Contaminao por Campylobacter sp atravs do consumo de ovos MAX SIQUEIRA DA SILVA1; DAISE APARECIDA ROSSI2;

RESUMO Campylobacter sp uma bactria Gram negativa, microerfila, termotolerante e reconhecida como uma das principais causas de gastrenterite humana de origem alimentar. Dentre os alimentos veiculadores desses microrganismos, a carne de frango tem sido a mais relacionada, porm, h poucos estudos sobre sua prevalncia em ovos. Este estudo objetivou verificar a presena de Campylobacter sp no contedo interno de ovos de poedeiras com swabs cloacais positivos. Foram realizadas anlises microbiolgicas em swabs cloacais de 80 poedeiras. Foram coletados e analisados 99 ovos das aves positivas. Das 90 poedeiras pesquisadas, 12 (13,33%) foram positivas em swabs cloacais, mas no houve positividade nos ovos. As caractersticas fisiolgicas das galinhas, dos ovos e da Campylobacter sp so favorveis entrada e sobrevivncia da bactria nos ovos, mas neste estudo, nenhuma positividade foi encontrada na gema. Esse resultado indica que a contaminao de humanos por meio do consumo de ovos , provavelmente, um evento raro. Palavras chaves: Campylobacter, ovos, epidemiologia.

1 Acadmico da Faculdade de Medicina Veterinria da Universidade Federal de Uberlndia. Av. Cear, s/n., Bloco 2D sala 43, Campus Umuarama, Uberlndia-MG.

maxssilva@yahoo.com.br 2 Profa. Dra. do Programa de Ps-graduao em Cincias Veterinrias da Universidade Federal de Uberlndia. Av. Cear, s/n., Bloco 2D sala 43, Campus Umuarama, UberlndiaMG daiser@umuarama.ufu.br

2 SUMARY

Contamination for Campylobacter sp through the egg consumption

Campylobacter sp is a Gram negative bacterium, microaerophilic, thermotolerating and known as one of the main causes of food-borne human infections. Among the foods that carry these microorganisms the chicken stands out however, it has few research about the prevalence in eggs. This research aims to verify the presence of Campylobacter sp in eggs yolk from positive cloacal swab laying hens. Microbiological analyses were made on cloacal swabs of 90 layers. The eggs of the positive birds, total of 99, had been analyzed. Out of the 90 researched layers, 12 (13.33%) were positive on cloacal swabs, however the eggs were not positive. The physiological characteristics of the birds, their eggs and Campylobacter sp are favorable to the entrance and survival of the bacterium in the eggs, but in this study, no positive result was found in the yolk. This result indicates that the contamination of human beings by means of the egg consumption is probably, an event rare.

Key words: Campylobacter, eggs, epidemiology.

1. INTRODUO

refere s exportaes, o Brasil fechou o ano de 2005, exportando 2,84 mil

O Brasil visto hoje no cenrio mundial, como sendo responsvel pela quarta maior produo de carne de frango, fechando o ano de 2005 com uma produo total de 10,2 mil toneladas de carne. No que se

toneladas de carne de frango, conferindo ao pas o ttulo de maior exportador de carne de frango.(ABEF, 2006) O Brasil considerado atualmente, como sendo detentor de um modelo de avicultura

3 avanada, por possuir um controle rgido de todo o modelo de produo aviria. O controle abrange desde a produo de matrias primas para rao at a fase de distribuio e venda dos produtos algum tipo de doena de origem alimentar, levando a 325.000 hospitalizaes e 5.200 mortes (FOOD AND DRUG

ADMINISTRATION, 2002). Na avicultura moderna, tem se dado mais ateno a alguns patgenos de maior prevalncia, como a Escherichia coli, Salmonella spp, Yersinia, Pasteurella, e atualmente, algumas bactrias emergentes

derivados de aves e possui ainda um controle higinico sanitrio eficiente, que analisa todos os produtos, sejam eles para o mercado interno ou externo. Apesar do grande existem de controle sanitrio que

vem sendo estudadas, como por exemplo, Campylobacter. Campylobacter sp a primeira causa de gastrenterite em humanos nos Estados Unidos e em outros pases desenvolvidos (FRIEDMAN et al., 2000). No Laboratrio clnico Fleury, So Paulo, Brasil o segundo enteropatgeno bacteriano mais isolado (SCARCELLI, 1998). Campylobacter sp geralmente so

brasileiro, necessitam estudos,

patgenos e

constantes

maiores que

principalmente,

aqueles

causam doenas em humanos. Os produtos de origem animal devem atender normas de segurana alimentar tanto para atender o mercado interno como o externo. A exigncia de um produto seguro

intensifica-se nos pases desenvolvidos onde as doenas de origem alimentar so detectadas de forma mais eficiente,

colonizadoras comensais do organismo de aves, sendo que avestruzes so uma possvel exceo (BERNDSTON et al., 1996). O trato intestinal das aves

ampliando assim, a busca constante de um alimento livre de patgenos. Nos Estados Unidos, estima-se que anualmente 76 milhes de pessoas sejam acometidas por

domsticas tem sido demonstrado como o

4 principal reservatrio de Campylobacter jejuni (MACHADO et al., 1994). De acordo com AQUINO (1995), o gnero Campylobacter uma bactria gramnegativa em forma de bacilo, curvado, fino, mtil e de microaerfilo. relacionado Esse a diarria por ano, sendo reconhecida, portanto como um dos principais

patgenos de origem alimentar causadores de gastrenterite em humanos. Nos ltimos anos vrias pesquisas sobre a epidemiologia da campylobacteriose vm sendo realizadas em pases da Unio Europia e Estados Unidos. Shane (2002) cita que estudos vm sendo conduzidos inclusive em pases menos desenvolvidos como China, Mxico, Chile, Guatemala, Peru, Singapura, Libria, frica do Sul e Bangladesh. Em pases desenvolvidos, carne de frango tem sido relatada como

microrganismo contaminaes

alimentos,

principalmente os de origem aviria, em diversas partes do mundo. Segundo

MACHADO (1994), o trato intestinal das aves domsticas tem sido demonstrado como o principal reservatrio de

Campylobacter jejuni. Estima-se que nos Estados Unidos,

origem de

vrios

surtos

de

origem

anualmente 76 milhes de pessoas so vtimas de algum tipo de em infeco 325 mil

alimentar (SHANE, 1992), mas surtos devido a esses consumos no so bem documentados em pases subdesenvolvidos (SAKUMA 1992). O gnero Campylobacter considerado uma zoonose emergente, de distribuio mundial e responsvel por um alto ndice de contaminao humana, causando

alimentar,

culminando

hospitalizaes e 5,2 mil mortes. (FDA, 2002). Campylobacter sp a principal causa de gastroenterites em humanos nos Estados Unidos, e em outros paises desenvolvidos (FRIEDMAN et al., 2000). Blaser (1987) citou que Campylobacter sp est associada a 4 milhes de casos de

principalmente doenas entricas agudas de origem alimentar tanto em pases

5 desenvolvidos quanto nos pases em desenvolvimento. Alm disso, caseira, e tambm, para estratgias de controle da doena nos lotes de poedeiras. O propsito deste estudo foi verificar a presena de Campylobacter sp em ovos de poedeiras positivas em swabs cloacais e determinar o potencial risco de

Campylobacter jejuni um dos patgenos mais freqentemente encontrado e

estudado nos ltimos anos, pois induz a uma resposta imunolgica, que em alguns casos pode produzir uma reao cruzada, levando a uma polineuropatia

contaminao de humanos por consumo de ovos. 2.MATERIAL E MTODOS Positividade para Campylobacter sp nos lotes de poedeiras Em um lote de poedeiras de uma granja do

desmielinizante inflamatria aguda, de origem idioptica, conhecida com

Sndrome de Guillain Barr (TORRES et al., 2003). Nos ltimos anos, vrias pesquisas

estado de Minas Gerais, foram coletadas, com o auxlio de swab estril, amostras cloacais individuais de 90 aves com idade de 52 semanas. As aves foram

mostram o potencial risco de contaminao por Campylobacter atravs do consumo de carne de frango ou seus subprodutos. Porm, estudos relacionados

identificadas com uma anilha numerada na regio do tarso. em Cada gua swab foi

contaminao por meio do consumo de ovos no so freqentes. O melhor entendimento da contaminao humana por meio do consumo de ovos faz-se importante devido a fatores no raros como o consumo de ovos crus, principalmente em estabelecimentos que usam a maionese

acondicionado

peptonada

tamponada, identificado e enviado ao Laboratrio de Biotecnologia Animal da Faculdade de Medicina Veterinria da Universidade Federal de Uberlndia para anlise microbiolgica.

6 Aps 12 horas da coleta, 5mL da gua peptonada que acondicionava os swabs de cada ave foram enriquecidos em tubos contendo 50mL de caldo Bolton (Oxoid) suplementado com 5% de sangue de ovino hemolizado e mistura antibitica (20mg/L de cefoperazona de sdio (Oxoid), 20mg/L de vancomicina, 20g/L de de contraste de fase para verificar

motilidade de saca-rolha e colorao morfo-tinturial de Gram para verificar a morfologia tpica de bacilos curvos em forma de asa de gaivota. Campylobacter sp em ovos As aves positivas em swab cloacal foram separadas e seus ovos assepticamente coletados durante 14 dias. Esses ovos no foram submetidos a nenhum processo de desinfeco. Aps 12 horas da coleta, os ovos foram quebrados e cerca de 10mL da gema foi transferido para 50mL caldo Bolton

trimetropim, 50mg/L de cycloheximina). Esse material foi acondicionado em jarra para anaerobiose com gerador de

microaerofilia e incubado a 42C durante 24 horas. Aps enriquecimento, a cultura foi estriada em agar Brucella suplementado com a mesma mescla antibitica, sangue de ovino hemolizado e suplemento FBP (0,4 g/L de piruvato de sdio, 0,4 g/L de sulfato ferroso e 0,4 g/L de metassulfito de sdio). As placas foram incubadas a 37C por 48 horas em jarra para anaerobiose com gerador de microaerofilia. Colnias com morfologia tpica de

(Oxoid) suplementado com 5% de sangue de ovino hemolizado e a mescla antibitica (20mg/L de cefoperazona de sdio (Oxoid), 20mg/L de vancomicina, 20g/L de trimetropim, A 50mg/L mistura de foi

cycloheximina).

homogeneizada e incubada a 42C durante 24 horas em microarofilia. O plaqueamento foram e identificao de de

Campylobacter sp (cinzas, brilhantes e pequenas) foram submetidas microscopia

colnias

realizados

forma

7 idntica ao protocolo utilizado para o swab cloacal das poedeiras. 3.RESULTADOS E DISCUSSO Campylobacter sp foi detectada na cloaca de 12 das 90 poedeiras analisadas, com positividade de 13,33%. Durante os 14 dias de coleta foram colhidos 99 ovos. Nenhuma positividade foi encontrada nas gemas dos 99 ovos pesquisados. Esses achados so similares aos obtidos nos estudos de RABIE (1992) e ZAKI, REDA (1995) que tambm no encontraram nenhuma positividade Campylobacter em gema de ovos. DOYLE (1984) no encontrou a bactria no contedo interno dos ovos aps o contato com cultura de Campylobacter. Tambm BAKER (1987) no encontrou nenhuma positividade para Campylobacter jejuni, quando analisou 276 amostras de ovos provenientes de 23 granjas no estado de New York. Porm, MARUYAMA, desafiaram KATSUBE oralmente (1990) com Campylobacter sp foi encontrada em casca de ovos de galinhas por DOYLE (1984) e SHANKER et al. (1986) que detectaram 0,8% e 1% de positividade,

respectivamente, em matrizes positivas para Campylobacter jejuni. Nesse estudo, no foi pesquisada presena de

Campylobacter sp na casca dos ovos. SAHIN et al. (2003) demonstraram que a Campylobacter tem limitada capacidade de penetrar na casca do ovo ao no detectarem a bactria em ovos frescos de reprodutoras que eliminavam Campylobacter em fezes. O gnero Campylobacter possui 0,2m a 0,8m de largura por 0,5m a 5m de comprimento (VANDAMME, 2000),

tamanho significativamente menor que os poros da casca do ovo cuja media 11m a 12m. A temperatura da ave de 42C (SESTI et al., 2000) ideal para

sobrevivncia das trs principais espcies de importncia de na origem jejuni etiologia alimentar pode de e

codornas

gastrenterites Campylobacter

Campylobacter jejuni e recuperaram a bactria em 4% dos ovos.

estar

naturalmente presente em segmentos dos

8 tratos reprodutivos de lotes de galinhas comerciais (BUHR et al., 2002). Ainda, a bactria possui motilidade em movimentos de saca-rolha (AQUINO, 1995). Essas caractersticas fisiolgicas do ovo, da ave e da bactria levam a acreditar que possvel a entrada de Campylobacter sp para o interior de ovos. Poedeiras com swabs cloacal positiva provavelmente possuem fezes Os contribuir para evitar a entrada da bactria para o interior dos ovos. Esses fatos podem ter contribudo para que todos os ovos coletados tenham sido negativos para presena de Campylobacter sp, apesar de as poedeiras serem positivas. 4.CONCLUSO resultados que obtidos a nesse estudo de a

sugerem

capacidade

Campylobacter sp atingir e/ou sobreviver no interior dos ovos limitada em condies de campo. Assim, a

contaminando o ambiente o que poderia ser uma via de infeco para o interior do ovo. Porm, estudos realizados por SAHIN et al. (2003) em ovos de galinhas e MARUYAMA et al. (1995) em ovos de codorna, mostraram que a viabilidade de Campylobacter jejuni drasticamente diminuda quando a bactria inoculada dentro do albume. possvel que, no contedo substncia da ou clara, fator exista que alguma a

contaminao de humanos pelo consumo de ovos de galinhas oriundos de granjas com boas condies de manejo

provavelmente, um evento raro. 5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS AQUINO, M. H. C., FRANCO, R. M., TIBANA, A. Campylobacter jejuni na avicultura: importncia e mtodo de controle. Higiene Alimentar, v. 9, n.36, p.17-19, 1995.

impea

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