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Unidade de Novo Hamburgo Curso de Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia

Angenor Geovani Auler Priscila Monteiro

EXTRAO DE DNA DO MORANGO DISCIPLINA DE LABORATRIO DE BIOLOGIA MOLECULAR Prof. Dra. Roberta Bussamara

Novo Hamburgo 2014

1. Introduo O DNA foi descoberto em 1869 pelo bioqumico suo Johann Friedrich Miescher (1844-1895), discpulo do professor Ernst Felix Immanuel Hoppe-Seyler (1825-1895), que desenvolveu vrios estudos importantes, principalmente no que se refere hemoglobina. Mas, at ento, no se conhecia a estruturao tridimensional do DNA - e nem como poderia ser sua configurao molecular (Rahal, 2013). Somente em 1951, em Npoles, sul da Itlia, num congresso internacional consagrado ao tema da estrutura de molculas encontradas em clulas vivas, Francis Crick conheceu James Watson, dando incio a uma parceria que, dois anos mais tarde, seria responsvel por uma das mais importantes descobertas das cincias biolgicas: juntos, elaboraram o modelo da dupla hlice para a molcula de DNA (Rahal, 2013). Segundo o modelo proposto por Watson e Crick, a molcula de DNA constituda por duas cadeias polinucleotdicas dispostas em hlice ao redor de um eixo imaginrio, girando para a direita (uma hlice dupla). Ou seja, a molcula de DNA apresenta a forma de uma escada em caracol, na qual os "degraus" so compostos por bases de nitrognio dos nucleotdeos e, os "corrimos" so fosfato e acar ligados covalentemente - por isso, diz-se que o DNA tem o formato de uma fita helicoidal (Rahal, 2013). Os cidos nuclicos DNA e RNA esto relacionados com o controle do funcionamento e da estrutura das clulas e com os mecanismos de hereditariedade. So longas cadeias formadas por unidades chamadas nucleotdeos, ligadas entre si. Um nucleotdeo constitudo por um fosfato, uma pentose, e uma base nitrogenada (Favaretto, 2011). O DNA um aglomerado de molculas que contm material gentico. Esse material determinante para o bom funcionamento dos seres vivos e da formao das caractersticas fsicas. importante porque, entre outras razes, o DNA contm as informaes para que se produzam protenas e RNAs (FONTE: biologiamolecular.info). Nas clulas eucariticas, a maior parte do DNA concentra-se no ncleo, associada a protenas, como constituinte dos cromossomos. No citoplasma, o DNA tambm pode ser encontrado em mitocndrias, cloroplastos e associados aos centrolos (Favaretto, 2011).

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2. Objetivos Extrair o DNA de 5 frutos de morango, para a visualizao. 3. Materiais e mtodos Material: -5 morangos; - 1 colher de sal de cozinha; -20 mL de detergente para lavar loua; -80 mL de gua quente (65 a 80C); - Filtro de caf; -Funil de vidro; - lcool 96 GL gelado; - 2 copos bquer -basto de vidro e esptula Antes de tudo, preparamos a bancada, limpando com lcool 70% para assepsia, colocamos luvas para que no houvesse a possibilidade de resqucios do DNA da nossa mo casse na amostra, separamos o material a ser utilizado. Triturou-se os morangos com auxlio de uma esptula e basto de vidro, aps triturar bem formando um suco, acrescentamos os 80 mL de gua quente e 20 mL de detergente e uma colher de sal de cozinha, misturando com o basto de vidro por 5 min. Aps, coloca-se em banho maria por mais 5min, retira-se do banho e aguarda mais 5min, posteriormente tampa-se o copo Bquer com papel filme e coloca-se em freezer para o banho de gelo por mais 5 min. J com o papel filtr o arrumado no funil essa soluo filtrada para retirar os pedaos de morango. Aps esses procedimentos acrescenta-se o lcool com o copo Bquer inclinado derramando lentamente pelas paredes at percebermos a separao das fases.

4. Resultados e Discusso Quando trituramos o morango facilitamos o rompimento das clulas. A gua quente juntamente com o detergente capaz de romper a membrana das clulas para a liberao do seu material para a soluo. O detergente afeta na permeabilidade das membranas onde o DNA e as protenas so liberados na soluo, visto que o DNA encontra-se dentro no ncleo, o sal aumenta a densidade

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do meio o que facilita a migrao do DNA para o lcool, j o papel do lcool precipitar o DNA j que o DNA no solvel em lcool, aparecendo na superfcie porque ele menos denso que a mistura aquosa, como mostra a Figura 1.

Figura 1. DNA de morango em suspenso

5. Concluso A execuo desta prtica relativamente simples, utilizamos reagentes bem comuns que podemos encontrar at mesmo na cozinha da nossa casa. Mas interessante perceber que cada etapa essencial para conseguirmos alcanar a extrao do DNA com sucesso. Conseguimos extrair o DNA como o previsto concluindo que a prtica eficaz para esta atividade.

6. Referencias RAHAL Rodrigo Lus. Dupla hlice do DNA: Conhea a histria da descoberta de Watson e Crick. UOL Educao ano 2013. Disponvel em <http://educacao.uol.com.br/disciplinas/biologia/dupla-helice-do-dna-conheca-ahistoria-da-descoberta-de-watson-e-crick.htm> Acesso em 15 de maro 2014. Biologia-molecular.info Disponvel em molecular.info/mos/view/DNA_/> Acesso em 15 de maro 2014. <http://biologia-

FAVARETTO, Jos Arnaldo; MERCADANTE, Clarinda. BIOLOGIA, v.nico. Editora Moderna, 1 edio, So Paulo, p. 91-92, 2011.

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