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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MATO GROSSO FACULDADE DE ARQUITETURA, ENGENHARIA E TECNOLOGIA DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTAL ENGENHARIA SANITRIA E AMBIENTAL

ISOLAMENTO DE MICRO-ORGANISMOS DO AMBIENTE E OBSERVAO MACROSCPICA E MICROSCPICA DESTES

PALOMA DONDO TONELLO PEDRO RAFAEL DE BONA RODRIGUES

CUIAB-MT 2012

ROTEIRO PRTICO
1. INTRODUO

Os

micro-organismos

so

definidos,

em

princpio,

como

seres

microscpicos, individualmente invisveis a olho nu (VERMELHO, 2006 , p. 1). Os micro-organismos so encontrados em praticamente todos os ambientes naturais tais como solo, ar, gua, alimentos, esgoto, corpo humano, plantas e animais (COELHO, 2006, p. 15). Ou seja, esto constantemente presentes no meio ambiente. Estes organismos so relatados apenas por seus fatores negativos, como problemas de higiene, danos alimentos e equipamentos, alm de doenas. Entretanto, sua utilizao, apesar de ser no ser divulgada, de extrema importncia, visto que so responsveis pela ciclagem de nutrientes em ambientes aquticos e terrestres, recuperao de leo, extrao de metais (CAIXETA, 2012, p.13), dentre outras utilidades. Desta maneira, para o aperfeioamento dos conhecimentos, baseando-se em estudos aprofundados, necessria a coleta dos organismo, para isto, duas maneiras foram estabelecidas, a primeira consiste no esfregao do ambiente especfico, e a segunda, consiste no mtodo de exposio de placa, ou seja, aguardada a proliferao dos organismos na placa. Entretanto, este mtodo possui imprecises tcnicas, pois no quantifica os micro-organismos em relao ao volume de ar, no sendo ento muito recomendvel (COELHO, 2006, p. 141). A verificao destes micro-organismos d-se atravs da anlise

microscpica, pois estes constituem um grupe de seres vivos de dimenses reduzidas e bastante variveis de acordo com o grupo a que pertencem (PADRN, 2006, p. 79), sendo necessrio desta maneira, o manuseamento de microscpios.

2. OBJETIVO GERAL

Verificao de diversos micro-organismos encontrados no ambiente no especfico.

3. OBJETIVO ESPECFICO

Isolar diferentes tipos de micro-organismos, adquiridos, a partir de diversos ambientes. Alm, da anlise microscpica e macroscpica das coletas.

4. PROCEDIMENTOS

Foram coletadas amostras em dois ambientes. O primeiro foi coletado na UFMT, bloco ICET, nas proximidades dos banheiros. A segunda amostra foi coletada neste mesmo local, porm dentro do banheiro, mais especificamente, na torneira do banheiro masculino. Para a coleta utilizou-se a placa de Petri, que na coleta por exposio, foi necessrio aguardar 15 minutos, para ocorrncia da inoculao. J na coleta por esfregao, utilizou-se alm da placa de Petri, o gabarito, e o swab para retirar os micro-organismos da superfcie especfica, aps isto, foi necessrio a passagem do material coletado, sendo este ento levemente esfregado na placa, para que meio de cultivo, gar de batata, no fosse deteriorado. As coletas foram transferidas para a incubadora, e foram armazenadas de forma invertida, tendo como temperatura 37 C ou 25 C, e as mesmas foram entregues aps 7 (sete) dias. Aps a durao necessria, e ambiente propicio houve a proliferao dos variados micro-organismos, fungos filamentosos, leveduras e bactrias. E atravs destes, foram feitas as anlises macroscpicas, sendo necessrio a contagem das colnias de bactrias, leveduras e variao no nmero de fungos. Aps esta anlise, foi proposto a realizao de uma lmina, para isto, foi necessrio primeiramente a esterilizao da lmina, lamnulas e ala de platina no bico de Bunsen, logo aps foi adicionado gua destilada, com a utilizao da pipeta de Pasteur, foi transferida uma pequena coleta dos micro-organismos, em especfico bactrias e leveduras, lmina, e adicionado o Azul de metileno, e logo aps a adio da lamnula. Todo o processo foi cautelosamente manuseado na rea estril, prximo ao bico de Bunsen. Finalizado o processo de criao de lminas, estas foram levadas ao microscpio tico, para anlise microscpica.

5. RESULTADOS E DISCUSSES

Aps o perodo de maturao em que foi submetido os micro-organismos das placas, foi realizada uma caracterizao dos mesmo, houve fungos filamentosos e bactrias. Os fungos filamentosos apresentam hifas, que agrupadas formam o miclio. Podem conter diferentes tamanhos de colnias, e geralmente tomam conta do ambiente em que habitam. Apresentam cores intensas, podendo tambm ser esbranquiados esta varincia ocorre graas aos esporos, que variam de indivduo para indivduo. As leveduras e bactrias so facilmente diferenciadas, j que as primeiras so opacas e formam colnias grandes, e as segundas apresentam brilho e colnias pequenas. Na placa em que foi utilizado o mtodo do esfregao pode-se notar a dominncia de fungos filamentosos, sendo que estes tomaram conta de toda a placa de Petri, assim, impedindo o crescimento de leveduras e bactrias e sua consequente caracterizao. Tais fungos apresentavam a cor branca e cresceram na forma de uma estrela. Na placa em que foi utilizado o mtodo de sedimentao espontnea foi necessrio calcular o nmero de Unidades Formadoras de Colnias (UFC) por m. Foi obtido o resultado de 1,71 UFC/m, conforme o clculo abaixo, ( )

Atravs deste mtodo, foram registradas 2 colnias de bactrias e 3 tipos de fungos filamentosos, sendo que o fungo foi predominante e acabou propiciando o crescimento do elo de inibio uma proteo feita pelas colnias de bactrias para se protegerem do inibidor .

6. CONCLUSO

Atravs dos procedimentos realizados, nota-se que em ambos os locais em que foram coletados os micro-organismos houve certa dominncia de uma determinada espcie. Na placa realizada atravs do mtodo do esfregao houve a predominncia de fungos, e nenhum outro espcime conseguiu se desenvolver. Entretanto, na placa desenvolvida atravs do mtodo de exposio, apesar da dominncia de fungos, desenvolveram-se 2 (duas) colnias de bactrias, registrando desta maneira, o elo de inibio mecanismo de defesa tornando-se possvel a sobrevivncia das mesmas frente espcime dominante.

7. REFERNCIAS

CAIXETA, D. S. Manual Prtico de Microbiologia Geral. Cuiab, 2012.

TODA

biologia.

Disponvel

em:

<http://www.todabiologia.com/microbiologia/>.

Acesso em: 19 dez. 2012, 21:30:30.

ULIANA, S.; SPECK, V.; VILA, A. F. A.; REGINATTO, V.; MOECKE, E. H. S. Isolamento e caracterizao morfolgica de micro-organismo de sistemas de tratamento de dejetos sunos: 2009.

VERMELHO, A. B.; COELHO, R. R. R.; PADRN, T. S. Prticas de microbiologia. So Paulo: Guanabara Koogan, 2006.