Universidad Tecnolgica de Panam Facultad de Ingeniera Elctrica Ciencias de los Materiales 1 Gregorio Mrquez 8-854-1915

Anlisis metalrgico Entre los anlisis metalrgicos tenemos: Microscopa ptica y anlisis de imagen Los microscopios siguen siendo hoy en da una de las ms valiosas herramientas con que se cuenta para llevar a cabo cualquier trabajo rutinario o de investigacin en el campo de las ciencias de la vida. En los ltimos aos, se han producido importantes avances en su diseo, a la vez que han aparecido nuevos tipos encaminados a dar respuesta a los problemas que se han ido planteando en la investigacin. Es de inters por tanto para todo aquel que necesite utilizar estos aparatos, conocer perfectamente sus tipos, prestaciones y manejo. Por otro lado, los resultados de las observaciones, que tiempo atrs se obtenan en forma de material micro fotogrfico impreso en soporte de papel o pelcula, actualmente han evolucionado al formato digital. Ello obliga a cambiar los clsicos sistemas analgicos de captura de imgenes por los digitales y al empleo de variadas aplicaciones informticas destinadas a la gestin y tratamiento de los archivos obtenidos, todo lo cual habr de ser tambin perfectamente conocido por los usuarios de estos equipos. Microscopa ptica: (o tambin sin tilde microscopia) es el conjunto de tcnicas y mtodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeez estn fuera del rango de resolucin del ojo normal. Si bien el microscopio es el elemento central de la microscopa, el uso del mismo se requiere para producir las imgenes adecuadas, de todo un conjunto de mtodos y tcnicas afines pero extrnsecas al aparato. Algunas de ellas son, tcnicas de preparacin y manejo de los objetos de estudio, tcnicas de salida, procesamiento, interpretacin y registro de imgenes, y de Caas. Exceptuando tcnicas especiales como las utilizadas en microscopio de fuerza atmica, microscopio de iones en campo y microscopio de efecto tnel, la microscopa generalmente implica la difraccin, reflexin o refraccin de algn tipo de radiacin incidente en el sujeto de estudio. Microscopa ptica (microscopa de luz clsica), consiste en hacer pasar luz visible de una fuente (difractada, reflejada o refractada en el sujeto de estudio) a travs de lentes pticos simples o mltiples, para lograr una vista ampliada de la muestra. La imagen resultante puede ser detectada directamente por el ojo humano, impresa en una placa fotogrfica o registrada y mostrada digitalmente (y eventualmente almacenada en algn soporte digital).

En la fig. mo1 puede verse un microscopio estereoscpico (adecuado principalmente para una visin binocular directa).

Microscopio usado en la Microscopa ptica

Anlisis de imagen: Se llama anlisis de imgenes a la extraccin de informacin derivada de sensores y representada grficamente en formato de dos o tres dimensiones, para lo cual se puede utilizar tanto anlisis visual como digital (procesamiento digital de imgenes). Abarca la fotografa en blanco y negro y color, infrarroja, imgenes satelitales, de radar, radar de alta definicin, ultrasonido, electrocardiogramas, electroencefalogramas, resonancia magntica, sismogramas y otros. La experimentacin con las imgenes pticas resultara en la explotacin y la manipulacin de centenares de niveles de sombra, resultando en una mejor explotacin de la informacin obtenida. Los primeros en usar de esta nueva tecnologa seran de la inteligencia americana y los investigadores cientficos quienes refinaran esta tecnologa, resultando en la tomografa computarizada. Otra tecnologa seria la del ecocardiograma que hara posible el ver movimientos cardacos y el flujo cardaco. Otro adelanto seria la introduccin de la resonancia magntica cuyas imgenes revelaran anomalas en tejidos humanos y flujo sanguneos. Tambin se podra ver evidencia de danos en la espina dorsal y aun procesos neuroqumicos cerebrales. En el presente los cientficos estn explorando el uso de nuevas tecnologas que hagan uso de ms sectores del espectrum electromagntico como las imgenes de rayos X.

Anlisis de imagen de materiales

Diagrama de Fase En termodinmica y ciencia de materiales se denomina diagrama de fase, diagrama de equilibrio de fases o diagrama de estados de la materia, a la representacin grfica de las fronteras entre diferentes estados de la materia de un sistema, en funcin de variables elegidas para facilitar el estudio del mismo. Cuando en una de estas representaciones todas las fases corresponden a estados de agregacin diferentes se suele denominar diagrama de cambio de estado. Los diagramas de equilibrio son grficas que representan las fases y estado en que pueden estar diferentes concentraciones de materiales que forma una aleacin a distintas temperaturas. Dichas temperaturas van desde la temperatura por encima de la cual un material est en fase lquida hasta la temperatura ambiente y en que generalmente los materiales estn en estado slido. Informacin que podemos obtener de los diagramas de fase: 1. Conocer que fases estn presentes a diferentes composiciones y temperaturas bajo condiciones de enfriamiento lento (equilibrio). 2. Averiguar la solubilidad, en el estado slido y en el equilibrio, de un elemento (o compuesto) en otro. 3. Determinar la temperatura a la cual una aleacin enfriada bajo condiciones de equilibrio comienza a solidificar y la temperatura a la cual ocurre la solidificacin. 4. Conocer la temperatura a la cual comienzan a fundirse diferentes fases.

Anlisis por difraccin de rayos X Los rayos X interactan con los electrones que rodean los tomos por ser su longitud de onda del mismo orden de magnitud que el radio atmico. El haz de rayos X emergente tras esta interaccin contiene informacin sobre la posicin y tipo de tomos encontrados en su camino. Los cristales, gracias a su estructura peridica, dispersan elsticamente los haces de rayos X en ciertas direcciones y los amplifican por interferencia constructiva, originando un patrn de difraccin. Existen varios tipos de detectores especiales para observar y medir la intensidad y posicin de los rayos X difractados, y su anlisis posterior por medios matemticos permite obtener una representacin a escala atmica de los tomos y molculas del material estudiado. Max von Laue realiz los primeros experimentos de cristalografa de rayos X en 1912. Von Laue, William Henry Bragg y William Lawrence Braggdesarrollaron inicialmente la teora de difraccin de cristales, tarea a la que pronto se sumaron otros cientficos. A lo largo del siglo XX tuvieron lugar varios avances tericos y tcnicos, como la aparicin de los superordenadores y el uso de sincrotrones para la produccin de rayos X, que resultaron en un creciente capacidad del mtodo para determinar las propiedades estructurales de todo tipo de molculas: sales, materiales inorgnicos complejos, protenas y hasta componentes celulares como los ribosomas. Es posible trabajar con monocristales o con polvo microcristalino, consiguindose diferentes datos en ambos casos. Para las aplicaciones que requieren solo una caracterizacin precisa de los parmetros de la red cristalina, puede ser suficiente la difraccin de rayos X por polvo; para una dilucidacin precisa de las posiciones atmicas se prefiere trabajar con monocristales. La mayor limitacin de este mtodo es la necesidad de trabajar con sistemas cristalinos, por lo que no es aplicable a disoluciones, a sistemas biolgicos in vivo, a sistemas amorfos o a gases. En algunos casos, los rayos X pueden romper los enlaces qumicos que mantienen la integridad estructural, lo que resulta en un modelo distorsionado de la molcula estudiada. Este problema afecta especialmente a los materiales de inters biolgico.

Proceso de determinacin de la estructura de una molcula por cristalografa de rayos X

Primeros Experimentos La idea de que los cristales eran una repeticin peridica de un grupo de molculas ya exista anteriormente a que Wilhelm Conrad Rntgen descubriera los rayos-X en 1895. Aunque las distancias tpicas entre los planos de la red cristalina se desconocan, se saba que deban ser muy pequeas comparadas con la longitud de onda de la luz visible. Esto le dio al fsico alemn Max von Laue la idea de utilizar cristales de sulfato de cobre para determinar si los rayos X se componan de partculas u ondas: dedujo que, si fueran ondas, deberan generar un patrn de difraccin al atravesar los cristales. Los experimentos se realizaron en 1912, con la ayuda de Walter Friedrich y Paul Knipping, ambos antiguos estudiantes de Rntgen. Estos experimentos confirmaron la presencia de difraccin cristalina. Poco despus, los britnicos William Henry Bragg y William Lawrence Bragg (padre e hijo respectivamente) reprodujeron el experimento. W.L. Bragg explic la difraccin como la interferencia de los rayos X reflejados por el cristal, introduciendo la descripcin conocida desde entonces como la ley de Bragg. En 1913, Paul Ewald demostr que las dos interpretaciones de los resultados publicadas independientemente por von Laue y Bragg eran equivalentes. Von Laue recibi elpremio Nobel de Fsica en 1914 por su descubrimiento del fenmeno, y los Bragg recibieron el premio un ao ms tarde por su trabajo en las aplicaciones prcticas. Hacia el final de la dcada, se haba logrado determinar las longitudes de onda de los rayos X y la estructura de varios compuestos inorgnicos simples y se haban establecido las bases tericas de la tcnica gracias al trabajo de los ya mencionados investigadores, Charles Galton Darwin y Peter Debye, entre otros. El desarrollo de la tcnica: 1920-1960 El perodo entre 1920 y 1960 se caracteriz por importantes adelantos metodolgicos que propiciaron el empleo de la difraccin de rayos X para analizar estucturas de molculas ms complejas. Durante la dcada de los 20, los avances de la teora cuntica sirvieron para caracterizar ms precisamente la interaccin entre los rayos X y los tomos de los cristales; esto posibilit el anlisis correcto de la intensidad de la difraccin. En la misma poca aparecieron las tablas para determinar la simetra cristalina a partir de la distribucin de reflexiones en el patrn de difraccin y se empezaron a usar las series de Fourier para representar la distribucin de electrones en la red cristalina. Los desarrollos en la representacin matemtica de la densidad electrnica continuaron hasta la Segunda Guerra Mundial, facilitando la obtencin de las primeras estructuras de molculas orgnicas. En 1935, el cristalgrafo britnico Arthur Patterson descubri un truco matemtico para obtener las distancias interatmicas directamente a partir de los datos experimentales, lo que supuso un importante avance en el anlisis de la difraccin.

Entre los aos 40 y 60, surgieron otros procedimientos para la determinacin de estructuras, con especial nfasis en mtodos heursticos basados en el proceso de ensayo y error, que demostraron ser bastante robustos en combinacin con restricciones condicionantes basadas en las propiedades fsicas de una estructura correcta, como por ejemplo, que la densidad electrnica debe ser siempre positiva. En este perodo la cristalografa empez a adquirir importancia en el campo de la qumica orgnica, proceso que culmin con la determinacin en 1957 de la estructura de la vitamina B12, un proyecto liderado por Dorothy Hodgkin. Avances en cristalografa de macromolculas: 1960-1980 El evento de ms impacto durante las dcadas de los 60 y 70 fue el reconocimiento de la cristalografa de protenas y de molculas biolgicas en general como rea de investigacin clave en la biologa molecular. El ao 1962 marc un hito al otorgarse dos premios Nobel por los resultados obtenidos usando mtodos cristalogrficos en esta rea: El premio Nobel de Qumica fue concedido a Max Perutz y John Kendrew por sus estudios cristalogrficos de las protenashemoglobina y mioglobina y el premio Nobel de Medicina a Francis Crick, James Watson y Maurice Wilkins por descubrir que el ADN forma una doble hlice. En 1964 Dorothy Hodgkin tambin obtuvo el premio Nobel de Qumica por la determinacin de varias estructuras de importancia biolgica, como la penicilina y la vitamina B12, entre otras. Un adelanto que facilit en gran medida el xito de las tcnicas cristalogrficas tanto en los casos ms complejos como en el de molculas de menor tamao fue el desarrollo de ordenadores digitales; gracias a ellos fue posible usar programas para medir y analizar fcilmente los datos obtenidos en los experimentos en vez de realizar los laboriosos clculos manualmente. Sin embargo, al final de este perodo el estudio de protenas estaba an limitado por la ausencia de fuentes de rayos X intensos y el empleo de pelcula fotogrfica para medir los patrones de difraccin, lo que requera un largo proceso de revelado y digitalizacin de las imgenes. A consecuencia de estas limitaciones, y a pesar del reconocimiento generalizado del potencial de la cristalografa para estos experimentos, a finales de los aos 70 el Banco de Datos de Protenas solo contaba con unas sesenta entradas. Expansin y madurez: 1980-2010 Los tubos de rayos X, con sucesivas mejoras, se utilizaron como la fuente primordial de rayos X para los experimentos de cristalografa desde sus comienzos hasta la dcada de 1970, poca en la que se empez a experimentar con la radiacin sincrotrn de rayos X. Los sincrotrones dedicados exclusivamente a la produccin de rayos X aparecieron en los aos 80 y su nmero no ha dejado de aumentar desde entonces. En la primera dcada del siglo XXI se construyeron los primeros lseres de electrones libres de rayos-X, capaces de producir haces de luz pulsada de una intensidad de rdenes de magnitud mayor que en las fuentes de luz sincrotrn convencionales. La duracin de los pulsos de luz, del orden de femtosegundos ofrece la posibilidad de observar cambios en los cristales a escalas temporales inalcanzables anteriormente. Durante estos aos tambin se desarrollaron nuevos detectores bidimensionales o de rea, capaces de generar directamente una imagen digitalizada del patrn de difraccin. Estos detectores facilitaron la rpida medicin

y anlisis de la difraccin y sustituyeron totalmente a las placas fotogrficas usadas hasta entonces. Estos avances tecnolgicos, unidos al incremento de la capacidad de los ordenadores modernos para almacenar y procesar datos, han permitido llevar a cabo experimentos antao irrealizables, y han desembocado en un aumento exponencial del nmero de estructuras elucidadas por mtodos cristalogrficos. Los avances ms notables han tenido lugar en el rea de las macromolculas orgnicas, con ms de 88 000 estructuras depositadas en el Banco de Datos de Protenas al comienzo de 2013. La obtencin en 2000 de la estructura del ribosoma, un enorme complejo de cidos nucledos y varias protenas donde tiene lugar la sntesis de protenas en la clula, ilustra las capacidades que ha alcanzado la tcnica.