ESPECTROFOTOMETRA UV-VISIBLE

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1. Propiedades de la luz 2. Absorcin de luz 2.1. Fenmeno de la absorcin 2.2. Espectros de absorcin molecular 2.3. Tipos de transiciones electrnicas 3. Ley de Lambert-Beer 4. Instrumentacin 4.1. Fuente de radiacin 4.2. Selector de longitud de onda 4.3. Recipientes para muestra 4.4. Detector

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1. Propiedades de la luz

longitud de onda ()

Onda

= c Longitud de onda x Frecuencia = velocidad de la luz

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1. Propiedades de la luz ESPECTRO ELECTROMAGNTICO Energa Longitud de onda

Luz visible

Longitud de onda (nm)

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2.1. Fenmeno de absorcin de radiacin

2. Absorcin de luz

Estados excitados

Estado fundamental

- Cuando una molcula absorbe luz aumenta su energa - Cuando una molcula emite luz disminuye su energa
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Energa

ABSORCIN DE RADIACIN (h)

EMISIN DE RADIACIN (h)

Rotura de enlace e ionizacin

e-

excitacin electrnica

vibracin

2. Absorcin de luz

Luz visible

Longitud de onda (nm)

Energa

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2.2. Espectros de absorcin molecular

2. Absorcin de luz

V2
Niveles rotacionales Niveles vibracionales

V1 Vo
Transiciones electrnicas

S1

V1
h (UV-Vis)

S0

V0
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Energa

2. Absorcin de luz
S2

S1

Transiciones electrnicas y espectros de los tomos

Transiciones electrnicas y espectros UV-Visible en molculas

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2. Absorcin de luz

ESPECTRO DE ABSORCIN

A
Paracetamol

0.8

0.6

0.4

Propifenazona

0.2

c. acetilsaliclico
0.0 200 250

Cafena
300

Longitud de onda (nm)

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350

2. Absorcin de luz

*
AZUL DE BROMOFENOL (max = 614 nm)

Luz blanca

Luz azul

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2. Absorcin de luz

Espectro de absorcin de la clorofila en la regin visible. Obsrvese que absorbe en las regiones del rojo y del azul.

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1. Propiedades de la luz 2. Absorcin de luz 2.1. Fenmeno de la absorcin 2.2. Espectros de absorcin molecular 2.3. Tipos de transiciones electrnicas 3. Ley de Lambert-Beer 4. Instrumentacin 4.1. Fuente de radiacin 4.2. Selector de longitud de onda 4.3. Recipientes para muestra 4.4. Detector

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3. Ley de Lambert-Beer

Muestra Fuente de luz Selector de longitud de onda Io I Detector de luz

I Io

b Instrumentacin para medir absorcin de luz

I0 (intensidad radiante)

I (intensidad transmitida)

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3. Ley de Lambert-Beer

Io

b
- Transmitancia T = I / Io

(fraccin de la luz incidente que sale de la muestra)

vara entre 0 y 1

- Absorbancia A = - log T = log (Io / I)

Ley de Lambert-Beer
: coeficiente de absortividad molar (l mol-1 cm-1) b : espesor de la clula (cm) c : concentracin (moles/l)

A = b c

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1. Propiedades de la luz 2. Absorcin de luz 2.1. Fenmeno de la absorcin 2.2. Espectros de absorcin molecular 2.3. Tipos de transiciones electrnicas 3. Ley de Lambert-Beer 4. Instrumentacin 4.1. Fuente de radiacin 4.2. Selector de longitud de onda 4.3. Recipientes para muestra 4.4. Detector

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4. Instrumentacin Espectrofotmetro

Muestra Fuente de luz Selector de longitud de onda Io I Detector de luz

Instrumento para medir intensidad de radiacin

Fuente de radiacin Sistema de seleccin de longitud de onda Recipiente para la muestra Detector
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MONOCROMADOR

4. Instrumentacin

rendija entrada

fuente espejos red o prisma detector rendija salida

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MONOCROMADOR DE RED

4. Instrumentacin

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4.3. Recipientes de muestra

4. Instrumentacin

UV : cuarzo Material Visible: cuarzo o vidrio

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4. Instrumentacin

Macro-clulas

Clulas semi-micro

UV

Vis

UV

Vis

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4. Instrumentacin

Esquema de un espectrofotmetro de haz simple

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4. Instrumentacin ESPECTROFOTMETROS, FOTMETROS, COLORMETROS

Espectrofotmetro de doble haz

Espectrofotmetros porttiles
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