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Rev Esp Med Legal. 2012;38(2):85-86

REVISTA ESPAOLA DE

MEDICINA LEGAL
www.elsevier.es/mlegal

MEDICINA LEGAL EN IMGENES

Visualizacin microscpica en agresiones sexuales

Microscopy visualization in sexual aggressions
Pilar Martnez y Gloria Vallejo
Seccin de Biologa. Instituto Nacional de Toxicologa y Ciencias Forenses, Las Rozas, Madrid, Espa na Disponible en Internet el 15 de junio de 2012

La visualizacin microscpica de espermatozoides sigue siendo considerada la prueba denitiva para la demostracin de esperma en los laboratorios de biologa forense1 . La tcnica Kernechtrol-Picrondigocarmn KPIC o rbol de Navidad se utiliza de forma corriente como tincin identicativa de clulas espermticas. Este mtodo se caracteriza por discernir principalmente espermatozoides completos o cabezas de espermatozoide de clulas no espermticas, bien clulas epiteliales o levaduras, que regularmente estn presentes en las muestras procedentes de una agresin sexual. La composicin de la tcnica es de sulfato de aluminio, nuclear Fast Red, cido pcrico e ndigo carmn2 . As, de un pellet o sedimento centrifugado se selecciona un peque no volumen para tincin microscpica y se prepara un smear que una vez jado al calor se ti ne primero con nuclear Fast Red y posteriormente con picrondigocarmn. En la visualizacin al microscopio ptico se destaca la parte posterior de las cabezas de espermatozoide de rojo fucsia refringente, siendo la zona anterior te nida de forma ms suave, resaltando el acrosoma con su caracterstica transparencia, mientras que la cola del espermatozoide y el cuello resultarn en color verde (g. 1). Las clulas epiteliales, si las hubiere en la muestra, por ejemplo por descamacin de tejido anogenital, toman una coloracin verde en citoplasma y granate en el ncleo. Debido a la fragilidad de la unin entre cabeza y cola, y a la rapidez de su ruptura por deshidratacin, lo

Figura 1 Visualizacin en microscopio de luz visible de espermatozoides en alcuota de un control de semen dilucin 1:2.500 (magnicacin original 40).

Autora para correspondencia. Correo electrnico: pilarm.fernandez@mju.es (P. Martnez).

ms frecuente es la visualizacin de cabezas de espermatozoide (g. 2). Recientemente, se ha descrito otro mtodo de tincin mediante uorescencia especco de espermatozoides (HY-LITER, Independent Forensics) donde las cabezas y porciones de la cola se visualizarn usando ltros compatibles con uorescena o Alexa 488 por inmunodiagnosis con marcaje dise nado mediante anticuerpos monoclonales3 (g. 3).

0377-4732/$ see front matter 2012 Asociacin Nacional de Mdicos Forenses. Publicado por Elsevier Espaa, S.L. Todos los derechos reservados.

http://dx.doi.org/10.1016/j.reml.2012.05.004

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P. Martnez, G. Vallejo

Bibliografa
1. Atienza I, Martnez P. Identicacin de vestigios de semen. En: Delgado Bueno S, director. Patologa y Biologa Forense. Tratado de Medicina Legal y Ciencias Forenses (T. III). Editorial Bosch; -1013. 2010; p. 9932. Shaler RC. Modern forensic biology. En: Saferstein R, editor. Forensic science handbook. Upper Saddle River, I, 2a ed. NJ: -613. Prentice Hall; 2002. p. 5253. Herr J. SpermPaint optimization and validation. NIJ Grant 2000-IJ-CX-K013 Report. Disponible en: <http://www. Ncejrs.gov/pdfles1/nij/grants/220289.pdf>; Fecha Consulta: 12/06/2012.

Figura 2 Visualizacin de frotis vaginal donde se observan clulas epiteliales de la vctima con citoplasma en color verde y ncleo en granate, junto con cabezas de espermatozoide en coloracin fucsia refringente (magnicacin original 40).

Figura 3 Tincin con uorescena donde se visualizan espermatozoides completos por marcaje mediante anticuerpos monoclonales de membrana (Filtro FITC, magnicacin original 40).