UNIVERSIDAD NACIONAL DE SANTIAGO DEL ESTERO. FACULTAD DE AGRONOMA y AGROINDUSTRIAS. CTEDRA: MICROBIOLOGA GENERAL.

AO 2011 CONTROL MICROBIANO MEDIANTE AGENTES QUMICOS 1. ANTIMICROBIANOS Un agente antimicrobiano es un compuesto qumico, natural o sinttico, que mata o inhibe el crecimiento de los microorganismos. Los agentes que matan microorganismos se denominan agentescidas, con un prefijo que indica el tipo de microorganismos que mata. As tenemos agentes bactericidas, funguicidas y viricidas. Los agentes que no matan pero inhiben el crecimiento se denominan agentes est tic!s; as, hablaremos de agentes bacteriost ticos, fungist ticos y virist ticos. Los agentes antimicrobianos varan con respecto a su t!"icidad se#ecti$a. Algunos act!an de forma no selectiva y sobre todos los tipos de clulas, otros presentan una mayor selectividad y to"icidad para los microorganismos que para los tejidos animales. Aquellos agentes antimicrobianos que tienen to"icidad selectiva son especialmente !tiles para el tratamiento de enfermedades infecciosas, porque pueden matar el agente etiol#gico sin da$ar al hospedador. E%ect! de #!s agentes anti&ic'!(ian!s s!('e e# c'eci&ient! %e observan tres tipos de efectos cuando se a$ade un agente antimicrobiano a un cultivo bacteriano en fase e"ponencial de crecimiento& bacteriost tico, bactericida y bacterioltico. %e observa un efecto& (acte'i!st tic! cuando se inhibe el crecimiento pero las clulas no mueren. 'on frecuencia los agentes bacteriost ticos son inhibidores de la sntesis de protenas y act!an unindose a los ribosomas. (o obstante dicha uni#n no es fuerte y cuando disminuye la concentraci#n del agente, el antimicrobiano se libera de los ribosomas y se reanuda el crecimiento. )uchos antibi#ticos act!an seg!n este mecanismo. (acte'icidas matan las clulas pero no dan lugar a la lisis o rotura de las clulas. Los agentes bactericidas son una clase de agentes qumicos que generalmente se unen fuertemente a sus dianas celulares de acci#n y no se eliminan por diluci#n. (acte'i!#)tic!s provocan la muerte celular por lisis, la rotura celular se detecta por un descenso en el n!mero de clulas o en la turbide*, despus de que se haya a$adido el agente. +entro de los agentes bacteriolticos se incluyen los antibi#ticos que inhiben la sntesis de pared celular, como la penicilina y los compuestos qumicos que lesionan la membrana citoplasm tica.

Desde e# *+nt! de $ista *' ctic! e"isten distint!s ti*!s de anti&ic'!(ian!s&

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Desin%ectantes, s#lo se aplican a sistemas inanimados y eliminan la carga microbiana total. Los agentes este'i#i-antes son desinfectantes que, en condiciones apropiadas, matan todos los tipos de vida microbiana y se usan para esterili*ar objetos inanimados y superficies.

Saniti-antes, s#lo se aplican a sistemas inanimados y disminuyen la carga microbiana total. Antis.*tic!s, son agentes qumicos usualmente aplicados en la superficie del cuerpo -piel y.o mucosas/ para prevenir la multiplicaci#n de microorganismos. %e puede usar para matar los microorganismos o para inhibir su crecimiento y actividad metab#lica. Los antispticos son frecuentemente usados en heridas. Los antispticos y los desinfectantes tienen muchas aplicaciones en la industria, donde se emplean para impedir el deterioro microbiano de muchos materiales org nicos. 0n algunas industrias, los agentes antimicrobianos se utili*an de forma rutinaria y e"tensiva. 'on frecuencia esto genera una serie de problemas por los residuos t#"icos que se producen cuando se liberan al ambiente grandes cantidades de metales pesados -industria papelera/, fenoles -conservantes de la madera/, vinasa -industria a*ucarera/.

Anti&ic'!(ian!s de +s! sist.&ic!, reducen y controlan la presencia de microorganismos que han invadido los tejidos. Act!an en el organismo, pudiendo ser ingeridos -va oral/, absorbidos por piel -ap#sitos/ y.o inyectados. %on los agentes antimicrobianos utili*ados in $i$! .%e utili*an en el tratamiento de las infecciones microbianas in vivo. 1ueden ser sintticos o naturales.

Anti&ic'!(ian!s sint.tic!s& son los llamados agentes /+i&i!te'a*.+tic!s0 importantes en medicina clnica y veterinaria, as como en la agricultura. %e clasifican seg!n su estructura y mecanismo de acci#n y el requisito clave es su to"icidad selectiva. 1or ejemplo& an logos de factores de crecimiento -sulfamidas/, an logos de bases -234romouracilo/ y 5uinolonas -evitan el empaquetamiento del +(A en la clula/.

Anti&ic'!(ian!s sntesis.

nat+'a#es,

Anti(i1tic!s,

son compuestos

qumicos

producidos

por

microorganismos, que inhiben o matan a otros microorganismos. 0n la actualidad se producen por

Los antispticos y los desinfectantes qumicos tienen muchas aplicaciones en la industria, donde se emplean para impedir el deterioro microbiano de muchos materiales org nicos. 0n algunas industrias, los agentes antimicrobianos se utili*an de forma rutinaria y e"tensiva. 'on frecuencia esto genera una serie

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SANTIAGO DEL ESTERO. FACULTAD DE AGRONOMA y AGROINDUSTRIAS. CTEDRA: MICROBIOLOGA GENERAL. AO 2011 de problemas por los residuos t#"icos que se producen cuando se liberan al ambiente grandes cantidades de metales pesados -industria papelera/ o fenoles - conservantes de la madera/. La sensibilidad de los microorganismos a los antibi#ticos y otros agentes quimioteraputicos vara. Las bacterias 7ram positivas son generalmente m s sensibles a los antibi#ticos que las bacterias 7ram negativas. Un antibi#tico que act!e tanto sobre bacterias 7ram positivas como sobre 7ram negativas se denomina anti(i1tic! de a&*#i! es*ect'!. 1or ejemplo, e"isten antibi#ticos que inhiben la sntesis de protenas y los que afectan a la A8( polimerasa. C!nt'!# de $i'+s 2 de *at1gen!s e+ca'i1tic!s. Anti$)'ic!s 2 Anti%3ngic!s Los virus usan sus hospedadores eucari#ticos para reproducirse y reali*ar sus funciones metab#licas. +ado que el hospedador y el virus utili*an la maquinaria metab#lica y de reproducci#n, y las estructuras del hospedador, los esfuer*os por controlar los virus con f rmacos frecuentemente son t#"icos para el hospedador. (o obstante, algunos son m s t#"icos para los virus que para el hospedador, y algunos agentes producidos por el hospedador especficamente act!an sobre los virus. Los agentes m s eficaces y utili*ados en la quimioterapia antivrica son an logos de gluc#sidos. 9tros act!an a nivel de polimerasa vrica y otros son los inhibidores de la proteasa. Los interferones son sustancias antivricas producidas por muchas clulas animales en respuesta a la infecci#n por virus. +ado que los hongos pertenecen al dominio Eukarya ,la mayor parte de su maquinaria celular es la misma que la del hombre y los animales, por lo que los agentes quimioteraputicos que afectan rutas metab#licas en los hongos a menudo interfieren con las correspondientes rutas en las clulas hospedadoras, de ah la to"icidad de estos medicamentos. 1or esta ra*#n, muchos antif!ngicos solo pueden administrarse por va t#pica.

4. 5ACTORES QUE IN5LU6EN SOBRE LA ACCI7N DE LOS ANTIMICROBIANOS 4.1. Tie&*! de c!ntact! ent'e e# agente 2 #!s &ic'!!'ganis&!s& la mortalidad de un conjunto de clulas, bajo la acci#n de un antimicrobiano, es un fen#meno gradual, la mayora muere r pidamente y el resto tiene mayor resistencia. 0"perimentalmente, se ha demostrado que el antimicrobiano debe estar en contacto con las clulas un tiempo suficientemente largo para obtener una destrucci#n total. 0n caso

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SANTIAGO DEL ESTERO. FACULTAD DE AGRONOMA y AGROINDUSTRIAS. CTEDRA: MICROBIOLOGA GENERAL. AO 2011 contrario, basta la supervivencia de unas pocas clulas para que estas se multipliquen, formando miles de millones de nuevas clulas, las que tendr n una resistencia especial para el germicida usado. 4.4. C!ncent'aci1n de# agente& los antimicrobianos no tienen efecto mientras su concentraci#n no llegue a un determinado valor& C!ncent'aci1n in8i(it!'ia &)ni&a -');/ o bien la C!ncent'aci1n Ge'&icida M)ni&a -'7)/. 0mpleando concentraciones m s bajas, se ha observado, a veces, un efecto estimulante. 1ero a medida que la concentraci#n aumenta, aparece un efecto germist tico y finalmente germicida. T!d!s #!s %act!'es #istad!s en #a G+)a C!nt'!# Mic'!(ian! I, 4.9. Ca'ga &ic'!(iana inicia# 4.:. C!&*!sici1n de# &edi! d!nde se enc+ent'an #!s &ic'!!'ganis&!s d+'ante #a acci1n de# agente 4.;. Resistencia de #a es*ecie c!nside'ada a# agente anti&ic'!(ian! 4.<. Ca'acte')sticas de# &edi! d!nde se enc+ent'an #!s &ic'!!'ganis&!s des*+.s de #a acci1n de# agente.

9. COM=UESTOS ANTIMICROBIANOS M>S USADOS EN LA INDUSTRIA DE LOS ALIMENTOS 9.1. A#c!8!#es& Una concentraci#n entre <= a >= ? de una soluci#n de alcohol etlico es efectiva contra clulas vegetativas de microorganismos, pero el alcohol etlico no puede ser utili*ado para esterili*ante de objetos porque no mata endosporas baterianas. Usos& el alcohol etlico -<=?/ y el isopropanol ->=?/ se usan como antispticos en la piel y como desinfectantes de term#metros clnicos y ciertos instrumentos quir!rgicos. )odo de acci#n& los alcoholes desnaturali*an las protenas, son tambin solventes de lpidos, de esta manera da$an la estructura lipdica de la membrana celular. 9.4. I!d! 2 c!&*+est!s de I!d! 0l yodo es uno de los m s viejos y m s efectivo agente antimicrobiano. Usos& %e usa como agente antisptico en forma de tintura de yodo -soluci#n de yodo en alcohol/, es tambin usado en sustancias llamadas ;odophoros que son germicidas que no manchan ni irritan la piel, se usan en la industria l ctea porque no confiere olor. (o tiene acci#n sobre endosporos ni esporos f!ngicos. )odo de acci#n& el yodo es un potente agente o"idante, puede destruir compuestos metab#licos esenciales del microorganismo por o"idaci#n, se combina con el amino cido tiro"ina y como resultado se produce la inactivaci#n de en*imas y otras protenas.

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SANTIAGO DEL ESTERO. FACULTAD DE AGRONOMA y AGROINDUSTRIAS. CTEDRA: MICROBIOLOGA GENERAL. AO 2011 9.9. C#!'!, el cloro en forma de gas y en ciertas combinaciones qumicas, es uno de los agentes qumicos m s usados como desinfectantes. Los compuestos de cloro m s usados& los hipocloritos de sodio y de calcio. Las cloraminas son compuestos org nicos que contienen cloro donde uno o m s de los tomos de hidr#geno del amonio o de un grupo amino se reempla*a por cloro. La m s simple es la monocloramina y la m s compleja es la cloramina A, estos compuestos se usan debido a su estabilidad a largo pla*o. Usos& los hipocloritos de calcio se usan para saniti*ar utensilios en restaurantes y equipamiento de f bricas. La soluci#n al ,? de hipoclorito de sodio se usa para la higiene personal, como desinfectante domstico y como saniti*ante en plantas procesadoras de alimentos. A concentraci#n de 2= ppm o menos, clulas vegetativas de bacterias, levaduras y hongos mueren en segundos. )odo de acci#n& el cloro y otros compuestos clorados deben su acci#n germicida a un doble proceso& !"idaci1n y c#!'aci1n. 0stas acciones impiden a los componentes celulares ejercer sus procesos vitales. 9.:. Dete'gentes %on compuestos an%i* tic!s que tienen la propiedad de disminuir la tensi#n superficial del agua -tensoactivos/, de emulsionar las sustancias aceitosas, de favorecer la penetraci#n de los lquidos en los poros de las clulas y favorecer la e"tensi#n de lquidos sobre las superficies - s+'%actantes cuando presentan propiedades 8+&ectantes/. Aienen acci#n ge'&icida, en condiciones de trabajo adecuadas. 0st n formados por uno o m s grupos 8id'!%1(ic!s e 8id'!%)#ic!s. Las propiedades antimicrobianas de estas sustancias dependen especialmente de la naturale*a qumica de la parte hidrof#bica. %eg!n #a ca'ga e#.ct'ica de #a *a'te 8id'!%1(ica, los detergentes se clasifican en& Dete'gentes ani1nic!s& la propiedad germicida reside en la parte ani#nica de la molcula -carga negativa/. 1or ejemplo& dodecil sulfato de sodio& [',6 B62 9% 9: ]3 (a+ Dete'gentes cati1nic!s& la propiedad germicida reside en la porci#n cati#nica -carga positiva/ de la molcula. 1or ejemplo& el cloruro de 'etylpyridinium -'eepryn/& (3 ',C B:: 'l3 Los detergentes cati#nicos los m s usados son los c!&*+est!s de a&!ni! c+ate'na'i!. %on (acte'icidas, tanto para bacterias 7ram positivas como 7ram negativas. D(o son corrosivos, son estables en soluci#n y se caracteri*an por su baja to"icidad. 2

UNIVERSIDAD NACIONAL DE SANTIAGO DEL ESTERO. FACULTAD DE AGRONOMA y AGROINDUSTRIAS. CTEDRA: MICROBIOLOGA GENERAL. AO 2011 D%e usan como desinfectantes, antispticos y saniti*antes. DLos jabones y detergentes ani#nicos los inactivan, por lo que los vestigios de estas sustancias deben eliminarse antes del empleo de los compuestos de amonio cuaternario. D%u actividad biocida es influenciada por el pB, siendo m s eficaces en medio alcalino. Dete'gentes n! i1nic!s& no tienen carga, no son atrados por cuerpos cargados elctricamente. 0jemplo& polisorbato E= y octo"inol. N! s!n anti&ic'!(ian!s. Usos de los detergentes& pisos, paredes y otras superficies de hospitales, viviendas, etc. 0llos tambin se usan en sanidad alimentaria, utensilios de restaurantes y en plantas procesadoras de alimentos. )odo de acci#n& su acci#n se debe a la desnaturali*aci#n de protenas, interferencia en procesos metab#licos y da$o en la membrana citoplasm tica. 9.;. 7"id! de eti#en!, agente esterili*ante 0s un gas incoloro, no corrosivo a temperatura ambiente. Licua a ,=.E F' y solidifica a G ,,,,:F'. Aiene olor similar al ter, es e"tremadamente inflamable. Usos& el gas es muy penetrante, se usa para esterili*ar cueros, pl sticos, gomas, papel, etc. 1or esto es e"celente para esterili*ar objetos sensibles al calor, a las radiaciones y a la humedad, como la ropa de cama, libros, instrumental mdico, etc. )odo de acci#n& act!a como agente a#/+i#ante, se bloquean grupos reactivos de en*imas que tienen tomos de hidr#geno l biles. 9.<. O-!n!& el o*ono es un gas inestable, a*ulado y soluble en agua, con olor caracterstico y agradable a concentraci#n menor a 6 ppm. 0s agente esterili*ante. %e produce continuamente en las capas e"teriores de la atm#sfera por acci#n de los rayos ultravioleta solares sobre el o"geno. Usos& en el tratamiento de aguas, como agente esterili*ante y para la eliminaci#n de sabores, colores y olores. 1ara esterili*ar botellas destinadas a contener bebidas o agua mineral. Aambin se usa en procesos de envasado asptico. )ecanismo de acci#n& el o*ono puede reaccionar con muchas partes vitales de la clula microbiana, pero no est bien definida la causa de la muerte& se producen reacciones de o"idaci#n de en*imas vitales, o"idaci#n del material lipdico insaturado de la membrana o pared celulares.

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CONTROL MICROBIANO =OR AGENTES QUMICOS C+anti%icaci1n de #a acti$idad anti&ic'!(iana C!ncent'aci1n in8i(it!'ia &)ni&a 1. M.t!d! de di#+ci1n en t+(! La actividad antimicrobiana se mide determinando la mnima cantidad necesaria de un agente para inhibir el crecimiento de un microorganismo, valor llamado c!ncent'aci1n in8i(it!'ia &)ni&a ?CIM@. 1ara la ';) se prepara una serie de tubos con medio de cultivo, con una concentraci#n creciente del agente. %e inocula la serie de tubos con el germen. %e incuba. +espus de la incubaci#n, se observa si ha habido crecimiento -turbide*/ en los tubos. 0l tubo que contiene la &en!' c!ncent'aci1n de agente que inhibe completamente el crecimiento del organismo usado define la ';). 0ste procedimiento simple y efica* se denomina tcnica de diluci#n en tubo. La ';) no es constante para un determinado agente, porque depende del tipo de microorganismo utili*ado, el tama$o del in#culo y las condiciones de incubaci#n, como la temperatura, el pB y la aireaci#n. 0ste mtodo no distingue entre un agente germicida y un agente germist tico, dado que el agente est presente en el medio de cultivo durante todo el perodo de incubaci#n. 4.- M.t!d! de di%+si1n en *!-! de aga' %e prepara una placa de 1etri con un medio agari*ado, inoculado en csped, uniformente, con el microorganismo a ensayar. %e reali*an orificios en el medio de cultivo. 'antidades conocidas del agente antimicrobiano se vierten en los orificios reali*ados; el agente difunde en el medio, su concentraci#n disminuye a medida que aumenta la distancia al papel de filtro. A una determinada distancia del disco se alcan*a la ';). A partir de ese punto hay crecimiento, pero en las pro"imidades del disco no hay crecimiento. %e crea entonces una *ona de inhibici#n; el

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SANTIAGO DEL ESTERO. FACULTAD DE AGRONOMA y AGROINDUSTRIAS. CTEDRA: MICROBIOLOGA GENERAL. AO 2011 di metro de la *ona es proporcional a la cantidad de antimicrobiano a$adido al disco, la solubilidad del agente, el coeficiente de difusi#n y la eficacia del agente. 0ste mtodo se usa de forma rutinaria para ensayar la sensibilidad a los antibi#ticos en pat#genos. 0ste mtodo no distingue entre un agente germicida y un agente germist tico.