Dr. Francisco Gonzalo Bolvar Zapata Investigador Emrito, Instituto de Biotecnologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico.

Miembro de El Colegio Nacional

La Biotecnologa es una multidisciplina, sustentada en disciplinas tradicionales, como la bioqumica, la gentica, la ingeniera bioqumica que permite estudiar, modificar y utilizar los sistemas biolgicos (microbios, plantas y animales). Con la aplicacin de la biotecnologa se busca hacer un uso responsable y sustentable de la biodiversidad, mediante el desarrollo de tecnologa eficaz, limpia y competitiva, para facilitar la solucin de problemas importantes en los sectores de la salud, el agropecuario, el industrial y medio ambiente.

El ADN: la estructura del material gentico doble hlice complementaria es la misma en todos los seres vivos y en lo virus. Esta caracterstica es lo que permite la transferencia horizontal del material gentico entre distintos organismos

El ADN es una macromolcula formada por la unin de miles de nucletidos. El genoma humano tiene 3350 millones de pares de nucletidos en los 24 cromosomas.

Gene

DNA Cromosomas

El gene es un segmento de la molcula de ADN que forman los cromosomas. Cada gene codifica para una protena.

Con el desarrollo de las tcnicas de ingeniera gentica, la biotecnologa alcanza una nueva dimensin. Con estas metodologas es posible aislar genes especficos de un organismo y transferirlo a otro, generndose as los organismos genticamente modificados (OGM) o transgnicos.

Esquema general para la construccin de clulas y plantas transgnicas

Los transgnicos se disean y construyen para generar una nueva capacidad en el organismo receptor, la cual reside en el material gentico transferido. El objetivo de la construccin de OGMs es el de ayudar a resolver problemas en los diferentes sectores, con la certeza de que estos |organismos son seres vivos naturales y por ello, tienen un menor impacto en el medio ambiente, biodiversidad y en la salud humana y animal.

Los transgnicos han sido utilizados comercialmente desde hace casi 30 aos con el propsito de construir organismos que producen protenas idnticas a las humanas.

La produccin de interfern humano

Existen en las farmacias, incluyendo las de Mxico, medicamentos de origen transgnico o recombinante como la insulina, interferones y anticoagulantes de la sangre, que se utilizan para contender con varias problemticas de la salud humana y que se producen comercialmente con microorganismos transgnicos. Sin estos transgnicos no sera posible producir las cantidades requeridas por el mercado, ya que a partir de tejidos y fluidos humanos como la sangre, no se obtienen ms que cantidades muy pequeas. As, los transgnicos que producen estas protenas idnticas a las humanas, no pueden ser sustituidos por ninguna otra tecnologa. Desde 1982, la utilizacin de las protenas recombinantes transgnicas ha contribuido significativamente a mantener y mejorar la salud humana.

El uso desde hace muchos aos de protenas recombinantes tambin ha tenido gran impacto en la elaboracin de alimentos, como las enzimas quimosina, en la produccin de quesos; amilasas en la produccin de jarabe; pectinasas, para la elaboracin de jugos; glucosa oxidasas y catalasas para la deshidratacin de huevo; lipasas para fabricacin de aceites de pescado; glucosa isomerasas, para la produccin de jarabes glucosados; glucanasas en la produccin de cerveza; entre las ms importantes

Las plantas transgnicas se cultivan desde 1996, y 15 aos despus se siguen usando sin que hasta la fecha se hayan reportado efectos nocivos a la salud humana o animal ni a la biodiversidad. Por el contrario, han permitido reducir el uso de pesticidas lo que se ha traducido en un menor impacto en el ambiente, a diferencia de lo que ha sucedido con la aplicacin de productos qumicos, algunos de los cuales tienen efectos carcingenos. El maz y la soya transgnicos se consumen en muchos pases y cada vez es mayor el nmero de hectreas que se cultivan con plantas transgnicas.

Produccin de -caroteno en arroz transgnico

La introduccin de tres diferentes genes heterlogos en arroz se llev a cabo utilizando el sistema de Agrobacterium. Las enzimas codificadas por los tres genes introducidos transforman el geranil difosfato en b-caroteno y lo acumulan en el endospermo, produciendo el color amarillo del llamado arroz dorado. El -caroteno puede ser transformado en vitamina A por el cuerpo humano y aliviar deficiencias de esta vitamina que causan ceguera.
(Cortesa del doctor Ingo Potrikus.)

Uso responsable de los OGMs

El Comit de Biotecnologa de la Academia Mexicana de Ciencias ha editado el libro: Por un uso responsable de los organismos genticamente modificados en el cual se sealan los argumentos y conocimientos cientficos que sustentan el bajo riesgo de los OGMs, por ser organismos construidos con procesos que ocurren cotidianamente en la naturaleza.

Ingeniera de vas metablicas y construccin de organismos modificados con capacidades mejoradas para la produccin de compuestos de inters comercial

El uso del conocimiento en la gentica y fisiologa de los organismos ha permitido el diseo y construccin de organismos modificados por ingeniera gentica y de vas metablicas (IVM). La IVM representa una capacidad mas sofisticada para modificar a los seres vivos; permite a travs de diferentes estrategias modular la dosis gnica de ciertos genes, cancelar los productos de otros y canalizar el flujo de los nutrientes, en especial de carbono haca la biosntesis de compuestos como los aromticos, que tiene gran importancia comercial.

Produccin microbiana, por biosntesis de compuestos aromticos de importancia

Metabolismo central de carbono y va de sntesis de compuestos aromticos

en la bacteria Escherichia coli JM101.

Metabolismo central de carbono Glucosa Piruvato PTS Glucosa-6-P Gluclisis Va de las pentosas fosfato

Eritrosa-4-P

50%
2 Fosfoenol piruvato

5%

DAHP

Shikimato

Corismato

Phe Tyr Trp

Va del shikimato

Piruvato

TCA

En nuestro grupo de investigacin se han desarrollado estrategias para la optimizacin de cepas bacterianas para canalizar la fuente de carbono hacia la produccin de compuestos aromticos. Entre estas modificaciones estn el desarrollo de cepas carentes del sistema PTS y evolucionadas en cultivos en el laboratorio para generar microorganismos que crecen rpido en glucosa.

La cepa evolucionada de E. coli PB12, carente del sistema PTS ha sido utilizada en nuestro grupo de trabajo para obtener una cepa sobreproductora del metabolito shikimato como precursor para la sntesis de compuestos antivirales

Procesodesntesis qumica

Shikimato Oseltamivir fosfato Inhibidor de la neuraminidasa tipo I (NI) de virus de influenza estacional A y B, virus de influenza aviar (H5N1) y de virus de influenza humana A/H1N1

Se han aislado genes del metabolismo central de carbono (aroGfbr, tktA) y de la va del shikmato (aroB, aroE) que se han incorporado en plsmidos para incrementar la dosis de estos genes. Tambin se han interrumpido otros genes (aroK , aroL, pykF, pykA) canalizar e incrementar el flujo de carbono haca la sntesis de shikimato.

Produccin de shikimato en la cepa evolucionada de E. coli PB12.SA22

Produccin Condiciones de cultivo (g SHK/L) Lote 0.5 L medio mineral+25 g/L glucosa+ 15g/L extracto de levadura (YE) Lote 300 L medio mineral+25 g/L glucosa+ 15g/L YE Lote alimentado medio mineral + 140 g/L glucosa, alimentando 500 g YE *Valor ms alto reportado (Escalante et al., 2010) ** Zuloaga D. (Grupo OT Ramrez, IBT-UNAM) 28.7 0.2** 13.4 0.28** 7.05 (mol SHK/mol glc) 0.29* Rendimiento

Mejoramiento de la produccin de shikimato en la cepa evolucionada de E. coli PB12

Incremento de la capacidad de transporte de glucosa por modificacin del promotor de GalP. resultados preliminares: Produccin de 13 g SHK/L. Incorporacin de los genes aroGfbr, tktA, aroB, aroE, aroD, zwf y sin el gen lacI en un solo plsmido bajo un promotor fuerte. Resultados preliminares: Produccin de 37 g SHK/L Combinacines de (a) + (b) con condiciones de fermentacin lote y lote alimentada optimizadas.

a.

b.

c.

La biotecnologa y los OGMs usados responsablemente representan una oportunidad y una herramienta muy poderosa para dar valor agregado a los productos de la biodiversidad mexicana, que es una de nuestras mayores riquezas, y para coadyuvar a resolver problemas globales y nacionales extraordinarios a los que nos enfrentamos en este siglo.