UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA FACULTAD DE CIENCIAS

Preparacin De Muestras Para El TEM Membranas

INTRODUCCION A LA MICROSCOPIA ELECTRONICA

ALUMNO: Mautino Chvez Alberto Enzo Profesor: Alcides Lpez 2011-2

Preparacin De Muestras Para El TEM Membranas

Mautino Chvez Alberto Enzo
Laboratorio de microscopia electrnica, facultad de ciencias, universidad nacional de ingeniera.

E-Mail:tatito_8423@hotmail.com RESUMEN La preparacin de muestras para el TEM no solo requiere del use de rejillas, sino tambin de la utilizacin de membranas, las cuales han de fabricarse en el laboratorio con ayuda del Parlodion. Veremos cuales son los mtodos para obtener las membranas. Veremos los cuidados que debemos de tener a la hora de experimentar, Tambin veremos cual es el lugar adecuado de la membrana en donde debemos colocar la rejillas. ABSTRACT The preparation of simple for TEM not only requires the use of grids, but also the use of membranes which must be manufactured in the laboratory with the help of Parlodion.We will see that are the methods to obtain the membranes. We will see that we must take care when it comes to experience, which will also see is the place where the membrane must place the grids.

1. Introduccin Existe toda una clase de franjas de interferencia en as que el parmetro dominante es el espesor ptico, nfd, mas que i . Se denominan franjas de igual espesor. Con la iluminacin de la luz blanca la iridiscencia de pompas de jabn, manchas de aceite (cuyo espesor es de unas cuantas longitudes de onda), e incluso superficies de metal oxidado es el resultado de variaciones en el espesor de la pelcula. Las bandas de interferencia de este tipo son anlogas al contorno de lneas de altura constante de un mapa topogrfico. Cada franja es el lugar geomtrico de todos los puntos

en la pelcula cuyo espesor ptico es constante. Por lo general nf no varia, de modo que las franjas corresponden a regiones de espesor de pelcula constante. Como tal, ellas pueden ser bastante tiles a fin de determinar aspectos diferentes de la superficie de elementos pticos: lentes, prismas, etc.Por ejemplo, una superficie que va a ser examinada puede ponerse en contacto con una plano ptico. El aire en el espacio entre las superficies genera una figura de interferencia de pelculas delgadas. Si la superficie de prueba es plana, una seria de bandas rectas e igualmente espaciadas indicara

una pelcula de aire en forma de cua, que resulta, por lo general del polvo entre los planos. 2. Pelcula en forma de cua Dos piezas de placas de vidrio separadas en un extremo por una tira de papel formaran una cua satisfactoria con la cual se observaran estas bandas. Cuando se observan casi a incidencia normal, de la forma ilustrada en la figura, los contornos procedentes de una pelcula no uniforme se denominan franjas de fizeau. Para una cua fina de ngulo pequeo, la diferencia de longitud de camino ptico entre dos rayos reflejados puede calcularse aproximadamente por medio de la ecuacin =2nfdcosi ,donde d es el espesor en un punto determinado, es decir d =x. Para pequeos valores de la condicin para un mximo de interferencia es (m + )0 =2nfdm (m + )0 = 2xmnf

Puesto que nf= escribirse como

, xm puede

Xm = (

Los mximos se dan a distancias del vrtice , proporcionadas por

etc..., y las franjas consecutivas

estn separadas por una distancia x, dada por x =

Obsrvese que la diferencia d espesor de la pelcula entre mximos adyacentes es simplemente f/2. Puesto que el haz reflejado en la superficie inferior cruza la pelcula dos veces (i t 0 ), los mximos adyacentes diferente en longitud de camino ptico en f .Ntese tambin que el espesor de la pelcula en los diversos mximos viene dado por dm = (m + )

que es un mltiplo impar de un cuarto de longitud de onda. Cruzando la pelcula dos veces se obtiene un desfase de que, al sumarse al desplazamiento de resultante de la reflexin, vuelve a poner los dos rayos en fase.

Fig1.franjas de una pelcula en forma de cua

3. Tensin superficial

Fig2. Efectos de la tensin superficial. Es la resistencia de los lquidos a cualquier fuerza que tiende a expandir su superficie .Es la propiedad que tiende a halar a las molculas de la superficie de un lquido hacia su interior, debido a una reduccin de temperatura. La superficie de cualquier lquido se comporta como si sobre esta existe una membrana a tensin. A este fenmeno se le conoce como tensin superficial. La tensin superficial de un liquido esta asociada a la cantidad de energa necesaria para aumentar su superficie por una unidad de rea. La tensin superficial es causada por efectos de las fuerzas intermoleculares que existen en al interface .la tensin superficial depende de la naturaleza del liquido, del medio que el rodea y de ls temperatura. Lquidos cuyas molculas cuyas molculas tenga fuerzas de atraccin intermoleculares fuertes tendrn tensin superficial elevada.

Fig3. Efecto de la tensin superficial en un lquido.

4. Tcnica squash``

de

aplastamiento

Esta tcnica de extensin consiste en los siguientes pasos: 1) Poner el material en forma de gota en uno de los extremos del porta muestra. 2) Apoyar sin ejercer mucha presin un segundo porta muestra por una de sus caras y en sentido perpendicular al primero. 3) Con un movimiento rpido, deslizar el segundo porta muestra sobre el primero.

Fig4. Tcnica de squash.

Fig5.tcnica carbono

de

recubrimiento

con

5. Tcnica de recubrimiento con carbono 6. Parlodion

En el caso de precisarse un anlisis elemental en una muestra no conductora es necesario recubrir la superficie de un elemento lo ms transparente posible a los RX. Este elemento es el carbono. Uno de los tipos de metalizadores de carbono se muestra esquemticamente en el grfico. Consiste en dos electrodos conectados a una fuente de corriente alterna de bajo voltaje y alta intensidad entre los que se intercala una barra de carbono terminada en una punta afilada. Al pasar la corriente, la punta de la barra se va evaporando, de forma que roca la muestra con una fina capa de carbono. La punta va acoplada a un muelle que la mantiene en todo momento en contacto con el otro electrodo. Todo el conjunto est encerrado en vaco con el fin de facilitar la deposicin de la pelcula de carbono sobre la muestra.

Este es el nitrato de celulosa preferido para pelculas de soporte TEM y la fabricacin de rplicas. Parlodion es fabricado por nitracin (con cido ntrico) y sulfatacin (con cido sulfrico) relativamente algodn ordinario que sea (como resultado de la adicin de nitratos solubles y los grupos sulfato) soluble. Cuando se seca, los slidos convertirse en lo que se conoce como "algodn plvora" debido a su uso original como la plvora. Aspecto: Amarillo-blanco Frmula: C 12 H 16 N 4 O 18 Olor: Ninguno reportado Solubilidad en agua: Insoluble CAS # 9004-70-0 N RTECS QW0970000 Gravedad Especfica: 1.66 a 20 C/4C Punto de fusin: No disponible ONU 1325 Clase de peligro: 4.1 Slidos inflamables, grupo de embalaje II

Fig6. Frascos de Parlodion.

Fig7. Estructura acetona

molecular

de

la

Otros nombres: dimetilcetona 7. Acetona La acetona o propanona es un compuesto qumico de frmula qumica CH3(CO)CH3 del grupo de las cetonas que se encuentra naturalmente en el medio ambiente. A temperatura ambiente se presenta como un lquido incoloro de olor caracterstico. Se evapora fcilmente, es inflamable y es soluble en agua. La acetona sintetizada se usa en la fabricacin de plsticos, fibras, medicamentos y otros productos qumicos, as como disolvente de otras sustancias qumicas. Acetona -cetopropano Formula semidesarrollada:CH3(CO)CH3 Formula molecular: C3H6O

8. Parafilm Parafilm es un plstico de parafina d cine con un papel de apoyo producidos por la empresa Pechiney Plastic Packaging , con sede en Chicago, Illinois utiliza sobre todo en lo laboratorios . Es comnmente usado para sellar o proteccin de los buques (por ejemplo, frascos o cubetas). Es dctil, m aleable, resistente al agua , sin olor , termoplstico , semi-transparente y coherente . Tambin se utiliza para sellar an ms un recipiente con tapa contra la humedad y la contaminacin del aire para el almacenamiento a largo

plazo. Sin embargo, tambin afirm que Parafilm descompone con el tiempo de exposicin al aire y la luz y por lo tanto no sirve como un sellador a largo plazo.

Fig8. Parafilm.

10. Materiales Vasija petri Agua destilada Acetona o tiner Portamuestras laminas Papel toalla Pipeta Pasteur Parlodion Lmpara Parafilm Guantes, cubre bocas.

11. Parte experimental Lo primero que debemos hacer para obtener membranas de laboratorio es trabajar con mucha limpieza, usar guantes ,

cubre bocas, tener las manos limpias. Lo segundo a hacer es disolver el Parlodion en acetona, para obtener otro material disuelto tal que la concentracin sea la adecuada. Se llena agua en al vasija casi lleno y ahora usamos un lmpara (para la observacin de la membrana). Con ayuda de la pipeta se saca liquido de Parlodion disuelta y luego con cuidado se suelta en la laminas y se tapa , una lamina encima de la otra, acto seguido se deslizan una sobre otra ,despus quitamos la lamina de encima y lo que queda en la lamina inferior la sumergimos , con ayuda de la pinzas, en agua, de poco en poco , y vemos como la membrana que yace sobre la lamina se va desprendiendo y comienza a flotar sobre el agua. La membrana se desprende debido a la tensin superficial. Sumergimos de manera inclinada la lamina con al membrana para q poco a apoco esta se vaya desprendiendo de la lamina. Con la membrana flotando sobre el agua, se toma una rejilla y se llena sobre la membrana, en los que los lugares sean del dorado al verde. Ahora usamos el Parafilm plano, se corta un pedazo, ms grande que la membrana. Se inunda la membrana completamente de agua, ms arriba del borde.

Se saca la cubierta del Parafilm, se le hace un pequeo arco y se le coloca encima de la membrana con rejilla. Hacemos que lentamente el Parafilm comience a mojarse y con eso capturamos la membrana con la rejilla, luego jalamos el Parafilm con cuidado. Esperamos a que seque el agua de la membrana. Una vez seco se corta la rejilla con la membrana usando la pinza de precisin. Mtodo de tensin superficial Se coge dos centmetros de Parlodion. Con la pipeta se echa el Parlodion en el agua y debido a la tensin superficial se forma la membrana. Y despus como en el caso anterior extraemos la membrana con cuidado con ayuda del Parafilm. Dejamos a secar.

podemos colocar la rejilla y posteriormente la muestra sobre ese hueco, de ese modo tendramos una imagen pura sin la membrana.

13. Conclusiones o discusiones De los tres mtodos que estudiamos solo el del squash nos result, tratamos de hacerlo por el mtodo de tensin superficial, pero debido a factores externos no se logro. Los factores q debemos de tener en cuenta son al temperatura ambiente la cual debe ser de 20 grados Celsius. Otro factor tambin pudo ser la concentracin del Parlodion, la cual no era la adecuada.

12. Observaciones Para realizar la experiencia debemos hacerlo siguiendo las normas de limpieza ya antes mencionadas. Al momento de tratar con la membrana debemos estar en completo silencio, debido a que en la boca poseemos grmenes. En la disolucin del Parlodion, podemos usar tiner o acetona. Puede haber casos en que la membrana nos salga con huecos,

14. referencias
1)

http://en.wikipedia.org/wiki/Parafilm

2) http://translate.google.com.pe/translate?hl=es&sl=en&u=http://en.wikipedia.org/ wiki/Parafilm&ei=bz2vTvS3LZTbtwesxPmpAg&sa=X&oi=translate&ct=result &resnum=1&ved=0CB4Q7gEwAA&prev=/search%3Fq%3Dparafil%2Bwikipe dia%26hl%3Des%26biw%3D1024%26bih%3D653%26prmd%3Dimvns 3) http://es.scribd.com/doc/6091432/3Procesado-de-Muestras 4) http://www.2spi.com/catalog/submat/sup_film4.shtml 5) http://quimicageneral1parl2.blogspot.com/2010/12/estados-fisicos-de-lamateria.html 6) ptica, tercera edicin, Eugene hecht, Addison wesley.