos interagem com a fase estacionria tm uma movimentao mais rpida ao longo do papel, enquanto que os que mais interagem com a fase estacionria sero seletivamente retidos, tendo uma movimentao mais lenta. Estes mecanismos de separao podem ser explicados da seguinte maneira: a celulose constituda por 2000 ou mais unidades de glicose anidra ligada por tomos de oxignio; um lquido polar como a gua tem grande afinidade pelas hidroxilas de cada glicose, formando pontes de hidrognio, ficando retida e funcionando como fase estacionria, e os lquidos menos polares (solventes orgnicos) so repelidos por esta estrutura e funcionam como fase mvel. Tiveram-se como objetivos: 1) Definir qual o melhor eluente para a amostra de corante e estudar e observar os erros clssicos na aplicao da tcnica de CP; 2) Estudar a separao dos pigmentos que constituem as tintas das canetas hidrocor para identificar a mistura de componentes semelhantes em cores diferentes (CP); 3) Estudar a eluio de extratos de diferentes espcies vegetais em diversos solventes e propor uma mistura eluente apropriada. 1.1 Materiais e Reagentes: Prtica I: Tubos de ensaio; Grade de tubo de ensaio; Tesoura; Papel de filtro qualitativo; Tubos capilares; Rgua; Lpis; Corante Amarelo Crepsculo;

Hexano; Clorofrmio; gua destilada; Etanol. Prtica II: Cuba; Papel de filtro qualitativo; Rgua; Lpis; Canetas hidrocor de diferentes cores; gua; Etanol. Prtica III: Extrato de manjerico; Extrato de hortel; Acetona; Tubos de ensaio; Lpis; Grade para tubos de ensaio; Tubos capilares; Rgua.

1.2 EPIS Guarda-p; Luvas; Capela de exausto. 1.3 Parte Experimental Prtica I:

Na primeira parte da prtica, procurou-se definir o melhor eluente para a amostra apresentada (corante Amarelo Crepsculo): Utilizaram-se tubos de ensaio numerados de 1 a 4 como cubas e neles foram introduzidos os seguintes eluentes: hexano, clorofrmio, etanol, e uma mistura de etanol e gua na proporo de 1:1. Aps recortar uma tira de papel para cada tubo (quatro no total), foram feitos dois traos, utilizando lpis, prximos s extremidades superior e inferior de cada uma. No risco que foi definido como inferior, aplicou-se o corante Amarelo Crepsculo por meio de um tubo capilar em forma de micropipeta. Colocou-se cerca de 3mL do respectivo eluente em cada tubo, em seguida, inseriu-se tambm as tiras com a amostra. Na segunda parte, realizou-se um estudo dos erros clssicos, aplicando 4 erros e analisando suas consequncias sobre o resultado final do processo: Foram colocados nos tubos, aproximadamente, 3 mL da mistura escolhida como melhor eluente anteriormente (mistura de etanol e gua 1:1). No tubo 5, colocou-se um excesso de amostra; no tubo 6, realizou-se um corte transversal na parte inferior do papel; no

tubo 7, a parte que continha a amostra foi imersa no eluente e, por fim, no tubo 8 a amostra foi aplicada em mais de um ponto. Prtica II:

Foi utilizado um recipiente de vidro (cuba) e recortou-se uma tira de papel de filtro de largura inferior ao dimetro e o comprimento da altura da cuba. Marcou-se com um lpis uma linha referencial a 2,0 cm da parte inferior da tira e aproximadamente 1,0 cm da superior. Em cima da linha inferior foram demarcados pontos equidistantes entre si para a aplicao das amostras. Em cada demarcao foi aplicado, com a prpria caneta, uma pequena poro da tinta, tomando o devido cuidado para no adicionar uma grande quantidade e provocar um erro no processo. Adicionou-se 25 mL de etanol e gua na proporo 3:1 na cuba, a tira foi inserida e o recipiente fechado. Prtica III:

Previamente foi realizada uma extrao dos componentes das espcies manjerico e hortel em solventes orgnicos. Em tubos numerados de 1 a 4, foram adicionados os solventes orgnicos e o extrato de manjerico foi submetido ao processo cromatogrfico em papel. Ento, analisaram-se os cromatogramas a fim de identificar qual eluente provocou a melhor eluio da amostra. Em seguida, props-se uma mistura dos melhores eluentes para obtermos um cromatograma mais prximo da perfeio. 2 Resultados e Discusses Prtica I:

Na primeira parte, constatou-se que o melhor eluente foi a mistura 1:1 de etanol e gua. O hexano e o clorofrmio no foram capazes de eluir a amostra. Isso se deve ao fato de que a fase estacionria apresentava uma polaridade maior do que ambos os reagentes. O corante um composto inico, logo, sua interao maior com substncias polares como a gua. Utilizando o etanol, verificou-se uma eluio parcial, porm, a mistura deste com gua mostrou-se mais eficaz por ser mais polar. O rastro da mistura foi mais longo, pois ela compete com a fase estacionria de uma forma mais eficaz.

Figura 1: Estrutura do corante Amarelo Crepsculo

Figura 2: Eluies em suas respectivas cubas

Na segunda parte, utilizamos o melhor eluente para verificar alguns erros clssicos na preparao da fase estacionria. No primeiro tubo, onde havia excesso de corante, a mancha se espalhou e formou um rastro confuso e largo. No segundo, o corte transversal na fase estacionria fez com que o rastro desviasse lateralmente. No terceiro, o corte na parte de baixo da fase estacionria fez com que o corante ficasse em contato com o eluente, que o solubilizou. No quarto, os diversos pontos aplicados eluiram de forma descoordenada e se fundiram, formando uma grande mancha. Nenhuma dessas eluies possui algum significado qumico.

Figura 3: Imagem ilustrativa dos resultados dos estudos de erro

Prtica II:

A distncia percorrida por cada composto em uma fase estacionria, dividido pela distncia percorrida pelo solvente conhecida como o Rf (fator de reteno). Para o clculo de valor de Rf mede-se a distncia que a substncia deslocou a partir do ponto de aplicao (ds), considerando-se para efeito de medida o centro de gravidade da mancha, e divide-se pela distncia percorrida pela frente do solvente a partir do ponto original da amostra (dm). Distncia percorrida pela mancha desde a origem (ds) ----------------------------------------------------------------------------- = Rf Distncia percorrida pelo solvente desde a origem (dm) Tendo isso como referncia, infere-se que a medida varia sempre de 0 a 1, que quanto mais prximo de 1 o valor resultar, mais afinidade ele tem pelo eluente e quanto mais prximo de 0 ele estiver, mais afinidade ele ter pela gua do papel. Os valores de Rf obtidos pelos compostos das canetas hidrocor foram: Caneta Cores dos compostos Preto Laranja Amarelo Lils Azul Azul Rosa Amarelo Rosa Amarelo Azul Rosa Lils Amarelo Rosa Laranja Distncia do composto (cm) 1,8 2,4 4,0 4,5 5,1 8,0 1,8 3,6 5,1 3,1 4,5 4,0 0,7 3,3 7,0 5,4 Distncia do solvente (cm) 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 Fator de Reteno 0,22 0,29 0,50 0,57 0,63 1,0 0,22 0,45 0,63 0,39 0,57 0,50 0,09 0,41 0,87 067

Verde Escuro

Azul Vermelho Verde Claro Rosa Marrom

Laranja

A partir deste experimento possvel perceber que a grande maioria das cores do espectro visvel so formadas pelas combinaes de outras cores, sendo que duas cores diferentes podem ser originadas da combinao das mesmas cores, porm em propores diferentes. As cores base mais comuns apresentaram-se como azul, amarelo e rosa. As cores que apresentam corantes semelhantes apresentaram Rfs prximos, o que indica que tais cores possuem o mesmo composto em comum, por exemplo: em 4 das 7 cores houve presena do amarelo, o qual possui Rfs girando em torno de 3 a 4, indicando que o mesmo composto que d origem cor amarela em todas as cromatogramas est presente nestas canetas.

Prtica III:

Foram testados diversos compostos para a eluio da clorofila e dos carotenoides do manjerico, foram eles: ter etlico: A amostra eluiu completamente, deixando um rastro amarronzado que impossibilita a leitura. Acetato de etila: A amostra eluiu irregularmente, de forma que houve separao da clorofila (verde) e dos carotenoides (amarelo), porm houve extrapolao. Cloreto de metileno: A clorofila eluiu demasiadamente. Hexano: Houve eluio bastante satisfatria, observando-se separao clara da clorofila e carotenoides, porm ocorreu de forma lenta. Observando tais resultados, optou-se pela mistura de hexano (90%) e acetado de etila (10%) para uma eluio mais prxima da perfeio, que separasse a clorofila dos carotenoides e de forma rpida, porm sem irregularidades. Assim como previsto, os carotenoides foram arrastados majoritariamente pelos solventes orgnicos devido grande presena de hidrocarbonetos em suas estruturas, sendo assim, pouco polares, interagindo pouco com as diversas estruturas polares da celulose (papel). Diferentemente da clorofila, que se apresenta mais polar que os carotenoides, o que aumenta sua afinidade pela celulose, sendo arrastado de maneira minoritria.

Composto

Distncia do composto (cm)

Distncia do solvente (cm) 9,0 9,0

Fator de Reteno

Clorofila Carotenoides

6,1 7,3

0,68 0,8

Concluso Prtica I:

Nos testes realizados com o corante Amarelo Crepsculo, pde-se observar de maneira simples e prtica que o melhor eluente foi a mistura etanol e gua 1:1. Foi possvel tambm adquirir conhecimento sobre os possveis erros que podem ocorrer seguindo o mtodo de cromatografia em papel para que estes no ocorram futuramente. Prtica II:

A partir dos testes realizados com as canetas hidrocor de diversas cores foi possvel observar que as tintas destas so, na verdade, misturas de corantes de cores primrias que, em determinadas propores, do origem s cores das canetas em si. Tal fato pde ser evidenciado pela forma como os compostos se separaram e eluram de forma diferente na fase estacionria, indicando ainda que as mesmas cores so originadas pelas mesmas substncias. Prtica III:

As cromatografias realizadas possibilitaram estudar e confirmar as diferentes substncias presentes em extratos vegetais, alm das diferentes formas que estes eluem na presena de determinados solventes e suas respectivas interaes com a celulose. Deste modo foi proposta

com sucesso uma mistura que elusse de forma mais prxima da perfeio a clorofila e os carotenoides do extrato. Assim como previsto, os carotenoides foram arrastados majoritariamente pelos solventes orgnicos devido grande presena de hidrocarbonetos em suas estruturas, sendo assim, pouco polares.

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Referncias Bibliogrficas

MACHADO, A.M.R. e STASSUN, M.S. Qumica Orgnica Aplicada I. Belo Horizonte: Grfica do CEFET-MG,2007.