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ESPECTROFOTOMETRA UV-VISIBLE

M Luisa Fernndez de Crdova Universidad de Jan

1. Propiedades de la luz 2. Absorcin de luz 2.1. Fenmeno de la absorcin 2.2. Espectros de absorcin molecular 2.3. Tipos de transiciones electrnicas 3. Ley de Lambert-Beer 4. Instrumentacin 4.1. Fuente de radiacin 4.2. Selector de longitud de onda 4.3. Recipientes para muestra 4.4. Detector

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1. Propiedades de la luz

longitud de onda ()

Onda

= c Longitud de onda x Frecuencia = velocidad de la luz

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1. Propiedades de la luz ESPECTRO ELECTROMAGNTICO Energa Longitud de onda

Luz visible

Longitud de onda (nm)

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2.1. Fenmeno de absorcin de radiacin

2. Absorcin de luz

Estados excitados

Estado fundamental

- Cuando una molcula absorbe luz aumenta su energa - Cuando una molcula emite luz disminuye su energa
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Energa

ABSORCIN DE RADIACIN (h)

EMISIN DE RADIACIN (h)

Rotura de enlace e ionizacin

e-

excitacin electrnica

vibracin

2. Absorcin de luz

Luz visible

Longitud de onda (nm)

Energa

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2.2. Espectros de absorcin molecular

2. Absorcin de luz

V2
Niveles rotacionales Niveles vibracionales

V1 Vo
Transiciones electrnicas

S1

V1
h (UV-Vis)

S0

V0
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Energa

2. Absorcin de luz
S2

S1

Transiciones electrnicas y espectros de los tomos

Transiciones electrnicas y espectros UV-Visible en molculas

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2. Absorcin de luz

ESPECTRO DE ABSORCIN

A
Paracetamol

0.8

0.6

0.4

Propifenazona

0.2

c. acetilsaliclico
0.0 200 250

Cafena
300

Longitud de onda (nm)


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350

2. Absorcin de luz

*
AZUL DE BROMOFENOL (max = 614 nm)

Luz blanca

Luz azul

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2. Absorcin de luz

Espectro de absorcin de la clorofila en la regin visible. Obsrvese que absorbe en las regiones del rojo y del azul.

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1. Propiedades de la luz 2. Absorcin de luz 2.1. Fenmeno de la absorcin 2.2. Espectros de absorcin molecular 2.3. Tipos de transiciones electrnicas 3. Ley de Lambert-Beer 4. Instrumentacin 4.1. Fuente de radiacin 4.2. Selector de longitud de onda 4.3. Recipientes para muestra 4.4. Detector

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3. Ley de Lambert-Beer

Muestra Fuente de luz Selector de longitud de onda Io I Detector de luz

I Io

b Instrumentacin para medir absorcin de luz

I0 (intensidad radiante)

I (intensidad transmitida)

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3. Ley de Lambert-Beer

Io

b
- Transmitancia T = I / Io

(fraccin de la luz incidente que sale de la muestra)

vara entre 0 y 1

- Absorbancia A = - log T = log (Io / I)

Ley de Lambert-Beer
: coeficiente de absortividad molar (l mol-1 cm-1) b : espesor de la clula (cm) c : concentracin (moles/l)

A = b c

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1. Propiedades de la luz 2. Absorcin de luz 2.1. Fenmeno de la absorcin 2.2. Espectros de absorcin molecular 2.3. Tipos de transiciones electrnicas 3. Ley de Lambert-Beer 4. Instrumentacin 4.1. Fuente de radiacin 4.2. Selector de longitud de onda 4.3. Recipientes para muestra 4.4. Detector

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4. Instrumentacin Espectrofotmetro

Muestra Fuente de luz Selector de longitud de onda Io I Detector de luz

Instrumento para medir intensidad de radiacin

Fuente de radiacin Sistema de seleccin de longitud de onda Recipiente para la muestra Detector
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MONOCROMADOR

4. Instrumentacin

rendija entrada

fuente espejos red o prisma detector rendija salida


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MONOCROMADOR DE RED

4. Instrumentacin

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4.3. Recipientes de muestra

4. Instrumentacin

UV : cuarzo Material Visible: cuarzo o vidrio

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4. Instrumentacin

Macro-clulas

Clulas semi-micro

UV

Vis

UV

Vis

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4. Instrumentacin

Esquema de un espectrofotmetro de haz simple

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4. Instrumentacin ESPECTROFOTMETROS, FOTMETROS, COLORMETROS

Espectrofotmetro de doble haz

Espectrofotmetros porttiles
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