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uma tcnica de colorao para diferenciao de microrganismos atravs das cores, para serem observados em microscpio ptico.

A tcnica recebeu este nome em homenagem ao mdico dinamarqus Hans Cristian Joaquim Gram. Quando as estruturas celulares so cobertas por corante violeta-de-metila, todas se coram em roxo. Com a adio de Soluto de Lugol, ocorre formao do complexo iodo-pararosanilina, que tem como propriedade fixar o corante primrio nas estruturas coradas. Algumas estruturas perdem a cor violeta rapidamente, quando ocorre a lavagem, com lcool etlico, enquanto outras perdem sua colorao mais devagar ou a perdem completamente. O corante safranina colore novamente as estruturas que foram descoradas. As bactrias Gram-positivas, que tm a parede celular composta por murena (peptdeoglicano peptdeo de cido n-acetil murmico), durante o processo de descolorao com lcool etlico, retm o corante, permanecendo com a colorao conferida pelo corante primrio (roxo). J as bactrias Gram-negativas com parede celular composta predominantemente por cidos graxos (lipopolissacardeos e lipoprotenas), perdem o complexo iodo-pararosanilina, so incapazes de reter o violeta de Genciana, assumindo a cor do corante de fundo (vermelha). So as diferenas da estrutura da parede bacteriana, principalmente com relao espessura da camada de peptidoglicano, que responsvel pelo diferente comportamento das bactrias diante da colorao de Gram. 3.MATERIAIS, VIDRARIAS E UTENSLIOS 10 Placas de Petri .dimetro: 12cm Papel de po Tesoura Lpis 10 Papis de filtro Barbante 1 Becker de 500mL 1 Becker de 250mL de polietileno 1 Espatula tipo canaleta 1 Proveta de 200mL 1 Pissete de 500mL Bico de Bunsen Fsforo 1 Trip 1 Tela de amianto Fita zebrada Fita crepe 1 Frasco de meio de cultivo 25mL com boca rosqueada 10 Tubos de ensaio 10x150mm com boca rosqueada 10 Tampas para tubos de ensaio 10x150mm 1 Estante para tubos de ensaio 10 Tubos de Durhan 5x40 mm 2 Bastes de vidro 1 Pipeta graduada de 10mL 1 Micropipetador 1 Becker de alumnio de 500mL

10 Cotonetes estreis Caneta de retroprojetor 2 Alas de Nichrome 1 Bero para colorao de lminas 1 Cronmetro 1 Suporte de madeiras para lminas 8 Cubas para colorao de lminas 3 Lminas 26x76mm 3 Lamnulas 4.EQUIPAMENTOS: Balana semi analtica Estufa bacteriolgica Autoclave Microscpio ptico binocular 110V, ocular de 10x 5.REAGENTES USADOS: Sabonete lquido LUX lcool gel 70% Spray antissptico HERTZ leo de imerso Soluo salina NaCl 0,5%m/v Soluo de cristal violeta 1%m/v Soluo de iodo 1%m/v (lugol) Soluo de lcool acetonado 1:1 Soluo de fucsina 1%m/v gua da torneira 6.MEIOS DE CULTIVO: gar para contagem de microrganismos (A.P.C) Composio (g/L) Peptona de casena 5,0g Extrato de levedura 2,5g Dextrose 1,0g gar 15,0g 23,5g/L pH = 7

Caldo Verde Brilhante (C.V.B) Composio (g/L)

Peptona de casena Lactose Sais biliares Verde brilhante pH ? 7.AMOSTRAS

10g 10g 20g 0,0133g

Ar atmosfrico Dedo sujo e limpo Fio de cabelo Tela do celular Fruta Tomate Banheiro feminino Caneta