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Acta Scientiae Veterinariae. 35(Supl 2): s267-s269, 2007.

ISSN 1678-0345 (Print) ISSN 1679-9216 (Online)

Citologia para clnicos: como utilizar esta ferramenta diagnstica


Cytology for clinicians: how to use this diagnostic tool
Roberta Fraga Graa
Laboratorio de Anlises Citolgicas Citologia Veterinria Roberta Graa E-mail: betagraca@hotmail.com

ABSTRACT
Cytology is a diagnostic tool used to evaluate the morphological abnormalities of cells without the presence of tissue architecture and correlate them with the clinical findings. It is helpful to diagnose and evaluate the prognosis of different lesions on several tissues of the body, Sample collection and handling are as important as the interpretation of the cytologic slides. Another key factor for a successful cytologic diagnosis is the communication between the pathologist and the clinician, as well as a routine use of the method on the veterinary practice. Different types of inflammatory diseases can be easily distinguished from each other as well as from neoplastic processes. Key words: cytology of dogs and cats, diagnosis, inflammation, neoplasia.

INTRODUO
A citopatologia ou citologia a anlise morfolgica de clulas de um tecido sem a presena de arquitetura tecidual. Ela tem como objetivo auxiliar no diagnstico e prognstico de leses nos mais variados locais do corpo, incluindo pele, linfonodos, glndulas e rgos internos, alm das cavidades torcica e abdominal. A importncia da avaliao citolgica de um tecido s pode ser percebida quando esta utilizada com freqncia na rotina diagnstica da clnica. As vantagens da citologia como meio diagnstico incluem a simplicidade da coleta, o custo relativamente barato, a rapidez, e a eficcia dos resultados, podendo diagnosticar e/ou diferenciar doenas infecciosas, inflamatrias, proliferativas e neoplsicas. A vantagem da histopatologia sobre a citologia se d pelo fato desta avaliar tanto a arquitetura tecidual quanto a morfologia celular e por causa disso, os diagnsticos histopatolgicos so mais especficos e definitivos. Porm, em muitos casos, o diagnstico citolgico definitivo. O valor da informao obtida na citologia aumenta de acordo como o grau de entendimento de suas vantagens e desvantagens.

COLETA DA AMOSTRA
O resultado de um teste laboratorial to bom quanto a qualidade da amostra enviada Na hora da coleta de material, as chances de obteno de amostras significativas dependem de diversas etapas que esto relacionadas entre si como: a obteno de amostra significativa na coleta, a aplicao correta do material nas lminas, utilizao de corante adequado e avaliao com um microscpio de boa qualidade. Por isso, algumas tcnicas bsicas de coleta e processamento do material so detalhadas a seguir: Agulhas e seringas: A citologia aspirativa realizada com agulhas de 21 a 25-gauge, dependendo do tamanho da massa a ser aspirada, mas a agulha de 22 gauge (25x7mm-cor cinza) a mais comumente utilizada. A seringa deve ser de 3 a 20 ml, dependendo da consistncia da massa, sendo as seringas menores recomendadas para massas mais fluidas e as maiores para as slidas e fibrosas. Procedimento de aspirao com suco: o passo inicial a localizao da massa a ser puncionada. Dois dedos da mo no dominante so usados para localizar e fixar a massa o indicador e o terceiro dedo, com a mo posicionada sobre a massa. A seguir, introduz-se a seringa na pele, at atingir a leso. A suco (presso negativa) ento aplicada, executando-se movimentos para cima e para baixo, sem retirar a ponta da agulha da leso, em vrias direes desenhando um cone em que a base est na leso e o pice na superfcie cutnea. A suco desfeita e s ento a agulha retirada. Neste momento, a maioria ou todo o material est no interior da agulha (apenas em leses csticas ou necrticas e aspiraes muito hemorrgicas o material atinge a seringa). Procedimento sem suco: O procedimento similar, mas a agulha inserida na leso sem a seringa e direcionada em vrias direes como na tcnica com suco. Essa tcnica deve ser utilizada em massas menores, onde difcil fazer o procedimento com suco. Alm disso, esta tcnica evita a contaminao por sangue perifrico e facilita a sensao ttil do clnico em relao textura da massa. Caso este mtodo no obtenha material, recomenda-se a tentativa da tcnica com suco;

Recolhendo o material da agulha: aps retirar a agulha do paciente, destaca-se a agulha da seringa (o material ainda est inteiramente na agulha). A seguir, enche-se a seringa de ar e recoloca-se a agulha na seringa, usando o ar para extrair gentilmente o contedo da agulha. A mo no dominante deve segurar firmemente a agulha, impedindo que ela se desloque ao ser

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aplicada a presso. A ponta da agulha deve tocar a lmina num ngulo de 45-90, formando uma pequena gota. Se a agulha no tocar na lmina, o material ser espalhado em spray, formando pequenas gotculas que se dessecaro rapidamente ao espalhar o material na lmina. A gota formada dever ser espalhada rapidamente com a ajuda de uma segunda lmina transversal com presso leve para no destruir as clulas.

Imprint: Procedimento simples onde se encosta a lmina na ferida e obtm-se o material. Realizado em casos de feridas abertas sem presena de tumorao passvel de ser aspirada. A ferida deve ser limpa com soro fisiolgico antes da coleta para evitar a anlise de inflamao secundria e hemorragia. Exfoliao: Procedimento que utiliza uma lmina de bisturi para raspar uma pequena quantidade de material de um tecido que foi retirado para bipsia. Depois de coletado, o material colocado em um lado da lmina de vidro. Com uma segunda lmina posicionada transversalmente, o material espalhado. Fixao do material: dependendo do corante a ser utilizado, o mtodo de fixao varia. Para corantes do tipo Romanowsky (Wrights, Giemsa e Pantico), que so os mais utilizados na citologia veterinria, a lmina dever ser seca ao ar e armazenada em lugar seco e longe de formol para o envio do material para o laboratrio. A lmina pode ser enrolada em papel toalha (caso no haja porta-lminas) para armazenamento e transporte. Antes do envio da amostra para o laboratrio, importante identificar a lmina (no lado onde est o material) e preencher a requisio com os dados do animal, incluindo, no mnimo, espcie, idade, sexo, localizao da leso e suspeita clnica. Dados adicionais como tempo de crescimento, tamanho, formato, cor, mobilidade, invaso para tecidos adjacentes e presena de alopecia, ulcerao e crosta so muito importantes para o citopatologista.

AVALIAO CITOLGICA
Na rotina citolgica, os locais mais comumente avaliados so pele e linfonodos, provavelmente pela facilidade de observao e palpao de aumento de volume de linfonodos, ndulos e feridas pelos proprietrios dos animais e tambm pelo acesso mais simples s reas, sem a necessidade de uso de ultra-sonografia.A citologia a ferramenta diagnstica mais comum e imediatamente informativa na prtica da dermatologia veterinria [3]. Um estudo comparando os resultados de histopatologia e citologia de ndulos cutneos e subcutneos demonstrou um nvel de concordncia geral de 90,9%6. O resultado da interpretao citolgica de uma amostra pode ser includo em uma de seis categorias: tecido normal, inflamao, neoplasia, resposta a injria celular e amostras no diagnsticas por falta de material ou por contaminao por sangue perifrico.
a) Inflamao

De uma maneira geral, a avaliao microscpica da celularidade da amostra em aumento de 10x, j o suficiente para distinguir entre diferentes tipos de processos inflamatrios, j que amostras altamente celulares so associadas a processos inflamatrios supurativos e piogranulomatosos, enquanto inflamaes granulomatosas so menos celulares. A distribuio celular vai sugerir o tipo de microorganismo que se deve procurar durante a avaliao da lmina. A presena de uma maioria de neutrfilos (>85%), indica inflamao supurativa, que pode estar associada bactria ou no. No caso de presena de bactria na amostras, importante lembrar que necessrio observar a bactria dentro do citoplasma, para se confirmar que esta a causadora da inflamao. A inflamao considerada piogranulomatosa quando h presena de neutrfilos, macrfagos epiteliides e clulas gigantes multinucleadas. Nesse caso, os principais diagnsticos diferenciais so fungos (ex: Cryptococcus e Sporothrix) e corpos estranhos. No caso de inflamao granulomatosa, a populao formada por uma maioria de macrfagos, com nmeros menores de clulas gigantes multinucleadas. Alguns fungos e bactrias, como Micobacterium sp., Nocardia e Actinomyces causam esse tipo de inflamao. Inflamaes eosinoflicas contm >12% de eosinfilos e esto relacionadas alergia, complexo granuloma eosinoflico felino, alguns parasitas e sndromes paraneoplsicas.
b) Neoplasia

No caso de neoplasias, as epiteliais e as de clulas redondas tm alta celularidade por esfoliarem bem, enquanto as mesenquimais tm celularidade baixa por serem fibrosas e de difcil esfoliao. As neoplasias de clulas redondas, como histiocitoma, mastocitoma, tumor venreo transmissvel, plasmocitoma e linfoma so facilmente diagnosticados citologicamente por um patologista experiente. Raramente, alguns deles no podem ser diferenciados citologicamente, porm a dvida fica restrita a apenas dois ou trs deles. No caso das neoplasias epiteliais, muitas vezes o diagnstico fica restrito a diferenciao entre uma neoplasia benigna e uma maligna (carcinoma), sem especificar o tecido de origem, porm em outros casos como o do adenoma perianal, o carcinoma epidermide e os carcinomas de clulas transicionais, podem ter um diagnstico definitivo. Apesar da maioria das neoplasias mesenquimais esfoliarem pouco, muitas delas esfoliam o suficiente para um diagnstico como o hemangiopericitoma, mixossarcoma, alguns casos de fibrossarcoma, a maioria dos casos de osteossarcoma. O lipoma a neoplasia mesenquimal mais comumente diagnosticada citologicamente. No estudo citado acima, envolvendo diagnstico de neoplasias cutneas e subcutneas, a sensibilidade foi de 89.3% e a especificidade de 97.9% demonstrando que o nmero de resultados falso positivos nfimo, enquanto o nmero de resultados falso negativos um pouco mais elevado [2].

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Graa R.F. 2007. Citologia para clnicos: como utilizar esta ferramenta diagnstica. Acta Scientiae Veterinariae. 35: s267-s269. c) Linfonodos

A citologia de linfonodos deve ser feita sempre que houver aumento, sendo ele focal ou em casos de linfadenopatias generalizadas. As categorias citodiagnsticas dos linfonodos incluem: linfonodo reativo, quando h aumento no nmero de plasmcitos devido a um estmulo antignico crnico; inflamao dos diversos tipos citados acima, gerando uma linfadenite que pode ser neutroflica, eosinoflica e etc; linfoma (neoplasia primria) e neoplasias metastticas (principalmente os carcinomas). Quando h uma linfadenopatia generalizada, recomenda-se a aspirao de mais de um linfonodo, de preferncia os prescapulares e poplteos, evitando os submandibulares, que tm maior tendncia a aumento de volume.

CONCLUSO
A citologia uma ferramenta diagnstica de alta importncia para os clnicos gerais e para os oncologistas, j que atravs dela, possvel fechar diagnsticos de leses inflamatrias e neoplsicas, alm de, em casos onde no possvel chegar a uma concluso, a citologia capaz de restringir os possveis diagnsticos diferenciais. Os maiores fatores de restrio na citologia so a obteno de amostra inadequada e o mau uso desta em casos onde no h indicao para a realizao de citologia. Outro fator muito importante para a obteno de resultados mais satisfatrios a comunicao e interao entre clnicos e patologistas, j que um bom diagnstico citolgico obtido atravs de um esforo de equipe.

REFERNCIAS
1 2 3 4 5 6 Raskin R.E. & Meyer D.J. 2001. Atlas of Canine and Feline Cytology. Philadelphia: W.B. Saunders Co., 410p. Cowell R.L., Tyler R.D. & Meinkoth J.H. 1999. Diagnostic cytology and hematology of the dog and cat. 2nd edn. St. Louis: Mosby Inc., 321p. Meyer D.J. 2001. The essentials of diagnostic cytology in clinical oncology. In: Withrow S.J & MacEwen E.G. (Eds). Small Animal Clinical Oncology. 3rd edn. Philadelphia: W.B. Saunders Co., pp.54-62. Stockham S. & Scott M. 2002. Introductory concepts In: Fundamentals of veterinary clinical pathology. Ames: Iowa State Press, pp.3-30 Mendelson C., Rosenkrantz W. & Griffin C.E. 2006. Practical cytology for inflammatory skin diseases. Clinical Techniques in Small Animal Practice. 21:117-127. Ghisleni G., Roccabianca P., Ceruti R., Stefanello D., Bertazzolo W., Bonfanti U. & Caniatti M. 2006. Correlation between fine-needle aspiration cytology and histopathology in the evaluation of cutaneous and subcutaneous masses from dogs and cats. Veterinary Clinical Pathology. 35: 24-30. Sharkey L.C., Dial S.M. & Matz M.E. 2007. Maximizing the diagnostic value of cytology in small animal practice. Veterinary Clinics of North American Small Animal Practice. 37: 351-372.

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