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Diversidade microbiana utilizada na biorremediao de solos contaminados por petrleo e derivados


Oliveira, Rosiane Martins*, Alves, Fabiana**1 Trabalho apresentado ao Centro Universitrio Metodista Izabela Hendrix, como requisito para obteno de Ttulo de Licenciatura em Cincias Biolgicas.

RESUMO: A Biorremediao uma tecnologia segura e eficiente quando comparada aos processos fsicos e qumicos convencionais utilizados no tratamento de locais contaminados. O petrleo e seus derivados, quando no ambiente, ocasionam grande impacto ecolgico, alm de infringirem a legislao ambiental. No entanto, o petrleo uma fonte com alto teor de carbono e, por isso, seus hidrocarbonetos so atacados por micro-organismos quando entra em contato com o ar e umidade. O objetivo do presente estudo foi inventariar os produtos orgnicos de origem petrolfera e os principais micro-organismos utilizados na biorremediao de solos contaminados por petrleo e derivados. Foi realizada uma reviso bibliogrfica em trabalhos publicados entre os anos de 1998 e 2013. Em seguida, os dados foram tabulados e foram construdos quadros correlacionando o produto de origem petrolfera e os respectivos micro-organismos biorremediadores. Dentre os trabalhos analisados foi possvel constatar que os principais gneros de fungos e bactrias citados com capacidade de degradao dos derivados de petrleo foram: Aspergillus, Penicillium, Fusarium, e Pseudomonas, Sphingomonas, Mycobacterium, Microbacterium, Gordonia, respectivamente. De acordo com os dados obtidos foi possvel verificar que a biodegradao do petrleo em ambientes naturais ou em laboratrio, no pode ser realizada por uma nica espcie microbiana, uma vez que os poluentes so constitudos por vrios tipos de hidrocarbonetos e nenhum micro-organismo capaz de degradar sozinho todos os componentes presentes no ambiente contaminado. O conhecimento da biodiversidade e da pesquisa de novos microrganismos tornam-se um dos focos principais da era biotecnolgica e vem auxiliando positivamente nos programas relacionados gesto de reas contaminadas. Palavras chave: Hidrocarbonetos. Biodegradao. Contaminao ambiental. Qualidade dos solos. Micro-organismos.

* Graduanda em Cincias Biolgicas pelo Centro Universitrio Metodista Izabela Hendrix Belo Horizonte/MG. E-mail: rose.moliveira@hotmail.com ** Professora do Centro Universitrio Metodista Izabela Hendrix. Doutoranda em Fisiologia pelo Departamento de Fisiologia e Farmacologia da Universidade Federal de Minas Gerais UFMG. Mestre em Cincia Animal, UFMG.

Microbial diversity used in the bioremediation of soils contaminated by petroleum and oil products
ABSTRACT: The Bioremediation is a safe and efficient technology when compared to conventional physical and chemical processes used in the treatment of contaminated sites. Oil and its derivatives, when in the environment, cause great ecological impact, addition to violating environmental laws. However, oil is a source with a high carbon content and therefore its hydrocarbons are attacked by micro-organisms when it comes into contact with air and moisture.The main objective of this study was to inventory the organic products of petroleum origin and the main micro-organisms used in bioremediation of soils contaminated by oil and oil products.Was performed a literature review published between the years 1998 and 2013. Then the data were tabulated and tables were constructed correlating the product of petroleum and its micro-organisms bioremediators. Among the works analyzed it was established that the main kind of fungi and bacteria cited capacity degradation of petroleum were: Aspergillus, Penicillium, Fusarium, and Pseudomonas, Sphingomonas, Mycobacterium, Microbacterium, Gordonia, respectively. According to the data obtained it was possible to verify that the biodegradation of oil in natural environments or in the laboratory cant be performed by a single microbial species, since the pollutants are composed of various types of hydrocarbons and no micro-organism is capable degrade by yourself all components present in the contaminated environment. The biodiversity knowledge and research of new microorganisms becomes a major focus of biotechnological era and has helped in the programs positively related to the management of contaminated places. Keywords: Hydrocarbons. Biodegradation. Environmental contamination. Soil quality. Micro-organisms.

INTRODUO

A poluio tornou-se uma preocupao global devido contaminao do ambiente com compostos indesejveis e ao efeito negativo que esses poluentes causam no somente no ambiente, mas tambm na sade humana (MARTINS & AZEVEDO, 2012). Atualmente, inmeras pesquisas relacionadas remediao de reas atingidas por acidentes envolvendo produtos petroqumicos so realizadas com a finalidade de restaurar a qualidade dos solos (COSTA, 2011). O petrleo um composto orgnico, formado por processos biogeoqumicos, constitudo em sua maior parte por uma mistura complexa de hidrocarbonetos (USBERCO & SALVADOR, 2002). Melo et al. (2008) definiram que o petrleo constitudo por centenas de compostos orgnicos que podem ser divididos em hidrocarbonetos alifticos (alcanos, alcenos e cclicos), hidrocarbonetos aromticos (mono e poli aromticos), asfaltenos (fenis, cidos graxos, cetanos e esteres) e compostos polares que incluem as resinas (piridina, quinolinas, carbazleo, amidas, tiofeno, entre outros). Usberco & Salvador (2002) acrescentaram que o petrleo (bruto ou derivado) tambm pode conter quantidades pequenas de nitrognio, oxignio, compostos de enxofre e ons metlicos, principalmente nquel e vandio. A indstria de petrleo, em suas diversas atividades produo, refino, transporte e comercializao, apresenta risco ambiental inerente que precisa ser constantemente gerenciado. Os vazamentos acidentais de petrleo e derivados em dutos, embarcaes e unidades industriais, so exemplos desses impactos ao ambiente (COSTA, 2011). Diante desse cenrio, a contaminao do solo e gua por hidrocarbonetos derivados de petrleo, mesmo em pequenas concentraes podem constituir um grande perigo sade humana e ao meio ambiente (COSTA, 2011). A legislao brasileira exige que reas contaminadas devam ser remediadas, para minimizar a interferncia ambiental e restaurar os ecossistemas. Para isto, so necessrios o diagnstico, a anlise e o monitoramento do impacto e medidas remediadoras (CETESB, 2010). A Resoluo do CONAMA 273/2000, define que toda instalao e sistemas de armazenamento de derivados de petrleo configuramse como empreendimentos potencialmente ou parcialmente poluidores e geradores de acidentes ambientais, considerando que os vazamentos de derivados de petrleo e outros combustveis podem causar contaminao de corpos dgua subterrneos e superficiais, do solo e do ar. Diversas tcnicas que envolvem mtodos fsicos e qumicos podem ser empregadas para remover os contaminantes do solo ou reduzir a concentrao destes poluentes como:

diluio, disperso, soro, bombeamento, incinerao e biorremediao (COSTA, 2011). Porm, as tcnicas relacionadas biorremediao so consideradas de baixo custo em comparao com o de processos convencionais. As tcnicas de biorremediao utilizam micro-organismos vivos, apresentam baixo consumo de energia e causam poucas mudanas nas caractersticas fsicas, qumicas e biolgicas do ambiente (TONINI et al., 2010). A biorremediao uma opo que oferece a possibilidade de eliminar ou transformar diversos contaminantes em compostos menos prejudiciais usando a atividade biolgica dos micro-organismos que possuem capacidade de decompor poluentes, como os hidrocarbonetos aromticos policclicos do petrleo, conhecidos como HAPs (VIDALLI, 2002; MARIANO, 2007). Conforme Desai & Desai (1993), bactrias e fungos so agentes transformadores eficazes, visto sua habilidade em degradar uma ampla diversidade de substncias orgnicas. Mariano (2007) ressaltou que a estrutura qumica dos poluentes orgnicos tem uma profunda influncia na habilidade dos micro-organismos metabolizarem estas molculas, especialmente com respeito s taxas e extenso da biodegradao, sendo que alguns compostos orgnicos so rapidamente biodegradados enquanto outros so recalcitrantes. Vrias vias metablicas de degradao dos HAPs j foram identificadas em diferentes microrganismos, porm as mais estudadas so do metabolismo aerbico realizado pelas bactrias, pelos fungos lignolticos e pelos fungos no-lignilticos (JACQUES, 2007). A possibilidade de utilizao integral das vias bioqumicas permite a algumas bactrias crescerem utilizando os HAPs como nica fonte de carbono e energia para o seu crescimento, resultando na degradao destes compostos e na sua eliminao do ambiente. O mesmo autor afirmou que foram isoladas bactrias do gnero Pseudomonas que degradaram em mdia 51% do antraceno presente no meio de cultura mineral. Para o caso dos fungos lignolticos, estes oxidam a lignina extracelularmente pela ao de lignina peroxidases, peroxidases dependentes de mangans e lacases. Estas so enzimas no especficas que podem oxidar HAPs As estratgias de biorremediao incluem: a utilizao de microrganismos autctones, ou seja, do prprio local, sem qualquer interferncia de tecnologias ativas de remediao (biorremediao intrnseca ou natural); a adio de agentes estimulantes (bioestimulao) como: oxignio e biossurfactantes; e a inoculao de consrcios microbianos enriquecidos (bioaumento) (BENTO et al., 2003). Os produtos finais de uma biorremediao efetiva so nitratos, sulfatos, fosfatos, formas amoniacais, gua, gs carbnico e outros compostos inorgnicos resultantes do processo de mineralizao. Estes compostos no apresentam

toxicidade e podem ser incorporados ao ambiente sem prejuzo aos organismos vivos (MARIANO, 2006). Segundo Melo et al. (2008), a biorremediao um conjunto de processos de tratamento que utiliza organismos (bactrias, fungos, vegetais) para biodegradar, reduzir ou eliminar o risco de compostos orgnicos perigosos ao meio ambiente e sade humana. A capacidade dos micro-organismos em degradar petrleo e derivados, utilizando-os como fonte de carbono, esteve bem reportado na literatura pesquisada. Para ressaltar esta eficincia, uma dada populao microbiana necessita de condies ambientais especficas para realizar a biodegradao do contaminante, pois, caso contrrio, esta populao entrar em latncia at que as condies ideais sejam disponibilizadas. Biorremediao a acelerao do processo de biodegradao e por isso pode estar limitada disponibilidade de nutrientes, a umidade, a temperatura, ao pH, a concentrao de minerais, ao potencial redox, a natureza do contaminante e as caractersticas fsicas e qumicas dos ambientes contaminados (ROSA & TRIGUIS, 2005). A biorremediao baseada em trs princpios bsicos: a presena do microorganismo com capacidade metablica, a disponibilidade do contaminante e as condies ambientais adequadas para o crescimento e atividade microbiana (MENEGHETTI, 2007). O sucesso desta tcnica est relacionado diretamente a uma ampla compreenso das condies fsicas, qumicas, biolgicas e de uma minuciosa avaliao da aplicabilidade das tcnicas in situ e ex situ (SANTOS, et al., 2007). As tcnicas de remediao in situ so aquelas em que no h necessidade de remoo do material, sendo a biorremediao realizada no prprio local contaminado. Isso evita custos e distrbios ambientais associados ao movimento do material contaminado para o local de tratamento (JACQUES et al., 2005; MARIANO, 2006). Na tecnologia ex situ o material contaminado retirado do local de origem e encaminhado para outro adequado, esta tcnica necessria para evitar o alastramento do contaminante e muito utilizada em contaminaes de cursos de gua e lenis freticos (SANTOS et al., 2007). Esta tcnica produz um resultado mais rpido, pois so mais fceis de serem controladas e apresenta uma maior versatilidade para o tratamento de vrios tipos de contaminantes (ABBAS, 2003). Entre as tcnicas mais utilizadas nos processos ex situ encontram-se o Landfarming, a compostagem e os biorreatores. No momento em que um contaminante ou poluente atinge a superfcie do solo, vrios mecanismos esto envolvidos, dentre eles a adsoro, a fixao qumica, a precipitao, a oxidao, a troca inica, a neutralizao, ou o poluente pode ser arrastado pelas guas atravs

do escoamento superficial, ou lixiviado pelas guas de infiltrao, passando para as camadas inferiores e atingindo as guas subterrneas. Uma vez atingindo as guas subterrneas, esse poluente ser ento carreado para outras regies, atravs do fluxo dessas guas (CETESB, 2009). A persistncia de um contaminante no solo depende de suas propriedades fsicoqumicas, das propriedades do solo, da interao com o solo e mudanas estruturais as quais determinam sua degradao (LAVORENTI, 1996). Sabat et al. (2004) observaram que os solos possuem diferenas nas atividades metablicas dos microrganismos naturais, afetadas pela sua estrutura, composio e caractersticas. Dessa forma, inmeras pesquisas relacionadas remediao biolgica de reas atingidas por derivados de petrleo so realizadas com a finalidade de restaurar a qualidade dos solos (LOVLEY, 2003). Percebe-se que a tcnica de biorremediao revela-se como uma tcnica eficiente, promissora e interessante devido, principalmente, aos baixos custos e por ser uma tcnica com mnima interveno, na maioria das vezes, na recuperao dos ambientes contaminados. Assim, o objetivo do presente estudo foi inventariar os produtos orgnicos de origem petrolfera e os principais micro-organismos utilizados na biorremediao de solos contaminados por petrleo e derivados. METODOLOGIA Para inventariar os produtos orgnicos de origem petrolfera e os principais microorganismos foram utilizados 45 trabalhos, publicados em revistas brasileiras e estrangeiras no perodo entre os anos de 1998 e 2013. Esses trabalhos foram selecionados por meio de buscas nos bancos de dados Pubic Medline (PUBMED), Scientific Eletronic Library On Line (SCIELO), Google acadmico, utilizando os seguintes descritores: descontaminao, petrleo, qualidade dos solos, micro-organismos. Em seguida, os dados foram tabulados em planilhas do programa Excel e foram construdos quadros correlacionando os respectivos microorganismos biorremediadores com suas capacidades de degradar os produtos de origem petrolfera.

RESULTADOS

A partir da anlise dos trabalhos pesquisados foi possvel inventariar alguns produtos orgnicos de origem petrolfera e relacionar os gneros de micro-organismos com a capacidade de degradar compostos orgnicos poluentes derivados do petrleo (Quadro 1). Os trabalhos analisados indicam que os principais gneros de fungos e bactrias que apresentam capacidade de degradao dos produtos orgnicos de origem petrolfera so: Aspergillus, Penicillium, Fusarium, e Pseudomonas, Sphingomonas, Mycobacterium, Microbacterium, Gordonia, respectivamente.
Quadro 1: Relao dos produtos de origem petrolfera e respectivos micro-organismos biorremediadores em trabalhos publicados no perodo de 1998 a 2013. Produto Micro-organismo - Gnero Alvo de degradao Autores Mucor, Gliocadium, Penicillium, Phialophora, Ravelet et al. Trichoderma, Scopulariopsis e Degradao do pireno (2000) Coniothyrium Hidrocarbonetos Aromticos Cladosporium, Fusarium, Mollea et al. (2005) Policclicos Penicillium, Aspergillus e (HAPs) Pleorotus Biodegradao de HAPs Mollea et al. (2005) Phanerochaete Aspergillus, Penicillium, Arajo et al (2002) Paecilomyces e Fusarium Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Amorphoteca, Neosartorya, Paecilomyces Hidrocarbonetos Talaromyces e Graphium Paecilomyces Aspergillus, Cladosporium., Penicilium sp. e Phoma sp. Aspergillus sp. LEBM2 Microbacterium. e Rhodococcus Cladophialophora e Ccladosporium Pseudomonas, Rhodococcus Capazes de catabolizar benzeno, tolueno, etilbezeno xilenos (BTEX). Passos et al. (2009) Kang et al. (2005); Nikolova e Nenov (2005) Nagarajan e Loh (2009) Teixeira e Bento (2007) Degradao de tolueno e xileno Biodegradao de hidrocarbonetos de cadeias longas Otenio et al. (2005) Chaillan e et al. (2004)

Metabolizar hidrocarbonetos aromticos Capazes de degradar compostos fenlicos

Conceio et al. (2005)

Silvia et al. (2007)

Hidrocarbonetos aromticos BTEX (benzeno, tolueno, etilbezeno e xileno)

Tolueno e Xileno

Pseudomonas

n- hexadecano

Bacillus e Ochrobactrum

Costa (2006)

Atrazine + simazine

Aspergillus, Penicillium e Trichoderma

Alcanos

Rhodococcus

Apresentam maior velocidade de crescimento radial a partir de solo contaminado com Atrazine + simazine Capazes de degradar alcanos normais (C10-36 alcanos) e alcanos ramificados (pristano, fitano)

Colla et al. (2008)

Makiko et al. (2010)

De acordo com os dados obtidos foi possvel verificar que a biodegradao do petrleo em ambientes naturais ou em laboratrio, no pode ser realizada por uma nica espcie microbiana, uma vez que os poluentes so constitudos por vrios tipos de hidrocarbonetos e nenhum micro-organismo capaz de degradar sozinho todos os componentes presentes no ambiente contaminado. Algumas generalizaes podem ser feitas quanto susceptibilidade dos

hidrocarbonetos de petrleo ao ataque microbiano, quando analisado a composio do hidrocarboneto, derivado encontrado e biodegradabilidade (Quadro 2).
Quadro 2: Estrutura qumica e biodegradabilidade. Biodegradabilidade Mais degradvel Exemplo de constituintes Derivados nos quais os constituintes so usualmente encontrados Gasolina leo diesel Gasolina Gasolina leo diesel, querosene leo diesel Querosene leos combustveis para aquecimento leos lubrificantes leo diesel Querosene leos combustveis para aquecimento leos lubrificantes

n-butano, n-pentano, n-octano Nonano Metilbutano, dimetilpentenos, metiloctanos Benzeno, tolueno, etilbenzeno, xilenos Propilbenzenos Decanos Dodecanos Tridecanos Tetradecanos Naftalenos Fluorantenos Pirenos Acenaftenos Menos degradvel Fonte: U.S. Environmental Protection Agency (1995).

DISCUSSO Os resultados obtidos neste estudo corroboram com os dados encontrados por Jacques et al. (2007) e Alexander (1999) que descrevem que a complexidade dos processos metablicos leva necessidade de consrcios microbianos de diferentes gneros e espcies, cada um especializado em degradar uma ou vrias fraes do composto. A degradao de substncias xenobiticas por micro-organismos presentes no solo depende da presena de vrias enzimas que realizam metabolismo para seu crescimento, e dessa forma conseguem remediar os compostos qumicos, reduzir as concentraes presentes no ambiente ou torn-los menos txicos.

Micro-organismos com habilidade de biodegradar hidrocarbonetos de petrleo podem ser encontrados em reas poludas ou at mesmo em reas que no tiveram contato prvio com hidrocarbonetos. No entanto, mais fcil encontr-los em ambientes j impactados, pois os poluentes conferem auxilio na seleo de linhagens com habilidade em degradar esses compostos (MORAIS, 2005). A partir desta reviso, constatou-se que ambos, bactrias e fungos, so amplamente utilizados para a remediao de derivados de petrleo (Quadro 1), sendo difcil inferir e generalizar qual mais utilizado. Segundo Silva et al. (2008), a maior parte do conhecimento sobre rotas metablicas de degradao desses compostos encontra-se fundamentada em bactrias. No entanto, estudos tm mostrado que fungos atuam como decompositores de compostos aromticos, assim como de compostos fenlicos (SILVA, 2008). Segundo Balba et al. (1998), as bactrias e leveduras apresentam-se como os principais responsveis pela degradao dos hidrocarbonetos em ambientes aquticos, enquanto que fungos e bactrias so dominantes no solo. Os principais gneros de fungos citados pelos autores analisados neste estudo foram (Quadro 1): Cunnighamella, Phanerochaete, Fusarium, Candida, Penicillium, Pleorotus, Trametes, Aspergillus, Bjerkandera e Chrysosporium. Contudo, Jacques et al. (2007); Mutnuri et al. (2005) e Cerniglia (1997) relatam que as bactrias degradadoras de

hidrocarbonetos so pertencentes, principalmente, aos gneros (Quadro 1): Pseudomonas, Beijerinckia, Flavobacterium, Nocardia, Corynebacterium, Sphingomonas, Mycobacterium, Stenotrophomonas, Paracoccus, Burkholderia, Microbacterium, Gordonia, entre outros. Chaillan et al. (2004) isolaram 61 linhagens, sendo 31 bactrias, 26 fungos filamentosos e quatro leveduras de solos poludos por petrleo na Indonsia. Foram identificadas cepas bacterianas pertencentes aos gneros Gordonia, Brevibacterium, Aeromicrobium, Dietzia, Burkholderia e Mycobacterium, alm de quatro espcies novas e ainda no descritas. J os fungos foram identificados os gneros Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Amorphoteca, Neosartorya, Paecilomyces, Talaromyces e Graphium. As leveduras foram Candida sp, Pichia sp e Yarrowia sp. Todas as cepas foram cultivadas em uma soluo, onde o petrleo era a nica fonte de carbono e energia. As cepas foram avaliadas com relao ao potencial de biodegradao. Foi observada uma degradao mxima por Rhodococcus nos hidrocarbonetos saturados, sendo que o mesmo resultado foi citado por Makiko et al. (2006) (Quadro 1). No entanto, para o caso dos hidrocarbonetos aromticos o mesmo autor apresentado uma menor degradao desses micro-organismos, ao contrrio do encontrado neste estudo.

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Silva et al. (2007), demonstraram que: Aspergillus flavus, Cladosporium sp., Penicilium sp. e Phoma sp. so resistentes s condies adversas e capazes de degradar compostos fenlicos a partir de guas residurias de postos de gasolina. O gnero Paecilomyces j foi descrito associado a processos de biorremediao com sucesso na degradao de vrios compostos txicos, em especial as espcies Paecilomyces variotti e Paecilomyces niveus. Passos et al. (2009) isolaram de um solo, contaminado por hidrocarbonetos derivados de petrleo, na regio da Cidade do Rio Grande, RS, Brasil, uma linhagem de Aspergillus sp. LEBM2 e avaliaram a taxa de biodegradao de fenol em concentraes crescentes. Com os resultados, puderam concluir que Aspergillus sp. LEBM2 tem alta tolerncia ao fenol, podendo degrad-lo efetivamente at uma concentrao de 989 15 mg L-1, podendo ser empregado em processos de bioaumentao. Atagana et al. (2006) ao avaliaram a capacidade dos gneros Cladosporium, Fusarium, Penicillium, Aspergillus e Pleorotus isolados de solos contaminados com creosoto na degradao de HPAs, constatou que os fungos constituem um grupo de micro-organismos atrativo e promissor para a investigao como agentes degradadores, uma vez que avaliaes de fungos em escala de laboratrio apresentam um potencial adequado para degradar HPAs de alto peso molecular e outros compostos orgnicos recalcitrantes por meio de sistemas enzimticos extracelulares. Colla et al. (2008), realizaram o isolamento de quinze fungos de solo contaminado com atrazina + simazina. Destes, foram identificados os seguintes gneros: Aspergillus, Penicillium e Trichoderma, constatando que os dois primeiros gneros apresentaram maior velocidade de crescimento radial a partir de solo contaminado com atrazine + simazine, o que indica que estes microrganismos apresentam potencial para serem utilizados em processos de biorremediao. J Otenio et al. (2005), estudaram a atividade degradativa da espcie

Pseudomonas putida CCMI 852, de componentes presentes na gasolina, o benzeno, tolueno e xileno (BTX) e se mostrou eficiente na degradao de tolueno e xileno exceto do benzeno. Esses resultados devem-se adaptabilidade do gnero Pseudomonas a diversos substratos (OTENIO et al., 2005; SILVA et al., 2007; SINHA e MUKHERJEE, 2009 ). Os autores Arajo et al. (2002), realizaram o isolamento e identificao de fungos filamentosos com capacidade de degradao do petrleo. A partir de um solo contaminado com petrleo foram obtidas 80 linhagens, das quais 60 apresentaram capacidade para degradar hidrocarbonetos de petrleo. Dentre estas, foram identificados quatro gneros fngicos: Aspergillus, Penicillium, Paecilomyces e Fusarium. Mollea et al. (2005), utilizaram linhagens fngicas puras na otimizao da biodegradao de HPAs. Os resultados mostraram que Phanerochaete chrysosporium

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biodegradou os HPAs at aproximadamente 600 mg/kg de solo. Entretanto Ravelete et al. (2000) identificaram vrias espcies de fungos com capacidade para degradar pireno. Os isolados pertenciam aos gneros Mucor, Gliocadium, Penicillium, Phialophora, Trichoderma, Scopulariopsis e Coniothyrium. Nikolova e Nenov (2005) estudaram o potencial de degradao de BTEX por fungos. Os fungos foram isolados de locais contaminados com gasolina e foram identificados como pertencentes aos gneros Cladophialophora e Cladosporium. Na tentativa de inventar uma cultura mista de um consrcio estvel, Cao et al. (2010) testaram o potencial de biodegradao de trs culturas puras (Pseudomonas putida, Rhodococcus zopfii e Pseudomonas stutzeri) e tambm, combinadas. O objetivo foi verificar se as trs espcies combinadas em uma cultura mista poderiam biodegradar mais eficazmente o BTEX. Estes pesquisadores detectaram no sistema de substrato misto uma hierarquia de biodegradao, sendo o tolueno o composto mais facilmente degradado, seguido pelo benzeno, etilbenzeno e o-xileno. Estudos realizados por Teixeira e Bento (2007) isolaram e caracterizaram 37 bactrias de solos contaminados com gasolina. Foi determinada a degradao do etanol e do BTEX na gasolina comercial, por meio de cromatografia gasosa, bem como a produo de surfactantes para cinco destes isolados. Estes foram identificados como Pseudomonas putida e Pseudomonas aeruginosa. Costa (2006), selecionou duas linhagens com maior potencial para degradar nhexadecano, as quais foram identificadas como Bacillus pumilus e Ochrobactrum anthropi. O n-hexadecano um dos principais compostos do leo diesel e considerado um composto modelo para a biodegradao de hidrocarbonetos de cadeia longa. Kang et al., (2005), isolaram bactrias capazes de degradar hidrocarbonetos aromticos do solo rizosfrico de cana na Baa de Sunchon pela cultura de enriquecimento usando o benzeno, tolueno, etilbenzeno e xileno (BTEX) como nica fonte de carbono. A identificao dos isolados com base no sequenciamento do gene 16S rRNA, que uma subunidade ribossomal revelou duas linhagens capazes de catabolizar o BTEX, Microbacterium sp. e Rhodococcus sp. Entretanto, Makiko et al., (2006) isolaram bactrias degradadoras de alcanos, a partir de amostras de solo contaminado com petrleo. As bactrias do gnero Rhodococcus se mostraram capazes de degradar alcanos normais (C10-C36 alcanos) e alcanos ramificados (pristano, fitano).

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CONSIDERAES FINAIS

A pesquisa e o uso de micro-organismos selecionados naturalmente em reas contaminadas por hidrocarbonetos representam uma estratgia importante, a fim de obter agentes para a biorremediao destas reas. A remediao de reas contaminadas importante porque, alm do efeito visual e protetor, geralmente, uma exigncia legal e um compromisso social que precisam ser executados. Conforme os resultados apresentados e discutidos neste artigo foi possvel verificar que h uma grande diversidade de micro-organismos, contudo existe ainda poucos descritos na literatura com potencial de uso in situ para a soluo ou atenuao dos problemas de contaminao de ambientes contaminados com petrleo e seus derivados. Para que a biorremediao traga resultados satisfatrios, de fundamental importncia o conhecimento dos princpios e das tcnicas. Isso possibilita uma utilizao e seleo correta do micro-organismo de acordo com as condies especficas de cada local e de cada contaminante presente. Finalmente, o conhecimento da biodiversidade e da pesquisa de novos microrganismos tornam-se um dos focos principais da era biotecnolgica e vem auxiliando positivamente nos programas relacionados gesto de reas contaminadas. As pesquisas nacionais e internacionais j possibilitaram o isolamento e a identificao destes micro-organismos, assim como o conhecimento das vias bioqumicas, que confirmam a capacidade de metabolizao destes compostos.

AGRADECIMENTOS

A professora D.Sc. Flvia C. de Paula e Silva pela orientao e pelos ensinamentos e a professora M.Sc. Fabiana Alves pela prontido em aceitar meu convite para ser minha orientadora e conselhos para redao deste trabalho.

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