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Curso: Agronomia rea: Desenvolvimento Rural Disciplina: Bioqumica Equipe: Francisco Adelino de Assis Arajo de Lucena, Juca Tura

C, Joana Darc Feitosa, Mauro Lucio da Silva Andrade junior, Albertino Yal, Danisio Professor (a): Maria Socorro Moura Rufino Trimestre: 5

AULA PRTICA 01 - CARBOIDRATOS

Redeno, 20 de Fevereiro de 2013

SUMRIO
1 - INTRODUO............................................................................................................... 3 2- OBJETIVOS .................................................................................................................... 3 3 - FUNDAMENTAO TERICA ....................................................................................... 4 4 - MATERIAIS E MTODOS .............................................................................................. 8 4.1 MATERIAIS ............................................................................................................... 8 4.2 MTODOS ................................................................................................................ 8 4.2.1 - Extrao do amido ................................................................................................. 8 4.2.2 Preparo de uma soluo de amido ....................................................................... 9 4.2.3 Caracterizao do amido por reao de fenol cido sulfrico ........................... 10 4.2.4 Caracterizao do amido por reao com iodo .................................................. 10 4.2.5 Precipitao do amido por soluo saturada de sulfato de amnio. ................. 11 5 RESULTADO E DISCUSSO ....................................................................................... 12 6 CONSIDERAES FINAIS ........................................................................................... 13

1 - INTRODUO Os polissacardeos, que tambm so conhecidos como glicanos, consistem de monossacardeos ligados por ligaes glicosdicas. Eles so classificados como homopolissacardeos ou heteropolissacardeos, se forem constitudos por um tipo ou mais de monossardeo. Como exemplos de polissacardeos importantes na natureza, podemos destacar: o glicognio, a celulose e o amido (VOET, 2006). O amido, polissacardeo de extrema importncia em alimentos, produzido em grande quantidade nas folhas dos vegetais como forma de armazenamento dos produtos da fotossntese e a forma de carboidrato mais comum na alimentao humana, representando cerca de 90% dos carboidratos da dieta. Ele constitudo por dois outros polissacardeos estruturalmente diferentes: -amilose e amilopectina (SOUZA & NEVES, 2011) O amido um alimento de reserva em plantas e um nutriente importante para os animais. Ele uma mistura de glicanos que as plantas sintetizam como principal reserva de alimento, e est depositado no citoplasma das clulas de plantas como grnulos insolveis compostos por -amilose e amilopectina.

2- OBJETIVOS 1. Demostrar a extrao e caracterizao de polissacardeos de material biolgico: amido de batata; 2. Identificar o amido; 3. Evidenciar o amido atravs de reaes de colorao e precipitao.

3 - FUNDAMENTAO TERICA

CARBOIDRATOS

De um modo geral, todos os alimentos so constitudos por substncias qumicas, tais como: protenas, lipdios, carboidratos, fibras, minerais, vitaminas e gua. Estas substncias qumicas so chamadas de nutrientes as quais desempenham no organismo funes vitais, correspondentes as suas necessidades de crescimento, de energia, de elaborao e manuteno tecidual e de equilbrio biolgico. Alimentos fontes: Vegetais- cereais (arroz, trigo, milho, aveia, cevada), razes e tubrculos (batata inglesa, batatadoce, mandioca, beterraba, inhame),

leguminosas (feijo), frutas, doces, etc.

DEFINIO

So compostos orgnicos constitudos de Carbono (C), Hidrognio (H) e Oxignio (O) produzido na natureza pelas plantas atravs da fotossntese. So o principal fornecedor de energia para o funcionamento orgnicos. So definidos como poli-hidroxialdedos, poli-hidroxicetonas, poli-hidroxilcoois, polihidroxicidos, e seus derivados simples, e polmeros desses compostos unidos por ligaes hemiacetticas.

CLASSIFICAO DOS CARBOIDRATOS Monossacardeos So os menores e mais simples carboidratos, que, se hidrolisados a compostos de menor peso molecular, no sero mais carboidratos, correspondem a menor unidade estrutural de um carboidrato. Esses compostos apresentam um dos seguintes grupos funcionais; polihidroxialdedo, polihidroxicetona,

polihidroxicido e polihidroxilcool.

De acordo com o nmero de carbonos os monossacardeos podem ser classificados em: 3C= triose , 4C= tetrose , 5C= pentose , 6C= hexose, 7C= heptose. Os monossacardeos mais importantes em qumica de alimentos so as pentoses e as hexoses. Os monossacardeos importantes para a nutrio humana so: glicose, frutose e galactose. A glicose o monossacardeo bsico dos carboidratos e encontrado em maior quantidade na natureza. o nico carboidrato constituinte dos polissacardeos amido, glicognio e celulose. Os monossacardeos so classificados de acordo com a natureza qumica do grupo carbonila e pelo nmero de seus tomos de carbono. Os que tm grupos aldedicos so aldoses e os que tm grupos cetnicos, formam as cetoses. Oligossacardeos So polmeros contendo de 2 a 10 unidades de monossacardeos unidos por ligaes glicosdicas. So nomeados segundo o nmero de molculas de monossacardeos: dissacardeos, trissacardeos, tetrassacardeos. Os mais

importantes so os dissacardeos os quais contm dois monossacardeos. Para formar dissacardeos, oligossacardeos ou mesmo polissacardeos,

necessrio que os monossacardeos se unam entre si atravs de ligaes glicosdicas. A ligao glicosdica se faz entre uma hidroxila alcolica de uma molcula de um acar com a hidroxila do carbono de outra molcula de acar, com eliminao de gua, o glicosdio resultante um dissacardeo. Exemplos de dissacardeos os quais se hidrolisam em duas molculas de monossacardeos: Sacarose -> glicose + frutose (acar da cana ou da beterraba) Maltose -> glicose +glicose ( acar do malte, da uva) Lactose -> glicose +galactose (acar do leite) Sob o ponto de vista nutricional dos animais, apenas, trs dissacardeos tm importncia: a sacarose, lactose e a maltose. A Sacarose conhecida como o

acar comercial ou acar comum amplamente distribudo entre as plantas superiores. Suas nicas fontes comerciais de obteno a cana-de-acar e a beterraba Polissacardeos So polmeros de alto peso molecular dos monossacardeos. Os

polissacardeos contm mais que 12 unidades de monossacardeos dispostos de forma linear ou ramificada. Os que mais se encontram distribudos na natureza so: no reino vegetal, o amido, a celulose e as pectinas; e, no reino animal, o glicognio. A sua solubilidade em gua depende do peso molecular (diminui medida que aumenta o peso molecular) POLISSACARDEOS: DEFINIO E CARACTERSTICAS GERAIS Polissacardeos so constituintes de numerosos resduos de monossacardeos unidos por ligaes glicosdicas. Polissacardeos compostos por um nico tipo de resduo de acar so chamados de homopolissacardeos, enquanto que aqueles compostos por 2 ou mais diferentes tipos de resduos de acar so chamados de heteropolissacardeos. Geralmente no tm um peso molecular preciso; eles consistem de uma mistura de molculas de alto peso molecular. Desempenham duas principais funes: So uma forma de estocar combustvel celular e so os elementos estruturais das paredes celulares e plantas. AMIDO: ASPECTOS GERAIS E ESTRUTURA QUMICA O amido, includo entre os alimentos energticos pode ser considerado um carboidrato de estrutura complexa, formado de monossacardeos (glicose) ligados entre si e representado pela frmula geral (C6H10O5)n + XH2O. O amido acumulado nas plantas s custas de resduos de glicose formados durante o processo de fotossntese. Essas glicoses unidas pela ao de enzimas, na presena de ATP, formam cadeias longas do amido. A unio entre

duas ou mais molculas de glicose feita por ligao glicosdica, do tipo alfa. Desempenha a funo de reserva. Encontra-se principalmente no trigo, cevada, milho, batata, feijo, arroz, mandioca e vrias outras fontes. Muitos dos xaropes comercializados no mercado brasileiro derivado do amido, principalmente do milho. Uma tonelada de milho produz entre 600 a 650 Kg de amido. O amido a matria-prima mais barata e abundante, principalmente para a alimentao humana. O amido obtido dos frutos, razes e outras partes de diferentes vegetais. O amido de milho (Zea mays L., Gramineae), amido de arroz (Oryza sativa L., Gramineae), amido de trigo (Triticum aestivum L., Gramineae), amido de mandioca (Manihot utilissima Pohl, Euforbiaceae) e amido de batata (Solanum tuberosum L., Solanaceae) so considerados oficiais. O amido puro tem colorao branca, inspido e se adicionado gua fria e mantido sob agitao forma uma suspenso de aspecto leitoso, separando-se aps repouso. Embora tendo-se verificado que pequena frao torna-se solvel quando agitado em gua, tido como praticamente insolvel. Baseado nisto que a indstria consegue obt-lo em estado puro.

4 - MATERIAIS E MTODOS 4.1 MATERIAIS 1- Soluo de amido recm-preparada; 2- cido sulfrico concentrado; 3- Soluo de lugol; 4- Soluo saturada de sulfato de amnio; 5- lcool etlico absoluto; 6- Bquer de 250mL; 7- Erlenmeyer de 500mL 8- Filtro de papel.

4.2 MTODOS 4.2.1 - EXTRAO DO AMIDO

Raspou-se um pedao de batata e depois transferiu-se a raspa para um bquer de 250mL, depois adicionou-se 100mL de gua destilada e agitou-se comum basto de vidro, em seguida filtrou-se e recolheu-se o liquido num Erlenmeyer de 500mL. Deixou o amido depositar-se no fundo do Erlenmeyer durante 10 minutos e em seguida removeu-se cuidadosamente o liquido sobrenadante descartando-o. Sobrando - se no Erlenmeyer um depsito de amido. Conforme figura abaixo:

Fig. 1 lquido em repouso

Fig. 2 amido extrado

4.2.2 PREPARO DE UMA SOLUO DE AMIDO

Manteve-se aproximadamente 150mL de gua fervendo em um bquer de 250mL. Depois acrescentou-se aproximadamente 50mL de gua fria ao depsito de gros de amido obtido anteriormente, logo depois adicionou-se esta suspenso de amido lentamente e com constante agitao, gua fervente. Continuou-se o aquecimento at que se formou uma soluo leitosa e azulada.

Fig. 3 soluo de amido aquecida

Fig. 4 soluo leitosa e azulada

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4.2.3 CARACTERIZAO DO AMIDO POR REAO DE FENOL CIDO SULFRICO

Em um tubo de ensaio pipetou-se 0,5mL de soluo de amido (diluda previamente de 1:10), ou seja, adicionou-se 4,5mL de gua destilada. Desta soluo coletou-se 0,5mL e colocou-se em um segundo tubo, juntou-se a este 0,5mL de soluo de fenol 5% e adicionou-se 2,5mL de cido sulfrico concentrado, num nico jato. Observou-se a cor laranja sendo caracterstica da reao.

4.2.4 CARACTERIZAO DO AMIDO POR REAO COM IODO

Em um tubo de ensaio pipetou-se 2mL de soluo de amido e adicionou-se 2 gotas de lugol. Notou-se o aparecimento de cor azul intensa. Aqueceu-o e foi observada a mudana de colorao passando de azul-escuro para amarelado, em seguida, resfriou-se o tubo em gua corrente e foi observado que a cor azulada retorna aps o resfriamento em gua corrente. Vejamos, nas figuras abaixo:
Lquido com colarao azulada Lquido com colorao amarelado

Fig. 1 tubo frio com soluo de amido e lugol

Fig. 2 tubo quente com soluo de amido e lugol

Aps a adio de lugol na soluo de amido bem visvel a colorao azulescuro que se forma no tubo. A soluo de amido fica azul-escuro na presena de lugol, devido aquela formar um complexo colorido com o iodo presente neste. Sendo que a amilose d origem a uma colorao negro-azulada, enquanto a amilopectina d origem a uma colorao vermelho-violcea, o que no nos deixa concluir que a amilose encontrava-se em maior quantidade na

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soluo do que a amilopectina devido ao predomnio da colorao azul-escuro. Ao aquecer a soluo de amido e lugol esse complexo se dissocia, sofre uma hidrlise pelo calor, formando uma soluo marrom.

4.2.5 PRECIPITAO DO AMIDO POR SOLUO SATURADA DE SULFATO DE AMNIO.

A 5ml de soluo de amido adicionou-se 5ml de soluo saturada de sulfato de amnio. Agitou-se fortemente e deixou-o em repouso por 10 minutos em seguida filtrou-se. Pesquisou-se separadamente no filtrado e no precipitado a presena de amido pelo teste do iodo, adicionou- se 2 gotas de lugol ao precipitado e tambm no sobrenadante.

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5 - RESULTADO E DISCUSSO Os resultados obtidos foram:

TESTE DE FENOL E ACIDO SULFRICO Quando adicionado o cido sulfrico e fenol na soluo de amido no obtivemos o resultado esperado a cor laranja, porque foi utilizado uma soluo que no estava em perfeitas condies.

TESTE DO IODO Quando adicionado lugol a soluo de amido apareceu a colorao azulada e ao aquecer essa soluo a colorao citada anteriormente perdida, voltando aparecer quando a mesma soluo resfriada em gua corrente. O resultado da mudana de cor, por que o amido perde sua estrutura espiral quando aquecido assim o iodo sai do interior do polissacardeo e o complexo que tem cor azul momentaneamente desestruturado. Quando resfriado volta a forma espiral do amido (desnaturao reversvel) e o iodo forma novamente o complexo, voltando a forma azul.

5.3 TESTE DE PRECIPITAO DO AMIDO Depois de 10 minutos de repouso, observa-se a formao de um precipitado no fundo do tubo, sendo este de colorao branca e aspecto viscoso. Ele ocorre devido a adio de sulfato de amnio na soluo de amido. Pois assim como as protenas, o amido se solubiliza na gua devido a presena de ligaes de hidrognio, o sulfato de amnio, sendo um sal muito solvel, aumenta a fora inica desidratando o amido fazendo que este se precipite.

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6 CONSIDERAES FINAIS

A partir desta aula prtica, foi possvel trabalhar contedos abordados nas aulas tericas sobre os carboidratos, o que ficou evidenciado de que a prtica comprovou o que estava sendo repassado em sala, o que torna o assunto mais atrativo, como tambm proporciona ao aluno a oportunidade de formular hipteses e interpretar os resultados obtidos.

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REFERENCIAS

VOET, Donald; VOET, Judith G.: Bioqumica. 3 Ed. Artmed: Porto Alegre, 2006. pp. 366-368.

SOUZA, Karina A. F.D; NEVES, Valdir A.: Reao com iodo. Disponvel em: www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/teste_amido.htm. Acesso em: 27/02/2013.

LIMA,

Anny

Kelly.

Carboidratos

Disponvel

em:

http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAMIgAL/carboidratos. Acessado em: 27 de fevereiro de 2013.