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Microscpio ptico Generalidades

Parte mecnica. Parte ptica: Ocular, Objectiva e Condensador. Ocular ajuste inicialmente para o olho direito e posteriormente para o olho esquerdo. Objectiva vrias ampliaes. Ampliao: multiplicao da ocular pela objectiva. Condensador focalizar a luz na amostra, fundamental para boa resoluo. Focagem parafusos macro e micromtricos. Resoluo menor distncia em que dois pontos aparecem separados.

Tcnicas de preparao da lmina


- Fixao preservar a morfologia e composio dos tecidos (12 h). - Desidratao com lcool etlico remoo de gua (6 a 24 h) - Clareamento/Diafanizao embeber a amostra em substncia miscvel com a parafina (benzol, xilol ou tululol), que so solventes do lcool e da parafina (1 a 6 h) - Impregnao em parafina para possibilitar os cortes em micrtomo (30 mins a 6h) - Incluso colocar a pea em molde rectangular para ser cortada no micrtomo ( 1 a 2 m). Alternativa micrtomo de congelao.

Mtodos de Colorao

Hematoxilina e Eosina: - Hematoxilina corante bsico que colora de azul estruturas cidas (DNA e RNA), tais como o ncleo, ribossomas e retculo endoplasmtico rugoso estruturas basfilas. - Eosina corante cido que colora estruturas bsicas (protenas) de vermelho ou rosa, tais como o citoplasma. - Tricrmios (ex: Masson): colora trs cores: - Ncleos e estruturas basfilas de azul escuro. - Colagnio de verde ou azul forte. - Citoplasma, msculo, eritrcitos e queratina de vermelho-vivo. Existem variantes. - Van Gieson: colagnio cora de vermelho, ncleos de azul, eritrcitos e citoplasma de amarelo. Pode ser utilizada colorao para a elastina em adio azul ou preto.

- Tcnicas de imuno-histoqumica: marcao especfica, recorrendo a anticorpos e reaces enzimticas que levam formao de precipitados..

Epitlio estratificado pavimentoso e tecido conjuntivo pele

Pele funes (proteco, sensao tctil, termoregulao, funes metablicas energia, vitamina D) Anexos da Pele plos, unhas, glndulas sebceas e sudoriparas. Trs camadas principais: epiderme, derme e hipoderme. - Epiderme epitlio estratificado pavimentoso, estrato basal, espinhoso, granuloso e crneo. Melancitos fottipo. Clulas de Langerhans (APCs) - Derme suporte vascular, anexos, camadas (papilar e reticular). - Derme papilar tecido conjuntivo laxo, fibras elsticas finas e escassas, assim como fibras colagnicas. - Derme reticular tecido conjuntivo denso, fibras de colagnio tipo I, e fibras elsticas, ambas mais organizadas e em maior quantidade - Hipoderme camada de tecido conjuntivo laxo e tecido adiposo.

Mesentrio
Whole Mount vrias camadas. A amostra colocada integra na lmina. Tecido conjuntivo laxo, mesotlio do peritoneu tecido simples pavimentoso. Observao de todas as camadas em vrios planos. Fibras colagnicas mais espessas, fibras elsticas (elastina).

Epiglote exemplo de cartilagem elstica

Cartilagem enquanto forma especializada de tecido conjuntivo. Condroblastos e condrcitos. Grupos isgenos. Proteoglicanos sulfatados (sulfato de condroitina e queratano) e no sulfatados (cido hialurnico). Fibras de colagnio tipo 2 Fibras elsticas colorao com fucsina, van Gieson elstico. Pericndrio Crescimento intersticial (s inicialmente, pede-se a capacidade de crescimento interesticial durante o crescimento, porque ficam mais longe das regies vascularizadas) e aposicional ( periferia, a partir do pericndrio). Outros tipos de cartilagem: Hialina superfcies articulares muito sujeita a processos degenerativos; Fibrocartilagem discos intervertebrais e snfise pbica tambm apresenta colagnio tipo I. Outras particularidades tecido epitelial de dois tipos respiratrio na face larngea e estratificado pavimentoso no queratinizado na face farngea.

Osso Fresco
Para observao das clulas o osso tem que ser descalcificado (ex: cido ntrico a 5% ou EDTA), e posteriormente corado por mtodos clssicos.

Matriz extracelular rica em colagnio tipo I, chamada osteide. Mineralizada pela deposio de cristais de hidroxiapatite de clcio rigidez e fora. Osteoblasto sntese e mineralizao encontram-se periferia. Ostecitos osteoblastos inactivos no meio do osso; ajudam a suportar o osso Osteoclastos clulas fagocticas que reabsorvem osso. Osso compacto (ex cortical; difise); osso esponjoso (medular; epfise) Ossificao intramembranosa (no interior de uma membrana conjuntiva) ou endocondral (por substituio de molde cartilagneo).

Msculo esqueltico lmina de lngua

Hematoxilina frrica Msculo-feixe-fibra Epimsio-perimsio-endomsio Corte longitudinal e transversal do msculo; Estriaes no corte longitudinal Unidade Funcional Sarcmero

Observao sumria de outras estruturas histolgicas da lngua (epitlio, papilas gustativas (filiformes, fungiformes e circunvaladas), conjuntivo, vasos, tecido linfide)

Cerebelo exemplo de sistema nervoso


Funo geral Regio cortical de substncia cinzenta e medular de substncia branca, com quatro pares de ncleos. Cortical: 3 camadas molecular (clulas em cesto e clulas estreladas dispersas, clulas de Golgi na poro superficial; fibras no mielinizadas), camada de clulas de Purkinje (nicos neurnios eferentes, com extensa rede dendrtica pela camada molecular) e camada granulosa com muitos neurnios de pequenas dimenses vias aferentes e mltiplas conexes entre si e para com as clulas piramidais)