Determinao de Ca, K, Mg, Na, sulfato, fosfato, formato, acetato, propionato, e glicerol em biodiesel por eletroforese capilar com

deteco de condutividade de contacto acoplado capacitivamente

Neste trabalho, um novo mtodo que utiliza a eletroforese capilar (CE), para a determinao de vrias espcies em biodiesel introduzido. As concentraes de espcies inorgnicas (Na +, K +, Ca2 +, Mg2 +, SO42-, PO43-e) e de glicerol so de interesse para as autoridades reguladoras, devido sua capacidade para formar compostos indesejveis nos motores. Alm disso, outras espcies de baixo peso molecular (por exemplo, acetato, formato, propionato) so de interesse uma vez que contribuem para o aumento da acidez. Estas espcies so formadas pela degradao (rN0.99), os valores de CV para a rea e o tempo de migrao foram b3.4% e 0,9%, respectivamente, e a recuperao foi no intervalo de 89-107%. 1 INTRODUAO O campo de pesquisa de combustveis alternativos desenvolvido a fim de reduzir a dependncia dos derivados de petrleo e para melhorar a qualidade do ar. O biodiesel tem demonstrado potencial para reduzir o problema de monxido de carbono (CO), dixido de carbono (CO2) e de dixido de enxofre (SO2). Alm disso, o uso de biodiesel elimina a fumaa escura e reduz suas partculas. O termo biodiesel geralmente usado para definir uma mistura de steres de alquilo simples de cidos gordos de cadeia longa, derivados de leo vegetal ou gordura animal para utilizao em compresso de motores de ignio. tipicamente produzido por transesterificao de triglicerdeos em leos vegetais com um lcool na presena de um catalisador, geralmente alcalino. Este processo tem sido largamente usado para reduzir a viscosidade elevada de triglicerdeos. A determinao de Na e K em amostras de biodiesel importante uma vez que os hidrxidos alcalinos so usados como catalisadores na fase de transesterificao e podem formar compostos indesejveis nos motores. A presena de Ca e Mg na biodiesel devido utilizao de gua dura durante a etapa de purificao. Outras espcies, tais como compostos de enxofre e de fsforo esto presentes em formas orgnicas e inorgnicas. A principal fonte antrpica desta espcie inorgnicos vem das etapas de neutralizao e dessecao. Alm disso, a determinao de glicerol relevante porque altas concentraes desta espcie foram uma das principais causas no passado do entupimento de filtros e falhas gerais em motores a diesel . A concentrao de metais no biodiesel geralmente baixa e requer a utilizao de tcnicas analticas altamente sensveis para a deteco. O desenvolvimento de estratgias para a determinao de metais tem vrios problemas devido elevada complexidade e natureza orgnica da matriz de metal . Hoje em dia, essas determinaes so realizadas principalmente por absoro atmica ( AAS ) e espectrometria de emisso (AES) , e vrias estratgias de prtratamento empregam anlise direta , diluio com solventes orgnicos, emulso , extrao e digesto completa .

Alm disso, com plasma indutivamente acoplado a espectrometria de emisso ptica (ICPOES) demonstrou o potencial para determinar fsforo total em biodiesel. A determinao total de enxofre feita por espectroscopia de UV - fluorescncia . A norma brasileira ( RANP 07/08 ) , bem como outros mtodos convencionais ( EN 14214, ASTM D 6751 ) , estabeleceu as concentraes de Na mais K como sendo inferior a 5 mg kg - 1 e , mais de Mg como Ca sendo de 5 mg kg - 1 . Estes mtodos recomendam o uso de AAS para a determinao de Na e K e / ou ICP - OES de Ca, Mg , Na, K e P. O ICP - OES mtodo tem a vantagem de ser de multi elementos (poder ser usados para vrios elementos). Edlund et ai . descreveram a aplicao de ICP - OES para a determinao simultnea de K , Na, Ca , Mg , Cl e P em biodiesel por dissoluo de amostras e padres organometlicos em querosene . No entanto, este mtodo mostrou algumas desvantagens , tais como a baixa estabilidade do analito nas solues-padro orgnicas diluidas , a necessidade de padres organometlicos para a calibrao e o uso de solventes orgnicos perigosos que exigem condies especiais para o seu manuseamento . A fim de evitar a necessidade de usar solventes orgnicos perigosos , Santos et al . utilizou o etanol como o solvente para diluir o biodiesel e as solues padro . Para compensar as interferncias de transporte , trio foi usado como o padro interno ( IS ) . Outros mtodos baseados em microemulses de gua em - leo como a preparao da amostra so relatados na literatura, estes mtodos so realizados por platina e paldio e ICP - OES . Por outro lado , mtodos eletroqumicos tm sido propostos como uma alternativa . Castilho e Stradiotto descreveram um mtodo potenciomtrico alternativo. Neste trabalho, um eletrodo modificado com hexacianoferrato de nquel foi desenvolvido para determinar a concentrao de ons de potssio em biodiesel. Determinao de cobre com pr - tratamento mnimo foi relatado por empregando a extrao cronopotenciometria usando um elctrodo de trabalho de ouro . Outras tcnicas utilizadas para a determinao da qualidade do biodiesel foram revisadas por Monteiro et al. . A determinao de glicerol em biodiesel realizado por meio de tcnicas de separao , tais como a cromatografia em fase gasosa ( GC ) e cromatografia lquida de alta eficincia ( HPLC ) . Cromatografia em fase gasosa tem a vantagem da separao simultnea de glicerol e di-e tri-glicerdeos mono . Recentemente, um mtodo utilizando eletroforese capilar (CE ), a tcnica foi descrito para determinao de espcies catinicas no biodiesel , o qual utilizado de deteco indireta UV ( 214 nm ) , porque esta espcie no mostra boa absoro . Uma outra aplicao desta tcnica a determinao de glicerol em biodiesel . A reaco com periodato foi empregue para a determinao indirecta , porque o glicerol uma espcie neutra . Uma vez que esta reao especfica para polilcool , para evitar as interferncias de outros compostos que tm grupos hidroxilo vicinais (por exemplo , mono-e di -glicridos ) a extrao de glicerol a fase aquosa foi realizada antes da reaco de oxidao . Capacitivamente acoplado a deteco de condutividade contacto ( C4D ) pode ser considerado como uma tcnica de deteco universal de CE que revela uma boa sensibilidade de todas as espcies inicas . O princpio bsico de deteco de condutividade - a medida de uma diferena na condutividade entre as zonas de migrao do analito e o eletrlito de fundo ( BGE ) - favoreceu a aplicao de C4D para a determinao de espcies no - absorventes . Vrios mtodos que empregam CE - C4D podem ser encontrados na literatura , e mostram a sua aplicao em diversas amostras. O presente trabalho mostra um mtodo alternativo para a anlise de amostras de biodiesel , empregando CE - C4D para atingir os limites de deteco

estabelecidos pelas autoridades reguladoras . Alm disso , outras espcies que contribuem para a acidez do biodiesel - formato, acetato , propionato e - tambm so detectados por um dos mtodos desenvolvidos . O trabalho tambm teve como objetivo demonstrar a versatilidade da CE- C4D , aplicaes so ilustradas para diferentes classes de compostos usando uma nica tcnica , onde, em alguns casos, foram necessrias pequenas alteraes nas condies de separao . 2 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 2.1. Reagentes Todos os reagentes e solventes eram de grau analtico. Brometo de cetiltrimetilamnio (CTAB), L-histidina (His), 2 - (N-morfolino) etanossulfnico (MES), KCl, NaCl, CaCl2, MgCl2, e LiCl foram adquiridos a partir de Sigma (St. Louis, MO). cido actico, cido cloroactico, cido frmico, cido propinico, glicerol, cido peridico, iodato de sdio, e thyocianate de sdio foram adquiridos a Merck (Darmstadt, Alemanha). Toda a BGE e solues-padro foram preparadas por dissoluo dos reagentes ou diluir as solues estoque em gua desionizada (Barnstead, Dubuque, IA, EUA). 2.2. Equipamentos Todas as anlises foram realizadas utilizando CE-C4D equipamento feito em casa . O detector foi operado a 600 kHz e 2 Vpp. Um d.i. 75 mcrons 375 mcrons de dimetro exterior capilar de slica fundida (J & W Scientific, Folsom, CA, EUA) com 50 cm de comprimento foi utilizado. O comprimento efectivo foi de 40 cm para todos os experimentos, mas que uma para determinao de glicerol, que foram realizados com 10 cm. As amostras foram introduzidas hidrodinamicamente, elevando o reservatrio andico a 10 cm, durante 30 s. Uma voltagem constante de 25 kV foi usada para todos os experimentos. 2.3. Amostras As amostras de biodiesel foram adquiridas diretamente de fabricantes diferentes. A extraco da espcie polar foi realizada por pesagem 10-880 mg de uma amostra num frasco (2 mL) e adio de 200 - 1000 mg de gua deionizada ou BGE diludo dez vezes. A extraco foi realizada agitando o frasco dentro de um misturador de vrtice (Q220, Quimis, Diadema, Brasil), e depois centrifugando-o (7 Fora de microcentrfuga, Denver Instrument, Arvada, EUA) a 10.000 rpm, durante 8 min. Aps centrifugao, a fase aquosa foi removida e foi mantido durante a anlise. 3.1 . Otimizao das condies de separao 3.1.1 . Separao de K + , Na + , Ca 2 + e Mg 2 + A BGE empregando MES / His tem normalmente sido usado como um tampo de corrida para a separao de pequenos ons na CE- C4D , devido sua baixa capacidade de condutividade e de tamponamento. Uma vez que a injeo de amostras no tratadas diretamente para o capilar no possvel devido caracterstica hidrfoba do biodiesel , a extrao da fase aquosa foi estudada para esta amostra . A extrao foi realizada utilizando duas solues diferentes : gua deionizada e BGE diludo dez vezes. Em ambos os casos , 200 mmol L - 1 de LiCl foi adicionado como uma IS O processo de extrao foi feito com 880 mg da amostra de biodiesel e de 200 mg de soluo de extrao , o que proporcionou um fator de melhoria de 4,4 vezes . Fig . 1 apresenta a rea relativa de

cations inorgnicos, utilizando estes dois procedimentos. A extrao foi realizada em duplicata e analisadas em triplicata injees. Os resultados mostram que o tempo de extrao no tm uma influncia significativa sobre a extrao . Por outro lado, as diferenas na composio das solues de extrao causou diferenas nos resultados de extrao : a soluo diluda contendo BGE mostrou melhor eficcia de extrao . Este foi possivelmente devido a troca inica entre os ctions do eletrlito ( histidina ) e os ctions inorgnicos da amostra. Assim, a condio de extrao empregue foi diluindo BGE e 30 segundos de tempo de extrao . Fig . 2 mostra os eletroferogramas de uma soluo padro de K + , Na + , Ca 2 + e Mg 2 + , extrator de branco e amostras de biodiesel aps extrao . A separao de espcies aninicas feita empregando BGE composto de 30 mmol L - 1 MES/13 mmol L - 1 Seu pH 5,7 . A escolha deste valor de pH baseada em valores mobilidades simulados , que mostraram a melhor previso da separao. A mobilidade inica e dados do pKa dos cidos de interesse foram obtidos a partir da literatura e utilizada para calcular mobilidades eficazes . Alm disso , um tampo MES / Histidina a este pH d estvel e de linha de base de baixo rudo . Brometo de cetiltrimetilamnio (CTAB ) foi escolhida para o fluxo eletro osmtico (EOF) reverso neste trabalho. Foi utilizado o mesmo teste para a melhor soluo de extrao mostrado na seo anterior, mas com 200 mmol L-1 cloroacetato de sdio como IS Fig . 3 apresenta a rea relativa de espcies aninicas aps extrao em momentos diferentes . Ao contrrio do que aconteceu para os cations , a composio da fase de extrao ou do tempo de extrao no influenciar a eficincia de extrao para os analitos aninicos . Fig . 4 mostra os eletroferogramas de a separao de anions. digno de nota o eletrodisperso evidenciado pela forma dos picos , o que principalmente devido combinao da elevada concentrao relativa dos analitos e diferena de mobilidades dos analitos e co - ion . No entanto , a sensibilidade em C4D depende desta diferena . Assim , como uma regra geral , existe um compromisso entre a sensibilidade e largura de pico : quanto maior a sensibilidade , mais elevada a eletrodisperso , e , assim , a largura do pico . Felizmente, no caso presente, o eletro disperso no prejudica a separao da linha de base e a quantificao dos analitos. 3.1.3 . Determinao de glicerol Uma vez que o glicerol uma espcie neutra numa larga extensao de pH , a clivagem oxidativa de glicerol com periodato para formar espcies aninicas foi empregue . Este procedimento foi descrito por Goncalves e Micke , no entanto , a composio de BGE foi alterado para ser mais adequado para C4D . Esta proposta baseada na formao de espcies inicas, tal como abaixo : C3H8O3 2HIO4 2CH2O HCOOH H2O 2HIO3 Com base nesta reao , pode-se determinar indiretamente o glicerol pela formao das espcies : formaldedo , cido frmico , ou cido idico . Embora um mtodo para formiato foi introduzido na seco 3.1.2 , ele no apropriado para o presente processo , porque a histidina e o brometo de ( usado na composio BGE ) reagem com periodato de [ 19,26 ] . Assim , um novo BGE foi optimizado para conseguir a separao e a quantificao dos produtos da reao de oxidao entre o glicerol e periodato . A fim de fornecer um sistema qumico simplificado, a BGE contendo 30 mmol/ L-1 foi escolhida de cido actico para atingir um pH de 3,0. A escolha deste BGE tem a vantagem de

proporcionar uma limpeza on-line, desde que a maioria dos cidos orgnicos esto na forma protonada neste valor de pH. Alm disso, a mobilidade eficaz de EOF to baixa, que a separao pode ser feita no EOF contador, que dispensa o uso de CTAB e, assim, o brometo. Fig. 5 mostra a formao e o consumo de iodato e periodato, respectivamente, quando o glicerol foi adicionado. Em todos os experimentos, o equilbrio foi alcanado antes de 5 min. Fig. 6 mostra os eletroferogramas da separao de periodato e iodato produzido pela oxidao do glicerol em uma soluo-padro de glicerol (100 mmol L-1) e uma amostra de biodiesel, aps extrao com uma soluo aquosa contendo 100 mmol L-1 tiocianato de sdio (IS ). Antes da adio de soluo de periodato, apenas o IS pico foi observado, o que demonstra a seletividade do mtodo. 3.2. Validao do mtodo Os mtodos desenvolvidos foram validados em termos de linearidade, limites de deteco (LOD) e de quantificao (LOQ), preciso e exatido. 3.2.1 . Linearidade , LODs e LOQs Injees em triplicata de seis solues de cada espcie em concentraes crescentes foram realizados para a calibrao. A equao de calibrao foi construda, correlacionando a rea relativa de cada espcie (rea do pico da rea do analito / pico da IS ) vs concentrao por mnimos quadrados de regresso linear. Os coeficientes de regresso linear foram sempre superiores a 0,9990 . Os limites de determinao e LOQs foram calculados considerando a relao (SNR) de 3,3 e 10, respectivamente sinal- rudo. Os resultados so apresentados na Tabela 1. Todos os valores do LOQ encontrados foram o suficiente para atender a legislao, que estabelece os limites : 5 mg kg -1 de Na + plus K + , 5 mg kg- 1 para o Ca2 + plus Mg2 + , 10 mg kg -1 para fsforo total, 50 mg kg - 1 para o enxofre total e 200 mg kg - 1 de glicerol . 3.2.2 . Preciso A preciso foi avaliada por cinco medidas, tomadas no mesmo dia , das solues-padro de todas as espcies de interesse e a amostra de biodiesel. Repetitividade da rea relativa e do tempo de migrao , expressos como desvios-padro relativo (RSD) , foi melhor do que 3,4 % e 0,9 % , respectivamente . A diferena de preciso entre os dados dos padres e das amostras foi avaliada atravs do teste de F. Os valores de Fcalculated no apresentaram diferenas significativas entre repetitividade da rea relativa e tempo de migrao dos picos dos analitos . Os resultados so apresentados na Tabela 2 . 3.2.3 . Exatidao A validade foi calculada como a percentagem de recuperao de uma quantidade conhecida de analito adicionado amostra de biodiesel . As recuperaes variaram 89-107 % para a concentrao . Estes resultados indicam uma boa exatidao de acordo com o protocolo de validao AOAC , a qual estabelece a recuperao mdia variando de 80 a 110% . Os resultados so mostrados na Tabela 3 . 3.3 . Anlise das amostras Os valores da concentrao de todas as espcies em quatro amostras de biodiesel diferentes so apresentados na Tabela 3 . Para todas as amostras , as concentraes de K +, Na + , Ca2 + , Mg2 + , e glicerol foram inferiores aos estabelecidos pela RANP 07/08 , ASTM D 6751 e EN 14214 . Alm disso, sulfato e fosfato estavam de acordo com os valores estabelecidos pelas mesmas normas de enxofre total e fsforo.

Entre os cidos orgnicos, cido frmico foi a espcie predominante . Embora a concentrao de nions orgnicos no estabelecida pelas autoridades reguladoras, esta classe de compostos podem fornecer informaes teis sobre o grau de oxidao do biodiesel , uma vez que estas espcies so formadas durante a auto-oxidao de compostos graxos . 4. Concluses Um mtodo simples e verstil, e de baixo custo de EC foi optimizado para determinar a espcie de interesse no biodiesel. O pr-tratamento da amostra levou menos de 10 minutos e foi facilmente realizado em paralelo para vrias amostras. Alm disso, os valores de patamar determinado para o biodiesel eram pelo menos 10 vezes maior do que os limites de determinao dos mtodos. Os resultados obtidos demonstram a confiabilidade da CE para a sua aplicao pretendida.