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Biologia Molecular

Ana Valado 2013/2014

Reduzir riscos Regras gerais Normas de higiene pessoal Risco de exposio a agentes qumicos Limpeza de reagentes derramados Laboratrio de biologia molecular Esterilizao

Reduzir Riscos
De exposio

Agentes infecciosos

Agentes qumicos

Regras de laboratrio

No brinque no laboratrio e procure no trabalhar sozinho. Em caso de acidente, procure imediatamente o professor, mesmo que no haja danos pessoais ou materiais. Encare todos os produtos qumicos como venenos, enquanto no verificar a sua inocuidade. Consulte literatura

especializada.

No fume, no beba e no coma no laboratrio. Deve usar sempre luvas de proteco apropriadas quando manusear substncias agressivas para a pele ou que sejam
absorvidas por via cutnea, para evitar possveis

contaminaes. Use uma bata apropriada.

Trabalhe com calado fechado. Caso tenha cabelo comprido, mantenha-o preso durante a realizao das experincias. No coloque nenhum material slido dentro da pia ou nos ralos, nem resduos de solventes. H

recipientes apropriados para isso.

No coloque vidro quebrado ou lixo biolgico ou


potencialmente perigoso no lixo comum. No coloque sobre a bancada do laboratrio bolsas, agasalhos ... No caso de contacto de um produto qumico com os olhos, boca ou pele, lave com abundantemente gua. De

seguida, procure o tratamento especfico para o caso.

No aconselhvel testar um produto qumico pelo


odor.

Se algum cido ou produto qumico for derramado,


lave o local imediatamente. Consulte o professor antes de fazer qualquer

modificao na experincia e na quantidade de reagentes a

ser usada.

Antes de usar qualquer reagente, leia cuidadosamente

o rtulo do frasco, para ter a certeza de que aquele o reagente pretendido. Antes de utilizar um aparelho pela primeira vez, leia
sempre manual de instrues. Antes de sair do laboratrio, verifique se no h torneiras (gua ou gs) abertas, desligue todos os aparelhos e deixe todo o equipamento limpo.

Proteger cortes, feridas e outras leses da pele


com pensos e usar luvas

Usar luvas na manipulao de produtos biolgicos para anlise

No usar luvas na manipulao do telefone, do teclado do computador, dos puxadores das

portas

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Lavar as mos aps a execuo do trabalho prtico e sempre


que entender necessrio.

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Verificar recomendaes e precaues descritas antes de manipular um agente qumico

Ler o rtulo do produto com ateno s caractersticas:

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Reagentes preparados no laboratrio, ateno ao rtulo: Colocar a informao bem visvel, referente a:
Qual produto qumico ou soluo? Qual a concentrao? A data de preparao? Se for uma soluo estril necessrio colocar data de abertura?

NaCl 6M 10/09/11 Aberto em 2/10/11

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Usar sempre luvas Proceder absoro com toalhas de papel absorvente (celulose)
Descontaminar a rea com hipoclorito de sdio a 2,5% Fazer uma lavagem com gua e detergente

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Sala Pr-PCR

Sala Ps-PCR
Fluxo de trabalho unidireccional

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Utilizar material estril pontas, ependorfs Utilizar solues estreis sempre que possvel. Trabalhar em cmara de fluxo laminar sempre que possvel. Aps realizao experimental descontaminar com lcool a 70% e

ligar UV durante pelo menos 20 min.

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Se trabalhar em bancada descontaminar com lcool a


70% antes e aps realizao experimental. Utilizao de luvas obrigatria. Conjunto de micropipetas para cada tarefa especfica, descontamin-las com lcool a 70% antes e aps utilizao.

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Contaminao da amostra

Sensibilidade da PCR

1010 ou 1011 molculas

Diluir 1010 molculas 106L

Controlos Negativos

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Eliminao total de microrganismos, vrus, fungos, nucleases,


Dnases/Rnases O processo de esterilizao pode ocorrer por: Flambagem, Fervura, Calor seco,

Calor hmido: autoclavagem e ebulio, UV, Mtodos qumicos Filtrao.


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A tcnica usada mais regularmente para esterilizar a


autoclavagem, em que o material exposto a vapor de gua sob presso (121C, 15-20min).

O calor destri membranas e desnatura protenas celulares A eficcia do processo de autoclavagem garantido pela utilizao de

fita de autoclave.
O indicador (riscas brancas), quando atinge 121C muda para uma cor escura ( azul, preto ou prateado).

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