II.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD Y BUENAS PRCTICAS DE LABORATORIO

A. BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
1. MANEJO SEGURO EN EL USO DE QUMICO Precauciones generales: 1. Conocer los peligros potenciales de los reactivos qumicos antes de iniciar una nueva operacin. Leer cuidadosamente los datos que estn escritos en las etiquetas del fabricante del producto o del frasco que contiene el reactivo. 2. Conocer la localizacin y el uso apropiado de los equipos de emergencia en el rea de trabajo, y cmo obtener la ayuda de emergencia. 3. Conocer el tipo de equipo de proteccin disponible y el uso adecuado en cada trabajo. 4. Estar alerta a condiciones y acciones no seguras, y llamar la atencin para indicar las acciones correctivas. 5. No colocar sustancias txicas en cuartos fros o calientes, deben de existir atmsferas recirculadas. Deben haber aparatos que puedan eliminar los agentes qumicos (EJ. Bombas de vaco, columnas de destilacin) de los lugares de trabajo. 6. No usar cristalera daada, pues es peligrosa y puede causar accidentes. 7. Obedecer los avisos que se instalan para su seguridad. 8. Los alimentos, goma de mascar y bebidas se mantendrn y consumirn fuera del laboratorio. 9. Es importante mantener la precaucin de no llevarse las manos a la boca, nariz, ojos, cara y pelo, evitando la autoinoculacin de aerosoles o reactivos. 10. Usar anteojos especiales o mascarillas para proteger los ojos y la cara, cuando sea conveniente. 11. Usar vestimenta apropiada, es decir bata de algodn larga.

12. El laboratorio debe mantenerse limpio y organizado, libre de materiales que no pertenecen a la prctica del mismo. 13. Todos los procedimientos y tcnicas deben ser ejecutadas con el mayor cuidado, para minimizar la produccin de aerosoles. 14. Las superficies de las mesas y gabinetes requieren ser descontaminadas, antes de cada jornada de trabajo y al final del da. 15. Los miembros del personal profesional o auxiliar deben lavarse las manos cuantas veces sea necesario, escrupulosamente con jabn o detergente adecuado, as como tambin al terminar las jornadas de trabajo. 16. El uso de batas es obligatorio y debe ser lavada en reas especficas a estos fines, nunca introducirlas en la rutina domstica. 17. En los casos necesarios, utilizar guantes, mascarillas, espejuelos u otros aditamentos de proteccin laboral. 18. Est estrictamente prohibido comer, beber, fumar, usar cosmticos, materiales de lectura u otros objetos ajenos al laboratorio. 19. Cualquier accidente que ocurra, an de mnima consideracin, debe ser informado al instructor o profesor del Laboratorio. 20. Antes de salir del laboratorio, al concluir la sesin de trabajo, es obligatorio revisar las llaves del agua, gas y equipos con conexiones elctricas as como recolectar los materiales que requieren refrigeracin y almacenamiento adecuado. 21. Es estrictamente prohibido introducir comida, bebidas y otros materiales ajenos al laboratorio en la refrigeradora. 22. Al guardar reactivos o soluciones en la refrigeradora, es estrictamente necesario rotular los recipientes que los contienen con el nombre del reactivo, concentracin, fecha y nombre de la persona que la prepar, as como los riesgos y cuidados especiales de su manejo. 23. Cuidar de secar las manos antes de manejar enchufes elctricos o los utensilios de cristal.

B. INSTRUCCIONES PARA EL MANEJO DE EQUIPO DE LABORATORIO 1. Material de vidrio para medir volmenes En las diversas especializaciones de la qumica, incluyendo la bioqumica, se emplea material y equipo de laboratorio con diversos fines. En esta parte se har hincapi nicamente en los diversos tipos de material de vidrio que se emplean para medir. ste puede estar calibrado para contener (TC del ingls To contain) o para vaciar (TD del ingls To deliver) determinados volmenes. La calibracin hecha por el fabricante del equipo volumtrico que se usar en este curso est dentro del error aceptable para nuestros fines. Por lo tanto no es necesario que el estudiante haga ninguna calibracin especial. Simplemente conviene llamar la atencin al hecho de que los aparatos y las soluciones usadas en volumetra deben emplearse a la temperatura ambiente cuando se haga la medida, puesto que la mayor parte de las soluciones acuosas aumentan 0.20 % en volumen por cada grado Celsius de elevacin de temperatura por encima de la ambiental. 2. Probetas Las probetas estn calibradas para contener (TC) volmenes variables indicados en su graduacin y son menos precisas que los materiales volumtricos o aforados, los cuales estn calibrados para contener un volumen determinado. En ambos casos, al emplearlos, el menisco del lquido con que se llenan debe quedar tangente a la graduacin de la probeta o al aforo grabado en el cuello del matraz volumtrico. 3. Balones aforados Estos balones estn calibrados para contener un volumen dado a la temperatura impresa en las paredes, cuando el borde inferior del menisco formado por el lquido coincide con el anillo del baln. Este tipo de baln NO PUEDE CALENTARSE porque se rompe. Si se desea aforar una solucin que est por arriba de la temperatura de calibrado del baln, deber esperarse a que se enfre y enseguida aforar. 4. Buretas Las buretas se emplean para medir volmenes variables. En las que tengan llaves esmeriladas, stas deben de estar ligeramente engrasadas. Una bureta de 50 ml, no debe vaciarse ms a prisa de 0.7 ml. por segundo, pues de otra manera se adhiere mucho lquido a las paredes y el volumen del lquido que baja es inferior al que marca el menisco. Las buretas deben limpiarse con mezcla crmica antes de ser

usadas. La llave debe engrasarse cuidadosamente y las lecturas deben hacerse evitando errores de paralaje. El engrase debe hacerse de tal manera que su manejo sea fcil y suave, sin permitir ningn escape de lquido. Debe tambin evitarse que el lubricante contamine la parte graduada de la bureta. El lquido sin usar no debe descartarse invirtiendo la bureta, sino a travs de la punta. Para facilitar la lectura de la bureta pntese con lpiz un rea negra en un trozo de papel y trcese la lectura manteniendo el borde del rea a nivel del menisco. 5. Pipetas calibradas al contenido (Marcadas T.C. "To contain") En la calibracin de estas pipetas el fabricante toma en cuenta el volumen de lquido que se queda en el interior de la pipeta al drenarla y, por lo tanto es necesario soplarlas al final. 6. Pipetas calibradas al vaciado (Marcadas T.D. "To deliver") Al calibrar estas pipetas nicamente se toma en cuenta el volumen del lquido que se obtiene al drenarlas y por consiguiente no se deben soplar. Cuando estas pipetas tienen uno o dos anillos esmerilados en el extremo superior, s se deben soplar. 7. Pipetas graduadas y pipetas volumtricas. Existen dos tipos generales de pipetas, las pipetas graduadas y las pipetas volumtricas. Las primeras estn calibradas para descargar un volumen determinado y por consiguiente con ellas no se puede medir volmenes intermedios. Por ejemplo, con una pipeta volumtrica de 5 mL slo se puede medir este volumen o un mltiplo de ste. Las pipetas graduadas, como su nombre lo indica, poseen una escala que permite descargar, adems del volumen total, diferentes volmenes intermedios. 8. Pipetas serolgicas y pipetas de Mohr Las pipetas graduadas pueden ser terminales (pipetas serolgicas) o no terminales (pipetas de Mohr). Es importante fijarse bien en el tipo de pipeta graduada que se est empleando, pues la confusin de una pipeta terminal con una no terminal introduce errores serios en el volumen de lquido servido por la pipeta. 9. Procedimiento para usar la pipeta y Tmese la pipeta por el tercio superior entre los dedos pulgar, ndice, medio anular. Introdzcase la punta en el lquido. Succinese con un

llenador/dispensador de pipetas1 por el extremo libre y viglese constantemente el menisco que asciende por el tallo para evitar que el lquido llegue a la parte inferior del llenador de pipetas. Cudese de mantener completamente sumergida la punta de la pipeta durante todo el perodo de succin; de otra manera, al succionar aire, una buena parte del lquido ir a parar al llenador o dispensador de pipetas inutilizando su uso. Cuando el menisco haya subido una pulgada arriba de la marca superior, rpidamente saque la pipeta del lquido y lentamente lleve el menisco hacia el nivel deseado. Para descargar la solucin en el recipiente deseado, apoye la punta de la pipeta contra la pared y con el llenador de pipetas drene el contenido hasta que alcance la marca deseada o la punta de la pipeta. Recurdese que las pipetas con una o dos bandas en la parte superior deben soplarse despus que el menisco alcanza la punta. Las pipetas graduadas terminales se usan de una manera similar a las volumtricas, solamente que el lquido puede hacerse ascender por succin hasta la graduacin final (cero) o hasta alguna de las graduaciones intermedias, y tambin al vaciarlas puede hacerse hasta el final o hasta alguna de las graduaciones terminales. NOTA Al leer las graduaciones de probetas, matraces volumtricos, pipetas o buretas, debe tomarse como referencia el nivel inferior del menisco del lquido, cuando se emplean lquidos transparentes, o el nivel superior cuando se utilizan lquidos opacos. Siempre debe tenerse mucho cuidado de que el ojo est al nivel del menisco, para evitar errores de paralaje.

El instrumento llenador/dispensador de pipetas puede ser: perillas, bulbos, artefactos cilndricos que permitan llenar/vaciar la pipeta por accin de vaco.

C. NORMAS GENERALES PARA UN BUEN TRABAJO EN EL LABORATORIO 1. Mantenga su mesa de trabajo limpia y ordenada. No ponga sobre ella libros o aparatos que no est usando. 2. Vista bata de laboratorio. 3. Deposite toda la basura, materiales slidos, papeles, fsforos, etc. en el canasto de basura. Descarte los lquidos en el lavadero y luego drnelos con suficiente agua de llave. No descarte en el lavadero solventes, ni cidos o bases fuertes. 4. Evite los juegos y actitudes violentas en beneficio de su seguridad personal y la de sus compaeros de trabajo. 5. Sea corts, y amable con sus compaeros. Las buenas relaciones interpersonales son muy importantes para su trabajo. 6. No debe fumar ni consumir alimentos en el laboratorio. 7. Adquiera el hbito de trabajar de pie sin inclinarse demasiado sobre los tubos o aparatos. Cuidado con los bancos. 8. Maneje con precaucin y cuidado los aparatos calientes y las sustancias corrosivas como cidos y bases fuertes. 9. Notifique inmediatamente al instructor cualquier lesin o accidente, por leve que sea. l sabr que hacer y cmo ayudarlo. 10. Cuando trabaje con sustancias corrosivas y solventes, asegrese de que no haya llamas en su proximidad. 11. Trabaje con calma y sin precipitacin. Acte con cautela cuando necesite detectar propiedades organolpticas de las sustancias. 12. Saque de las botellas de reactivos nicamente la cantidad que va a necesitar. Si la botella tiene tapn plano puede poner ste sobre la mesa reposando sobre el tope, si el tapn no es plano, qutelo de la botella colocndolo entre los dedos anular y medio de la mano derecha y la cara dorsal hacia abajo. Una vez destapada la botella, tmela con la mano derecha conservando el tapn entre los dedos anular y medio. 13. Cuando transfiera un lquido de una botella de reactivo, deposite siempre la ltima gota que quede pendiente de la boca de la botella.

14. NUNCA regrese el reactivo sobrante a la botella con el reactivo original, DESCRTELO. NUNCA introduzca varillas de agitar, pipetas, goteros, etc. en la botella de reactivos. Transfiera un volumen prudencial de la botella a un erlenmeyer o beaker y de all tome lo que necesite. DESCARTE LO QUE NO USE. 15. Reponga inmediatamente las etiquetas deterioradas en los frascos y tape perfectamente los reactivos despus de usarlo. Con ello evitar el desperdicio y la contaminacin. 16. Para trasvasar slidos de una botella a un papel o a un recipiente: esto se logra fcilmente rotando la botella con suavidad alrededor de su eje. Cuando tenga que transferir slidos a cristalera de boca angosta, primero pngalos en un trozo de papel limpio y luego pselos del papel al recipiente deseado. 17. Cuando caliente un tubo de ensayo, fije la pinza en el tercio superior. Acostmbrese a manejar la pinza y el tubo con la mano izquierda para tener la mano derecha libre para otras manipulaciones. Nunca permita que la boca del tubo que est calentando apunte hacia usted o su compaero. 18. Todos los experimentos de este manual tienen sus instrucciones, las cuales deber seguir fielmente para evitar en lo posible, errores. 19. El trabajo del laboratorio debe hacerse con cuidado y originalidad. Es importante conocer en cada etapa del procedimiento lo que se est haciendo y por qu se est haciendo. NOTA IMPORTANTE Previo a la realizacin de la prctica el alumno debe: a. Estudiar el material bibliogrfico que fundamenta cada prctica la cual se evaluar con un examen corto antes de empezar la misma. b. En el cuaderno de laboratorio debe elaborar el diagrama de flujo sobre el procedimiento a efectuar durante la prctica y responder el cuestionario indicado en cada una de las prcticas de laboratorio.